專利名稱：一種降血糖的藥物組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物，特別是一種降血糖的藥物組合物，及其用于制備降血糖藥物的用途。
背景技術(shù)：
糖尿病是一種由多基因、多因素引起的慢性代謝性疾病。中藥復(fù)方具有多靶點、多種成分協(xié)同作用的優(yōu)勢，與單一靶點的藥物相比更適合此類疾病的治療。以阿卡波糖為代表的α -葡萄糖苷酶抑制劑通過減緩碳水化合物的消化吸收，能夠降低II型糖尿病患者的餐后血糖(PPHG)，增加胰島素敏感性及分泌能力，已經(jīng)成為II型糖尿病的一線治療藥物， 占據(jù)30%以上的市場份額，具有廣闊的市場前景。但目前尚無具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的中藥復(fù)方制劑上市。前期研究工作和文獻報道顯示，桑白皮中的1-脫氧野尻霉素(DNJ)具有較強的 α -葡萄糖苷酶抑制作用，而且桑白皮和葛根配伍具有協(xié)同增效作用。動物體內(nèi)實驗結(jié)果表明，桑葛復(fù)方的降低血糖作用明顯優(yōu)于單一的桑白皮提取物和葛根提取物，可開發(fā)成具有 α-葡萄糖苷酶抑制作用的桑葛降糖復(fù)方。專利“一種降血糖的藥物組合物及其制備方法”(申請?zhí)朇N200610099050. 5)保護
了桑白皮葛根為1 6 1的組合物，其專利說明書中表明，當(dāng)葛根用量一定，且桑白皮 葛根比例為1 6 1時，隨著桑白皮用量的增加，其α-葡萄糖苷酶抑制作用是逐漸增強的，即當(dāng)桑葛復(fù)方中DNJ含量增加時，復(fù)方對α -葡萄糖苷酶抑制作用也隨之增強，表明DNJ 對α-葡萄糖苷酶的抑制作用存在量效關(guān)系。但目前尚沒有研究對葛根在桑白皮葛根復(fù)方(簡稱桑葛復(fù)方)中的作用進行闡述。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過大量地實驗，證明了葛根在桑葛復(fù)方中的作用，即在桑葛復(fù)方中，當(dāng)桑白皮用量不變時，隨著葛根用量的增加，降糖效果也隨之增強，并提供了新的桑葛復(fù)方。具體地，本發(fā)明涉及以下幾個方面本發(fā)明的一個方面涉及一種藥物組合物，其含有桑白皮和葛根，其特征在于桑白皮和葛根的比例按重量份計為1 2 1 10，例如可以為1 3 1 10，1 6 1 10 或 1 8 1 10。在本發(fā)明的實施方案中，所述藥物組合物的組成為桑白皮和葛根。在本發(fā)明的實施方案中，所述桑白皮和葛根的比例按重量份計為1 2、1 3、 1 4、1 6、1 8 或 1 10。在本發(fā)明的一個實施方案中，當(dāng)桑白皮和葛根的比例為1 8禾Pl 10時，能夠明顯降低空腹血糖以及餐后30 120min血糖，并且隨著葛根所占比例的增加，降糖效果更好。
在本發(fā)明的另一個實施方案中，當(dāng)桑白皮和葛根的比例為1 3禾Pl 6時，分別與桑白皮和葛根的比例為3 1和6 1時相比，具有更強的降血糖作用，且降糖作用更持久。本發(fā)明的另一方面涉及本發(fā)明的藥物組合物在制備降血糖藥物中的用途。本發(fā)明的另一方面涉及本發(fā)明的藥物組合物在制備治療高血糖、糖尿病或其并發(fā)癥的藥物中的用途。本發(fā)明的另一方面涉及本發(fā)明的藥物組合物的制備方法，其包括以下步驟(1)取原料桑白皮和葛根，其比例按重量份計為1 2 1 10;(2)分別制備桑白皮提取物和葛根提取物，其制備方法為將桑白皮和葛根分別經(jīng)過水或有機溶劑如乙醇提取，或提取后進行進一步純化，得到提取物；(3)將步驟O)的桑白皮和葛根提取物混合均勻后得到本發(fā)明的藥物組合物，即桑葛提取物。