專利名稱：一種降血糖的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其制備方法和用途，特別涉及一種降血糖的藥物組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：
《糖尿病醫(yī)學(xué)》Diabate Medicine，10，688(1993)中報(bào)導(dǎo)α-葡萄糖苷酶抑制劑抑制了存在于小腸微絨毛的α-葡萄糖苷酶，從而干擾飲食中碳水化合物的迅速消化和吸收從而達(dá)到減少胰島素需要量的目的。這種治療方法存在一些潛在的優(yōu)勢(shì)，包括不會(huì)增加體重，在某些情況下甚至?xí)p少體重，同時(shí)不會(huì)有高胰島素血癥，而且當(dāng)單獨(dú)治療的時(shí)候，不會(huì)有低血糖的危險(xiǎn)。阿卡波糖(Acarbose)是第一個(gè)被臨床應(yīng)用的α-葡萄糖苷酶抑制劑，最近發(fā)現(xiàn)的小腸刷狀緣α-葡萄糖苷酶抑制劑包括米格列醇(miglitol)、伏格列波糖(voglibose)、emiglitate等。對(duì)于我國(guó)傳統(tǒng)的中藥，在α-葡萄糖苷酶抑制劑的研究開(kāi)發(fā)方面尚不多見(jiàn)。
桑白皮(CORTEX MORI)為?？浦参锷orus alba L.的干燥根皮，是一種常用中藥，功效瀉肺平喘，主治肺熱喘咳、水飲停肺、水腫、小便不利。用桑白皮治療消渴癥在古代已有記載如桑根湯(《千金翼》卷十九)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明桑白皮具有降血糖的作用與其對(duì)α-葡萄糖苷酶有抑制作用相關(guān)。葛根(RADIX PUERARIAE)為豆科多年生藤本植物柴葛Pueraria lobata(Willd)Ohwi的干燥根，是中醫(yī)臨床常用藥物，葛根始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品。歷代本草均有記載。其單味藥或復(fù)方在消渴病的治療中應(yīng)用廣泛。桑白皮和葛根雖然在傳統(tǒng)中藥方劑中作為降糖藥使用，但目前尚未見(jiàn)到桑白皮與葛根組合治療糖尿病的報(bào)導(dǎo)。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種藥物組合物；本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供一種降血糖的藥物組合物；本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供該藥物組合物的制備方法。
本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的 本發(fā)明藥物組合物的原料藥按重量份組成為桑白皮∶葛根為1～6∶1；優(yōu)選桑白皮∶葛根為5∶1；桑白皮∶葛根為4∶1；桑白皮∶葛根為3∶1。
本發(fā)明藥物組合物的制備方法為 桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制或粉碎后，用水提取，提取溫度為室溫～90℃，總?cè)軇┝繛樗幉牡?4～30倍重量份，提取次數(shù)為2～4次，每次1～5小時(shí)；將三次提取液合并；50～75℃減壓濃縮，將1～5倍藥材重量份的濃縮液離心上活性碳柱，所用活性碳為藥材重量份的0.5～3倍，可選用粉末型或顆粒型，使用前用蒸餾水浸泡過(guò)夜，濕法裝柱，上柱液溫度為室溫～75℃，提取液也可經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的醇沉后以水溶液的形式上活性碳柱；上柱完畢后用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性)換用10～50％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，50～90℃將乙醇洗脫液濃縮至30℃密度約為1.20～1.25，或濃縮液的體積為藥材0.05～0.1倍重量份，得桑白皮濃縮液待用； 