專利名稱：一種柴胡提取物、其制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種柴胡提取物、其制備方法及其應(yīng)用，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
柴胡為傘形科柴胡屬植物，根入藥。該屬植物共有120多種，我國(guó)有42種、17個(gè)變種，民間廣泛應(yīng)用的有10余種。收載于《中華人民共和國(guó)藥典》的僅有南柴胡Bupleu rumscorzonerifolium Willd和北柴胡B.chinense DC。其味苦、性涼，入肝、膽經(jīng)。具有和解表里、疏肝、升陽(yáng)功能。主治往來(lái)寒熱、胸滿肋痛、口苦耳聾、頭痛目眩、瘧疾、下痢脫肛、月經(jīng)不調(diào)、子宮下垂等。
通過(guò)化學(xué)成分研究，從中分出皂苷、黃酮、木脂素、香豆素、甾醇、多糖、多聚炔、苯乙醇苷、異戊烯醇苷、揮發(fā)油等。皂苷類成分為其主要成分，到目前為止，從中已分出約60余種皂苷成分，柴胡皂苷其苷元主要分為兩大類即齊墩果烷型和熊果烷型，前者又分為環(huán)氧醚(I-1)、異環(huán)雙烯(I-2)，12-烯(I-3)、同環(huán)雙烯(I-4)，12-烯-28-羧酸(I-5)、異環(huán)雙烯-30-羧酸(I-6)，18-烯型(I-7)；后者分為11-烯16-羥基-環(huán)氧醚(II-1)，11-烯-16，23-羥基-環(huán)氧醚(II-2)，11-烯-16，20-羥基-環(huán)氧醚(II-3)，12-烯-11，16，28-羥基-環(huán)氧醚(II-4)，12-烯-11，28-羥基-15，16-環(huán)氧醚(II-5)等。其多糖部分常見(jiàn)有葡萄糖、鼠李糖、吠喃糖、木糖、戊糖醇等。
柴胡皂苷可分為a、b、c、d、e、f和h，其中最具活性的成分是柴胡皂苷a和d。研究發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)等作用。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者把柴胡皂苷應(yīng)用于腎病、肝纖維化、腫瘤等疾病的治療，取得了可喜的成就。
現(xiàn)今國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上柴胡的各種制劑很多，在臨床上用于治療上呼吸道感染、肺炎、流感等多種發(fā)熱癥，是一種療效較好的解表退熱藥，在臨床治療中發(fā)揮了重要的作用。但由于使用藥材品種混亂，藥用部位不統(tǒng)一，再加上其化學(xué)成分復(fù)雜，有效成分含量相差懸殊，造成了柴胡及其制劑質(zhì)量不穩(wěn)定，在其療效或使用等方面都存在著一定的問(wèn)題口服制劑如片劑、顆粒、沖劑等存在用藥劑量大，效果不明顯的缺陷，每次需服用4-6片或10-20g，給患者帶來(lái)不便；而注射液則存在毒副作用大，導(dǎo)致不良反應(yīng)發(fā)生等缺陷。據(jù)報(bào)道，柴胡注射液的主要不良反應(yīng)有1、過(guò)敏性休克在常規(guī)劑量，發(fā)生反應(yīng)時(shí)間最快者在注射過(guò)程中即出現(xiàn)休克癥狀，最慢在注射后1.5h出現(xiàn)休克癥狀，大多在5min內(nèi)發(fā)病。表現(xiàn)為頭暈、心慌、呼吸急促、面色蒼白、四肢厥冷、血壓下降等。2、呼吸道反應(yīng)常規(guī)劑量注射后，在5min內(nèi)出現(xiàn)氣短、胸悶、心慌、口唇紫紺、哮喘、呼吸困難等癥狀。3、心血管系統(tǒng)反應(yīng)可引起心率減慢、陣發(fā)性心動(dòng)過(guò)速。4、皮膚反應(yīng)常規(guī)劑量注射，發(fā)生反應(yīng)時(shí)間從注射后5min-2d，大多在30min左右發(fā)病。表現(xiàn)為皮膚潮紅、瘙癢、紅色丘疹、尋麻疹、固定性藥疹等。
近年來(lái)隨著世界上許多國(guó)家對(duì)柴胡的深入研究，一致認(rèn)為柴胡皂苷是柴胡的主要有效成份，經(jīng)現(xiàn)代中藥提取手段得到的柴胡皂苷比柴胡原藥材具有療效顯著、副作用小的特殊優(yōu)勢(shì)，其生理作用及臨床意義不斷擴(kuò)大。目前，已有的柴胡皂苷產(chǎn)品中，有效成分含量低，雜質(zhì)含量高，不利于藥物藥效的發(fā)揮，及相關(guān)劑型的研制，所以，高純度柴胡皂苷產(chǎn)品的研制尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種柴胡提取物，該提取物中含有較高含量的柴胡皂苷a和柴胡皂苷d。
本發(fā)明的另一目的在于提供上述柴胡提取物的制備方法。
本發(fā)明的再一目的在于提供上述柴胡提取物在制備抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)疾病藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的柴胡提取物由中藥柴胡經(jīng)醇溶液提取得到，其中含有20-30％重量份的柴胡皂苷a，10-20％重量份的柴胡皂苷d。
根據(jù)原料、工藝和操作的不同，上述提取物中柴胡皂苷a與柴胡皂苷d之和優(yōu)選占提取物總量的40-50％重量份。在此范圍內(nèi)，通過(guò)原料的篩選，工藝的優(yōu)化，以及操作的良好控制，能夠?qū)崿F(xiàn)柴胡皂苷a與柴胡皂苷d之和占提取物總量高達(dá)50％的結(jié)果，這是現(xiàn)有技術(shù)無(wú)法達(dá)到的高度，有利于柴胡有效成分的進(jìn)一步利用。
