專利名稱：靶向性納米藥物載體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種靶向性納米藥物載體及其制備方法，特別是涉及一種海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物的新型靶向性納米藥物載及其制備方法。
背景技術(shù)：
在我國，每年約有130萬人死于惡性腫瘤，估計(jì)發(fā)病率在180萬-200萬之間，總的發(fā)病率在不斷上升。在國內(nèi)多個(gè)大城市中，惡性腫瘤已超過心腦血管疾病，排在所有疾病死亡原因的第一位，而在35-59歲年齡段，惡性腫瘤一直是第一殺手。腫瘤是多機(jī)制的復(fù)雜疾病，目前的治療方法仍采用傳統(tǒng)的早期診斷、放療、化療等綜合手段治療。采用上述治療方法，其最大的缺陷在于對病變細(xì)胞和正常細(xì)胞的分辨率較低，因而造成對人體的正常細(xì)胞損傷太大。因此，開發(fā)具有腫瘤靶向性的給藥體系就顯得尤為重要。隨著腫瘤發(fā)生發(fā)展分子機(jī)制的闡明，腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的區(qū)別將會更加明確，一些腫瘤細(xì)胞特有的分子靶點(diǎn)將成為篩選特效抗癌藥物的有用工具，而具有腫瘤靶向性的給藥體系即靶向藥物載體將可能使抗癌藥物特異地攻擊腫瘤細(xì)胞。這些抗癌藥物對正常細(xì)胞損害很小，因而其療效更好，也能在臨床較長期地大劑量使用，因此，腫瘤的靶向治療是腫瘤治療最理想的用藥途徑。
在我國，近三十多年來應(yīng)用化學(xué)藥物治療惡性腫瘤已有了較迅速的發(fā)展，國際抗癌聯(lián)盟最近的報(bào)導(dǎo)認(rèn)為化療后可以明顯延長癌癥病人生存期。但是從另一方面可以看到，化學(xué)治療具有靶向性不強(qiáng)的缺點(diǎn)，故一方面殺傷腫瘤細(xì)胞，另一方面能明顯影響患者造血、免疫和某些器官的功能，易產(chǎn)生多藥耐藥而治療失敗。因此這就需要采取更有效的方法來緩解或消除這些副作用。用可降解的高分子聚合物制備的納米微球，是七十年代末發(fā)展起來的具有緩釋和靶向性的藥物載體，它可以根據(jù)粒子的特異性將包裹的藥物輸送到病變部位，提高病灶的藥物濃度，延長藥物的作用時(shí)間，進(jìn)而明顯提高藥物的治療效果，以減少其毒副作用，從而達(dá)到在體內(nèi)將藥物靶向到病變部位和緩慢釋放的目的。目前納米生物材料已成為研究的熱點(diǎn)，并在藥物納米載體和納米顆?；蜣D(zhuǎn)移技術(shù)方面已取得較好基礎(chǔ)及做出實(shí)質(zhì)性成果。這種技術(shù)是以納米顆粒作為藥物和基因轉(zhuǎn)移載體，將化療藥物、DNA和RNA等基因治療分子包裹在納米顆粒之中或吸附在其表面，同時(shí)也在顆粒表面耦聯(lián)特異性的靶向分子，如特異性配體、單克隆抗體等，通過靶向分子與細(xì)胞表面特異性受體結(jié)合，在細(xì)胞攝取作用下進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，實(shí)現(xiàn)安全有效的靶向性藥物和基因治療，即實(shí)現(xiàn)“強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合”的原則。
藥物載體或基因載體的重要特征之一是其生物降解性，通過成分控制和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，生物降解的速率可以控制，部分及它們的共聚物可降解成細(xì)胞正常代謝物質(zhì)，即—水和二氧化碳。通過降解，載體與藥物/基因片段定向進(jìn)入靶細(xì)胞之后，表層的載體被生物降解，芯部的藥物釋放出來發(fā)揮療效，避免了藥物在其他組織中釋放。目前這類載體聚合物的研究主要在藥物制劑和組織工程方面，而且在藥物制劑方面大都通過化學(xué)反應(yīng)與藥物連接，從而達(dá)到治療的目的，但采用上述的化學(xué)合成的方法其最大的缺陷在于該類藥物進(jìn)入人體后在不能特異地攻擊腫瘤細(xì)胞，對正常細(xì)胞損害很大。對于聚合物表面修飾如調(diào)節(jié)材料表面親水/疏水性及電荷、將細(xì)胞粘連因子和細(xì)胞增殖因子等生物活性因子固定于材料表面等，大都采用物理吸附的修飾方法，是由范德華力維持吸附分子與基材間的作用，所以結(jié)合力弱，被結(jié)合分子易脫落，影響材料的長期使用性能，不能滿足應(yīng)用需要。
