專利名稱：豆腐果苷－石杉堿甲縮醛亞胺,其制備方法和其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺化合物，其制備方法，以化合物為活性成分的藥物組合物，及它在制備抑制乙酰膽脂酶活性的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著世界人口平均壽命的逐年增加，老年性癡呆癥的發(fā)病率也隨著迅速上升，老年癡呆癥中有50％-70％為阿爾茨海默氏病(AD)，阿爾茨海默氏癥又稱早老年性癡呆癥，患者的腦功能逐漸率退，出現(xiàn)記憶力、抽象思維能力和語言表達(dá)能力減退、行動不便和其它功能性障礙，影響神經(jīng)系統(tǒng)功能，最終導(dǎo)致死亡。AD是一種以進(jìn)行性認(rèn)知和記憶力損傷為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，估計全球世界阿爾茨海默氏病發(fā)病人數(shù)高達(dá)1200多萬。在發(fā)達(dá)國家此病是繼心血管病和腫瘤之后引起死亡的主要疾病。治療AD的藥物主要有膽堿能類藥物、神經(jīng)細(xì)胞代謝增強(qiáng)劑、抗氧化劑、鈣離子拮抗劑、神經(jīng)生長因子、雌激素、抗炎藥、抗β淀粉樣蛋白藥物等。目前臨床上治療該病最成功的方法就是通過提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)——乙酰膽堿的水平，改善AD病人的癥狀。其中針對的通過抑制AChE對乙酰膽堿的降解作用而提高腦內(nèi)的乙酰膽堿的水平，是改善癥狀的有效途徑。臨床上有效的藥物如他克林(Cognex，tacrine)，安理申(Aricept，donepezil)，艾斯能(Exelon，rivastigmine)，加蘭他敏(Reminyl，galantamine)和石杉堿甲(Hup A)均為乙酰膽堿酯酶抑制劑，它們能有效升高腦內(nèi)乙酰膽堿水平，使人的認(rèn)知功能得以改善。而作為乙酰膽堿酯酶抑制劑的著名天然產(chǎn)物石杉堿甲，其藥效得到了臨床的充分肯定，在此基礎(chǔ)上中國科學(xué)院上海藥物研究所合成一系列石杉堿甲的衍生物，發(fā)現(xiàn)了一個新型的抗老年癡呆的治療藥物“希普林”，目前在歐洲進(jìn)入了三期臨床，預(yù)計2-3年以后可以得到批準(zhǔn)上市。希普林是作為前藥，對AChE抑制劑活性和石杉堿甲相當(dāng)，選擇性略高，但生物利用度明顯提高。
迄今為止，現(xiàn)有技術(shù)中未有豆腐果苷的石杉堿甲衍生物的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種豆腐果苷的石杉堿甲衍生物即豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺化合物，其制備方法，以化合物為活性成分的藥物組合物，及它在制備抑制乙酰膽脂酶活性的藥物中的應(yīng)用。
為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案如結(jié)構(gòu)式(I)所示的豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺。
本發(fā)明同時提供了制備式(I)化合物的方法，取石杉堿甲，置于帶有冷凝管的三徑瓶中，加入無水乙醇攪拌并溶解；另取豆腐果苷溶于無水乙醇中，加入三乙胺混合均勻后，緩慢滴入三徑瓶中，混合液磁力攪拌并在50℃-55℃加熱1小時，冷卻至室溫，減壓濃縮，經(jīng)硅膠柱層析即可。
