專利名稱：一種載藥納米粒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種載藥納米粒，本發(fā)明還涉及上述的載藥納米粒的制備方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代藥物治療學(xué)不但要求藥物能夠以一種預(yù)定的速率釋放出來，而且要求藥物盡可能地濃集到靶向部位，從而提高藥物的生物利用度和療效，減少藥物的毒副作用。而傳統(tǒng)的藥物及藥物制劑(包括緩釋制劑)在體內(nèi)的分布是無差異的，在對病灶部位起作用的同時，對人體的正常器官帶來了一定的毒副作用。因而，如何使藥物能夠到達(dá)靶向(病灶)部位，并以預(yù)定的速率把藥物釋放出來，成為當(dāng)今藥物學(xué)和藥物制劑學(xué)的熱點和難點。載藥納米微粒(Drug-loaded Nanoparticles)正是為解決這兩個問題而發(fā)展起來的新型載藥體系。
載藥納米微粒一般是指粒徑在10nm-1000nm之間的固態(tài)或膠態(tài)粒子。活性組分(藥物，生物活性物質(zhì)等)通過溶解、包裹作用分布于粒子內(nèi)部或通過吸附作用位于粒子的表面。納米微粒由于其本身特有的性質(zhì)，使其在藥物輸送方面具有許多特有的優(yōu)點(1)由于納米微粒的尺寸效應(yīng)，納米微粒在生物體內(nèi)的分布具有特異性?？刂萍{米微粒的大小，可以使納米微粒到達(dá)特定的組織，起到靶向的作用。比如粒徑在100nm-1000nm的微球很快被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的吞噬細(xì)胞從血液中清除，到達(dá)網(wǎng)狀內(nèi)皮組織豐富的肝、脾組織中，而粒徑小于100nm的納米微?？傻竭_(dá)骨髓等組織中。
(2)對載藥納米微粒表面進(jìn)行修飾，可以延長納米微粒在血液中的半衰期，或者使納米微粒到達(dá)某些特定的部位。如以F-68包裹的聚氰基丙烯酸丁酯納米微?？梢酝ㄟ^血腦屏障(BBB)，將藥物輸送到腦部。而PEG修飾的聚丙交酯-聚乙交酯納米粒在血液中的停留時間大大延長，從而可以減少給藥次數(shù)和給藥量，提高藥物的利用率。
(3)因為藥物是通過化學(xué)或物理的作用，分散于納米微粒的內(nèi)部或吸附于納米的表面，因此載藥納米微?？梢跃忈屗幬?，延長藥物的作用時間。
(4)可以提高藥物的穩(wěn)定性，避免藥物在達(dá)到病灶部位前被降解，這一點對基因藥物和具有生物活性的藥物特別重要。
基于以上的一些特點，載藥納米微粒體系是非常有前途的給藥體系，已經(jīng)引起了人們廣泛的研究興趣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的在于提供一種含冬凌草素的載藥納米粒；本發(fā)明的另一個目的在于提供一種載藥納米粒的制備方法。
本發(fā)明的上述目的是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的本發(fā)明公開了一種載藥納米粒，所述載藥納米粒的活性組分為冬凌草素，所用載藥納米材料為兩親聚己內(nèi)酯-聚乙二醇-聚己內(nèi)酯ABA型嵌段共聚物，所述納米粒粒徑范圍為50nm～300nm。
優(yōu)選的，所述載藥納米粒載藥量為1％～20％。
本發(fā)明還提供了一種沉淀法制備上述載藥納米粒的方法，該方法依次包括下面步驟原料按下列重量比，聚己內(nèi)酯-聚乙二醇-聚己內(nèi)酯共聚物10～200份，冬凌草素1～50份，丙酮10～100份，水10～500份。按上述比例將載藥納米材料和活性組分溶于有機(jī)溶劑中，形成有機(jī)相；控制溫度在20℃～40℃，通過攪拌將有機(jī)相滴加入水相形成納米膠束；攪拌1～5小時；除去有機(jī)相溶劑使納米粒得到固化。
優(yōu)選的，所述攪拌為磁力攪拌，速度為20～90轉(zhuǎn)/分；所述除去有機(jī)相為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為60～95℃，真空度控制在400mbar以下。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果冬凌草素為抗癌植物藥，因此本發(fā)明的含冬凌草素的載藥納米?？捎糜诎┌Y的治療。利用本發(fā)明的方法制備的載藥納米粒，實現(xiàn)了較高的載藥量，載藥量為1％～20％。