葛根藥材經(jīng)過(guò)切制或粉碎后，用水提取，提取溫度為50～100℃，總?cè)軇┝繛樗幉牡?5～30倍重量份，提取次數(shù)為2～4次，每次1～3小時(shí)；將三次提取液合并；50～90℃常壓或減壓濃縮，將2～5倍藥材重量份的濃縮液離心，上清液上大孔樹(shù)脂柱，上柱完畢后用水洗脫至無(wú)總糖時(shí)即總糖反應(yīng)Molish反應(yīng)為陰性，換用30％～90％的乙醇洗脫，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮呈陰性時(shí)結(jié)束洗脫，50～90℃下醇洗脫液濃縮至30℃密度約為1.31～1.35，或濃縮液的體積為藥材0.1～0.3倍重量份，得葛根濃縮液待用；上述桑白皮濃縮液和葛根濃縮液混合均勻后50～70℃常壓、減壓干燥或進(jìn)行噴霧干燥后，即得桑白皮和葛根混合提取物，簡(jiǎn)稱桑葛提取物； 桑白皮濃縮液與葛根濃縮液也可以分別按常規(guī)的常壓、減壓或噴霧干燥后得桑白皮提取物和葛根提取物再混合均勻，得桑葛提取物； 將桑葛提取物加入常規(guī)賦形劑，按照常規(guī)工藝，制成臨床可接受的劑型，包括但不限于濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。
上述方法所得用高效液相色譜法測(cè)定桑葛提取物中的1-脫氧野尻霉素即DNJ的含量為15～60mg/g，葛根素含量為50～160mg/g。
本發(fā)明藥物組合物的制備方法優(yōu)選為 桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制或粉碎后，用水提取，提取溫度為50℃，總?cè)軇┝繛樗幉牡?7重量份，提取次數(shù)為3次，時(shí)間為(2+1+1)小時(shí)；將三次提取液合并；60～65減壓濃縮，將3倍藥材重量份的濃縮液離心上活性碳柱，所用活性碳為藥材重量份的1倍，顆粒型，使用前用蒸餾水浸泡過(guò)夜，濕法裝柱，上柱液溫度為50℃，提取液也可經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的醇沉后以水溶液的形式上活性碳柱；上柱完畢后用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性)換用15％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，60℃～65℃將乙醇洗脫液濃縮，濃縮液濃縮至30℃密度約為1.20～1.25，或濃縮液的體積為藥材0.05～0.1倍重量份，得桑白皮濃縮液待用； 葛根藥材經(jīng)過(guò)切制或粉碎后，用水提取，提取溫度為室溫50℃，總?cè)軇┝繛樗幉牡?2倍重量份，提取次數(shù)為3次，每次2小時(shí)；將提取液合并；75℃提取液減壓濃縮、離心，將3倍藥材重量份的上清液上大孔樹(shù)脂柱，上柱完畢后用水洗脫至無(wú)總糖時(shí)即Molish反應(yīng)為陰性，換用75％的乙醇洗脫，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮呈陰性反應(yīng)時(shí)結(jié)束洗脫，50～90℃下醇洗脫液濃縮至30℃密度約為1.31～1.35，或濃縮液的體積為藥材0.1～0.3倍重量份，得葛根濃縮液待用； 上述桑白皮濃縮液和葛根濃縮液按原藥材的比例，即桑白皮∶葛根為5∶1比例混合均勻后60～65℃減壓干燥，即得桑葛提取物；桑白皮濃縮液與葛根濃縮液也可以分別按常壓、減壓或噴霧干燥后，再按按原藥材的比例混合，即桑白皮藥材∶葛根藥材為5∶1比例混合均勻，得桑葛提取物。
將桑葛提取物加入常規(guī)賦形劑，按照常規(guī)工藝，制成臨床可接受的濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。
上述提取溶劑中的水還可以用乙醇溶液替代，乙醇溶液的濃度優(yōu)選10％～90％； 上述提取方法可以是常規(guī)攪拌提取、浸泡提取或加熱回流提取； 上述大孔樹(shù)脂選用苯乙烯型弱極性或非極性大孔樹(shù)脂，優(yōu)選DS401、AB-8、NKA、D4006、DA201或DB-301型號(hào)的樹(shù)脂。
本發(fā)明藥物組合物可用于制備治療高血糖、糖尿病及其并發(fā)癥的藥物。
