專利名稱：：蛋白聚集抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及與神經(jīng)變性疾病如帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)有關(guān)的α-突觸核蛋白聚集和能調(diào)節(jié)這種聚集的二氨基吩噻嗪化合物。
背景技術(shù)：
：帕金森病是一種常見的神經(jīng)變性運(yùn)動(dòng)失調(diào)，有1％的老年人受此病影響(參見Kapurniotu(2004)chemistry&Biology11，1476-1478頁中的討論)。PD的主要臨床癥狀為運(yùn)動(dòng)過慢、靜止性震顫、肌強(qiáng)直和平衡困難。PD神經(jīng)病理學(xué)特征為多巴胺能神經(jīng)元的顯著且進(jìn)行性退化，并且在大腦的黑質(zhì)和其它區(qū)域中存在原纖維細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物(盧易體[Lewybodies，LB])和營養(yǎng)不良性神經(jīng)突(盧易神經(jīng)突[Lewyneuritis，LN])(Recchia等人，(2004)FASEBJ18617-626)。盡管多巴胺神經(jīng)元丟失一定與PD的主要臨床癥狀有關(guān)，但這種多因子病及“突觸核蛋白病(synucleinopathies)”的病因和發(fā)病機(jī)理在較大程度上仍然是未知的。LB和LN的主要組分是α-突觸核蛋白的原纖維聚集體。α-突觸核蛋白是經(jīng)廣泛表達(dá)的神經(jīng)元突觸前蛋白，其在膜相關(guān)過程和突觸可塑性中扮演重要角色，并且與學(xué)習(xí)和發(fā)育過程有關(guān)。盡管LB和LN的形成機(jī)理及它們與PD的關(guān)系還沒有明了，但現(xiàn)有的幾條證據(jù)表明α-突觸核蛋白纖維化與PD有關(guān)，并且表明α-突觸核蛋白纖維化會(huì)導(dǎo)致毒性(參見，例如masliah等人，Science，2871265-1269(2000)；Feany等人，Nature404394-8(2000))。除了α-突觸核蛋白外，β-突觸核蛋白也牽涉在神經(jīng)變性突觸核蛋白病中。人β-突觸核蛋白是134-殘基神經(jīng)元蛋白，該蛋白與α-突觸核蛋白有78％同源性。所述α-和β-突觸核蛋白共有保守的C-端，具有三個(gè)相同位置的酪氨酸殘基。除了含有α-突觸核蛋白的LB和LN外，具有LB的PD和癡呆的發(fā)展伴隨著在海馬中出現(xiàn)了新型α-和β-突觸核蛋白-陽性損傷(Galvin等人，1999)，這說明除了α-突觸核蛋白外，β-突觸核蛋白也參與了該疾病的發(fā)作和發(fā)展。據(jù)了解，β-突觸核蛋白可調(diào)節(jié)α-突觸核蛋白纖維化，也許起到侶伴蛋白的作用而使α-突觸核蛋白的聚集最小化(Hashimoto等人，2001；Uversky等人，2002；ParkandLansbury，2002)。因此，β-突觸核蛋白水平的降低被認(rèn)為是PD的病因之一(Uversky等人，2002)。因此，抑制或逆轉(zhuǎn)突觸核蛋白聚集被認(rèn)為具有治療益處。Li等人(chemistry&Biology111513-1521頁，2004)討論了通過抗菌素利福平(rifampicin)抑制α-突觸核蛋白纖維化和原纖維的解聚集。Zhu等人(JournalofBiologicalchemistry279，2626846-26857頁，2004)討論了通過類黃酮黃芩素抑制α-突觸核蛋白纖維化和原纖維的解聚集?，F(xiàn)有技術(shù)還有很多其它文獻(xiàn)涉及針對(duì)這種聚集的抑制劑。這些文獻(xiàn)包括“Compositionsforinhibitingtheaggregationpathwayofalpha-synuclein”(US6780971-2004-08-24)；“Polyhydroxylatedaromaticcompoundsforthetreatmentofamyloidosisandalpha-synucleinfibrildiseases”(US2004152760-2004-08-05)；Peptideandpeptidederivativesforthetreatmentofalpha-synucleinrelateddiseases(WO2004009625-2004-01-29)；Proanthocyanidinsforthetreatmentofamyloidandalpha-synucleindiseases(EP1377287-2004-01-07)；Methodsforpreventingneuraltissuedamageandforthetreatmentofalpha-synucleindiseases(CN1440420T-2003-09-03)。然而，應(yīng)當(dāng)理解的是，如果能提供現(xiàn)有技術(shù)還未知的、并且能抑制突觸核蛋白聚集的化合物將對(duì)該領(lǐng)域是有貢獻(xiàn)的。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的發(fā)明人首次證明二氨基吩噻嗪化合物可用于抑制突觸核蛋白聚集。簡言之，本發(fā)明的發(fā)明人表達(dá)并純化了兩種形式α-突觸核蛋白，并將它們用在自組裝和原纖維形成試驗(yàn)(fibrilformation)中。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，截短形式的α-突觸核蛋白(truncatedformofα-synuclein，tsyn)在纖維形成試驗(yàn)中是特別有效的，并且這種自組裝的tsyn經(jīng)證明能提高硫黃素T的熒光。發(fā)明人試驗(yàn)了二氨基吩噻嗪類化合物和其它化合物的這種原纖維-破壞活性(fibril-disruptingactivity)。結(jié)果表明，所述二氨基吩噻嗪類化合物破壞組裝的α-突觸核蛋白的活性小于1μM。也設(shè)計(jì)了針對(duì)突觸核蛋白結(jié)合的固相試驗(yàn)，該試驗(yàn)用于證明諸如锍氯化物(thioniniumchlorides)等的二氨基吩噻嗪類化合物和黃酮類能抑制這種結(jié)合。根據(jù)本發(fā)明公開的內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員理解的是，這些結(jié)果說明了這類化合物尤其可用于治療與突觸核蛋白聚集有關(guān)的疾病(如PD和本發(fā)明所述其它疾病)的潛在病因。Piotrowski，G.(Thetreatmentofparkinsoniantremor.medicalRecord，144322-323，1936)報(bào)道了在對(duì)4個(gè)個(gè)體的研究中，采用亞甲藍(lán)(甲基锍氯化物-MTC)使得帕金森病震顫(Parkinsoniantremor)的癥狀得到了緩解。將所述MTC以1或2mg/kg劑量靜脈給藥。由于副反應(yīng)而中止了口服給藥8格令(grains)(＝518mg)/天的藥物。根據(jù)該報(bào)道，對(duì)震顫的效果不是很強(qiáng)，而且僅維持了有限長的時(shí)間，同時(shí)對(duì)不同癥狀(強(qiáng)直)的影響不大。另一采用硫素(thionin)的單獨(dú)試驗(yàn)沒有得到結(jié)果。因此，該文獻(xiàn)的本質(zhì)為，已知具有副交感神經(jīng)作用的MTC僅對(duì)帕金森病癥狀之一即“帕金森病震顫”具有有限的作用。相比之下，本發(fā)明涉及直接針對(duì)潛在的疾病過程的治療而不是針對(duì)所述疾病的癥狀表現(xiàn)。先前已知二氨基吩噻嗪類化合物能抑制τ蛋白聚集并破壞PHFs結(jié)構(gòu)，而且逆轉(zhuǎn)PHF核心的蛋白水解穩(wěn)定性(參見WO96/30766，F(xiàn)Hoffman-LaRoche)。這些化合物被披露用于治療各種疾病包括阿爾茨海默氏病和盧易體病(LewyBodyDisease)。此外，盡管WO02/055720(TheUniversityCourtoftheUniversityofAberdeen)主要涉及τ蛋白病，但其討論了還原形式的二氨基吩噻嗪類化合物專門用于治療各種蛋白聚集疾病的用途。WO2005/030676(TheUniversityCourtoftheUniversityofAberdeen)討論了經(jīng)放射標(biāo)記的吩噻嗪，及其在診斷和治療如τ蛋白病中的用途。然而，這些公開出版物中沒有明確披露二氨基吩噻嗪類化合物，特別是非還原形式在抑制或逆轉(zhuǎn)α-突觸核蛋白聚集中的用途。二氨基吩噻嗪化合物本發(fā)明涉及具有如下結(jié)構(gòu)式之一的特定二氨基吩噻嗪化合物及其類似物和它們的可藥用鹽、水合物和溶劑化物(本發(fā)明中統(tǒng)稱為“二氨基吩噻嗪類”或“二氨基吩噻嗪化合物”)式(1)描述了還原形式的化合物，而式(2)、(3)和(4)各自描述了氧化形式的化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物選自式(1)化合物及其可藥用鹽、水合物和溶劑化物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物選自式(2)或(3)化合物及其可藥用鹽、水合物和溶劑化物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物選自式(4)化合物及其可藥用鹽、水合物和溶劑化物。上述結(jié)構(gòu)中的每個(gè)結(jié)構(gòu)僅為眾多等同共振結(jié)構(gòu)之一，所有共振結(jié)構(gòu)都被該代表性結(jié)構(gòu)所涵蓋。例如，結(jié)構(gòu)(4)僅為眾多等同共振結(jié)構(gòu)之一，所述共振結(jié)構(gòu)的一些結(jié)構(gòu)如下所示，所有這些共振結(jié)構(gòu)都被結(jié)構(gòu)(4)涵蓋碳環(huán)原子取代基在上述每個(gè)結(jié)構(gòu)式中，R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H；-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-OR；-SH；-SR；-NO2；-C(＝O)R；-C(＝O)OH；-C(＝O)OR；-C(＝O)NH2；-C(＝O)NHR；-C(＝O)NR2；-C(＝O)NRN1RN2；-NH2；-NHR；-NR2；-NRN1RN2；-NHC(＝O)H；-NRC(＝O)H；-NHC(＝O)R；-NRC(＝O)R；和-R；其中，各R獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基(carboaryl)；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；其中，在每個(gè)-NRN1RN2基團(tuán)中，獨(dú)立地，RN1和RN2各自與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。-NRN1RN2基團(tuán)(其中RN1和RN2與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán))的例子包括吡咯烷子基(pyrrolidino)、哌啶子基(piperidino)、哌嗪子基(piperazino)、嗎啉代(morpholino)、吡咯基和它們的取代形式，如N-取代形式如N-甲基哌嗪子基(piperazino)。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H；-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-OR；-C(＝O)OH；-C(＝O)OR；和-R。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H；和-R。在一個(gè)實(shí)施方案中，各個(gè)R獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中，各個(gè)R獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；和經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中，各個(gè)R獨(dú)立地選自-Me(甲基)、-Et(乙基)、-nPr(正丙基)和-iPr(異丙基)。在一個(gè)實(shí)施方案中，各個(gè)R獨(dú)立地選自-Me和-Et。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述C1-6烷基為C1-4烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述C2-6烯基為C2-4烯基。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述C3-6環(huán)烷基為C3-4環(huán)烷基。未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基的例子包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、叔戊基、新戊基、己基、異己基等。未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基的例子包括丙烯-1-基、丙烯-2-基、丁烯-1-基、丁烯-2-基、丁烯-3-基等。未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基的例子包括環(huán)丙基、環(huán)丙基-甲基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述C6-10碳芳基為C6碳芳基。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述C5-10雜芳基為C5-6雜芳基。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述C6-10碳芳基-C1-4烷基為C6碳芳基-C1-2烷基。未經(jīng)取代的C6-10碳芳基的例子包括苯基、萘基。未經(jīng)取代的C5-10雜芳基的例子包括吡咯基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基。未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基的例子包括芐基、苯乙基。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選取代基(如在脂肪族C1-6烷基上、在脂肪族C2-6烯基上、在C3-6環(huán)烷基上、在C6-10碳芳基上、在C5-10雜芳基上、在C6-10碳芳基-C1-4烷基上的任選取代基)獨(dú)立地選自-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-OR’；-SH；-SR’；-NO2；-C(＝O)R’；-C(＝O)OH；-C(＝O)OR’；-C(＝O)NH2；-C(＝O)NHR’；-C(＝O)NR’2；-C(＝O)NR’N1R’N2；-NH2；-NHR’；-NR’2；-NR’N1R’N2；-NHC(＝O)H；-NR’C(＝O)H；-NHC(＝O)R’；-NR’C(＝O)R’；和-R’；其中，各個(gè)R’獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；其中，在每個(gè)-NR’N1R’N2基團(tuán)中，R’N1和R’N2各自與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選取代基(如在脂肪族C1-6烷基上、在脂肪族C2-6烯基上、在C3-6環(huán)烷基上、在C6-10碳芳基上、在C5-10雜芳基上、在C6-10碳芳基-C1-4烷基上的任選取代基)獨(dú)立地選自-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-OR’；-C(＝O)OH；-C(＝O)OR’；和-R’。