海藻酸鈉為褐藻的細(xì)胞膜組成成分，系多糖類化合物，于1881年被發(fā)現(xiàn)，1965年用核磁共振技術(shù)確定其結(jié)構(gòu)式。海藻酸由聚β-1，4-甘露糖醛酸(β-1，4-D-mannosyluronicacid，M)與聚α-1-4-L-古洛糖醛酸(α-1-4-L-gulosyluronic acid，G)結(jié)合的線型高聚物，常用稀堿從褐藻中提取而得，海藻酸鈉的結(jié)構(gòu)式如下 海藻酸鈉是被美國FDA批準(zhǔn)可用作創(chuàng)傷敷料等外用制劑及藥物釋放載體的生物材料，具有生物降解性和生物相容性，被廣泛用于醫(yī)藥，化妝品，食品，紡織等領(lǐng)域。在藥劑學(xué)中利用海藻酸鈉的溶解度特性、凝膠和聚電解質(zhì)性質(zhì)作為緩釋制劑的載體，包埋劑或生物粘附劑，利用其成膜性，制備微囊，利用其與二價(jià)離子的結(jié)合性，曾作為軟膏基質(zhì)或混懸劑的增粘劑，其作為緩釋制劑和微囊材料等尤為重要。海藻酸鈉用于藥物載體的開發(fā)研究已有報(bào)道，但是將用于藥物載體同樣存在無靶向性的缺點(diǎn)。
眾所周知，糖類化合物是一切生物體維持生命活動所需能量的主要來源，是生物體合成其它化合物的基本原料，或充當(dāng)生物體的結(jié)構(gòu)原料。糖類化學(xué)的研究較早，但在核酸、蛋白質(zhì)的研究處于鼎盛時(shí)期，對糖類化合物的研究一度受到冷落。直到20世紀(jì)70年代后，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，人們逐步認(rèn)識到，糖類是涉及生命活動本質(zhì)的生物大分子之一，糖類結(jié)構(gòu)上具有多個(gè)羥基基團(tuán)，糖鏈結(jié)構(gòu)蘊(yùn)含十分豐富的生物語言信息，是高密度的信息載體。對多種多糖抗腫瘤作用機(jī)理的研究表明，多糖類藥物并非直接殺死癌細(xì)胞，而是通過刺激機(jī)體各種免疫活性細(xì)胞的成熟、分化和繁殖，使機(jī)體免疫系統(tǒng)恢復(fù)平衡，發(fā)揮機(jī)體自身的抵抗力去清除、吞噬癌細(xì)胞。近年來樹突狀細(xì)胞(dendriticcells，DCs)已成為當(dāng)今腫瘤生物治療領(lǐng)域備受關(guān)注的熱點(diǎn)之一，越來越多的證據(jù)表明由DC激活的細(xì)胞免疫，特別是細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，在機(jī)體抵御惡性腫瘤和傳染性疾病中發(fā)揮著十分重要的作用，甘露聚糖被成功的發(fā)現(xiàn)它對樹突狀細(xì)胞(dendritic cells，DCs)等能有效遞呈，從而能激起有效的抗腫瘤反應(yīng)，其結(jié)構(gòu)式如下 因此，用甘露聚糖作為海藻酸鈉微球的修飾基團(tuán)，構(gòu)建腫瘤特異性的新型靶向給藥體系，能將微球包裹的藥物或基因定向的送到病變部位，從而提高病灶部位的藥效，同時(shí)兼有緩釋的作用，是一種功能性和實(shí)用性強(qiáng)的新型給藥體系。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種靶向性納米藥物載體及其制備方法，該靶向性納米藥物載體為海藻酸鈉和甘露聚糖合成的靶向載藥微球；該方法是將甘露聚糖作為海藻酸鈉的修飾基團(tuán)，經(jīng)酯化反應(yīng)等工藝，制備具有靶向性的納米藥物載藥微球；所制備的載藥微球?qū)鼓[瘤藥物的包封率可達(dá)80％以上，提高了對治療目標(biāo)細(xì)胞的親和性。