其中步驟O)中的桑白皮和葛根提取物優(yōu)選采用以下制備方法桑白皮提取物的制備方法為以下方法中的其中之一A.桑白皮藥材經(jīng)過切制或粉碎，用水提取，提取次數(shù)為1 3次，優(yōu)選提取3次，提取溫度為室溫 煮沸，優(yōu)選煮沸提取，溶劑量為藥材重量的10 30倍重量份，優(yōu)選20-30 倍，獲得桑白皮藥材水提取液，提取液濃縮后離心，上清液濃縮成稠膏得到桑白皮提取物A， 或經(jīng)過噴霧干燥、減壓或常壓干燥得桑白皮提取物A ；B.桑白皮藥材水提取液濃縮后加入乙醇沉淀，乙醇濃度范圍50% 90%，優(yōu)選乙醇濃度范圍為70 80%，沉淀棄之，上清液濃縮，回收乙醇后成稠膏得到桑白皮提取物B， 或經(jīng)過噴霧干燥、減壓或常壓干燥得桑白皮提取物B ；C.桑白皮藥材水提取液濃縮后離心，上清液過強酸型陽離子交換樹脂，樹脂可選擇001 ± 4,001 ± 7、D61、DOOlcc等型號，優(yōu)選001 ± 7 (732型)，上柱流出液棄之，收集 0. 1 IN的氨水洗脫液，優(yōu)選用0. 5N的氨水洗脫，洗脫液濃縮后得到桑白皮提取物C，或經(jīng)過噴霧干燥、減壓或常壓干燥得桑白皮提取物C ；D.桑白皮藥材水提取液濃縮后離心，上清液過強酸型陽離子交換樹脂，樹脂可選擇001 ± 4,001 ± 7、D61、DOOlcc等型號，優(yōu)選001 ± 7 (732型)，上柱流出液棄之，收集 0. 1 IN的氨水洗脫液，洗脫液濃縮揮去氨水，PH值8 9，濃縮液繼續(xù)上強堿型陰離子交換樹脂，樹脂可選擇201 4、D201等型號，優(yōu)選201 4型，上柱流出液和水洗液(水洗至中性)串聯(lián)上弱酸型陽離子交換樹脂柱，樹脂可選擇WK40、110、D113、D151等型號，優(yōu)選 D151型，收集從弱酸型陽離子交換樹脂柱下來的PH為8 9的流出液和水洗液，合并濃縮后得到桑白皮提取物D，或經(jīng)過常壓、減壓干燥、冷凍干燥或噴霧干燥得桑白皮提取物D ；E、桑白皮藥材水提取液濃縮后離心，上粉末或顆粒型活性碳柱，提取液也可經(jīng)過醇沉上清液揮去乙醇后在上活性炭柱，上柱完畢用水洗至茚三酮反應(yīng)陰性時換用10 50%的乙醇洗脫，優(yōu)選15 25%的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)molish反應(yīng)消失時結(jié)束洗脫，洗脫液濃縮后得到桑白皮提取物E，或經(jīng)過常壓、減壓干燥、冷凍干燥或噴霧干燥得桑白皮提取物E ；葛根提取物的制備方法為以下方法中的其中之一F.葛根藥材經(jīng)過切制或粉碎，用水提取，提取次數(shù)為1 3次，提取溫度為室溫 煮沸，優(yōu)選煮沸提取，溶劑量為藥材重量的10 30倍重量份，優(yōu)選20 30倍，獲得葛根藥材的水提取液，提取液濃縮后離心，上清液繼續(xù)濃縮成稠膏得到葛根提取物F，或經(jīng)過噴霧干燥、減壓或常壓干燥得葛根提取物F ；G.