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選取代基(如在脂肪族C1-6烷基上、在脂肪族C2-6烯基上、在C3-6環(huán)烷基上、在C6-10碳芳基上、在C5-10雜芳基上、在C6-10碳芳基-C1-4烷基上的任選取代基)如上所述，除了各R’獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選取代基(如在脂肪族C1-6烷基上、在脂肪族C2-6烯基上、在C3-6環(huán)烷基上、在C6-10碳芳基上、在C5-10雜芳基上、在C6-10碳芳基-C1-4烷基上的任選取代基)如上所定義，除了各R’獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選取代基(如在脂肪族C1-6烷基上、在脂肪族C2-6烯基上、在C3-6環(huán)烷基上、在C6-10碳芳基上、在C5-10雜芳基上、在C6-10碳芳基-C1-4烷基上的任選取代基)如上所定義，除了各R’獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；和經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選取代基(如在脂肪族C1-6烷基上、在脂肪族C2-6烯基上、在C3-6環(huán)烷基上、在C6-10碳芳基上、在C5-10雜芳基上、在C6-10碳芳基-C1-4烷基上的任選取代基)如上所定義，除了各R’獨(dú)立地選自-Me、-Et、-nPr和-iPr。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選取代基(如在脂肪族C1-6烷基上、在脂肪族C2-6烯基上、在C3-6環(huán)烷基上、在C6-10碳芳基上、在C5-10雜芳基上、在C6-10碳芳基-C1-4烷基上的任選取代基)如上所定義，除了各R’獨(dú)立地選自-Me和-Et。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H、-Me、-Et、-nPr和-iPr。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H、-Me和-Et。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H和-Me。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9中除了4個(gè)基團(tuán)外，其它都是-H。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9中除了2個(gè)基團(tuán)外，其它都是-H。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9中除了1個(gè)基團(tuán)外，其它都是-H。在一個(gè)實(shí)施方案中，R1、R2、R4、R6、R8和R9各自為-H。氨基在上述每個(gè)結(jié)構(gòu)式中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地為-H或如上述針對(duì)R的定義；或R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地如上述針對(duì)R的定義；或R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；或R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；或R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。在另一個(gè)例子中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；或R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。在另一例子中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；或R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。在另一例子中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；或R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。在另一例子中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；或R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。在另一例子中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H、-Me、-Et、-nPr和-iPr。在另一例子中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H、-Me和-Et(如-NR3NAR3NA為-NH2、-NHMe、-NMe2、-NHEt、-NEt2或-NMeEt)。在另一例子中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H和-Me(如-NR3NAR3NA為-NH2、-NHMe或-NMe2)。非常相似地，在上述每個(gè)結(jié)構(gòu)式中如果存在-NR7NAR7NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR7NAR7NB基團(tuán)中，R7NA和R7NB各自獨(dú)立地為-H或如上述針對(duì)R的定義；R7NA和R7NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中如果存在-NR7NAR7NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR7NAR7NB基團(tuán)中，R7NA和R7NB各自獨(dú)立地如上述針對(duì)R的定義；或R7NA和R7NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，-NR3NAR3NB和-NR7NAR7NB如果都存在，則是相同的。在一個(gè)實(shí)施方案中，-NR3NAR3NB和-NR7NAR7NB如果都存在，則是不同的。在上述每個(gè)結(jié)構(gòu)式中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地為-H或具有如上針對(duì)R的定義。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC具有如上針對(duì)R的定義。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基。在另一個(gè)實(shí)施例中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施例中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施例中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施例中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施例中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H、-Me、-Et、-nPr和-iPr。在另一個(gè)實(shí)施例中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H、-Me和-Et(如＝NR3NC為＝NH、＝NMe或＝NEt)。在另一個(gè)實(shí)施例中，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H和-Me(如＝NR3NC為＝NH或＝NMe)。非常相似地，在上述每個(gè)結(jié)構(gòu)式中如果存在＝NR7NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR7NC基團(tuán)中，R7NC為如上針對(duì)R3NC的定義。氮環(huán)原子取代基同樣地，非常相似地，在上述每個(gè)結(jié)構(gòu)式中，如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地具有如上針對(duì)R3NC(或R7NC)的定義。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地選自-H和未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地選自-H、-Me和-Et。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地選自-H和-Me。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地選自-H。反離子如果存在X-，則X-是一個(gè)或多個(gè)實(shí)現(xiàn)電中性的陰離子反離子(anioniccounter)。合適的陰離子反離子的例子在以下標(biāo)題為“鹽”的部分討論。在一個(gè)實(shí)施方案中，X-獨(dú)立地為鹵素陰離子(即鹵素離子)。在一個(gè)實(shí)施方案中，X-獨(dú)立地為Cl-、Br-或I-。在一個(gè)實(shí)施方案中，X-獨(dú)立地為Cl-.在一個(gè)實(shí)施方案中，X-獨(dú)立地為NO3-.組合在本申請(qǐng)中公開了上述實(shí)施方案的所有可能組合，就如同每種組合單獨(dú)而詳盡地記載了那樣。異構(gòu)體某些化合物可能以一種或多種特定的形式存在，所述形式為幾何異構(gòu)形式、光學(xué)形式、對(duì)映異構(gòu)形式、非對(duì)映異構(gòu)形式(diasteriomeric)、差向異構(gòu)形式(epimeric)、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)形式(atropic)、立體異構(gòu)形式、互變異構(gòu)形式、構(gòu)象異構(gòu)形式(conformational)或端基異構(gòu)形式(anomericforms)，包括但不限于順式-和反式-形式；E-和Z-形式；c-、t-和r-形式；內(nèi)(endo-)和外(exo-)形式；R-、S-和內(nèi)消旋-形式；D-和L-形式；d-和l-形式；(+)和(-)形式；酮-、烯醇-和烯醇化物-形式；順(syn)-和反(anti)-形式；順錯(cuò)(synclinal)-和反錯(cuò)(anticlinal)-形式；α-和β-形式；軸(axial)和平展(equatorial)形式；船式-、椅式-、扭轉(zhuǎn)-、信封式-和半椅式；及它們的組合，下文中統(tǒng)稱為＂異構(gòu)體＂(或＂異構(gòu)體形式＂)。需要注意的是，除以下討論中對(duì)互變異構(gòu)形式之外，從本發(fā)明使用的術(shù)語“異構(gòu)體”中明確排除了結(jié)構(gòu)異構(gòu)體(或constitutionalisomer)(即在原子間聯(lián)接方面就存在不同的異構(gòu)體，而不僅僅是原子在空間位置的不同)。例如，不能將甲氧基-OCH3解釋為其結(jié)構(gòu)異構(gòu)體羥甲基-CH2OH。類似地，不能將鄰-氯苯基解釋為其結(jié)構(gòu)異構(gòu)體間氯苯基。然而，當(dāng)提到一類結(jié)構(gòu)時(shí)，該類結(jié)構(gòu)包括落入該類結(jié)構(gòu)范圍內(nèi)的結(jié)構(gòu)異構(gòu)形式(如C1-7烷基包括正丙基和異丙基；丁基包括正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基；甲氧基苯基包括鄰甲氧基苯基、間甲氧基苯基和對(duì)甲氧基苯基)。上述例外不涉及互變異構(gòu)體形式，例如酮-、烯醇-和烯醇化物-形式，如以下的互變異構(gòu)體對(duì)那樣酮/烯醇(如下所示)、亞胺/烯胺、酰胺/亞胺醇、脒(amidine)/脒(amidine)、亞硝基/肟、硫酮/烯硫醇、N-亞硝基/羥基偶氮和硝基/酸式-硝基。酮烯醇烯醇化物需要注意的是，具體地，術(shù)語“異構(gòu)體”包括具有一個(gè)或多個(gè)同位素取代的化合物。例如，H可以是其任何同位素形式，包括1H、2H(D)和3H(T)；C可以是其任何同位素形式，包括11C、12C、13C和14C；O可以是其任何同位素形式，包括16O和18O；依此類推。除非另有說明，當(dāng)提到具體化合物時(shí)，包括所有這些異構(gòu)體形式，包括(全部或部分)的外消旋體和它們的其它混合物。這些異構(gòu)形式的制備方法(如不對(duì)稱合成)和分離方法(如分步結(jié)晶和色譜法)是本領(lǐng)域已知的或可采用本發(fā)明披露的的方法或采用已知方法按照已知方式很容易地制備得到。鹽可以很方便或可能需要制備、純化和/或處理所述化合物的鹽，例如可藥用鹽。可藥用鹽的例子如在Berge等人，1977，＂PharmaceuticallyAcceptableSalts，＂J.Pharm.Sci.，卷66，1-19頁中討論的那些。例如，如果化合物是陰離子性的或者具有可以是陰離子性的官能團(tuán)(如-COOH可以為-COO-)，則鹽可由合適的陽離子形成。合適的無機(jī)陽離子的例子包括但不限于堿金屬離子如Na+和K+，堿土金屬陽離子如Ca2+和Mg2+，其它陽離子如Al+3。合適的有機(jī)陽離子的離子包括但不限于銨離子(即NH4+)和經(jīng)取代的銨離子(如NH3R+、NH2R2+、NHR3+、NR4+)。一些合適的經(jīng)取代的銨離子的例子為衍生自如下的那些乙胺、二乙基胺、二環(huán)己基胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、芐胺、苯基芐基胺、膽堿、葡甲胺和氨基丁三醇，以及氨基酸如賴氨酸和精氨酸。常見的季銨離子的例子為N(CH3)4+。如果所述化合物為陽離子性的或者具有可以是陽離子性的官能團(tuán)(如-NH2可以為-NH3+)，則鹽可由合適的陰離子形成。合適的無機(jī)陰離子的例子包括但不限于衍生自下述無機(jī)酸的那些氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、亞硫酸、硝酸、亞硝酸、磷酸和亞磷酸。合適的有機(jī)陰離子的例子包括但不限于衍生自下述有機(jī)酸的那些2-乙酰氧基苯甲酸、醋酸、抗壞血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟腦磺酸、肉桂酸、檸檬酸、乙二胺四乙酸、乙二磺酸(ethanedisulfonic)、乙磺酸(ethanesulfonic)、反丁烯二酸、葡庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、羥基乙酸、羥基馬來酸、羥萘酸(hydroxynaphthalenecarboxylic)、羥乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、馬來酸、蘋果酸、甲磺酸、粘酸、油酸、草酸、棕櫚酸、撲酸(pamoic)、泛酸(pantothenic)、苯乙酸、苯磺酸、丙酸、丙酮酸、水楊酸、硬脂酸、琥珀酸、對(duì)氨基苯磺酸、酒石酸、甲苯磺酸和纈草酸(valeric)。合適的多有機(jī)陰離子(polymericorganicanions)包括但不限于衍生自下述多元酸的那些鞣酸、羧甲基纖維素。所述化合物也可以混鹽(mixedsalt)的形式提供(即所述化合物與一種鹽或另一種鹽結(jié)合)。例如，甲基-锍氯化物氯化鋅混鹽(MTZ)是一種甲基-锍氯化物(MTC)(氯化物鹽)和另一種鹽，即氯化鋅的混鹽。這些混鹽可由術(shù)語“及(或)其可藥用鹽”涵蓋。除非另有說明，否則當(dāng)提到某特定化合物時(shí)，還包括其鹽的形式。水合物和溶劑化物可以很方便或可能需要制備、純化和/或處理所述活性化合物的相應(yīng)溶劑化物。本申請(qǐng)使用的術(shù)語“溶劑化物”具有常規(guī)含義，是指溶質(zhì)(如化合物、化合物的鹽)與溶劑的復(fù)合物(complex)。如果溶劑是水，則溶劑化物可便利地為水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等。除非另有說明，否則當(dāng)提到特定化合物時(shí)，也包括其溶劑化物。一些優(yōu)選實(shí)施例一些優(yōu)選的二氨基吩噻嗪類化合物包括如下所述化合物及其可藥用鹽、水合物和溶劑化物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述二氨基吩噻嗪選自MTC、ETC、DEMTC、DEETC、硫堇和托洛氯銨(也已知稱作ToluidineBlueO)。本發(fā)明優(yōu)選的化合物為在本申請(qǐng)的試驗(yàn)中表現(xiàn)出高活性的那些化合物。聚集的抑制在本發(fā)明的所有治療方面和其它方面，優(yōu)選的是所述二氨基吩噻嗪為基本上被氧化的形式，如至少50、60、70、80、90、95、99或100％被氧化的形式。