用于治療增殖性疾病的咪唑基-嘧啶化合物的制作方法

文檔序號：1118726閱讀：429來源：國知局

專利名稱：用于治療增殖性疾病的咪唑基-嘧啶化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及具有CDK抑制活性的式(I)化合物的任何和所有互變異構體形式。
還應該理解的是，某些式(I)化合物可以溶劑化形式以及非溶劑化形式存在，例如以水合形式存在。應該理解的是，本發(fā)明包括具有CDK抑制活性的所有這些溶劑化形式。
可變基團的具體取值如下。對于本文所限定的定義、權利要求或實施方案，如果適當，就可以采用這些取值。
R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基或環(huán)丁基。
R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基或環(huán)丁基。
R1為乙基。
R1為異丙基。
R1為環(huán)丙基甲基。
R1為1-環(huán)丙基乙基。
R1為環(huán)丁基。
R1為環(huán)戊基。
R1為環(huán)丁基。
R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基。
R2為甲基或甲氧基甲基。
R2為甲基。
R2為乙基。
R2為異丙基。
R2為二氟甲基。
R2為三氟甲基。
R2為甲氧基甲基。
R2為環(huán)丙基。
R3為氫或氟。
R3為氫、氟或氯。
R3為氫。
R3為氟。
R3為氯。
R4為氫、鹵素、氰基、甲磺酰基、甲基或甲氧基。
R4為氫、氟、氯、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基。
R4為氫。
R4為鹵素。
R4為氟。
R4為氯。
R4為氰基。
R4為甲磺酰基。
R4為甲基。
R4為甲氧基。
A環(huán)是氮連接的5或6元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代；其中R7為C1-4烷基。
A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中A環(huán)的2個原子當A環(huán)是氮連接的5-7元飽和環(huán)時，可以任選通過1或2個原子橋連接；其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代；其中 R7選自C1-4烷基、碳環(huán)基或雜環(huán)基；其中R7可以在碳上被一個或多個選自R13的基團任選取代； R13選自鹵素、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中A環(huán)的2個原子當A環(huán)是氮連接的5-7元飽和環(huán)時，可以任選通過1或2個原子橋連接；且其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代；其中 R7選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R13選自羥基、C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中A環(huán)的2個原子當A環(huán)是氮連接的5-7元飽和環(huán)時，可以任選通過1或2個原子橋連接；且其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代；其中 R7選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R13選自C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代；其中 R7選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R13選自C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
A環(huán)為嗎啉代、哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基；其中所述哌嗪-1-基可以在氮上被R7任選取代；其中R7為C1-4烷基。
A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代(1，1-dioxothiomorpholino)、哌啶-1-基、1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基、吡咯烷-1-基或2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基；其中A環(huán)可以在氮上被R7任選取代；其中 R7選自甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、苯基或吡啶基；其中R7可以在碳上被一個或多個選自R13的基團任選取代； R13選自氟、氯、羥基、甲基、甲氧基、二甲氨基或吡咯烷-1-基。
A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基、吡咯烷-1-基或2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基；其中所述1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、哌嗪-1-基或2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基可以在氮上被R7任選取代；其中 R7選自甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基或環(huán)丁基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R13選自羥基、甲氧基、二甲氨基或吡咯烷-1-基。
A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、1，1-dioxothimorpholino、哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基或吡咯烷-1-基；其中所述1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基或哌嗪-1-基可以在氮上被R7任選取代；其中 R7選自甲基、乙基、異丙基或環(huán)丙基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R13選自甲氧基、二甲氨基或吡咯烷-1-基。
A環(huán)為嗎啉代、哌啶-1-基、1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基；其中所述1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基或哌嗪-1-基可以在氮上被R7任選取代；其中 R7選自甲基、乙基或環(huán)丙基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R13選自甲氧基、二甲氨基或吡咯烷-1-基。
A環(huán)為嗎啉代、哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基；其中所述哌嗪-1-基可以在氮上被R7任選取代；其中R7為甲基。
A環(huán)為嗎啉代、4-甲基哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基。
A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、4-異丙基哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基高哌嗪-1-基、4-環(huán)丁基高哌嗪-1-基、4-(2-羥乙基)高哌嗪-1-基、4-異丙基高哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基、吡咯烷-1-基、2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基或2-乙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基。
A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-乙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、4-異丙基哌嗪-1-基、4-(4-氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2-氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2，4-二氟苯基)哌嗪-1-基、4-(3，4-二氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2-氯苯基)哌嗪-1-基、4-(4-氯苯基)哌嗪-1-基、4-(4-苯基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(3-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2，3-二甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2，6-二甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-羥基苯基)哌嗪-1-基、4-(2-羥基苯基)哌嗪-1-基、4-(5-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基高哌嗪-1-基、4-環(huán)丁基高哌嗪-1-基、4-(2-羥乙基)高哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)高哌嗪-1-基、4-異丙基高哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基、吡咯烷-1-基、2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-甲基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-(2-甲氧基乙基)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-乙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基或2-異丙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基。
A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、4-異丙基哌嗪-1-基、4-異丙基高哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基或吡咯烷-1-基。
A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基。
A環(huán)為嗎啉代。
A環(huán)為4-甲基哌嗪-1-基。
A環(huán)為吡咯烷-1-基。
R5為-NR10R11；其中R10和R11獨立選自C1-4烷基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷基磺酰氧基、C1-6烷基S(O)a(其中a為2)或雜環(huán)基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代；其中 R6選自鹵素、甲氧基和羥基； R9、R10、R11和R15獨立選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R9、R10、R11和R15可以在碳上獨立地被一個或多個選自R13的基團任選取代； R8選自羥基、氨基和苯氨基；和 R13選自碳環(huán)基和C1-3烷氧基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷基磺酰氧基、C1-6烷基S(O)a(其中a為2)或雜環(huán)基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代；其中 R6選自鹵素、甲氧基和羥基； R9、R10、R11和R15獨立選自C1-4烷基或碳環(huán)基； R8選自羥基和氨基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷基S(O)a(其中a為2)或雜環(huán)基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代；其中 R6選自鹵素、甲氧基和羥基； R9、R10、R11和R15獨立選自C1-4烷基； R8選自羥基和氨基。
R5為-NR10R11；其中R10和R11為甲基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺酰基、甲磺酰氧基、嗎啉代、哌啶-1-基、吡啶-2-基、高哌嗪-1-基、哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；其中R5可以在氮上被R15任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中 R6選自鹵素、甲氧基和羥基； R9、R10、R11和R15獨立選自甲基、乙基、丙基、異丙基、異丁基、環(huán)丙基或環(huán)丁基；其中R9、R10、R11和R15可以在碳上獨立地被一個或多個選自R13的基團任選取代； R8選自羥基、氨基和苯氨基；和 R13選自環(huán)丙基和甲氧基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；⒓谆酋Ｑ趸?、嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；其中所述哌嗪-1-基可以在氮上被R15任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中 R6選自鹵素、甲氧基和羥基； R9、R10、R11和R15獨立選自甲基或環(huán)丙基； R8選自羥基和氨基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；?、哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；其中所述哌嗪-1-基可以在氮上被R15任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中 R6選自鹵素、甲氧基和羥基； R9、R10、R11和R15獨立選自甲基； R8選自羥基和氨基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺酰基、甲磺酰氧基、嗎啉代、哌啶-1-基、二甲氨基、二乙氨基、異丙基、吡啶-2-基、羥甲基、甲氨基、氨甲基、4-甲基哌嗪-1-基、環(huán)丙氨基、吡咯烷-1-基、高哌嗪-1-基、環(huán)丁氨基、苯氨基甲基、N-甲基-N-(環(huán)丙基甲基)氨基、N-甲基-N-環(huán)丙氨基、N-甲基-N-異丁氨基、N-甲基-N-(2-甲氧基乙基)氨基、N-乙基-N-丙氨基或N-甲基-N-環(huán)丁氨基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；?、甲磺酰氧基、嗎啉代、哌啶-1-基、二甲氨基、羥甲基、甲氨基、氨甲基、4-甲基哌嗪-1-基、環(huán)丙氨基或吡咯烷-1-基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；?、二甲氨基、羥甲基、甲氨基、氨甲基、4-甲基哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基。
n為0或1。
n為0。
n為1。
n為2；其中R5的取值可以相同或不同。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基或環(huán)丁基； R2為甲基或甲氧基甲基； R3為氫或氟； R4為氫、鹵素、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基； A環(huán)是氮連接的5或6元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代；其中R7為C1-4烷基； R5為-NR10R11；其中R10和R11獨立選自C1-4烷基；和 n為0或1。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基或環(huán)丁基； R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基； R3為氫、氟或氯； R4為氫、鹵素、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基； A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中A環(huán)的2個原子當A環(huán)是氮連接的5-7元飽和環(huán)時，可以任選通過1或2個原子橋連接；其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代； R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷基S(O)a(其中a為2)或雜環(huán)基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代； n為0或1； R7選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R8選自羥基和氨基； R9、R10、R11和R15獨立選自C1-4烷基；和 R13選自C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基或環(huán)丁基； R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基； R3為氫或氟； R4為氫、鹵素、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基； A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代； R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷基S(O)a(其中a為2)或雜環(huán)基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代； n為0或1； R7選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R8選自羥基和氨基； R9、R10、R11和R15獨立選自C1-4烷基；和 R13選自C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基或環(huán)丁基； R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基； R3為氫、氟或氯； R4為氫、鹵素、氰基、甲磺?；⒓谆蚣籽趸?； A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中A環(huán)的2個原子當A環(huán)是氮連接的5-7元飽和環(huán)時，可以任選通過1或2個原子橋連接；其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代； R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷基磺酰氧基、C1-6烷基S(O)a(其中a為2)或雜環(huán)基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代； n為0或1； R6選自鹵素、甲氧基和羥基； R7選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R7可以在碳上被選自R13的基團任選取代； R8選自羥基和氨基； R9、R10、R11和R15獨立選自C1-4烷基或碳環(huán)基； R13選自羥基、C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基或環(huán)丁基； R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基； R3為氫、氟或氯； R4為氫、鹵素、氰基、甲磺?；⒓谆蚣籽趸? A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中A環(huán)的2個原子當A環(huán)是氮連接的5-7元飽和環(huán)時，可以任選通過1或2個原子橋連接；其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代； R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷基磺酰氧基、C1-6烷基S(O)a(其中a為2)或雜環(huán)基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代； n為0或1； R6選自鹵素、甲氧基和羥基； R7選自C1-4烷基、碳環(huán)基或雜環(huán)基；其中R7可以在碳上被一個或多個選自R13的基團任選取代； R8選自羥基、氨基和苯氨基； R9、R10、R11和R15獨立選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R9、R10、R11和R15可以在碳上獨立地被一個或多個選自R13的基團任選取代； R13選自鹵素、碳環(huán)基、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基或環(huán)丁基； R2為甲基或甲氧基甲基； R3為氫或氟； R4為氫、氟、氯、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基； A環(huán)為嗎啉代、4-甲基哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基； R5為-NR10R11；其中R10和R11為甲基；和 n為0或1。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基或環(huán)丁基； R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基； R3為氫、氟或氯； R4為氫、氟、氯、氰基、甲磺?；⒓谆蚣籽趸?； A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、4-異丙基哌嗪-1-基、4-異丙基高哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基或吡咯烷-1-基； R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；?、二甲氨基、羥甲基、甲氨基、氨甲基、4-甲基哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基； n為0或1。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基或環(huán)丁基； R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基； R3為氫或氟； R4為氫、氟、氯、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基； A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基； R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；⒍装被?、羥甲基、甲氨基、氨甲基、4-甲基哌嗪-1-基或吡咯烷-1-基； n為0或1。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基或環(huán)丁基； R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基； R3為氫、氟或氯； R4為氫、氟、氯、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基； A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、4-異丙基哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基高哌嗪-1-基、4-環(huán)丁基高哌嗪-1-基、4-(2-羥乙基)高哌嗪-1-基、4-異丙基高哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基、吡咯烷-1-基、2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基或2-乙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基。
