一種降血糖的藥物組合物及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種降血糖的藥物組合物及其應(yīng)用，該藥物組合物由活性成分和輔料制備而成，所述的活性成分包括5?溴呋喃?2?羧酸[2?(4?甲氧基苯基)?2H?苯并三唑?5?基]?酰胺。本發(fā)明藥物具有顯著的降血糖效果，同時能保護和減輕機體組織器官的損傷，特別是經(jīng)皮膚創(chuàng)傷擦拭給藥后可修復(fù)糖尿病小鼠損傷組織，特別適合治療糖尿病足。
【專利說明】
一種降血糖的藥物組合物及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，尤其涉及一種降血糖的藥物組合物及其應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是一種常見的全身慢性疾病。伴隨著病情的發(fā)展，中后期出現(xiàn)很多并發(fā)癥， 最常見得有糖尿病肢體壞疽、腎病以及眼病。由于胰島細(xì)胞不能正常分泌胰島素，導(dǎo)致胰島 素相對或絕對不足，引起糖、脂肪、蛋白質(zhì)的代謝紊亂，使肝糖原和肌糖原不能合成。因而出 現(xiàn)了血糖、尿糖升高和糖耐量降低，典型臨床癥狀為多飲、多食、多尿、體重減輕等中醫(yī)稱糖 尿病為消渴癥?？诳识囡?、納食增加、尿量增多、體質(zhì)消瘦、體重減輕為主要癥狀，俗稱"三多 一少"。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示當(dāng)前全世界有2.85億糖尿病患者，預(yù)測到2030年全世界的糖尿病患者 將達到4.39億。糖尿病所引發(fā)的并發(fā)癥已成為患者致殘和致死的主要原因。在糖尿病的諸 多并發(fā)癥中，糖尿病患者傷口愈合能力受損是糖尿病一個典型的并發(fā)癥，如果慢性的損傷 和潰瘍發(fā)生在足部，則有可能引發(fā)糖尿病足，嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致截肢。據(jù)報道全世界每30秒就 有一位因糖尿病而導(dǎo)致截肢的患者。
[0003]傷口愈合是一個復(fù)雜而精細(xì)的過程，由多種細(xì)胞和分子參與，它們彼此之間相互 協(xié)調(diào)共同完成傷口修復(fù)。正常的傷口愈合由凝血期、炎癥期、增生期、修復(fù)期所組成，各個階 段之間沒有明顯的界限，它們連續(xù)發(fā)生并又相互交錯。外傷一出現(xiàn)，機體首先出現(xiàn)止血反 應(yīng)，血小板聚集，纖維蛋白止血栓形成，血小板釋放大量生長因子，這些生長因子一方面促 使血管收縮，血管滲透性增加;另一方面吸引炎性細(xì)胞迀移至傷口處。此過程發(fā)生于傷口出 現(xiàn)后的數(shù)小時，而在隨后的2至3天內(nèi)，傷口愈合進入炎性期，多種炎性細(xì)胞，如中性粒細(xì)胞 和巨噬細(xì)胞進入傷口，它們可以吞噬入侵的細(xì)菌及消化壞死的組織細(xì)胞碎片，起到清潔創(chuàng) 面的作用，它們同時也合成釋放多種生長因子和調(diào)節(jié)分子。在增生期，多種細(xì)胞增殖速度增 加，如角質(zhì)細(xì)胞迀移和增殖速度增加可以促進再上皮化，再上皮化為正常的傷口提供了一 道與外界的防護屏，以免機體受到感染；內(nèi)皮細(xì)胞迀移及增殖增加可以促進新生血管的形 成，為傷口愈合提供良好的血液供應(yīng)，以輸送充足的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì);而成纖維細(xì)胞迀移增 殖增加可以促使肉芽組織的形成。在修復(fù)期，細(xì)胞外基質(zhì)沉積，細(xì)胞外基質(zhì)的快速形成和 沉積為參與傷口愈合的細(xì)胞提供腳手架，同時為再生修復(fù)和血管新生時血管的擴展提供基 質(zhì)支持。
[0004] CN105218532A公開了一種苯并三氮唑類小分子化合物或其藥學(xué)上可接受的酸加 成鹽，還公開了該苯并三氮唑類小分子化合物或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽在制備治療由 于RAS基因突變引起的各種惡性腫瘤生長、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)等疾病藥物中的醫(yī)藥用途，然而其沒 有披露該類化合物在降血糖或治療糖尿病并發(fā)癥方面的生物活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種降血糖的藥物組合物及其應(yīng)用，該藥物組合物可降低 血糖水平和尿蛋白，改善慢性腎臟、大血管、傷口等病理學(xué)功能變化。
[0006] 本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的： 一種降血糖的藥物組合物，由活性成分和輔料制備而成，所述的活性成分包括5-溴呋 喃-2-羧酸[2-( 4-甲氧基苯基)-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺。