圖1是用不同PEG分子量合成的共聚物分子量分布圖；圖2是用不同PEG分子量合成的共聚物DSC圖(熔點)；圖3是用不同PEG分子量合成的共聚物的紅外光譜圖；圖4是芘I338/I335熒光強(qiáng)度比與LogC(聚合物濃度的對數(shù))圖；圖5是PCL-PEG6000-PCL載藥納米粒的粒徑分布圖；圖6是PCL-PEG2000-PCL載藥納米粒的粒徑分布圖；圖7是載藥納米粒的掃描電鏡圖。
具體實施例方式
下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
實施例1PCL-PEO-PCL的制備按照設(shè)計50000的共聚物重均分子量確定投料比，將純化的己內(nèi)酯單體、聚乙二醇及辛酸亞錫置于聚合反應(yīng)管中，通過三次連續(xù)的抽真空充氮操作，最后在真空狀態(tài)下融封反應(yīng)管。將此反應(yīng)管置于150℃～200℃高溫反應(yīng)器中，反應(yīng)12～36小時得到初產(chǎn)物。將初產(chǎn)物通過多次氯仿溶解甲醇沉淀的純化步驟，可除去聚乙二醇的均聚體及未反應(yīng)掉的己內(nèi)酯單體，最后40℃真空干燥。
對此共聚物的理化性質(zhì)進(jìn)行考察實際分子量為50000左右，且多分散性好；熔點在60℃～65℃之間，紅外表征圖譜顯示了聚己內(nèi)酯及聚氧乙烯的結(jié)晶態(tài)的特征峰，表明所合成的聚合物即我們所設(shè)想的嵌段共聚物。表征見附圖。
實施例2稱取100mgPCL-PEO-PCL(PEG6000)聚合物，溶于20ml丙酮，放置，待高分子聚合物溶脹；稱取約10mg冬凌草素溶解于聚合物的丙酮溶液，作為油相。量取50ml重蒸水，磁力攪拌速度為70～80轉(zhuǎn)/分，將油相滴加入水相中，可明顯看到有乳光現(xiàn)象。
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙酮，控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為70℃及真空度控制在200mbar以下；并濃縮溶液體積至約20ml，放冷，用0.65um的水相微孔濾膜抽濾，冷凍干燥。
凍干制品用高效液相色譜法測定其載藥量，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法作對照，測得載藥量為1.05％。
實施例3取50mgPCL-PEO-PCL(PEG6000)聚合物，溶于20ml丙酮，放置待高分子聚合物溶脹；稱取約5mg冬凌草素溶解于聚合物的丙酮溶液，作為油相。量取50ml超純水，控溫于25℃，磁力攪拌速度為70～80轉(zhuǎn)/分。將油相滴加入水相中，可明顯看到有乳光現(xiàn)象。磁力攪拌4h以平衡體系。
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙酮，控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為70℃及真空度控制在200mbar以下；并濃縮溶液體積至約20ml左右，此時控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為95℃。放冷，用0.65um的水相微孔濾膜抽濾，以除去聚集體及未包裹的藥物。冷凍干燥。
凍干制品用高效液相色譜法測定其載藥量，用兩點法校正，測得載藥量為3.28％。
實施例4100mgPCL-PEO-PCL(PEG6000)聚合物，溶于20ml丙酮，放置，待高分子聚合物溶脹；稱取約10mg冬凌草素溶解于聚合物的丙酮溶液，作為油相。量取50ml超純水，控溫于25℃，磁力攪拌速度為30～40轉(zhuǎn)/分。將油相滴加入水相中，可明顯看到有乳光現(xiàn)象。磁力攪拌4h以平衡體系。
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙酮，控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為70℃及真空度控制在400mbar以下；控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為95℃，濃縮溶液體積至約20ml。放冷，用0.65um的水相微孔濾膜抽濾，以除去聚集體及未包裹的藥物。冷凍干燥。
凍干制品用高效液相色譜法測定其載藥量，用兩點法校正，測得載藥量為9.58％。
對此體系的空白納米粒用熒光方法測定CMC(臨界膠束濃度)，得到其值為0.008g/L；對載藥體系用掃描電鏡觀察其形態(tài)，發(fā)現(xiàn)粒子呈圓整的球形；也分別對空白及載藥納米粒作了粒徑及粒徑分布范圍的測定，發(fā)現(xiàn)次體系的粒徑均在50～300nm之間，見圖5。