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；?、甲磺酰氧基、嗎啉代、哌啶-1-基、二甲氨基、羥甲基、甲氨基、氨甲基、4-甲基哌嗪-1-基、環(huán)丙氨基或吡咯烷-1-基； n為0或1。
因此，本發(fā)明又一方面提供式(I)化合物(如上所示)或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中 R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基或環(huán)丁基； R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基； R3為氫、氟或氯； R4為氫、氟、氯、氰基、甲磺?；⒓谆蚣籽趸?； A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-乙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、4-異丙基哌嗪-1-基、4-(4-氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2-氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2，4-二氟苯基)哌嗪-1-基、4-(3，4-二氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2-氯苯基)哌嗪-1-基、4-(4-氯苯基)哌嗪-1-基、4-(4-苯基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(3-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2，3-二甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2，6-二甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-羥基苯基)哌嗪-1-基、4-(2-羥基苯基)哌嗪-1-基、4-(5-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基高哌嗪-1-基、4-環(huán)丁基高哌嗪-1-基、4-(2-羥乙基)高哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)高哌嗪-1-基、4-異丙基高哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基、吡咯烷-1-基、2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-甲基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-(2-甲氧基乙基)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-乙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基或2-異丙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基； R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；⒓谆酋Ｑ趸?、嗎啉代、哌啶-1-基、二甲氨基、二乙氨基、異丙基、吡啶-2-基、羥甲基、甲氨基、氨甲基、4-甲基哌嗪-1-基、環(huán)丙氨基、吡咯烷-1-基、高哌嗪-1-基、環(huán)丁氨基、苯氨基甲基、N-甲基-N-(環(huán)丙基甲基)氨基、N-甲基-N-環(huán)丙氨基、N-甲基-N-異丁氨基、N-甲基-N-(2-甲氧基乙基)氨基、N-乙基-N-丙氨基或N-甲基-N-環(huán)丁氨基； n為0或1。
本發(fā)明另一方面，優(yōu)選的本發(fā)明化合物為實施例中的任一種化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明另一方面，優(yōu)選的本發(fā)明化合物選自下列化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯 (1)4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-{4-[(4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]苯基}嘧啶-2-胺； (2)N-(4-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}苯基)-5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1 H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺； (3)5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-{4-[(4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]苯基}嘧啶-2-胺； (4)5-氯-N-(4-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}苯基)-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺； (5)5-氯-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-{4-[(4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]苯基}嘧啶-2-胺； (6)N-{4-[(4-異丙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]苯基}-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺； (7)N-(4-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}苯基)-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺； (8)N-(4-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-氟苯基)-5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1 H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺； (9)[4-[[5-氟-4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-(4-丙-2-基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)甲酮； (10)[4-[[5-氟-4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-[(3S)-3-(甲氨基)吡咯烷-1-基]甲酮。
本發(fā)明優(yōu)選的方面是涉及式(I)化合物或其藥學上可接受鹽的方面。
本發(fā)明另一方面提供式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯的制備方法，該方法由以下方法組成(其中可變基團如式(I)中定義，除非另有說明) 方法a)使下式(II)的嘧啶
與下式(III)的苯胺反應
式(II)中，L為可置換基團；或者方法b)使下式(IV)的化合物
與下式(V)的化合物反應
其中T為O或S；Rx可以相同或不同，且選自C1-6烷基；或者方法c)使下式(VI)的酸或其活性酸衍生物
與下式(VII)的胺反應
或者方法d)對于式(I)化合物；使下式(VIII)的嘧啶
下式(IX)的化合物反應
其中Y為可置換基團；且之后如有需要 i)將一種式(I)化合物轉化成另一種式(I)化合物； ii)脫去任何保護基； iii)制成藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
L為可置換基團，L的合適取值為例如鹵素或磺酰氧基(例如氯、溴、甲磺酰氧基或甲苯-4-磺酰氧基)。
Y為可置換基團，Y的合適取值為例如鹵素或磺酰氧基(例如溴、碘或三氟甲磺酰氧基)。優(yōu)選Y為碘。
上述反應的具體反應條件如下。
方法a)式(II)的嘧啶和式(III)的苯胺可與合適的堿(例如無機堿例如碳酸銫或有機堿例如叔丁醇鉀)一起，在合適的配體例如2，2′-雙(二苯膦基)-1，1′-聯(lián)萘存在下，在25-80℃的溫度范圍內，在以下條件下進行反應 i)在合適的溶劑例如酮(例如丙酮)或醇(例如乙醇或丁醇)或芳烴(例如甲苯或N-甲基吡咯烷)存在下，任選在合適的酸例如鹽酸或硫酸等無機酸或例如乙酸或甲酸或合適的路易斯酸(Lewis acid)等有機酸存在時，在0℃至回流的溫度范圍內，優(yōu)選在回流溫度下進行；或者 ii)在標準Buchwald條件(例如參見J.Am.Chem.Soc.，118，7215；J.Am.Chem.Soc.，119，8451；J.Org.Chem.，62，1568和6066)，例如在乙酸鈀存在下，在合適的溶劑例如芳族溶劑(例如甲苯、苯或二甲苯)中進行。
其中L為氯的式(II)嘧啶可以按照流程1制備
流程1 式(III)的苯胺為市售化合物，或者在文獻中有記載，或者可以通過本領域已知標準方法制備。
方法b)式(IV)化合物和式(V)化合物一起在合適的溶劑(例如N-甲基吡咯烷酮或丁醇)中，在100-200℃的溫度范圍內，優(yōu)選在150-170℃的范圍內進行反應。反應優(yōu)選在合適的堿(例如氫化鈉、甲醇鈉或碳酸鉀)存在下進行。
其中R3為氫的式(V)化合物，可以按照流程2制備
流程2 對于其中R3為鹵素的式(V)化合物，將需要進行隨后的鹵化。
式(IV)化合物和式(Va)化合物為市售化合物，或者在文獻中有記載，或者可以通過本領域已知標準方法制備。
方法c)酸和胺可以在合適的偶聯(lián)劑存在下偶合在一起。可以用本領域已知標準肽偶聯(lián)劑，或者例如羰基二咪唑和二環(huán)己基碳二亞胺用作合適的偶聯(lián)劑，任選在催化劑(例如二甲氨基吡啶或4-吡咯烷-1-基吡啶)存在下，任選在堿(例如三乙胺、吡啶或2，6-二烷基-吡啶例如2，6-二甲基吡啶或2，6-二叔丁基吡啶)存在時進行。合適的溶劑包括二甲基乙酰胺、二氯甲烷、苯、四氫呋喃和二甲基甲酰胺。偶合反應可以方便地在-40℃至40℃的溫度范圍內進行。
合適的活性酸衍生物包括酰基鹵，例如?；群突钚怎?例如五氟苯酯)。這些類型化合物與胺的反應是本領域眾所周知的，例如它們可以在堿(例如上述堿)存在下，在合適的溶劑(例如上述溶劑)中進行反應。反應可以方便地在-40℃至40℃的溫度范圍內進行。
可以采用方法a)、方法b)或方法c)制備式(VI)化合物。
式(VII)胺為市售化合物，或者在文獻中有記載，或者可以通過本領域已知標準方法制備。
方法d)式(VIII)化合物和式(IX)的胺可以在方法a)所述標準Buchwald條件下進行反應。
式(VIII)化合物的合成見流程1。
式(IX)化合物為市售化合物，或者在文獻中有記載，或者可以通過本領域已知標準方法制備。
應當理解的是，本發(fā)明化合物不同環(huán)取代基中的某些取代基，可以通過標準芳族取代反應引入，或者在上述方法之前或者緊接其后通過常規(guī)官能團修飾產生，因此這些也包括在本發(fā)明的方法方面。這樣的反應和修飾包括例如通過芳族取代反應引入取代基，取代基的還原，取代基的烷基化，取代基的氧化。這些方法步驟中所用的試劑和反應條件是化學領域眾所周知的。芳族取代反應的具體實例包括用濃硝酸引入硝基；用例如?；u和路易斯酸(例如三氯化鋁)在Friedel Crafts條件下引入?；?；用烷基鹵和路易斯酸(例如三氯化鋁)在Friedel Crafts條件下引入烷基；引入鹵素基團。修飾的具體實例包括例如用鎳催化劑催化氫化或在鹽酸存在下用鐵加熱處理，使硝基還原成氨基；將烷硫基氧化成烷基亞磺?；蛲榛酋；?br> 還應當理解的是，在本文所述的一些反應中，保護化合物中的任何敏感基團是必要/需要的。其中保護是必要或需要的實例以及合適的保護方法為本領域技術人員所知。可以根據標準規(guī)程使用常用保護基(例如參見T.W.Green，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley和Sons，1991)。因此，如果反應物包括例如氨基、羧基或羥基等基團，則有可能需要在本文所述某些反應中保護這些基團。
對于氨基或烷基氨基的合適保護基團有例如?；?，如乙酰基等烷?；?，如甲氧羰基、乙氧羰基或叔丁氧羰基等烷氧羰基，如芐氧羰基等芳基甲氧羰基，或如苯甲?；确减；?。對于上述保護基團的脫保護條件必將隨保護基團的選擇而變化。因此，?；缤轷；蛲檠豸驶蚍减；?，可以例如通過用合適的堿如氫氧化鋰或氫氧化鈉等堿金屬氫氧化物水解脫去?；蛘?，如叔丁氧羰基等?；梢酝ㄟ^用合適的酸如鹽酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸處理脫去，如芐氧羰基等芳基甲氧羰基可以例如通過在催化劑如披鈀碳存在下氫化或通過用路易斯酸如三(三氟乙酸)硼處理脫去。對于伯氨基的合適的替代保護基團有例如鄰苯二甲?；淇梢酝ㄟ^用烷基胺如二甲基氨基丙胺或用肼處理脫去。
對于羥基的合適保護基團有例如?；?，如乙?；韧轷；?、苯甲?；确减；?、或芐基等芳基甲基。對于以上保護基團的脫保護條件必將隨著保護基團的選擇而變化。因此，例如烷?；蚍减；弱；梢岳缤ㄟ^用合適的堿如氫氧化鋰或氫氧化鈉等堿金屬氫氧化物水解脫去。或者，芐基等芳基甲基可以例如經披鈀碳等催化劑氫化脫去。
對于羧基的合適保護基團有例如酯化基團，例如可以通過例如用氫氧化鈉等堿水解脫去的甲基或乙基，或者可以通過例如用三氟乙酸等有機酸類的酸處理脫去的叔丁基，或者可以通過經催化劑如披鈀碳氫化脫去的芐基。
采用化學領域熟知的常規(guī)技術，可以在合成的任何方便的階段除去保護基團。
如上所述，本發(fā)明限定的化合物具有抗細胞增殖活性(例如抗癌活性)，我們認為是由于化合物的CDK抑制活性造成的。這些性質可以例如用下述方法評價測定法本文使用下列縮寫詞 HEPES表示N-[2-羥乙基]哌嗪-N′-[2-乙磺酸] DTT表示二硫蘇糖醇 PMSF表示苯甲磺酰氟。
在體外激酶測定法的96孔板中，用閃爍親近測定法(SPA-得自Amersham)測定摻入到試驗底物(GST-成視網膜細胞瘤蛋白；GST-Rb)中的[γ-33-P]-腺苷三磷酸，對化合物進行測試。在每孔中加入待測化合物(在DMSO和水中稀釋到適當濃度)，對照孔加入roscovitine作為抑制劑對照，或者加入DMSO作為陽性對照。
將稀釋于25μl孵育緩沖液的約0.2μl CDK2/細胞周期蛋白E部分純化酶(用量取決于酶活性)加到各孔中，然后加入20μl GST-Rb/ATP/ATP33混合物(含有0.5μg GST-Rb和0.2μM ATP和0.14μCi[γ-33-P]-腺苷三磷酸的孵育緩沖液)，將所得混合物輕輕振蕩，然后在室溫下孵育60分鐘。
然后，向各孔加入150μl終止溶液，終止溶液中含有0.8mg/孔的蛋白質A-PVT SPA珠粒(Amersham)、20pM/孔的抗谷胱甘肽轉移酶、兔IgG(得自Molecular Probes)、61mM EDTA和50mM HEPES(pH 7.5)(含有0.05％疊氮化鈉)。
各板用Topseal-S板密封器(plate sealer)密封，放置2小時后離心(2500rpm，1124xg)5分鐘。各板用Topcount讀數，30秒鐘/孔。
孵育緩沖液用來稀釋含有50mM HEPES pH7.5、10mM MnCl2、1mM DTT、100μM釩酸鈉、100μM NaF、10mM甘油磷酸鈉、BSA(1mg/ml終濃度)的酶與底物的混合物。
試驗底物在該項測定中，僅使用與GST tag融合的成視網膜細胞瘤蛋白部分(Science 1987年3月13日，235(4794)1394-1399；Lee W.H.，Bookstein R.，Hong F.，Young L.J.，Shew J.Y.，Lee E.Y.)。將編碼氨基酸379-928(得自成視網膜細胞瘤質粒ATCC pLRbRNL)的成視網膜細胞瘤基因進行PCR，將該序列克隆至pGEx 2T融合載體(Smith D.B.和Johnson，K.S.Gene 67，31(1988))；該載體包含用于誘導型表達的tac啟動子、用于任何大腸桿菌(E.Coli)宿主中的內部lac Iq基因和用于凝血酶切割的編碼區(qū)(得自Pharmacia Biotech)，用來擴增氨基酸792-928。再將該序列克隆至pGEx 2T。
用標準誘導型表達技術，將所得成視網膜細胞瘤792-928序列在大腸桿菌(BL21(DE3)pLysS細胞)中進行表達，按如下方法純化。
將大腸桿菌糊狀物重懸浮于10ml/g NETN緩沖液(50mM Tris pH7.5、120mM NaCl、1mM EDTA、0.5％(體積/體積)NP-40、1mMPMSF、1μg/ml亮抑肽酶、1μg/ml抑蛋白酶肽和1μg/ml抑胃酶肽)，用超聲處理(2x45秒鐘/100ml勻漿液)。離心后，將上清液加樣至10ml谷胱甘肽瓊脂糖凝膠柱(Pharmacia Biotech，Herts，UK)中，用NETN緩沖液洗滌。用激酶緩沖液(50mM HEPES pH 7.5、10mMMgCl2、1mM DTT、1mM PMSF、1μg/ml亮抑肽酶、1μg/ml抑蛋白酶肽和1μg/ml抑胃酶肽)洗滌后，蛋白質用50mM還原谷胱甘肽的激酶緩沖液洗脫。合并含有GST-Rb(792-927)的部分，用激酶緩沖液透析過夜。用8-16％Tris-甘氨酸凝膠(Novex，San Diego，USA)，用十二烷基硫酸鈉(SDS)PAGE(聚丙烯酰胺凝膠)電泳對最終產物進行分析。
CDK2和細胞周期蛋白E 用HeLa細胞和活化T細胞mRNA作為模板，通過反轉錄酶-PCR分離出CDK2和細胞周期蛋白E的可讀框，并克隆至昆蟲表達載體pVL1393(得自Invitrogen 1995目錄號V1392-20)。然后在昆蟲SF21細胞系統(tǒng)(得自草地貪夜蛾(Fall Army Worm)卵巢組織的草地貪夜蛾(Spodoptera Frugiperda)細胞-市售產品)中，使CDK2和細胞周期蛋白E進行雙重表達[應用標準病毒Baculogold共感染技術]。
產生細胞周期蛋白E/CDK2的實施例下面的實施例提供在SF21細胞(TC100+10％FBS(TCS)+0.2％聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物(Pluronic)溶液)中產生細胞周期蛋白E/CDK2的詳細說明，對于每個病毒的細胞周期蛋白E和CDK2，雙重感染的MOI為3。
將在滾瓶培養(yǎng)物中生長至2.33x106細胞/ml的SF21細胞按0.2x10E6細胞/ml接種到10x500ml滾瓶內。將滾瓶放入滾瓶裝置(28℃)內孵育。
3天(72小時)后，對細胞進行計數，測得兩個滾瓶的平均值為1.86x10E6細胞/ml(99％為活細胞)。用雙病毒感染培養(yǎng)物，每個病毒MOI為3。
將病毒混勻后加到培養(yǎng)物中，并將該培養(yǎng)物放回滾瓶裝置(28℃)內。
在感染后2天(48小時)之后，收獲了5升培養(yǎng)物。收獲時，統(tǒng)計的細胞總數為1.58x10E6細胞/ml(99％為活細胞)。將細胞放在Heraeus Omnifuge 2.0 RS中按每份250ml于4℃以2500rpm離心30分鐘。棄去上清液。
CDK2和細胞周期蛋白E的部分共純化將Sf21細胞重懸浮于裂解緩沖液(50mM Tris pH 8.2、10mMMgCl2、1mM DTT、10mM甘油磷酸、0.1mM原釩酸鈉、0.1mMNaF、1mM PMSF、1μg/ml亮抑肽酶和1μg/ml抑蛋白酶肽)，在10ml杜恩斯勻漿器(Dounce homgeniser)中勻漿2分鐘。離心后，將上清液加樣至Poros HQ/M 1.4/100陰離子交換柱(PE Biosystems，Hertford，UK)中。從0M NaCl開始，按0-1M NaCl的梯度(在沒有蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液過柱)經20個柱體積，將CDK2和細胞周期蛋白E共洗脫。用抗CDK2抗體和抗細胞周期蛋白E抗體(Santa CruzBiotechnology，California，US)，通過蛋白質印跡檢測共洗脫物。
可以用類推的方法，設計創(chuàng)建評價CDK1和CDK4抑制的測定法。CDK2(EMBL檢索號X62071)可與細胞周期蛋白A或細胞周期蛋白E(參見EMBL檢索號M73812)一起使用，這種測定法的更多詳細資料見PCT國際申請?zhí)朩O99/21845，有關該項申請的生化與生物學評價部分通過引用結合到本文中。
盡管式(I)化合物的藥理性質隨結構變化而變化，但是一般而言，式(I)化合物所具有的活性可用IC50濃度或劑量表示，范圍為250μM～1nM。
當用上述體外測定法測試時，測出實施例14的CDK2抑制活性為IC50＝3nM。
體內活性可以通過標準技術，例如通過測定對細胞生長的抑制，評價細胞毒性，對本發(fā)明化合物的體內活性進行評價。
可以用使蛋白質染色的熒光染料磺基羅丹明B(SulforhodamineB，SRB)使細胞染色，來測定細胞生長的抑制，因此得到孔中蛋白質含量的估計值(即細胞)(參見Boyd，M.R.(1989)Status of the NCIpreclinical antitumour drug discovery screen(美國國家癌癥研究所臨床前抗腫瘤藥物發(fā)現篩選的現狀)，Prin.Prac Oncol 101-12)。因此，下面為測定細胞生長抑制的詳細資料按100ml的體積，將細胞接種在96孔板中合適的培養(yǎng)基內；對于MCF-7、SK-UT-1B和SK-UT-1，培養(yǎng)基可為Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基?？梢允辜毎N壁生長過夜，然后，按不同濃度加入抑制劑化合物的DMSO溶液，DMSO最高濃度為1％(體積/體積)?？蓽y定對照板以得到給藥前的細胞值?？蓪⒓毎?7℃(5％CO2)下孵育3天。
第三天結束時，將TCA加到各板中使終濃度為16％(體積/體積)?？蓪逶?℃下孵育1小時，取出上清液，各板用自來水沖洗。干燥后，可在37℃下加入100ml SRB染料(0.4％SRB的1％乙酸溶液)30分鐘。除去過量SRB，各板用1％乙酸洗滌?？捎?0mMTris pH7.5使與蛋白質結合的SRB增溶，并在室溫下振蕩30分鐘。可在540nm下讀取OD，從抑制劑濃度對吸光度的半對數圖中確定引起50％生長抑制的抑制劑濃度。光密度減少至在實驗開始接種細胞時所獲得的光密度以下時的化合物濃度，可作為毒性值。
當用SRB測定法測試時，本發(fā)明化合物典型的IC50值應當在1mM-1nM范圍內。
本發(fā)明又一方面提供藥物組合物，該組合物包含如上文定義的式(I)嘧啶衍生物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，以及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
組合物可為適于口服給藥的形式(例如作為片劑或膠囊劑)，適用于胃腸外注射(包括靜脈內、皮下、肌內、血管內或輸注)的形式(作為無菌溶液劑、混懸劑或乳劑)，作為軟膏劑或乳膏劑適用于局部給藥的形式或者作為栓劑適用于直腸給藥的形式。
一般而言，可以通過常規(guī)方法，采用常用的賦形劑，制備上述組合物。
通常按每平方米動物體表面積5-5000mg(即約0.1-100mg/kg)的單位劑量范圍內給予溫血動物式(I)化合物，這通常提供治療上有效的劑量。單位劑型(例如片劑或膠囊劑)通常將含有例如1-250mg的活性成分。優(yōu)選采用1-50mg/kg范圍的日用量。然而日用量必將根據待治療宿主、具體的給藥途徑和待治療疾病的嚴重程度而變化。因此，可以由治療任何具體患者的醫(yī)師確定最佳劑量。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，用于通過療法治療人體或動物體的方法。