本發(fā)明的靶向性納米藥物載體的制備方法，一方面，將對樹突狀細(xì)胞具有靶向性的甘露聚糖作為海藻酸鈉的修飾基團(tuán)，制備海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，另一方面，用制備好的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，采用溶劑乳化蒸發(fā)法，或超聲乳化法，或高壓乳均法，制備甘露聚糖靶向的海藻酸鈉微球，即靶向性納米藥物載體，海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物的制備主要包括以下工藝步驟(1)在室溫條件下，將海藻酸鈉和甘露聚糖置于容器中，按重量份甘露聚糖為海藻酸鈉的1-2倍，在濃度為0.01-0.1mol/l的酸性溶液HCl中進(jìn)行酯化反應(yīng)，攪拌下，反應(yīng)0.5-2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液的PH值調(diào)至中性；
(2)在上述反應(yīng)溶液中，加入過氧化物過硫酸胺1-5重量份作為引發(fā)劑，加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉1-5重量份作為乳化劑，升溫至40℃-60℃，攪拌下，反應(yīng)時(shí)間2-4小時(shí)，用去離子水洗滌，除去表面活性劑后，于凍干機(jī)中干燥，即制得海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物備用。
本發(fā)明制備的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物采用IR進(jìn)行分析檢測，其酯化反應(yīng)達(dá)到100％。
本發(fā)明靶向性納米藥物載體的制備方法中，所述的溶劑乳化蒸發(fā)法，主要經(jīng)以下工藝步驟制備的靶向性納米藥物載體，其納米微球的粒徑大小在200nm～300nm之間(1)將制備好的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，溶于有機(jī)溶劑中，使其得濃度為0.1-5mg/ml的混合溶液，向該混合溶液中加入占混合溶液體積百分比為0.01-0.1％的潛溶劑，得復(fù)合溶液；(2)將難溶或不溶于水的抗腫瘤藥物長春新堿溶解在上述復(fù)合溶液中，使其濃度為1-5mg/ml，然后緩慢的滴加入含有按體積百分比為1-10％的表面活性劑的水溶液中，得乳化液，在室溫下，攪拌反應(yīng)4-12小時(shí)，使乳化液中的有機(jī)溶劑蒸發(fā)；(3)用離心機(jī)高速離心收集微球顆粒，用蒸餾水洗滌微球顆粒至少三次，即得到靶向性納米藥物載體，置于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 上述方案中，所述的有機(jī)溶劑為二氯甲烷，或三氯甲烷，或乙酸乙酯；所述有機(jī)溶劑中用二氯甲烷制備的微球包封率更好。
上述方案中，所述的表面活性劑為十二烷基硫酸鈉，或聚乙烯醇。
上述方案中，所述的潛溶劑為丙酮，或甲醇，或二甲亞砜。
本發(fā)明靶向性納米藥物載體的制備方法中，所述的超聲乳化法，主要經(jīng)以下工藝步驟制備的靶向性納米藥物載體，其納米微球的粒徑大小在50nm～150nm之間(1)將制備好的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，溶于有機(jī)溶劑中，使其得濃度為0.1-5mg/ml的混合溶液；(2)用超聲乳化器，將上述混合溶液和溶于水的抗腫瘤藥物，分散于含有按體積百分比為1-10％的表面活性劑聚乙烯醇的水溶液中，使溶液的濃度為1-5mg/ml，然后進(jìn)行超聲乳化1-5分鐘，超聲功率為50-100W，得乳化液，攪拌，除去乳化液中的有機(jī)溶劑；(3)用離心機(jī)高速離心收集微球顆粒，用蒸餾水洗滌微球顆粒至少三次，即制得靶向性納米藥物載體，置于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 上述方案中，所述的有機(jī)溶劑為丙酮，或二氯甲烷。
上述方案中，所述的抗腫瘤藥物為紫杉醇，或DNA，或蛋白質(zhì)。