本發(fā)明藥物組合物經(jīng)臨床研究證實(shí)桑白皮含有的1-脫氧野尻霉素(簡(jiǎn)稱DNJ)、N-Me-DNJ、GAL-DNJ、fagomine等生物堿類是作用明確的α-葡萄糖苷酶抑制劑，DNJ具有很強(qiáng)的α-葡萄糖苷酶抑制作用；體外研究結(jié)果表明，DNJ對(duì)不同動(dòng)物體內(nèi)α-葡萄糖苷酶的抑制作用不同，它抑制蔗糖酶和麥芽糖酶的IC50范圍分別是6.6～16×10-8M和7.4～63×10-8M，DNJ對(duì)α-葡萄糖苷酶表現(xiàn)為競(jìng)爭(zhēng)性抑制，常作用于底物結(jié)合位點(diǎn)或其附近；葛根煎劑可降低血糖，葛根素(葛根的主要活性成分之一)能夠顯著降低四氧嘧啶高血糖小鼠的血糖，明顯改善四氧嘧啶小鼠的糖耐量，對(duì)抗腎上腺素的升血糖作用，葛根素對(duì)糖尿病并發(fā)癥也具有治療作用，包括糖尿病周圍神經(jīng)病變、糖尿病腎病及糖尿病視網(wǎng)膜病變等。本發(fā)明利用現(xiàn)代的分離純化手段去除兩味藥中的雜質(zhì)成分并提高了提取物中有效成分的含量，克服了傳統(tǒng)方劑服用量大，服用不方便的缺點(diǎn)，用于治療高血糖、糖尿病及其并發(fā)癥具有更好的療效。
下述實(shí)驗(yàn)和實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例1 用豬小腸粘膜葡萄糖苷酶抑制模型比較桑葛提取物與桑白皮提取物、葛根提取物對(duì)葡萄糖苷酶的抑制作用。
(1)豬小腸粘膜葡萄糖苷酶來(lái)源于豬小腸空腸段刷狀緣。制備過(guò)程為取新鮮豬小腸，清洗干凈，刮取小腸黏膜，勻漿處理，4℃放置過(guò)夜，離心2次，合并上清液，硫銨沉淀，放置過(guò)夜，高速冷凍離心2次，收集沉淀并透析除鹽，所得粗酶冷凍干燥，得到淡黃色固體粉末。使用時(shí)以磷酸鹽緩沖液配制成10mg/ml溶液。
(2)藥品與試劑 0.05M磷酸鹽緩沖液；麥芽糖上?；瘜W(xué)試劑公司，批號(hào)F20030512，配制成56mM的溶液；葡萄糖試劑盒(體外診斷試劑盒)中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)240811。
(3)實(shí)驗(yàn)儀器 恒溫水浴鍋，島津UV-1601PV型分光光度計(jì)。
(4)在藥材總量保持一致時(shí)，桑白皮提取物、葛根提取物以及桑葛提取物均配制成0.4g生藥/ml的濃度，并按比例進(jìn)行稀釋，繪制抑制率-濃度曲線。
(5)實(shí)驗(yàn)方法 A、酶促反應(yīng)的進(jìn)行及樣品的收集取豬小腸黏膜葡萄糖苷酶溶液0.1ml加入試管中，再分別加入葡萄糖苷酶抑制劑0.1ml，加入底物麥芽糖溶液0.2ml，37℃恒溫反應(yīng)45分鐘。再將以上試管于沸水浴中加熱8分鐘終止反應(yīng)，而后在試管中加入0.6ml蒸餾水，靜置5分鐘，取上清液測(cè)定葡萄糖含量。
B、樣品中葡萄糖的測(cè)定及結(jié)果評(píng)價(jià)樣品中葡萄糖的測(cè)定采用葡萄糖液體試劑盒，將試劑盒R1和R2液按1∶9比例混合，在試管中先加入1.5ml混合液，再加入樣品30μl，37℃反應(yīng)15min。比色法510nm測(cè)定吸光值；在不同濃度的α-葡萄糖苷酶抑制劑存在的條件下，葡萄糖的釋放以無(wú)抑制劑時(shí)葡萄糖的百分比表示。以抑制百分率對(duì)不同抑制劑濃度作圖，得劑量反應(yīng)曲線，并作擬合方程，計(jì)算每根曲線的IC50值，結(jié)果如表1 表1桑白皮葛根不同比例樣品對(duì)粗酶的抑制活性 應(yīng)用豬小腸粘膜葡萄糖苷酶抑制模型測(cè)定體外抑制葡萄糖苷酶活性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示桑白皮提取物和葛根提取物在體外均有葡萄糖苷酶抑制作用，二者按一定配比組合后這種抑制作用有明顯的增強(qiáng)。
實(shí)驗(yàn)例2用反轉(zhuǎn)腸囊技術(shù)評(píng)價(jià)桑葛提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制劑抑制作用 實(shí)驗(yàn)材料 (1).原理反轉(zhuǎn)腸囊技術(shù)可用于研究小腸酶在溫育瓶中對(duì)底物的作用。本研究的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖窍葘?duì)反轉(zhuǎn)腸囊技術(shù)進(jìn)行方法學(xué)考察，然后通過(guò)此方法對(duì)DNJ及受試桑白皮葛根提取物藥物的α-葡萄糖苷酶抑制作用進(jìn)行評(píng)價(jià)。