我們發(fā)現，本發(fā)明所限定的化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯是有效的細胞周期抑制劑(抗細胞增殖劑)，我們認為該性能起因于CDK抑制性質。因此，預期本發(fā)明化合物用于治療單獨或部分由CDK酶介導的疾病或醫(yī)學病癥，也就是說，所述化合物可以用于在需要這種治療的溫血動物體內產生CDK抑制作用。因此，本發(fā)明的化合物提供用于治療惡性腫瘤細胞增殖的方法，該方法以抑制CDK酶為特征，也就是說所述化合物可以用于產生單獨或部分由抑制CDK介導的抗增殖和可能的凋亡作用。特別是通過抑制CDK2、CDK4和/或CDK6，尤其是通過抑制CDK2阻止進入S期或者通過S期的進程，以及通過抑制CDK1抑制進入M期或者通過M期的進程，產生抑制作用。凋亡作用還包括通過抑制CDK1、CDK7、CDK8，特別是抑制CDK9下調RNA聚合酶II活性。預期本發(fā)明這類化合物具有多種抗癌性質，因為CDK涉及許多普遍的人類癌癥，例如白血病和乳腺癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌和卵巢癌。因此，預期本發(fā)明化合物將具有抗這些癌癥的抗癌活性。另外還預期本發(fā)明化合物將具有抗各種白血病、淋巴惡性腫瘤和實體瘤的活性，例如各種組織(例如肝、腎、前列腺和胰腺)中的癌和肉瘤。具體地講，預期本發(fā)明的這些化合物有利地減緩原發(fā)性實體瘤和復發(fā)性實體瘤(例如結腸癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌和皮膚癌)的生長。更具體地講，預期本發(fā)明這些化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，抑制與CDK相關的原發(fā)性實體瘤和復發(fā)性實體瘤的生長，尤其抑制其生長和擴散十分依賴于CDK的腫瘤生長，該腫瘤包括例如某些結腸腫瘤、乳腺腫瘤、前列腺腫瘤、肺腫瘤、外陰腫瘤和皮膚腫瘤。
另還預期本發(fā)明化合物在多種其它疾病中具有抗其它細胞增殖疾病的活性，所述其它疾病包括白血病、纖維增殖性和分化性疾病、牛皮癬、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈粥樣硬化、動脈再狹窄、自身免疫病、急性和慢性炎癥、骨病和伴有視網膜血管增生的眼部疾病。
因此，本發(fā)明這一方面提供用作藥物的如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于產細胞周期抑制作用的藥物中的用途。
本發(fā)明一方面，其中細胞周期抑制作用是指抑制CDK1。本發(fā)明又一方面，這是指抑制CDK2。本發(fā)明又一方面，這是指抑制CDK4。本發(fā)明又一方面，這是指抑制CDK5。本發(fā)明又一方面，這是指抑制CDK6。本發(fā)明又一方面，這是指抑制CDK7。本發(fā)明又一方面，這是指抑制CDK8。本發(fā)明又一方面，這是指抑制CDK9。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于產生抗細胞增殖作用的藥物中的用途。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于產生CDK2抑制作用的藥物中的用途。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于治療以下疾病的藥物中的用途白血病或淋巴惡性腫瘤或乳腺癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、肝癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌、外陰癌、皮膚癌或卵巢癌。
根據本發(fā)明又一特征，提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于治療以下疾病的藥物中的用途癌癥、纖維增殖性和分化性疾病、牛皮癬、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈粥樣硬化、動脈再狹窄、自身免疫病、急性和慢性炎癥、骨病和伴有視網膜血管增生的眼部疾病。
本發(fā)明又一方面提供在需要這種治療的溫血動物體內產生細胞周期抑制作用的方法，該方法包括給予所述動物有效量的如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明又一方面提供在需要這種治療的溫血動物體內產生抗細胞增殖作用的方法，該方法包括給予所述動物有效量的如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明又一方面提供在需要這種治療的溫血動物體內產生CDK2抑制作用的方法，該方法包括給予所述動物有效量的如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明又一方面提供在治療需要這種治療的溫血動物的癌癥的方法，該方法包括給予所述動物有效量的如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明又一方面提供治療需要這種治療的溫血動物的白血病或淋巴惡性腫瘤或以下癌癥的方法乳腺癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、肝癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌、外陰癌、皮膚癌或卵巢癌，該方法包括給予所述動物有效量的如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明又一方面提供治療需要這種治療的溫血動物的以下疾病的方法癌癥、纖維增殖性和分化性疾病、牛皮癬、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈粥樣硬化、動脈再狹窄、自身免疫病、急性和慢性炎癥、骨病和伴有視網膜血管增生的眼部疾病，所述方法包括給予所述動物有效量的如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明又一方面提供藥物組合物，所述組合物包含如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明又一方面提供用作藥物的藥物組合物，所述組合物包含如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明又一方面提供用于產生細胞周期抑制作用的藥物組合物，所述組合物包含如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明又一方面提供用于產生抗細胞增殖作用的藥物組合物，所述組合物包含如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明又一方面提供用于產生CDK2抑制作用的藥物組合物，所述組合物包含如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明又一方面提供用于治療癌癥的藥物組合物，所述組合物包含如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明又一方面提供用于治療白血病或淋巴惡性腫瘤或癌癥的藥物組合物，所述組合物包含如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯及藥學上可接受的稀釋劑或載體，所述癌癥包括乳腺癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、肝癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌、外陰癌、皮膚癌或卵巢癌。
本發(fā)明又一方面提供用于治療以下疾病的藥物組合物，所述組合物包含如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯及藥學上可接受的稀釋劑或載體，所述疾病包括癌癥、纖維增殖性和分化性疾病、牛皮癬、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈粥樣硬化、動脈再狹窄、自身免疫病、急性和慢性炎癥、骨病和伴有視網膜血管增生的眼部疾病。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在產生細胞周期抑制作用中的用途。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在產生抗細胞增殖作用中的用途。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在產生CDK2抑制作用中的用途。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在治療癌癥中的用途。
本發(fā)明又一方面提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在治療白血病或淋巴惡性腫瘤或以下疾病中的用途乳腺癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、肝癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌、外陰癌、皮膚癌或卵巢癌。
根據本發(fā)明又一特征，提供如上文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在治療以下疾病中的用途癌癥、纖維增殖性和分化性疾病、牛皮癬、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈粥樣硬化、動脈再狹窄、自身免疫病、急性和慢性炎癥、骨病和伴有視網膜血管增生的眼部疾病。
通過抑制重要的S期起動活性(例如CDK2啟動)阻止細胞進入DNA合成，還可以用于保護體內正常細胞不受周期特異性藥物的毒性。抑制CDK2或CDK4將阻止正常細胞進入細胞周期的進程，這可能限制在S期、G2或有絲分裂中起作用的周期特異性藥物的毒性。這些保護可以產生預防通常與這些藥物有關的脫發(fā)的作用。
因此，本發(fā)明又一方面提供用作細胞保護藥(cell protective agent)的如上定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
因此，本發(fā)明又一方面提供用于防止由于用藥物治療惡性腫瘤病癥而造成脫發(fā)的如上定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
已知引起脫發(fā)的治療惡性腫瘤病癥藥物的實例包括烷化劑例如異環(huán)磷酰胺和環(huán)磷酰胺；抗代謝藥例如甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、吉西他濱和阿糖胞苷；長春花屬生物堿和類似物例如長春新堿、長春堿、長春地辛、長春瑞濱；紫杉烷類例如紫杉醇和多西他賽；拓撲異構酶I抑制劑例如伊立替康和托泊替康；細胞毒性抗生素例如多柔比星、柔紅霉素、米托蒽醌、放線菌素D和絲裂霉素和其它藥物例如依托泊苷和維A酸。
本發(fā)明另一方面，式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，可與上述一種或多種藥物聯(lián)合給藥。在這種情況下，可以通過系統(tǒng)性方法或非系統(tǒng)性方法給予式(I)化合物。特別是可通過非系統(tǒng)性方法給予式(I)化合物，例如局部給藥。
因此，按本發(fā)明另一特征，提供在用藥物治療溫血動物(例如人)的一種或多種惡性腫瘤病癥期間防止脫發(fā)的方法，該方法包括給予所述動物有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
按本發(fā)明另一特征，提供在用藥物治療溫血動物(例如人)的一種或多種惡性腫瘤病癥期間防止脫發(fā)的方法，該方法包括以同時、序貫或單獨給予有效量的所述藥物的方式，給予所述動物有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
本發(fā)明又一方面提供用于防止由于用藥物治療惡性腫瘤病癥而造成的脫發(fā)的藥物組合物，所述組合物包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，以及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明又一方面提供藥盒，所述藥盒包括式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，以及已知引起脫發(fā)的用于治療惡性腫瘤病癥的藥物。
本發(fā)明又一方面提供藥盒，該藥盒包括 a)第一單位劑型的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯； b)第二單位劑型的已知引起脫發(fā)的用于治療惡性腫瘤病癥的藥物；和 c)裝有第一劑型和第二劑型的包裝物。
按照本發(fā)明另一特征，提供式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于在用藥物治療惡性腫瘤病癥期間防止脫發(fā)的藥物中的用途。
本發(fā)明又一方面提供用于防止脫發(fā)的聯(lián)合療法，該療法包括給予溫血動物(例如人)有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，任選的藥學上可接受的稀釋劑或載體，以及同時、序貫或單獨給予有效量的用于治療惡性腫瘤病癥的藥物。
如上所述，治療性或預防性治療具體細胞增殖疾病所需的劑量大小必將根據待治療宿主、給藥途徑和待治療疾病的嚴重程度而變化。預期單位劑量范圍為例如1-100mg/kg，優(yōu)選1-50mg/kg。
如上定義的CDK抑制活性可以用作單一療法，或者除本發(fā)明化合物以外，可以包括一種或多種其它物質和/或治療。這種治療可以通過同時、序貫或單獨給予治療的各個組分來實現。在內科腫瘤學領域，應用不同形式的治療組合來治療各個癌癥患者是常規(guī)作法。在內科腫瘤學中，除如上定義的細胞周期抑制治療外，這種治療的其它組成可為手術、放射療法或化學療法。這種化學療法可以包括三個主要類別的治療藥 (i)通過與如上定義的相同或不同的機制起作用的其它細胞周期抑制藥； (ii)細胞生長抑制劑，例如抗雌激素藥(例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和艾多昔芬(iodoxyfene))、孕激素藥(例如醋酸甲地孕酮)、芳香酶抑制劑(例如阿那曲唑、來曲唑、伏氯唑(vorazole)和依西美坦)、抗孕激素藥、抗雄激素藥(例如氟他胺、尼魯米特、比卡魯胺和醋酸環(huán)丙孕酮)、LHRH激動劑和拮抗劑(例如醋酸戈舍瑞林、亮丙瑞林)、睪酮5α-二氫還原酶抑制劑(例如非那雄胺)、抗侵襲劑(例如金屬蛋白酶抑制劑如馬立馬司他和尿激酶纖溶酶原激活物受體功能抑制劑)和生長因子功能抑制劑(這些生長因子包括例如血小板衍生生長因子和肝細胞生長因子，這些抑制劑包括生長因子抗體、生長因子受體抗體、酪氨酸激酶抑制劑和絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑)；和 (iii)醫(yī)學腫瘤學中使用的其它抗增殖/抗腫瘤藥物及其組合，例如抗代謝藥(例如抗葉酸藥如甲氨蝶呤、氟嘧啶如5-氟尿嘧啶、嘌呤和腺苷類似物、阿糖胞苷)；抗腫瘤抗生素(例如蒽環(huán)類如多柔比星、道諾霉素、表柔比星和伊達比星、絲裂霉素C、放線菌素D、普卡霉素)；鉑衍生物(例如施鉑錠、卡鉑)；烷化劑(例如氮芥、美法侖、苯丁酸氮芥、白消安、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、亞硝基脲、塞替派)；抗有絲分裂藥(例如長春花屬生物堿如長春新堿和紫杉醇類如泰素、泰索帝)；拓撲異構酶抑制劑(例如表鬼臼毒素類如依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、托泊替康)。本發(fā)明這一方面提供用于聯(lián)合治療癌癥的藥物產品，所述產品包含如上文定義的式(I)化合物和如上文定義的其它抗腫瘤物質。
除治療藥物用途外，式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽也可在體外和體內測試體系的開發(fā)和標準化中用作藥理學工具，所述測試系統(tǒng)用于評價各種抑制劑對實驗室動物(例如貓、狗、兔、猴、大鼠和小鼠)的細胞周期活性的作用，是尋找新型治療藥物的組成部分。
在上述其它藥物組合物中，步驟、方法、用途和藥物制備特征，也同樣適用于本文所述本發(fā)明化合物備選和優(yōu)選的實施方案。
實施例現在，通過下面非限制性實施例對本發(fā)明進行說明，除非另有說明，否則 (i)溫度以攝氏溫度(℃)表示；在室溫或環(huán)境溫度下，即在18-25℃的溫度范圍內進行操作； (ii)有機溶液經無水硫酸鎂干燥；在高達60℃的浴溫下用旋轉蒸發(fā)器減壓(600-4000帕斯卡；4.5-30毫米汞柱)蒸發(fā)溶劑； (iii)色譜法是指硅膠快速色譜法；薄層色譜法(TLC)在硅膠板上進行； (iv)一般而言，反應進程用TLC跟蹤，反應時間僅用于說明； (v)最終產物具有令人滿意的質子核磁共振(NMR)譜和/或質譜數據； (vi)所給出的收率僅用以說明目的，不一定是通過過多實驗所能獲得的收率；如需要更多原料可重復制備； (vii)當給出的NMR數據為主要特征質子的δ值形式時，以相對于四甲基硅烷(TMS)內標的百萬分之幾(ppm)給出，除非另有說明，否則就用全氘二甲亞砜(DMSO-d6)作溶劑在300MHz進行測定； (viii)化學符號具有其通用含義；采用SI單位和符號； (ix)溶劑比以體積∶體積(體積/體積)給出；和 (x)質譜(MS)操作中采用70電子伏特的電子能，化學電離(CI)模式，使用直接暴露探頭；其中所述電離通過電子碰撞(EI)、快速原子轟擊(FAB)或電噴霧(ESP)實現；給出了m/z值；一般說來，僅報告指示母體質量的離子；除非另有說明，否則給出的質量離子為MH+； (xi)除非另有說明，否則沒有拆分包含不對稱取代碳原子和/或硫原子的化合物； (xii)當指出某個合成類似于前面實施例介紹的合成時，各原料用量的毫摩爾比與前面實施例使用的毫摩爾比相同；和 (xvi)使用下列縮寫詞 THF 四氫呋喃； DMF N，N-二甲基甲酰胺； EtOAc 乙酸乙酯； MeOH甲醇； ether 乙醚； EtOH乙醇； DCM 二氯甲烷； DMSO二甲亞砜； Pd2(dba)3 雙(二亞芐基丙酮)合鈀； BINAP 2，2’-雙(二苯膦基)-1，1’-聯(lián)萘； TEA 三乙胺； EDTA乙二胺四乙酸； HBTU六氟磷酸O-雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓； DIPEA N，N-二異丙基乙胺； DMFDMA N，N-二甲基甲酰胺縮二甲醇； HPLC高效液相色譜法； MPLC中壓液相色譜法； RPHPLC 反相高效液相色譜法；和 Xantphos 9，9-二甲基-4，5-雙(二苯膦基)呫噸； xvii)當提及SCX-2柱時，是指用于吸附堿性化合物的“離子交換”萃取柱柱體，也就是說，含有基于強陽離子交換吸附劑的苯磺酸的聚丙烯管，按照生廠商的說明書使用(得自International SorbentTechnologies Limited，Dyffryn Business Park，Hengeod，Mid Glamorgan，UK，CF82 7RJ)。
實施例1 5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-[4-(嗎啉-4-基羰基)苯基]嘧啶-2-胺在惰性氣氛下，將5-氟-4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺(方法2，0.20g，0.85mmol)、乙酸鈀(8mg，0.034mmol)、Xantphos(30mg，0.051mmol)、碳酸銫(0.42g，1.3mmol)和(4-碘-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮(WO 05/044814的方法16a；290mg，0.90mmol)加到二噁烷(7ml)中，加熱回流6小時。用硅膠純化(用0-10％MeOH的DCM溶液為洗脫劑)，得到標題化合物，為黃色固體。用RPHPLC完成進一步純化，得到無色泡沫狀物(292mg，81％)。NMR(400.132MHz)9.78(s，1H)，8.59(d，1H)，7.73(d，2H)，7.38-7.36(m，3H)，5.43(七重峰，1H)，3.64-3.56(m，4H)，3.54-3.46(m，4H)，2.53(s，3H)，1.45(d，6H)；m/z425。
實施例2-115 下列化合物按實施例1的方法用合適的原料制備。
實施例135 5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]苯基}嘧啶-2-胺鹽酸鹽將5-氟-4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺(方法2，64mg，0.272mmol)、1-(4-溴苯甲?；?-4-甲基哌嗪(WO 03/004472的實施例59；92mg，0.325mmol)、BINAP(51mg，0.082mmol)和叔丁醇鈉(31mg，0.323mmol)與1，4-二噁烷(2.0ml)混勻?；旌衔镏型ㄈ霘鍤?分鐘，然后加入Pd(OAc)2(9.1mg，0.045mmol)，再次通入氬氣。將密封管中的反應混合物放入微波反應器于110℃加熱30分鐘。真空蒸發(fā)溶劑，使殘余物在DCM和稀的NaHCO3(水溶液)之間分配。水相用DCM萃取，合并的有機相經干燥(Na2SO4)，過濾后蒸發(fā)。粗制的游離堿用制備型HPLC純化，然后溶于DCM，加入0.1M HCl的乙醚溶液(2當量HCl)，從溶液中析出產物的鹽酸加成產物。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于水，冷凍干燥，得到標題化合物(43mg，36％，固體)。NMR(D2O)8.54(d，J＝2.0Hz，1H)，7.79(d，J＝2.0Hz，1H)，7.63(d，J＝8.8Hz，2H)，7.48(d，J＝8.6Hz，2H)，5.39-5.26(m，1H)，4.29-3.83(m，2H)，3.79-3.33(m，4H)，3.32-3.09(m，2H)，2.95(s，3H)，2.79(s，3H)，1.52(d，J＝6.8Hz，6H)；MS(ESI)m/z 437。
實施例136 5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-{3-甲氧基-4-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]苯基}嘧啶-2-胺鹽酸鹽將5-氟-4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺(方法2，49.8mg，0.212mmol)、1-(4-氯-2-甲氧基苯甲?；?-4-甲基哌嗪(方法11，45mg，0.167mmol)、碳酸銫(110mg，0.338mmol)與無水1，4-二噁烷(2ml)混勻，混合物中通入氬氣5分鐘后，加入Pd2(dba)3(9.3mg，0.010mmol)和Xantphos(11.3mg，0.024mmol)。向混合物中通入氬氣，然后在密封管中于90℃加熱過夜。真空除去溶劑，將殘余物溶于DCM，用稀的NaHCO3(水溶液)洗滌。有機層經干燥(Na2SO4)，過濾后蒸發(fā)。粗制的游離堿用制備型HPLC純化，然后溶于DCM，加入0.1M HCl的乙醚溶液(2當量HCl)，從溶液中析出產物的鹽酸加成產物。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于水，冷凍干燥，得到標題化合物(60mg，53％，固體)。NMR11.38(br s，1H)，10.06(s，1H)，8.85(d，J＝2.0Hz，1H)，8.12(d，J＝1.8Hz，1H)，7.49(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，7.39(s，1H)，7.20(d，J＝8.3Hz，1H)，5.30-5.15(m，1H)，4.58(d，J＝13.3Hz，1H)，3.81(s，3H)，3.57-3.13(m，6H)，3.13-2.87(m，2H)，2.82(s，3H)，2.79(br s，3H)，1.51(d，J＝7.0Hz，6H)；m/z(ESI)468。
實施例137-138 下列化合物按實施例136的方法用合適的原料制備。