本發(fā)明用超聲乳化法制備的微球顆粒更小、且均勻，其納米微球的粒徑大小為50nm～150nm之間。
本發(fā)明靶向性納米藥物載體的制備方法中，所述的高壓乳均法，主要經(jīng)以下工藝步驟制備的靶向性納米藥物載體，其納米微球的粒徑大小在50nm～150nm之間(1)將海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物溶于有機(jī)溶劑二氯甲烷，或三氯甲烷，或乙酸乙酯中，使其得濃度為0.1-5mg/ml的混合溶液，將基因，或基因疫苗溶于含有按體積百分比為1-10％的表面活性劑聚乙烯醇的蒸餾水中，(2)用高壓均質(zhì)機(jī)，將上述復(fù)合溶液乳化分散于占體積百分比為1-10％的表面活性劑聚乙烯醇的水溶液中，進(jìn)行高壓乳化循環(huán)三次以上，每次2-3分鐘，再中速攪拌，得乳化液，將乳化液中的有機(jī)溶劑蒸發(fā)除去；(3)用離心機(jī)高速離心收集納米微球，用蒸餾水洗滌納米微球至少三次，即制得靶向性納米藥物載體，置于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 本發(fā)明采用高壓乳均法制備的甘露聚糖靶向的海藻酸鈉納米微球顆粒粒徑為50nm～150nm，微球分散更均勻，而且采用此方法，在制備過程中，可以不破壞包裹的DNA鏈段，且DNA的包封率高于60％。
本發(fā)明制備的甘露聚糖靶向的海藻酸鈉納米微球采用凍干保存，可以進(jìn)一步有效的除去殘留在納米微球中的有機(jī)溶劑。
本發(fā)明上述制備方法中任一所述的方法制備的靶向性納米藥物載體，其特征是，該靶向性納米藥物載體含有海藻酸鈉和甘露聚糖，其含量按重量份，甘露聚糖為海藻酸鈉的1-2倍；其納米藥物微球粒徑的大小在50nm～300nm之間。
本發(fā)明納米藥物載體為具有靶向性的甘露聚糖作為海藻酸鈉的修飾基團(tuán)的靶向性給藥納米微球載藥體系；該納米微球可以包裹化療藥物，或抗腫瘤藥物，或抑癌基因以及基因疫苗等，將藥物或基因定向的送到病變部位，是一種靶向性強(qiáng)的載藥納米微球。
本發(fā)明具有以下特點(diǎn)一、本發(fā)明所選用的材料制備的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物載體的安全性好，毒副作用小，具有穩(wěn)定和高的靶向性；海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物作為藥物釋放載體的生物材料，具有生物降解性和生物相容性；利用甘露聚糖的特異性，即它對樹突狀細(xì)胞(dendriticcells，DCs)等能有效遞呈，從而能激起有效的抗腫瘤反應(yīng)。
二、將甘露聚糖通過化學(xué)修飾連接到海藻酸鈉上，進(jìn)而制備具有靶向性的納米微球；該納米微球可以包裹化療藥物，或抗腫瘤藥物，或抑癌基因以及基因疫苗等，是一種靶向性強(qiáng)的載藥納米微球，該載藥納米微球能將藥物或基因定向的送到病變部位，從而提高病灶部位的藥效；同時(shí)兼有緩釋的作用，是一種功能性和實(shí)用性較強(qiáng)的新型靶向給藥體系。
三、本發(fā)明靶向性納米藥物載體制備方法簡單，操作方便，且反應(yīng)條件溫和；還可以通過調(diào)節(jié)反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)物濃度、或控制聚合反應(yīng)溫度，來調(diào)節(jié)聚合物載體材料的疏水性。


附圖為海藻酸鈉的紅外圖譜，附圖中海藻酸鈉和甘露聚糖酯化反應(yīng)后，用IR作分析檢測，根據(jù)常見基團(tuán)及化學(xué)鍵的特征吸收頻率可知，酯化反應(yīng)的化合物基團(tuán)的特征吸收頻率在1720～1750cm-1的范圍，從圖中可看出，在吸收頻率為1748.976cm-1處出現(xiàn)一強(qiáng)的峰，即為得到的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例中所用儀器凍干機(jī)，離心機(jī)，本發(fā)明海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