本發(fā)明的用于抑制乙酰膽脂酶活性的藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺化合物和/或藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明還提供了豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺化合物在制備抑制乙酰膽脂酶活性藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明技術(shù)方案的提出是受到希普林化學(xué)結(jié)構(gòu)的啟發(fā)，憑借對天然化合物的結(jié)構(gòu)及活性特點，試圖制備豆腐果苷的石杉堿甲衍生物，預(yù)期應(yīng)該具有顯著的乙酰膽堿酯酶抑制活性，以及更加廣泛的對神經(jīng)系統(tǒng)的活性。試驗結(jié)果符合預(yù)期期望。
本發(fā)明化合物用作藥物時，可以加賦形劑以適當(dāng)制劑直接使用，或與其他藥物組成復(fù)方制劑使用。其余為藥物學(xué)上可接受的對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。藥用載體或賦形劑是藥物學(xué)上可接受的對人和動物無毒和惰性的固體、半固體和液體稀釋劑、填料以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明的藥物可經(jīng)注射(靜注、肌注)和口服兩種形式給藥。使用量可根據(jù)用藥途徑、患者的年齡、體重、所治療的疾病的類型和嚴(yán)重程度等變化進(jìn)行一次或多次使用。對成人來說，給藥量每天1～100mg比較合適。
本發(fā)明化合物豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺涉及的天然產(chǎn)物原料及其來源1)豆腐果苷(Hel)豆腐果苷(神衰果素，Helicid)，化學(xué)結(jié)構(gòu)為4-甲酰苯基-β-D-吡喃阿洛糖苷(4-formylpheny-β-D-allopyranoside)，是一種從我國云南山龍眼科植物豆腐渣果(Helicia nilagirica Beed)果實中提取分離得到的有效成分，是一種天然產(chǎn)物中比較罕見的阿洛糖酚苷單體化合物。經(jīng)大量藥理和臨床研究證明豆腐果苷具有止痛、安眠和鎮(zhèn)靜作用，而被用于神經(jīng)衰弱、神經(jīng)衰弱綜合癥、失眠及血管神經(jīng)性頭痛等癥。
豆腐果苷的提取純化工藝豆腐渣果生藥粉，用冷水浸泡數(shù)小時后，加水煎煮3次，每次1小時，過濾，合并濾液，減壓蒸發(fā)成小體積，再加95％乙醇到溶液含醇量大于75％，放置5-6小時，過濾(殘渣用乙醇洗滌2-3次)，取清夜與洗滌液回收乙醇后，靜置，析出類白色晶體，粗晶體用90％乙醇回流，加入0.5％活性碳脫色，趁熱過濾，濾液靜置48個小時，析出晶體，過濾，干燥，得0.4-0.5％的豆腐果苷純品，可作為藥品原料。目前國內(nèi)有數(shù)十家制藥企業(yè)在生產(chǎn)豆腐果苷為有效成分的治療藥物。
豆腐果苷的表征豆腐果苷為白色針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭，味微苦；分子式C13H16O7，分子量284.27；溶于熱水，水、甲醇中微溶，乙醇中溶解度極微，乙醚、氯仿中基本不溶；熔點190-198℃UVλmax280nm豆腐果苷的NMR數(shù)據(jù)1H NMRδ7.85(1H，d，J＝9.2，2-H)，7.22(1H，d，J＝8.7，3-H)，7.22(1H，d，J＝8.7，5-H)，7.85(1H，d，J＝9.2，6-H)，9.85(1H，s，7-H)，5.38(1H，J＝7.8，1’-H)，3.70(1H，m，2’-H)，3.86(1H，m，3’-H)，3.62(1H，m，4’-H)，3.88(1H，m，5’-H)，4.15(1H，m)；3.86(1H，m)(6’-2H)13C NMRδ132.6(s，C-1)，132.8(d，C-2)，117.9(d，C-3)，164.3(s，C-4)，117.9(d，C-5)，132.8(d，C-6)，192.9(s，C-7)，99.8(d，C-1’)，72.1(d，C-1’)，73.0(d，C-3’)，68.8(d，C-4’)，76.0(d，C-5’)，63.0(t，C-6’).