1Prasad，R.N.等，J.Med.Chem.1968，6，1144-1150 實施例139 5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-[4-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]-3-(甲磺酰基)苯基]嘧啶-2-胺鹽酸鹽將無水1，4-二噁烷(2ml)加到5-氟-4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺(方法2，52mg，0.22mmol)、1-[4-溴-2-(甲磺酰基)苯甲?；鵠-4-甲基哌嗪(Bruce，R.B.等，J.Med.Chem.1968，5，1031-1034；71.0mg，0.197mmol)和叔丁醇鈉(30.9mg，0.32mmol)中。向混合物中通入氬氣，加入Pd(OAc)2(2mg，0.009mmol)和Pd(t-Bu3P)2(6.1mg，0.012mmol)后再一次通入氬氣。將密封管中的混合物于120℃加熱。攪拌過夜后，加入Pd(t-Bu3P)2(12.4mg，0.024mmol)，再過24小時后加入以下試劑CsCO3(107mg，0.33mmol)、X-Phos(11.3mg，0.024mmol)和Pd2(dba)3(11.1mg，0.012mmol)。將所得混合物在90℃油浴中加熱20小時?；旌衔锝涍^硅藻土過濾后，用EtOAc洗滌。有機相用水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾后真空蒸發(fā)。殘余物用快速色譜法純化(梯度為MeCN/5％TEA的MeCN溶液；0-5％TEA的MeCN溶液)。將含有產物的部分合并在一起，真空蒸發(fā)。將殘余物溶于DCM，有機相用EDTA(水溶液，pH 1)洗滌。EDTA(水溶液)相用NaHCO3(水溶液)中和(pH 7)，產物用DCM萃取。有機相經干燥(Na2SO4)，過濾后真空蒸發(fā)。將殘余物溶于DCM/乙醚(1∶1，10ml)，經滴加1M HCl的乙醚溶液(2.0當量)，使標題化合物析出。經過濾收集沉淀物，用DCM漂洗，溶于水后，冷凍干燥，得到標題化合物(96mg，74％，黃色固體)。NMR11.47-11.25(m，1H)，10.41(s，1H)，8.90(d，J＝1.5Hz，1H)，8.30(s，1H)，8.21(d，J＝8.5Hz，1H)，8.12(s，1H)，7.52(d，J＝8.0Hz，1H)，5.29-5.12(m，1H)，4.64-4.48(m，1H)，3.62-3.04(m，6H)，2.84-2.71(m，7H)，2.76(br s，4H)，1.52(d，J＝7.0Hz，6H)；MS(ESI)m/z 516。
實施例140 5-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}-2-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]芐腈在惰性氣氛下，將4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺(方法14，0.20g，0.92mmol)、PdOAc2(16mg，0.068mmol)、Xantphos(60mg，0.10mmol)、碳酸銫(0.42g，1.3mmol)和5-氯-2-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-芐腈(方法13，0.32g，1.20mmol)加到二噁烷(7ml)中，用微波于150℃加熱1小時。用硅膠快速色譜法純化(用0-10％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到所需化合物，為黃色泡沫狀物。用RPHPLC進一步純化，得到所需化合物(204mg，50％，無色泡沫狀物)。NMR(400.132MHz)9.95(s，1H)，8.49(d，1H)，8.26(s，1H)，8.01(d，1H)，7.48(d，1H)，7.46(s，1H)，7.17(d，1H)，5.60(七重峰，1H)，3.70-3.58(m，2H)，3.32-3.22(m，2H)，2.51(s，3H)，2.42-2.27(m，4H)，2.20(s，3H)，1.48(d，6H)；m/z 445。
實施例141-144 下列化合物按實施例137的方法用合適的原料制備。
實施例145 [(2S)-1-(4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲?；?吡咯烷-2-基]甲醇向4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸鈉鹽(方法50；240mg)與DMF(8ml)攪拌的懸浮液中加入HBTU(257mg)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌20分鐘，然后加入L-脯氨醇(81mg)。將混合物在室溫下攪拌18小時，然后用EtOAc(80ml)稀釋，用2N NaOH(80ml)洗滌后，水層再次用EtOAc(80ml)萃取。真空濃縮有機物，然后殘余物用反相制備型HPLC純化。將含有產物的部分注入10g SCX-2柱中，用Me0H洗滌，然后用甲醇/氨(methanolic ammonia)洗脫。蒸發(fā)堿性洗脫液，得到標題化合物(177mg，63％，白色固體)。NMR(300.074MHz)9.65(s，1H)，8.42(d，1H)，7.74(d，2H)，7.46-7.43(m，3H)，7.08(d，1H)，5.71-5.64(m，1H)，4.75(br s，1H)，4.16-4.08(m，1H)，3.56-3.34(m，4H)，2.50(s，3H)，1.94-1.82(m，3H)，1.75-1.64(m，1H)，1.46(d，6H)；m/z 421。
實施例146-174 下列化合物按實施例145的方法用合適的酸和胺原料制備。
實施例175 N-(4-{[4-(氨甲基)哌啶-1-基]羰基}苯基)-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺向4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸鈉鹽(方法50；240mg)與DMF(8ml)攪拌的懸浮液中加入HBTU(257mg)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌20分鐘，然后加入(叔丁氧羰基-4-氨甲基)哌啶(81mg)。將混合物在室溫下攪拌18小時，然后用EtOAc(80ml)稀釋，用2N NaOH(80ml)洗滌后，水層再用EtOAc(80ml)萃取。真空濃縮有機物，然后殘余物用反相制備型HPLC純化。將含有產物的部分注入10g SCX-2柱中，用MeOH洗滌，然后用甲醇/氨洗脫。蒸發(fā)堿性洗脫液，得到白色固體。將該固體溶于MeOH(1ml)后，加入氯化氫的二噁烷溶液(4M，4ml)。將該溶液在環(huán)境溫度下攪拌3小時，然后真空濃縮。將所得固體溶于MeOH，并加到10g SCX-2柱上。柱子用MeOH洗滌后用甲醇/氨洗脫。蒸發(fā)堿性洗脫液，得到標題化合物(85mg，30％，白色固體)。NMR(399.902MHz).8.46(s，1H)，8.41(d，1H)，7.79(d，2H)，7.74(d，2H)，7.37(s，1H)，7.05(d，1H)，5.65-5.58(m，1H)，3.20-3.10(m，4H)，3.09-2.95(m，2H)，2.58-2.51(m，2H)，2.50(s，3H)，1.72-1.63(m，3H)，1.49(d，6H)，1.21-1.11(m，2H)；m/z 434。
實施例176-178 下列化合物按實施例175的方法用合適的原料制備。
實施例179-199 實施例179-199按下列通用方法制備將4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸鋰鹽(方法106；2.47g)和HBTU(2.73g)與無水DMF(97ml)一起在環(huán)境溫度下攪拌1小時。將等分的4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸鋰鹽和所配的HBTU/DMF溶液(2ml)加到相應的胺(0.18mmol)中后加入DIPEA(0.45mmol)。將所得溶液在環(huán)境溫度下渦旋66小時。將DMF溶液真空濃縮后溶于DCM，與碳酸氫鈉水溶液一起渦旋。分離有機層后真空濃縮。用RPHPLC純化，得到標題化合物。
實施例200 [4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮將(3R)-1-(4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酰基)吡咯烷-3-醇(實施例173；3.8g)和TEA(1.92ml)加到DCM中，使反應混合物冷卻至0℃(冰浴)后，慢慢加入甲磺酰氯(0.781ml)。將反應混合物攪拌1小時后，加入水(50ml)，然后用DCM(3×100ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空除去溶劑。將所得固體溶于最少量的熱乙腈中，冷卻，過濾后干燥，得到標題化合物(3.6g，白色固體)。NMR 9.26(s，1H)，8.42(d，1H)，7.76(d，2H)，7.49(d，2H)，7.39(s，1H)，7.05(d，1H)，5.60(七重峰，1H)，5.31-5.27(m，1H)，3.87(dd，1H)，3.72(d，1H)，3.67-3.60(m，2H)，3.16(s，3H)，2.87(s，3H)，2.29-2.17(m，2H)，1.48(d，6H)；m/z 48。
實施例201 [4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-[(3S)-3-(嗎啉-4-基)吡咯烷-1-基]甲酮將[4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(實施例200；0.1g)和嗎啉(0.09g)的二噁烷(10ml)溶液于100℃加熱48小時。將反應混合物真空濃縮，將殘余物加到SCX-2柱(MeOH)上，用MeOH洗滌，然后用7NNH3的MeOH溶液洗脫。粗產物通過硅膠柱色譜法純化(用0-10％MeOH的DCM溶液洗脫)，得到標題化合物(0.04g，無色固體)。NMR(500.133MHz).9.22(s，1H)，8.40(d，1H)，7.73(d，2H)，7.46(d，2H)，7.37(s，1H)，7.04(d，1H)，5.60(七重峰，1H)，3.69-3.64(m，2H)，3.62-3.57(m，5H)，3.51-3.45(m，1H)，3.35(dd，1H)，2.47-2.45(m，1H)，2.40-2.34(m，2H)，2.09-2.02(m，1H)，1.83-1.75(m，1H)，1.47(d，6H)；m/z 476。
實施例202-204 下列化合物按實施例201的方法用合適的原料制備。
實施例205 [4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-[(1S，4S)-3-丙-2-基-3，6-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-6-基]甲酮將[(1S，4S)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基]-[4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]甲酮(實施例109；100mg)、

分子篩(1g)和丙酮(28mg)加到甲醇(10ml)中，攪拌10分鐘。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(66mg)，將反應物在環(huán)境溫度下攪拌66小時。再加入三乙酰氧基硼氫化鈉(33mg)和丙酮(28mg)，將反應混合物于50℃加熱16小時后，再加入三乙酰氧基硼氫化鈉(33mg)和丙酮(28mg)并加熱5小時。使反應混合物冷卻，過濾并通過SCX-2柱，依次用MeOH、3.5N NH3的MeOH溶液、7N NH3的MeOH溶液、1％TEA的MeOH溶液洗脫后，最后用2％TEA的MeOH溶液洗脫。再用RPHPLC純化，得到標題化合物(62mg，無色泡沫狀物)；NMR(500.133MHz)9.22(s，1H)，8.40(d，1H)，7.75-7.72(m，2H)，7.46-7.43(m，2H)，7.37(s，1H)，7.04(d，1H)，5.60(七重峰，1H)，4.45-4.36(m，1H)，3.68(s，1H)，3.47-3.36(m，2H)，2.99-2.96(m，1H)，2.64-2.59(m，2H)，2.50-2.48(m，3H，因被DMSO峰掩蓋而模糊)，1.75-1.69(m，2H)，1.48-1.46(m，6H)，1.02-0.99(m，6H)；m/z 460。
實施例206 [(1S，4S)-3-甲基-3，6-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-6-基]-[4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]甲酮將[(1S，4S)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基]-[4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]甲酮(實施例109；100mg)溶于MeOH(5ml)，然后加入甲醛水溶液(37％(重量)；0.22ml)，將所得溶液在環(huán)境溫度下攪拌10分鐘。一次性加入氰基硼氫化鈉(23mg)，攪拌混合物2小時。之后加入2M NaOH溶液(3ml)，攪拌反應混合物30分鐘后，用DCM(3×20ml)萃取。合并的有機物經干燥(MgSO4)，過濾后真空除去溶劑。用RPHPLC純化，然后用乙醚研磨，得到標題化合物，為無色固體；NMR(500.133MHz，DMSO)9.22(s，1H)，8.40(d，1H)，7.75-7.72(m，2H)，7.45-7.42(m，2H)，7.36(s，1H)，7.04(d，1H)，5.60(七重峰，1H)，4.44-4.35(m，1H)，3.49-3.46(m，1H)，3.39-3.35(m，2H)，2.79(d，1H)，2.67-2.64(m，1H)，2.50-2.48(m，3H，因被DMSO峰掩蓋而模糊)，2.33(s，3H)，1.80(d，1H)，1.68(d，1H)，1.48-1.46(m，6H)；m/z 432。
實施例207 [4-[[5-氟-4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-[(1S，4S)-3-甲基-3，6-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-6-基]甲酮用[(1S，4S)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基]-[4-[[5-氟-4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]甲酮(實施例131)，用實施例206的方法替換實施例109制備標題化合物。NMR(500.133MHz，DMSO)9.33(s，1H)，8.49(d，1H)，7.69(d，2H)，7.44(d，2H)，7.36(d，1H)，5.40(七重峰，1H)，4.42-4.36(m，1H)，3.49-3.45(m，1H)，3.39-3.35(m，2H)，2.79(dd，1H)，2.65(d，1H)，2.52(s，3H)，2.34(s，3H)，1.80(d，1H)，1.68(d，1H)，1.46(d，6H)；m/z 450。
實施例208 [(1S，4S)-3-(2-甲氧基乙基)-3，6-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-6-基]-[4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]甲酮將[(1S，4S)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基]-[4-[[4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]甲酮(實施例109；100mg)、2-溴乙基甲基醚(0.034ml)和TEA(0.067ml)加到DMA(5ml)中，在70℃下加熱18小時。然后使反應混合物冷卻，真空濃縮，通過快速SCX柱，依次用MeOH、7N NH3的MeOH溶液洗脫。用RPHPLC再次純化，得到標題化合物(23mg，淺黃色固體)；NMR(500.133MHz，DMSO)9.22(s，1H)，8.40(d，1H)，7.75-7.72(m，2H)，7.46-7.43(m，2H)，7.37(s，1H)，7.04(d，1H)，5.60(七重峰，1H)，4.44-4.36(m，1H)，3.59-3.53(m，2H)，3.48-3.36(m，4H)，3.26(s，3H)，2.75-2.63(m，3H)，2.50-2.48(m，3H，因被DMSO峰掩蓋而模糊)，1.79-1.67(m，2H)，1.47(d，6H)；m/z 476。
原料的制備方法1 (2Z)-3-(二甲氨基)-2-氟-1-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮在環(huán)境溫度下，在～5分鐘內向(2E)-3-(二甲氨基)-1-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(WO 03/076436的方法24；5.53g，25mmol)與MeOH(100ml)的攪拌溶液中分批加入(1-氯甲基-4-氟-1，4-重氮化二環(huán)[2.2.2]辛烷雙(四氟硼酸鹽)(14.16g，40mmol)。經稍稍冷卻使溫度保持在25-30℃。攪拌90分鐘后，使反應混合物在冰/丙酮中冷卻，過濾。將濾液減壓蒸發(fā)，將殘余物溶于DCM。用氨水、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)后減壓蒸發(fā)。標題化合物用兩條單獨的柱經硅膠MPLC分離(依次用10％EtOH/EtOAc、3.5％EtOH/DCM)，為金色黏性油狀物，靜置數周后結晶。收率＝2.50g(42％)。NMR1.40(d，6H)，2.38(s，3H)，3.05(s，6H)，4.70(七重嶧，1H)，6.96(d，1H)，7.08(s，1H)；氟NMR(376MHz)-166.7(d)；m/z 240。
方法2 5-氟-4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺將(2Z)-3-(二甲氨基)-2-氟-1-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(方法1；4.0g，16.7mmol)和碳酸胍(6.6g，37mmol)與丁醇(80ml)預混勻，加熱回流30小時。使反應物冷卻后用水(200ml)猝滅，然后反應物用DCM(2×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色固體。將該固體溶于最少量的熱DCM中，然后使之冷卻后加入乙醚?；野咨腆w析出，過濾后干燥。重復該方法，得到第二批產物(3.18g，81％)。NMR(299.954MHz，CDCl3)8.15(d，1H)，7.54(d，1H)，7.26(s，1H)，5.40(七重峰，1H)，4.88(s，2H)，2.59(s，3H)，1.56(d，6H)；m/z 236。
方法3 4-[1-異丙基-2-(甲氧基甲基)-1H-咪唑-4-基]-嘧啶-2-基胺用碳酸胍和3-(二甲氨基)-1-[1-異丙基-2-(甲氧基甲基)-1H-咪唑-5-基]丙-2-烯-1-酮(WO 03/076434的方法50)，按方法2的方法和相同的量制備標題化合物，NMR(400.132MHz，CDCl3)8.26(d，1H)，7.38(s，1H)，6.82(d，1H)，5.30(七重峰，1H)，5.14(s，2H)，4.64(s，3H)，3.39(s，3H)，1.59(d，6H)；m/z 248。
方法4 (4-溴-2-甲基-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮將溴甲基苯甲酸(10g，46.5mmol)和HBTU(23g，60.5mmol)溶于DMF(150ml)，然后加入N-甲基哌嗪(6.0g，60.5mmol)和DIPEA(21ml，121mmol)。攪拌反應物過夜后，真空除去DMF，膠狀物用2.0N NaOH(100ml)猝滅，用乙醚(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黏性膠狀物。用硅膠純化(用0-10％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到標題化合物，為黏性油狀物。將油狀物溶于最少量的乙醚，加入異己烷，得到無色固體，過濾后干燥(11.8g，86％)。NMR(CDCl3)7.40(s，1H)，7.36(d，1H)，7.04(d，1H)，3.86-3.79(m，2H)，3.27-3.21(m，2H)，2.51-2.45(m，2H)，2.32-2.29(m，8H)；m/z298。
方法5-9 用方法4所述步驟，按類似方式制備下列化合物。
方法10 1-(4-碘苯甲酰基)-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺在惰性氣氛下，將N，N-二甲基吡咯烷-3-胺(5.0g，43.8mmol)和TEA(7.3ml，52.5mmol)與THF(200ml)攪拌。在5分鐘內，分批加入4-碘苯甲酰氯(11.7g，43.8mmol)。攪拌持續(xù)另外16小時，然后真空蒸發(fā)溶劑，使殘余物在EtOAc(200ml)與1M NaOH(100ml)之間分配。有機物用水(100ml)和鹽水(100ml)洗滌，干燥并蒸發(fā)，得到標題化合物(12.3g，74％，無色固體)。NMR(400.13MHz)7.83(d，2H)，7.32(ap.t，2H)，3.75-3.58(m，1H)，3.52-3.38(m，2H)，3.31-3.16(m，1H)，2.78-2.59(m，1H)，2.18(s，3H)，2.11(s，3H)，2.10-1.98(m，1H)，1.81-1.63(m，1H)；m/z 345。
方法11 1-(4-氯-2-甲氧基苯甲?；?-4-甲基哌嗪將亞硫酰氯(5ml)加到4-氯-2-甲氧基苯甲酸(0.501g，2.68mmol)中。加入一滴無水DMF后，將反應混合物在回流下攪拌30分鐘。真空除去溶劑，將殘余物與甲苯共蒸發(fā)。將殘余物再溶于無水DCM(5ml)，依次滴加N-甲基哌嗪(0.277mg，2.77mmol)、TEA(0.28g，2.77mmol)，將所得混合物在環(huán)境溫度下攪拌15分鐘。將反應混合物稀釋(DCM)，用飽和NaHCO3(水溶液)、水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾后真空濃縮，得到定量收率的標題化合物。該產物無需進一步純化，便可用于下一步驟。NMR7.18(d，J＝8.0Hz，1H)，7.17(d，J＝2.0Hz，1H)，7.05(dd，J＝8.0，1.8Hz，1H)，3.81(s，3H)，3.67-3.51(m，2H)，3.14-3.04(m，2H)，2.38-2.27(m，2H)，2.27-2.19(m，2H)，2.18(s，3H)。
方法12 1-(4-氯-2-碘苯甲?；?-4-甲基哌嗪將4-氯-2-碘苯甲酸(0.523g，1.85mmol)溶于亞硫酰氯(2.5ml)及一滴無水DMF中。將反應混合物在回流下攪拌1小時后，蒸發(fā)過量亞硫酰氯。將殘余物溶于無水DCM(5ml)，分批加入N-甲基哌嗪(0.194g，1.94mmol)后，加入TEA(0.196g，1.94mmol)。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。然后將混合物稀釋(DCM)，用飽和NaHCO3(水溶液)洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾后真空蒸發(fā)。產物用硅膠快速色譜法純化(CHCl3/MeOH梯度；0-5％MeOH)，得到標題化合物(0.415g，61％，固體)。NMR7.97(d，J＝2.0Hz，1H)，7.54(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.26(d，J＝8.3Hz，1H)，3.69-3.53(m，2H)，3.08(t，J＝5.0Hz，2H)，2.38(t，J＝5.1Hz，2H)，2.36-2.21(m，2H)，2.19(s，3H)；MS(ESI)m/z 365。
方法13 5-氯-2-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]芐腈將1-(4-氯-2-碘苯甲?；?-4-甲基哌嗪(方法12，400mg，1.70mmol)、乙酸鋅(17.2mg，0.079mmol)、氰化鋅(109mg，0.928mmol)、鋅粉(8.0mg，0.122mmol)、Pd2(dba)3(44mg，0.048mmol)和1，1’-雙(二苯膦基)二茂鐵(117mg，0.211mmol)與無水1，4-二噁烷(1.5ml)混勻，通入氬氣。將密封管中的混合物在90-95℃下加熱45分鐘。反應混合物經過硅藻土過濾后，用EtOAc漂洗。有機相用飽和NaHCO3(水溶液)洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾后真空蒸發(fā)。粗產物用快速色譜法純化(DCM/MeOH梯度；0-5％MeOH)，得到標題化合物(280mg，62％)。NMR8.16(d，J＝2.0Hz，1H)，7.87(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.59(d，J＝8.3Hz，1H)，3.71-3.59(m，2H)，3.24-3.14(m，2H)，2.43-2.32(m，2H)，2.32-2.22(m，2H)，2.19(s，3H)；MS(ESI)m/z 264。