(2).實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠，♂，120-140g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證編號(hào)SCXK(京)2002-2003。
(3).實(shí)驗(yàn)藥品與試劑 桑白皮葛根提取物來(lái)源于實(shí)施例4的樣品；淀粉酶Sigma產(chǎn)品，100mg/支，1070U/mg。使用時(shí)用蒸餾水溶解，使4000U/g淀粉(取22.4mg α-淀粉酶，溶于1ml蒸餾水中，取10μl/6ml淀粉溶液)；Krebs-Henseleit緩沖液NaHCO3 25.0mM，NaCl 118mM，KCl 4.7mM，MgSO4 1.2mM，NaH2PO4 1.2mM，CaCl2 1.2mM。配制時(shí)先將NaHCO3、NaCl、KCl、NaH2PO4溶解，最后再加入MgSO4和CaCl2；可溶性淀粉四川省彭州市軍樂(lè)化工廠，批號(hào)20010108。使用時(shí)用Krebs-Henseleit緩沖液配制成1％的混懸液，然后在具塞三角瓶中置入95℃左右的水浴鍋中加熱13min，期間不斷混均。
實(shí)驗(yàn)方法 (1)底物的準(zhǔn)備與給藥將1％的淀粉溶液加熱溶解后，按一定比例加入α-淀粉酶，混均，37℃水浴鍋中反應(yīng)10min，反應(yīng)結(jié)束后與碘液無(wú)顯色反應(yīng)，說(shuō)明淀粉已經(jīng)完全被分解為寡糖。每個(gè)25ml的三角瓶中加入此溶液6ml，再加入各濃度的受試藥物備用。
(2)腸囊的制備斷頭處死雄性大鼠，在十二指腸上端切開(kāi)并取出小腸。借助不銹鋼針將小腸反轉(zhuǎn)，剪成7-8cm的小段，每段小腸的一端用手術(shù)線結(jié)扎，在另一端將1ml Krebs-Henseleit緩沖液灌入小腸后結(jié)扎，完成了此段腸囊的制備。將各腸囊置于冰凍的Krebs-Henseleit緩沖液中備用。
(3)酶促反應(yīng)的進(jìn)行及樣品的收集提前將搖床預(yù)熱到37℃?zhèn)溆?。待所有的腸囊制備完畢，將它們隨機(jī)加到各三角瓶中，在搖床上以37℃的溫度，30轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速進(jìn)行反應(yīng)。2h后取出各三角瓶，每瓶加入10μl 1mol/L HCl終止反應(yīng)。然后從三角瓶中取出腸囊，切開(kāi)腸囊并使腸囊內(nèi)的液體與三角瓶?jī)?nèi)的液體混合，混均后收集樣品0.5ml，4℃冰箱保存。
(4)樣品中葡萄糖的測(cè)定及結(jié)果評(píng)價(jià)在不同濃度的α-葡萄糖苷酶抑制劑存在的條件下，葡萄糖的釋放以無(wú)抑制劑時(shí)葡萄糖的百分比表示。以抑制百分率對(duì)不同抑制劑濃度作圖，得劑量反應(yīng)曲線。結(jié)果見(jiàn)表2。
表2用反轉(zhuǎn)腸囊技術(shù)評(píng)價(jià)桑葛提取物對(duì)葡萄糖苷酶的抑制作用 從上述結(jié)果分析可知，桑白皮葛根提取物對(duì)葡萄糖苷酶的抑制作用較強(qiáng)。
實(shí)驗(yàn)例3 桑葛提取物單次給藥對(duì)正常大鼠口服淀粉耐量實(shí)驗(yàn)的影響 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用180g左右的Wistar大鼠，♂，分為對(duì)照組和給藥組，給藥組又分為小、中、大三個(gè)劑量組，每組15只。禁食一夜后，剪尾取血，立即測(cè)定血糖，作為空腹血糖，隨后給藥組給予小、中、大劑量的桑白皮葛根提取物，并同時(shí)給予2g/kg的淀粉溶液，對(duì)照組則給予同樣體積的蒸餾水及淀粉溶液，以后依次在30min、60min、120min時(shí)剪尾測(cè)定血糖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。
表3桑白皮葛根提取物對(duì)正常大鼠淀粉耐量試驗(yàn)的影響 **p＜0.01，與對(duì)照組比較，n＝15 從以上結(jié)果分析對(duì)照組大鼠在給予淀粉溶液30min出現(xiàn)血糖峰值，而給藥組在給予淀粉后血糖峰值變得非常平緩，在給藥組中的小、中、大三個(gè)劑量組中有明顯的量效關(guān)系，說(shuō)明本發(fā)明所提取桑白皮葛根提取物對(duì)正常大鼠的腸道α-葡萄糖苷酶有顯著的抑制作用。