葛根藥材經(jīng)過切制或粉碎，用濃度為30 95%乙醇回流提取，優(yōu)選70 80% 的乙醇提取，提取次數(shù)為1 3次，優(yōu)選提取3次，溶劑量為藥材重量的10 30倍重量份， 優(yōu)選20 30倍，獲得葛根藥材的醇提取液，提取液濃縮后離心，上清液繼續(xù)濃縮成稠膏得到葛根提取物G，或經(jīng)過噴霧干燥、減壓或常壓干燥得葛根提取物G ；H、葛根藥材的水提取液濃縮后加入乙醇醇沉，乙醇濃度范圍50% 90%，優(yōu)選乙醇濃度范圍為70 80%，沉淀棄之，上清液繼續(xù)濃縮成稠膏得到葛根提取物H，或經(jīng)過噴霧干燥、減壓或常壓干燥得葛根提取物H ；I、葛根藥材的醇提取液濃縮至無醇后加入水沉淀，沉淀棄之，上清液濃縮后得到葛根提取物I，或經(jīng)過噴霧干燥、減壓或常壓干燥得葛根提取物I ；J、葛根藥材的水或醇提取液濃縮后，上非極性大孔樹脂柱，樹脂型號可選擇AB-8、 DS401、D101、D3520、NKA-9、D4006等型號，優(yōu)選AB_8、DS401，上柱流出液和水洗液棄之，收集50 95 %乙醇洗脫液，優(yōu)選70 %乙醇洗脫，洗脫液濃縮后得到葛根提取物J，或經(jīng)過噴霧干燥、減壓或常壓干燥得葛根提取物J。 在本發(fā)明的實施方案中，采用制備方法A-E制備桑白皮提取物；在本發(fā)明的實施方案中，采用制備方法F-J制備葛根提取物。在本發(fā)明的一個實施方案中，采用制備方法C或D制備桑白皮提取物，在本發(fā)明的另一個實施方案中，采用制備方法F或J制備葛根提取物。在本發(fā)明的實施方案中，桑白皮提取物中DNJ的含量為1. 45 % -60 %，葛根提取物中葛根素的含量為10% -35.4%?；旌线x自A-E制得的桑白皮提取物和選自F-J制得的葛根提取物，得到本發(fā)明的藥物組合物，即桑葛提取物。在本發(fā)明的一個實施方案中，分別將C和J、D和J制得的提取物混合，得到桑葛提取物。本發(fā)明的另一方面涉及葛根在延遲α -葡萄糖苷酶抑制劑腸道吸收中的用途。在所述用途中，葛根可以是葛根原料藥經(jīng)過粉碎制得，也可以是按照上述制備方法制備得到的提取物，即葛根經(jīng)過水或乙醇提取或提取后進行純化得到的產(chǎn)物。在本發(fā)明的一個實施方案中，葛根是經(jīng)過乙醇提取以及大孔樹脂柱純化后獲得的產(chǎn)物。所述α -葡萄糖苷酶抑制劑為DNJ、N-Me-DNJ、GAL-DNJ或fagomine，在本發(fā)明的一個實施方案中，所述α -葡萄糖苷酶抑制劑為DNJ。發(fā)明的有益效果1.本發(fā)明進一步證明了葛根在桑葛復(fù)方中的作用，將桑白皮和葛根在復(fù)方中的配比范圍進一步擴大為桑白皮葛根比例為1 2 1 10，即當(dāng)桑白皮用量不變時，隨著葛根用量的增加，復(fù)方的降糖效果隨之增強。2.本發(fā)明通過藥代動力學(xué)試驗初步證明了本發(fā)明復(fù)方的部分作用機制，即葛根中的成分對DNJ在動物體內(nèi)的吸收、代謝、分布、排泄等過程發(fā)生了影響，延滯了腸道DNJ的快速吸收，使更大濃度的DNJ與小腸刷狀緣上的a_葡萄糖苷酶充分接觸，對酶的抑制作用增強，致部分雙糖不能水解成葡萄糖吸收入血，使得餐后血糖變得更低、平穩(wěn)且降糖作用更持久。3.本發(fā)明證明了桑葛復(fù)方中葛根對桑白皮的協(xié)同作用，克服了以往研究認(rèn)為的在該復(fù)方中桑白皮起主要作用、只需要少量葛根的偏見，并提出了新的作用機制，為糖尿病治療藥物的研制開辟了新方向。


圖1.大鼠口服給予桑白皮和桑葛復(fù)方后DNK40mg/kg)的藥時曲線。其中橫坐標(biāo)為給藥后時間(單位h)，縱坐標(biāo)為DNJ濃度(單位ng/mL)。
