一種新的雜萜化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術領域，具體設及從獨活的干燥根中分離得到的一種具有治療 膜腺癌作用的祗類化合物及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 獨活為傘形科植物重齒毛當歸AngelicapubescensMaxim,f.biserrataShanet 化an的干燥根。春初苗剛發(fā)芽或秋末莖葉枯萎時采挖，除去須根及泥沙，烘至半干，堆置 2~3天，發(fā)軟后再烘至全干。性微溫，味辛、苦，歸腎、膀脫經。有桂風除濕、通搏止痛、解表 之功效，臨床上主要用于治療風寒濕搏、腰膝疼痛、風寒挾濕表證、少陰伏風頭痛等證。始載 于《神農本草經》，列為上品，言其"味苦，平。主風寒所擊，金瘡止痛，奔豚，痛疫，女子痛瘤。 服輕身耐老"。主產于湖北、四川、陜西、浙江等地，又稱川獨活、資丘獨活、己東獨活、恩施獨 活、肉獨活、浙獨活、績獨活、香獨活等，W根條粗壯，油潤，質軟，香氣濃者為佳。
[0003] 目前從各種不同品種獨活中已分離出香豆素、祗類、揮發(fā)油、有機酸和糖類等多種 化學成分。香豆素是獨活重要的活性成分。香豆素（Coumarin)是具有苯拼a-化喃酬結 構的一類化合物?？煽醋魇琼樖洁弿交鹌に崦撍纬傻膬瓤?，絕大多數(shù)在C,位有徑基 或控基，具有芳香氣味。
[0004] 現(xiàn)代研究證實，獨活具有鎮(zhèn)靜催眠、鎮(zhèn)痛、抑制血小板聚集、抗氧化、抗衰老、抗腫 瘤、抗血管生成等藥理作用。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從獨活的干燥根中分離得到的一種具有治療膜腺癌作 用的祗類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術方案得W實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結構式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制備方法，包含W下操作步驟：(a)將獨活的干燥根粉碎， 用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水飽 和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化）步驟（a) 中乙酸乙醋萃取物用大孔樹脂除雜，先用15%乙醇洗脫8個柱體積，再用75%乙醇洗脫10 個柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物浸膏；（C)步驟化）中75% 乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、20:1、10:1和1:1的二氯甲 燒-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（C)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體 積比為25:1、20:1和10:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分 2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫， 收集8~10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0010] 進一步地，步驟（a)中，用80%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0011] 進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] 一種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I)在制備治療膜腺癌的藥物中的應用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療膜腺癌的藥物中的應用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可W直接使用，或者W藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料W及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物W單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質體或乳劑等。
【附圖說明】 陽〇1引圖1為化合物（I)結構式；
[0019] 圖2為化合物（I)理論ECD值與實驗ECD值比較。
【具體實施方式】
[0020] 下面結合實施例進一步說明本發(fā)明的實質性內容，但并不W此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可W對 本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的實質和范圍。
[0021] 實施例1 :化合物（I)分離制備及結構確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲燒為分析純，購自上海凌峰化 學試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學試劑有限公司。