在上述提取物中柴胡皂苷a與柴胡皂苷d之和優(yōu)選占提取物總量的40-50％重量份的情況下，包括柴胡皂苷a與柴胡皂苷d的全部柴胡皂苷的總量可占到提取物總量的50-90％重量份，其純度與含量已經(jīng)達(dá)到了極高的水平。
本發(fā)明所述提取物的制備方法包括干燥柴胡粉碎、提取、濃縮、柱層析、除糖、除雜質(zhì)、洗脫、脫色、濃縮、干燥等操作過(guò)程，具體為以下步驟I.將柴胡粉碎，加6-10倍柴胡重量的醇溶液在75-85℃水浴中回流提取1-3次，每次提取1-3小時(shí)，合并提取液，在35-50℃下減壓濃縮，得濃縮液，濃縮液量為生藥量的2-4倍重量；II.將濃縮液通過(guò)D101大孔樹(shù)脂柱，靜置吸附2-3小時(shí)，然后用8-12倍樹(shù)脂柱裝量體積的蒸餾水洗柱除糖，再用1-2倍樹(shù)脂柱裝量體積的40-60％乙醇洗柱除雜質(zhì)；III.使用4-6倍樹(shù)脂柱裝量體積的醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，通過(guò)D280脫色柱脫色，脫色后在35-50℃下減壓濃縮，濃縮液的比重控制在1.05-1.20，干燥即得。
上述制備方法的步驟I中，優(yōu)選的柴胡粉碎方式是將柴胡粉碎至10-20目。
所述步驟I和III中的醇溶液優(yōu)選為60-80％乙醇水溶液。
所述步驟I中，醇溶液用量?jī)?yōu)選為8倍柴胡重量，水浴溫度優(yōu)選為80℃，提取次數(shù)優(yōu)選為3次，每次1小時(shí)；濃縮液量?jī)?yōu)選為生藥量的3倍重量。
所述步驟III中，醇溶液用量?jī)?yōu)選為5倍樹(shù)脂柱裝量體積。
所述步驟II中，蒸餾水用量?jī)?yōu)選為10倍樹(shù)脂柱裝量體積，洗柱除雜質(zhì)用的乙醇水溶液濃度優(yōu)選為50％。
本發(fā)明所述的提取物有效成分含量高、純度高，在抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)疾病中，有著很好藥物應(yīng)用。根據(jù)實(shí)際藥物需要，可制備成注射劑或固體口服制劑。
本發(fā)明所述的柴胡提取物可加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，制成藥物制劑，所述的藥學(xué)上可接受的載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的各類藥物輔料，包括但不限于甘露醇、山梨醇、右旋糖酐、葡萄糖、乳糖、蔗糖、氯化鈉、羥丙甲纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、泊洛沙姆、吐溫80、羧甲基淀粉鈉、預(yù)膠化淀粉、淀粉、二氧化硅、木糖醇、聚乙二醇4000-6000、β-環(huán)糊精、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣或丙烯酸樹(shù)脂或其任意組合。
上述的藥物制劑根據(jù)不同給藥途徑的需要，可制成注射劑、口服制劑、鼻吸入或腸胃外給藥制劑，施用于不同人群的患者。
用于口服時(shí)，可將其制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊劑等；制成液體制劑，如水或油懸浮劑或其它液體制劑，如糖漿、酏劑等；優(yōu)選的形式是凍干粉針劑、片劑、膠囊劑、注射劑，其中片劑可為普通片、分散片、口腔崩解片、緩釋片、控釋片、泡騰片、普通薄膜包衣片等。
所述的注射劑包括但不限于小水針、凍干粉針、粉針或靜脈注射液等所述的固體口服制劑包括但不限于普通片劑、口腔崩解片、分散片、緩釋片、控釋片、泡騰片、薄膜包衣片、硬膠囊、緩釋膠囊、控釋膠囊、軟膠囊、滴丸、顆粒劑、泡騰顆粒等。
發(fā)明人經(jīng)過(guò)多年研究、試驗(yàn)，用中藥現(xiàn)代化理論和方法總結(jié)出一套柴胡藥物制劑配方及其制備方法，具體如下柴胡皂苷凍干粉針劑，按重量份計(jì)其主要組分為柴胡提取物1-500份甘露醇1-200份注射用水 10-1000ml制備方法將柴胡提取物、甘露醇按處方精確稱定，用注射用水溶解完全，加0.1-3％活性碳，攪拌均勻(在20-60℃情況下，攪拌10-100分鐘)，加鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH為2-7.0之間，脫碳過(guò)濾，然后用0.1-0.9μm的濾膜濾過(guò)1-3次，即可分裝，半加塞，進(jìn)冷凍干燥箱干燥。
柴胡皂苷注射液(50-100ml)，按重量份計(jì)其主要組分為柴胡提取物25-100份吐溫-80 1-5份殼聚糖(自制脫酰度92％)溶液(1.5mg/ml)0.1-50份氯化鈉(9g/1000ml) 0.1-9份注射用水加至10-1000ml制備方法將主藥溶解于適量的注射用水中，再加入殼聚糖溶液，加熱攪拌，40-70℃保溫20-60分鐘后，加入吐溫-80、氯化鈉，攪拌10-50分鐘，調(diào)節(jié)PH值至3-8之間，加0.05-6％活性碳，攪拌10-50分鐘，脫碳過(guò)濾，加注射用水到位，用0.1-6μ微孔濾膜過(guò)濾，即可灌裝。
柴胡皂苷的分散片，按重量份計(jì)其主要組分為柴胡提取物25-100份微晶纖維素30-200份預(yù)膠化淀粉10-50份二氧化硅 5-20份阿斯巴甜 1-10份甜橙香精 1-7份羧甲基淀粉鈉 1-8份硬脂酸鎂 0.5-5份2％聚乙烯吡咯烷酮K30(乙醇∶水＝2∶8)溶液(粘合劑)2-20份制備方法將柴胡提取物、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、二氧化硅混合均勻，過(guò)30-150目篩，混合，加1-20％聚乙烯吡咯烷酮K30(乙醇∶水＝2∶8)溶液制成軟材，用20-50目制粒，于50-60℃條件下通風(fēng)干燥1-9小時(shí)，以10-20目整粒，加阿斯巴甜、甜橙香精、羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂等總混即得。