具體實施例方式下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。實驗例實驗例1、2的桑白皮提取物按照實施例3制備，葛根提取物按照實施例10制備， 桑葛提取物按照實施例11制備。實驗例1不同配比桑葛復(fù)方的藥效學(xué)實驗(1)采用雄性ICR小鼠(購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司)64只，每組8只， 體重為M_28g，禁食過夜(從第一天5 OOpm開始空腹，第二天上午開始造模)，通過快速尾靜脈注射新鮮配制的鏈脲佐菌素(STZ)溶液造模，后者的劑量為140mg/kg，造模結(jié)束后使小鼠自由飲食。在造模2周后進行空腹血糖(白天空腹3-4h)測定，血糖在11. ImM以上的可作為成功的模型選用。具體造模方法請參見藥理學(xué)實驗指南-新藥發(fā)現(xiàn)和藥理學(xué)評價， H.G.沃格爾編著，科學(xué)出版社2001年第一版。然后將各組小鼠連續(xù)灌胃給予各個組別的受試藥物(所用樣品分別按照實施例 3、10和11制備)，其中桑白皮和葛根單獨使用時的提取物給藥劑量分別為0. 04g/kg和 0. 21g/kg，使用桑葛復(fù)方時桑白皮提取物的給藥劑量為0. 04g/kg，葛根的用量參見表1中配比，每天灌胃2次，連續(xù)灌胃2個月，在2個月后進行模型小鼠的淀粉耐量試驗，具體方法如下STZ糖尿病小鼠白天禁食不禁水4h，然后分別灌胃給予與0. 15g/ml糊化后淀粉混勻在一起的各組受試藥物，給藥劑量與長期給藥劑量相同，其中淀粉的劑量為3g/kg，空白對照(為正常小鼠)和模型對照組僅給予淀粉，然后在給予淀粉的0min、30min、60min及 120min進行血糖的測定，試驗結(jié)果見表1。表1不同配比的桑葛復(fù)方連續(xù)給予2個月后淀粉耐量試驗結(jié)果(1)
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其含有桑白皮和葛根，其特征在于桑白皮和葛根的比例按重量份計為1 2 1 10。
2.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所述的桑白皮和葛根的比例按重量份計為1 3 1 10。
3.權(quán)利要求2的藥物組合物，其中所述的桑白皮和葛根的比例按重量份計為1 6 1 10。
4.權(quán)利要求3的藥物組合物，其中所述的桑白皮和葛根的比例按重量份計為1 8 1 10。
5.權(quán)利要求1-4任一項的藥物組合物在制備降血糖藥物中的用途。
6.權(quán)利要求1-4任一項的藥物組合物在制備治療高血糖、糖尿病或其并發(fā)癥的藥物中的用途。
7.權(quán)利要求1-4任一項的藥物組合物的制備方法。
8.葛根在延遲α-葡萄糖苷酶抑制劑腸道吸收中的用途。
9.權(quán)利要求8的用途，其中所述的α-葡萄糖苷酶抑制劑為1-脫氧野尻霉素。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種降血糖的藥物組合物，及其用于制備降血糖藥物的用途。所述藥物組合物含有桑白皮和葛根，其特征在于桑白皮和葛根的比例按重量份計為1∶2～1∶10。本發(fā)明還涉及所述藥物組合物的制備方法及其用于制備治療高血糖、糖尿病或其并發(fā)癥的藥物中的用途。本發(fā)明還涉及葛根在延遲α-葡萄糖苷酶抑制劑的腸道吸收中的用途。
文檔編號A61P3/10GK102579585SQ20111000253
公開日2012年7月18日 申請日期2011年1月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月7日
發(fā)明者劉春麗, 樊利青, 段震文, 郭樹仁 申請人:北京北大維信生物科技有限公司