專利名稱：：一種單環(huán)單萜類化合物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及化合物d-檸檬烯，包括它的制備方法，以及它在治療糖尿病包括1型和2型糖尿病中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及化合物d-檸檬烯的醫(yī)學(xué)用途，尤其涉及在制藥領(lǐng)域的新用途，具體是在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：現(xiàn)有技術(shù)和知識已經(jīng)公開了化合物檸檬烯(Cydohexene,l-methyl-4-(l-methylethenyl)-，(+)-(R)),艮卩1-甲基-4-(l-甲基乙烯基)環(huán)己烯。該化合物的分子式為C10H16，分子量為136.32，液體，不溶于水，易溶于乙醇。檸檬烯有d-檸檬烯，l-檸檬烯，dl-檸檬烯或雙戊烯三種光學(xué)異構(gòu)體。d-檸檬烯的化學(xué)名稱為(4R)-(+)-4-異丙烯基-1-甲基環(huán)己烯。它存在于橙皮油、檸檬油、香檸檬油、蒔蘿油和桔油等中。沸點178'C，6rC(1.60kPa)。相對密度為0.8411。1-檸檬烯在柑桔精油中存在較少，但可以從其他芳香化合物轉(zhuǎn)化而來。它存在于俄羅斯松節(jié)油、白千層油等中。沸點177.6-177.8°C(100.7kPa)，64.4。C(2.0kPa)。相對密度為0.8422。dl-檸檬烯存在于西伯利亞松針油、檸檬草油、香草油等中，沸點178°C，64.4。C(2.0kPa)，相對密度為0.8402。三者都是具有檸檬香的油狀液體。在常壓下蒸餾不起變化，但在空氣中容易氧化生成含氧化合物和聚合物等復(fù)雜混合物，閃點48"C。藥物作用的分子生物學(xué)研究顯示，藥物在體內(nèi)的吸收、轉(zhuǎn)運、分布、代謝、排泄以及與受體、酶和離子通道等靶點的結(jié)合均體現(xiàn)出立體選擇性，因此，手性藥物的不同對映體間往往顯示不同的藥理學(xué)和毒理學(xué)特性以及不同的藥代動力學(xué)性質(zhì)。在許多情況下，化合物的一對對映體在生物體內(nèi)的藥理活性、代謝過程、代謝速率及毒性等存在顯著的差異。但是，消旋體具有某種特性時，至少有一個異構(gòu)體帶有該種特性也是化學(xué)常識。因此，可以認(rèn)為dl-檸檬烯也具有部分d-檸檬烯的藥理作用。該化合物擰檬烯由分餾的方法，分別從列出在下述植物或草藥的揮發(fā)油中提取出來蕓香科植物檸檬a'/r"s//wo"(L.)Burm.f.及其栽培變種的新鮮成熟果實、果皮(Pericarp)和葉，或者蕓香科植物桔CV^sBlanco及其栽培變種的新鮮成熟果皮或干燥成熟果皮(中藥陳皮pericarpiumCitriReticulatae)，或干燥幼果或未成熟果實的果皮(中藥青皮pericarpiumCitriReticulataeViride)，或甜橙C.^ra""wm的新鮮成熟果實、果皮和種子(seed)，或者酸橙C7/msawra油'w/w的新鮮成熟果皮，或者酸橙C!Yn^awra油'訓(xùn)及其栽培變種或甜橙C.awra油'聰(中藥枳實FructusAurantiilmmaturus)的干燥幼果的果皮，或者馬蜂橙C./2>^rix的新鮮成熟果實和果皮，或者油橙C.&wfl附/"的新鮮成熟果實和果皮，或者蕓香科植物佛手C/r"sme^cflL.松rSawo^c^toSwingle的新鮮成熟果皮或干燥果皮，或者傘形禾斗植物羌活iVo寧e，.鵬/"c/s膽TingexH.T.chang或?qū)捜~羌活A(yù)T./o^m//Boiss的根莖及根，或者姜科植物姜Zz'"g/6wo#c/"fl/e(Willd)Rose.的新鮮根莖，或者紫蘇葉尸en7/"如fe^^w(L.)Britt.的根，或者木蘭科植物玉蘭MDesr.[M/ze/to/eto(Buch.)Dandy;Mcow5p/cwaSalisb;M.yulanDesr.]或武當(dāng)玉蘭Afs;re"ger/Pamp.(中藥辛夷FlosMagnoliae)的干燥花蕾，或者荊芥Sc/^o"e戸tote"w/o""Briq的干燥地上部分，或者傘形科植物北柴胡5w/7/ewn/mC/w'"emeDC.