因此，本發(fā)明第一方面披露了二氨基吩噻嗪抑制例如細(xì)胞中突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)的聚集中的用途。在疾病狀態(tài)(diseasestate)的情況下，所述聚集可表現(xiàn)為神經(jīng)變性和/或臨床癡呆。另一方面，本發(fā)明提供二氨基吩噻嗪化合物，該化合物用在處置或治療人體或動(dòng)物體的方法中，例如用在治療或預(yù)防與突觸核蛋白(特別是與α-突觸核蛋白)聚集有關(guān)的神經(jīng)變性疾病和/或臨床癡呆的方法中。在另一方面，本發(fā)明提供二氨基吩噻嗪在制備用于抑制突觸核蛋白(特別是抑制α-突觸核蛋白)聚集的藥物中的用途，所述聚集與表現(xiàn)為神經(jīng)變性和/或臨床癡呆的疾病狀態(tài)有關(guān)，例如用于治療或預(yù)防與突觸核蛋白聚集有關(guān)的神經(jīng)變性疾病和/或臨床癡呆的藥物。另一方面，本發(fā)明提供治療或預(yù)防與突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)聚集有關(guān)的神經(jīng)變性疾病和/或臨床癡呆的方法，該方法包括向受試者給藥預(yù)防有效量的或治療有效量的二氨基吩噻嗪，或給藥含有該化合物的治療組合物，從而抑制突觸核蛋白聚集。另一方面，本發(fā)明提供調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物的腦中突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)聚集的方法，所述聚集與如下討論的疾病狀態(tài)有關(guān)，所述治療包括向所述需要這種治療的哺乳動(dòng)物給藥預(yù)防有效量的或治療有效量的二氨基吩噻嗪的步驟。在另一方面，本發(fā)明提供抑制哺乳動(dòng)物的腦中突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)聚集體產(chǎn)生的方法，該治療如上所述。在另一方面，本發(fā)明提供用于治療哺乳動(dòng)物與突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)聚集有關(guān)的疾病的藥物產(chǎn)品，該哺乳動(dòng)物患有由所述聚集導(dǎo)致的疾病，該藥物產(chǎn)品包括容器，所述容器標(biāo)有或帶有說明所述藥物是用于治療所述疾病的標(biāo)簽，所述容器含有一個(gè)或多個(gè)劑量單位，每個(gè)單位含有至少一種可藥用的賦型劑和作為活性成分的、單獨(dú)的、純的選自上述的本發(fā)明二氨基吩噻嗪化合物。二氨基吩噻嗪可以單獨(dú)給藥，或與其它治療劑或方法聯(lián)合使用，根據(jù)要治療的病癥或疾病同時(shí)或順序給藥。特別是，通常希望與其它相關(guān)蛋白聚集反應(yīng)抑制劑共同使用或配制二氨基吩噻嗪類化合物。優(yōu)選的聯(lián)合是如上所述的二氨基吩噻嗪化合物的一種或多種加上能調(diào)節(jié)要進(jìn)行治療的哺乳動(dòng)物多巴胺水平的化合物。這樣的另外化合物可包括左旋-DOPA和多巴胺能激動(dòng)劑如羅平尼咯(參見如Olanow，c.W.2004，ThescientificbasisforthecurrenttreatmentofParkinson′sdisease，Ann.Rev.med.5541-60)。在每種情況下，優(yōu)選的哺乳動(dòng)物為人類。配體本發(fā)明討論的能夠抑制α-突觸核蛋白聚集的二氨基吩噻嗪也能用作α-突觸核蛋白(或聚集的α-突觸核蛋白)的配體或標(biāo)記(labels)。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，所述二氨基吩噻嗪為配體，如突觸核蛋白(或聚集的突觸核蛋白)，特別是α-突觸核蛋白的配體。這些二氨基吩噻嗪化合物(配體)可以與其它化學(xué)基團(tuán)結(jié)合(incorporate)、連接(conjugated)、螯合(chelated)或聯(lián)合(associated)，所述其它化學(xué)基團(tuán)為可檢測(cè)的標(biāo)記，例如穩(wěn)定的或不穩(wěn)定的可檢測(cè)同位素、放射性同位素、正電子發(fā)射原子(positron-emittingatoms)、磁共振標(biāo)記(magneticresonancelabels)、染料、熒光標(biāo)記物、抗原基團(tuán)(antigenicgroups)、治療部分(therapeuticmoieties)或其它任何有助于預(yù)防、診斷或治療用途的原子或基團(tuán)。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，所述二氨基吩噻嗪化合物如上所定義，但是附加的限定是將所述化合物與一個(gè)或多個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)同位素、放射性同位素、正電子發(fā)射原子、磁共振標(biāo)記、染料、熒光標(biāo)記物、抗原基團(tuán)、治療部分結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述二氨基吩噻嗪化合物為配體，也是標(biāo)記，如針對(duì)α-突觸核蛋白(或聚集的α-突觸核蛋白)的標(biāo)記，并且與一個(gè)或多個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)可檢測(cè)標(biāo)記結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，所述二氨基吩噻嗪化合物如上所定義，但是附加的限定是將所述化合物與一個(gè)或多個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)可檢測(cè)標(biāo)記結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述可檢測(cè)標(biāo)記為穩(wěn)定的可檢測(cè)同位素、不穩(wěn)定的可檢測(cè)同位素、放射性同位素(例如99Tc)、正電子發(fā)射原子(例如11C、18F)、磁共振標(biāo)記(例如19F)、染料、熒光基團(tuán)或抗原基團(tuán)，或結(jié)合有穩(wěn)定的可檢測(cè)同位素、不穩(wěn)定的可檢測(cè)同位素、放射性同位素(例如99Tc)、正電子發(fā)射原子(例如11C，18F)、磁共振標(biāo)記(例如19F)、染料、熒光基團(tuán)或抗原基團(tuán)。可以通過任何合適的手段顯現(xiàn)或檢測(cè)經(jīng)標(biāo)記的二氨基吩噻嗪化合物(例如，當(dāng)配合到α-突觸核蛋白或聚集的α-突觸核蛋白時(shí))，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解的是可使用任何本領(lǐng)域已知的合適檢測(cè)手段。例如，所述二氨基吩噻嗪化合物(配體-標(biāo)記)可以合適地如下檢測(cè)結(jié)合正電子發(fā)射原子(例如11C)(例如作為一個(gè)或多個(gè)烷基取代基(如甲基取代基)中的碳原子)，并用本領(lǐng)域已知的正電子發(fā)射斷層掃描術(shù)(PET)對(duì)所述化合物進(jìn)行檢測(cè)。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，所述二氨基吩噻嗪化合物如上所定義，但是附加的限定是二氨基吩噻嗪化合物的至少一個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)環(huán)碳原子為正電子發(fā)射原子，例如11C；和/或取代基R1、R2、R4、R6、R8、R9、R3NA、R3NB、R3NC、R7NA、R7NB、R7NC和RN10中的至少一個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)上的至少一個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)碳原子為正電子發(fā)射原子，例如11C。在一個(gè)實(shí)施方案中，取代基R3NA、R3NB、R3NC、R7NA、R7NB和R7NC中的至少一個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)上的至少一個(gè)碳原子(如1、2、3、4個(gè)等)為正電子發(fā)射原子，例如11C。在一個(gè)實(shí)施方案中，取代基R3NA、R3NB、R3NC、R7NA、R7NB和R7NC中的至少一個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)為-11CH3。這些二氨基吩噻嗪化合物的例子(即結(jié)合有PET可檢測(cè)的正電子發(fā)射原子的化合物)包括如下所列的這些制備上述這些化合物和相似的11C標(biāo)記的二氨基吩噻嗪類化合物的合適方法公開在例如WO02/075318(參見圖11a、11b、12)和WO2005/030676中?？蛇x擇地或額外地，所述二氨基吩噻嗪可連接到螯合基團(tuán)(即適用于通過形成復(fù)合物或螯合物而連接到另一分子或原子或離子的部分)(例如放射同位素螯合基團(tuán)，如锝-螯合基團(tuán)，例如二亞乙基三胺五乙酸基團(tuán))，其螯合到可檢測(cè)標(biāo)記(例如放射同位素，例如99Tc)上。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，所述二氨基吩噻嗪化合物如上所定義，但是附加的限定是取代基R1、R2、R4、R6、R8、R9、R3NA、R3NB、R3NC、R7NA、R7NB、R7NC和RN10中的至少一個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)為螯合基團(tuán)或結(jié)合有螯合基團(tuán)(如锝-螯合基團(tuán)，如二亞乙基三胺五乙酸基團(tuán))，其能螯合到可檢測(cè)標(biāo)記(如放射同位素，如99Tc)上?？蛇x擇地或額外地，所述二氨基吩噻嗪化合物可結(jié)合磁共振標(biāo)記(例如19F)，因此適用于MRI成像(參見如Higuchi等人，NatNeurosci.2005Apr；8(4)527-33)。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，所述二氨基吩噻嗪化合物如上所定義，但附加的限定為取代基R1、R2、R4、R6、R8、R9、R3NA、R3NB、R3NC、R7NA、R7NB、R7NC和RN10中的至少一個(gè)(如1、2、3、4個(gè)等)為磁共振標(biāo)記或結(jié)合有磁共振標(biāo)記(如19F，如-19F、-C(19F)3，等)。因此，一個(gè)方面，本發(fā)明提供標(biāo)記突觸核蛋白(或聚集的突觸核蛋白)，特別是α-突觸核蛋白的方法，該方法包括如下步驟將突觸核蛋白(或聚集的突觸核蛋白)與二氨基吩噻嗪化合物接觸，所述化合物結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合可檢測(cè)標(biāo)記。另一方面，本發(fā)明提供一種檢測(cè)突觸核蛋白(或聚集的突觸核蛋白)，特別是α-突觸核蛋白的方法，包括如下步驟將突觸核蛋白(或聚集的突觸核蛋白)與二氨基吩噻嗪接觸，該化合物結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合可檢測(cè)標(biāo)記，檢測(cè)與突觸核蛋白(或聚集的突觸核蛋白)結(jié)合的所述化合物的存在和/或其量。在另一方面，本發(fā)明提供一種診斷或預(yù)測(cè)(prognosis)被認(rèn)為患有突觸核蛋白病的受試者中所述疾病的方法，包括如下步驟(i)向所述受試者中引入能標(biāo)記突觸核蛋白或聚集的突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)的二氨基吩噻嗪化合物(例如與可檢測(cè)標(biāo)記結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合的二氨基吩噻嗪)，(ii)檢測(cè)所述受試者的腦中結(jié)合與突觸核蛋白或聚集的突觸核蛋白結(jié)合的所述化合物的存在和/或其量，(iii)將(ii)得到的檢測(cè)結(jié)果與受試者的疾病狀態(tài)相關(guān)聯(lián)。在另一方面，本發(fā)明提供能夠標(biāo)記突觸核蛋白或聚集的突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)的二氨基吩噻嗪化合物(例如與可檢測(cè)標(biāo)記結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合的二氨基吩噻嗪)，以用在診斷或預(yù)測(cè)突觸核蛋白病的方法中。在另一方面，本發(fā)明提供能夠標(biāo)記突觸核蛋白或聚集的突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)的二氨基吩噻嗪化合物(如與可檢測(cè)標(biāo)記結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合的二氨基吩噻嗪化合物)在制備用在診斷或預(yù)測(cè)突觸核蛋白病中的診斷劑或預(yù)測(cè)劑(prognosticreagent)方法中的用途。本領(lǐng)域技術(shù)人員能理解的是，二氨基吩噻嗪配體物/標(biāo)記物可以以前體形式給藥，通過所述受試者中存在的活化劑或服用的活化劑而轉(zhuǎn)化為活性形式(如配合形式、標(biāo)記形式)，而不是直接給藥這些二氨基吩噻嗪配體物/標(biāo)記物。疾病本發(fā)明涉及的疾病狀態(tài)為突觸核蛋白病。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)意識(shí)到，術(shù)語“突觸核蛋白病”用于一類神經(jīng)變性障礙的稱謂，這類障礙的特點(diǎn)是突觸核蛋白(特別是α-突觸核蛋白)的原纖維聚集體在神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)的選擇性群體的胞質(zhì)中，并且特別是其中含有突觸核蛋白的內(nèi)含物的存在是所述疾病的病征。這應(yīng)當(dāng)將該疾病與非-突觸核蛋白病區(qū)分開，在非-突觸核蛋白病中，除了其它病理原因外，含突觸核蛋白的內(nèi)含物可能存在或可能不存在。所述突觸核蛋白病目前包括如下疾病帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)、盧易體癡呆(dementiawithLewybodies，DLB)、多系統(tǒng)萎縮癥(multiplesystematrophy，MSA)、藥物誘發(fā)帕金森綜合征(drug-inducedparkinsonism)(如由1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶[MPTP]或殺蟲劑如魚藤酮誘發(fā)的帕金森綜合征)和單純性自主神經(jīng)衰竭(pureautonomicfailure，PAF)?？赡馨l(fā)現(xiàn)有盧易體的非-突觸核蛋白病包括如下疾病阿爾茨海默氏病、匹克病/額顳癡呆、克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布病(Creutzfeldt-Jakobdisease)、共濟(jì)失調(diào)-毛細(xì)管擴(kuò)張癥(ataxiatelangectasia)、皮質(zhì)延髓變性(corticobasaldegeneration)、張力失常(dystonia)、進(jìn)行性核上性麻痹(progressivesupranuclearpalsy)、神經(jīng)軸索性營養(yǎng)不良(neuraxonaldystrophy)、亞急性硬化性全腦炎(subacutesclerosingpanencephalitis)、肌萎縮側(cè)索硬化(amyotrophiclateralsclerosis)、ALS-關(guān)島癡呆綜合征(ALS-dementiaguamcomplex)、米爾羅伊綜合征(Meige’ssyndrome)和哈-斯二氏病(Hallervorden-Spatzdisease，HSD)(伴有腦鐵的神經(jīng)變性疾病)。LB通常發(fā)生在各種神經(jīng)變性疾病中。研究表明不管潛在的疾病，α-突觸核蛋白原纖維在神經(jīng)元中的形態(tài)具有基本的相似性。