圖1用反轉(zhuǎn)腸囊技術(shù)評(píng)價(jià)桑白皮葛根提取物對(duì)葡萄糖苷酶的抑制作用 圖2桑白皮葛根提取物單次給藥對(duì)正常大鼠淀粉耐量試驗(yàn)的影響 下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果。

具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 1000g桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制后，35℃攪拌提取三次，加水量為藥材重量的(8+6+6)倍，提取時(shí)間為(2+1+1)小時(shí)，三次提取液合并，60℃減壓濃縮，濃縮液2000ml離心上活性碳柱(活性碳型號(hào)為GH-15，用量1000g，濕法裝柱)，樣品上完全后用水洗脫，直至水洗液澄清時(shí)(此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性)換用15％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，15％的乙醇洗脫液60～65℃減壓濃縮，醇洗脫液濃縮至50ml左右待用； 166克的葛根藥材經(jīng)過(guò)切制后，用水60℃加熱攪拌提取三次，加水量為藥材重量的(9+6+5)倍，提取時(shí)間為(2+1+1)小時(shí)，三次提取液合并，60℃減壓濃縮、離心，上清液600ml上NKA大孔樹(shù)脂柱，樣品上完柱后一直用水洗脫，至水洗液澄清(此時(shí)總糖反應(yīng)Molish反應(yīng)為陰性)，換用50％的乙醇洗脫，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮，反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束收集，醇洗脫液濃縮至20ml待用； 上述桑白皮濃縮液和葛根濃縮液混合均勻后65～75℃℃減壓干燥，得到桑葛提取物58克；用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定提取物中的DNJ含量為45mg/g，葛根素含量為120mg/g； 以上桑葛提取物加入輔料，經(jīng)常規(guī)工藝；制成緩釋制劑。
實(shí)施例2 1000克桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制后，50℃攪拌提取二次，加水量為藥材重量的(10+8)倍，提取時(shí)間為(2+1)小時(shí)，二次提取液合并，60℃減壓濃縮，濃縮液3000ml離心上活性碳柱(活性碳型號(hào)為GH-1，用量500克，濕法裝柱)，樣品上完后用水洗脫至直至水洗液澄清時(shí)(此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性)換用25％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，25％的乙醇洗脫液60～65℃減壓濃縮干燥，得桑白皮提取物；250克的葛根藥材經(jīng)過(guò)切制后用水90℃加熱攪拌提取兩次，加水量為藥材重量的(10+8)倍，提取時(shí)間為(2+1)小時(shí)，兩次提取液合并，60～65℃減壓濃縮、離心，上清液750ml上AB-8大孔樹(shù)脂柱，樣品上完柱后一直用水洗脫至無(wú)總糖時(shí)(即總糖反應(yīng)Molish反應(yīng)為陰性)，換用60％的乙醇洗脫，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮→反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束收集，醇洗脫液濃縮，得到葛根提取物； 上述桑白皮提取物和葛根提取物混合均勻后70～75℃減壓干燥，即得桑葛提取物50克，用HPLC測(cè)定提取物中的DNJ含量為35mg/g，葛根素含量為90mg/g； 以上桑葛提取物加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)工藝；制成濃縮丸劑。