或狹葉柴胡5.scorzowe/7》/z'M附Willd々/cafw附L.var.>scwzowm》//m/wLedeb.)(中藥柴胡RadixBupleuri)，或曰本三島柴胡及々/ca似m丄.@.化0^0"6"》//"附wiUdvar*Nakai)的干燥根，或者唇形禾斗植物薄荷Me"http://w/w//oc_y/>:Briq.(Morrvera/sL.ww*Aa/7/oca/3a:Briq.)和家薄荷Briq.&rp—rasoms(Malinvand)C.Y.WuetH.W.Li(Marve腦'sLpzj^mscmsMalinvaud.)的全草，或者三白草禾斗植物蕺菜/fow^vmVaThunb.(中藥魚腥草HerbaHouttuyniae)的全草，或者菊科植物野菊C/o^aw決ewwm/"cfcwwL.的頭狀花序，或者胡椒禾斗植物風(fēng)藤P^erfeK/sMrafb/zo&^Ohwi及石楠藤Piperwallichii(Miq)Hand-Mass(中藥海風(fēng)藤CaulisPiperKadsurae)的干燥藤莖，或者唇形科植物活血丹Glechomalongituba(Nakai)Kupr.(中藥連錢草HerbaGlechomae)的干燥地上部分，或者蕓香科植物青椒Zi2wf/oxy/M附sc/wVw》/z'MmSieb.EtZucc.或花椒ZafAojqv/mw26wwgeawM/wMaxim或野花椒Zw'附"/fl似Hance的干燥成熟果皮，或者傘形科植物茴香Foem'cw/wwVM/gawMill.(中藥小茴香FructusFoeniculi)的干燥成熟果實，或者蕓香科植物酸橙C/frwm/ra"^wL.(中藥枳殼FructusAurantii)及其栽培變種的未成熟果實，或者傘形科植物頁蒿Ozn/wcwr/L.(中藥藏茴香Fructuscaricarvi)的果實，或者藜科藜屬植物土荊芥C7^wqpo&MWam6ras/o/tfesL.的全草，或者菊科植物艾爿rte附/w》wgy/Levl.etVant.的干燥葉，或者禾本科植物蕓香草qvw60pogow(Nees)A.Camus的全草，或者松科植物白皮松尸/w附6wwgeawaZucc.(中藥白松塔StrobilusPiniBungeanae)的球果(cones),或者杜鵑花科植物黃花杜驟朋odoflfe打d謂fl"f/zo/ogo"oz血Maxim.，或者菊科飛蓬屬植物短葶飛蓬五Wgeraw6rev^ca/—Vant.)Hand.-Mazz(中藥燈盞細(xì)辛HerbaErigeronisBreviscapi)的干燥全草，或者菊科植物黃花蒿Afew/w'aa"m/aL.(中藥青蒿HerbaArtemisiaeAnnuae)的全草，或蕓香科蕓香屬植物蕓香RutagraveolensL.(中藥臭草HerbaRutae)的全草，或樟科植物山雞椒丄/teeacw&6a(Lour.)Pers.(中藥蓽澄茄FructusLitseae)的干燥成熟果實，或者木蘭科植物八角茴香IlliciumverumHook.f.的干燥成熟果實，或者菊科植物天名精CarpeskimabranoidesL.(中藥鶴虱FructusCarpesii)的干燥成熟果實，或者唇形科植物廣藿香尸ogostewowcaW/"(Blanco)Benth.或藿香々astac/en/go郞(Fisch.etMey.)O.Ktze的全草，或者莎草科植物莎草Q^pen/sraft/w^MSL.的根莖，或者橄f覽禾斗植物沒藥樹Co附附z》/ora附Fr/wEngl.樹干皮部滲出的油膠樹脂，或者姜科植物陽春砂Jmomwmw7/owmLour.，縮^!爿vz7/osw附Lour.VarjcaW/n'o/^fesT.L.WuetSenjen，海南^>A/owg///gw/,eT丄.Wu(中藥砂仁FructusAmomi)的干燥成熟果實，或者唇形科植物紫蘇葉Perilkfrutescens(L.)Britt.的干燥葉子，或者敗醬科植物纈草Ki/en》"flo^c"a//sL.或?qū)捜~纈草L.var.latifoliaMiq的根和根莖，或者豆科植物紫苜蓿Afe&cago<SW^vaL.