與MSA的發(fā)病率(4/100,000)，帕金森病具有高發(fā)病率(約100/100,000)。采用DLB作為共同名稱，以涵蓋其它幾種早就存在的疾病(McKeith，I.g.等人(1996).＂ConsensusguidelinesfortheclinicalandpathologicdiagnosisofdementiawithLewybodies(DLB)reportoftheconsortiumonDLBinternationalworkshop.Neurology，47，1113-1124.＂Neurology471113-1124)。這些疾病包括盧易體老年癡呆、阿爾茨海默氏病的盧易體變體、皮質(zhì)盧易體癡呆癥(corticalLewybodydementia)和盧易體癡呆。MSA涵蓋夏-德綜合征(MSAencompassesShyDragersyndrome)、橄欖體腦橋小腦萎縮(olivopontocerebellaratrophy)和紋狀體黑質(zhì)變性(striatonigraldegeneration)。據(jù)報(bào)道，DLB是繼阿爾茨海默氏病后老年人癡呆中第二常見疾病類型。帕金森病的特征在于黑質(zhì)中的LB，但是也在皮質(zhì)中發(fā)現(xiàn)了LB。DLB的特征在于出現(xiàn)更多的皮質(zhì)LB。據(jù)發(fā)現(xiàn)，在MSA中，絲狀內(nèi)含物(稱作神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物(glialcytoplasmicinclusions，GCI))主要存在于少突膠質(zhì)細(xì)胞中。LB中的組分細(xì)絲的性質(zhì)直到1997年才弄清楚，當(dāng)時(shí)的兩個(gè)發(fā)現(xiàn)確定了其主要組分(i)α-突觸核蛋白中的錯(cuò)義突變經(jīng)發(fā)現(xiàn)能導(dǎo)致家族性PD的罕見形式(Polymeropoulos，m.H.等人(1997).＂Mutationintheα-synucleingeneidentifiedinfamilieswith’sdisease.＂Science2762045-2047)，和(ii)在特發(fā)性的PD和DLB中的LB和LN經(jīng)發(fā)現(xiàn)對(duì)α-突觸核蛋白為免疫活性的(Spillantini，m.g.等人(1997).＂α-synucleininLewybodies＂Nature388839-840)。重組α-突觸核蛋白可在體外形成細(xì)絲(filaments)。該蛋白為天然未折疊蛋白。在產(chǎn)生該蛋白質(zhì)聚集體(proteinaggregates)的疾病中，其與β-折疊結(jié)構(gòu)形成原纖維。優(yōu)選地，本發(fā)明所述化合物用于突觸核蛋白病中，所述突觸核蛋白病選自PD、PAF、MSA和HSD。受試者的選擇本發(fā)明披露的配體可用作診斷或預(yù)測(cè)方法的一部分?？捎闷溥x擇要進(jìn)行治療的患者，或用于評(píng)估治療或治療劑的有效性，所述治療劑為例如給藥到受試者的α-突觸核蛋白相關(guān)抑制劑。用于所述方法的合適受試者可以基于通常的因素進(jìn)行選擇。因此，最初對(duì)患者的選擇可能涉及如下的一個(gè)或多個(gè)通過有經(jīng)驗(yàn)的臨床醫(yī)生的嚴(yán)格評(píng)價(jià)；通過增補(bǔ)實(shí)驗(yàn)和其它研究方法盡可能排除非-AD診斷；利用神經(jīng)病理有效的實(shí)驗(yàn)組客觀評(píng)價(jià)認(rèn)知功能的水平。劑量單位和制劑及化合物的給藥給藥本申請(qǐng)所述的化合物、組合物和藥物優(yōu)選采用“預(yù)防有效量”或“治療有效量”(視情況而定，盡管預(yù)防也可能被認(rèn)為是治療)，這足以對(duì)個(gè)體產(chǎn)生有益效果。對(duì)于配體，所述量是診斷有效量的，該量在含有突觸核蛋白病的患者體內(nèi)含有產(chǎn)生可檢測(cè)的結(jié)合。對(duì)于藥物，實(shí)際給藥量和給藥的速度及時(shí)程依賴于要進(jìn)行治療的疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度。治療處方如劑量的確定，是在全科醫(yī)師和其它醫(yī)生的責(zé)任范圍內(nèi)，并且典型地需要考慮進(jìn)行治療的疾病、患者個(gè)體的狀況、給藥部位、給藥方法和醫(yī)師已知的其它因素。盡管本發(fā)明也涉及用在動(dòng)物上(如出于試驗(yàn)?zāi)康幕颢F用治療目的)，但典型地，所述哺乳動(dòng)物為人類。本發(fā)明吩噻嗪的例子是本領(lǐng)域已知的，并可參考標(biāo)準(zhǔn)教材記載的方法進(jìn)行制備(如Merckmanual，Houben-Weyl，BeilsteinEIII/IV27，1214ff，J.Heterocycl.chem21，613(1984)，等等)。上述結(jié)構(gòu)式的化合物、它們的可藥用鹽或經(jīng)發(fā)現(xiàn)具有由所提供的試驗(yàn)定義的性質(zhì)的其它化合物可在經(jīng)進(jìn)一步毒性試驗(yàn)后用做藥物(如采用藥物制劑的形式)。已經(jīng)披露了亞甲藍(lán)具有很廣范圍的醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥，包括治療高鐵血紅蛋白癥(methaemoglobineamia)和預(yù)防躁郁癥(Naylor(1986)Biol.Psychiatry21，915-920)，并且還描述了全身給藥后的CNS穿透(CNSpenetration)(Muller(1992)ActaAnat.，144，39-44)。天藍(lán)A和天藍(lán)B的產(chǎn)生是亞甲藍(lán)的正常代謝降解(DisantoandWagner(1972a)J.Pharm.Sci.61，598-602；DisantoandWagner(1972b)J.Pharm.Sci.611086-1094)。藥物的給藥可如下進(jìn)行經(jīng)腸胃(例如口服，采用片劑、包衣片劑、錠劑、硬明膠膠囊和軟明膠膠囊、溶液劑、乳劑或混懸劑形式)、經(jīng)鼻給藥(如采用鼻腔噴霧形式)或直腸給藥(如采用栓劑形式)。所述給藥也可經(jīng)非腸胃(parentally)，例如肌內(nèi)注射或靜脈注射(如采用注射液形式)進(jìn)行。除了上述組分外，所述組合物還可能包括可藥用賦型劑、防腐劑、助溶劑、增粘劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、調(diào)味劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑或包衣劑。這些物質(zhì)應(yīng)當(dāng)是非毒性的，并且不應(yīng)影響活性成分的有效性。所述載體或其它物質(zhì)的確切形式可取決于給藥途徑。各種技術(shù)和方案的實(shí)例記載在“Remington’sPharmaceuticalSciences”，16thedition，Osol，A.(ed.)，1980。當(dāng)將所述組合物配制成藥物組合物時(shí)，該藥物組合物可如下進(jìn)行經(jīng)腸胃(例如口服給藥，采用散劑、片劑、包衣片劑、錠劑、硬明膠膠囊和軟明膠膠囊、溶液、乳劑或懸浮劑形式)、經(jīng)鼻給藥(如采用鼻腔噴霧形式)或直腸給藥(如采用栓劑形式)。然而，所述給藥也可非腸胃，例如肌內(nèi)注射或靜脈注射(如采用注射液形式)進(jìn)行。因此，例如，當(dāng)所述藥物組合物采用片劑形式時(shí)，其可包括固體載體如明膠或助劑。對(duì)于片劑、包衣片劑、錠劑、硬明膠膠囊和軟明膠膠囊的制備，可將活性化合物及其可藥用酸加成鹽與藥用惰性的、無機(jī)或有機(jī)賦型劑一起加工?？梢允褂萌樘恰⒂衩?maize)、淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸及其鹽，等等，例如用于片劑、錠劑、硬明膠膠囊和軟明膠膠囊的賦型劑。用于軟明膠膠囊的合適賦型劑為如植物油、蠟、脂肪物質(zhì)、半固體和液體多元醇等。當(dāng)所述組合物采用液體藥物制劑形式時(shí)，其通常包括液體載體如水、石油醚、動(dòng)物油或植物油、礦物油或合成油。也可包括生理鹽水溶液溶液、右旋糖或其它糖溶液或二醇如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇。其它合適的制備溶液和糖漿劑的賦型劑為如水、多元醇、蔗糖、轉(zhuǎn)化糖、葡萄糖、海藻糖(trihalose)，等等。針對(duì)注射溶液的合適賦型劑為如水、醇、多元醇、甘油、植物油，等。對(duì)于靜脈注射、皮膚注射或皮下注射或?qū)τ谇粌?nèi)灌輸?shù)侥X中，所述活性成分可采用非腸道-可接受的水溶液形式，該形式不含熱原并且具有合適的pH、等滲性和穩(wěn)定性。本領(lǐng)域相關(guān)技術(shù)人員能夠利用如等滲載體，例如氯化鈉注射液、林格氏注射液、乳酸林格氏(注射液)制備合適的溶液。如果需要，也可以包括防腐劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑和/或其它添加劑。本申請(qǐng)化合物在作為配體的用途中也可采用相似載體或組合物。因此，本發(fā)明一方面將二氨基吩噻嗪(如MTC)用在治療或醫(yī)治人或動(dòng)物的方法中，該方法優(yōu)選包括口服給藥有效量的二氨基吩噻嗪。優(yōu)選地，所述藥物適用于口服給藥，優(yōu)選采用固體劑量單位形式。優(yōu)選地，所述劑量口服給藥。優(yōu)選地，每天總劑量為小于或等于400、300、200或100mg。例如，其可包括如下劑量單位10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120或130mgt.i.d.(一天三次)可選擇地，其可包括如下劑量單位10、20、30、40、50、70、60、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190或200mgb.i.d.(一天2次)。優(yōu)選地，所述治療將持續(xù)或至少持續(xù)2、3或4周。針對(duì)這些劑量的說明可以記載在書面說明中，或置于本發(fā)明藥物產(chǎn)品的容器中。當(dāng)給藥采用靜脈給藥形式時(shí)，優(yōu)選的是，所述二氨基吩噻嗪不是MTC。對(duì)于本發(fā)明引用的任何交叉參考披露的內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)需要補(bǔ)充到本發(fā)明中，因此將這些交叉參考專門并入本申請(qǐng)。通過參考如下非限定附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步披露。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)這里公開的內(nèi)容可想到本發(fā)明的其它實(shí)施方案。圖1.利用硫酸銨對(duì)tsyn分級(jí)和Ni-親和色譜純化的樣品。通過15％SDS-PAGE和考馬斯藍(lán)(CoomassieBlue)染色，以對(duì)樣品進(jìn)行分析。圖2.利用硫酸銨對(duì)tsyn分級(jí)和DEAE-Sepharose陰離子交換層析純化的樣品。通過15％SDS-PAGE和考馬斯藍(lán)染色對(duì)樣品進(jìn)行分析。圖3.利用DEAE-Sepharose陰離子交換層析和CM-凝膠陽離子交換層析對(duì)fsyn純化的樣品。通過15％SDS-PAGE和考馬斯藍(lán)染色對(duì)樣品進(jìn)行分析。圖4.通過tsyn和fsyn的原纖維形成的時(shí)程，該時(shí)程經(jīng)硫黃素T和櫻草黃的熒光監(jiān)測(cè)。將在20mMTris.HCl(三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽)、pH7.5，加上50μg/ml肝素(經(jīng)指示)中的1mg/ml(A)tsyn-8和2mg/mfsyn-14(B)在37℃攪拌培養(yǎng)。通過將10μl所述培養(yǎng)物加入到總體積為100μl的1μM硫黃素T或櫻草黃中來分析原纖維形成，測(cè)量激發(fā)光譜，發(fā)射波長為480nm。在測(cè)量位于激發(fā)峰的信號(hào)之前從光譜中減去針對(duì)單獨(dú)熒光團(tuán)的信號(hào)(櫻草黃為420nm，硫黃素T為450nm)。圖5.MTC和ETC對(duì)經(jīng)組裝的tsyn誘導(dǎo)的硫黃素T或櫻草黃熒光的效果。將1mg/ml(～95μM)Tsyn-13加上50μg/ml肝素在37℃培養(yǎng)20h，然后將等分與MTC(A、C)或ETC(B、D)混合，得到所示濃度(μM)，再培養(yǎng)1h。將10μl所述蛋白質(zhì)加到總體積為100μl的1μM硫黃素T(A，B)或櫻草黃(C，D)中，測(cè)量激發(fā)光譜，發(fā)射波長為480nm。顯示的跡線為從來自蛋白質(zhì)加上熒光團(tuán)和化合物的信號(hào)中減去熒光團(tuán)加上化合物的信號(hào)所得到的結(jié)果。圖6.MTC和ETC對(duì)經(jīng)組裝的fsyn-14誘導(dǎo)的櫻草黃熒光的效果。將將2mg/ml(～140μM)蛋白質(zhì)加上50μg/ml肝素在37℃培養(yǎng)47h，然后將等份與MTC(A、C)或ETC(B、D)混合，得到所示濃度(μM)，再培養(yǎng)1h。將10μl所述蛋白質(zhì)加到總體積為100μl的櫻草黃中，測(cè)量激發(fā)光譜，發(fā)射波長為480nm。顯示的記錄為從來自蛋白質(zhì)加上熒光團(tuán)和化合物的信號(hào)中減去熒光團(tuán)加上化合物的信號(hào)所得到的結(jié)果。圖1.MTC和ETC對(duì)經(jīng)組裝的tsyn或fsyn誘導(dǎo)的硫黃素T或櫻草黃熒光的效果。從圖5顯示的記錄中測(cè)得針對(duì)tsyn-8(A)的熒光值或從圖6顯示的記錄中測(cè)得針對(duì)fsyn-14(B)的熒光值，并且歸一化到?jīng)]有化合物情況下的測(cè)量值。圖8.MTC和ETC對(duì)經(jīng)組裝的tsyn誘導(dǎo)的硫黃素T或櫻草黃熒光的效果，針對(duì)不同濃度的硫黃素T和櫻草黃進(jìn)行分析。組裝Tysn-16并如圖5所述分析MTC或ETC的效果，不同的是硫黃素T和櫻草黃為0.2、1或5μM。校準(zhǔn)背景后，將熒光峰值歸一化到?jīng)]有化合物情況下的測(cè)量值，并作為化合物濃度函數(shù)繪圖。MTC(A、B)或ETC(C、D)的效果用硫黃素T(A，c)或櫻草黃(B，D)監(jiān)測(cè)。圖9.水相fsyn與固相tsyn的結(jié)合。0-10μM的fsyn-20與以0-2μM結(jié)合在固相上的tsyn-13一起培養(yǎng)，利用抗體211對(duì)結(jié)合的fsyn進(jìn)行檢測(cè)。圖10.化合物對(duì)突觸核蛋白-突觸核蛋白結(jié)合的影響。在所示化合物存在下，將水相中的5μMfsyn-10與固相中的1μMtsyn-13一起培養(yǎng)。圖13.DEETC對(duì)SSFsyn在NIE細(xì)胞中的表達(dá)的抑制作用。每種藥物濃度(0-100nM)均一式三份地進(jìn)行。加入DEETC和dbcAMP，2天后通過免疫印跡用mAb42分析細(xì)胞。圖14.用mAb42檢測(cè)到的額外蛋白帶的存在，但用mAb211沒有檢測(cè)到。道1，未處理的；道2、3、4，三個(gè)獨(dú)立的板，利用dbcAMP進(jìn)行區(qū)分。圖15.在表達(dá)SSFsyn的NIE細(xì)胞中的聚集的α-突觸核蛋白。左組，SSFsyn細(xì)胞；右組，非轉(zhuǎn)染的，在dbcAMP處理后的對(duì)照NIE-115細(xì)胞。圖16.在表達(dá)SSFsyn的NI細(xì)胞中的聚集的α-突觸核蛋白。用得克薩斯紅-標(biāo)記的-α-突觸核蛋白(左)染色的SSFsyn細(xì)胞；右組，櫻草黃標(biāo)記；中間組，合并的圖像，顯示了抗體和櫻草黃標(biāo)記的共區(qū)域化。圖17.MTC對(duì)tsyn聚合的影響。在所示濃度的MTC的存在下，將在20mMTris.HCl、pH7.5，50μg/ml肝素中的1mg/ml(95μM)tsyn-16在37℃攪拌培養(yǎng)。在不同時(shí)間取樣品(10μl)，分析它們1μM時(shí)對(duì)硫黃素T(上方組)或櫻草黃(下方組)熒光的影響。圖18.針對(duì)不同syn制劑的結(jié)合曲線。將結(jié)合到ELISA板上的1μMTsyn-13與所示三種不同syn制劑的一系列稀釋液一起培養(yǎng)。水相緩沖液為20mMTris.HCl、50mMNaCl、pH7.5、0.05％Tween-20、1％魚鱗膠(fishskingelatine)。