實(shí)施例3 1000克桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制后，用30％的乙醇加熱回流提取三次，溶劑量為藥材重量的(7+5+5)倍，提取時(shí)間為(2+1+1)小時(shí)，三次提取液合并，60℃減壓濃縮，揮去乙醇濃縮至4000ml離心上活性碳柱(活性碳型號(hào)為GH-1，用量1000克，濕法裝柱)，樣品上完全后用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性)換用30％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，30％的乙醇洗脫液60℃減壓濃縮，濃縮液待用； 330克的葛根藥材經(jīng)過(guò)切制后用80％乙醇加熱回流提取兩次，加醇量為藥材重量的(10+8)倍，提取時(shí)間為(2+1)小時(shí)，兩次提取液合并，60℃減壓濃縮揮去乙醇轉(zhuǎn)成水溶液，離心后上清液1000ml上DS-401大孔樹(shù)脂柱，樣品上完柱后一直用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，換用75％的乙醇洗脫，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮，反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束收集，醇洗脫液濃縮，得到葛根提取物； 上述桑白皮提取物和葛根提取物混合均勻后55℃減壓干燥，即得桑葛提取物40克，用HPLC測(cè)定提取物中的DNJ含量為20mg/g，葛根素含量為140mg/g； 以上桑葛提取物加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)工藝；制成口服液。
實(shí)施例4 10KG桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制后，50℃攪拌提取三次，加水量為藥材重量的(8+6+6)倍，提取時(shí)間為(2+1+1)小時(shí)，三次提取液合并，60℃減壓濃縮，濃縮液25L離心上活性碳柱(活性碳型號(hào)為GH-15，用量12KG，濕法裝柱)，樣品上完全后用水洗脫，直至水洗液澄清(此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性)換用15％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖，反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，15％的乙醇洗脫液70℃減壓濃縮，濃縮液待用； 2KG的葛根藥材經(jīng)過(guò)切制后用水60℃加熱攪拌提取三次，加水量為藥材重量的(9+6+5)倍，提取時(shí)間為(2+1+1)小時(shí)，三次提取液合并，70℃減壓濃縮、離心，上清液上DS40大孔樹(shù)脂柱，樣品上完柱后一直用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(Molish反應(yīng)為陰性)，換用85％的乙醇洗脫，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮，反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束收集，醇洗脫液濃縮，待用； 上述桑白皮濃縮液和葛根濃縮液混合均勻后噴霧干燥，得到桑葛提取物456克，用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定提取物中的DNJ含量為34mg/g，葛根素含量為80mg/g； 以上桑葛提取物加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)工藝；制成片劑。