方法14 4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺 (2E)-3-(二甲氨基)-1-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(WO 03/076436的方法24，4.0g，18mmol)和碳酸胍(7.2g，40mmol)與2-甲氧基乙醇(80ml)預混勻，加熱回流30小時。使反應物冷卻后，用水(50ml)猝滅。反應物然后用DCM(2×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色固體。將該固體溶于最少量的熱DCM中，然后使之冷卻后加入乙醚。將析出的灰白色固體過濾后干燥。重復該方法，得到第二批產物(3.18g，81％)。NMR(299.954MHz，CDCl3)8.22(d，1H)，7.33(s，1H)，6.80(d，1H)，5.45(七重峰，1H)，5.10(s，2H)，2.56(s，3H)，1.54(d，6H)；m/z 218。
方法15 (4-氯-2-碘-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮將4-氯-2-碘苯甲酸(5.0g，17.7mmol)和HBTU(8.7g，23mmol)溶于DMF(150ml)，依次向其中加入嗎啉(2.0g，23mmol)、DIPEA(8.2ml，46mmol)。攪拌反應物過夜后，真空除去DMF，膠狀物用2.0N NaOH(100ml)猝滅，用DCM(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到褐色固體。用硅膠純化(用0-3.5％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到標題化合物(5.8g，94％，灰白色固體)。NMR(CDCl3)7.84(s，1H)，7.39(d，1H)，7.13(d，1H)，3.91-3.73(m，5H)，3.62-3.51(m，1H)，3.33-3.24(m，1H)，3.21-3.12(m，1H)；m/z 352。
方法16 5-氯-2-(嗎啉-4-羰基)-芐腈將(4-氯-2-碘-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮(方法15；5.8g，16.5mmol)、氰化銅(5.2g，58mmol)、Pd2(dba)3(0.45g，0.50mmol)、1，1’-雙(二苯膦基)二茂鐵(0.82g，1.48mmol)和Et4NCN(2.6g，15.5mmol)加到二噁烷(75ml)中，在惰性氣氛下加熱回流3小時。使反應物通過硅藻土過濾，真空除去溶劑，得到黏性褐色固體。用硅膠純化(用0-2.5％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到標題化合物，為褐色固體。將固體加到MeOH(50ml)中，加熱后進行超聲處理，所得固體過濾后干燥(3.1g，76％)。NMR(CDCl3)7.71(s，1H)，7.65(d，1H)，7.42(d，1H)，3.92-3.64(m，6H)，3.39-3.25(m，2H)；m/z 251。
方法17 (4-芐氧基-2-甲氧基-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮將4-芐氧基-2-甲氧基-苯甲酸(7.0g，27mmol)和HBTU(13.3g，35mmol)加到DMF(100ml)中，然后加入N-甲基哌嗪(3.5g，35mmol)和DIPEA(12.5ml，70mmol)。將反應物攪拌1小時后，加入2.0NaOH(100ml)，用乙醚(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色油狀物(8.5g，92％)。NMR(CDCl3)7.44-7.33(m，5H)，7.17(d，1H)，6.58(d，1H)，6.54(s，1H)，5.07(s，2H)，3.87-3.72(m，5H)，3.32-3.24(m，2H)，2.53-2.40(m，2H)，2.37-2.23(m，5H)。
方法18 (4-羥基-2-甲氧基-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮將(4-芐氧基-2-甲氧基-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮(方法17；7.0g，20.5mmol)、10％披鈀碳(0.3g)和甲酸銨(6.6g，103mmol)加到MeOH中，加熱回流1小時。真空除去溶劑，得到白色固體。加入DCM(100ml)，將其用超聲處理20分鐘，將反應物過濾，濾液干燥后真空除去溶劑，得到白色固體(5.0g)，無需進一步純化便可使用；m/z 251。
方法19 三氟-甲磺酸3-甲氧基-4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基酯將(4-羥基-2-甲氧基-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮(方法18；5.0g，20mmol)和TEA加到DCM(100ml)中后冷卻到0℃，然后慢慢加入三氟甲磺酸酐(4.4ml，26mmol)，將反應物攪拌1小時。再加入三氟甲磺酸酐(0.3當量)，持續(xù)攪拌1小時。加入水(100ml)，真空除去DCM，剩余水溶液用乙醚(2×100ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黑色油狀物。用硅膠純化(用0-2.5％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到標題化合物(4.2g，55％，黑色膠狀物)。NMR(CDCl3)7.34(d，1H)，6.94(d，1H)，6.82(s，1H)，3.97-3.89(m，2H)，3.87(s，3H)，3.44-3.31(m，2H)，2.77-2.69(m，2H)，2.62-2.54(m，2H)，2.51(s，3H)；m/z 383。
方法20 (4-芐氧基-2-甲氧基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮將4-芐氧基-2-甲氧基-苯甲酸(7.0g，27mmol)和HBTU(13.3g，35mmol)加到DMF(100ml)，向其中加入嗎啉(3.0g，35mmol)和DIPEA(12.5ml，70mmol)。將反應物攪拌1小時后，用2.0NaOH(100ml)猝滅，用乙醚(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色油狀物。(8.4g，94％)。NMR(CDCl3)7.44-7.32(m，5H)，7.19(d，1H)，6.59(d，1H)，6.53(s，1H)，5.07(s，2H)，3.80-3.69(m，7H)，3.64-3.53(m，2H)，3.32-3.20(m，2H)；m/z 328。
方法21 (4-羥基-2-甲氧基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮將(4-芐氧基-2-甲氧基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮(方法20；8.8g，27mmol)、甲酸銨(4.3g，67.2mmol)和10％披鈀碳(0.3g)加到MeOH(150ml)中，加熱回流2小時。將反應物過濾后真空除去溶劑，得到白色固體。該固體用硅膠純化(0％-5％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到標題化合物(5.1g，80％，白色固體)。NMR(400.132MHz)9.73(s，1H)，6.99(d，1H)，6.43(s，1H)，6.39(d，1H)，3.74(s，3H)，3.64-3.54(m，4H)，3.54-3.45(m，2H)，3.20-3.09(m，2H)；m/z 238。
方法22 三氟-甲磺酸3-甲氧基-4-(嗎啉-4-羰基)-苯基酯將(4-羥基-2-甲氧基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮(方法21；1.0g，4.22mmol)和2-[N，N-雙(三氟甲磺酰基)氨基]-5-氯吡啶(1.80g，4.6mmol)加到THF(30ml)中，于55℃加熱過夜。反應物用水(50ml)猝滅，用乙醚(3×50ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色油狀物。用硅膠純化(0％-1％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到標題化合物(1.4g，90％，黃色膠狀物)。NMR(CDCl3)7.34(d，1H)，6.82(d，1H)，3.88(s，3H)，3.83-3.72(m，4H)，3.66-3.57(m，2H)，3.29-3.18(m，2H)；m/z 370。
方法23 N-乙基-N-(5-甲基-異噁唑-4-基)-異丁酰胺將乙基-(5-甲基-異噁唑-4-基)-胺鹽酸鹽(15g，0.092mol)加到DCM(200ml)中，加入TEA(32ml，0.23mol)后，慢慢加入異丁酰氯(10.7g，0.10mol)。將反應物攪拌30分鐘后，真空除去溶劑。殘余物用水(150ml)處理，用乙醚(3×150ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色油狀物(12.9g，72％)。NMR(300.072MHz，CDCl3)8.14(s，1H)，3.61(q，2H)，2.46-2.37(m，4H)，1.09(t，3H)，1.03(d，6H)；m/z 197。
方法24 N-{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-N-乙基-異丁酰胺將N-乙基-N-(5-甲基-異噁唑-4-基)-異丁酰胺(方法23；15.6g，0.08mol)和10％Pd/C(3.9g)加到EtOH中，在4個大氣壓下攪拌過夜。將反應物過濾，真空除去溶劑，得到灰白色固體。加入乙醚(150ml)，將反應物用超聲處理10分鐘后，過濾并干燥。得到白色固體(11g，69％)。NMR(400.132MHz)7.57(t，1H)，6.99(brs，1H)，6.79(brs，1H)，3.39-3.31(m，3H)，2.43-2.33(m，1H)，2.09(s，3H)，0.92-0.81(m，9H)；m/z 199。
方法25 1-(3-乙基-2-異丙基-3H-咪唑-4-基)-乙酮將N-{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-N-乙基-異丁酰胺(方法24；11g，0.056mol)和NaOH(2.7g，0.067mol)加到EtOH(150ml)中，加熱回流4小時。向反應物中加入固體NH4Cl(4.4g，0.084mol)，將其攪拌過夜。將所得漿狀物真空濃縮，加入乙醚(200ml)，攪拌10分鐘后過濾。將濾液真空濃縮，得到橙色油狀物。用球對球的減壓蒸餾裝置(bulb-to-bulb distillation)(0.76mmbar/120℃)進行蒸餾，得到透明油狀物(8.2g，81％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.74(s，1H)，4.34(q，2H)，3.04(七重峰，1H)，2.44(s，3H)，1.35(d，6H)，1.32(t，3H)；m/z 181。
方法26 (E)-3-二甲氨基-1-(3-乙基-2-異丙基-3H-咪唑-4-基)-丙烯酮將1-(3-乙基-2-異丙基-3H-咪唑-4-基)-乙酮(方法25；7.0g，0.039mol)和DMFDMA(13.3ml，0.078mol)加到DMF中，在130℃下加熱6小時。真空除去溶劑，得到黑色膠狀物。將乙醚(50ml)加到膠狀物中，得到金色固體，將其過濾后干燥，得到標題化合物(7.7g，84％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.66(d，1H)，7.54(s，1H)，5.52(d，1H)，4.42(q，2H)，3.09-2.89(m，9H)，1.36-1.33(m，9H)；m/z 236。
方法27 4-(3-乙基-2-異丙基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺將(E)-3-二甲氨基-1-(3-乙基-2-異丙基-3H-咪唑-4-基)-丙烯酮(方法26；6.5g，0.028mol)和碳酸胍(12.5g，0.069mol)加到丁醇(100ml)中，加熱回流5天。真空除去溶劑，得到黃色膠狀物。用硅膠柱色譜法純化(用0-5％MeOH的DCM溶液)，得到標題化合物，為黃色固體。加入DCM(5ml)和乙醚(50ml)后，將懸浮液過濾后干燥，得到標題化合物(5.0g，77％，白色固體)。NMR(400.132MHz)8.14(d，1H)，7.53(s，1H)，6.84(d，1H)，6.56(brs，2H)，4.54(q，2H)，3.13(七重峰，1H)，1.25-1.20(m，9H)；m/z 232。
方法28 環(huán)丙基甲酸乙基-(5-甲基-異噁唑-4-基)-酰胺將乙基-(5-甲基-異噁唑-4-基)-胺鹽酸鹽(15g，0.092mol)加到DCM(200ml)中，向其中加入TEA(32ml，0.23mol)后，慢慢加入環(huán)丙基甲酰氯(10.2g，0.10mol)。將反應物攪拌30分鐘后，真空除去溶劑。殘余物然后用水(150ml)處理，用乙醚(3×150ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色油狀物(12.2g，69％)。無需進一步純化便可用于方法29。
方法29 N-{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-N-乙基-環(huán)丙基酰胺將環(huán)丙基甲酸乙基-(5-甲基-異噁唑-4-基)-酰胺(方法28；12.2g，0.08mol)和10％Pd/C(3.0g)加到EtOH(300ml)中，在4個大氣壓下攪拌過夜，將反應物過濾，真空除去溶劑，得到灰白色固體。加入乙醚(150ml)，將其用超聲處理10分鐘后，過濾后干燥，得到白色固體。(9.2g，59％)；m/z 197。
方法30 1-(3-乙基-2-環(huán)丙基-3H-咪唑-4-基)-乙酮將N-{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-N-乙基-環(huán)丙基酰胺(方法29；9.2g，0.047mol)和NaOH(2.3g，0.056mol)加到EtOH(150ml)中，加熱回流4小時。向反應物中加入固體NH4Cl(4.4g，0.084mol)，將反應物攪拌過夜。將所得漿狀物真空濃縮，加入乙醚(200ml)，攪拌10分鐘后過濾。真空除去濾液，得到橙色油狀物。用球對球的減壓蒸餾裝置(0.50mbar/110℃)進行蒸餾，得到透明油狀物(5.0g，60％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.64(s，1H)，4.48(q，2H)，2.42(s，3H)，1.87-1.80(m，1H)，1.37(t，3H)，1.13-1.08(m，2H)，1.08-1.02(m，2H)；m/z 179。
方法31 (E)-1-(2-環(huán)丙基-3-乙基-3H-咪唑-4-基)-3-二甲氨基-丙烯酮將1-(3-乙基-2-環(huán)丙基-3H-咪唑-4-基)-乙酮(方法30；3.5g，0.020mol)和DMFDMA(6.7ml，0.039mol)加到DMF(50ml)中，在130℃下加熱6小時。真空除去溶劑，得到黃色固體。依次加入DCM(3.0ml)、乙醚(50ml)，將反應物用超聲處理10分鐘后過濾。得到黃色固體(3.4g；72％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.65(d，1H)，7.45(s，1H)，5.50(d，1H)，4.56(q，2H)，3.13-2.88(m，6H)，1.87-1.81(m，1H)，1.39(t，3H)，1.09-1.06(m，2H)，1.02-0.98(m，2H)；m/z 234。
方法32 4-(3-乙基-2-環(huán)丙基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺將(E)-1-(2-環(huán)丙基-3-乙基-3H-咪唑-4-基)-3-二甲氨基-丙烯酮(方法31；3.4g，0.015mol)和碳酸胍(6.6g，0.036mol)加到丁醇(60ml)中，加熱回流4天。真空除去溶劑，加入水(50ml)，殘余物用DCM(3×75ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到灰白色固體。依次加入DCM、乙醚，將所得固體過濾后干燥，得到白色固體(2.75g，83％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)8.19(d，1H)，7.95(s，1H)，6.83(d，1H)，4.94(brs，2H)，4.64(q，2H)，1.90-1.84(m，1H)，1.41(t，3H)，1.11-1.07(m，2H)，1.05-0.99(m，2H)；m/z 230。
方法33 N-乙基-2，2，2-三氟-N-(5-甲基-異噁唑-4-基)-乙酰胺將乙基-(5-甲基-異噁唑-4-基)-胺鹽酸鹽(15g，0.092mol)溶于吡啶(100ml)。向其中加入三氟乙酸酐(16.9ml，0.12mol)，攪拌反應物過夜后，真空除去溶劑。所得殘余物用飽和NH4Cl(200ml)猝滅，用乙醚(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色油狀物(18g，88％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)8.03(s，1H)，3.55(q，2H)，2.26(s，3H)，1.05(t，3H)；m/z 223。
方法34 N-{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-N-乙基-2，2，2-三氟-乙酰胺在氫氣氛下，使N-乙基-2，2，2-三氟-N-(5-甲基-異噁唑-4-基)-乙酰胺(方法33；18.0g，0.081mol)與10％Pd/C(4.0g)在4個大氣壓下反應3天。將反應物過濾，真空除去溶劑，得到灰白色固體，加入DCM(30ml)和乙醚(100ml)。將反應物攪拌10分鐘，過濾后干燥，得到白色固體(11.6g，64％)；m/z 225。
方法35 1-(3-乙基-2-三氟甲基-3H-咪唑-4-基)-乙酮將N-{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-N-乙基-2，2，2-三氟-乙酰胺(方法34；11.6g，0.051mol)和碳酸鉀(14.4g，0.103mol)加到二噁烷(180ml)中，加熱回流2小時。使反應物冷卻，過濾，真空除去溶劑，得到黃色油狀物。用硅膠柱色譜法純化(用0-40％乙醚的異己烷溶液)，得到標題化合物(8.9g，85％，透明油狀物)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.79(s，1H)，4.50(q，2H)，2.54(s，3H)，1.40(t，3H)；m/z207。
方法36 (E)-3-二甲氨基-1-(3-乙基-2-三氟甲基-3H-咪唑-4-基)-丙烯酮將1-(3-乙基-2-三氟甲基-3H-咪唑-4-基)-乙酮(方法35；7.0g，0.034mol)和DMFDMA(11.6ml，0.068mol)加到DMF(90ml)中，在130℃下加熱1小時。真空除去溶劑，得到黃色固體。用硅膠柱色譜法純化(用0-5％MeOH的DCM溶液)，得到標題產物，為黃色固體。依次加入乙醚、異己烷，將所得固體過濾后干燥，得到標題化合物(7.6g，85％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.74(d，1H)，7.55(s，1H)，5.53(d，1H)，4.57(q，2H)，3.17(brs，3H)，2.93(brs，3H)，1.42(t，3H)；m/z 262。
方法37 4-(3-乙基-2-三氟甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺將(E)-3-二甲氨基-1-(3-乙基-2-三氟甲基-3H-咪唑-4-基)-丙烯酮(方法36；6.0g，0.023mol)和碳酸胍(8.3g，0.046mol)加到2-甲氧基乙氧基醚(80ml)中，在140℃下加熱2天。使反應物冷卻，真空除去溶劑，得到黃色固體。加入水(100ml)，反應系統(tǒng)用DCM(3×100ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色固體。用硅膠柱色譜法純化(用0-5％MeOH的DCM溶液)，得到標題化合物，為黃色固體。依次加入乙醚(20ml)、異己烷(50ml)。得到灰白色固體，將其過濾后干燥(5.9g，100％)；m/z 258。
方法38 N-乙基-2，2-二氟-N-(5-甲基-異噁唑-4-基)-乙酰胺將乙基-(5-甲基-異噁唑-4-基)-胺鹽酸鹽(15g，0.092mol)和TEA加到DCM(300ml)中，使之冷卻至0℃后，慢慢加入二氟乙酰氯(11.5g，0.10mol)。將反應物攪拌1小時后，真空除去溶劑。所得殘余物用飽和NH4Cl(200ml)猝滅，用乙醚(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色油狀物(9.0g，48％)；m/z 203(M-H)-。
方法39 N-{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-N-乙基-2，2-二氟-乙酰胺在4個大氣壓下，用10％披鈀碳(3.0g)處理N-乙基-2，2-二氟-N-(5-甲基-異噁唑-4-基)-乙酰胺(方法38；9.0g，0.044mol)。將反應物過濾，真空除去溶劑，加入DCM，將反應物過濾，得到灰白色固體(3.0g，33％)；m/z 207。
方法40 1-(2-二氟甲基-3-乙基-3H-咪唑-4-基)-乙酮將N-{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-N-乙基-2，2-二氟-乙酰胺(方法39；3.0g，0.014mol)和碳酸鉀(3.9g，0.028mol)加到二噁烷(50ml)中，加熱回流過夜。將反應物過濾后真空除去溶劑，得到黃色油狀物。用硅膠柱色譜法純化(用乙醚為洗脫液)，得到標題化合物，為黃色固體(2.4g，92％)。NMR(400.132 MHz，CDCl3)7.74(s，1H)，6.78(t，1H)，4.54(q，2H)，2.51(s，3H)，1.40(t，3H)；m/z 189。
方法41 (E)-1-(2-二氟甲基-3-乙基-3H-咪唑-4-基)-3-二甲氨基-丙烯酮將1-(2-二氟甲基-3-乙基-3H-咪唑-4-基)-乙酮(方法40；2.4g，0.013mol)和DMFDMA(4.4ml，0.026mol)加到DMF(50ml)中，在130℃下加熱20分鐘。真空除去溶劑，得到黃色固體。依次加入DCM(3.0ml)、乙醚(50ml)，用超聲處理10分鐘后過濾。得到黃色固體(2.7g，85％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.71(d，1H)，7.52(s，1H)，6.75(t，1H)，5.52(d，1H)，4.61(q，2H)，3.19-2.88(m，6H)，1.42(t，3H)；m/z 244。
方法42 4-(2-二氟甲基-3-乙基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺將(E)-1-(2-二氟甲基-3-乙基-3H-咪唑-4-基)-3-二甲氨基-丙烯酮(方法41；2.7g，0.011mol)和碳酸胍(4.0g，0.022mol)加到乙二醇乙醚(30ml)中，在137℃下加熱2天。真空除去溶劑，得到黃色固體。依次加入DCM(5.0ml)、乙醚(50ml)，將所得固體過濾后干燥。得到白色固體(2.5g，96％)。NMR(400.132MHz)8.27(d，1H)，7.72(s，1H)，7.23(t，1H)，6.97(d，1H)，6.71(s，2H)，4.70(q，2H)，1.30(t，3H)；m/z240。