柴胡皂苷口腔崩解片，按重量份計(jì)其主要組分為柴胡提取物25-100份微晶纖維素30-200份交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮10-150份二氧化硅 5-20份甘露醇10-50份薄荷醇0.5-5份阿斯巴甜 1-15份香精 1-15份制備方法將主輔原料按處方精確稱定后，充分混合均勻，過(guò)20-60目篩兩次，即可壓片(直壓法)。
柴胡皂苷的泡騰片，按重量份計(jì)其主要組分為柴胡提取物 25-100份無(wú)水枸櫞酸50-1000份碳酸氫鈉 50-1000份無(wú)水乳糖 20-200份阿斯巴甜5-100份聚乙二醇6000 10-100份交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 1-20份無(wú)水乙醇 20-200份香精 1-5份制備方法1)將交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、無(wú)水乙醇配成1-15％無(wú)水乙醇溶液，備用。
2)將柴胡提取物、無(wú)水枸櫞酸、碳酸氫鈉、無(wú)水乳糖按處方精確稱定投料，以30-60℃通風(fēng)干燥，12-36小時(shí)備用。
3)將干燥后的柴胡提取物、無(wú)水枸櫞酸、碳酸氫鈉、無(wú)水乳糖混合均勻，加上述備用溶液制成軟材，以10-30目制粒，30-60℃通風(fēng)干燥，以10-20目整粒。
4)整粒后加阿斯巴甜、聚乙二醇6000混合均勻后，即可壓片。
柴胡皂苷的普通薄膜包衣片，按重量份計(jì)其主要組分為柴胡提取物 25-100份淀粉 10-80份微晶纖維素5-30份羥丙基甲基纖維素 1-5份二氧化硅 2-20份羧甲基淀粉鈉 1-10份硬脂酸鎂 1-5份制備方法1)將柴胡提取物、淀粉、微晶纖維素精確稱定后充分混合均勻，用1-20％羥丙基甲基纖維素水溶液制成軟材，以10-30目篩制顆粒。
2)顆粒以30-60℃通風(fēng)干燥，水分控制在1.5％-10％之間，用10-30目篩整粒。
3)加二氧化硅、羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂混合均勻后，即可壓片。
4)包衣液的配制(按重量計(jì))羥丙基甲基纖維素1-5份聚乙二醇6000 0.5-3份蓖麻油0.5-3份苯二甲酸二乙酯0.5-3份95％乙醇 1-10份將以上原輔料精確稱定，充分?jǐn)嚢杈鶆?，直至完全溶解，過(guò)50-150目篩備用。
5)按常規(guī)方法包制薄膜衣。
柴胡皂苷的硬膠囊劑，按重量份計(jì)其主要組分為柴胡提取物25-100份羧甲基淀粉鈉 10-100份二氧化硅2-20份硬脂酸鎂 0.5-5份制備方法將主輔原料按處方精確稱定后，充分混合均勻，上全自動(dòng)膠囊灌裝機(jī)灌裝硬膠囊。
柴胡皂苷的顆粒劑(無(wú)糖型)，按重量份計(jì)其主要組分為柴胡提取物25-100份木糖醇20-200份蔗糖 20-200份微晶纖維素20-100份羥丙甲纖維素 1-5份二氧化硅1-20份制備方法將主、輔原料按處方精確稱定，加入3-30％羥丙基甲基纖維素水溶液，制成軟材，以10-30目篩制粒，以30-70℃通風(fēng)干燥，以80目與10目篩篩分，去除＜80與＞10目篩的顆粒后，用顆粒包裝機(jī)包裝即得。
上述制劑中，柴胡提取物與輔料優(yōu)選重量配比為1∶1-1∶100，優(yōu)選為1∶20-1∶60，最優(yōu)選為1∶40。
本發(fā)明的柴胡提取物可根據(jù)用藥途徑、患者的年齡、體重、所治療疾病的類型和嚴(yán)重程度等變化，其日劑量可以是0.01-10mg/kg體重，優(yōu)選0.1-5mg/kg體重，可以一次或多次施用。
本發(fā)明所述的柴胡提取物制備方法是以中藥現(xiàn)代化的制藥理念和方法，提取、分離、純化中藥，工藝的控制，尤其是溫度的控制，使柴胡中的活性成分柴胡皂苷a、柴胡皂苷d得以最大程度的保留，成為提取物的主要組分，并以現(xiàn)代化的檢測(cè)手段定性、定量，使柴胡中的活性成分首次在藥物制劑中得以量化。
發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過(guò)本發(fā)明方法制備的柴胡提取物，在抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)等方面，比現(xiàn)有柴胡制劑在同樣的條件下，治療效果要更加顯著。
發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，由于所制得的柴胡提取物中皂苷組分單一，純度高，使其在藥學(xué)應(yīng)用中表現(xiàn)了很低的毒性，且副作用小。


圖1柴胡皂苷標(biāo)準(zhǔn)品指紋圖譜柴胡皂苷a(24.229)、柴胡皂苷d(35.364)圖2實(shí)施例1產(chǎn)品指紋圖譜柴胡皂苷a(24.234)、柴胡皂苷d(36.137)具體實(shí)施方式
實(shí)施例1將柴胡洗凈干燥后，粉碎至10目，加8倍柴胡重量的70％乙醇在80℃水浴中回流提取3次，每次1小時(shí)，合并三次提取液，在45℃減壓濃縮，濃縮液量控制為柴胡生藥量的3倍，將濃縮液上D101大孔樹(shù)脂柱，靜置吸附2小時(shí)，然后用10倍樹(shù)脂柱裝量體積的蒸餾水洗柱除糖，再用1倍樹(shù)脂柱裝量體積的50％乙醇洗柱除雜質(zhì)；用5倍樹(shù)脂柱裝量體積的70％乙醇洗脫，收集洗脫液，上D280脫色柱，脫色后在45℃減壓濃縮，濃縮液的比重控制在1.05，干燥即得柴胡提取物，經(jīng)檢測(cè)，柴胡皂苷a含量為25.33％，柴胡皂苷d含量為15.41％，總皂苷含量為53.65％。