或南苜蓿AfeJ/cago/z/^/cfaGuertn的全草，或者蕓香科植物山油柑Jcra/^c/w'a/^/w"c"/ato(L)Miq或鮑爾氏山油柑J.6awer/的葉子，或者唇形科植物石薺苧M.scabra(Thunb.)C.Y.WuetH.W.Li的全草，或者唇形禾斗植物檸檬羅勒Oc/mw附6o7/cw/wvar.citriodorum的葉。此外，在植物精油除萜及樟腦油蒸餾加工或者制造合成樟腦時，檸檬烯作為副產(chǎn)品大量生成。檸檬烯主要用作磁漆、假漆和各種含油樹脂、樹脂蠟、金屬催干劑的溶劑，用于制造合成樹脂和合成橡膠。用于食品、洗滌劑等日用香精，尚可配制食用人造柑桔油，如桔味香精的配方。美國專利US4，083，994公開了d-檸檬烯可以用作利膽藥的活性組分。此夕卜，美國專利4,083,994所公開的毒性實驗顯示，d-檸檬烯的毒性非常低。d-檸檬烯的高度生物學(xué)的安全適合于口服給藥。大鼠口服d-檸檬烯(d-limoneiie)的半數(shù)致死量LD50為6.0ml/kg。現(xiàn)有技術(shù)和知識公開了d-檸檬烯的部分藥代動力學(xué)數(shù)據(jù)。d-檸檬烯口服后經(jīng)胃腸迅速吸收，可分布到體內(nèi)各個部位，48小時內(nèi)75%95%的給藥量經(jīng)尿排泄。檸檬烯主要從尿中排泄，約60%在24小時內(nèi)經(jīng)尿排泄，5%經(jīng)糞便排泄，2%經(jīng)呼出的C02排泄。主要代謝物是雙氫紫蘇酸和紫蘇酸，由約35%的血槳中的檸檬烯轉(zhuǎn)化而得。服用檸檬烯后，在血漿中測得紫蘇酸甲脂和雙氫紫蘇酸甲脂，但僅有5%是從初始的檸檬烯轉(zhuǎn)化而來。檸檬烯-1，2-二醇是另一代謝物，由約18%檸檬烯的初始量轉(zhuǎn)化而得。糖尿病是一種復(fù)雜的疾病，其特征為高血糖癥。這個疾病可以分成兩個主要的子集胰島素依賴型(IDDM)，也被稱為1型糖尿病，和非胰島素依賴型(NIDDM)，也被稱為2型糖尿病。(世界衛(wèi)生組織糖尿病研究組，WHO技術(shù)系列報告844，1994)。1型糖尿病在機體的免疫系統(tǒng)摧毀了胰島P細(xì)胞時形成，這細(xì)胞是在機體中唯一的制造調(diào)節(jié)血糖的激素胰島素的細(xì)胞。1型糖尿病可能占全部已診斷的糖尿病的5-10%2型糖尿病可能占全部己診斷的糖尿病的90-95%。它通常開始時有胰島素抵抗，一種以細(xì)胞不能完全地利用胰島素的紊亂。當(dāng)需要胰島素增加分泌時，胰腺逐漸喪失它生產(chǎn)胰島素的能力(美國國家衛(wèi)生部疾病預(yù)防中心，國家糖尿病情況說明書，2003)。1型和2型糖尿病都能夠?qū)е虏l(fā)癥微血管、大血管和神經(jīng)病變。糖尿病能夠影響機體的許多部分，并能夠?qū)е孪盗胁l(fā)癥例如象失明、腎臟損傷、和截肢。2003年，中國疾病預(yù)防和控制中心估計中國大約有4000萬糖尿病人。2005年歐盟估計歐洲有大約2250萬人患有2型糖尿病。2005年，美國國家疾病預(yù)防中心估計美國有2080萬人有糖尿病，占人口的7.0%。糖尿病的總費用在2002年是1320億美元(包括直接費和間接費)，直接的醫(yī)療費用是920億美元，間接費用是400億美元(包括傷殘，喪失工作能力和過早死亡)。2005年，世界衛(wèi)生組織估計，全球糖尿病患者為1.8億。目前，治療的2型糖尿病的藥物主要有下面幾類1.雙胍類藥物。療效低，副作用較大，久用常產(chǎn)生乳酸酸中毒。2.磺尿類藥物。副作用較大，久用常產(chǎn)生低血糖癥。并且，可使胰小島發(fā)生疲勞，甚至衰竭，內(nèi)源性的胰島素分泌功能進(jìn)一步減少，發(fā)生藥物繼發(fā)性失效。3.葡萄糖苷酶抑制劑類藥物。僅僅延遲葡萄糖在小腸的吸收，降低餐后血糖水平。它不能刺激胰島素的分泌，也不能改變空腹胰島素和C肽水平。4.單獨使用胰島素治療2型糖尿病或者使用上述1-3類藥物配合胰島素，內(nèi)源性的胰島素分泌功能終將完全喪失，最后產(chǎn)生胰島素的依賴性(世界衛(wèi)生組織糖尿病研究組。WHO技術(shù)系列報告844，1994)。上述所有的藥物都不能穩(wěn)定地降低血糖水平。同時，病人將需要逐年加大這些藥物的治療劑量。英國糖尿病前瞻性研究指出，所有藥物都不能制止空腹血漿葡萄糖水平持續(xù)性上升，表明胰島細(xì)胞功能進(jìn)行性衰竭。(英國糖尿病前瞻性研究組，英國糖尿病前瞻性研究，1977-1992)目前的藥物卻難以穩(wěn)定地控制疾病的進(jìn)程，糖尿病因此在世界上被稱為尚無一例治療痊愈的疾病，糖尿病人將終身用藥。現(xiàn)在，制藥公司和科學(xué)家正在尋找老藥的新的替代品，以使口服藥能夠更為有效并且副作用更小，同時，也在尋找全新的、作用機制完全不同的藥物。
