專利名稱：新的丹參降香提取物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥注射液領(lǐng)域，涉及一種新的以丹參降香為來源的藥物組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：
丹參，又名赤參、紫丹參，是唇形科多年生草本植物丹參的根。丹參性味苦，微寒，歸心、肝經(jīng)。具有活血化瘀、消腫止痛、養(yǎng)血安神之功效。其有效成分水溶性酚酸類具有較強(qiáng)的擴(kuò)張冠脈血管、降血脂、降血液黏度、抗血小板凝集等作用。對缺血性心臟病可以起到標(biāo)本兼治的作用。
降香(英)Rosewood，別名降真香、紫降香、花梨母。為豆科植物降香檀Dalbergia odorifera T.Chen樹干和根的心材。喬木，幼嫩部分、花序及子房略被短柔毛；樹皮褐色，粗糙；小枝近平滑，具密集的蒼白色皮孔。羽狀復(fù)葉互生；小葉9～13，近革質(zhì)，卵形或橢圓形，基部小葉較小，闊卵形，側(cè)脈和網(wǎng)脈于兩面略凸起。圓錐花序腋生；萼鐘狀，5裂，上部2裂齒短闊；花冠蝶形，淡黃色或乳白色，各瓣近等長，均具爪；雄蕊9枚，1組；子房狹橢圓形，具長約2.5mm的柄。莢果舌狀長橢圓形，長4.5～8cm，寬1.5～1.8cm，柄長5～10mm。種子常1枚，稀2枚?；ㄆ?～6月。生于中海拔地區(qū)的山坡疏林中、林邊或村旁。產(chǎn)于海南。全年采收，除去邊材，陰干。心材呈長條形或不規(guī)則碎塊。表面紫紅色或褐色，有致密的紋理，縱斷面不整齊。質(zhì)硬，有油性。氣香，味微苦。含揮發(fā)油、油中主成分有β-沒藥烯、反式-β-金合歡烯、反式-苦橙油醇等。性溫，味辛。行氣活血，止痛，止血。用于脘腹疼痛、肝郁脅痛、胸痹刺痛、跌撲損傷、外傷出血。
丹參和降香合用目前國內(nèi)市場有丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液，效果顯著，臨床反應(yīng)良好。但是三種注射液研發(fā)時(shí)間較早，受當(dāng)時(shí)技術(shù)水平和條件的限制，工藝有許多弊端，存在質(zhì)量不易控制、不良反應(yīng)多等問題。將現(xiàn)代新興提取純化和質(zhì)量控制方法用于丹參和降香的制備工藝中，符合名優(yōu)中成藥二次開發(fā)的方向，具有重大的意義。原工藝丹參和降香分別處理，造成能源浪費(fèi)，并且降香的揮發(fā)油成分直接入藥制成注射液，顯然利用率較低，不良反應(yīng)多。解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的這些技術(shù)問題，不是普通技術(shù)人員不經(jīng)過創(chuàng)造性的勞動(dòng)就能實(shí)現(xiàn)的，更不是顯而易見的。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種新的丹參降香提取物，本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供該提取物的制備方法。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采取了如下的技術(shù)手段 我們制備了新的丹參降香提取物，由丹參和降香的水飽和蒸餾液的環(huán)糊精包合物和丹參降香的水溶性部分的精制物組成。可以用于制備丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液。
新的丹參降香提取物制備過程如下 1)處方量丹參和降香合并，加入水，蒸餾得飽和水蒸餾液，蒸餾液加入環(huán)糊精包合，得揮發(fā)油包合部分； 2)剩余藥渣用水提取三次，水提取液濃縮后加入乙醇至65-80％濃度醇沉過夜，過濾，續(xù)濾液回收乙醇，濃縮液加入水充分?jǐn)嚢韬箪o置過夜，過濾，續(xù)濾液進(jìn)一步純化，得丹參降香水溶性部分精制物； 3)合并兩部分，得丹參降香提取物。
其中環(huán)糊精可以使用α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精或羥丙基-β-環(huán)糊精，其中羥丙基-β-環(huán)糊精包合率較好。
第二步中進(jìn)一步純化是指用乙酸乙酯萃取或大孔吸附樹脂層析。
大孔吸附樹脂可以是D101、HPD-300、ADS-8、ADS-7、ADS-5或ME-1型號大孔吸附樹脂。
我們還提供了丹參降香提取物在制備丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液中的應(yīng)用。