實(shí)施例2將柴胡洗凈干燥后，粉碎至20目，加10倍柴胡重量的60％乙醇在85℃水浴中回流提取2次，每次2小時(shí)，合并提取液，在40℃減壓濃縮，濃縮液量控制為柴胡生藥量的2倍，將濃縮液上D101大孔樹(shù)脂柱，靜置吸附3小時(shí)，然后用8倍樹(shù)脂柱裝量體積的蒸餾水洗柱除糖，再用2倍樹(shù)脂柱裝量體積的40％乙醇洗柱除雜質(zhì)；用6倍樹(shù)脂柱裝量體積的60％乙醇洗脫，收集洗脫液，上D280脫色柱，脫色后在40℃減壓濃縮，濃縮液的比重控制在1.20，干燥即得柴胡提取物，經(jīng)檢測(cè)，柴胡皂苷a含量為29.25％，柴胡皂苷d含量為12.85％，總皂苷含量為56.20％。
實(shí)施例3將柴胡洗凈干燥后，粉碎至20目，加6倍柴胡重量的80％乙醇在75℃水浴中回流提取3小時(shí)，將提取液在50℃減壓濃縮，濃縮液量控制為柴胡生藥量的4倍，將濃縮液上D101大孔樹(shù)脂柱，靜置吸附2小時(shí)，然后用12倍樹(shù)脂柱裝量體積的蒸餾水洗柱除糖，再用1.5倍樹(shù)脂柱裝量體積的60％乙醇洗柱除雜質(zhì)；用4倍樹(shù)脂柱裝量體積的80％乙醇洗脫，收集洗脫液，上D280脫色柱，脫色后在50℃減壓濃縮，濃縮液的比重控制在1.10，干燥即得柴胡提取物，經(jīng)檢測(cè)，柴胡皂苷a含量為20.91％，柴胡皂苷d含量為11.15％，總皂苷含量為78.55％。
實(shí)施例4將柴胡洗凈干燥后，粉碎至10目，加9倍柴胡重量的75％乙醇在80℃水浴中回流提取3次，每次2小時(shí)，合并三次提取液，在45℃減壓濃縮，濃縮液量控制為柴胡生藥量的2倍，將濃縮液上D101大孔樹(shù)脂柱，靜置吸附2小時(shí)，然后用9倍樹(shù)脂柱裝量體積的蒸餾水洗柱除糖，再用2倍樹(shù)脂柱裝量體積的55％乙醇洗柱除雜質(zhì)；用5.5倍樹(shù)脂柱裝量體積的75％乙醇洗脫，收集洗脫液，上D280脫色柱，脫色后在45℃減壓濃縮，濃縮液的比重控制在1.15，干燥即得柴胡提取物，經(jīng)檢測(cè)，柴胡皂苷a含量為21.65％，柴胡皂苷d含量為17.24％，總皂苷含量為65.66％。
實(shí)施例5將柴胡洗凈干燥后，粉碎至20目，加7倍柴胡重量的65％乙醇在65℃水浴中回流提取2次，每次3小時(shí)，合并兩次提取液，在35℃減壓濃縮，濃縮液量控制為柴胡生藥量的3倍，將濃縮液上D101大孔樹(shù)脂柱，靜置吸附2.5小時(shí)，然后用11倍樹(shù)脂柱裝量體積的蒸餾水洗柱除糖，再用2倍樹(shù)脂柱裝量體積的45％乙醇洗柱除雜質(zhì)；用4.5倍樹(shù)脂柱裝量體積的65％乙醇洗脫，收集洗脫液，上D280脫色柱，脫色后在35℃減壓濃縮，濃縮液的比重控制在1.20，干燥即得柴胡提取物，經(jīng)檢測(cè)，柴胡皂苷a含量為28.75％，柴胡皂苷d含量為13.54％，總皂苷含量為89.36％。
實(shí)施例6柴胡皂苷凍干粉針劑的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例1產(chǎn)品1g甘露醇 200g注射用水 1000ml制備方法將實(shí)施例1產(chǎn)品、甘露醇按處方精確稱定，用注射用水溶解完全，加0.1％針用活性碳，攪拌均勻(在60℃情況下，攪拌10分鐘)，加鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH為2，脫碳過(guò)濾，然后用0.4μm和0.22μm的濾膜各濾過(guò)一次，即可分裝，半加塞，進(jìn)冷凍干燥箱干燥。
實(shí)施例7柴胡皂苷凍干粉針劑的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例2產(chǎn)品500g甘露醇 1g注射用水 1000ml制備方法將實(shí)施例1產(chǎn)品、甘露醇按處方精確稱定，用注射用水溶解完全，加30％針用活性碳，攪拌均勻(在20℃情況下，攪拌100分鐘)，加鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH為7.0，脫碳過(guò)濾，然后用0.4μm和0.22μm的濾膜各濾過(guò)一次，即可分裝，半加塞，進(jìn)冷凍干燥箱干燥。
實(shí)施例8
柴胡皂苷凍干粉針劑的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例3產(chǎn)品250g甘露醇 100g注射用水 1000ml制備方法將實(shí)施例1產(chǎn)品、甘露醇按處方精確稱定，用注射用水溶解完全，加15％針用活性碳，攪拌均勻(在30℃情況下，攪拌60分鐘)，加鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH為4.0，脫碳過(guò)濾，然后用0.4μm和0.22μm的濾膜各濾過(guò)一次，即可分裝，半加塞，進(jìn)冷凍干燥箱干燥。
實(shí)施例9柴胡皂苷注射液劑(50-100ml)的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例4產(chǎn)品 25g吐溫-80 5g殼聚糖(自制脫酰度92％)溶液(1.5mg/ml)2.5％0.1g氯化鈉(9g/1000ml)9g注射用水加至1000ml。