化學(xué)結(jié)構(gòu) 化學(xué)名稱4-甲酰苯基-β-D-吡喃阿洛糖苷(4-formylpheny-β-D-allopyranoside)2)石杉堿甲(HupA)石杉堿甲[(-)Huperzine A]是20世紀(jì)80年代我國學(xué)者從民間草藥蛇足石杉(千層塔)(Huperzia serrata)發(fā)現(xiàn)的一種新型石松生物堿類有效成分單體；并于90年代一些學(xué)者成功開發(fā)成為治療阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)的天然藥物，商品名為“雙益平”。與國際上同類AD治療藥物相比，石杉堿甲的化學(xué)結(jié)構(gòu)具有特異性，具有非常顯著的抑制腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶和增強(qiáng)腦內(nèi)膽堿能神經(jīng)元的功能。同位素H3-石杉堿甲183ug/ml靜脈注射到小鼠15分鐘后，自顯影實驗結(jié)果顯示在外周及各腦區(qū)均有放射性藥物分布，3個小時后，主要分布在額、頂、顳葉皮質(zhì)，海馬，伏隔核，第四腦室基底部及腺垂體等區(qū)域，更加明顯。表明石杉堿甲十分易于進(jìn)入中樞，并選擇性分布在與學(xué)習(xí)、記憶有關(guān)的神經(jīng)通路區(qū)域，對腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶具有較高的選擇性抑制活性。
而石杉堿甲的神經(jīng)保護(hù)作用也十分明顯，研究表明細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激參與了AD和VD的病理過程，自由基引起的氧化損傷被認(rèn)為是不同原因誘發(fā)神經(jīng)退行性變的最后通路，除了AD和VD之外，動脈粥樣硬化、腦缺血、癲癇、肌肉萎縮側(cè)索硬化、帕氏金森綜合癥等，都提示對抗細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激藥物可能阻止這些疾病的發(fā)展。石杉堿甲是通過提高抗氧化酶活力，具有顯著抗β-淀粉樣蛋白(β-amyloid，Aβ)毒性作用，能夠明顯改善老年大鼠衰老導(dǎo)致的氧化應(yīng)激，其抗氧化作用有助于延緩、阻止AD發(fā)展。石杉堿甲不但可以提高超氧化歧化酶(SOD)的活力加速體內(nèi)自由基的清除，減少氧自由基導(dǎo)致的損傷。提示石杉堿甲不但與抑制乙酰膽堿酯酶活性有關(guān)，還與其改善抗氧自由基功能、減少自由基導(dǎo)致的損傷有關(guān)。說明石杉堿甲抗老年癡呆作用不但與抑制乙酰膽堿酯酶活性有關(guān)，與改善抗氧自由基功能、減少自由基導(dǎo)致的損傷有關(guān)。Aβ前體蛋白APP(分泌型APP)被認(rèn)為具有神經(jīng)保護(hù)作用，大鼠側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ后能夠?qū)е路置谛虯PP與PKC水平下降。石杉堿甲能夠明顯上調(diào)PKC水平，增加分泌型APP的表達(dá)，而起到神經(jīng)元保護(hù)作用，改善由于Aβ引起的學(xué)習(xí)、記憶障礙。
石杉堿甲對成年、老年猴有促智作用，對東莨菪堿、電擊、還已酰亞胺、亞硝酸鈉或二氧化碳誘發(fā)的認(rèn)知障礙，腦內(nèi)注射膽堿能選擇性毒劑AF64A誘發(fā)的記憶障礙，側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ1-40片段后誘發(fā)的大腦空間學(xué)習(xí)、記憶障礙，石杉堿甲均有改善作用。
石杉堿甲1994年應(yīng)用于臨床之后，在改善中老年良性衰老性記憶減退和早老性癡呆導(dǎo)致的記憶和認(rèn)知能力減退，及提高青少年記憶和學(xué)習(xí)成績提高取得明顯效果。
石杉堿甲的表征石杉堿甲，為白色或微黃色結(jié)晶性粉末，無臭，味微苦；C15H18N2O，分子量242.32易溶于甲醇、氯仿，溶于乙醇，不溶于水；熔點224-229℃；比旋光度[α]24.5D-150.4°(c＝0.498甲醇)；UVλmax231，313nm石杉堿甲的NMR數(shù)據(jù)1H NMRδ(400MHz，CDCl3)6.41(1H，d，J＝9.4，2-H)，7.86(1H，d，J＝9.4，3-H)，2.71(2H，ddd，ddd，J6α，6β＝16.8，J6α，7＝1.16，J6β，7＝0.52，6-H)，3.60(1H，brs，7-H)，5.39(1H，J＝4.6，8-H)，1.66(3H，d，J＝6.7，10-H)，5.47(3H，d，J＝6.7，11-H)，2.11(2H，s，14-H)，1.54(3H，s，16-H)，13.15(1H，s，NH).
