右旋糖酐納米藥物載體及其制備方法與抗腫瘤藥物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種右旋糖酐納米藥物載體及其制備方法與抗腫瘤藥物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，癌癥已經(jīng)成為威脅人類生命和健康的首要敵人。傳統(tǒng)的抗癌藥物，如阿霉素等，由于其缺乏特異性的腫瘤靶點(diǎn)，不能特異性分布于正常細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞，不僅療效差，而且阿霉素藥物劑量相關(guān)的副作用明顯。
[0003]在正常生理?xiàng)l件下，人體不同部位的pH不同，在病理狀況下，pH變化尤為明顯，利用這種變化可設(shè)計(jì)PH響應(yīng)的釋藥系統(tǒng)以提高藥物的靶向性，從而提高療效，減少副作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]基于此，有必要提供一種右旋糖酐納米藥物載體，用于建立pH響應(yīng)的釋藥系統(tǒng)，以提尚療效，減少副作用。
[0005]—種右旋糖酐納米藥物載體，包括羧基化的右旋糖酐納米粒子，所述羧基化的右旋糖酐納米粒子的粒徑為20?100納米。
[0006]—種右旋糖酐納米藥物載體的制備方法，包括如下步驟:
[0007]在保護(hù)氣體氛圍中，將右旋糖酐溶于溶劑中，制備得到第一溶液；
[0008]在保護(hù)氣體氛圍中，將硝酸鈰銨溶于硝酸中，制備得到第二溶液；
[0009]在保護(hù)氣體氛圍中，將所述第二溶液注入所述第一溶液中，并于20?30°C下反應(yīng)5?10分鐘，加入丙烯酸，再于20?30°C下反應(yīng)20?30分鐘，加入N，N-亞甲基雙丙烯酰胺，然后于20?30°C下繼續(xù)反應(yīng)4?6小時，分離純化，得到所述右旋糖酐納米藥物載體，所述右旋糖酐納米藥物載體包括羧基化的右旋糖酐納米粒子，所述羧基化的右旋糖酐納米藥物粒子的粒徑為20?100納米。
[0010]在其中一個實(shí)施例中，所述分離純化的方法為:將反應(yīng)液的pH調(diào)至中性，然后將反應(yīng)液裝入透析袋中，在去離子水中透析72小時，冷凍干燥，得到所述右旋糖酐納米藥物載體。
[0011]—種抗腫瘤藥物，包括阿霉素和肉桂醛中的一種及如權(quán)利要求1所述的右旋糖酐納米藥物載體，所述阿霉素和肉桂醛中的一種通過腙鍵連接于所述右旋糖酐納米藥物載體上。
[0012]—種抗腫瘤藥物，包括阿霉素和肉桂醛中的一種、EGFR抗體及上述右旋糖酐納米藥物載體，所述EGFR抗體與所述右旋糖酐納米藥物載體相連，所述阿霉素和肉桂醛中的一種通過腙鍵連接于所述右旋糖酐納米藥物載體上。
[0013]在其中一個實(shí)施例中，所述阿霉素和肉桂醛中的一種的質(zhì)量百分比為23%。
[0014]—種抗腫瘤藥物的制備方法，包括如下步驟:
[0015]混合EGFR抗體和上述右旋糖酐納米藥物載體，并加入碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺得到第一混合液，將所述第一混合液的PH值調(diào)節(jié)為4.5?5，于室溫下反應(yīng)2?4小時，分離純化得到中間產(chǎn)物；
[0016]將所述中間產(chǎn)物溶于溶劑中得到含有中間產(chǎn)物的溶液，將所述含有中間產(chǎn)物的溶液滴加入聯(lián)氨溶液中，并加入碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺得到第二混合液，將所述第二混合液于室溫反應(yīng)20?25小時，分離純化得到氨基修飾的中間產(chǎn)物；