制備方法將主藥溶解于適量的注射用水中，再加入殼聚糖溶液，加熱攪拌，40℃保溫60分鐘后，加入吐溫-80、氯化鈉，攪拌10分鐘，調(diào)節(jié)PH值至8之間，加0.05％活性碳，攪拌50分鐘，脫碳過(guò)濾，加注射用水到位，用0.22μm和0.4μm微孔濾膜過(guò)濾，即可灌裝。
實(shí)施例10柴胡皂苷注射液(50-100ml)的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例5產(chǎn)品 60g吐溫-80 2.5g殼聚糖(自制脫酰度92％)溶液(1.5mg/ml)2.5％25g氯化鈉(9g/1000ml)4.5g注射用水加至500ml制備方法將主藥溶解于適量的注射用水中，再加入殼聚糖溶液，加熱攪拌，50℃保溫40分鐘后，加入吐溫-80、氯化鈉，攪拌30分鐘，調(diào)節(jié)PH值至5，加3％活性碳，攪拌30分鐘，脫碳過(guò)濾，加注射用水到位，用0.22μm和0.4μm微孔濾膜過(guò)濾，即可灌裝。
實(shí)施例11柴胡皂苷注射液劑(50-100ml)的制備。
取如下重量份計(jì)組分
實(shí)施例1產(chǎn)品100g吐溫-801g殼聚糖(自制脫酰度92％)溶液(1.5mg/ml)2.5％50g氯化鈉(9g/1000ml) 0.1g注射用水加至10ml制備方法將主藥溶解于適量的注射用水中，再加入殼聚糖溶液，加熱攪拌，70℃保溫20分鐘后，加入吐溫-80、氯化鈉，攪拌50分鐘，調(diào)節(jié)PH值至3之間，加6％活性碳，攪拌10分鐘，脫碳過(guò)濾，加注射用水到位，用0.22μm和0.4μm微孔濾膜過(guò)濾，即可灌裝。
實(shí)施例12柴胡皂苷分散片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例2產(chǎn)品25g微晶纖維素 200g預(yù)膠化淀粉 10g二氧化硅 20g阿斯巴甜 1g甜橙香精 7g羧甲基淀粉鈉 1g硬脂酸鎂 5g2％聚乙烯吡咯烷酮K30(乙醇∶水＝2∶8)溶液(粘合劑)2g制備方法將實(shí)施例1產(chǎn)品、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、二氧化硅混合均勻，過(guò)30目篩，混合，加20％聚乙烯吡咯烷酮K30(乙醇∶水＝2∶8)溶液制成軟材，用20目制粒，于60℃條件下通風(fēng)干燥1小時(shí)，以20目整粒，加阿斯巴甜、甜橙香精、羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂等總混即得。
實(shí)施例13柴胡皂苷分散片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例3產(chǎn)品100g微晶纖維素 30g預(yù)膠化淀粉 50g二氧化硅 5g阿斯巴甜 10g甜橙香精 1g羧甲基淀粉鈉 8g硬脂酸鎂 0.5g
2％聚乙烯吡咯烷酮K30(乙醇∶水＝2∶8)溶液(粘合劑)20g制備方法將實(shí)施例1產(chǎn)品、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、二氧化硅混合均勻，過(guò)150目篩，混合，加1％聚乙烯吡咯烷酮K30(乙醇∶水＝2∶8)溶液制成軟材，用50目制粒，于50℃條件下通風(fēng)干燥9小時(shí)，以10目整粒，加阿斯巴甜、甜橙香精、羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂等總混即得。
實(shí)施例14柴胡皂苷分散片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例4產(chǎn)品60g微晶纖維素 115g預(yù)膠化淀粉 30g二氧化硅 12g阿斯巴甜 6g甜橙香精 4g羧甲基淀粉鈉 5g硬脂酸鎂 3g2％聚乙烯吡咯烷酮K30(乙醇∶水＝2∶8)溶液(粘合劑)10g制備方法將實(shí)施例1產(chǎn)品、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、二氧化硅混合均勻，過(guò)90目篩，混合，加10％聚乙烯吡咯烷酮K30(乙醇∶水＝2∶8)溶液制成軟材，用35目制粒，于55℃條件下通風(fēng)干燥5小時(shí)，以30目整粒，加阿斯巴甜、甜橙香精、羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂等總混即得。
實(shí)施例15柴胡皂苷口腔崩解片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例5產(chǎn)品25g微晶纖維素 200g交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 10g二氧化硅 20g甘露醇 10g薄荷醇 5g阿斯巴甜 1g香精 15g制備方法將主輔原料按處方精確稱定后，充分混合均勻，過(guò)20、30目篩各一次，即可壓片(直壓法)。
實(shí)施例16
柴胡皂苷口腔崩解片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例1產(chǎn)品100g微晶纖維素 30g交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 150g二氧化硅 5g甘露醇 50g薄荷醇 0.5g阿斯巴甜 15g香精 1g制備方法將主輔原料按處方精確稱定后，充分混合均勻，過(guò)50、60目篩各一次，即可壓片(直壓法)。