實(shí)施例5 1000克桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制后，50℃攪拌提取三次，加水量為藥材重量的(8+6+6)倍，提取時(shí)間為(2+1+1)小時(shí)，三次提取液合并，60℃減壓濃縮至3000ml，加95％的乙醇9000ml醇沉，放置過(guò)夜，離心，上清液濃縮揮去乙醇并加水定容至3000ml上活性碳柱(活性碳型號(hào)為GH-1，用量1000克，濕法裝柱)，樣品上完全后用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性)換用30％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，30％的乙醇洗脫液60℃減壓濃縮，濃縮液減壓干燥，獲得桑白皮提取物干燥凈膏30克； 1000克的葛根藥材經(jīng)過(guò)切制后用80％乙醇加熱回流提取兩次，加醇量為藥材重量的(10+8)倍，提取時(shí)間為(2+1)小時(shí)，兩次提取液合并，60℃減壓濃縮揮去乙醇轉(zhuǎn)成水溶液，離心后上清液80ml上DS-401大孔樹(shù)脂柱，樣品上完柱后一直用水洗脫，水洗液澄清時(shí)(即Molish反應(yīng)為陰性)，換用90％的乙醇洗脫，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮，反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束收集，醇洗脫液濃縮，得到葛根提取液，濃縮液減壓干燥，獲得葛根提取物干燥凈膏70克； 上述桑白皮提取物和葛根提取物的干燥凈膏混合均勻后，得到桑葛提取物，用HPLC測(cè)定提取物中的DNJ含量為15mg/g，葛根素含量為150mg/g；以上桑葛提取物加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)工藝；制成顆粒劑。
實(shí)施例6 取桑白皮60kg葛根10kg按常規(guī)提取、制備工藝制成膠囊劑。
實(shí)施例7 取桑白皮50kg葛根10kg按常規(guī)提取、制備工藝制成片劑。
實(shí)施例8 取桑白皮10kg葛根10kg按常規(guī)提取、制備工藝制成顆粒。
權(quán)利要求
1.一種降血糖的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥按重量份組成為桑白皮∶葛根為1～6∶1。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥按重量份組成為桑白皮∶葛根為5∶1。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥按重量份組成為桑白皮∶葛根為4∶1。
4.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥按重量份組成為桑白皮∶葛根為3∶1。
5.如權(quán)利要求1～4任一所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制或粉碎后，用水提取，提取溫度為室溫～90℃，總?cè)軇┝繛樗幉牡?4～30倍重量份，提取次數(shù)為2∶4次，每次1～5小時(shí)；將三次提取液合并；50～75℃減壓濃縮，將1～5倍藥材重量份的濃縮液離心上活性碳柱，所用活性碳為藥材重量份的0.5～3倍，可選用粉末型或顆粒型，使用前用蒸餾水浸泡過(guò)夜，濕法裝柱，上柱液溫度為室溫～70℃，提取液也可經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的醇沉后以水溶液的形式上活性碳柱；上柱完畢后用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性；換用10～50％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，50～90℃將乙醇洗脫液濃縮至30℃密度約為1.20～1.25，或濃縮液的體積為藥材0.05～0.1倍重量份，得桑白皮濃縮液待用；
葛根藥材經(jīng)過(guò)切制或粉碎后，用水提取，提取溫度為50～100℃，總?cè)軇┝繛樗幉牡?5～30倍重量份，提取次數(shù)為2～4次，每次1～3小時(shí)；將三次提取液合并；50～90℃下常壓或減壓濃縮，將2～5倍藥材重量份的濃縮液離心，上清液上大孔樹(shù)脂柱，上柱完畢后用水洗脫至無(wú)總糖時(shí)即Molish反應(yīng)為陰性，換用30％～90％的乙醇洗脫并開(kāi)始接收洗脫液，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮呈陰性時(shí)結(jié)束洗脫，50～90℃下醇洗脫液濃縮至30℃密度約為1.31～1.35，或濃縮至濃縮液的體積為藥材0.1～0.3倍重量份，得葛根濃縮液待用；