13C NMRδ(100MHz，CDCl3)165.4(s，C-1)，116.9(d，C-2)，140.2(d，C-3)，122.8(s，C-4)，142.5(s，C-5)，35.2(t，C-6)，32.8(d，C-7)，124.2(d，C-8)，12.3(q，C-10)，111.2(d，C-11)，143.1(s，C-12)，54.3(s，C-13)，49.1(t，C-14)，134.1(s，C-15)，22.6(q，C-16).
化學(xué)結(jié)構(gòu) 化學(xué)名(5R，9R，11E)-5-氨基-11-亞乙基-5，6，9，10-四氫-7-甲基-5，9-亞甲環(huán)芳辛并-2(1H)-吡啶酮，(英文[5R-(5α，9β，11E)]-5-amino-11-ethylid-ene-5，6，9，10-tetrahydro-7-methyl-5，9-Methanocycloocta[b]pyridine-2(1H)-one)
具體實施例方式下面的實施例可以使本專業(yè)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
實施例1豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺化合物的制備豆腐果苷與石杉堿甲縮醛反應(yīng)制備豆腐果苷衍生物(1)，反應(yīng)式 取48.4mg(0.2mmol)HupA置于帶有冷凝管的三徑瓶中，加入8ml的無水乙醇攪拌并溶解。豆腐果苷71.1mg(0.25mmol)溶于8ml的無水乙醇中，并加入0.5ml的三乙胺混合均勻后，緩慢滴入三徑瓶中?；旌弦捍帕嚢璨⒓訜?，溫度維持在55℃左右，1小后通過TLC檢測，表明反應(yīng)已經(jīng)結(jié)束。反應(yīng)物冷卻至室溫后，減壓濃縮，殘余物硅膠柱層析(CHCl3/CH3OH 40∶1，20∶1)，得到產(chǎn)物1，80mg，收率79.2％。白色固體。
通過希夫堿制備豆腐果苷衍生物。實驗中用的石杉堿甲(95％)購自長沙拓康生物技術(shù)有限公司。其余試劑購自百靈威化學(xué)試劑有限公司。
實施例2取120mg(～0.5mmol)HupA置于帶有冷凝管的三徑瓶中，加入25ml的無水乙醇攪拌并溶解。豆腐果苷200mg(～0.7mmol)溶于25ml的無水乙醇中，并加入1.3ml的三乙胺混合均勻后，緩慢滴入三徑瓶中。混合液磁力攪拌并加熱，溫度維持在55℃左右，1小后通過TLC檢測，表明反應(yīng)已經(jīng)結(jié)束。反應(yīng)物冷卻至室溫后，減壓濃縮，殘余物硅膠柱層析(CHCl3/CH3OH 40∶1，20∶1)，得到產(chǎn)物1，210mg，收率83.3％。白色固體。
豆腐果苷衍生物1的表征白色針狀結(jié)晶，mp.198-200℃.旋光比[α]20D-2.42(c＝1.24，CHCl3)；1H NMRδ(500MHz，CDCl3)6.32(1H，d，J＝9.4，2-H)，7.22(1H，d，J＝9.4，3-H)，2.80(2H，ddd，J＝16.8，3.5，1，6-H)，3.68(1H，brs，7-H)，5.34(1H，d，J＝7.2，8-H)，1.65(3H，d，J＝6.5，10-H)，5.12(1H，q，J＝6.8，11-H)，(2H，d，J＝16.0，14-H)，1.28(3H，s，16-H)，7.81(1H，d，J＝8.6，2’-H)，7.17(1H，d，J＝8.6，3’-H)，7.81(1H，d，J＝8.6，6’-H)，8.43(1H，s，7’-H)，5.50(1H，s，1”-H)，3.69(1H，m，2”-H)，3.86(1H，m，3”-H)，3.61(1H，m，4”-H)，3.86(1H，overlap，5”-H)，4.14(1H，brs，6”-H)，3.89(1H，overlap，6”-H).