實(shí)施例17柴胡皂苷口腔崩解片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例2產(chǎn)品60g微晶纖維素 110g交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 80g二氧化硅 12g甘露醇 30g薄荷醇 2.5g阿斯巴甜 8g香精 8g制備方法將主輔原料按處方精確稱定后，充分混合均勻，過(guò)30、40目篩各一次，即可壓片(直壓法)。
實(shí)施例18柴胡皂苷泡騰片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例3產(chǎn)品25g無(wú)水枸櫞酸 1000g碳酸氫鈉 50g無(wú)水乳糖 200g阿斯巴甜 5g聚乙二醇6000 100g交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 1g
無(wú)水乙醇200g香精1g制備方法1)將交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、無(wú)水乙醇配成1％無(wú)水乙醇溶液，備用。
2)將實(shí)施例1產(chǎn)品、無(wú)水枸櫞酸、碳酸氫鈉、無(wú)水乳糖按處方精確稱定投料，以60℃通風(fēng)干燥，12小時(shí)備用。
3)將干燥后的實(shí)施例1產(chǎn)品、無(wú)水枸櫞酸、碳酸氫鈉、無(wú)水乳糖混合均勻，加上述備用溶液制成軟材，以10目制粒，60℃通風(fēng)干燥，以10目整粒。
4)整粒后加阿斯巴甜、聚乙二醇6000混合均勻后，即可壓片。
實(shí)施例19柴胡皂苷泡騰片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例4產(chǎn)品100g無(wú)水枸櫞酸 50g碳酸氫鈉 1000g無(wú)水乳糖 20g阿斯巴甜 100g聚乙二醇6000 10g交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 20g無(wú)水乙醇 20g香精 5g制備方法1)將交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、無(wú)水乙醇配成15％無(wú)水乙醇溶液，備用。
2)將實(shí)施例1產(chǎn)品、無(wú)水枸櫞酸、碳酸氫鈉、無(wú)水乳糖按處方精確稱定投料，以30℃通風(fēng)干燥，36小時(shí)備用。
3)將干燥后的實(shí)施例1產(chǎn)品、無(wú)水枸櫞酸、碳酸氫鈉、無(wú)水乳糖混合均勻，加上述備用溶液制成軟材，以10目制粒，60℃通風(fēng)干燥，以10目整粒。
4)整粒后加阿斯巴甜、聚乙二醇6000混合均勻后，即可壓片。
實(shí)施例20柴胡皂苷泡騰片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例5產(chǎn)品60g無(wú)水枸櫞酸 500g碳酸氫鈉 500g無(wú)水乳糖 110g
阿斯巴甜50g聚乙二醇600055g交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 10g無(wú)水乙醇110g香精2.5g制備方法1)將交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、無(wú)水乙醇配成8％無(wú)水乙醇溶液，備用。
2)將實(shí)施例1產(chǎn)品、無(wú)水枸櫞酸、碳酸氫鈉、無(wú)水乳糖按處方精確稱定投料，以45℃通風(fēng)干燥，24小時(shí)備用。
3)將干燥后的實(shí)施例1產(chǎn)品、無(wú)水枸櫞酸、碳酸氫鈉、無(wú)水乳糖混合均勻，加上述備用溶液制成軟材，以20目制粒，45℃通風(fēng)干燥，以15目整粒。
4)整粒后加阿斯巴甜、聚乙二醇6000混合均勻后，即可壓片。
實(shí)施例21柴胡皂苷普通薄膜包衣片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例1產(chǎn)品25g淀粉 80g微晶纖維素 5g羥丙基甲基纖維素 5g二氧化硅 2g羧甲基淀粉鈉 10g硬脂酸鎂 1g制備方法1)將柴胡皂苷、淀粉、微晶纖維素精確稱定后充分混合均勻，用1％羥丙基甲基纖維素水溶液制成軟材，以30目篩制顆粒。
2)顆粒以30℃通風(fēng)干燥，水分控制在10％，用10目篩整粒。
3)加二氧化硅、羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂混合均勻后，即可壓片。
4)包衣液的配制(按重量計(jì))羥丙基甲基纖維素1g聚乙二醇60003g蓖麻油 0.5g苯二甲酸二乙酯 3g95％乙醇1g將以上原輔料精確稱定，充分?jǐn)嚢杈鶆?，直至完全溶解，過(guò)50目篩備用。
5)按常規(guī)方法包制薄膜衣。
實(shí)施例22柴胡皂苷普通薄膜包衣片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例2產(chǎn)品100g淀粉 10g微晶纖維素 30g羥丙基甲基纖維素 1g二氧化硅 20g羧甲基淀粉鈉 1g硬脂酸鎂 5g制備方法1)將柴胡皂苷、淀粉、微晶纖維素精確稱定后充分混合均勻，用20％羥丙基甲基纖維素水溶液制成軟材，以10目篩制顆粒。
2)顆粒以60℃通風(fēng)干燥，水分控制在1.5％，用30目篩整粒。
3)加二氧化硅、羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂混合均勻后，即可壓片。
4)包衣液的配制(按重量計(jì))羥丙基甲基纖維素5g聚乙二醇60000.5g蓖麻油 3g苯二甲酸二乙酯 0.5g95％乙醇10g將以上原輔料精確稱定，充分?jǐn)嚢杈鶆?，直至完全溶解，過(guò)150目篩備用。
