專利名稱：：Dna－pk抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用作DNA-PK抑制劑的化合物、其用途及合成方法。DNA-依賴性蛋白激酶(DNA-PK)是在與DNA締合作用下激活的核絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。生物化學(xué)和遺傳學(xué)數(shù)據(jù)揭示了這種激酶是由稱作DNA-PKcs的大的催化亞單位和稱作Ku的調(diào)節(jié)組件所組成。已經(jīng)證實DNA-PK是DNA雙鏈斷裂(DSB)修復(fù)機(jī)和V(D)J重組裝置二者的關(guān)鍵組件。此外，最新的研究暗示了DNA-PK組件存在于多種其他過程中，包括染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的調(diào)制和端粒的維護(hù)(Smith，G.C.M.和Jackson，S.P.，GenesandDev.13916-934(1999))。DNADSB被認(rèn)為是細(xì)胞可能碰到的最致命的損害。為了對抗DNADSB帶來的嚴(yán)重威脅，真核生物的細(xì)胞進(jìn)化了數(shù)種機(jī)制來介導(dǎo)其修復(fù)。在高級真核生物中，這些機(jī)制中的主導(dǎo)機(jī)制是DNA非同源末端連接(NHEJ)，也稱作不正常重組。DNA-PK在該途徑中起關(guān)鍵作用。已經(jīng)在體外和體內(nèi)證實了增加的DNA-PK活性，并且該增加的活性與腫瘤細(xì)胞對IR和雙功能烷化劑的抗藥性相關(guān)(MullerC.等，Blood，92，2213-2219(1998)，SirzenF.等，Eur.J.Cancer，35，111-116(1999))。因此，已有人提出增加的DNA-PK活性是細(xì)胞和腫瘤的抗藥性機(jī)制。從而，采用小分子抑制劑來抑制DNA-PK可能在其中過度表達(dá)被看作是抗藥性機(jī)制的腫瘤中是有效的。先前還發(fā)現(xiàn)PI3-激酶抑制劑LY294002能夠在體外抑制DNA-PK的功能(Izzard，R.A.等，CancerRes.592581-2586(1999))。LY294002對DNA-PK的IC50(喪失50％酶活性時的濃度)為大約1μM，與PI3-激酶相同。此外還證實了LY294002能夠微弱敏化細(xì)胞對IR的作用(Rosenzweig，K.E.等，Clin.CancerRes.31149-1156(1999))。WO03/024949描述了大量的用作DNA-PK抑制劑的化合物，包括具有以下通式結(jié)構(gòu)的2-氨基-苯并吡喃-4-酮其中是其中的一個例子。該化合物的IC50值為10-12nM，SER值為1.3(參見以下對方法的描述)。DNA-PK抑制劑的其它實例包括1-(2-羥基-4-嗎啉-4-基-苯基)-乙酮(Kashishian，A.等，Mol.CancerTher，2，1257-1264(2003)))和SU11752(Ismail，I.H.等，Oncogene，23，873-882(2004))假設(shè)DNA-PK參與DNA的修復(fù)過程，并且由于已經(jīng)證明了小分子抑制劑可使培養(yǎng)物中的哺乳動物細(xì)胞對放射和化療敏感，因此應(yīng)用特異性的DNA-PK抑制藥物將可以作為提高癌癥化療和放療效能的藥物。也已證實DNA-PK抑制劑可以有效治療逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的疾病。例如，已經(jīng)證實DNA-PK活性的喪失嚴(yán)重抑制了逆轉(zhuǎn)錄病毒整合的過程(DanielR等，Science，284644-7(1999))。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了顯示出類似或改善的DNA-PK抑制作用的化合物，其同時具有用作活性藥物的其它有用性能，特別是改善了的溶解性。因此，本發(fā)明的第一個方面提供了式I化合物和其異構(gòu)體、鹽、溶劑化物、化學(xué)保護(hù)的形式和前藥其中R1和R2獨立地選自氫、取代或未取代的C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，或者可以與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)；Q為-NH-C(＝O)-或-O-；Y為取代或未取代的C1-5亞烴基；X選自SR3或NR4R5，其中，R3、或R4和R5獨立地選自氫、取代或未取代的C1-7烴基、C5-20芳基或C3-20雜環(huán)基，或者，R4和R5可以與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)；如果Q為-O-，X還進(jìn)一步選自-C(＝O)-NR6R7，其中R6和R7獨立地選自氫、取代或未取代的C1-7烴基、C5-20芳基或C3-20雜環(huán)基，或者，R6和R7可以與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)；和如果Q為-NH-C(＝O)-，-Y-X還可進(jìn)一步選自C1-7烴基。