[0017]將所述氨基修飾的中間產(chǎn)物溶于溶劑中，加入阿霉素和肉桂醛中的一種，在35?40°C下振蕩48?72小時，分離純化后得到所述抗腫瘤藥物。
[0018]在其中一個實(shí)施例中，所述EGFR抗體和所述右旋糖酐納米藥物載體的摩爾比為20 ?30:1。
[0019]在其中一個實(shí)施例中，所述并加入碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺得到第一混合液的步驟中，所述碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為5?10:1。
[0020]在其中一個實(shí)施例中，所述并加入碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺得到第二混合液的步驟中，所述碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為5?10:1。
[0021]粒徑為20?100納米的羧基化右旋糖酐納米粒子具有良好的生物包容性及降解性，可以用于負(fù)載藥物作用于人體，并且由于羧基化的右旋糖酐本身的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可以通過腙鍵負(fù)載藥物，腙鍵對PH敏感，在特定的pH環(huán)境下斷裂而靶向釋放藥物。因此，上述右旋糖酐納米藥物載體可以用于建立PH響應(yīng)的釋藥系統(tǒng)，以提高療效，減少副作用。
【附圖說明】
[0022]圖1為一實(shí)施方式的右旋糖酐納米藥物載體的制備方法的流程圖；
[0023]圖2為一實(shí)施方式的上述抗腫瘤藥物的制備方法的流程圖；
[0024]圖3為圖2所示的抗腫瘤藥物的制備方法的合成示意圖；
[0025]圖4為實(shí)施例1所制備的右旋糖酐納米藥物載體的TEM圖；
[0026]圖5為實(shí)施例5的EGFR-Dextran-DOX抗腫瘤藥物的DOX在不同pH條件下的釋放曲線；
[0027]圖6 (a)?圖6 (C)為實(shí)施例5的EGFR-Dextran-DOX抗腫瘤藥物的共焦掃描顯微鏡熒光顯色圖；
[0028]圖7為實(shí)施例4的Dextran-DOX抗腫瘤藥物及實(shí)施例5的EGFR-Dextran-DOX抗腫瘤藥物的抗腫瘤療效實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0029]為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】做詳細(xì)的說明。在下面的描述中闡述了很多具體細(xì)節(jié)以便于充分理解本發(fā)明。但是本發(fā)明能夠以很多不同于在此描述的其它方式來實(shí)施，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在不違背本發(fā)明內(nèi)涵的情況下做類似改進(jìn)，因此本發(fā)明不受下面公開的具體實(shí)施的限制。
[0030]—種右旋糖酐納米藥物載體，表示為Dextran。該Dextran包括羧基化右旋糖酐納米粒子，該羧基化的右旋糖酐納米粒子的粒徑為20?100納米。
[0031]右旋糖酐具有良好的生物包容性及降解性，無可觀察到的毒性，其外周血循環(huán)時間較長，使用該右旋糖酐納米藥物載體負(fù)載藥物進(jìn)入人體時，安全性較高。因而可以使用該右旋糖酐納米藥物載體負(fù)載藥物作用于人體。
[0032]并且，由于羧基化的右旋糖酐本身的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可以通過腙鍵負(fù)載藥物，腙鍵對pH敏感，在特定的pH環(huán)境下斷裂而靶向釋放藥物。因此，上述右旋糖酐納米藥物載體，可以用于建立pH響應(yīng)的釋藥系統(tǒng)，以提高療效，減少副作用。