圖19A和19B在不同緩沖液中的syn-10結(jié)合曲線。將結(jié)合到ELISA板上的1μMTsyn-13與syn-10的一系列稀釋液一起培養(yǎng)。水相緩沖液全為20mM，并包括50mMNaCl、0.05％Tween-20和1％魚鱗膠。圖20針對(duì)不同syn制劑的結(jié)合曲線。結(jié)合到ELISA板上的1μMTsyn-13與所示syn的一系列稀釋液一起培養(yǎng)。水相緩沖液為20mMTris.HCl、pH7.0、50mMNaCl、0.05％Tween-20、1％魚鱗膠。圖21針對(duì)不同syn制劑的結(jié)合曲線。結(jié)合到ELISA板上的1μMTsyn-13與所示syn的一系列稀釋液一起培養(yǎng)。水相緩沖液為20mMTris.HCl、pH7.0、50mMNaCl、0.05％Tween-20、1％魚鱗膠。圖22.針對(duì)在不同緩沖液中的fsyn和20fsyn-22的結(jié)合曲線。A.將結(jié)合到ELISA板上的1μMTsyn-13與在20mMTrispH7.0中或在50mMNa磷酸鹽pH6.0或5.5中的一系列fsyn-20稀釋液一起培養(yǎng)。B.將結(jié)合到ELISA板上的1μMTsyn-13與在Na磷酸鹽pH6.0中的一系列fsyn-20或fsyn-22緩沖液一起培養(yǎng)。在這兩種情況下，緩沖液也含有50mMNaCl、0.05％Tween-20和1％魚鱗膠。實(shí)施例化學(xué)合成如下所述，下述合成僅用于說明目的而不是對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行限制。合成1乙基-锍氯化物(ETC)N，N-二乙基-對(duì)苯二胺二鹽酸鹽將N，N-二乙基-對(duì)苯二胺(5g，30.4mmol)溶解在乙醚(25cm3)中，加入鹽酸(6cm3，10m)，對(duì)所得混合物進(jìn)行濃縮，得到標(biāo)題化合物(7.22g，100％)，為紅/褐色固體。δH(250MHz；D2O)7.68(4H，m，ArH)，3.69(4H，q，7.32，NCH2)，1.11(6H，t，7.32，CH3)；δC(62.9MHz；D2O)12.1(CH3)，56.4(NCH2)，126.8(ArC)，127.6(ArC)，135.5(ArC)，139.1(ArC)。乙基-锍氯化物將N，N-二乙基-對(duì)苯二胺二鹽酸鹽(7.22g，30.4mmol)溶解在水(250cm3)中，用HCl將pH調(diào)節(jié)到1.6，向其中逐滴加入硫化鈉(>60％)(3.95g，30.4mmol)。攪拌該懸浮液直到所有硫化鈉溶解。制備氯化鐵(III)(27.15g，100mmol)的水(200cm3)溶液，并將該溶液的一半加到上述混合物中。立即發(fā)生顏色變化，從淺黃色變?yōu)樗{(lán)色。然后向溶液中充氣1h，接著加入剩余的氯化鐵(III)溶液。將混合物冷卻到5℃，過濾除去淺綠色淤漿。向?yàn)V液中加入HCl水溶液(15cm3，6m)，然后加入氯化鈉(60g)，懸浮液攪拌5分鐘，過濾得到固體產(chǎn)物，將其溶解在DCM中，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾濃縮，得到紫/綠色固體(1.28g，22％)。將該紫/綠色固體加載在制備性C18反向柱上，用水洗(1L)或直到黃顏色褪去。用MeOH/HCl(pH2)將產(chǎn)物從柱上沖洗下來，濃縮得到標(biāo)題化合物(0.64g，11％)，為粘稠紫色固體。δH(250MHz；D2O)1.26(12H，t，6.5，CH3)，3.56(8H，q，6.5，NCH2)，7.01(2H，s，ArH)，7.20(2H，d，9.25，ArH)，7.54(2H，d，9.25，ArH)；m/z(ESI)340.2(100％，[M-Cl]+)。合成21，9-二甲基-甲基-锍氯化物(DMMTC)3-甲基-N，N-二甲基苯二胺二鹽酸鹽向250cm3圓底燒瓶中加入水(100cm3)，用冰浴將溫度降低到5℃。向該冷卻的溶液中小心加入硫酸(98％，22.5g)。向該溶液中加入3-甲基-N，N-二甲基苯胺(10g，74mmol)和亞硝酸鈉(5.6g，81.4mmol)，將該溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入鐵(Fe)屑(12.8g，229mmol)，將混合物再攪拌2小時(shí)。過濾該溶液，然后用飽和碳酸氫鈉溶液中和，有機(jī)物萃取到乙酸乙酯(3x100cm3)中。萃出物用硫酸鎂干燥，過濾濃縮，得到棕色油狀物。將該油狀物溶解在乙醚(100cm3)中，加入濃鹽酸(50cm3)。對(duì)溶液進(jìn)行蒸發(fā)干燥，得到標(biāo)題化合物(10g，60％)，為淡褐色固體。vmax(KBr)/cm-12849(CH)，2821(CH)，2543(CH)，2444(CH)，1586(C＝N)，1487(CH)，1445(CH)，1415(CH)，1138(CH)；δH(250MHz；D2O)7.59(1H，s，ArH)，7.50(2H，s，ArH)，3.24(6H，s，CH3)，2.39(3H，s，CH3)；δC(62.9MHz；D2O)18.9(CH3)，48.8(CH3)，122.1(ArC)，126.2(ArC)，127.6(ArC)，133.7(ArC)，137.4(ArC)，144.4(ArC)。二甲基甲基锍氯化物向500cm3圓底燒瓶中加入3-甲基-N，N-二甲基-苯二胺二鹽酸鹽(0.9g，4.03mmol)，將該化合物溶解在鹽酸水溶液(50cm3，3m)中，然后加入硫化鈉(>60％)(0.52g，4.03mmol)。將氯化鐵(III)六水合物(7.26g，27mmol)溶解在水(50cm3)中，制得的溶液的一半倒入反應(yīng)混合物中，溶液立即變?yōu)樗{(lán)色。然后向所述溶液中充氣2小時(shí)，之后加入剩余的氯化鐵(III)水溶液。將所得混合物冷卻到5℃并過濾；沉淀物溶解在沸水(60cm3)中，過濾，冷卻。向該冷卻的溶液中加入鹽酸(10cm3，6m)，然后過濾得到標(biāo)題化合物(0.22g，16％)，為紫/藍(lán)色固體。vmax(KBr)/cm-12926(CH)，1604(C＝N)，1535，1496，1444(CH)，1404(CH)，1315(CH)，1185(CH)；δH(250MHz；DMSO)7.29(2H，s，ArH)，7.23(2H，s，ArH)，3.29(12H，s，CH3)，2.55(6H，s，CH3)；δC(62.9MHz；DMSO)18.9(CH3)，41.5(CH3)，105.7(ArC)，118.7(ArC)，133.6(ArC)，134.5(ArC)，147.2(ArC)，154.2(ArC)；C18H22N3S.3H2O的分析值C，51.98；H，6.74；N，10.11；S，7.70。實(shí)測(cè)值C，52.03；H，6.59；N，10.05；S，7.66。合成31，9-二乙基-甲基-锍氯化物(DEMTC)N，N-二甲基-間乙基苯胺向100cm3圓底燒瓶中加入3-乙基苯胺(10g，82.5mmol)、乙醇(15cm3)、碳酸鈉(11.81g，111.4mmol)。逐滴加入碘甲烷(31.63g，222mmol)。然后在45℃加熱該混合物10分鐘，之后冷卻到室溫并加入水(100cm3)。將該混合物萃取到乙醚(3x100cm3)中，該萃出物用硫酸鎂干燥，過濾濃縮，得到標(biāo)題化合物(4.68g，38％)，為淺黃色油狀物。vmax(凈)/cm-13045(CH)，2960(CH)，2920(CH)，2891(CH)，2797(CH)，1597(C＝N)，1494(CH)，1438(CH)，1352(CH)，1225(CH)；δH(250MHz；CDCl3)7.22(1H，t，7.75，ArH)，6.63(3H，m，ArH)，2.97(6H，s，NCH3)，2.63(2H，q，7.5，CH2)，1.27(3H，t，7.5，CH3)；δC(62.9MHz；CDCl3)15.8(CH3)，29.5(NCH2)，40.8(NCH3)，110.3(ArC)，112.4(ArC)，116.5(ArC)，129.1(ArC)，145.3(ArC)，150.9(ArC)。N，N-二甲基-間乙基-對(duì)苯二胺二鹽酸鹽向250cm3圓底燒瓶中加入N，N-二甲基-間乙基苯胺(4.68g，31.3mmol)、水(100cm3)和鹽酸(8.5cm3，37％)，該溶液冷卻到5℃。然后向該苯胺混合物中逐滴加入亞硝酸鈉(2.46g，3.57mmol)的水(80cm3)溶液，室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入鐵(Fe)屑(5.24g，94mmol)和鹽酸(8.5cm3，37％)，所得混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。過濾該懸浮液，用碳酸氫鈉溶液將濾液的pH調(diào)整到7，然后萃取到乙酸乙酯(3x50cm3)中。合并萃出物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾濃縮，得到棕色油狀物。將該油狀物溶解在乙醇(100cm3)和乙醚(80cm3)中，小心加入鹽酸(7cm3，37％)得到標(biāo)題化合物(7.42g，72％)，為淡褐色固體。vmax(KBr)/cm-12976(CH)，2894(CH)，2859(CH)，2753(CH)，1583(C＝N)，1508(CH)，1486(CH)，1459(CH)，1183(CH)；δH(250MHz；D2O)7.66(1H，s，ArH)，7.56(2H，s，ArH)，3.29(6H，s，NCH3)，2.74(2H，q，7.5，CH2)，1.25(3H，t，7.5，CH3)；δC(62.9MHz；CDCl3)15.5(CH3)25.6(NCH2)，48.9(NCH3)，122.1(ArC)，124.6(ArC)，128.1(ArC)，132.6(ArC)，143.3(ArC)，144.9(ArC)。1，9-二乙基甲基锍氯化物將N，N-二甲基-間乙基-對(duì)苯二胺二鹽酸鹽(1.3g，5.5mmol)溶解在水(50cm3)中，然后將該溶液的pH值調(diào)整到pH1.6。接著向該粉色溶液中逐份加入硫化鈉>60％(0.71g，5.5mmol)。所得懸浮液中加入氯化鐵(III)水溶液(2.23g，8.2mmol，在50cm3水中的溶液)，立即發(fā)生顏色變化，變?yōu)樽仙?。然后向該溶液中充?小時(shí)，再加入第二份氯化鐵(III)溶液(2.23g，8.2mmol，在50cm3水中的溶液)。將該溶液冷卻到5℃，過濾，用水洗滌沉淀物。向?yàn)V液中加入氯化鈉(50g)，攪拌溶液10分鐘，隨著產(chǎn)物鹽析，顏色變?yōu)榧t/紫色。過濾該懸浮液，將固體溶解在二氯甲烷(100cm3)和甲醇(10cm3)中，然后經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾濃縮，得到綠色固體狀的標(biāo)題化合物(0.15g，15％)。vmax(KBr)/cm-13408(CH)，2613(CH)，1606(C＝N)，1399(CH)，1316(CH)；δH(250MHz；D2O)6.55(2H，s，ArH)，6.23(2H，s，ArH)，2.92(12H，s，NCH3)，2.56(4H，q，7.5，CH2)，0.99(6H，t，7.5，CH3)；(ESI)，340.4(100％，[M-Cl]+)。任選地，進(jìn)行快速柱色譜除去氯化鐵殘余物，洗脫液為10％甲醇90％二氯甲烷，利用硅膠40-63μ合成41，9-二甲基-乙基-锍氯化物(DMETC)將N，N-二乙基-3-甲基對(duì)苯二胺二鹽酸鹽(10.74g，50mmol)溶解在水(400cm3)中，將pH調(diào)整到1.6，然后加入硫化鈉(>60％)(3.90g，50mmol)。加入氯化鐵(III)(20.28g，75mmol)的水溶液(175cm3)，顏色立即發(fā)生變化，從黃色變?yōu)樯钏{(lán)色。向混合物中充氣1小時(shí)，然后加入第二等份氯化鐵(III)水溶液(20.28g，75mmol，在175cm3中的溶液)。將溶液冷卻到5℃，維持在該溫度1小時(shí)，然后過濾。濾液中加入氯化鈉(200g)，過濾，得到藍(lán)/紫色固體狀的粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物固體用柱色譜純化(洗脫液為10％meOH，90％DCM，利用40-63μ)得到標(biāo)題化合物(0.80g，4％)，為綠/紫色固體。vmax(KBr)/cm-12971(CH)，2921(CH)，2865(CH)，1600(C＝N)，1412(CH)，1326(CH)；δH(250MHz；D2O)6.62(2H，s，ArH)，6.39(2H，s，ArH)，3.30(8H，q，NCH2)，1.89(6H，s，ArCH3)，1.09(12H，t，CH3)；δC(62.9MHz；D2O)12.6(CH3)，18.0(CH3)，46.2(NCH2)，103.6(ArC)，117.1(ArC)，132.3(ArC)，133.9(ArC)，147.3(ArC)，151.9(ArC)；m/z(ESI)368.1(100％，[M-Cl]+)。合成51，9-二乙基-乙基-锍氯化物(DEETC)N，N-二乙基-間乙基苯胺向100cm3圓底燒瓶中加入3-乙基苯胺(5.0g，41.3mmol)、乙醇(7.5cm3)、碳酸鈉(5.9g，55.7mmol)。逐滴加入碘乙烷(17.38g，111.4mmol)。接著將混合物在45℃加熱12小時(shí)，然后冷卻到室溫，加入水(50cm3)。將該混合物萃取到乙醚(3x50cm3)中，萃出物用硫酸鎂干燥，過濾濃縮，得到標(biāo)題化合物(7.03g，96％)，為淺黃色油狀物。δH(250MHz；CDCl3)7.20(1H，dd，9，7.25，ArH)，6.60(3H，m，ArH)，3.43(4H，q，7，NCH2)，2.69(2H，q，7.25，CH2)，1.32(3H，t，7.5，CH3)，1.23(6H，t，7，CH3)；δC(62.9MHz；CDCl3)12.7(CH3)，15.8(CH3)，29.5(CH2)，44.4(NCH3)，109.4(ArC)，111.4(ArC)，115.1(ArC)，129.2(ArC)，145.4(ArC)，147.9(ArC)。N，N-二乙基-間乙基-對(duì)苯二胺二鹽酸鹽向250cm3圓底燒瓶中加入N，N-二乙基-間乙基苯胺(5g，28.2mmol)、水(50cm3)和鹽酸(9cm3，37％)，將該溶液冷卻到5℃。然后向該苯胺混合物中逐滴加入亞硝酸鈉(2.14g，31.0mmol)的水(20cm3)溶液，低溫?cái)嚢?小時(shí)。加入鐵(Fe)屑(4.72g，84.6mmol)和鹽酸(9cm3，37％)，將混合物在低于30℃攪拌2小時(shí)。過濾懸浮液，濾液的pH值用碳酸氫鈉調(diào)整到pH7，然后萃取到乙酸乙酯(3x50cm3)中。合并的萃出物用硫酸鎂干燥，過濾濃縮，得到棕色油狀物。用柱色譜純化該粗品油狀物(洗脫液為乙酸乙酯，利用硅膠40-63μ)得到所述苯二胺(2.2g，41％)，為棕色油狀物。將該油溶解在乙醚(50cm3)中，加入鹽酸(2.5cm3，37％)，濃縮該溶液得到標(biāo)題化合物(2.76g，41％)，為淡棕色固體。δH(250MHz；D2O)7.50(3H，m，ArH)，3.59(4H，q，7.25，NCH2)，2.69(2H，q，7.5，CH2)，1.20(3H，t，7.5，CH3)，1.03(6H，t，7.25，CH3)；δC(62.9MHz；D2O)12.1(CH3)，15.5(CH3)，25.5(CH2)，56.3(NCH2)，123.9(ArC)，126.0(ArC)，127.9(ArC)，133.1(ArC)，139.4(ArC)，143.3(ArC)。1，9-二乙基乙基锍氯化物N，N-二乙基-間乙基-對(duì)苯二胺二鹽酸鹽(2g，7.5mmol)溶解在水(75cm3)中，并將所得溶液的pH值調(diào)整到pH1.6。然后向所得粉色溶液中逐份加入硫化鈉(>60％)(1.35g，10.4mmol)。向懸浮液中加入氯化鐵(III)水溶液(4.22g，15.6mmol，在35cm3水中的溶液)，立即發(fā)生顏色變化，變?yōu)樽仙Ｈ缓笙蛟撊芤褐谐錃?小時(shí)，接著加入第二份氯化鐵(III)溶液(4.22g，15.6mmol，在35cm3水中的溶液)。將所得溶液冷卻到5℃，過濾，用水洗滌沉淀物。沉淀也用乙醇洗滌，并將隨后得到的乙醇濃縮得到粘稠紫色固體。向含水濾液中加入氯化鈉(50g)，所得溶液攪拌10分鐘，隨著產(chǎn)物鹽析，溶液的顏色變?yōu)榧t/紫色。過濾該懸浮液，并將固體溶解在二氯甲烷(100cm3)和甲醇(10cm3)中，然后經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾并與可溶于乙醇的產(chǎn)物濃縮，得到標(biāo)題化合物(0.06g，3％)，為紫色固體。