方法43 環(huán)丙基甲酸{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-異丙基-酰胺在4個大氣壓下，將環(huán)丙基甲酸異丙基-(5-甲基-異噁唑-4-基)-酰胺(WO 03/076434的方法36；18g，0.086mol)和10％披鈀碳(3.0g)的EtOH溶液與氫反應。將反應物過濾，真空除去溶劑，得到固體，加入乙醚后，將固體過濾(7.9g，44％)；m/z 211。
方法44 1-(2-環(huán)丙基-3-異丙基-3H-咪唑-4-基)-乙酮將環(huán)丙基甲酸{1-[1-氨基-甲-(Z)-亞基]-2-氧代-丙基}-異丙基-酰胺(方法43；7.9g，0.038mol)和氫氧化鈉(2.28g，0.057mol)加到EtOH(150ml)中，加熱回流過夜。真空除去溶劑，所得固體用飽和NH4Cl(100ml)處理，用乙醚(3×100ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黑色油狀物。用硅膠柱色譜法純化(用100％乙醚)，得到標題化合物(3.9g，53％，黃色油狀物)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.65(s，1H)，5.63-5.48(m，1H)，2.44(s，3H)，1.98-1.91(m，1H)，1.57(d，6H)，1.17-1.11(m，2H)，1.07-1.03(m，2H)；m/z 193。
方法45 (E)-1-(2-環(huán)丙基-3-異丙基-3H-咪唑-4-基)-3-二甲氨基-丙烯酮將1-(2-環(huán)丙基-3-異丙基-3H-咪唑-4-基)-乙酮(方法44；3.74g，0.019mol)和DMFDMA(6.66ml，0.039mol)加到DMF中，在130℃下加熱4小時。真空除去溶劑，得到橙色膠狀物，依次加入DCM、乙醚，得到標題化合物，為黃色固體，將其過濾后干燥(4.5g，96％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.63(d，1H)，7.40(s，1H)，5.61(七重峰，1H)，5.50(d，1H)，3.12-2.88(m，6H)，1.98-1.92(m，1H)，1.60(d，6H)，1.13-1.09(m，2H)，1.03-0.98(m，2H)；m/z 248。
方法46 4-(2-環(huán)丙基-3-異丙基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺/001 將(E)-1-(2-環(huán)丙基-3-異丙基-3H-咪唑-4-基)-3-二甲氨基-丙烯酮(方法45；4.5g，0.019mol)和碳酸胍(6.55g，0.036mol)加到乙二醇乙醚(75ml)中，在142℃下加熱2天。真空除去溶劑，加入水(100ml)后用DCM(3×150ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色固體。依次加入DCM、乙醚，將混合物攪拌30分鐘后，過濾后干燥(3.6g，78％)。NMR(400.132MHz，CDCl3)8.22(d，1H)，7.28(s，1H)，6.79(d，1H)，5.57(七重峰，1H)，5.01(brs，2H)，2.03-1.96(m，1H)，1.64(d，6H)，1.17-1.13(m，2H)，1.05-1.00(m，2H)；m/z 244。
方法47 ((S)-3-二甲氨基-吡咯烷-1-基)-(4-碘-苯基)-甲酮將4-碘苯甲酰氯(5g，0.019mol)和TEA(6.6ml，0.048mol)加到DCM(100ml)中，冷卻到0℃。向其中慢慢加入(S)-二甲氨基吡咯烷(2.2g，0.019mol)，將反應物攪拌1小時后，真空除去溶劑至90％體積。所得漿狀物用2.0M NaOH(50ml)猝滅，用乙醚(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色固體。加入乙醚，反應系統(tǒng)用超聲處理10分鐘后過濾。得到灰白色固體(3.9g，60％)。NMR(300.072MHz，CDCl3)7.75(d，2H)，7.25(d，2H)，3.94-3.78(m，1H)，3.66-3.25(m，3H)，2.81-2.62(m，1H)，2.30(s，3H)，2.21(s，3H)，2.16-2.02(m，1H)，1.97-1.76(m，1H)；m/z 345。
方法48 ((R)-3-二甲氨基-吡咯烷-1-基)-(4-碘-苯基)-甲酮按類似于方法47的方式，由4-碘苯甲酰氯和(R)-二甲氨基吡咯烷制備標題化合物(5.1g，78％)。NMR(300.072MHz，CDCl3)7.75(d，2H)，7.25(d，2H)，3.94-3.78(m，1H)，3.66-3.25(m，3H)，2.81-2.62(m，1H)，2.30(s，3H)，2.21(s，3H)，2.16-2.02(m，1H)，1.97-1.76(m，1H)；m/z 345。
方法49 4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸乙酯向4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺(方法14；7.8g)的二噁烷(200ml)溶液中加入4-碘苯甲酸乙酯(9.445g)、乙酸鈀(II)(461mg)、Xantpos(1.785g)和碳酸銫(22.29g)。使混合物脫氣，再通入氬氣，然后回流加熱3小時。使混合物冷卻至室溫，過濾除去固體，然后將濾液真空濃縮。用硅膠純化(用2-5％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到標題化合物(3.82g，31％，黃色固體)。NMR 9.87(s，1H)，8.46(d，1H)，7.90-7.83(m，4H)，7.45(s，1H)，7.14(d，1H)，5.72-5.63(m，1H)，4.27(q，2H)，2.49(s，3H)，1.47(d，6H)，1.30(t，3H)；m/z366。
方法50 4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸鈉鹽將4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸乙酯(方法49；3.82g)溶于THF(130ml)后，加入NaOH(419mg)水(20ml)溶液。將混合物回流加熱2天。將混合物真空濃縮，然后溶于水(400ml)，用EtOAc(2×300ml)洗滌。將水層真空濃縮，得到標題化合物(3.53g，94％，白色固體)。NMR 9.43(s，1H)，8.38(d，1H)，7.79(d，2H)，7.56(d，2H)，7.41(s，1H)，7.03(d，1H)，5.82-5.72(m，1H)，2.49(s，3H)，1.44(d，6H)；m/z 338。
方法51 4-{[5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸乙酯向5-氟-4-(3-異丙基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺(方法2；5.32g)的二噁烷(100ml)溶液中加入4-碘苯甲酸乙酯(3.59g)、乙酸鈀(II)(305mg)、Xantphos(1.18g)和碳酸銫(14.74g)。使混合物脫氣，再通入氬氣，然后回流加熱3小時。使混合物冷卻至室溫，過濾除去固體，然后將濾液真空濃縮。用硅膠純化(用2-5％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到標題化合物(2.75g，32％，黃色固體)。NMR 9.97(s，1H)，8.62(d，1H)，7.88(d，2H)，7.80(d，2H)，7.38(d，1H)，5.47-5.38(m，1H)，4.27(q，2H)，2.53(s，3H)，1.46(d，6H)，1.30(t，3H)；m/z 384。
方法52 4-{[5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸鋰鹽向4-{[5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸乙酯(方法51；2.75g)與EtOH(70ml)的攪拌溶液中加入氫氧化鋰(301mg)的水(15ml)溶液。將混合物回流加熱18小時，然后真空濃縮，在水(300ml)和EtOAc(300ml)之間分配。水層再用EtOAc(200ml)洗滌后真空濃縮，得到標題化合物(2.07g，80％，白色固體)。NMR9.56(s，1H)，8.53(d，1H)，7.80(d，2H)，7.53(d，2H)，7.36(d，1H)，5.56-5.46(m，1H)，2.51(s，3H)，1.43(d，6H)；m/z 356。
方法53 1-(4-碘苯甲?；?吡咯烷-3-醇按類似于方法10的方式，由二氫吡咯醇(pyrrolinol)和4-碘苯甲酰氯制備標題化合物。NMR 7.78(d，2H)，7.28(d，2H)，4.96(dd，1H)，4.35-4.18(br d，1H)，3.60-3.15(m，4H，與水峰重疊(overlapping water))，2.00-1.65(m，2H)；m/z 318。
方法54 (2Z)-3-(二甲氨基)-2-氟-1-(1-環(huán)丁基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮按類似于方法1的方式，用(2E)-3-(二甲氨基)-1-(1-環(huán)丁基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(WO 03/076435的方法37)替換(2E)-3-(二甲氨基)-1-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮，制備標題化合物。NMR(300.074MHz，CDCl3)7.27-7.17(m，1H)，6.85(d，1H)，5.06-4.91(m，1H)，3.12-3.05(m，6H)，2.54-2.39(m，7H)，1.74(m，2H)；m/z 252。
方法55 5-氟-4-(3-環(huán)丁基-2-甲基-3H-咪唑-4-基)-嘧啶-2-基胺按類似于方法2的方式，用(2Z)-3-(二甲氨基)-2-氟-1-(1-環(huán)丁基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮(方法54)替換(2Z)-3-(二甲氨基)-2-氟-1-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)丙-2-烯-1-酮，制備標題化合物。NMR(300.074MHz，CDCl3)8.26(d，1H)，7.21(d，1H)，6.58(br.s，1H)，5.17(五重峰，1H)，3.45(s，3H)，2.42-2.29(m，4H)，1.80-1.64(m，2H)；m/z 248。
方法56 1-(4-碘苯甲?；?-4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷按類似于方法10的方式，由N-甲基高哌嗪和4-碘苯甲酰氯制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.79(d，2H)，7.18(d，2H)，3.84-3.79(m，2H)，3.54-3.52(m，1H)，3.48(t，1H)，2.79-2.77(m，1H)，2.70-2.66(m，1H)，2.62-2.55(m，2H)，2.45(s，3H)，2.07-2.00(m，1H)，1.91-1.84(m，1H)；m/z 345。
方法57 1-異丙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷將1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁酯(17g)和丙酮(10g)加到MeOH(150ml)中，在0℃下攪拌20分鐘。在20分鐘內慢慢加入NaCNBH3(6.4g)，同時將溫度保持在0℃以下。加完后使反應物升溫到環(huán)境溫度，攪拌過周末。將反應物真空濃縮，得到黃色殘余物，將其用水(100ml)猝滅，用乙醚(3×100ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到透明黏性油狀物(20g)。將該油狀物加到TFA(50ml)和DCM(50ml)中，將反應物攪拌16小時后真空濃縮。反應物用水(30ml)猝滅，向其中加入碳酸鉀直到水溶液完全飽和，然后將其用EtOAc(3×200ml)萃取，干燥，小心地真空除去溶劑，得到標題化合物(5.2g，黃色油狀物)。NMR(400.132MHz，CDCl3)2.94-2.86(m，5H)，2.68-2.63(m，4H)，1.74-1.68(m，2H)，1.01(d，6H)。
方法58 1-苯甲?；?4-異丙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷按類似于方法10的方式，由1-異丙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷(方法57)和4-碘苯甲酰氯制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.74(d，2H)，7.13(d，2H)，3.75-3.72(m，2H)，3.40(t，2H)，2.96-2.84(m，1H)，2.79-2.77(m，1H)，2.67(t，1H)，2.62-2.56(m，2H)，1.92-1.87(m，1H)，1.71-1.67(m，1H)，1.03-0.97(m，6H)；m/z 373。
方法59 1-(4-溴-2-甲基苯甲酰基)-4-甲基-1，4-二氛雜環(huán)庚烷按類似于方法4的方式，由N-甲基高哌嗪和4-溴-2-甲基苯甲酸制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.38(s，1H)，7.34(d，1H)，7.04(t，1H)，3.86-3.76(m，2H)，3.34(t，1H)，3.27(t，1H)，2.75-2.73(m，1H)，2.69-2.50(m，2H)，2.50-2.43(m，1H)，2.37(s，3H)，2.30(s，3H)，1.99(五重峰，1H)，1.80(五重峰，1H)(旋轉異構體)；m/z 313。
方法60 1-(4-溴-2-氟苯甲?；?-4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷按類似于方法4的方式，由N-甲基高哌嗪和4-溴-2-氟苯甲酸制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.35(d，1H)，7.30(d，1H)，7.24(t，1H)，3.83-3.77(m，2H)，3.45-3.43(m，1H)，3.38(t，1H)，2.75-2.73(m，1H)，2.65-2.62(m，1H)，2.58-2.56(m，1H)，2.54-2.52(m，1H)，2.38(d，3H)，2.02-1.96(m，1H)，1.88-1.82(m，1H)；m/z 317。
方法61 (3S)-1-(4-溴-2-氟苯甲?；?-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺按類似于方法4的方式，由(3S)-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺和4-溴-2-氟苯甲酸制備標題化合物。NMR(300.072MHz，CDCl3)7.38-7.27(m，3H)，3.98-3.81(m，1H)，3.63-3.17(m，3H)，2.85-2.68(m，1H)，2.30(s，3H)，2.21(s，3H)，2.19-2.04(m，1H)，1.92-1.77(m，1H)；m/z316。
方法62 (3R)-1-(4-溴-2-氟苯甲?；?-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺按類似于方法4的方式，由(3R)-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺和4-溴-2-氟苯甲酸制備標題化合物。NMR(300.072MHz，CDCl3)7.38-7.27(m，3H)，3.97-3.81(m，1H)，3.63-3.17(m，3H)，2.84-2.68(m，1H)，2.30(s，3H)，2.21(s，3H)，2.17-2.02(m，1H)，1.90-1.77(m，1H)；m/z316。
方法63 4-(4-溴-2-甲基苯甲?；?-1，4-氧氮雜環(huán)庚烷按類似于方法4的方式，由1，4-氧氮雜環(huán)庚烷和4-溴-2-甲基苯甲酸制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.39(d，1H)，7.35(d，1H)，7.05(d，1H)，3.90-3.80(m，4H)，3.76(t，1H)，3.64-3.57(m，1H)，3.36-3.32(m，2H)，2.30(d，3H)，2.03(五重峰，1H)，1.75(五重峰，1H)；m/z 300。
方法64 4-(4-溴-2-氟苯甲?；?-1，4-氧氮雜環(huán)庚烷按類似于方法4的方式，由1，4-氧氮雜環(huán)庚烷和4-溴-2-氟苯甲酸制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.36(d，1H)，7.33-7.29(m，1H)，7.24(t，1H)，3.87-3.80(m，4H)，3.76(t，1H)，3.66(t，1H)，3.46-3.42(m，2H)，2.04(五重峰，1H)，1.82(五重峰，1H)；m/z 304。
方法65 3-(4-碘苯甲?；?-8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛烷按類似于方法10的方式，由8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛烷和4-碘苯甲酰氯制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.76(d，2H)，7.12(d，2H)，4.50-4.16(m，3H)，3.50-3.24(m，2H)，3.19-3.06(m，1H)，2.06-1.82(m，3H)，1.77-1.48(m，1H)(旋轉異構體)；m/z 344。
方法66 (3S)-1-(4-溴-2-甲基苯甲?；?-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺按類似于方法4的方式，由(3S)-NN-二甲基吡咯烷-3-胺和4-溴-2-甲基苯甲酸制備標題化合物。NMR(300.072MHz，CDCl3)7.39(s，1H)，7.35(d，1H)，7.06(d，1H)，4.00-3.84(m，1H)，3.61-3.35(m，1H)，3.31-3.23(m，1H)，3.18-2.95(m，1H)，2.80-2.63(m，1H)，2.29(s，6H)，2.19-2.03(m，4H)，1.90-1.74(m，1H)；m/z 312。
方法67 (3R)-1-(4-溴-2-甲基苯甲?；?-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺按類似于方法4的方式，由(3R)-N，N-二甲基吡咯烷-3-胺和4-溴-2-甲基苯甲酸制備標題化合物。NMR(300.072MHz，CDCl3)7.39(s，1H)，7.35(d，1H)，7.07(dd，1H)，4.00-3.84(m，1H)，3.61-3.35(m，1H)，3.31-2.95(m，2H)，2.81-2.64(m，1H)，2.30(s，6H)，2.19-2.02(m，4H)，1.90-1.76(m，1H)；m/z 312。
方法68 (4-溴-2-氯-苯基)-(4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-)甲酮按類似于方法4的方式，由N-甲基高哌嗪和4-溴-2-氯苯甲酸制備標題化合物，只是用減壓蒸餾法純化(180℃，0.80mmHg)。NMR7.73(d，1H)，7.59(dd，1H)，7.28(d，1H)，3.71-3.63(m，2H)，3.28-3.19(m，2H)，2.95-2.89(m，1H)，2.69-2.64(m，1H)，2.62-2.52(m，2H)，2.29(d，3H)，1.90-1.82(m，1H)，1.75-1.67(m，1H)；m/z 332。
方法69 (4-溴-2-氯-苯基)-(1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基)甲酮按類似于方法4的方式，由1，4-氧氮雜環(huán)庚烷和4-溴-2-氯苯甲酸制備標題化合物，只是用減壓蒸餾法純化(182℃，0.58mmHg)。NMR 7.74(s，1H)，7.60(d，1H)，7.31(d，1H)，3.79-3.66(m，5H)，3.61-3.55(m，1H)，3.34-3.25(m，2H)，1.95-1.87(m，1H)，1.77-1.69(m，1H)；m/z 319。
方法70 (4-碘苯基)-[(1S，4S)-2-丙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基]甲酮按類似于方法10的方式，由(1S，4S)-2-丙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚烷和4-碘苯甲酰氯制備標題化合物。NMR 7.80(d，2H)，7.27(d，2H)，3.48(s，1H)，3.45-3.38(m，1H)，3.32(dd，1H)，2.93(s，1H)，2.83(d，1H)，2.61(d，1H)，2.54-2.39(m，2H)，1.77(d，1H)，1.68(d，1H)，1.40(六重峰，2H)，0.87(t，3H)；m/z 372。
方法71 [4-(2-羥乙基)-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基]-(4-碘苯基)甲酮按類似于方法10的方式，由2-(1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)乙醇和4-碘苯甲酰氯制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.75(d，2H)，7.13(d，2H)，3.80-3.72(m，2H)，3.62-3.50(m，2H)，3.50-3.42(m，2H)，2.92-2.81(m，1H)，2.81-2.60(m，6H)，2.01-1.92(m，1H)，1.83-1.74(m，1H)；m/z 375。
方法72 (4-碘苯基)-(1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基)甲酮按類似于方法10的方式，由1，4-氧氮雜環(huán)庚烷和4-碘苯甲酰氯制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.76(d，2H)，7.14(d，2H)，3.89-3.72(m，5H)，3.69-3.59(m，1H)，3.54-3.45(m，2H)，2.09-1.97(m，1H)，1.87-1.75(m，1H)；m/z 332。
方法73 N-(5-甲基-1，2-噁唑-4-基)環(huán)丁烷甲酰胺在環(huán)境溫度下，將環(huán)丁基甲酰氯(26.7ml)滴加到5-甲基-1，2-噁唑-4-胺鹽酸鹽(30g)和TEA(80ml)與DCM(450ml)的攪拌溶液中。將反應混合物攪拌30分鐘后，用水(150ml)、10％檸檬酸水溶液(2×100ml)、NaHCO3飽和水溶液(2×100ml)洗滌。水層用DCM(2×100ml)再萃取，合并的有機萃取物經干燥(Na2SO4)，過濾后真空濃縮。殘余物用乙醚(250ml)研磨，過濾后干燥，得到標題化合物(35.3g，淺褐色固體)。NMR(300.072MHz，CDCl3)8.52(s，1H)，6.60(br.s，1H)，3.14(五重峰，1H)，2.45-2.16(m，5H)，2.11-1.84(m，2H)；m/z181。
方法74 N-(環(huán)丁基甲基)-5-甲基-1，2-噁唑-4-胺鹽酸鹽在惰性氣氛、環(huán)境溫度下，在30分鐘內將甲硼烷-二甲硫醚絡合物(200ml 2M的THF溶液)加到N-(5-甲基-1，2-噁唑-4-基)環(huán)丁烷甲酰胺(方法73；32.7g)與THF(150ml)的攪拌溶液中。將反應混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘，然后回流加熱(警告放熱并沸騰)2小時。使反應混合物冷卻至0℃，小心地加入MeOH后，在環(huán)境溫度下攪拌3小時。滴加4M HCl的二噁烷溶液(55ml)，攪拌1小時后真空除去溶劑。加入乙醚，將所得固體過濾后干燥，得到標題化合物(36.9g，無色固體)。NMR 8.68(s，1H)，3.20(d，2H)，2.58(m，1H)，2.49(s，3H)，2.06-1.92(m，2H)，1.88-1.64(m，4H)；m/z 166。