桑白皮濃縮液和葛根濃縮液混合均勻后50～90℃常壓、減壓干燥或噴霧干燥后，即得桑白皮和葛根混合提取物，簡(jiǎn)稱桑葛提取物；或?qū)⑸０灼饪s液與葛根濃縮液分別按常壓、減壓或噴霧干燥后，混合均勻，得桑葛提取物；
將桑葛提取物加入常規(guī)賦形劑，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑或口服液體制劑。
6.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為
桑白皮藥材經(jīng)過(guò)切制或粉碎后，用水提取，提取溫度為50℃，總?cè)軇┝繛樗幉?7重量份，提取次數(shù)為3次，每次提到時(shí)間為2小時(shí)、1小時(shí)、1小時(shí)；將三次提取液合并；60℃～65℃減壓濃縮，將3倍藥材重量份的濃縮液離心上活性碳柱，所用活性碳為藥材重量份的1倍，顆粒型，使用前用蒸餾水浸泡過(guò)夜，濕法裝柱，上柱液溫度為50℃，提取液也可經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的醇沉后以水溶液的形式上活性碳柱；上柱完畢后用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，此時(shí)茚三酮反應(yīng)為陰性；換用15％的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測(cè)總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，60℃～65℃將乙醇洗脫液濃縮，濃縮液濃縮至30℃密度為1.20～1.25，或濃縮至濃縮液的體積為藥材0.05～0.1倍重量份，得桑白皮濃縮液待用；
葛根藥材經(jīng)過(guò)切制或粉碎后，用水提取，提取溫度為50℃，總?cè)軇┝繛樗幉牡?2倍重量份，提取次數(shù)為3次，每次2小時(shí)；將提取液合并；70℃～75℃下提取液減壓濃縮、離心，將3倍藥材重量份的上清液上大孔樹(shù)脂柱，上柱完畢后用水洗脫至無(wú)總糖時(shí)即Molish反應(yīng)為陰性，換用75％的乙醇洗脫并開(kāi)始接收洗脫液，用三氯化鐵試劑定性檢測(cè)黃酮呈陰性反應(yīng)時(shí)結(jié)束洗脫，50～90℃下醇洗脫液濃縮至30℃密度約為1.31～1.35，或濃縮液的體積為藥材0.1～0.3倍重量份，得葛根濃縮液待用；
桑白皮濃縮液和葛根濃縮液混合均勻后60℃減壓干燥，即得桑葛提取物；或?qū)⑸０灼饪s液與葛根濃縮液分別按常規(guī)減壓或噴霧干燥后，再混合，得桑葛提取物；
將桑葛提取物加入常規(guī)賦形劑，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑。
7.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中所述提取溶劑中的水還可以用乙醇溶液替代，其中乙醇溶液的濃度為10～90％。
8.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中所述提取方法是常規(guī)攪拌提取、浸泡提取或加熱回流提取。
9.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于其中所述大孔樹(shù)脂是苯乙烯型弱極性或非極性大孔樹(shù)脂。
10.如權(quán)利要求1-4任一所述的藥物組合物在制備治療高血糖、糖尿病或其并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種降血糖的藥物組合物及其制備方法，該藥物組合物由桑白皮和葛根分別進(jìn)行提取純化，然后二者的過(guò)柱洗脫液分別濃縮后按一定比例混合再進(jìn)行噴霧干燥或減壓干燥，也可以分別干燥得到桑白皮提取物和葛根提取物再按一定比例混合均勻。該藥物組合物可用于制備治療高血糖、糖尿病及其并發(fā)癥的藥物。
文檔編號(hào)A61P3/00GK101108207SQ200610099050
公開(kāi)日2008年1月23日 申請(qǐng)日期2006年7月17日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月17日
發(fā)明者段震文, 郭樹(shù)仁, 樊利青, 何大林 申請(qǐng)人:北京北大維信生物科技有限公司