δH(250MHz；D2O)6.73(2H，s，ArH)，6.48(2H，s，ArH)，3.45(8H，brdq，NCH2)，2.46(4H，q，7.5，CH2)，1.17(12H，brdt，CH3)，0.93(6H，t，7.5，CH3)；m/z(ESI)396.2(100％，[M-Cl]+)。任選地，進(jìn)行快速柱色譜以除去氯化鐵殘余物，洗脫液為10％甲醇90％二氯甲烷，利用硅膠40-63μ合成6乙基-锍氯化物·氯化鋅的復(fù)鹽(ETZ)將N，N-二乙基-對(duì)苯二胺(5.0g，30.4mmol)在H2O(100cm3)和H2SO4(濃的，‘98％’，1cm3)中的攪拌混合物用非還原性ZnCl2溶液(ZnCl2，7.60g，55mmol，在15cm3水中的溶液，含100mg的Na2Cr2O7·2H2O)處理，得到淡紅色反應(yīng)混合物。加入Al2(SO4)3·16H2O溶液(5.80g，9.2mmol，在10cm3H2O中的溶液)、Na2S2O3·5H2O溶液(8.0g，32.2mmol，在10cm3H2O中的溶液)和隨后加入三分之一的Na2Cr2O7·2H2O(8.7g，29.2mmol，在15cm3H2O中的溶液)溶液，接著溫度迅速升高到40℃。加入N，N-二乙基苯胺(3.0g，20.1mmol，在濃HCl，4cm3中的溶液)，然后加入剩余的Na2Cr2O7·2H2O溶液。觀察到深綠色沉淀生成。溫度迅速升高到75℃，之后加入經(jīng)活化的MnO2懸浮液(3.80g，44.7mmol，在5cm3H2O中的懸浮液)。溫度升高到85℃，并在該溫度保持?jǐn)嚢?0分鐘。觀察藍(lán)色溶液生成，并伴有沉淀。將反應(yīng)混合物冷卻到50℃并緩慢加入H2SO4(濃，11cm3)。將反應(yīng)進(jìn)一步冷卻到20℃，真空過濾以回收沉淀，然后用鹽水(飽和食鹽水)洗滌該沉淀。將該黑色固體重新溶解在100℃的H2O(250cm3)中，冷卻，然后真空過濾以除去不溶物。濾液用ZnCl2(4g)和NaCl(23g)處理，置于冷凍裝置中16小時(shí)。之后真空過濾回收所得沉淀物，用鹽水(30cm3)洗滌，真空箱干燥3小時(shí)，得到標(biāo)題化合物(5.7g，71％)，為銹紅色粉末。δH(250MHz，D2O)1.20(12H，brt，CH3)，3.50(8H，brq，CH2)，6.80(2H，s，ArH)，7.05(2H，brd，ArH)和7.30(2H，brd，ArH)。參見，例如Interscience(London，UK)出版的Fierz-DavidandBlangley，1949，“F.OxazineandThiazineDyes，”inFundamentalProcessesofDyechemistry，第308-314頁。合成7甲基-锍碘化物(MTI)將甲基-锍氯化物(2.00g，6.25mmol)溶解在水(50cm3)中，加入碘化鉀(1.56g，9.4mmol)，同時(shí)攪拌。有沉淀生成，并過濾，固體用沸水(50cm3)重結(jié)晶得到標(biāo)題化合物(1.98g，77％)，為微細(xì)綠色針狀物。δH(250MHz；DMSO)7.88(2H，brd，ArH)，7.49(4H，brs，ArH)，3.37(12H，s，CH3)。C16H18N3SI的分析值C，46.72；H，4.41；N，10.22；S，7.80；I，30，85；實(shí)測(cè)值C，46.30；H，4.21；N，10.14；S，7.86；I，29.34。合成8甲基-锍碘化物·碘化氫的混鹽(MTI.HI)將甲基-锍碘化物(0.50g，1.22mmol)溶解在甲醇(20cm3)中，加入碘甲烷(1.90g，13.37mmol)，同時(shí)攪拌。將所得混合物加熱回流18小時(shí)，之后加入另外的碘甲烷(0.42g，6.69mmol)，混合物再次加熱回流并攪拌8小時(shí)。將所得混合物冷卻到室溫，得到固體，該固體經(jīng)過濾，用甲醇洗滌，得到標(biāo)題化合物(0.30g，46％)，為銅綠色(bronzegreen)固體。δH(250MHz；DMSO)7.82(2H，d，J＝8.5，ArH)，7.42(4H，s，ArH)，3.34(12H，s，CH3).δC(62.9MHz；DMSO)153.8(ArC)，137.9(ArC)，134.9(ArC)，133.5(ArC)，119.1(ArC)，118.8(ArC)，106.9(ArC)，106.6(ArC)，41.1(NCH3)。合成9乙基-锍碘化物(ETI)用氫氧化鈉水溶液(10％)將N，N-二乙基-對(duì)苯二胺(10.0g，61mmol)在鹽酸水溶液(0.5m，200cm3)中的攪拌混合物的pH值調(diào)整到pH2。將該二胺溶液冷卻到5℃，之后加入Na2S2O3·5H2O水溶液(16.65g，67mmol，在20cm3H2O中的溶液)。歷時(shí)15分鐘，將Na2Cr2O7·2H2O水溶液(7.27g，24mmol，在35cm3H2O中的溶液)逐滴加到上述混合物中，得到黑色懸浮液。將該懸浮液在5℃攪拌1小時(shí)(pH＝8.07，T＝3.7℃)。將N，N-二乙基苯胺(8.25g，61mmol)、H2SO4(6g)和水(10cm3)的溶液冷卻到5℃，之后加到所述懸浮液中。然后歷時(shí)20分鐘向混合物中逐滴加入Na2Cr2O7·2H2O水溶液(19.09g，64mmol，在50cm3H2O中的溶液)，得到粘稠的深綠色懸浮液。該混合物在5℃攪拌2小時(shí)(pH＝6.75，T＝6℃)，過濾。得到的紫綠色固體用水(2x50cm3)洗。將該固體漿化在鹽酸水溶液(300cm3，pH2)中，得到懸浮液，該懸浮液在22℃時(shí)的pH＝6.37。向該懸浮液中加入CuSO4(1.52g，6.1mmol)，所得混合物加熱到90℃，形成深藍(lán)色溶液。在該溫度攪拌1小時(shí)后，將混合物冷卻到25℃，過濾。固體用水(2x50cm3)洗滌，濾液的pH值用鹽酸(5M)從pH6.33調(diào)整到pH2.00，T＝25℃。將該深藍(lán)色溶液加熱到80℃，加入碘化鉀(14g)，一經(jīng)冷卻就有橙紫色沉淀析出。過濾得到紫色粉末(8.8g，31％)，該粉末經(jīng)熱乙醇(400cm3)重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為微細(xì)紫色針狀物。Mp211℃；vmax(KBr)/cm-13574(CH)，3484(CH)，3028(CH)，2965(CH)，1662(C＝C)，1539(CH)，1474(CH)，1346(CH)；δC(62.9MHz，CDCl3)1.33(12H，t，7，CH3)，3.72(8H，q，7，NCH2)，7.23(2H，d，9.75，ArH)，7.41(2H，s，ArH)，7.83(2H，d，9.75，ArH)；δH(62.9MHz，CDCl3)152.4，138.8，135.7，135.2，118.3，106.4，46.8，13.2。合成10乙基-锍碘化物·碘化氫的混鹽(ETI.HI)將乙基-锍碘化物(2.00g，4.28mmol)溶解在乙醇(100cm3)中，加入碘乙烷(27.35g，175mmol)，同時(shí)攪拌。將所得混合物加熱回流18小時(shí)，然后冷卻到室溫，得到沉淀。該沉淀經(jīng)過濾、乙醇洗滌得到標(biāo)題化合物(1.02g，40％)，為青銅色固體。δH(250MHz；D2O)7.90(2H，brd，ArH)，7.42(4H，s，ArH)，2.45(8H，brq，NCH2)，1.23(12H，brt，CH3)。合成11乙基-锍硝酸鹽(ETN)用氫氧化鈉水溶液(10％)將N，N-二乙基-對(duì)苯二胺(10.0g，61mmol)在鹽酸水溶液(0.5m，200cm3)中的攪拌混合物的pH值調(diào)整到pH2。將該二胺溶液冷卻到5℃，之后加入Na2S2O3·5H2O水溶液(16.65g，67mmol，在20cm3H2O中的溶液)。歷時(shí)15分鐘內(nèi)向該混合物中逐滴加入Na2Cr2O7·2H2O水溶液(7.27g，24mmol，在35cm3H2O中的溶液)得到黑色懸浮液。將該懸浮液在5℃攪拌1小時(shí)(pH＝8.07，T＝3.7℃)。將N，N-二乙基苯胺(8.25g，61mmol)、H2SO4(6g)和水(10cm3)溶液冷卻到5℃，然后加入到上述懸浮液中。歷時(shí)20分鐘，向所得混合物中逐滴加入Na2Cr2O7·2H2O(19.09g，64mmol，在50cm3H2O中的溶液)溶液，得到粘稠的深綠色懸浮液。將該混合物在5℃攪拌2小時(shí)(pH＝6.75，T＝6℃)，過濾。得到的紫綠色固體用水洗(2x50cm3)。將所得固體漿化在鹽酸水溶液(300cm3，pH2)中，得到懸浮液，其22℃時(shí)的pH＝6.37。向該懸浮液中加入CuSO4(1.52g，6.1mmol)，所得混合物加熱到90℃，此時(shí)有深藍(lán)色溶液形成。在該溫度攪拌1小時(shí)后，將該混合物冷卻到25℃，然后過濾。所得固體用水洗(2x50cm3)，濾液用鹽酸(5m)從pH6.33調(diào)節(jié)到pH2.00，T＝25℃。將該深藍(lán)色溶液加熱到80℃，加入硝酸鈉(50g)，并使其在輕微攪拌下緩慢冷卻到25℃。所得產(chǎn)物經(jīng)過濾為綠色針狀物(6.80g，28％)。δH(250MHz，CDCl3)1.36(12H，t，7，CH3)，3.72(8H，q，7，NCH2)，7.23(2H，d，9.5，ArH)，7.39(2H，s，ArH)，7.89(2H，d，9.5，ArH)；δH(62.9MHz，CDCl3)152.5，138.8，135.7，135.6，118.1，106.4，46.6，12.9。生物學(xué)研究方法α-突觸核蛋白的純化構(gòu)建了兩種質(zhì)粒，以在大腸埃希桿菌(E.coli)中表達(dá)α-突觸核蛋白。α-突觸核蛋白的核心聚集域(氨基酸31-109)用N-端多組氨酸標(biāo)記表達(dá)(tsyn)，這允許在Ni-螯合柱上對(duì)其進(jìn)行純化。全長α-突觸核蛋白(syn)沒有用標(biāo)記表達(dá)，但是在DEAESepharose上通過離子交換色譜進(jìn)行純化，并且在某些情況下，隨后在CM-Sepharose進(jìn)行純化。對(duì)于這兩種蛋白質(zhì)，首先通過采用30-50％硫酸銨餾分，使細(xì)菌提取物富集。針對(duì)pH9.5的20mMcAPS或20mMTris.HCl、pH7.5、50mMNaCl，對(duì)從柱上洗脫出來的蛋白質(zhì)進(jìn)行透析(詳見表1)，并在-70℃儲(chǔ)存。對(duì)細(xì)絲組裝(filamentassembly)的熒光分析將α-突觸核蛋白(tsyn或fsyn)在37℃培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間如附圖中圖標(biāo)所示，并伴隨攪拌以誘導(dǎo)原纖維形成。在某些情況下，加入50μg/ml肝素以促進(jìn)原纖維形成。然后用水加上1μM硫黃素T(thioflavineT)或櫻草黃(primulin)(在某些情況時(shí)為0.2或5μM)，將10μl樣品稀釋至100μl。在VariancareyEclipse熒光分光光度計(jì)中的96孔板上測(cè)量熒光激發(fā)光譜，發(fā)射波長為480nm。用不含tsyn測(cè)得的信號(hào)和從該光譜測(cè)得的信號(hào)峰校準(zhǔn)激發(fā)光譜。將數(shù)據(jù)歸一化到?jīng)]有化合物情況下的測(cè)量值，并且從歸一化的熒光對(duì)化合物濃度圖中測(cè)得的P50值。對(duì)突觸核蛋白-突觸核蛋白結(jié)合的ELISA分析利用固相分析來測(cè)量α-突觸核蛋白的自結(jié)合(self-association)。將稀釋在碳酸鹽緩沖液中的tsyn(pH8.5)結(jié)合到分析板上，加入在水相中的全長α-突觸核蛋白(fsyn)。該水相結(jié)合緩沖液為50mM磷酸鈉，pH6.0、20mMNaCl、0.05％Tween-20、1％魚鱗膠(fishskingelatine)。利用購得的不識(shí)別tsyn的抗體(211)，檢測(cè)結(jié)合的fsyn。實(shí)施例1.α-突觸核蛋白的純化圖1顯示了tsyn的純化樣品，樣品用SDS-PAGE分析，并用考馬斯藍(lán)染色。Ni-親和柱能實(shí)現(xiàn)非常有效的純化；最終經(jīng)純化的蛋白(圖1中的tsyn-8)的純度大于95％，從750ml細(xì)菌培養(yǎng)物中得到44mg蛋白質(zhì)。圖2顯示了在DEAE-Sepharose上對(duì)fsyn進(jìn)行純化。利用該方法得到的最終蛋白質(zhì)不是很純。(圖2中的fsyn-9)。圖3顯示了將fsyn在DEAE-Sepharose純化，然后在CM-Sepharose上純化。利用這種方法得到的蛋白質(zhì)的純度>95％，但是收率很低(與只用DEAE-Sepharose得到的85mg相比，該方法得到了12mg蛋白質(zhì))。在以下所述的分析中，采用了若干不同的α-突觸核蛋白制劑，對(duì)它們純化的簡要描述總結(jié)在表1中。表1.突觸核蛋白制劑的純化細(xì)節(jié)通過熱處理制備的蛋白質(zhì)在該分析中是失活的。通過DEAE離子交換色譜制備的蛋白質(zhì)是有活性的。因此，在CM-或SP-Sepharose上進(jìn)行了進(jìn)一步的純化步驟。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CM-Sepharose產(chǎn)生了最干凈的制劑，但比SP-凝膠的收率低。比較了這些制劑的結(jié)合活性(參見實(shí)施例9)。表1總結(jié)了用于這些試驗(yàn)的突觸核蛋白制劑。實(shí)施例2.通過熒光對(duì)突觸核蛋白組裝進(jìn)行分析已經(jīng)報(bào)道了，α-突觸核蛋白的組裝和原纖維形成能增強(qiáng)硫黃素T的熒光。我們測(cè)試了α-突觸核蛋白對(duì)硫黃素T和櫻草黃的熒光的影響。使用和不使用50μg/ml肝素，在37℃培育所述蛋白，從而誘導(dǎo)了所述蛋白組裝；樣品在不同時(shí)間點(diǎn)用1μM硫黃素T或櫻草黃進(jìn)行分析。圖4顯示了tsyn和fsyn制劑的組裝時(shí)程。在不采用肝素的情況下，針對(duì)兩種蛋白質(zhì)出現(xiàn)的硫黃素T熒光都非常少(圖4A，4B)。在不采用肝素的情況下，tsyn蛋白在第20-30小時(shí)期間出現(xiàn)了櫻草黃信號(hào)；在采用肝素的情況下，櫻草黃信號(hào)的出現(xiàn)沒有停滯期，但最終的熒光強(qiáng)度與不采用肝素的情況相似(圖4A)。對(duì)tsyn而言，肝素刺激了硫黃素T信號(hào)的出現(xiàn)，強(qiáng)度與使用櫻草黃時(shí)相似(圖4A)。對(duì)于fsyn而言，在沒有肝素的情況下，硫黃素T和櫻草黃信號(hào)的出現(xiàn)都非常慢。在存在肝素的情況下，對(duì)這兩種熒光團(tuán)而言均出現(xiàn)了信號(hào)，但是tsyn中觀察到了更長的停滯期(圖4B)。櫻草黃信號(hào)出現(xiàn)的停滯期比硫黃素T出現(xiàn)的停滯期短，但是硫黃素T信號(hào)的最終強(qiáng)度比櫻草黃信號(hào)的強(qiáng)度大(圖4B)。櫻草黃和硫黃素T信號(hào)上的不同說明了，這兩種熒光團(tuán)檢測(cè)突觸核蛋白的不同組裝狀態(tài)，這與下述觀點(diǎn)一致，該觀點(diǎn)認(rèn)為櫻草黃檢測(cè)原纖維形成前的組裝的較早前體狀態(tài)，而原纖維形成物是由硫黃素T檢測(cè)的。實(shí)施例3.由MTC和ETC分析原纖維破裂(fibrildisruption)使用熒光效果分析化合物MTC和ETC對(duì)組裝的α-突觸核蛋白的影響。圖5顯示了MTC和ETC對(duì)經(jīng)組裝的tsyn誘導(dǎo)的硫黃素T或櫻草黃熒光信號(hào)的影響，圖上的熒光峰值顯示為圖7A所示的化合物濃度的函數(shù)。圖6顯示了MTC和ETC對(duì)由組裝的fsyn誘導(dǎo)的硫黃素T或櫻草黃熒光信號(hào)的影響，圖上的熒光峰值顯示為圖7B所示的化合物濃度的函數(shù)。從圖7曲線上測(cè)得的P50值總結(jié)在表2中。表2.由MTC和ETC抑制α-突觸核蛋白-依賴的硫黃素T或櫻草黃熒光的P50值化合物對(duì)硫黃素T和櫻草黃熒光的影響也可能是由于對(duì)熒光配體的競爭引起的，而不是原纖維破裂引起的。為了驗(yàn)證這一觀點(diǎn)是否正確，以三種不同濃度的熒光團(tuán)進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，因?yàn)槿绻撚绊懯怯捎诟偁幍脑颍瑒tP50僅依賴于熒光團(tuán)濃度。一個(gè)實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)顯示在圖8中，所有實(shí)驗(yàn)的平均值顯示在表3中。熒光團(tuán)濃度25-倍內(nèi)變化時(shí)測(cè)得的P50值沒有明顯區(qū)別，這說明化合物的影響是由于原纖維破裂引起的。表3.通過MTC和ETC抑制α-突觸核蛋白-依賴的硫黃素T或櫻草黃熒光的P50值。熒光團(tuán)濃度的影響。實(shí)施例4.