物的制備實(shí)例實(shí)施例1在反應(yīng)瓶中，室溫下，加入20mg的海藻酸鈉和24mg的甘露聚糖，加入4ml的0.1mol/L的HCl，攪拌下，反應(yīng)0.5小時(shí)，用0.1ml/L的NaOH，將上述溶液的PH值調(diào)至7；再加入1mg的過硫酸胺和1mg的十二烷基硫酸鈉，此時(shí)將溫度升至60℃，攪拌下反應(yīng)2小時(shí)，用去離子水洗滌，凍干機(jī)干燥，即制得海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物備用。
實(shí)施例2在反應(yīng)瓶中，室溫下，加入10mg的海藻酸鈉和20mg的甘露聚糖，加入4ml的0.05mol/L的HCl，攪拌下，反應(yīng)2小時(shí)，用0.1ml/L的NaOH，將上述溶液的PH值調(diào)至7；再加入0.8mg的過硫酸胺和0.8mg的十二烷基硫酸鈉，此時(shí)將溫度升至40℃，攪拌下反應(yīng)4小時(shí)，用去離子水洗滌，于凍干機(jī)中干燥，即制得海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物載體備用。
采用上述方法制備的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物接枝聚合物的轉(zhuǎn)化率高，而且可以通過改變甘露聚糖的濃度來調(diào)節(jié)聚合物的酯化度50％～100％，進(jìn)而改變聚合物的親水性。
本發(fā)明制備的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物采用IR進(jìn)行分析檢測，其酯化反應(yīng)達(dá)到100％。
本發(fā)明用上述海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物制備靶向性納米藥物載體的實(shí)例實(shí)施例3采用O/W溶劑乳化蒸發(fā)法制備實(shí)例在反應(yīng)瓶中，取1mg的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，取難溶或不溶于水的抗腫瘤藥物長春新堿5mg，溶于5ml的CH2CI2中，緩慢的滴加入含有體積百分比為1％的表面活性劑聚乙烯醇(PVA)的10ml水溶液中，得乳化液，室溫下，攪拌，反應(yīng)8小時(shí)，使得乳化液中的有機(jī)溶劑蒸發(fā)，用離心機(jī)高速離心收集納米微球，然后用蒸餾水反復(fù)洗滌納米微球三次以上，即制得靶向性納米藥物載體，置于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 采用O/W溶劑乳化蒸發(fā)法，適用于對水不溶或難溶的抗腫瘤藥物，通過該法制備的納米微球其粒徑大小為200nm～500nm之間；用凍干機(jī)保存可以進(jìn)一步除去殘留在微球中的有機(jī)溶劑；該載藥納米微球能將抗腫瘤藥物長春新堿定向的送到病變部位，從而提高長春新堿在病灶部位的治療藥效。
實(shí)施例4采用超聲乳化法制備實(shí)例在反應(yīng)瓶中，將1mg的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，和難溶或不溶于水的紫杉醇3mg，溶于5ml的CH2Cl2有機(jī)溶劑中得混合溶液，用超聲乳化器將混合溶液分散于含有體積百分比為5％的表面活性劑聚乙烯醇(PVA)的10ml的水溶液中，得乳化液，超聲乳化5分鐘，超聲功率為50W，攪拌，除去乳化液中的有機(jī)溶劑，再用離心機(jī)高速離心收集微球顆粒，用蒸餾水反復(fù)洗滌微球顆粒三次，即得靶向性納米藥物載體，于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 采用超聲乳化法，制備的微球顆粒更小、且更均勻，通過該法制備的納米微球其粒徑大小為50nm～200nm之間；用凍干機(jī)保存可以進(jìn)一步除去殘留在微球中的有機(jī)溶劑；該載藥納米微球能將抗腫瘤藥物紫杉醇定向的送到病變部位，從而提高紫杉醇在病灶部位的治療藥效。