5)按常規(guī)方法包制薄膜衣。
實(shí)施例23柴胡皂苷普通薄膜包衣片的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例3產(chǎn)品60g淀粉 45g微晶纖維素 17g羥丙基甲基纖維素 3g二氧化硅 11g羧甲基淀粉鈉 5g硬脂酸鎂 3g制備方法1)將柴胡皂苷、淀粉、微晶纖維素精確稱定后充分混合均勻，用10％羥丙基甲基纖維素水溶液制成軟材，以15目篩制顆粒。
2)顆粒以45℃通風(fēng)干燥，水分控制在5％，用20目篩整粒。
3)加二氧化硅、羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂混合均勻后，即可壓片。
4)包衣液的配制(按重量計(jì))羥丙基甲基纖維素3g聚乙二醇60001.7g蓖麻油 1.8g苯二甲酸二乙酯 1.7g95％乙醇5.5g將以上原輔料精確稱定，充分?jǐn)嚢杈鶆颍敝镣耆芙?，過(guò)100目篩備用。
5)按常規(guī)方法包制薄膜衣。
實(shí)施例24柴胡皂苷硬膠囊劑的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例4產(chǎn)品25g羧甲基淀粉鈉 100g二氧化硅 2g硬脂酸鎂 5g制備方法將主輔原料按處方精確稱定后，充分混合均勻，上全自動(dòng)膠囊灌裝機(jī)灌裝硬膠囊。
實(shí)施例25柴胡皂苷硬膠囊劑的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例5產(chǎn)品100g羧甲基淀粉鈉 10g二氧化硅 20g硬脂酸鎂 0.5g制備方法將主輔原料按處方精確稱定后，充分混合均勻，上全自動(dòng)膠囊灌裝機(jī)灌裝硬膠囊。
實(shí)施例26柴胡皂苷硬膠囊劑的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例1產(chǎn)品60g羧甲基淀粉鈉 55g二氧化硅 11g
硬脂酸鎂2.5g制備方法將主輔原料按處方精確稱定后，充分混合均勻，上全自動(dòng)膠囊灌裝機(jī)灌裝硬膠囊。
實(shí)施例27柴胡皂苷顆粒劑(無(wú)糖型)的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例2產(chǎn)品25g木糖醇 200g蔗糖 20g微晶纖維素 100g羥丙甲纖維素 1g二氧化 20g制備方法將主、輔原料按處方精確稱定，加入3％羥丙基甲基纖維素水溶液，制成軟材，以30目篩制粒，以30℃通風(fēng)干燥，以80目與10目篩篩分，去除＜80與＞10目篩的顆粒后，用顆粒包裝機(jī)包裝即得。
實(shí)施例28柴胡皂苷顆粒劑(無(wú)糖型)的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例3產(chǎn)品100g木糖醇 20g蔗糖 200g微晶纖維素 20g羥丙甲纖維素 5g二氧化硅 1g制備方法將主、輔原料按處方精確稱定，加入30％羥丙基甲基纖維素水溶液，制成軟材，以10目篩制粒，以70℃通風(fēng)干燥，以80目與10目篩篩分，去除＜80與＞10目篩的顆粒后，用顆粒包裝機(jī)包裝即得。
實(shí)施例29柴胡皂苷顆粒劑(無(wú)糖型)的制備。
取如下重量份計(jì)組分實(shí)施例4產(chǎn)品60g木糖醇 110g蔗糖 110g微晶纖維素 60g羥丙甲纖維素 2.5g
二氧化硅10g制備方法將主、輔原料按處方精確稱定，加入15％羥丙基甲基纖維素水溶液，制成軟材，以20目篩制粒，以50℃通風(fēng)干燥，以80目與10目篩篩分，去除＜80與＞10目篩的顆粒后，用顆粒包裝機(jī)包裝即得。
試驗(yàn)例1本試驗(yàn)例為實(shí)施例1產(chǎn)品對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的抑制作用試驗(yàn)。
取健康昆明種小鼠30只，體重20-24g。隨機(jī)分成對(duì)照組、柴胡口服液組、實(shí)施例1產(chǎn)品組。每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。以人常規(guī)治療劑量折算為小鼠的劑量。折算公式為待測(cè)動(dòng)物試用計(jì)量＝已知?jiǎng)游锝o藥劑量×待測(cè)動(dòng)物的體表面積比值/已知?jiǎng)游锏捏w表面積比值。對(duì)照組給與蒸餾水，連續(xù)給藥7天，最后1次給藥后30分鐘，每只小鼠左耳前后兩面涂抹二甲苯0.03ml致炎，30分鐘后頸椎脫臼處死動(dòng)物，沿耳廓基線剪下兩耳，用9mm直徑打孔器分別在同一對(duì)稱部位打下圓耳片，扭力天平稱重，每鼠的左耳片重減去右耳片重量即為腫脹度，計(jì)算各組腫脹度之均值和標(biāo)準(zhǔn)差，并作t檢查，比較組間差異性，按下列公式計(jì)算腫脹抑制百分率抑制率＝(對(duì)照組均勻腫脹度-給藥組均勻腫脹度)/對(duì)照組平均腫脹度×100％。結(jié)果見(jiàn)表1。
表1對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的抑制作用(X±SD)

注與對(duì)照組比較*P＜0.01；與柴胡口服液組比較#P＜0.05實(shí)施例1產(chǎn)品和柴胡口服液對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹均有抑制作用(P＜0.01)；實(shí)施例1產(chǎn)品與柴胡口服液相比，對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹也有差異(P＜0.05)。說(shuō)明實(shí)施例1產(chǎn)品的藥理作用強(qiáng)于柴胡口服液。