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明的摘要本發(fā)明的目的在于提供d-檸檬烯的新用途。即在制藥中的新應(yīng)用。本發(fā)明涉及d-檸檬烯作為制備治療糖尿病的藥物方面的應(yīng)用。具體涉及d-檸檬烯作為制備降低血糖藥的應(yīng)用。與治療糖尿病的常規(guī)合成化學(xué)藥物雙胍類藥物、磺尿類藥物或葡萄糖苷酶抑制劑類藥物不同，這種新的治療糖尿病的藥物是從天然植物中提取出來的油狀液態(tài)化合物。d-檸檬烯存在于不同的揮發(fā)油中，特別是在檸檬、桔、酸橙、柚子和香擰檬的油中。d-檸檬烯可以從檸檬、桔、酸橙、柚子和香檸檬的果皮的蒸汽提取物獲得。高純度的d-檸檬烯的油產(chǎn)品的技術(shù)等級的蒸餾物，例如從大約95-96%。也可采用市售品。d-形態(tài)的檸檬烯可以在商業(yè)上獲得自吉水南方藥物油廠(江西吉^C，中國)，或佛羅里達(dá)化學(xué)公司(LakeAlfred，美國佛羅里達(dá))。揮發(fā)油和d-檸檬烯的提取方法蒸餾的方法因溫度高，容易產(chǎn)生聚合變質(zhì)，因此，大多采用冷榨法。采用蕓香科植物檸檬a'自//mo"(L.)Burm.f.的新鮮成熟果皮，或者采用蕓香科植物桔a'/rusBlanco及其栽培變種的新鮮成熟果皮，或采用甜橙C."wrawft'M附的新鮮成熟果實、果皮和種子(seed)，或者采用酸橙C/一m/ra"rtww的新鮮成熟果皮，或者馬蜂橙C力"r/^的新鮮成熟果實和果皮，或者采用油橙C.^gam/"的新鮮成熟果實和果皮，或者采用蕓香科植物佛手CrtmsL.Fw&rco由cO;foSwingle的新鮮成熟果皮，撕碎后直接冷榨，再經(jīng)過離心或者過濾，得到揮發(fā)油。或采用蕓香科植物桔aYrwswft'cw/atoBlanco及其栽培變種的干燥成熟果皮陳皮pericarpiumCitriReticulatae或干燥幼果或未成熟果實的果皮青皮pericarpiumCitriReticulataeViride，或者采用酸橙Cz7r附flwna"rt'ww及其栽培變種或甜橙C.m/raw"ww(中藥枳實FructusAurantiiImmaturus)的干燥幼果的果皮，使用干果皮，應(yīng)以每份果皮加8份水泡軟，一般泡3-4h?；蛘撸苯硬捎霉麑嵢∮?。選用清潔的柑桔類，橙類和檸檬類果實送入不同的磨油機內(nèi)取油。主要有FMC工藝和布朗工藝(BOE)，在一些地區(qū)和國家還有特殊的磨油機。精油除萜工藝，在沸點178i:，6rC(1.60kPa)分餾時，可以分離得到d-擰檬烯。或者，以常規(guī)方法分離精制后，可以用在本發(fā)明中。這種冷榨的方法獲得的冷榨油和精油，可以獲得純度在卯％以上的d-擰檬烯。進(jìn)一步在稀的NaOH或者碳基加成劑(如鹽酸胲)中蒸餾以除去醛，則純度可達(dá)到99.5%。美國專利US4，083,994已經(jīng)公開了d-檸檬烯的藥物毒性動物實驗，d-檸檬烯的毒性非常低。顯示d-檸檬烯作為口服藥物的高度安全性。本發(fā)明首先在臨床觀察中發(fā)現(xiàn)中藥羌活、陳皮等有明顯的降低2型糖尿病人餐后血糖的作用。進(jìn)一步的研究觀察到檸檬油和陳皮油有更加強大的降低血糖作用。最終發(fā)現(xiàn)其中的藥理活性成份是化合物檸檬烯的主要光學(xué)異構(gòu)體d-擰檬烯。在本發(fā)明的動物實驗中，本品對藥物誘導(dǎo)糖尿病大鼠表現(xiàn)出明顯的降血糖作用。經(jīng)口服給予實驗動物d-檸檬烯(0.8-2.4ml/kg)后0.5-2小時內(nèi)，動物血漿葡萄糖水平大幅度降低，藥物作用在用藥2小時后逐漸消失。本發(fā)明能降低藥物(鏈脲佐菌素，streptozotocin)誘導(dǎo)所致的重度1型或者2型糖尿病模型大鼠的空腹血糖。