實(shí)施例5采用高壓乳均法制備實(shí)例在反應(yīng)瓶中，將5mg的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，溶于5ml的CH2Cl2溶劑中，將基因DNA溶于含有體積百分比為3％的表面活性劑PVA的10ml蒸餾水中，用高壓乳化機(jī)將上述溶液乳化分散于PVA的水溶液中，得乳化液，進(jìn)行高壓乳化循環(huán)三次，中速攪拌，反應(yīng)2小時(shí)，將乳化液中的有機(jī)溶劑蒸發(fā)除去，用高速離心收集納米微球，用蒸餾水洗滌納米微球三次，即得靶向性納米藥物載體，于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 采用高壓乳均法制備的納米微球其粒徑為50nm～150nm，且分散更均勻；而且采用該方法，在制備過程中，可以不破壞包裹的DNA鏈段，且DNA的包封率高于60％；該載藥納米微球能將抗腫瘤藥物基因定向的送到病變部位，從而提高基因在病灶部位的治療藥效。
本發(fā)明采用甘露聚糖作為海藻酸鈉微球的修飾基團(tuán)，構(gòu)建腫瘤特異性的新型靶向給藥體系，提高了對治療目標(biāo)細(xì)胞的親和性；所制備的載藥微球?qū)鼓[瘤藥物的包封率可達(dá)80％以上，能將微球包裹的藥物或基因定向的送到病變部位，從而提高病灶部位的藥效；同時(shí)兼有緩釋的作用，是一種功能性和實(shí)用性強(qiáng)的新型給藥體系。
權(quán)利要求
1.一種靶向性納米藥物載體的制備方法，其特征是，將對樹突狀細(xì)胞具有靶向性的甘露聚糖作為海藻酸鈉的修飾基團(tuán)，制備海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，將制備好的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，采用溶劑乳化蒸發(fā)法，或超聲乳化法，或高壓乳均法，制備靶向性納米藥物載體，海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物的制備包括以下工藝步驟(1)在室溫條件下，將海藻酸鈉和甘露聚糖置于容器中，按重量份甘露聚糖為海藻酸鈉的1-2倍，在濃度為0.01-0.1mol/l的酸性溶液HCl中進(jìn)行酯化反應(yīng)，攪拌下，反應(yīng)0.5-2小時(shí)后，將反應(yīng)溶液的PH值調(diào)至中性；(2)在上述反應(yīng)溶液中，加入過氧化物過硫酸胺1-5重量份作為引發(fā)劑，加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉1-5重量份作為乳化劑，升溫至40℃-60℃，攪拌下，反應(yīng)時(shí)間2-4小時(shí)，用去離子水洗滌，除去表面活性劑后，于凍干機(jī)中干燥，即制得海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物備用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，所述的溶劑乳化蒸發(fā)法，經(jīng)以下工藝步驟制備的靶向性納米藥物載體，其納米微球的粒徑大小在200nm～300nm之間(1)將制備好的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，溶于有機(jī)溶劑中，使其得濃度為0.1-5mg/ml的混合溶液，向該混合溶液中加入占混合溶液體積百分比為0.01-0.1％的潛溶劑，得復(fù)合溶液；(2)將難溶或不溶于水的抗腫瘤藥物長春新堿溶解在上述復(fù)合溶液中，使其濃度為1-5mg/ml，然后緩慢的滴加入含有按體積百分比為1-10％的表面活性劑的水溶液中，得乳化液，在室溫下，攪拌反應(yīng)4-12小時(shí)，使乳化液中的有機(jī)溶劑蒸發(fā)；(3)用離心機(jī)高速離心收集微球顆粒，用蒸餾水洗滌微球顆粒至少三次，即得到靶向性納米藥物載體，置于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是，所述的有機(jī)溶劑為二氯甲烷，或三氯甲烷，或乙酸乙酯；所述有機(jī)溶劑中用二氯甲烷制備的微球包封率更好。