方法75 N-(環(huán)丁基甲基)-N-(5-甲基-1，2-噁唑-4-基)乙酰胺在30分鐘內將乙酸酐(35ml)加到N-(環(huán)丁基甲基)-5-甲基-1，2-噁唑-4-胺鹽酸鹽(方法74；37.3g)和乙酸鈉(15.1g)與乙酸(250ml)的攪拌懸浮液中。將反應混合物在環(huán)境溫度下攪拌16小時后，真空濃縮。殘余物用10％碳酸鉀水溶液(400ml)攪拌1小時，然后用DCM(1×300ml，2×100ml)萃取。有機萃取物用鹽水(100ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，真空濃縮，得到標題化合物(36.2g，黃色油狀物)。NMR(300.072MHz，CDCl3)8.08(s，1H)，3.63(d，2H)，2.41(m，1H)，2.34(s，3H)，2.05-1.80(m，7H)，1.74-1.57(m，2H)；m/z 209。
方法76 N-[(E)-1-氨基-3-氧代-丁-1-烯-2-基]-N-(環(huán)丁基甲基)乙酰胺在氫氣氛下，將N-(環(huán)丁基甲基)-N-(5-甲基-1，2-噁唑-4-基)乙酰胺(方法75；36.0g)和10％Pd/C(8.0g)的EtOH(360ml)溶液在4個大氣壓下攪拌16小時。使反應混合物通過硅藻土過濾(10％MeOH的DCM溶液)，真空除去溶劑。所得殘余物用乙醚研磨后真空干燥，得到標題化合物(31.4g，無色固體)。NMR 7.46(m，1H)，6.95(br.，1H)，6.66(br.，1H)，3.39-3.16(m，2H)，2.29(m，1H)，2.03(s，1H)，1.95-1.79(m，2H)，1.75-1.63(m，2H)，1.61(s，3H)，1.60-1.47(m，2H)；m/z 211。
方法77 (E)-1-[3-(環(huán)丁基甲基)-2-甲基-咪唑-4-基]-3-二甲氨基-丙-2-烯-1-酮將N-[(E)-1-氨基-3-氧代-丁-1-烯-2-基]-N-(環(huán)丁基甲基)乙酰胺(方法76；33.4g)和NaOH(7.63g)加到EtOH(250ml)中，加熱回流3小時。將反應混合物真空濃縮，加入氯化銨水溶液(200ml)，水層用乙醚(3×300ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空除去溶劑，得到橙色油狀物(30g)，然后蒸餾(106℃，0.69mbar)。將所得無色油狀物(30g)和DMFDMA(53ml)加到DMF(250ml)中，在130℃下加熱4小時。真空除去溶劑，得到黃色固體。依次加入DCM(20ml)、乙醚(100ml)，用超聲處理10分鐘后過濾，得到標題化合物(35.3g，黃色固體)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.65(d，1H)，7.49(s，1H)，5.52(d，1H)，4.41(d，2H)，3.07-2.89(m，6H)，2.72(七重峰，1H)，2.42(s，3H)，2.01-1.92(m，2H)，1.86-1.70(m，4H)；m/z 248。
方法78 4-[3-(環(huán)丁基甲基)-2-甲基-咪唑-4-基]嘧啶-2-胺將(E)-1-[3-(環(huán)丁基甲基)-2-甲基-咪唑-4-基]-3-二甲氨基-丙-2-烯-1-酮(方法77；1.5g)和胍(2.6g)與正丁醇(60ml)一起回流加熱30小時。真空除去溶劑，得到黃色固體，將其用水(60ml)猝滅后，用DCM(3×70ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空濃縮，得到黃色固體，將其溶于最少量的熱DCM中，使之冷卻。將所得固體過濾后干燥，得到標題化合物(1.35g，無色固體)。NMR 8.17(d，1H)，7.23(s，1H)，6.74(d，1H)，6.57(s，2H)，5.38(五重峰，1H)，2.51-2.35(m，7H)，1.83-1.69(m，2H)；m/z 230。
方法79 N-環(huán)戊基-5-甲基-1，2-噁唑-4-胺將5-甲基-1，2-噁唑-4-胺鹽酸鹽(20g)、環(huán)戊酮(13.9ml)和乙酸鈉(12.3g)加到MeOH(200ml)中，在0℃下攪拌1小時。在20分鐘內慢慢加入NaCNBH3(11.5g)，同時將溫度保持在0℃以下。加完后，使反應混合物升溫至環(huán)境溫度并攪拌16小時后，真空除去溶劑。將所得固體溶于NH4Cl飽和水溶液(100ml)中，用乙醚(依次為2×200ml，1×100ml)萃取。將合并的有機萃取物干燥，過濾后真空除去溶劑，得到黃色油狀物。油狀物用硅膠柱色譜法純化(用10-50％乙醚的異己烷溶液為洗脫液)。真空除去溶劑，得到標題化合物(17.2g，黃色油狀物)。NMR(300.072MHz，CDCl3)8.03(s，1H)，3.51(五重峰，1H)，2.31(s，3H)，1.94-1.83(m，2H)，1.79-1.54(m，4H)，1.47-1.37(m，2H)；m/z 167。
方法80 N-環(huán)戊基-N-(5-甲基-1，2-噁唑-4-基)乙酰胺在20分鐘內，將乙酸酐(18.9ml)分批加到N-環(huán)戊基-5-甲基-1，2-噁唑-4-胺(方法79；16.0g)與乙酸(160ml)的攪拌溶液中。1小時后，真空除去溶劑，所得漿狀物用K2CO3水溶液(50ml，警告釋放CO2)處理。水層用DCM(3×50ml)萃取，合并的有機物經干燥(Na2S04)，真空除去溶劑。將所得固體在高真空下干燥，得到標題化合物(19.0g，黃色固體)。NMR 8.64(s，1H)，4.77(五重峰，1H)，2.33(s，3H)，1.80-1.74(m，2H)，1.69(s，3H)，1.51-1.41(m，4H)，1.24-1.08(m，2H)；m/z 209。
方法81 N-[(E)-1-氨基-3-氧代-丁-1-烯-2-基]-N-環(huán)戊基-乙酚胺按類似于方法76的方式，由N-環(huán)戊基-N-(5-甲基-1，2-噁唑-4-基)乙酰胺(方法80)制備標題化合物，得到無色固體(16.0g)。NMR 7.59(t，1H)，6.84(d，2H)，4.44(五重峰，1H)，2.06(s，3H)，1.80-1.59(m，5H)，1.49-1.19(m，6H)；m/z 211。
方法82 1-(3-環(huán)戊基-2-甲基-咪唑-4-基)乙酮將N-[(E)-1-氨基-3-氧代-丁-1-烯-2-基]-N-環(huán)戊基-乙酰胺(方法81；16.0g)和NaOH(3.66g)加到EtOH(200ml)中，回流加熱4小時。加入NH4Cl(6.11g)，將混合物在環(huán)境溫度下攪拌16小時后，真空濃縮。加入乙醚(350ml)，將混合物攪拌10分鐘，然后過濾后真空濃縮。將所得黃色油狀物減壓蒸餾(0.55mbar/100℃)，得到標題化合物(10.08g，透明油狀物)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.73(s，1H)，5.22(五重峰，1H)，2.50(s，3H)，2.45(s，3H)，2.04-1.97(m，6H)，1.71-1.66(m，2H)；m/z 193。
方法83 (E)-1-(3-環(huán)戊基-2-甲基-咪唑-4-基)-3-二甲氨基-丙-2-烯-1-酮將1-(3-環(huán)戊基-2-甲基-咪唑-4-基)乙酮(方法82；10.08g)和DMFDMA(17.9ml)加到DMF(150ml)中，在130℃下加熱6小時。真空除去溶劑，依次加入DCM(10ml)、乙醚(100ml)。混合物用超聲處理10分鐘后，過濾后干燥，得到標題化合物(9.74g，黃色固體)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.62(d，1H)，7.48(s，1H)，5.52(d，1H)，5.35(五重峰，1H)，2.99(s，6H)，2.49(s，3H)，2.14-1.91(m，6H)，1.72-1.61(m，2H)；m/z 248。
方法84 4-(3-環(huán)戊基-2-甲基-咪唑-4-基)嘧啶-2-胺將(E)-1-(3-環(huán)戊基-2-甲基-咪唑-4-基)-3-二甲氨基-丙-2-烯-1-酮(方法83；3.00g)和碳酸胍(4.38g)加到2-甲氧基乙醇(50ml)中，在140℃下加熱36小時。使反應混合物冷卻后真空除去溶劑，得到黃色固體。加入水(50ml)，反應系統(tǒng)用DCM(3×50ml)萃取，將合并的有機物干燥后真空除去溶劑。所得黃色固體依次用DCM、乙醚研磨后，過濾，真空干燥，得到標題化合物(2.46g，灰白色固體)。NMR(400.132MHz，CDCl3)8.23(d，1H)，7.33(s，1H)，6.80(d，1H)，5.41(五重峰，1H)，5.01(s，2H)，2.54(s，3H)，2.17-2.02(m，4H)，1.97-1.87(m，2H)，1.74-1.64(m，2H)；m/z 244。
方法85 (3S)-3-吡咯烷-1-基吡咯烷將(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(JCS PerkinTransactions 1，1993，13，1421-4；26g，0.098mol)和吡咯烷(15.3g，0.215mol)加到DMF中，在80℃下加熱36小時。真空除去溶劑，得到褐色液體。減壓蒸餾(200℃，1.0mmHg)除去揮發(fā)物，所得膠狀物用NaOH水溶液(50ml)猝滅。水層用固體碳酸鉀飽和，然后用DCM(3×200ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空除去溶劑，得到褐色油狀物。用柱色譜法純化(0-50％MeOH的DCM溶液為洗脫液)，得到褐色油狀物，將其減壓蒸餾(40℃，0.56mmHg)，得到標題化合物，為透明油狀物。NMR(400.132MHz，CDCl3)3.08-3.01(m，2H)，2.94-2.88(m，1H)，2.82-2.78(m，1H)，2.64(五重峰，1H)，2.55-2.48(m，4H)，2.25(s，1H)，1.97-1.89(m，1H)，1.82-1.75(m，4H)，1.73-1.64(m，1H)。
方法86 (4-碘苯基)-[(3S)-3-吡咯烷-1-基吡咯烷-1-基]甲酮按類似于方法10的方式，由(3S)-3-吡咯烷-1-基吡咯烷(方法85)和4-碘苯甲酰氯制備標題化合物。NMR(400.132MHz，CDCl3；旋轉異構體)7.75(d，2H)，7.25(d，2H)，3.92-3.78(m，1H)，3.65-3.33(m，3H)，2.91-2.68(m，1H)，2.61-2.42(m，4H)，2.21-2.00(m，1H)，1.99-1.89(m，1H)，1.87-1.75(m，4H)；m/z 371。
方法87 [(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]-(4-碘苯基)甲酮將4-碘苯甲酰氯(20g)的DCM(200ml)溶液滴加到(3R)-吡咯烷-3-醇(6.9g)和TEA(23ml)的DCM(300ml)溶液中。將反應物攪拌1小時后，加入NH4Cl飽和水溶液(200ml)。水層用DCM(3×200ml)萃取，合并的有機物經干燥后真空除去溶劑，得到黃色固體。將粗產物溶于最少量的熱乙腈中，然后使之冷卻，過濾后干燥，得到標題化合物(21.2g，淺黃色固體)。NMR 7.77(d，2H)，7.28(d，2H)，4.63(d，1H)，4.34-4.22(m，1H)，3.62-3.50(m，2H)，3.49-3.39(m，1H)，3.34-3.22(m，1H)，2.00-1.91(m，1H)，1.85-1.76(m，1H)；m/z 318。
方法88 (4-碘苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮將甲磺酰氯(5.25ml)的DCM(20ml)溶液滴加到[(3R)-3-羥基吡咯烷-1-基]-(4-碘苯基)甲酮(方法87；19.5g)和TEA(12.8ml)的DCM(200ml)溶液中。將反應混合物攪拌1小時后，加入NH4Cl飽和水溶液(150ml)。水層用DCM(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到黃色固體，將其溶于最小量的熱乙腈中，加入乙醚后析出無色固體。再加入乙醚后，將懸浮液過濾后干燥，得到標題化合物，為無色固體。NMR 7.81(d，2H)，7.31(d，2H)，5.30-5.26(m，1H)，3.83-3.80(dd，1H)，3.70-3.63(m，1H)，3.60-3.57(m，2H)，3.16(s，3H)，2.31-2.15(m，2H)；m/z 396。
方法89 [(3S)-3-(環(huán)丙氨基)吡咯烷-1-基]-(4-碘苯基)甲酮將(4-碘苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法88；3.0g)和環(huán)丙胺(4.4g)加到二噁烷(40ml)中，在密封管中于109℃加熱5天。加入K2CO3飽和水溶液(50ml)，水層用乙醚(3×100ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空濃縮，得到黃色膠狀物。用硅膠純化(用0-5％MeOH的DCM溶液洗脫)，得到標題化合物(1.72g，黏性黃色油狀物)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.37(d，2H)，6.89(d，2H)，3.49-3.35(m，1H)，3.29-3.15(m，2H)，3.09-2.87(m，2H)，1.83-1.75(m，1H)，1.70-1.63(m，1H)，1.49-1.41(m，1H)，1.31-1.18(m，1H)，0.13-0.17(m，4H)；m/z 357。
方法90 [(3S)-3-(環(huán)丙氨基)吡咯烷-1-基]-(4-碘苯基)甲酮將(4-碘苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法88；4.0g)和甲胺(2.0M的THF溶液；50ml)在微波輻射下于150℃加熱4小時。將反應物真空濃縮，加入K2CO3水溶液(50ml)后，用DCM(3×100ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空除去溶劑，得到橙色膠狀物。用硅膠純化(用0-20％MeOH的DCM溶液洗脫)，得到標題化合物，為黃色膠狀物。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.75(d，2H)，7.28-7.24(m，2H)，3.83-3.31(m，4H)，3.25-3.19(m，1H)，2.47-2.37(m，3H)，2.21-1.98(m，1H)，1.84-1.74(m，1H)；m/z 331。
方法91 [(3S)-3-(環(huán)丁氨基)吡咯烷-1-基]-(4-碘苯基)甲酮按類似于方法89的方式，由(4-碘苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法88)和環(huán)丁胺制備標題化合物；NMR(500.133MHz，DMSO)7.78(d，2H)，7.27(d，2H)，3.57-3.48(m，2H)，3.43-3.34(m，1H)，3.26(五重峰，1H)，3.22-3.11(m，3H)，2.16-2.04(m，2H)，1.96(六重峰，1H)，1.72-1.52(m，5H)；m/z 371。
方法92 (4-碘苯基)-[(3S)-3-(甲基-丙基-氨基)吡咯烷-1-基]甲酮按類似于方法89的方式，由(4-碘苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法88)和N-甲基丙-1-胺制備標題化合物；NMR(500.133MHz，DMSO)7.79(d，2H)，7.27(d，2H)，3.63-3.49(m，2H)，3.44-3.38(m，1H)，3.25(dd，1H)，3.05(五重峰，1H)，2.37-2.27(m，2H)，2.16(s，3H)，2.04-1.98(m，1H)，1.82-1.74(m，1H)，1.42(六重峰，2H)，0.84(t，3H)；m/z 373。
方法93 (4-溴苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮將4-溴苯甲酰氯(15g)的DCM(200ml)溶液通過滴液漏斗慢慢加到(3R)-吡咯烷-3-醇(6.0g)和TEA(21ml)與DCM(300ml)的攪拌溶液中。將反應物攪拌1小時后，加入飽和NH4Cl(200ml)，用DCM(3×200ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空濃縮，得到黃色固體。將該固體溶于最少量的熱乙腈中，冷卻后過濾，得到淺黃色固體。將分離的固體(13.4g)和TEA(10.3ml)溶于DCM(200ml)中，然后用滴液漏斗加入甲磺酰氯(4.54ml)的DCM(20ml)溶液。將反應物攪拌1小時后，加入飽和NH4Cl(150ml)，用DCM(3×200ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空濃縮，得到黃色膠狀物。然后加入乙腈和乙醚，將混合物加熱后進行超聲處理，得到標題化合物(16g，灰白色固體)；NMR(400.132MHz，CDCl3，旋轉異構體)7.56(d，2H)，7.44-7.37(m，2H)，5.38-5.25(m，1H)，3.94-3.59(m，4H)，3.13-3.02(m，3H)，2.39-2.35(m，1H)，2.31-2.11(m，1H)；m/z 349。
方法94 (4-溴苯基)-[(3S)-3-二乙氨基吡咯烷-1-基]甲酮將(4-溴苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法93；2.5g)和二乙胺(10g)加到二噁烷(30ml)中，在100℃下加熱直到觀察到原料耗盡。將反應混合物真空濃縮，然后加到50g SCX柱(MeOH)上，然后依次用MeOH、7N NH3的MeOH溶液洗脫。用硅膠純化(用0-2.5％MeOH的DCM溶液洗脫)，得到標題化合物(1.1g，橙色膠狀物)；NMR(500.133MHz，DMSO)7.60(d，2H)，7.43(d，2H)，3.63-3.49(m，2H)，3.44-3.38(m，1H)，3.30-3.20(m，2H)，2.58-2.50(m，4H)，2.05-1.98(m，1H)，1.80-1.73(m，1H)，0.96(t，6H)；m/z 326。
方法95 [(3S)-3-(氮雜環(huán)庚烷-1-基)吡咯烷-1-基]-(4-溴苯基)甲酮按類似于方法94的方式，由(4-溴苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法93)和氮雜環(huán)庚烷制備標題化合物；NMR(500.133MHz，DMSO)7.60(d，2H)，7.43(d，2H)，3.64-3.49(m，2H)，3.43-3.38(m，1H)，3.28-3.21(m，2H)，2.66-2.57(m，4H)，2.06-2.00(m，1H)，1.80-1.72(m，1H)，1.61-1.52(m，8H)；m/z 353。
方法96 (4-溴苯基)-[(3S)-3-(2-甲氧基乙基-甲基-氨基)吡咯烷-1-基]甲酮按類似于方法94的方式，由(4-溴苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法93)和2-甲氧基-N-甲基-乙胺制備標題化合物；NMR(500.133MHz，DMSO)7.60(d，2H)，7.43(d，2H)，3.64-3.49(m，2H)，3.41(m，3H)，3.28-3.24(m，4H)，3.12(五重峰，1H)，2.63-2.53(m，2H)，2.23(s，3H)，2.05-1.99(m，1H)，1.82-1.74(m，1H)；m/z 343。
方法97 (4-溴苯基)-[(3S)-3-(甲基-(2-甲基丙基)氨基)吡咯烷-1-基]甲酮按類似于方法94的方式，由(4-溴苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法93)和N，2-二甲基丙-1-胺制備標題化合物；NMR(500.133MHz，DMSO)7.60(d，2H)，7.43(d，2H)，3.62-3.50(m，2H)，3.44-3.38(m，1H)，3.28-3.25(m，1H)，3.04(五重峰，1H)，2.16(s，3H)，2.14-1.98(m，3H)，1.82-1.66(m，2H)，0.84(d，6H)；m/z 340。
方法98 (4-溴苯基)-[(3S)-3-(丙-2-基氨基)吡咯烷-1-基]甲酮將(4-溴苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法93；2.5g)和丙-2-胺(3.12g)溶于二噁烷(50ml)中，在微波輻射下于150℃加熱8小時。將反應混合物真空濃縮，溶于MeOH后，加到50g SCX柱上(依次用MeOH、7N NH3的MeOH溶液洗脫)。用硅膠純化(用0-5％MeOH的DCM溶液洗脫)，得到標題化合物(1.6g，橙色膠狀物)；NMR(500.133MHz，DMSO)7.60(d，2H)，7.43(d，2H)，3.63-3.49(m，2H)，3.45-3.33(m，2H)，3.17-3.10(m，1H)，2.81-2.71(m，1H)，2.05-1.98(m，1H)，1.69-1.63(m，1H)，1.00-0.97(m，6H)；m/z 312。
方法99 (4-碘苯基)-[(3S)-3-(1-哌啶基)吡咯烷-1-基]甲酮將密封管中的(4-碘苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法88；2.0g)和哌啶(1.84g)的二噁烷(10ml)溶液于101℃加熱3天。將反應混合物真空濃縮，溶于MeOH后通過50g SCX柱，再依次用MeOH、7N NH3的MeOH溶液洗脫。將所得固體懸浮于熱乙腈中，然后過濾，得到標題化合物，為無色固體。NMR 7.79(d，2H)，7.27(d，2H)，3.65-3.49(m，2H)，3.44-3.38(m，1H)，3.25(dd，1H)，2.95-2.84(m，1H)，2.45-2.40(m，2H)，2.37-2.30(m，2H)，2.07-2.01(m，1H)，1.80-1.72(m，1H)，1.54-1.47(m，4H)，1.41-1.37(m，2H)；m/z385。
方法100 1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基-(4-碘苯基)甲酮將1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁酯(15.7g)慢慢加到4-碘苯甲酰氯(20g)和TEA(23ml)與DCM(300ml)的溶液中。將反應物攪拌30分鐘后，加入2M NaOH(100ml)，水層用DCM(3×200ml)萃取。合并的有機物經干燥，真空除去溶劑，得到黃色膠狀物(33g)，將其溶于DCM(200ml)，加入TFA(150ml)，將反應混合物攪拌1小時后真空濃縮。加入2M NaOH(100ml)，然后水層用固體碳酸鉀飽和。水層用DCM(3×200ml)萃取，干燥后真空除去溶劑，得到無色固體，將其溶于最小量的熱DCM中；然后加入乙醚直到溶液變混濁。攪拌溶液直到固體析出，將其過濾后干燥，得到標題化合物(20.8g，無色固體)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.74(d，2H)，7.14(d，2H)，3.78-3.73(m，2H)，3.47-3.39(m，2H)，3.07-3.04(m，1H)，2.97-2.89(m，2H)，2.86-2.83(m，1H)，1.96-1.87(m，1H)，1.74-1.67(m，2H)；m/z 331。
方法101 (4-環(huán)丙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)-(4-碘苯基)甲酮將1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基-(4-碘苯基)甲酮(方法100；4.0g)、乙酸(3.6g)、分子篩(6g)和(1-乙氧基環(huán)丙基)氧基三甲基硅烷(4.1g)加到MeOH中并攪拌10分鐘。加入NaCNBH3(1.17g)，將反應物回流加熱24小時。真空除去溶劑，得到黏性膠狀物，然后加入2M NaOH(50ml)，用DCM(3×100ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空濃縮，得到透明油狀物。減壓蒸餾(0.56mmHg，138℃)，得到標題化合物(2.92g，透明油狀物)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.74(d，2H)，7.12(d，2H)，3.79-3.69(m，2H)，3.47-3.39(m，2H)，3.01-2.91(m，1H)，2.89-2.71(m，3H)，1.98-1.68(m，3H)，0.49-0.36(m，4H)；m/z 371。