本發(fā)明的第二方面提供了包含第一方面的化合物和可藥用載體或稀釋劑的組合物。本發(fā)明的第三方面提供了用于治療方法的第一方面的化合物。本發(fā)明的第四方面提供了第一方面的化合物在制備用于治療通過抑制DNA-PK而緩解的疾病的藥物中的用途。優(yōu)選第四方面的藥物相對于PI3-激酶和/或ATM可以選擇性抑制DNA-PK的活性。由于對其它PI3-激酶家族成員的抑制作用可能會引起與那些酶的功能喪失有關(guān)的不良副作用，所以選擇性是一個很重要的問題。具體地，所述化合物可用于制備以下用途的藥物(a)在癌癥治療中用作輔助劑或用于增強(qiáng)電離放射或化療劑對腫瘤細(xì)胞的治療效果的藥物；或者(b)用于治療由逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的疾病。本發(fā)明的另一個方面提供優(yōu)選以藥物組合物的形式應(yīng)用于人或動物體的治療方法中的本文所述的活性化合物。本發(fā)明的另一方面提供一種體外或體內(nèi)抑制DNA-PK的方法，該方法包括使細(xì)胞與有效量的本文所述的活性化合物接觸。定義C1-7烴基在此使用的術(shù)語“C1-7烴基”是指通過除去具有1-7個碳原子的C1-7烴化合物的一個氫原子得到的一價部分，它可以是脂族或脂環(huán)族或其組合，并且可以是飽和、部分不飽和或完全不飽和的。飽和的直鏈C1-7烴基的實例包括但不限于，甲基、乙基、正丙基、正丁基和正戊基(戊基)。飽和的支鏈C1-7烴基的實例包括但不限于，異丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基和新戊基。飽和的脂環(huán)C1-7烴基(也稱作“C3-7環(huán)烷基”)的實例包括但不限于，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基，以及取代的基團(tuán)(例如，含有此類基團(tuán)的基團(tuán))，例如甲基環(huán)丙基、二甲基環(huán)丙基、甲基環(huán)丁基、二甲基環(huán)丁基、甲基環(huán)戊基、二甲基環(huán)戊基、甲基環(huán)己基、二甲基環(huán)己基、環(huán)丙基甲基和環(huán)己基甲基。含有一個或多個碳-碳雙鍵的不飽和C1-7烴基的實例(也稱作“C2-7鏈烯基”)包括但不限于，乙烯基(-CH＝CH2)、2-丙烯基(烯丙基、-CH-CH＝CH2)、異丙烯基(-C(CH3)＝CH2)、丁烯基、戊烯基和己烯基。含有一個或多個碳-碳叁鍵的不飽和C1-7烴基的實例(也稱作“C2-7炔基”)包括但不限于，乙炔基和2-丙炔基(炔丙基)。含有一個或多個碳-碳雙鍵的不飽和脂環(huán)(碳環(huán))C1-7烴基的實例(也稱作“C3-7環(huán)烯基”)包括但不限于，未取代的基團(tuán)例如環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基和環(huán)己烯基，以及取代的基團(tuán)(例如，含有此類基團(tuán)的基團(tuán))例如環(huán)丙烯基甲基和環(huán)己烯基甲基。C3-20雜環(huán)基在此使用的術(shù)語“C3-20雜環(huán)基”是指通過除去C3-20雜環(huán)化合物的環(huán)原子上的一個氫原子得到的一價部分，所述化合物具有一個環(huán)，或兩個或多個環(huán)(例如，螺環(huán)、稠合、橋連的環(huán))，并且具有3-20個環(huán)原子，它們中的1-10個是環(huán)雜原子，并且其中至少一個所述的環(huán)是雜環(huán)。優(yōu)選地，各環(huán)具有3-7個環(huán)原子，其中的1-4個是環(huán)雜原子?！癈3-20”代表環(huán)原子，不論是碳原子還是雜原子。具有一個氮環(huán)原子的C3-20雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自氮雜環(huán)丙烷、氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷(四氫吡咯)、吡咯啉(例如，3-吡咯啉、2，5-二氫吡咯)、2H-吡咯或3H-吡咯(異吡咯、異氮雜環(huán)戊二烯)、哌啶、二氫吡啶、四氫吡啶和氮雜的那些。具有一個氧環(huán)原子的C3-20雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自氧雜環(huán)丙烷、氧雜環(huán)丁烷、氧雜環(huán)戊烷(四氫呋喃)、氧雜環(huán)戊烯(二氫呋喃)、烷(四氫吡喃)、二氫吡喃、吡喃(C6)和氧雜的那些。取代的C3-20雜環(huán)基的實例包括環(huán)狀的糖，例如，呋喃糖類和吡喃糖類，包括，例如核糖、來蘇糖、木糖、半乳糖、蔗糖、果糖和阿糖。