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是，所述的表面活性劑為十二烷基硫酸鈉，或聚乙烯醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是，所述的潛溶劑為丙酮，或甲醇，或二甲亞砜。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，所述的超聲乳化法，經(jīng)以下工藝步驟制備的靶向性納米藥物載體，其納米微球的粒徑大小在50nm～150nm之間(1)將制備好的海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物，溶于有機(jī)溶劑中，使其得濃度為0.1-5mg/ml的混合溶液；(2)用超聲乳化器，將上述混合溶液和溶于水的抗腫瘤藥物，分散于含有按體積百分比為1-10％的表面活性劑聚乙烯醇的水溶液中，使溶液的濃度為1-5mg/ml，然后進(jìn)行超聲乳化1-5分鐘，超聲功率為50-100W，得乳化液，攪拌，除去乳化液中的有機(jī)溶劑；(3)用離心機(jī)高速離心收集微球顆粒，用蒸餾水洗滌微球顆粒至少三次，即制得靶向性納米藥物載體，置于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是，所述的有機(jī)溶劑為丙酮，或二氯甲烷。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是，所述的抗腫瘤藥物為紫杉醇，或DNA，或蛋白質(zhì)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，所述的高壓乳均法，經(jīng)以下工藝步驟制備的靶向性納米藥物載體，其納米微球粒徑的大小在50nm～150nm之間(1)將海藻酸鈉-甘露聚糖聚合物溶于權(quán)利要求3所述有機(jī)溶劑中，使其得濃度為0.1-5mg/ml的混合溶液，將基因，或基因疫苗溶于含有按體積百分比為1-10％的表面活性劑聚乙烯醇的蒸餾水中，(2)用高壓均質(zhì)機(jī)，將上述復(fù)合溶液乳化分散于占體積百分比為1-10％的表面活性劑聚乙烯醇的水溶液中，進(jìn)行高壓乳化循環(huán)三次以上，每次2-3分鐘，再中速攪拌，得乳化液，將乳化液中的有機(jī)溶劑蒸發(fā)除去；(3)用離心機(jī)高速離心收集納米微球，用蒸餾水洗滌納米微球至少三次，即制得靶向性納米藥物載體，置于凍干機(jī)中凍干保存?zhèn)溆谩?br> 10.權(quán)利要求1-9中任一所述的方法制備的靶向性納米藥物載體，其特征是，該靶向性納米藥物載體含有海藻酸鈉和甘露聚糖，其含量按重量份，甘露聚糖為海藻酸鈉的1-2倍，該藥物載體為具有靶向性的甘露聚糖作為海藻酸鈉的修飾基團(tuán)的靶向性給藥納米微球載藥體系，其納米藥物微球粒徑的大小在50nm～300nm之間。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種靶向性納米藥物載體及其制備方法。該方法是制備海藻酸鈉－甘露聚糖聚合物，通過海藻酸鈉－甘露聚糖聚合物，采用溶劑乳化蒸發(fā)法，或超聲乳化法，或高壓乳均法，制備靶向性納米藥物載體，該方法工藝簡單、操作方便；所制備的靶向性納米藥物載體含有海藻酸鈉和甘露聚糖，其含量按重量份甘露聚糖是海藻酸鈉的1－2倍，甘露聚糖靶向的海藻酸鈉納米微球粒徑在50nm～300nm之間。本發(fā)明靶向性納米藥物載體具有穩(wěn)定和較高的靶向性納米微球，可以包裹抗腫瘤藥物，抑癌基因以及基因疫苗；具有實(shí)用性強(qiáng)及廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號A61P35/00GK1903366SQ20061002155
公開日2007年1月31日 申請日期2006年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月8日
發(fā)明者范琳玉, 張恒 申請人:四川大學(xué)