[0007] 優(yōu)選地，如上所述降血糖的藥物組合物，其中所述的活性成分由5-溴呋喃-2-羧酸 [2-( 4-甲氧基苯基)-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺組成。
[0008] 進一步優(yōu)選地，如上所述降血糖的藥物組合物，其中所述的治療組合物為外用給 藥制劑，所述的外用給藥制劑選自凝膠劑、軟膏劑、擦劑。
[0009] 再進一步優(yōu)選地，如上所述降血糖的藥物組合物為擦劑，且藥物濃度為5-25mg/ mL，進一步優(yōu)選藥物濃度為6-18mg/mL。
[0010] 本發(fā)明所涉及的化合物5-溴呋喃-2-羧酸[2-(4_甲氧基苯基）-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺，其氫譜數(shù)據(jù)為：iHNMROMSO，300MHz): ? 10 ? 48(s，1H)，8 ? 48(d，J= 1 ? 2Hz，1H)， 8.22(d，J = 9.0Hz，2H)，7.98(t，J = 4.5Hz，lH)，7.75(dd，J= 1.82.1Hz，1H)，7.44(d，J = 3.6Hz，lH)，7.18(d，J = 9.0Hz，2H)，6.87(d，J = 3.3Hz，lH)，3.86(s，3H)，可以按照如下方法 制備而得： (1)將對甲氧基苯胺(2.48g，20.14mmo 1)溶解于48ml的鹽酸水溶液(4M)中，在冰浴條件 下加入亞硝酸鈉(1.678,24.17臟〇1)，反應(yīng)半小時后，將氨基磺酸銨(3.168)在0°(：下緩慢加 入體系中并繼續(xù)攪拌半個小時。用乙酸鈉將溶液的pH調(diào)至5-6，在冰浴條件下將鄰苯二胺鹽 酸鹽(3.33g，18.42mmol)加入到反應(yīng)體系中，攪拌過夜。TLC進行檢測反應(yīng)完全后，用氫氧化 鈉溶液調(diào)節(jié)至pH大于14,用乙酸乙酯和水進行萃取，合并有機相，減壓蒸餾，得到干燥的粗 品偶氮化合物。偶氮化合物用40ml的吡啶溶解，將10g無水硫酸銅加入到60ml濃氨水/水(v/ v = 1 /I)混合溶液中，混合物在油浴下進行回流，直至反應(yīng)完全。
[0011] (2)將冷卻的反應(yīng)液加入過量的水，用乙酸乙酯和水進行萃取，合并有機相，減壓 蒸餾，得到的粗品苯并三氮唑胺經(jīng)柱色譜進行分離，得到純的2_(4_甲氧基苯基)-5-氨基_ 2H-苯并三氮唑2.52g。
[0012] (3)將2-(4_甲氧基苯基）-5-氨基-2H-苯并三氮唑（87mg，0 ? 36mmol)，5-溴呋喃甲 酸（801^，0.419臟〇1)，1108以7011^，0.518111111〇1)，￡0(：.11(：1(10411^，0.518臟〇1)溶解于叱1二 甲基甲酰胺(DMF)后，在50-60°C油浴下進行攪拌，用TLC進行檢測，直至反應(yīng)完全。反應(yīng)液加 入過量的水，用乙酸乙酯和水進行萃取，合并有機相，減壓蒸餾，得到粗產(chǎn)物，用柱色譜進行 分離，得到純品5-溴呋喃-2-羧酸[2-(4_甲氧基苯基)-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺100mg。
[0013] 本發(fā)明通過用鏈脲佐菌素復(fù)制了糖尿病及其并發(fā)癥模型，研究了5-溴呋喃-2-羧 酸[2-(4_甲氧基苯基）-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺(RS001)對糖尿病模型小鼠血糖水平和 肝、脾、肺、腎等組織和血管損傷的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該化合物在防治糖尿病的活性中，表現(xiàn)出 保護和減輕機體組織器官損傷、延長壽命和降血糖作用;特別是經(jīng)皮膚創(chuàng)傷擦拭給藥，該化 合物可修復(fù)糖尿病小鼠損傷組織，部分小鼠糖尿病可康復(fù)。因此，本發(fā)明還提供一種制藥用 途，即：5-溴呋喃-2-羧酸[2-(4_甲氧基苯基)-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺在制備治療糖尿病 或/和其并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用。優(yōu)選地，所述的糖尿病并發(fā)癥選自糖尿病腎病、糖尿病足、 糖尿病視網(wǎng)膜病變。
[0014] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明藥物具有顯著的降血糖效果，同時能保護和減輕機體組 織器官的損傷，特別是經(jīng)皮膚創(chuàng)傷擦拭給藥后可修復(fù)糖尿病小鼠損傷組織，特別適合治療 糖尿病足。
【具體實施方式】