本發(fā)明成功的制備了新的丹參降香提取物，并且將該提取物進(jìn)一步制備成丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液。通過大量的試驗(yàn)篩選，提供了丹參降香提取物的制備方法。利用新技術(shù)、新工藝制備的該提取物克服了以往以丹參和降香為藥效成分的中藥注射液中揮發(fā)性有效成分利用率低、丹參酚酸類成分純度低、其他雜質(zhì)成分多和安全風(fēng)險(xiǎn)高等問題。實(shí)踐證明，新的丹參降香提取物用于制備丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液工藝可控，質(zhì)量穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，藥理實(shí)驗(yàn)證明藥效優(yōu)于原工藝制備物。
下面用具體實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但是并不能用于唯一限定本發(fā)明。
具體實(shí)施例 實(shí)施例1丹參降香提取物的制備 取丹參1000g和降香100g合并，加入10倍量水，蒸餾得飽和水蒸餾液，蒸餾液加入1000g羥丙基-β-環(huán)糊精包合，將蒸餾液超聲條件下不斷加入羥丙基-β-環(huán)糊精溶液中，超聲8小時(shí)，濃縮后干燥，得揮發(fā)油包合部分； 蒸餾飽和水蒸餾液后的剩余藥渣用水提取三次，每次10倍量水，每次2h，水提取液濃縮后加入95％乙醇至75％濃度醇沉過夜，過濾，續(xù)濾液回收乙醇，濃縮液加入水充分?jǐn)嚢韬箪o置過夜，過濾，續(xù)濾液上預(yù)處理好的D101大孔吸附樹脂柱，上柱流速2小時(shí)/BV(床體積)，2BV水沖洗樹脂柱，2BV75％乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液回收乙醇并進(jìn)一步濃縮，干燥，得丹參降香水溶性部分精制物； 將揮發(fā)油包和部分和丹參降香水溶性部分精制物合并，即為丹參降香提取物。
樣品編號DXGX-1 實(shí)施例2丹參降香提取物的制備 取丹參100g和降香1000g合并，加入10倍量水，蒸餾得飽和水蒸餾液，蒸餾液加入1000gβ-環(huán)糊精包合，將蒸餾液超聲條件下不斷加入β-環(huán)糊精溶液中，超聲12小時(shí)，濃縮后干燥，得揮發(fā)油包合部分； 蒸餾飽和水蒸餾液后的剩余藥渣用水提取三次，每次15倍量水，每次2h，水提取液濃縮后充分?jǐn)嚢柘?，加?5％乙醇至70％濃度醇沉過夜，過濾，續(xù)濾液回收乙醇，濃縮液加入水充分?jǐn)嚢韬箪o置過夜，過濾，續(xù)濾液上預(yù)處理好的ME-2大孔吸附樹脂柱，上柱流速3小時(shí)/BV(床體積)，2BV水沖洗樹脂柱，2BV75％乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液回收乙醇并進(jìn)一步濃縮，干燥，得丹參降香水溶性部分精制物； 將揮發(fā)油包和部分和丹參降香水溶性部分精制物合并，即為丹參降香提取物。
樣品編號DXPT-1 實(shí)施例3丹參降香提取物的制備 取丹參640g和降香400g合并，加入15倍量水，蒸餾得飽和水蒸餾液，蒸餾液加入1000gβ-環(huán)糊精包合，將蒸餾液在高速乳化切割機(jī)攪拌下不斷加入β-環(huán)糊精溶液中，攪拌12小時(shí)，濃縮后干燥，得揮發(fā)油包合部分； 蒸餾飽和水蒸餾液后的剩余藥渣用水提取三次，每次15倍量水，水提取液濃縮后加入95％乙醇至75％濃度醇沉過夜，過濾，續(xù)濾液回收乙醇，濃縮液加入水充分?jǐn)嚢韬箪o置過夜，過濾，續(xù)濾液上預(yù)處理好的D101大孔吸附樹脂柱，上柱流速2小時(shí)/BV(床體積)，2BV水沖洗樹脂柱，2BV75％乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液回收乙醇并進(jìn)一步濃縮，干燥，得丹參降香水溶性部分精制物； 將揮發(fā)油包和部分和丹參降香水溶性部分精制物合并，即為丹參降香提取物。
樣品編號XD-1 實(shí)施例4丹香冠心注射液的制備 取實(shí)施例1制備的丹參降香提取物DXGX-1，加入600ml注射用水，加熱條件下充分溶解，冷卻后放入0-4℃冷庫中冷藏過夜，取出后取上清液過濾，續(xù)濾液加入1ml土溫80，補(bǔ)充注射用水至1100ml，加熱至80℃，加入5g活性炭，保溫30min，脫碳，過0.22微米微孔濾膜，灌封，滅菌，既得。
實(shí)施例5丹香葡萄糖滴注液的制備 取實(shí)施例2制備的丹參降香提取物DXPT-1，加入500ml注射用水，加熱條件下充分溶解，冷卻后放入0-4℃冷庫中冷藏過夜，取出后取上清液過濾，續(xù)濾液加入1ml土溫80，補(bǔ)充注射用水至1000ml，加熱至80℃，加入5g活性炭，保溫30min，脫碳，過0.22微米微孔濾膜，灌封，滅菌，既得。