試驗(yàn)例2本試驗(yàn)例為實(shí)施例2產(chǎn)品的熱板法鎮(zhèn)痛試驗(yàn)比較。
水溫恒定在55±0.5℃，取預(yù)選合格的小鼠30只，隨機(jī)分3組。對(duì)照組、柴胡口服液組、實(shí)施例2產(chǎn)品組。各組分別連續(xù)給藥7天，末次給藥后1h測(cè)量各小鼠的痛閾值。結(jié)果見(jiàn)表2。
表2對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的抑制作用(X±SD)

注與對(duì)照組比較*P＜0.01；
與柴胡口服液組比較#P＜0.05實(shí)施例1產(chǎn)品和柴胡口服液均能顯著增加小鼠的痛閾值(P＜0.01)；實(shí)施例2產(chǎn)品與柴胡口服液相比，痛閾值提高也有差異(P＜0.05)。
說(shuō)明實(shí)施例2產(chǎn)品的藥理作用強(qiáng)于柴胡口服液。
以上藥理實(shí)驗(yàn)證明，實(shí)施例2產(chǎn)品具有更好的藥效。
其他實(shí)施例產(chǎn)品具有與實(shí)施例1或2相同的藥物作用效果。
權(quán)利要求
1.一種柴胡提取物，其特征在于，所述提取物由中藥柴胡經(jīng)醇溶液提取得到，其中含有20-30％重量份的柴胡皂苷a，10-20％重量份的柴胡皂苷d。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于，所述的提取物中柴胡皂苷a與柴胡皂苷d之和占提取物的40-50％重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取物，其特征在于，所述的提取物中，各柴胡皂苷的總和占提取物的50-90％重量份。
4.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述提取物的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟I.將柴胡粉碎，加6-10倍柴胡重量的醇溶液在75-85℃水浴中回流提取1-3次，每次提取1-3小時(shí)，合并提取液，在35-50℃下減壓濃縮，得濃縮液，濃縮液量為生藥量的2-4倍重量；II.將濃縮液通過(guò)D101大孔樹(shù)脂柱，靜置吸附2-3小時(shí)，然后用8-12倍樹(shù)脂柱裝量體積的蒸餾水洗柱除糖，再用1-2倍樹(shù)脂柱裝量體積的40-60％乙醇洗柱除雜質(zhì)；III.使用4-6倍樹(shù)脂柱裝量體積的醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，通過(guò)D280脫色柱脫色，脫色后在35-50℃下減壓濃縮，濃縮液的比重控制在1.05-1.20，干燥即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟I中，柴胡粉碎是將柴胡粉碎至10-20目。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟I和III中的醇溶液為60-80％乙醇水溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟I中，醇溶液用量為8倍柴胡重量，水浴溫度為80℃，提取次數(shù)為3次，每次1小時(shí)；濃縮液量為生藥量的3倍重量。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟III中，醇溶液用量為5倍樹(shù)脂柱裝量體積。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟II中，蒸餾水用量為10倍樹(shù)脂柱裝量體積，洗柱除雜質(zhì)用的乙醇水溶液濃度為50％。
10.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述提取物在制備抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)疾病藥物中的應(yīng)用；所述藥物的劑型優(yōu)選為注射劑或固體口服制劑；所述的注射劑優(yōu)選為小水針、凍干粉針或靜脈注射液；所述的固體口服制劑優(yōu)選為普通片劑、口腔崩解片、分散片、緩釋片、控釋片、泡騰片、薄膜包衣片、硬膠囊、緩釋膠囊、控釋膠囊、軟膠囊、滴丸、顆粒劑、泡騰顆粒。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種柴胡提取物、該提取物的制備方法及該提取物在藥劑學(xué)上的用途，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。該柴胡提取物由中藥柴胡經(jīng)醇溶液提取得到，其中含有20－30％重量份的柴胡皂苷a，10－20％重量份的柴胡皂苷d。其制備方法包括干燥柴胡粉碎、提取、濃縮、柱層析、除糖、除雜質(zhì)、洗脫、脫色、濃縮、干燥等操作過(guò)程。得到的提取物有效成分含量高、純度高，在抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)疾病中，有著很好藥物應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1899333SQ200610099498
公開(kāi)日2007年1月24日 申請(qǐng)日期2006年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月25日
發(fā)明者郭愛(ài)華 申請(qǐng)人:郭愛(ài)華