13C NMRδ(125MHz，CDCl3)165.7(s，C-1)，118.0(d，C-2)，142.9(d，C-3)，122.7(s，C-4)，144.7(s，C-5)，36.0(t，C-6)，34.2(d，C-7)，125.3(d，C-8)，12.6(q，C-10)，115.6(d，C-11)，140.8(s，C-12)，65.7(s，C-13)，46.7(t，C-14)，135.5(s，C-15)，23.0(q，C-16)；131.4(s，C-1’)，131.1(d，C-2’)，117.8(d，C-3’)，161.9(s，C-4’)，117.8(d，C-5’)，131.1(d，C-6’)，163.8(d，C-7’)；99.7(d，C-1”)，72.1(d，C-2”)，73.0(d，C-3”)，68.7(d，C-4”)，75.8(d，C-5”)，62.9(t，C-6”).
(+)FAB-MS m/z(％)509(M+1，100)，347(M+1-A11，78)，331(7)，243(14)，226(242-NH2，77)，211(13)，198(12)，122(19)根據(jù)起始原料的反應(yīng)過程，及以上波譜數(shù)據(jù)化合物1的結(jié)構(gòu)可以被推定。
化合物1的化學(xué)名稱由于系統(tǒng)命名復(fù)雜，按天然產(chǎn)物習(xí)慣，命名化合物1為豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺。
下述的制劑實施例是按實施例1的方法先制得豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺，按常規(guī)制成注射液、粉針劑、口服液以及加入賦形劑的粉劑、制粒壓片、膠囊。
片劑按照本領(lǐng)域已知的方法制備片劑，每片含有下述成分式(I)化合物 50mg乳糖 70mg硬脂酸鎂 3mg聚乙烯吡咯烷酮7mg合計 130mg
如果需要，片劑可用羥丙基甲基纖維素、滑石和著色劑進(jìn)行膜包覆。
膠囊按照本領(lǐng)域已知的方法制備膠囊劑，每個膠囊中含有下述成分式(I)化合物50mg乳糖 70mg玉米淀粉 25mg硬脂酸鎂 1mg聚乙烯吡咯烷酮 4mg合計 150mg[制劑實施例3]注射劑按實施例1的方法先制得本發(fā)明式(I)化合物，按本領(lǐng)域已知的方法制備注射劑，加注射用水，精濾，灌封滅菌制成注射液。
下述的試驗例可進(jìn)一步說明本發(fā)明所述豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺及其藥物組合物的有益效果，試驗例包括了本發(fā)明的藥效學(xué)試驗等。
試驗例1豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺的乙酰膽堿酯酶抑制實驗實驗原理乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase，AChE)的主要生理功能為通過快速水解神經(jīng)傳遞介質(zhì)乙酰膽堿(ACh)，中止膽堿能突觸中的脈沖傳遞，故AChE又稱乙酰膽堿水解酶(acetylcholine hydrolase)12。
CH3COOCH2CH2N+(CH3)3+ACh E→
CH3CO-ACh E+HOCH2CH2N+(CH3)3→CH3COO-+H++ACh E乙酰膽堿酯酶與碘化硫代乙酰膽堿生成的產(chǎn)物，與5，5-二硫雙硝基苯甲酸生成一種黃色物質(zhì)，本模型利用該顏色反應(yīng)，來測定待測樣品對乙酰膽堿酯酶的抑制程度。
材料乙酰膽堿酯酶(AChE)、陽性對照他克林(Tacrine)購于SIGMA公司，碘化硫代乙酰膽堿購于FLUKA公司，5，5-二硫雙硝基苯甲酸購于ACROS公司，其它均為國產(chǎn)分析純。
豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺對乙酰膽堿酯酶的抑制活性測定取5支磷酸鹽緩沖溶液的梨型管，依次加入不同的1.0mM的樣品DMSO溶液，使其用DMSO補齊至刻度體積后，將濃度控制為50.0，25.0，12.5，6.25，3.13(×10-9M)。分別加入一定量的4mg/mL 5，5-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)和乙酰膽堿酯酶溶液(0.1mg/ml)，并在37℃保溫15min后。立即加入一定量2mg/mL硫代乙酰膽堿溶液，搖勻后測其在λ＝412nm處的A值(An)。參比用0.1MpH 8.0磷酸鹽緩沖溶液。以未加樣品所測得的Acontrol值作為100個活力單位相對酶活力＝(An/Acontrol)×100然后以酶的相對活力對抑制劑濃度作圖，根據(jù)抑制曲線求得各種化合物的IC50值(抑制酶活力50％時的抑制劑濃度)。豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺對乙酰膽堿酯酶的抑制活性(表1)。
表1 化合物1的初步篩選活性結(jié)果

他克林為陽性對照，具體的濃度和抑制率為濃度1×10-3M，抑制率97.36％％；濃度1×10-4M，抑制率94.46％；濃度1×10-5M，抑制率90.93％；濃度1×10-6M，抑制率71.91％；濃度1×10-7M，抑制率17.25％；濃度1×10-8M，抑制率0。
可見，化合物1在1×10-5mol/L的濃度下，對乙酰膽堿酯酶的抑制率到達(dá)93.4％，而在同一實驗中同一濃度下，石杉堿甲(HupA)對乙酰膽堿酯酶的抑制率到達(dá)81.9％，而豆腐果苷(Hel)在1×10-3mol/L的濃度下，對乙酰膽堿酯酶的抑制率僅達(dá)24.8％。鑒于化合物1對乙酰膽堿酯酶的抑制活性較強(qiáng)，進(jìn)一步重復(fù)實驗測定了IC50(表2)表中陽性對照用較他克林活性更強(qiáng)的p0407(乙酰水楊酸毒扁豆堿)。
表2說明化合物豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺具有較強(qiáng)的乙酰膽堿酯酶的抑制活性。
表2 化合物1對乙酰膽堿酯酶的抑制活性(IC50)

權(quán)利要求
1.如結(jié)構(gòu)式(I)所示的豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺
2.制備權(quán)利要求1式(I)化合物的方法，取石杉堿甲，置于帶有冷凝管的三徑瓶中，加入無水乙醇攪拌并溶解；另取豆腐果苷溶于無水乙醇中，加入三乙胺混合均勻后，緩慢滴入三徑瓶中，混合液磁力攪拌并在50℃-55℃加熱1小時，冷卻至室溫，減壓濃縮，經(jīng)硅膠柱層析即可。
3.用于抑制乙酰膽脂酶活性的藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺化合物和/或藥學(xué)上可接受的載體。
4.權(quán)利要求1豆腐果苷-石杉堿甲縮醛亞胺化合物在制備抑制乙酰膽脂酶活性藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
如結(jié)構(gòu)式(I)所示的豆腐果苷－石杉堿甲縮醛亞胺，其制備方法，其作為有效成分的藥物組合物，以及其在制備抑制乙酰膽脂酶活性藥物中的應(yīng)用。
文檔編號A61P25/28GK101045708SQ20071006582
公開日2007年10月3日 申請日期2007年4月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月20日
發(fā)明者邱明華, 顏健, 楊付梅, 楊小生, 周琳, 易平 申請人:中國科學(xué)院昆明植物研究所