化合物對(duì)體外α-突觸核蛋白質(zhì)聚集體的組裝的影響。MTC不僅能影響組裝的α-突觸核蛋白質(zhì)聚集體，其也能抑制α-突觸核蛋白組裝成聚集體，如櫻草黃結(jié)合競爭所測(cè)定的那樣。已經(jīng)確定了從tsyn和fsyn組裝成聚集體的最佳條件，并且MTC的抑制效果如圖所示(新圖A)。使tsyn(1mg/ml，在20mMTris.HCl，pH7.5+50μg/ml肝素中)在37℃組裝24小時(shí)。MTC在濃度高于5μM(○，空心圓點(diǎn))時(shí)能抑制tsyn組裝。使fsyn在相同條件下組裝，不同的是fsyn的濃度為2mg/ml，并且培養(yǎng)了120小時(shí)。MTC對(duì)fsyn抑制作用要比對(duì)tsyn的抑制作用強(qiáng)，對(duì)前者(●，實(shí)心圓點(diǎn))而言，在0.05μM發(fā)生抑制。MTC和ETC對(duì)α-突觸核蛋白聚集的抑制(fsyn；如上所述利用櫻草黃分析)與DEMTC和DEETC對(duì)α-突觸核蛋白聚集所觀察的抑制作用相當(dāng)或前者比后者更強(qiáng)。所有這些化合物在濃度為50μM時(shí)完全抑制了組裝。表4.利用fsyn研究二氨基吩噻嗪類化合物對(duì)α-突觸核蛋白聚集的影響也使用硫黃素T來監(jiān)測(cè)fsyn組裝。硫黃素T信號(hào)的發(fā)出比櫻草黃信號(hào)的發(fā)出要慢，但是能達(dá)到一個(gè)更高的水平，并且看上去其顯示了原纖維的延長而不是聚集體的形成。在組裝的后期(第160小時(shí))，當(dāng)硫黃素T信號(hào)達(dá)到一個(gè)穩(wěn)態(tài)，所述硫黃素T信號(hào)對(duì)MTC的抑制比所述櫻草黃信號(hào)對(duì)MTC的抑制更敏感，0.05μM時(shí)能觀察到明顯效果。這顯示在圖12中。實(shí)施例5.利用固相ELISA分析實(shí)驗(yàn)對(duì)α-突觸核蛋白結(jié)合進(jìn)行分析在結(jié)合分析中也使用這兩種α-突觸核蛋白。將tsyn結(jié)合在固相中，將全長fsyn加到水相中。使用對(duì)抗不識(shí)別tsyn的α-突觸核蛋白中的表位的抗體，對(duì)結(jié)合的fsyn進(jìn)行量化。圖9顯示了tsyn-13與fsyn-20結(jié)合的水相結(jié)合曲線和固相結(jié)合曲線。fsyn-20的結(jié)合穩(wěn)態(tài)在約5μM，tsyn-13的結(jié)合穩(wěn)態(tài)在約2μM。這些濃度用于測(cè)試各種锍氯化物和黃酮對(duì)突觸核蛋白-突觸核蛋白結(jié)合的影響抑制曲線如圖10所示，從這些曲線計(jì)算的B50值總結(jié)在表4中。在結(jié)合分析中測(cè)試的所有黃酮化合物具有良好的抑制活性，而盡管大多數(shù)锍氯化物具有活性，即MTC、ETC、DMMTC、DEMTC、DMETC、DEETC、硫堇和托洛氯銨，但其它如天藍(lán)A和天藍(lán)B不具有活性。表5.抑制突觸核蛋白-突觸核蛋白結(jié)合的P50和B50值。P50如下測(cè)量使用1μg/ml、用在含有肝素(50μg/ml)的20μMTris.HCl(pH7.5)中的組裝tsyn-16，并且用兩種熒光團(tuán)，即硫黃素T或櫻草黃中的任意一種(1μM)進(jìn)行分析。B50如下測(cè)量使用1μMtsyn-16(固相)和5μMfsyn-20(水相)，并且利用含有20mMNaCl的50mM磷酸鈉緩沖液(pH6.0)。實(shí)施例6.對(duì)α-突觸核蛋白聚集的基于細(xì)胞的分析所述基于細(xì)胞的分析采用小鼠成神經(jīng)瘤細(xì)胞系NIE-115，該細(xì)胞系已經(jīng)經(jīng)工程化來表達(dá)全長α-突觸核蛋白，該蛋白結(jié)合N端信號(hào)序列(SSfsyn)以靶向蛋白質(zhì)至膜上(參見WO02/059150)。當(dāng)細(xì)胞用雙丁酰環(huán)化腺苷酸(dibutyrylcyclicAMP，dbcAMP)(1mM)分化時(shí)，α-突觸核蛋白的表達(dá)增強(qiáng)。通過免疫印跡利用各種抗-α-突觸核蛋白抗體來檢測(cè)α-突觸核蛋白。這些包括mAb42(BDBiosciencescatNo.610787)，其識(shí)別tsyn內(nèi)的表位(α-突觸核蛋白的殘基31-109)。除了α-突觸核蛋白，mAb42也與高分子量蛋白發(fā)生非特異性反應(yīng)(該蛋白不能被其它抗-α-突觸核蛋白抗體識(shí)別)。這種蛋白也用于對(duì)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行評(píng)估，因?yàn)榧?xì)胞中該蛋白水平與細(xì)胞密度相關(guān)。用這些細(xì)胞對(duì)藥物進(jìn)行測(cè)試，通過測(cè)定藥物濃度來計(jì)算抑制活性(EC50)，其中α-突觸核蛋白對(duì)非特異帶的比率降到只用dbcAMP處理的細(xì)胞的比率的50％。改變加入dbcAMP的時(shí)間和在收集細(xì)胞前使細(xì)胞置于藥物+dbcAMP存在下的環(huán)境。典型的結(jié)果顯示在針對(duì)DEETC的圖13中。當(dāng)將細(xì)胞置于MTC和dbcAMP存在下的環(huán)境中多于2天的時(shí)間時(shí)，MTC是具有抑制活性的。最有效的化合物是DEETC，其能以nM級(jí)進(jìn)行抑制；DEMTC、DMETC和ETC也表現(xiàn)出抑制活性(表6)。黃酮、鼠李素也是具有抑制活性的。表6.吩噻嗪化合物對(duì)FSyn在NIE細(xì)胞中表達(dá)的抑制，所述NIE細(xì)胞經(jīng)dbcAMP分化。實(shí)施例7.α-突觸核蛋白在細(xì)胞基分析中的截短和聚集當(dāng)DH60.21NIE細(xì)胞用dbcAMP分化后，SSFsyn的表達(dá)增加，如利用mAb42(識(shí)別α-突觸核蛋白的核心)或mAb211(識(shí)別α-突觸核蛋白的C-端表位)檢測(cè)的那樣。此外，還產(chǎn)生了兩種約15和16kDa的低分子量帶。后者可能對(duì)應(yīng)于缺少信號(hào)序列的Fsyn。而這兩種蛋白中分子量較大的一個(gè)蛋白可通過這兩種抗體都能檢測(cè)，使用mAb211，15kDa的帶最多僅僅被微弱地檢測(cè)出來。典型的實(shí)施例顯示在圖14中。這說明，這是C-端截短的蛋白質(zhì)。還觀察到另一種流動(dòng)性明顯大于FSyn的22kDa帶，但僅利用mAb42，而不是利用mAb211(圖14)。22-kDa對(duì)SSFsyn帶的比率根據(jù)采用的抗體不同而明顯不同(p<0.001；表7)。這說明存在N-和C-端都被截短的聚集的突觸核蛋白。也在用SSFsyn轉(zhuǎn)染的SH-SY5Y成神經(jīng)瘤細(xì)胞中觀察到該22-kDa帶。表7.如對(duì)c-端mAb211缺少反應(yīng)性所證實(shí)的，細(xì)胞中存在聚集的和截短的α-突觸核蛋白。當(dāng)表達(dá)SSFsyn的細(xì)胞用熒光顯微鏡觀察時(shí)，能觀察到大量表達(dá)，包括顆粒樣物質(zhì)，這說明存在聚集蛋白(圖15)。而且，在細(xì)胞中觀察到的聚集體同時(shí)被櫻草黃識(shí)別出來，櫻草黃是結(jié)合蛋白質(zhì)聚集體的熒光團(tuán)(圖16)。這肯定了下述研究，這些研究表明α-突觸核蛋白聚集在SH-SY5Y成神經(jīng)瘤細(xì)胞分化后發(fā)生(Hasegawa等人，2004；BrainRes.101351-59)。實(shí)施例8.MTC對(duì)體外α-突觸核蛋白低聚物組裝和α-突觸核蛋白結(jié)合的影響參考表5突觸核蛋白分析中P50和B50的測(cè)量結(jié)果，可以看出盡管某些黃酮化合物具有低的B50(與锍氯化物相當(dāng)?shù)腂50)，但是當(dāng)在突觸核蛋白分析中锍氯化物的P50通常比黃酮的P50低。這說明，盡管這兩類化合物在抑制突觸核蛋白自聚集反應(yīng)中是有效的，但僅锍化合物具有破解預(yù)形成的聚集體的能力。作為對(duì)MTC活性的進(jìn)一步分析，在tsyn組裝的時(shí)程中檢測(cè)其效果(圖17)。如圖17所示，在不存在MTC的情況下，在組裝前的約2小時(shí)有一個(gè)滯后期。熒光信號(hào)峰出現(xiàn)在第4-5小時(shí)，然后在20小時(shí)內(nèi)逐漸減弱。熒光出現(xiàn)的時(shí)程與兩種熒光團(tuán)熒光出現(xiàn)的時(shí)程相似。在低濃度MTC(0.05μM)存在的情況下，組裝開始之前的滯后期減少到1小時(shí)，并且24小時(shí)后的最終熒光信號(hào)更強(qiáng)。特別地，在使用櫻草黃時(shí)，對(duì)應(yīng)于櫻草黃的最大熒光強(qiáng)于硫黃素T。在0.5μMMTC存在的情況下，組裝比對(duì)照慢，但最終熒光水平強(qiáng)于對(duì)照。使用5μMMTC時(shí)，最初的4-5小時(shí)時(shí)程內(nèi)的組裝與對(duì)照相似，但是之后熒光更快地減弱，盡管最終熒光水平與對(duì)照相似。使用MTC50μM時(shí)，在實(shí)驗(yàn)的時(shí)程內(nèi)沒有組裝。圖17的數(shù)據(jù)說明MTC對(duì)突觸核蛋白的組裝具有復(fù)雜的效果；在較低濃度時(shí)(摩爾比，突觸核蛋白:MTC為2000:1)，MTC在一定程度上顯然刺激組裝，而在較高濃度時(shí)(最大摩爾比，突觸核蛋白:MTC為2:1)，其完全抑制組裝。盡管不受理論束縛，但是可以總結(jié)出，MTC在較低摩爾比率時(shí)提供配體交聯(lián)效果，該摩爾比率不足以實(shí)現(xiàn)對(duì)聚集的抑制，但是能使化合物與不止一種的突觸核蛋白分子結(jié)合，從而促進(jìn)聚集。實(shí)施例9.α-突觸核蛋白固相結(jié)合分析的優(yōu)化圖18顯示了實(shí)施例1所描述的三種不同突觸核蛋白制劑的結(jié)合曲線。利用syn-10，顯示了最好的結(jié)合，syn-10是最純的制劑；利用syn-14，顯示了最差的結(jié)合，syn-14是純度最差的制劑。這說明，第二個(gè)純化步驟能除去抑制結(jié)合的雜質(zhì)，并且盡管第二CM-Sepharose步驟會(huì)降低收率，但所述蛋白質(zhì)應(yīng)該用這一步驟純化。在所測(cè)試的三種制劑中，Syn-10給出了最好的結(jié)合，但是最大結(jié)合程度仍然很低。對(duì)Tsyn的兩種不同的固相制劑進(jìn)行了測(cè)試，結(jié)果表明沒有差別，并且采用的tsyn濃度表明是最佳的(沒有給出數(shù)據(jù))。因此，測(cè)試了對(duì)水相步驟的不同緩沖條件。圖19A說明緩沖液，即HEPES和MES完全破壞了syn的結(jié)合。圖19B表明pH7.0的Tris緩沖液比以前使用的pH7.5的Tris緩沖液實(shí)現(xiàn)了更好的結(jié)合。pH8.0的Tris的結(jié)合較差，因此pH越低對(duì)syn結(jié)合越有利。既然Tris不能用來在較低的pH進(jìn)行緩沖，也嘗試了使用磷酸鹽緩沖液，在pH6.5進(jìn)行測(cè)試。pH6.5的磷酸鹽比pH7.0的磷酸鹽實(shí)現(xiàn)了更好結(jié)合。盡管這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)在結(jié)合方面存在差異，但這些結(jié)果表明緩沖液的化學(xué)性質(zhì)以及pH會(huì)影響syn結(jié)合，最好的緩沖液為pH7.0的Tris。圖18的數(shù)據(jù)表明，對(duì)用于固相結(jié)合實(shí)驗(yàn)的syn而言，最好的純化方法是DEAE-色譜，然后進(jìn)行CM-色譜。經(jīng)該方法純化的其它3種Syn制劑也在Tris(pH7.0)緩沖液中進(jìn)行了測(cè)試(圖20)。結(jié)果說明，制劑之間的結(jié)合特性有一定變化。在進(jìn)一步的方法中，將所述蛋白質(zhì)對(duì)高pH值的緩沖液(syn-20)進(jìn)行了透析。圖21中，將該蛋白質(zhì)的結(jié)合與syn-19進(jìn)行了比較。2μM后結(jié)合的減弱是由于高非特異性結(jié)合引起的，從結(jié)合中減去該值。Syn-20比syn-19顯示出了明顯更好的結(jié)合，這證實(shí)了透析緩沖液的變化。為了嘗試并且為了減少變化，也對(duì)較低pH值的磷酸鹽緩沖液進(jìn)行了研究。圖22A表明在磷酸鹽緩沖液pH6.0中分析的fsyn-20比在pH7.0的Tris或pH5.5的磷酸鹽中分析的fsyn-20得到了更好的結(jié)合。重要地，由于噪音(background)增強(qiáng)，因此在較高fsyn濃度時(shí)曲線沒有跌落。將另一種fsyn制劑(fsyn-22)(其也對(duì)高pH值的CAPS進(jìn)行了透析)在pH6.0的磷酸鹽緩沖液中進(jìn)行測(cè)試，得到與fsyn-20相似的結(jié)合(圖22B)。在固相抑制分析(實(shí)施例5)中，使用經(jīng)由最終高pH透析制備的、在pH6.0的磷酸鹽緩沖液中分析的Fsyn。參考文獻(xiàn)Galvin，J.E.，Uryu，K.，Lee，V.M.，和Trojanowski，J.Q.(1999)AxonpathologyinParkinson’sdiseaseandLewybodydementiahippocampuscontainsα-，β-，andγ-synuclein，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.96，13450-13455。Uversky，V.N.，Li，J.，Souillac，P.O.，Millett，I.S.，Doniach，S.，Jakes，R.，Goedert，M.，和Fink，A.L.(2002)BiophysicalpropertiesofthesynucleinsandtheirpropensitiestofibrillateInhibitionofα-synucleinassemblybyβ-andγ-synucleins，J.Biol.Chem.277，11970-11978。Park，J.Y.，和Lansbury，P.T.，Jr.(2003)β-Synucleininhibitsformationofα-synucleinprotofibrilsApossibletherapeuticstrategyagainstParkinson’sdisease，Biochemistry42，3696-3700。Hashimoto，M.，Rockenstein，E.，Mante，M.，Mallory，M.，和Masliah，E.(2001)β-SynucleininhibitsaggregationApossibleroleasananti-parkinsonianfactor，Neuron32，213-223。權(quán)利要求1.二氨基吩噻嗪化合物在制備用于抑制或逆轉(zhuǎn)突觸核蛋白聚集的藥物中的用途，其中所述化合物選自下述結(jié)構(gòu)式的化合物或其可藥用鹽、混鹽、水合物或溶劑化物其中，R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H；-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-OR；-SH；-SR；-NO2；-C(＝O)R；-C(＝O)OH；-C(＝O)OR；-C(＝O)NH2；-C(＝O)NHR；-C(＝O)NR2；-C(＝O)NRN1RN2；-NH2；-NHR；-NR2；-NRN1RN2；-NHC(＝O)H；-NRC(＝O)H；-NHC(＝O)R；-NRC(＝O)R；和-R；其中，各R獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；其中，在每個(gè)-NRN1RN2基團(tuán)中，獨(dú)立地，RN1和RN2與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)；并且其中，如果存在-NR3NAR3NA基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NA中R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；或者R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)；并且其中，如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；并且其中，如果存在-NR7NAR7NA基團(tuán)，則在每個(gè)-NR7NAR7NA基團(tuán)中R7NA和R7NB各自獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；或者R7NA和R7NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)；并且其中，如果存在＝NR7NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR7NC基團(tuán)中，R7NC獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；并且其中如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；并且其中，如果存在X-，則X-為一個(gè)或多個(gè)陰離子反離子，從而實(shí)現(xiàn)電中性。