將0.8-2.4ml/kg的d-檸檬烯灌胃給予糖尿病大鼠，0.5-2小時后，實驗大鼠的血糖明顯下降。同時，d-檸檬烯并不降低健康大鼠的正常的血糖。d-檸檬烯能夠降低2型糖尿病大鼠的升高的血糖，但是，它也能夠降低1型糖尿病大鼠出乎意料之外的。一個可能的解釋是，藥物是通過一種與其他藥物完全不同的機制來影響胰島細(xì)胞的分泌的。在臨床實驗中，數(shù)量有限的2型糖尿病病人在每日3餐后服用d-擰檬烯0.9ml，結(jié)果表明，該藥能明顯而穩(wěn)定地降低用藥者餐后的血糖水平。未見任何明顯的副作用發(fā)生。用藥后使滯后的血糖峰值時間發(fā)生的移動，暗示糖尿病將可能被藥物治愈。d-檸檬烯在動物和臨床實驗中所顯示的另外一些特性，也是非常特別的。達(dá)到有效劑量后，增加劑量并不能使血糖降低更多，同時，也不會產(chǎn)生高血糖后的低血糖反應(yīng)。相反，隨著治療時間的長度的增加，病人的原有的低血糖反應(yīng)減緩或者消失。動物實驗和臨床實驗結(jié)果顯示，本發(fā)明涉及已知化合物d-檸檬烯的新的醫(yī)學(xué)用途，可以開發(fā)出一種新型的抗糖尿病藥物。另外，這是一種來自天然植物中的非合成化學(xué)藥物，存在于人類數(shù)百萬年以來形成的食物鏈上，毒性非常低。本發(fā)明可以含有一種或者多種藥學(xué)上可接受的載體，即藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，如水、淀粉、纖維素、明膠、瓊脂、p-糊精、豆磷脂或卵磷脂等，本發(fā)明的化合物d-檸檬烯可通過口服和注射的方式給藥?？诜o藥時，優(yōu)選的形式是片劑、包衣片劑、顆粒劑、軟膠囊、栓劑和注射液。本發(fā)明的化合物d-擰檬烯的常用劑量可以根據(jù)用藥途徑、患者病情的嚴(yán)重程度，糖尿病的類型等變化，日劑量可以是1.5-4.5ml，優(yōu)選每日劑量2.4-3.0ml。每日進(jìn)餐三次，分三次服用?；蛘叻幍拇螖?shù)與進(jìn)餐次數(shù)相同。在第一口食物入口后的l-10分鐘內(nèi)服用。部分患者用藥后有輕度口干現(xiàn)象；少數(shù)患者可出現(xiàn)頭昏、乏力、心悸、便秘、口唇皰疹等，在減量或停藥后反應(yīng)可消失。健康人服用d-檸檬烯，并不降低餐后或者空腹血糖水平。具體實施方式下面將描述本發(fā)明的幾個實施例，但本發(fā)明的內(nèi)容完全不局限于此。發(fā)明的詳細(xì)說明實施例1從上述新鮮果皮或者干燥果皮中提取揮發(fā)油，并從中提取d-檸檬烯采用蕓香科植物擰檬CzYr^//mo"(L.)Burm.f.的新鮮成熟果皮，撕碎后直接送進(jìn)壓榨機內(nèi)冷搾，或者采用蕓香科植物桔a'/n/sr幼'cM/atoBlanco及其栽培變種的干燥成熟果皮陳皮pericarpiumCitriReticulatae,以每份果皮加8份水泡軟，一般泡3-4h。1.浸泡將果皮浸泡在1.53.0%的石灰水中，保持PH值1(K14，浸泡6-10h，果皮與石灰水比例為1:4~6之間。硬化果皮，使之適合壓榨。除石灰之外，浸泡還可使用硫酸氫鈉、碳酸鈉、硫酸鈉等。2.清洗將果皮放入清水中洗去石灰和雜質(zhì)。3.壓榨通過壓榨機將果皮中的精油壓出。4.過濾或分離從冷榨機或者壓榨機出來的油水混合物，帶有較多的果皮渣，具有不定的黏稠度，需要進(jìn)行過濾和多次沉淀，以減輕離心分離機的壓力。濾渣可經(jīng)蒸餾器回收精油。5.離心分離油水的分離采用高速油水分離機，進(jìn)行油水分離。分離完畢后，應(yīng)讓分離機空轉(zhuǎn)2-3min，大量沖入清水，將殘存的油沖出。為了促使精油從油乳液中分離，可以加入大約2%的氫氧化鈉和少量硫酸鈉于榨油用的水中。6.精制和脫蠟輕微混濁的粗精油，用無水硫酸鈉脫水，然后靜置澄清透明后濾去殘渣，再離心分離?；鞚岬拇志?，先經(jīng)靜置沉淀，再用無水硫酸鈉過濾。沉淀殘渣，再離心分離。將粗精油置于低溫下靜置，蠟質(zhì)析出后，再用離心分離法除去。8匸條件下，6d左右即可析出。在-25'C下，2d可析出。采用檸檬果皮可以獲得純度達(dá)到90%以上的d-檸檬烯，采用桔皮可以獲得純度達(dá)80-90%的d-檸檬烯。7.提純冷榨獲得的d-檸檬烯，可以用蒸餾的方法，從蒸餾器中在沸點178°C，6rC(1.60kPa)分餾得到純度達(dá)到大約99%的d-檸檬烯。