[0015] 本發(fā)明通過用鏈脲佐菌素復(fù)制了糖尿病及其并發(fā)癥模型，研究了5-溴呋喃-2-羧 酸[2_(4_甲氧基苯基)-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺(簡稱RS001)對糖尿病模型小鼠血糖水平 和肝、脾、肺、腎等組織和血管損傷的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該化合物在防治糖尿病的活性中，表現(xiàn) 出保護和減輕機體組織器官損傷、延長壽命和降血糖作用;特別是經(jīng)皮膚創(chuàng)傷擦拭給藥，該 化合物可修復(fù)糖尿病小鼠損傷組織，部分小鼠糖尿病可康復(fù)。試驗過程如下： 選擇8周齡昆明鼠，禁食不禁水12小時后，按120 mg/kg劑量腹腔注射1%鏈脲佐菌素溶 液，分別于注射后第3天和第7天禁食不禁水12小時，尾靜脈采血，使用強生血糖儀測空腹小 鼠血糖濃度。此兩次血糖濃度超過15 mmol/L的小鼠用于給藥試驗。此后每周測空腹血糖1 次。
[0016] 以0.7 g/kg的劑量腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉小鼠，用8%硫化鈉脫毛，待2-3分鐘用 溫水擦拭以便洗去該部位脫下的被毛。在背部皮膚松弛狀態(tài)下，在背部脊柱上方不宜被自 身舔舐和撓傷部位印上8_印跡，用消毒眼科剪按印跡剪去全層皮膚，形成機械損傷動物模 型。將皮膚創(chuàng)傷模型小鼠分為藥物高濃度組（18mg/mL)、中濃度組(6mg/mL)、低濃度組(2mg/ mL)和空白對照組，每組15只。給藥組創(chuàng)后即在創(chuàng)傷處用消毒棉簽沾取RS001的相應(yīng)濃度溶 液（以無菌生理鹽水配制而成)擦拭，每日擦拭1次，連續(xù)擦拭2周?？瞻讓φ战M在創(chuàng)傷處擦拭 無菌生理鹽水。此時記為給藥第1周。每4周以同樣方式構(gòu)建皮膚創(chuàng)傷和給藥，如此重復(fù)3次。 小鼠不同時間點的血糖水平統(tǒng)計結(jié)果見表1: 根據(jù)表1的血糖水平統(tǒng)計結(jié)果可知，藥物中濃度和高濃度藥物組小鼠在第5周的第2次 創(chuàng)后給藥血糖濃度開始下降，在第13周的第4次創(chuàng)后給藥血糖下降維持在低水平，與空白對 照組小鼠血糖濃度相比差異極顯著(P<〇.01)。
[0017] 表1各組小鼠不同時間點的血糖水平比較(mmol/L)
續(xù)表1各組小鼠不同時間點的血糖水平比較(mm〇l/L)_ 與空白對照組比較廣P<〇. 01。
[0018]為了觀察糖尿病在模型小鼠上所引起的并發(fā)癥及其對機體器官和組織所造成的 退行性病變及損傷，小鼠繼續(xù)飼養(yǎng)直至空白對照組小鼠出現(xiàn)死亡，每組小鼠處死5只，取心、 肝、脾、肺、腎等組織用10%福爾馬林固定，制備石蠟切片，HE染色，觀察組織病理改變。組織 切片顯示，空白對照組小鼠肝、脾、肺、腎等組織和血管明顯發(fā)生病變和損傷:肝臟肝細(xì)胞彌 散性細(xì)胞癌變，已癌變肝細(xì)胞肝索結(jié)構(gòu)消失，部分細(xì)胞成空泡狀。脾臟紅白髓無明顯分區(qū)， 脾小體結(jié)構(gòu)消失，脾小梁呈惡性增生，部分淋巴細(xì)胞明顯空泡變性，脾小體中央動脈玻璃樣 病變。肺臟不均勻擴張，肺泡間隔斷裂，肺部血管普遍出現(xiàn)血栓，紅細(xì)胞變性、破碎。腎臟細(xì) 胞嚴(yán)重水腫，腎小球與間質(zhì)充血，腎小囊腔變窄。而給藥組小鼠組織器官病變較未給藥組 小鼠減輕，特別是藥物中濃度和高濃度組小鼠組織病變程度最輕。
【主權(quán)項】
1. 一種降血糖的藥物組合物，其特征在于：由活性成分和輔料制備而成，所述的活性成 分包括5-溴呋喃-2-羧酸[2-(4-甲氧基苯基)-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述降血糖的藥物組合物，其特征在于：所述的活性成分由5-溴呋 喃-2-羧酸[2-( 4-甲氧基苯基)-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺組成。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述降血糖的藥物組合物，其特征在于:所述的藥物組合物為外 用給藥制劑，所述的外用給藥制劑選自凝膠劑、軟膏劑、擦劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述降血糖的藥物組合物，其特征在于:所述的藥物組合物為擦劑， 且藥物濃度為5-25mg/mL。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述降血糖的藥物組合物，其特征在于:所述的藥物組合物為擦劑， 且藥物濃度為6-18mg/mL。 6.5-溴呋喃-2-羧酸[2-(4-甲氧基苯基)-2H-苯并三唑-5-基]-酰胺在制備治療糖尿病 或/和其并發(fā)癥的藥物中的應(yīng)用。7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于:所述的糖尿病并發(fā)癥選自糖尿病腎病、糖 尿病足、糖尿病視網(wǎng)膜病變。
【文檔編號】A61P3/10GK105853413SQ201610275793
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年4月29日
【發(fā)明人】張雪燕
【申請人】張雪燕