2.權(quán)利要求1所述的用途，其中所述化合物選自式(2)化合物或其可藥用鹽、混鹽、水合物和溶劑化物。3.權(quán)利要求1所述的用途，其中所述化合物選自式(3)化合物或其可藥用鹽、混鹽、水合物和溶劑化物。4.權(quán)利要求1所述的用途，其中所述化合物選自式(4)化合物或其可藥用鹽、混鹽、水合物和溶劑化物。5.權(quán)利要求1-4任一所述的用途，其中R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H；-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-OR；-C(＝O)OH；-C(＝O)OR；和-R。6.權(quán)利要求1-4任一所述的用途，其中R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H；-R。7.權(quán)利要求1-6任一所述的用途，其中R獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。8.權(quán)利要求1-6任一所述的用途，其中R獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；和經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基。9.權(quán)利要求1-8任一所述的用途，其中如果存在R上的取代基，則所述取代基獨(dú)立地選自-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-OR’；-SH；-SR’；-NO2；-C(＝O)R’；-C(＝O)OH；-C(＝O)OR’；-C(＝O)NH2；-C(＝O)NHR’；-C(＝O)NR’2；-C(＝O)NR’N1R’N2；-NH2；-NHR’；-NR’2；-NR’N1R’N2；-NHC(＝O)H；-NR’C(＝O)H；-NHC(＝O)R’；-NR’C(＝O)R’；和-R’；其中，各R’獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基；其中，在每個(gè)-NR’N1R’N2基團(tuán)中，獨(dú)立地，R’N1和R’N2與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。10.權(quán)利要求1-8任一所述的用途，其中如果存在R上的取代基，則所述取代基獨(dú)立地選自-F；-Cl；-Br；-I；-OH；-OR’；-C(＝O)OH；-C(＝O)OR’；和-R’。11.權(quán)利要求9或10所述的用途，其中各R’獨(dú)立地選自未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；未經(jīng)取代的C6-10碳芳基；未經(jīng)取代的C5-10雜芳基；和未經(jīng)取代的C6-10碳芳基-C1-4烷基。12.權(quán)利要求1-6任一所述的用途，其中各R獨(dú)立地選自-Me、-Et、-nPr和-iPr。13.權(quán)利要求1-4任一所述的用途，其中R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H、-Me、-Et、-nPr和-iPr。14.權(quán)利要求1-4任一所述的用途，其中R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H、-Me和-Et。15.權(quán)利要求1-4任一所述的用途，其中R1、R2、R4、R6、R8和R9各自獨(dú)立地選自-H和-Me。16.權(quán)利要求1-4任一所述的用途，其中R1、R2、R4、R6、R8和R9為-H。17.權(quán)利要求1-16任一所述的用途，其中如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；或者，R3NA和R3NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。18.權(quán)利要求1-16任一所述的用途，其中，如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H、-Me、-Et、-nPr和-iPr。19.權(quán)利要求1-16任一所述的用途，其中如果存在-NR3NAR3NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR3NAR3NB基團(tuán)中，R3NA和R3NB各自獨(dú)立地選自-H和-Me。20.權(quán)利要求1-16任一所述的用途，其中如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。21.權(quán)利要求1-16任一所述的用途，其中如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H、-Me、-Et、-nPr和-iPr。22.權(quán)利要求1-16任一所述的用途，其中如果存在＝NR3NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR3NC基團(tuán)中，R3NC獨(dú)立地選自-H和-Me。23.權(quán)利要求1-22任一所述的用途，其中如果存在-NR7NAR7NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR7NAR7NB基團(tuán)中，R7NA和R7NB各自獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；或R7NA和R7NB與它們相連的氮原子一起形成具有3-7個(gè)環(huán)原子的環(huán)。24.權(quán)利要求1-22任一所述的用途，其中如果存在-NR7NAR7NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR7NAR7NB基團(tuán)中，R7NA和R7NB獨(dú)立地選自-H、-Me、-Et、-nPr和-iPr。25.權(quán)利要求1-22任一所述的用途，其中如果存在-NR7NAR7NB基團(tuán)，則在每個(gè)-NR7NAR7NB基團(tuán)中，R7NA和R7NB各自獨(dú)立地選自-H和-Me。26.權(quán)利要求1-22任一所述的用途，其中如果存在＝NR7NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR7NC基團(tuán)中，R7NC獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。27.權(quán)利要求1-22任一所述的用途，其中如果存在＝NR7NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR7NC基團(tuán)中，R7NC獨(dú)立地選自-H、-Me、-Et、-nPr和-iPr。28.權(quán)利要求1-22任一所述的用途，其中如果存在＝NR7NC基團(tuán)，則在每個(gè)＝NR7NC基團(tuán)中，R7NC獨(dú)立地選自-H和-Me。29.權(quán)利要求1-28任一所述的用途，其中如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地選自-H；未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基；未經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；經(jīng)取代的脂肪族C2-6烯基；和未經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基；經(jīng)取代的C3-6環(huán)烷基。30.權(quán)利要求1-28任一所述的用途，其中如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地選自-H和未經(jīng)取代的脂肪族C1-6烷基。31.權(quán)利要求1-28任一所述的用途，其中如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地選自-H、-Me和-Et。32.權(quán)利要求1-28任一所述的用途，其中如果存在RN10，則RN10獨(dú)立地為-H。33.權(quán)利要求1-32任一所述的用途，其中如果存在X-，則X-為一個(gè)或多個(gè)陰離子反離子，從而實(shí)現(xiàn)電中性，X-任選地選自Cl-、Br-和I-。34.權(quán)利要求1所述的用途，其中所述化合物選自下列化合物或其可藥用鹽、混鹽、水合物和溶劑化物35.權(quán)利要求1-34任一所述的二氨基吩噻嗪化合物的用途，其用于抑制或逆轉(zhuǎn)突觸核蛋白聚集。36.權(quán)利要求1-35任一所述的用途，其中所述聚集與表現(xiàn)為神經(jīng)變性和/或臨床癡呆的疾病狀態(tài)有關(guān)。37.權(quán)利要求1-34任一所述的二氨基吩噻嗪化合物在制備用于治療或預(yù)防受試者中與突觸核蛋白聚集有關(guān)的神經(jīng)變性疾病和/或臨床癡呆的藥物中的用途。38.一種治療或預(yù)防與突觸核蛋白聚集有關(guān)的神經(jīng)變性疾病和/或臨床癡呆的方法，所述方法包括向受試者給藥預(yù)防有效量或治療有效量的權(quán)利要求1-34任一所述的二氨基吩噻嗪化合物或含有該化合物的治療組合物，從而抑制突觸核蛋白聚集。39.一種調(diào)節(jié)或抑制哺乳動(dòng)物的腦中突觸核蛋白聚集的方法，所述聚集與表現(xiàn)為神經(jīng)變性和/或臨床癡呆的疾病狀態(tài)有關(guān)，所述治療包括向需要所述治療的哺乳動(dòng)物給藥預(yù)防有效量的或治療有效量的權(quán)利要求1-34任一所述二氨基吩噻嗪化合物的步驟。40.一種用于治療患有與突觸核蛋白聚集有關(guān)的疾病狀態(tài)的哺乳動(dòng)物中所述疾病的藥物產(chǎn)品，該藥物產(chǎn)品包括容器，所述容器標(biāo)有或帶有指明所述藥物是用于治療所述疾病的標(biāo)簽，所述容器含有一個(gè)或多個(gè)劑量單位，每個(gè)單位含有至少一種可藥用的賦型劑和作為活性成分的、單獨(dú)的、純的權(quán)利要求1-34任一所述的二氨基吩噻嗪化合物。41.權(quán)利要求37-40任一所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中所述治療包括將所述二氨基吩噻嗪化合物與調(diào)節(jié)要進(jìn)行治療的哺乳動(dòng)物中多巴胺水平的化合物聯(lián)合給藥。42.權(quán)利要求37-41任一所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中在所述治療中，將二氨基吩噻嗪化合物口服給藥。43.權(quán)利要求37-42任一所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中每天給藥總劑量多于或等于400、300、200或100mg。44.權(quán)利要求43所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中給藥劑量單位為約10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120或130mg，每天三次。45.權(quán)利要求43所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中給藥劑量單位為約10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190或200mg，每天2次。46.權(quán)利要求1-45任一所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中所述藥物中，式(1)化合物或其可藥用鹽、混鹽、水合物或溶劑化物的量為二氨基吩噻嗪化合物總量的少于50％。47.能夠標(biāo)記聚集的突觸核蛋白的二氨基吩噻嗪化合物在制備用于診斷或預(yù)測(cè)突觸核蛋白病的診斷劑或預(yù)測(cè)劑的方法中的用途，其中所述二氨基吩噻嗪化合物如權(quán)利要求1-34任一所述，并結(jié)合、連接、螯合或聯(lián)合有一種或多種同位素、放射性同位素、正電子發(fā)射原子、磁共振標(biāo)記、染料、熒光標(biāo)記物或抗原基團(tuán)。48.權(quán)利要求47所述的用途，其中二氨基吩噻嗪化合物的至少一個(gè)環(huán)碳原子為正電子發(fā)射碳原子和/或至少一個(gè)如下取代基中的至少一個(gè)碳原子為正電子發(fā)射碳原子，所述取代基為R1、R2、R4、R6、R8、R9、R3NA、R3NB、R3NC、R7NA、R7NB、R7NC和RN10。49.權(quán)利要求47或權(quán)利要求48所述的用途，其中二氨基吩噻嗪化合物的至少一個(gè)環(huán)碳原子為11C和/或至少一個(gè)如下取代基中的至少一個(gè)碳原子上為11C，所述取代基為R1、R2、R4、R6、R8、R9、R3NA、R3NB、R3NC、R7NA、R7NB、R7NC和RN10。50.權(quán)利要求47-49任一所述的用途，其中至少一個(gè)如下取代基中的至少一個(gè)碳原子為11C，所述取代基為R3NA、R3NB、R3NC、R7NA、R7NB和R7NC。51.權(quán)利要求48所述的用途，其中所述化合物選自下列化合物或其可藥用鹽、混鹽、水合物和溶劑化物52.一種標(biāo)記聚集的突觸核蛋白的方法，包括如下步驟將聚集的突觸核蛋白與權(quán)利要求47-51任一所述的二氨基吩噻嗪化合物接觸。53.一種檢測(cè)聚集的突觸核蛋白的方法，包括如下步驟將所述聚集的突觸核蛋白與權(quán)利要求47-51任一所述的二氨基吩噻嗪化合物接觸，并檢測(cè)與聚集的突觸核蛋白結(jié)合的所述化合物的存在和/或其量。54.一種診斷或預(yù)測(cè)被認(rèn)為患有突觸核蛋白病的受試者中所述疾病的方法，包括如下步驟(i)向受試者中引入權(quán)利要求47-51任一所述的二氨基吩噻嗪化合物，(ii)檢測(cè)受試者腦中與突觸核蛋白或聚集的突觸核蛋白結(jié)合的所述化合物的存在和/或其量，(iii)將(ii)中得到的檢測(cè)結(jié)果與受試者的疾病相關(guān)聯(lián)。55.權(quán)利要求37-45或54任一所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中所述受試者或哺乳動(dòng)物為人類。56.權(quán)利要求36-45，或47-51，或54任一所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中所述疾病選自帕金森病(PD)、盧易體癡呆(DLB)、多系統(tǒng)萎縮癥(MSA)、藥物誘發(fā)帕金森綜合征；和單純性自主神經(jīng)衰竭(PAF)。57.權(quán)利要求56的用途、方法或產(chǎn)品，其中所述疾病選自PD、PAF、MSA和HSD。58.前述任一權(quán)利要求所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中所述突觸核蛋白為α-突觸核蛋白。59.前述任一權(quán)利要求所述的用途、方法或產(chǎn)品，其中所述突觸核蛋白為β-突觸核蛋白。全文摘要本發(fā)明總體上涉及二氨基吩噻嗪化合物用于抑制或逆轉(zhuǎn)突觸核蛋白聚集的用途，并涉及所述化合物在制備用于該目的的藥物中的用途，例如在制備用于治療帕金森病的藥物中的用途。本發(fā)明還涉及檢測(cè)或標(biāo)記聚集的突觸核蛋白的方法。文檔編號(hào)A61K31/00GK101460157SQ200780020257公開日2009年6月17日申請(qǐng)日期2007年3月28日優(yōu)先權(quán)日2006年3月29日發(fā)明者克勞德·M·維希克,珍妮特·E·里卡德,查爾斯·R·哈林頓,戴維·霍斯利申請(qǐng)人:維斯塔實(shí)驗(yàn)室有限公司