實施例5100mgPCL-PEO-PCL(PEG2000)聚合物，溶于20ml丙酮，放置，待高分子聚合物溶脹；稱取約10mg冬凌草素溶解于聚合物的丙酮溶液，作為油相。量取400ml超純水，控溫于25℃，磁力攪拌速度為30～40轉(zhuǎn)/分。將油相滴加入水相中，可明顯看到有乳光現(xiàn)象。磁力攪拌4h以平衡體系。
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙酮，控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為70℃及真空度控制在300mbar以下；并濃縮溶液體積至約20ml左右，此時控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為95℃。放冷，用0.65um的水相微孔濾膜抽濾，以除去聚集體及未包裹的藥物。冷凍干燥。
凍干制品用高效液相色譜法測定其載藥量，用兩點法校正，測得載藥量為9.95％。
對此體系的空白納米粒用熒光方法測定CMC(臨界膠束濃度)，得到其值為0.002g/L；對載藥體系用掃描電鏡觀察其形態(tài)，發(fā)現(xiàn)粒子呈圓整的球形；也分別對空白及載藥納米粒作了粒徑及粒徑分布范圍的測定，發(fā)現(xiàn)此體系的粒徑均在200nm左右，且多分散性較小。見圖6。
實施例6200mgPCL-PEO-PCL(PEG2000)聚合物，溶于50ml丙酮，放置，待高分子聚合物溶脹；稱取約30mg冬凌草素溶解于聚合物的丙酮溶液，作為油相。量取500ml超純水，控溫于25℃，磁力攪拌速度為30～40轉(zhuǎn)/分。將油相滴加入水相中，可明顯看到有乳光現(xiàn)象。磁力攪拌4h以平衡體系。
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去丙酮，控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為70℃及真空度控制在300mbar以下；并濃縮溶液體積至約50ml左右，此時控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為95℃。放冷，用0.65um的水相微孔濾膜抽濾后，冷凍干燥。
凍干制品用高效液相色譜法測定其載藥量，用兩點法校正，測得載藥量為19.5％。
權(quán)利要求
1.一種載藥納米粒，其特征在于所述載藥納米粒的活性組分為冬凌草素，所用載藥納米材料為兩親聚己內(nèi)酯-聚乙二醇-聚己內(nèi)酯ABA型嵌段共聚物，所述納米粒粒徑范圍為50nm～300nm。
2.如權(quán)利要求1所述的一種載藥納米粒，其特征在于，所述載藥納米粒載藥量為1％～20％。
3.一種沉淀法制備權(quán)利要求1或2所述的載藥納米粒的方法，其特征在于依次包括下面步驟原料按下列重量比，聚己內(nèi)酯-聚乙二醇-聚己內(nèi)酯共聚物10～200份，冬凌草素1～50份，丙酮10～100份，水10～500份。按上述比例將載藥納米材料和活性組分溶于有機(jī)溶劑中，形成有機(jī)相；控制溫度在20℃～40℃，通過攪拌將有機(jī)相加入水相形成納米膠束；攪拌1～5小時；除去有機(jī)相溶劑使納米粒得到固化。
4.如權(quán)利要求3所述的一種沉淀法制備載藥納米粒的方法，其特征在于所述攪拌為磁力攪拌，速度為20～90轉(zhuǎn)/分。
5.如權(quán)利要求3所述的一種沉淀法制備載藥納米粒的方法，其特征在于所述除去有機(jī)相為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，控制旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為60～95℃，真空度控制在400mbar以下。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種載藥納米粒。該載藥納米粒的活性組分為冬凌草素，所用載藥納米材料為兩親聚己內(nèi)酯－聚乙二醇－聚己內(nèi)酯ABA型嵌段共聚物，所述納米粒粒徑范圍為50nm～300nm。本發(fā)明還公開了所述納米粒的制備方法，制備載藥納米粒的過程為采用沉淀法制備。利用本發(fā)明的方法制備的載藥納米粒，實現(xiàn)了較高的載藥量，載藥量為1％～20％。
文檔編號A61K9/14GK1711989SQ20041002537
公開日2005年12月28日 申請日期2004年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月23日
發(fā)明者馮年平, 武培怡, 施水萍, 余婧 申請人:上海中醫(yī)藥大學(xué)