進(jìn)一步在稀的NaOH或者碳基加成劑(如鹽酸胲)中蒸餾以除去醛，則純度可達(dá)到99.5%。但是，純化以后的d-檸檬烯，如果不加以保護(hù)，則會很快與空氣中的氧反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為純度為95-96。/。的粗d-檸檬烯。實施例2將揮發(fā)油d-檸檬烯制成可服用的藥片或者注射用針劑-將揮發(fā)油以噴霧方式與一定量的P—糊精混和，加入一定量的水，保持在一定的溫度下，攪拌lh，冷藏放置24h，濾過、抽干，加少量乙醚洗滌2次，在5(TC以下干燥為粉末，再加入足量的水，回收揮發(fā)油，計算回收率。揮發(fā)油與p-糊精的投料比為1:9(ml:g)，攪拌速度100r/min，包合溫度為4(TC，P—糊精與加入水的比例為1:7，其揮發(fā)油回收率為88.0%?；蛘邔?5g豆磷脂加入蒸餾水中，在乳化機內(nèi)攪拌3次，每次3分鐘，然后加入500ml的d-檸檬烯，以同樣方式在乳化機內(nèi)攪拌3次，再加入5000ml蒸餾水，使油水充分混合。再與P—糊精混合，制片。或者，將油水混合液過濾，灌封，10(TC滅菌30分鐘，使其成為針劑。實施例32型糖尿病模型大鼠實驗2型糖尿病大鼠實驗?zāi)Ｐ偷慕?。采用速發(fā)型類似NIDDM的模型。一次足量給予動物Wistar大鼠鏈尿佐菌素(STZ)，造成B細(xì)胞大量損傷，胰島素的合成和分泌減少，引起糖代謝紊亂，導(dǎo)致糖尿病。將STZ用0.1mol/L無菌枸掾酸鈉緩沖液新鮮配制成2%的溶液，調(diào)節(jié)PH值至4.5，濾菌器過濾除菌。大鼠禁食18小時按50-65mg/kg尾靜脈一次注射溶液，24小時血糖大于等于16.7mmol/L，即可作為成功模型。該速發(fā)型模型通常單劑量達(dá)到50mg/kg體重不出現(xiàn)自然緩解現(xiàn)象，第6-27天，胰島有一定程度再生，功能部分恢復(fù)，但未達(dá)到正常，仍然處于高血糖狀態(tài)，適合于NIDDM的相關(guān)研究。鏈尿佐菌素注射后10小時內(nèi)給予大鼠喂飼10%葡萄糖，以防止低血糖。在相關(guān)的實驗中，STZ溶解入0.1M檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(114.2)以組成60-65mg/kg重量溶液，溶液立即注射入尾靜脈。IO天后，在確定檢驗血糖水平充分高后，實驗材料被給予。治療7天，使用正規(guī)方法從動物獲得血，一個血糖監(jiān)測系統(tǒng)強生公司的SureStep血糖機被利用于測量血糖水平。在相關(guān)的飼養(yǎng)方法中，使用7周大的雄性Wistar大鼠(重量210，+-.10g)每組12個。老鼠在房間溫度攝氏22度下飼養(yǎng)，濕度50%和光照-黑暗各12小時(7:00大約19:00)。自由迸食和飲水。每天在禁食4小時后，以灌胃的方式加入d-檸檬烯以0和2.4ml/kg身體重量進(jìn)入老鼠體內(nèi)。灌胃后2小時，從大鼠尾靜脈抽血，檢驗其血糖水平。實驗結(jié)果如表1顯示，P〈0.01，有非常顯著的差異，療效非常顯著。說明藥物d-檸檬烯能夠明顯降低2型糖尿病模型大鼠的空腹血糖。表1:2型糖尿病模型大鼠治療前后比較(S土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例4:1型糖尿病大鼠實驗1型糖尿病大鼠實驗?zāi)Ｐ偷慕ⅰＷ罱鼛啄?，更多的人們己?jīng)明確表達(dá)觀察到了STZ-誘導(dǎo)的實驗糖尿病模型，雖然，原則上它是l型模型，可能用于如同一個2型模型。無論如何，因為STZ-誘導(dǎo)的實驗糖尿病模型大鼠在發(fā)病后的第1-6天，類似依賴于胰島素的1型糖尿病，因此，在這期間，STZ-誘導(dǎo)的糖尿病大鼠是l型糖尿病模型大鼠。STZ-誘導(dǎo)的糖尿病大鼠，在注射STZ后的第3-6天中，每天在禁食4小時后，以灌胃的方式加入d-檸檬烯2.4ml/kg身體重量進(jìn)入老鼠體內(nèi)。灌胃后2小時，從大鼠尾靜脈抽血，檢驗其血糖水平。結(jié)果下表顯示以d-檸檬烯治療1型糖尿病模型大鼠，治療效果顯著。