[0033]羧基化的右旋糖酐易于被修飾，為右旋糖酐納米藥物載體負(fù)載多種藥物提供了可能。同時，粒徑為20?10nm的納米粒子可避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的吞噬細(xì)胞清除，通過適當(dāng)?shù)谋砻嫘揎?，還可有效延長右旋糖酐納米粒子的血液循環(huán)時間，從而提高療效。
[0034]請參閱圖1，上述右旋糖酐納米藥物載體的制備方法包括如下步驟:
[0035]步驟SllO:在保護(hù)氣體氛圍中，將右旋糖酐溶于溶劑中，制備得到第一溶液。
[0036]保護(hù)氣體可以為氮?dú)饣蚨栊詺怏w，優(yōu)選為氮?dú)狻?br>[0037]右旋糖酐為平均分子量為20000?40000的右旋糖酐。溶劑為去離子水。右旋糖酐在第一溶液中的濃度優(yōu)選為0.05mg/mL。
[0038]步驟S120:在保護(hù)氣體氛圍中，將硝酸鈰銨溶于硝酸中，制備得到第二溶液。
[0039]保護(hù)氣體可以為氮?dú)饣蚨栊詺怏w，優(yōu)選為氮?dú)狻?br>[0040]硝酸為0.1N的稀硝酸。硝酸鋪錢在第二溶液中的濃度優(yōu)選為0.25mg/mL。
[0041]步驟S130:在保護(hù)氣體氛圍中，將第二溶液注入第一溶液中，并于20?30°C下反應(yīng)5?10分鐘，加入丙烯酸，再于20?30 °C下反應(yīng)20分鐘，加入N，N-亞甲基雙丙烯酰胺，然后于20?30°C下繼續(xù)反應(yīng)4?6小時，分離純化，得到右旋糖酐納米藥物載體，右旋糖酐納米藥物載體包括羧基化的右旋糖酐納米粒子，羧基化的右旋糖酐納米藥物粒子的粒徑為20?100納米。
[0042]保護(hù)氣體可以為氮?dú)饣蚨栊詺怏w，優(yōu)選為氮?dú)狻?br>[0043]將第二溶液注入第一溶液中，以在右旋糖酐鏈上引發(fā)自由基。第一溶液和第二溶液的體積比優(yōu)選為30:1?40:1 ο
[0044]丙烯酸與第一溶液的體積比優(yōu)選為1:20?30，N, N-亞甲基雙丙烯酰胺與第一溶液的固液比為lg: 15?2OmLο
[0045]分離純化的方法具體為:將反應(yīng)液的pH調(diào)至中性，然后將反應(yīng)溶液裝入透析袋中，在去離子水中透析72小時，以除去未反應(yīng)的單體，透析完后冷凍干燥，得到右旋糖酐納米藥物載體，該右旋糖酐納米藥物載體包括羧基化的右旋糖酐納米粒子，羧基化的右旋糖酐納米藥物粒子的粒徑為20?100納米。
[0046]上述右旋糖酐納米藥物載體的制備方法將右旋糖酐納米化的同時進(jìn)行羧基化，制備得到可以用于建立PH響應(yīng)的釋藥系統(tǒng)的右旋糖酐納米藥物載體，工藝簡單，制備成本低。
[0047]—種抗腫瘤藥物，包括阿霉素和肉桂醛中的一種及上述右旋糖酐納米藥物載體，阿霉素和肉桂醛中的一種通過腙鍵連接于右旋糖酐納米藥物載體上。
[0048]腙鍵對pH敏感，只有在特定的pH條件下斷裂，腙鍵的斷裂釋放阿霉素或肉桂醛，使得阿霉素或肉桂醛在特定的環(huán)境下靶向釋放，有利于提高療效，減少副作用。
[0049]上述抗腫瘤藥物的制備方法包括如下步驟:
[0050]步驟S210:將上述右旋糖酐納米藥物載體、乙醇和濃硫酸混合得到混合液，將該混合液回流3?4小時，冷卻后加入飽和碳酸鈉中和，然后加入質(zhì)量濃度為80%的水合肼，繼續(xù)回流10?20小時，過濾，收集固體產(chǎn)物。
[0051]濃硫酸為質(zhì)量百分比為85%的硫酸。右旋糖酐納米藥物載體、乙醇和濃硫酸的固液比優(yōu)選為lg:5mL:10mL。
[0052]右旋糖酐納米藥物載體與質(zhì)量濃度為80%的水合肼的固液比優(yōu)選為lg:5mL。
[0053]步驟S220:將固體產(chǎn)物溶于水中，并加入阿霉素或肉桂醛，然后在37°C下振蕩72小時，于去離子水中透析72小時，冷凍干燥