[002引審恪方法：（a)獨活的干燥根（IOkg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取燭LX3次）， 合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油酸0LX3次）、乙酸乙醋0LX3次）和水飽 和的正下醇0LX3次）萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（398g)和正下醇 萃取物；化）步驟（a)中乙酸乙醋萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用15%乙醇洗脫8個 柱體積，再用75 %乙醇洗脫10個柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫 物浸膏（163g) ; (C)步驟化）中75 %乙醇洗脫浸膏用200-300目正相硅膠分離，依次用體 積比為85:1 (10個柱體積）、45:U9個柱體積）、20:1(8個柱體積）、10:1(8個柱體積）和 1:1巧個柱體積）的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個組分；(d)步驟（C)中組分3 (49g) 用200-300目正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1 (8個柱體積）、20:1 (10個柱體 積）和10:1巧個柱體積）的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分 2 (31g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠ODS-C18分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶 液等度洗脫，收集8~10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)(44mg)。
[0024] 結構確證：HR-ESIMS顯示[M+Na]+為m/z361. 1304,結合核磁特征可得分子式 為(：1品2〇7,不飽和度為7。核磁共振氨譜數(shù)據(jù)Sh(卵m，DMS0-de，600MHz) :H-2(6. 34,S)， H-5 (3. 82,d，J= 15. 0)，H-5 (3. 15,d，J= 15. 0)，H-7 (5. 19,d，J=6.6)，H-8(4. 64,br， t，J= 9.6)，H-9 (2. 36,d，J= 12. 4)，H-9 (I. 39,d，J= 12. 4)，H-Il(4. 01，s)，H-15 (I.66， s)，37,s)，1-0H(12. 00,s)，4-0H巧.57,s)，8-0H巧.71，s)，IO-OH巧.08,s)， 11-OH化.16,s) ,3-0(? 化 87,s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) 5C(ppm,DMSO-de，125MHz) :158. 4 (C， 1-C)，98. 2 (CH，2-C)，152. 5 (C，3-C)，137.6(C，4-C)，30. 3 (細2, 5-C)，135.I(C，6-C)， 129. 8(CH，7-C)，65. 7(CH，8-C)，46. 1(邸2,9-〇,61. 5(C，10-C)，62. 6(CH，11-C)，198. 7(C， 12-C)，114. 2(C，13-C)，121. 9(C，14-C)，21.I佩，15-C)，17.I佩，16-C)，56. 0(細3， 3-OCH3);碳原子標記參見圖I。紅外光譜表明該化合物含有徑基基團（3438cmI);此外該化 合物在374和289nm有紫外吸收，說明含有多共輛結構。IDNMR譜和服QC譜顯示有17個 碳信號，分別為=個甲基（包括一個甲氧基），兩個亞甲基，四個次甲基（兩個締控碳和兩 個含氧碳）W及八個季碳（分別為一個酬幾基，=個含氧締控碳，=個締控碳和一個含氧季 碳）。另外，一個締控質子信號5冊.34(1扎3，護2)，化及六個締碳信號50158.4((：，1-〇， 98. 2 (CH，2-C)，152. 5 (C，3-C)，137.6(C，4-C)，114. 2 (C，13-C)和 121. 9 (C，14-C)，表明該化 合物含有一個五取代的苯環(huán)結構。HMBC譜中，徑基質子（5H12. 00,s，l-〇H)與C-1，C-2， C-13W及5C198. 7 (C，12-C)的相關性表明幾基碳（C-。）與苯環(huán)的C-13位相連，該化合物 在374和289nm的紫外吸收也驗證了運一結論。HMBC譜中，徑基質子5H9. 57(lH，s，4-0H) 與5(：152.5((：，3-〇，137.6((：，4-〇和121.9((：，14-〇;甲氧基質子5冊.87(3,3-0邸3)與 C-3 ;W及H-2與C-3的相關性表明甲氧基和徑基分別位于C-3和C-4位上。剩余的10個 碳原子（去除苯環(huán)和甲氧基的屯個碳）形成了一個十元環(huán)單祗結構。C-8位低場的化學位 移（5C65. 7)，W及氨原子信號[5H4. 64,1H，br，t，J= 9.細Z，H-8)]，表明C-8位連有一個 徑基。HMBC譜中H-8與C-6( 5C135. 1)，C-7 ( 5C129.8)，C-9 ( 5C46. 1)和C-IO(SC61. 5) 的相關性驗證了上述結論。綜合氨譜、碳譜、HMBC譜和ROESY譜，W及文獻關于相關類型核 磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如圖1所示，立體構型進一步通過ECD試驗確定，理論值與實 驗值基本一致（圖2)。 陽0巧]實施例2:化合物（I)藥理作用試驗 [00%] -、材料和儀器
[0027] 人膜腺癌MiaPaCa-2細胞由天津醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所