實(shí)施例6香丹注射液的制備 取實(shí)施例2制備的丹參降香提取物DXPT-1，加入500ml注射用水，加熱條件下充分溶解，冷卻后放入0-4℃冷庫中冷藏過夜，取出后取上清液過濾，續(xù)濾液加入1ml土溫80，補(bǔ)充注射用水至1000ml，加熱至80℃，加入5g活性炭，保溫30min，脫碳，過0.22微米微孔濾膜，灌封，滅菌，既得。
實(shí)施例7本發(fā)明新香丹注射液對結(jié)扎冠狀動(dòng)脈所致大鼠急性心肌缺血的影響 實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明新香丹注射液、原香丹注射液生理鹽水 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar II級大白鼠60只，雌雄各半，體重160g-200g 實(shí)驗(yàn)方法 取體重200g-240g的健康Wistar大鼠60只，隨機(jī)分成6組，每組10只，①正常未結(jié)扎組，②缺血對照組(生理鹽水)，③本發(fā)明新香丹注射液(高劑量)，④原香丹注射液(高劑量)，⑤本發(fā)明新香丹注射液(低劑量)，⑥原香丹注射液(低劑量)。所有動(dòng)物給藥體積相同(2ml/100g)，造模前腹腔注射藥物，每天給藥1次，連續(xù)給藥3天，于末次給藥后1h，腹腔注射10％水合氯醛3ml/kg進(jìn)行麻醉，置于大鼠手術(shù)臺上固定仰臥位固定，縱形切開頸部皮膚，鈍性分離氣管周圍組織，暴露氣管，行氣管內(nèi)插管，確認(rèn)插入氣管中，后縫線固定插管于大鼠嘴旁。將針狀電極插入四肢皮下，記錄II導(dǎo)心電圖，于大鼠腋下平行線，左側(cè)橫行切開皮膚約1.5cm，在第4或第5肋間鈍性分離肌層，打開胸腔，緊接上動(dòng)物呼吸機(jī)，輔助大鼠呼吸。剪開心包，輕壓右側(cè)胸廓，擠出心臟，在右側(cè)圓錐與左心耳之間冠狀靜脈處用5個(gè)0的絲線結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈以阻斷左冠狀動(dòng)脈血流，此時(shí)缺血心肚壁呈現(xiàn)發(fā)紺、膨出，心肌收縮減弱，同時(shí)心電圖示S-T段明顯上抬，T波高聳，造成心肌缺血，缺血45min后剪開縫線以恢復(fù)冠狀動(dòng)脈血液灌流，心肌再灌注2h，心電圖示S-T段回落1/2以上。結(jié)扎前心電圖不正常，或未到觀察終點(diǎn)而死亡以及造模不成功者剔除。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死動(dòng)物，眼后動(dòng)脈取血，LDH，CPK檢測試劑盒測定血清LDH，CPK活性，并于斷頭取血后迅速取出心臟.用生理鹽水沖洗，除去血污，剔除血管、脂肪等非心肌組織，用吸水紙吸去水分，稱全心濕重。沿冠狀溝切除心房，留下心室，稱重，順房室溝從心尖到心基部平行將心室肌橫切成厚約0.1cm的心肌片4片，用生理鹽水沖洗干凈。將心肌片放在0.1％的N-BT溶液中，在37℃水浴條件下染色15min.染色后立即用水沖洗去多余的染料。梗死區(qū)不著色，非梗死區(qū)被N-BT溶液染成藍(lán)色。剪去梗死心肌，稱濕重，以梗死區(qū)濕重與全心濕重的百分比表示心肌梗死范圍。結(jié)果見表1、2。
表1本發(fā)明新香丹注射液對結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈所致急性心肌缺血再灌注心肌梗死范圍的影響 注與②對照組比較**P＜0.01 表2本發(fā)明新香丹注射液對結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈所致急性心肌缺血再灌注CPK和LDH的影響(x±s，iv/L) 注與②對照組比較**P＜0.01 說明本發(fā)明新香丹注射液與原香丹注射液比較，在高低劑量使用時(shí)抗心肌缺血作用更強(qiáng)。
實(shí)施例2利用血栓法測定本發(fā)明新丹香冠心注射液對大白鼠血栓形成的影響 實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明新丹香冠心注射液，原丹香冠心注射液生理鹽水 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 體重300-400克的SD大白鼠40只，雌雄各半。隨機(jī)分為①空白對照(生理鹽水)，②本發(fā)明新丹香冠心注射液(高劑量)，③原丹香冠心注射液(高劑量)，④本發(fā)明新丹香冠心注射液(低劑量)，⑤原丹香冠心注射液(低劑量)。