方法102 (4-環(huán)丁基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)-(4-碘苯基)甲酮將1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基-(4-碘苯基)甲酮(方法100；3.5g)和環(huán)丁酮(1.48g)加到MeOH(100ml)中，在0℃下攪拌20分鐘。在20分鐘內慢慢加入NaCNBH3(1.02g)，同時將溫度保持在0℃以下。加完后，使反應物升溫至環(huán)境溫度后攪拌2天。然后將反應混合物真空濃縮，加入2M NaOH(50ml)后，用乙醚(3×100ml)萃取。合并的有機物經干燥后，真空除去溶劑，得到透明黏性油狀物。通過硅膠柱色譜法純化(用0-5％MeOH的DCM溶液洗脫)，得到標題化合物(3.1g，透明黏性油狀物)。NMR(400.132MHz，CDCl3)7.74(d，2H)，7.13(d，2H)，3.76-3.74(m，2H)，3.46-3.40(m，2H)，2.95-2.82(m，1H)，2.63-2.60(m，1H)，2.51-2.49(m，1H)，2.44-2.39(m，2H)，2.08-1.91(m，2H)，1.89-1.57(m，6H)；m/z 385。
方法103 (4-碘苯基)-[4-(2-甲氧基乙基)-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基]甲酮將1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基-(4-碘苯基)甲酮(方法100；1.5g)、TEA(1.2ml)和2-甲氧基溴乙烷(0.95g)加到DMA(50ml)中，在70℃下加熱66小時。將反應混合物真空濃縮，溶于MeOH后，加到50gSCX柱上(依次用MeOH、7N NH3的MeOH溶液洗脫)。用硅膠純化(用0-5％MeOH的DCM溶液洗脫)，得到標題化合物(1.02g，橙色膠狀物)；NMR(400.132MHz，CDCl3)7.74(d，2H)，7.13(d，2H)，3.78-3.73(m，2H)，3.51-3.39(m，4H)，3.36-3.32(m，3H)，2.88-2.86(m，1H)，2.77-2.67(m，5H)，2.00-1.93(m，1H)，1.83-1.75(m，1H)；m/z 389。
方法104 (4-乙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)-(4-碘苯基)甲酮將1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基-(4-碘苯基)甲酮(方法100；3.0g)和乙醛(0.56ml)溶于MeOH(150ml)中，在環(huán)境溫度下攪拌10分鐘后，一次性加入氰基硼氫化鈉(0.69g)。2小時后，再加入乙醛(0.56ml)，再攪拌反應物2小時。之后加入2M NaOH溶液(11ml)，將反應混合物攪拌1小時后真空濃縮。使殘余物在DCM和水之間分配，水層用DCM萃取兩次。使合并的有機萃取物通過析相分離膜(PTFE濾膜)過濾，真空蒸發(fā)溶劑，得到淺黃色油狀物，再用RPHPLC純化(1.39g)；NMR(400.132MHz，CDCl3)7.76-7.72(m，2H)，7.15-7.11(m，2H)，3.79-3.73(m，2H)，3.48-3.39(m，2H)，2.80-2.77(m，1H)，2.70-2.66(m，1H)，2.63-2.49(m，4H)，2.00-1.92(m，1H)，1.82-1.76(m，1H)，1.11-1.01(m，3H)；m/z 359。
方法105 [(1S，4S)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基]-(4-碘苯基)甲酮鹽酸鹽將4-碘苯甲酰氯(5.37g)和(1S，4S)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(4.0g)溶于DCM(150ml)，加入TEA(4.2ml)，將反應混合物攪拌1小時。之后加入2.0M NaOH(50ml)，反應混合物用DCM(3×100ml)萃取，合并的有機物經干燥后，真空除去溶劑，得到無色固體(8.9g)。將該固體溶于DCM(150ml)和TFA(100ml)中，攪拌1小時后真空濃縮。加入K2CO3飽和水溶液(50ml)，然后水層用DCM(3×100ml)萃取，將合并的有機物干燥，真空除去溶劑，得到黏性黃色膠狀物，將其溶于乙腈，加入4.0N HCl的二噁烷溶液(5.0ml)后過濾，干燥，得到標題化合物(4.3g，淺黃色固體)。NMR 9.63(brs，1H)，7.83(d，2H)，7.33(d，2H)，4.72-4.59(m，1H)，4.39(s，1H)，3.74(d，1H)，3.58(dd，1H)，3.38(dd，1H)，3.27(dd，1H)，2.07(d，1H)，1.93(d，1H)；m/z329。
方法106 4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸鋰鹽按類似于方法52的方式，由4-{[4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸乙酯(方法49)替換4-{[5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-基]氨基}苯甲酸乙酯(方法51)制備標題化合物；NMR(400.132MHz，DMSO)9.51(s，1H)，8.40(d，1H)，7.85(d，2H)，7.61(d，2H)，7.43(s，1H)，7.05(d，1H)，5.78(m，1H)，2.50(s，3H)，1.45(d，6H)；m/z 338。
方法107 (4-碘苯基)-[(3S)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮按類似于方法93的方式，由(3S)-吡咯烷-3-醇替換(3R)-吡咯烷-3-醇制備標題化合物；NMR(400.132MHz，CDCl3)(旋轉異構體)7.78(d，2H)，7.34-7.20(m，2H)，5.37-5.25(m，1H)，3.93-3.47(m，4H)，3.16-3.02(m，4H)，2.42-2.32(m，1H)，2.31-2.11(m，1H)；m/z 396。
方法108 (4-碘苯基)-[(3R)-3-甲氨基吡咯烷-1-基]甲酮按類似于方法90的方式，用(4-碘苯基)-[(3S)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法107)替換(4-碘苯基)-[(3R)-3-甲磺酰氧基吡咯烷-1-基]甲酮(方法88)制備標題化合物；NMR(400.132MHz，CDCl3)(旋轉異構體)7.78(d，2H)，7.34-7.20(m，2H)，5.37-5.25(m，1H)，3.93-3.47(m，4H)，3.16-3.02(m，4H)，2.42-2.32(m，1H)，2.31-2.11(m，1H)；m/z 396。
實施例209 下面舉例說明人用治療或預防用途的含有式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯(下稱化合物X)的代表性藥物劑型注意可通過制藥領域眾所周知的常規(guī)方法獲得上述制劑。片劑(a)-(c)可通過常規(guī)方法進行腸溶包衣，例如用醋酸纖維素鄰苯二甲酸酯包衣。
權利要求
1.一種下式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯
其中
R1為乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基或環(huán)丁基；其中R1可以在碳上被一個或多個R6任選取代；
R2為甲基、乙基、異丙基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基、環(huán)丙基甲基或環(huán)丙基；
R3為氫或鹵素；
R4為氫、乙炔基、鹵素、硝基、氰基、羥基、氨基、羧基、氨基甲酰基、巰基、甲硫基、甲磺?；?、三氟甲基、三氟甲氧基、甲基、乙基或甲氧基；
A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中A環(huán)的2個原子當A環(huán)是氮連接的5-7元飽和環(huán)時，可以任選通過1或2個原子橋連接；且其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代；
R5為碳上的取代基，選自鹵素、氰基、羥基、三氟甲氧基、氨基、羧基、氨基甲?；被酋；?、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6烷?；-(C1-6烷基)氨基甲?；?、N，N-(C1-6烷基)2氨基甲?；?、其中a為0-2的C1-6烷基S(O)a、C1-6烷基磺酰氧基、C1-6烷氧羰基、碳環(huán)基、雜環(huán)基、N-(C1-6烷基)氨磺酰基或N，N-(C1-6烷基)2氨磺?；?；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代；或者R5為-NHR9、-NR10R11或-O-R12；
n為0-2；其中R5的取值可以相同或不同；
R6選自鹵素、甲氧基和羥基；
R7、R9、R10、R11、R12和R15獨立選自C1-4烷基、C1-4烷?；?、C1-4烷基磺酰基、C2-4烯基磺酰基、C2-4炔基磺?；1-4烷氧羰基、氨基甲?；-(C1-4烷基)氨基甲?；?、N，N-(C1-4烷基)氨基甲?；⑻辑h(huán)基或雜環(huán)基；其中R7、R9、R10、R11、R12和R15可以在碳上獨立地被一個或多個選自R13的基團任選取代；且其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R14取代；
R8選自鹵素、氰基、羥基、三氟甲氧基、三氟甲基、氨基、羧基、氨基甲?；?、氨磺酰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、乙?；?、乙酰氧基、甲氨基、乙氨基、二甲氨基、二乙氨基、N-甲基-N-乙氨基、乙?；被?、苯氨基、N-甲基氨基甲?；?、N-乙基氨基甲?；，N-二甲基氨基甲?；?、N，N-二乙基氨基甲酰基、N-甲基-N-乙基氨基甲酰基、甲硫基、乙硫基、甲基亞磺?；?、乙基亞磺?；?、甲磺?；?、乙磺酰基、甲氧羰基、乙氧羰基、N-甲基氨磺酰基、N-乙基氨磺?；?、N，N-二甲基氨磺?；，N-二乙基氨磺?；騈-甲基-N-乙基氨磺?；?；
R13選自鹵素、氰基、羥基、氨基、三氟甲基、三氟甲氧基、二甲氨基、碳環(huán)基、雜環(huán)基、C1-3烷基和C1-3烷氧基；和
R14選自C1-3烷基、C1-3烷?；?、C1-3烷基磺酰基、C1-3烷氧羰基、氨基甲?；-(C1-3烷基)氨基甲?；蚇，N-(C1-3烷基)氨基甲?；?。
2.權利要求1的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基或環(huán)丁基。
3.權利要求1或權利要求2的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基。
4.權利要求1-3中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中R3為氫、氟或氯。
5.權利要求1-4中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中R4為氫、鹵素、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基。
6.權利要求1-5中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中A環(huán)是氮連接的4-7元飽和環(huán)，任選含有另外的氮、氧或硫原子；其中A環(huán)的2個原子當A環(huán)是氮連接的5-7元飽和環(huán)時，可以任選通過1或2個原子橋連接；且其中如果A環(huán)含有另外的氮原子，則氮可以任選被R7取代；其中
R7選自C1-4烷基、碳環(huán)基或雜環(huán)基；其中R7可以在碳上被一個或多個選自R13的基團任選取代；
R13選自鹵素、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、二甲氨基或雜環(huán)基。
7.權利要求1-6中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷基磺酰氧基、其中a為2的C1-6烷基S(O)a或雜環(huán)基；其中R5可以在碳上獨立地被一個或多個R8任選取代；或者R5為-NHR9或-NR10R11；其中如果所述雜環(huán)基含有-NH-部分，則氮可以任選被R15取代；其中
R6選自鹵素、甲氧基和羥基；
R9、R10、R11和R15獨立選自C1-4烷基或碳環(huán)基；其中R9、R10、R11和R15可以在碳上獨立地被一個或多個選自R13的基團任選取代；
R8選自羥基、氨基和苯氨基；和
R13選自碳環(huán)基和C1-3烷氧基。
8.權利要求1-7中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，其中n為0或1。
9.一種下式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯
其中
R1為乙基、異丙基、環(huán)丙基甲基、1-環(huán)丙基乙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基或環(huán)丁基；
R2為甲基、乙基、異丙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基或環(huán)丙基；
R3為氫、氟或氯；
R4為氫、氟、氯、氰基、甲磺?；?、甲基或甲氧基；
A環(huán)為嗎啉代、1，1-二氧代硫代嗎啉代、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、氮雜環(huán)丁烷-1-基、4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-乙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基、4-(2-二甲氨基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基乙基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、4-異丙基哌嗪-1-基、4-(4-氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2-氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2，4-二氟苯基)哌嗪-1-基、4-(3，4-二氟苯基)哌嗪-1-基、4-(2-氯苯基)哌嗪-1-基、4-(4-氯苯基)哌嗪-1-基、4-(4-苯基)哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-甲氧基苯基)哌嗪-1-基、4-(3-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2，3-二甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(2，6-二甲基苯基)哌嗪-1-基、4-(4-羥基苯基)哌嗪-1-基、4-(2-羥基苯基)哌嗪-1-基、4-(5-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-基、4-環(huán)丙基高哌嗪-1-基、4-環(huán)丁基高哌嗪-1-基、4-(2-羥乙基)高哌嗪-1-基、4-(2-甲氧基乙基)高哌嗪-1-基、4-異丙基高哌嗪-1-基、1，4-氧氮雜環(huán)庚烷-4-基、8-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基、吡咯烷-1-基、2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-甲基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-(2-甲氧基乙基)-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基、2-乙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基或2-異丙基-2，5-二氮雜二環(huán)[2.2.1]庚-5-基；
R5為碳上的取代基，選自羥基、氨基、甲基、甲磺?；?、甲磺酰氧基、嗎啉代、哌啶-1-基、二甲氨基、二乙氨基、異丙基、吡啶-2-基、羥甲基、甲氨基、氨甲基、4-甲基哌嗪-1-基、環(huán)丙氨基、吡咯烷-1-基、高哌嗪-1-基、環(huán)丁氨基、苯氨基甲基、N-甲基-N-(環(huán)丙基甲基)氨基、N-甲基-N-環(huán)丙氨基、N-甲基-N-異丁氨基、N-甲基-N-(2-甲氧基乙基)氨基、N-乙基-N-丙氨基或N-甲基-N-環(huán)丁氨基；
n為0或1。
10.一種下式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯
所述式(I)化合物選自
(1)4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-{4-[(4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]苯基}嘧啶-2-胺；
(2)N-(4-{[(3 S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}苯基)-5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺；
(3)5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-{4-[(4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]苯基}嘧啶-2-胺；
(4)5-氯-N-(4-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}苯基)-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺；
(5)5-氯-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)-N-{4-[(4-甲基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]苯基}嘧啶-2-胺；
(6)N-{4-[(4-異丙基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)羰基]苯基}-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺；
(7)N-(4-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}苯基)-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺；
(8)N-(4-{[(3S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-基]羰基}-3-氟苯基)-5-氟-4-(1-異丙基-2-甲基-1H-咪唑-5-基)嘧啶-2-胺；
(9)[4-[[5-氟-4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-(4-丙-2-基-1，4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)甲酮；
(10)[4-[[5-氟-4-(2-甲基-3-丙-2-基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-[(3S)-3-(甲氨基)吡咯烷-1-基]甲酮。
11.一種用于制備權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解酯的方法，該方法由以下方法組成
方法a)使下式(II)的嘧啶
與下式(III)的苯胺反應
式(II)中，L為可置換基團；
或者
方法b)使下式(IV)的化合物
與下式(V)的化合物反應
其中T為O或S；Rx可以相同或不同，且選自C1-6烷基；或者
方法c)使下式(VI)的酸或其活性酸衍生物
與下式(VII)的胺反應
或者
方法d)對于式(I)化合物；使下式(VIII)的嘧啶
與下式(IX)的化合物反應
其中Y為可置換基團；
且之后如有需要
i)將一種式(I)化合物轉化成另一種式(I)化合物；
ii)脫去任何保護基；
iii)制成藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
12.一種藥物組合物，所述組合物包含權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯，以及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
13.一種用作藥物的權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
14.權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于產生抗細胞增殖作用的藥物中的用途。
15.權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于產生CDK2抑制作用的藥物中的用途。
16.權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
17.權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于治療以下疾病的藥物中的用途白血病或淋巴惡性腫瘤或乳腺癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、肝癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌、外陰癌、皮膚癌或卵巢癌。
18.權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯在制備用于治療以下疾病的藥物中的用途癌癥、纖維增殖性和分化性疾病、牛皮癬、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈粥樣硬化、動脈再狹窄、自身免疫病、急性和慢性炎癥、骨病和伴有視網膜血管增生的眼部疾病。
19.一種在需要這種治療的溫血動物體內產生抗細胞增殖作用的方法，該方法包括給予所述動物有效量的權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
20.一種在需要這種治療的溫血動物體內產生CDK2抑制作用的方法，該方法包括給予所述動物有效量的權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
21.一種治療需要這種治療的溫血動物的癌癥的方法，該方法包括給予所述動物有效量的權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
22.一種治療需要這種治療的溫血動物的白血病或淋巴惡性腫瘤或以下癌癥的方法乳腺癌、肺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、肝癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌、外陰癌、皮膚癌或卵巢癌，該方法包括給予所述動物有效量的權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
23.一種治療需要這種治療的溫血動物的以下疾病的方法癌癥、纖維增殖性和分化性疾病、牛皮癬、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈粥樣硬化、動脈再狹窄、自身免疫病、急性和慢性炎癥、骨病和伴有視網膜血管增生的眼部疾病，該方法包括給予所述動物有效量的權利要求1-10中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或體內可水解的酯。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有細胞周期抑制活性的式(I)化合物。
文檔編號A61K31/506GK101273031SQ200680035603
公開日2008年9月24日申請日期2006年7月27日優(yōu)先權日2005年7月30日
發(fā)明者D·安德魯斯, M·R·芬利, C·格林, C·瓊斯申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司

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