表2IDDM組和d-檸檬烯治療組血糖水平的比較(S土S)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例5l型鏈尿佐菌素糖尿病大鼠鏈脲佐菌素(streptozotocin)鏈脲佐菌素能夠選擇性損傷胰島P細(xì)胞，引起實驗性糖尿病。給大鼠注射鏈脲佐菌素后，血糖水平的改變也可分為三個時相①早期高血糖相，持續(xù)約12小時，乃此藥抑制胰島釋放所致；②低血糖相，持續(xù)約610小時，可能是由于胰島P細(xì)胞破壞，大量胰島素釋放，是血糖顯著降低；③24小時后出現(xiàn)穩(wěn)定的高血糖相即糖尿病階段，此時大部分胰島P細(xì)胞已呈現(xiàn)不同程度的損傷和破壞。與四氧嘧啶糖尿病不同，鏈脲佐菌素引起的糖尿病高血糖反應(yīng)及酮癥均較緩和。根據(jù)弗氏完全佐劑(CFA)和弗氏不完全佐劑可以激發(fā)機體免疫功能的特點，將小劑量STZ和CFA，IFA聯(lián)合使用，可激活大鼠體內(nèi)的淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)胰島B細(xì)胞發(fā)生輕度改變，在此基礎(chǔ)上被激活的具有細(xì)胞毒性作用的淋巴細(xì)胞可將輕度變性的細(xì)胞當(dāng)作靶細(xì)胞進(jìn)行攻擊，從而導(dǎo)致自身免疫過程的發(fā)生，使胰島B細(xì)胞損害進(jìn)一步加重，引起糖尿病。采用每周1次連續(xù)3周腹腔內(nèi)注射CFA和IFA(弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑)0.5ml和STZ(25mg/kg)方法，建立了遲發(fā)型Wistar大鼠糖尿病模型。遲發(fā)型Wistar大鼠糖尿病模型建立的可能的機理為注射CFA后激活大鼠體內(nèi)淋巴細(xì)胞，注射小劑量STZ后誘導(dǎo)胰島e細(xì)胞發(fā)生輕度改變，在此基礎(chǔ)上，來自脾細(xì)胞的被激活的具有細(xì)胞毒作用的T淋巴細(xì)胞將上述輕度變性的胰島P細(xì)胞當(dāng)作靶細(xì)胞進(jìn)行攻擊，從而導(dǎo)致自身免疫過程的發(fā)生，使胰島P細(xì)胞損害加重。經(jīng)過3周注射CFA，IFA和STZ，上述自身免疫作用不斷被強化，使胰島e細(xì)胞損傷由量變到質(zhì)變，最終誘發(fā)大鼠糖尿病的發(fā)生。大鼠正常進(jìn)食和飲水，第一天腹注射0.5mlCFA，第2天按25mg/kg體重注射STZ。第2周的第一天腹腔注射0.5mlIFA，第2天按25mg/kg體重注射STZ。第3周的第1天腹腔注射0.5mlIFA，第2天按25mg/kg體重注射STZ。連續(xù)三周。這種遲發(fā)型STZ動物模型有免疫學(xué)的改變，更接近人類IDDM的發(fā)生發(fā)展和變化。每天在禁食4小時后，以灌胃的方式加入d-檸檬烯0.8ml/kg身體重量進(jìn)入老鼠體內(nèi)。灌胃后2小時，從大鼠尾靜脈抽血，檢驗其血糖水平。結(jié)果下表顯示以d-檸檬烯治療1型糖尿病模型大鼠，治療效果非常顯著。表3:1型糖尿病模型大鼠治療前后比較(^士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例6一男性患者，56歲，2型糖尿病史10年，空腹血糖在正常范圍內(nèi)，餐后血糖在15.6mmol/L(281mg/dl)范圍內(nèi)。餐后4-6小時后，無進(jìn)食，常發(fā)生低血糖反應(yīng)。通過7天的治療，每天三餐，在第一口飯后5-10分鐘內(nèi)，口服給予d-檸檬烯0.9ml，早餐后血糖最高峰值11.8mmol/L(212mg/dl)，發(fā)生在餐后1.25小時。繼續(xù)治療12周，進(jìn)餐即口服給予d-檸檬烯0.9ml，餐后血糖水平均在正常范圍內(nèi)。早餐后血糖最高峰值10.4mmol/L(212mg/dl)，峰值時間前移到餐后0.75小時。有時，在晚餐后，不服任何藥物，餐后血糖在正常范圍內(nèi)。午餐后，不服藥，餐后血糖或者在正常范圍內(nèi)，或者血糖水平稍高于正常水平。但早餐目前仍然不能停藥。餐后6-8小時后，無進(jìn)食，無低血糖反應(yīng)。