實(shí)驗(yàn)方法 將大鼠給藥，所有動(dòng)物給藥體積相同(2ml/100g)，造模前腹腔注射各組藥物，每天給藥1次，共5天。大鼠給藥第5天，末次給藥后1小時(shí)后，動(dòng)物稱重，iv 3％戊巴比妥納1ml/kg麻醉。仰臥位固定，取頸正中切口，分離氣管，分離雙側(cè)頸總A，V，在聚乙烯管中穿6cm5個(gè)0絲線，以肝素生理鹽水溶液充滿聚乙烯管，當(dāng)聚乙烯管的一端插入左側(cè)頸外靜脈后，由聚乙烯管準(zhǔn)確的注入肝素抗凝，再將聚乙烯管另一端插入右側(cè)頸動(dòng)脈，打開動(dòng)脈夾，造成A-V旁路，開放血流15min，取出硅膠管，抽出絲線(含血栓)，按號置于已稱重的小培養(yǎng)皿中，分析天平稱取血栓濕重，總重量減去絲線重量即得血栓重量。結(jié)果見表3 表3各給藥組的血栓重量比較
注與生理鹽水對照組比較**P＜0.01 與原丹參冠心注射液對照組比較ΔΔP＜0.01 說明本發(fā)明新丹香冠心注射液與原丹香冠心注射液比較，高低劑量在抗血栓形成中活血作用更強(qiáng)。
權(quán)利要求
1、一種丹參降香提取物，由丹參和降香的水飽和蒸餾液的環(huán)糊精包合物和丹參降香的水溶性部分的精制物組成。
2、如權(quán)利要求1所述的丹參降香提取物，其特征是可以用于制備丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液。
3、如權(quán)利要求1或2所述的丹參降香提取物，是按如下步驟完成的
1)處方量丹參和降香合并，加入水，蒸餾得飽和水蒸餾液，蒸餾液加入環(huán)糊精包合，得揮發(fā)油包合部分；
2)剩余藥渣用水提取三次，水提取液濃縮后加入乙醇至65-80％濃度醇沉過夜，過濾，續(xù)濾液回收乙醇，濃縮液加入水充分?jǐn)嚢韬箪o置過夜，過濾，續(xù)濾液進(jìn)一步純化，得丹參降香水溶性部分精制物；
3)合并兩部分，得丹參降香提取物。
4、如權(quán)利要求3所述的丹參降香提取物，其特征是第一步中所述的環(huán)糊精是指α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精或羥丙基-β-環(huán)糊精。
5、如權(quán)利要求3所述的丹參降香提取物的制備方法，其特征是由以下步驟完成
1)處方量丹參和降香合并，加入水，蒸餾得飽和水蒸餾液，蒸餾液加入環(huán)糊精包合，得揮發(fā)油包合部分；
2)剩余藥渣用水提取三次，水提取液濃縮后加入乙醇至65-80％濃度醇沉過夜，過濾，續(xù)濾液回收乙醇，濃縮液加入水充分?jǐn)嚢韬箪o置過夜，過濾，續(xù)濾液進(jìn)一步純化，得丹參降香水溶性部分精制物；
3)合并兩部分，得丹參降香藥物組合物。
6、如權(quán)力要求5所述的丹參降香的提取物的制備方法，其特征是第一步中所述的環(huán)糊精是指α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精或羥丙基-β-環(huán)糊精。
7、如權(quán)力要求5或6所述的丹參降香的提取物的制備方法，其特征是第二步中進(jìn)一步純化是指用乙酸乙酯萃取或大孔吸附樹脂層析。
8、如權(quán)力要求7所述的丹參降香的提取物的制備方法，其特征是大孔吸附樹脂可以是D101、HPD-300、ADS-8、ADS-7、ADS-5或ME-1型號大孔吸附樹脂。
9、如權(quán)力要求8所述的丹參降香的提取物在制備丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液中的應(yīng)用。
全文摘要
一種丹參降香提取物，是由丹參和降香的水飽和蒸餾液的環(huán)糊精包合物和丹參降香的水溶性部分的精制物組成，可以用于制備丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液。利用新技術(shù)、新工藝制備的該提取物克服了以往以丹參和降香為藥效成分的中藥注射液中揮發(fā)性有效成分利用率低、丹參酚酸類成分純度低、其他雜質(zhì)成分多和安全風(fēng)險(xiǎn)高等問題。實(shí)踐證明，新的丹參降香提取物用于制備丹香冠心注射液、丹香葡萄糖滴注液或香丹注射液工藝可控，質(zhì)量穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，藥理實(shí)驗(yàn)證明藥效優(yōu)于原工藝制備物。
文檔編號A61P9/10GK1969951SQ20061012384
公開日2007年5月30日 申請日期2006年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月29日
發(fā)明者陳文展 申請人:陳文展