病人在此期間保持適度的中等飲食。實施例7一婦女，58歲，2型糖尿病史15年，空腹血糖在8.6-13mmol/L(155-234mg/dl)之間，餐后血糖最高為23mmol/L(414mg/dl)。通過7天的治療，每天三餐，在第一口飯后5-10分鐘內(nèi)，口服給予d-檸檬烯0.9ml，早餐后血糖最高峰值18.7mmol/L(337mg/dl)在1.25h。治療前后對比，血糖平均降低6.99mmol/L(126mg/dl)病人在此期間保持適度的中等飲食。實施例8健康志愿者的實驗一男性，24歲，健康無任何疾病?？崭寡窃?.4-5.3mmol/L(79-96mg/dl)波動，餐后血糖在6-7mmol/L(108-126mg/dl)之間。通過7天的治療，每天三餐，在第一口飯后5-10分鐘內(nèi)，口服給予d-檸檬烯0.9ml，早餐后血糖最高峰值6.3-8.4mmol/L(115-150mg/dl)在餐后0.5小時。治療前后對比，血糖基本無變化。受試者在此期間保持適度的中等飲食。實施例9健康志愿者的實驗一婦女，46歲，健康無任何疾病?？崭寡窃?.0-5.4mmol/L(79-96mg/dl)波動，餐后血糖在8-12.2mmol/L(144-202mg/dl)之間。糖耐量實驗異常。通過7天的治療，每天三餐，在第一口飯后5-10分鐘內(nèi)，口服給予d-檸檬烯0.9ml，早餐后血糖最高峰值10.3-11.7mmol/L(185-211mg/dl)在在餐后0.5小時。治療前后對比，血糖基本無變化。受試者在此期間保持適度的中等飲食。工業(yè)應(yīng)用性單萜類化合物檸檬烯的原料主要來自蕓香科植物檸檬OYn^//mow(L.)Burm.f.及其栽培變種的新鮮成熟果實和果皮(Pericarp)，或者蕓香科植物桔Cz7msr勸'c"/atoBlanco及其栽培變種的新鮮成熟果皮或干燥成熟果皮(中藥陳皮pericarpiumCitriReticulatae)，或干燥幼果或未成熟果實的果皮(中藥青皮pericarpiumCitriReticulataeViride)，或甜橙C."wra"ft'M附的新鮮成熟果實、果皮和種子(seed)，或者酸橙C/Zms^ra"ft、w的新鮮成熟果皮，或者酸橙Cz7r^awra"riw附及其栽培變種或甜橙C.a"raw^//w(中藥枳實FructusAurantiiImmaturus)的干燥幼果的果皮，或者馬蜂橙C./i"/rix的新鮮成熟果實和果皮，或者油橙C.&《"w'"的新鮮成熟果實和果皮，或者蕓香科植物佛手C/伊船w^'c"L.FarS"rco&c^fcSwingle的新鮮成熟果皮或干燥果皮。原料來源豐富而廣泛，產(chǎn)量非常高。其次，也可從其他的多達(dá)約80種植物藥的揮發(fā)油中提取。產(chǎn)地包括歐洲、亞洲、非洲、澳洲、北美和南美洲。其中產(chǎn)量最高的是南美洲的巴西和美國的佛羅里達(dá)州，其次是澳大利亞和南非。原料產(chǎn)地遍及全世界，價格低廉。其次，檸檬烯的加工方法簡單，最簡單的加工方法是通過壓榨的方式獲得d-檸檬烯含量高達(dá)80-90%以上的桔油和檸檬油。d-檸檬烯可以方便地通過高剪切乳化機進(jìn)行油水混合，制成注射針劑；或加入e-糊精中制成片劑?；蛘咭試婌F方式加入e-糊精中制成片劑，也可以直接制成油劑軟膠囊。因此，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。權(quán)利要求1.化合物d-檸檬烯(d-limonene)在制備治療糖尿病藥物中的用途。2.根據(jù)權(quán)利要求1,化合物d-檸檬烯在制備治療1型糖尿病藥物中的用途。3.根據(jù)權(quán)利要求1,化合物d-檸檬烯在制備治療2型糖尿病藥物中的用途。全文摘要本發(fā)明涉及一種單環(huán)單萜類化合物d-檸檬烯在制備治療糖尿病的藥物中的用途。特別涉及該化合物在制備治療1型糖尿病或2型糖尿病的藥物中的用途。與其他化學(xué)合成的抗糖尿病藥物不同，該化合物是一種天然化合物，其毒理學(xué)方面的高度安全性適合于口服。文檔編號A61K31/01GK101375840SQ20071001259公開日2009年3月4日申請日期2007年8月27日優(yōu)先權(quán)日2007年8月27日發(fā)明者剛舒申請人:剛舒