具有一個硫環(huán)原子的C3-20雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自硫雜環(huán)丙烷、硫雜環(huán)丁烷、硫雜環(huán)戊烷(四氫噻吩)、硫雜環(huán)己烷(四氫噻喃)和硫雜環(huán)庚烷的那些。具有兩個氧環(huán)原子的C3-20雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自二氧雜環(huán)戊烷、二氧雜環(huán)己烷和二氧雜環(huán)庚烷的那些。具有兩個氮環(huán)原子的C3-20雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自咪唑烷、吡唑烷(二氮雜環(huán)戊烷)、咪唑啉、吡唑啉(二氫吡唑)和哌嗪的那些。具有一個氮環(huán)原子和一個氧環(huán)原子的C3-20雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自四氫唑、二氫唑、四氫異唑、二氫異唑、嗎啉、四氫嗪、二氫嗪和嗪的那些。具有一個氧環(huán)原子和一個硫環(huán)原子的C3-20雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自氧硫雜環(huán)戊烷和氧硫雜環(huán)己烷(噻烷)的那些。具有一個氮環(huán)原子和一個硫環(huán)原子C3-20雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自噻唑啉、噻唑烷和硫代嗎啉的那些。C3-20雜環(huán)基的其他實例包括但不限于，二嗪和噻嗪。另外帶有一個或多個氧代(＝O)基團(tuán)的雜環(huán)基的實例包括但不限于，衍生自下列的那些C5雜環(huán)，例如呋喃酮、吡喃酮、吡咯烷酮、吡唑啉酮、咪唑烷酮、噻唑啉酮和異噻唑啉酮；C6雜環(huán)，例如哌啶酮、哌啶二酮、哌嗪酮、哌嗪二酮、噠嗪酮和嘧啶酮(例如，胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)和巴比土酸；稠合雜環(huán)，例如羥吲哚、羥基嘌呤(例如，鳥嘌呤)、苯并唑啉酮、苯并吡喃酮(例如，香豆素)；環(huán)狀酸酐(-C(＝O)-O-C(＝O)-在環(huán)內(nèi))，包括但不限于馬來酸酐、琥珀酸酐和戊二酸酐；環(huán)狀碳酸酯(-O-C(＝O)-O-在環(huán)內(nèi))，例如碳酸亞乙酯和碳酸1，2-亞丙酯；酰亞胺(-C(＝O)-NR-C(＝O)-在環(huán)內(nèi))，包括但不限于，琥珀酰亞胺、馬來酰亞胺、鄰苯二甲酰亞胺和戊二酰亞胺；內(nèi)酯(環(huán)酯，-O-C(＝O)-在環(huán)內(nèi))，包括但不限于，β-丙內(nèi)酯、γ-丁內(nèi)酯、δ-戊內(nèi)酯(2-哌啶酮)和ε-己內(nèi)酯；內(nèi)酰胺(環(huán)酰胺，-NR-C(＝O)-在環(huán)內(nèi))，包括但不限于，β-丙內(nèi)酰胺、γ-丁內(nèi)酰胺(2-吡咯烷酮)、δ-戊內(nèi)酰胺和ε-己內(nèi)酰胺；環(huán)狀氨基甲酸酯(-O-C(＝O)-NR-在環(huán)內(nèi))，例如2-唑烷酮；環(huán)脲(-NR-C(＝O)-NR-在環(huán)內(nèi))，例如2-咪唑烷酮和嘧啶-2，4-二酮(例如，胸腺嘧啶、尿嘧啶)。C5-20芳基在此使用的術(shù)語“C5-20芳基”是指由C5-20芳族化合物的芳環(huán)原子脫去一個氫原子得到的一價部分，所述化合物具有一個環(huán)，或兩個或多個環(huán)(例如，稠合的)，并且具有5-20個環(huán)原子，并且其中至少有一個所述的環(huán)是芳環(huán)。優(yōu)選地，各環(huán)具有5-7個環(huán)原子。所述的環(huán)原子可以全部是碳原子，稱作“碳芳基”，在這種情況中該基團(tuán)一般稱作“C5-20碳芳基”基團(tuán)。不含有環(huán)雜原子的C5-20芳基(即C5-20碳芳基)的實例包括但不限于，衍生自苯(即苯基)(C6)、萘(C10)、蒽(C14)、菲(C14)、并四苯(C18)和芘(C16)的那些。含有稠合環(huán)、其中一個不是芳環(huán)的芳基的實例包括但不限于，衍生自茚和芴的那些。或者，所述的環(huán)原子可以包括一個或多個雜原子，包括但不限于氧、氮和硫，稱作“雜芳基”。在這種情況中，該基團(tuán)一般被稱作“C5-20雜芳基”，其中“C5-20”指環(huán)原子，無論是碳原子還是雜原子。優(yōu)選地，各環(huán)具有5-7個環(huán)原子，其中0-4個是環(huán)雜原子。C5-20雜芳基的實例包括但不限于，衍生自呋喃(氧雜環(huán)戊二烯)、噻吩(硫雜環(huán)戊二烯)、吡咯(氮雜環(huán)戊二烯)、咪唑(1，3-氮雜環(huán)戊二烯)、吡唑(1，2-氮雜環(huán)戊二烯)、三唑、唑、異唑、噻唑、異噻唑、二唑和三唑的C5雜芳基；和衍生自嗪、吡啶(吖嗪)、噠嗪(1，2-二嗪)、嘧啶(1，3-二嗪；例如胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)、吡嗪(1，4-二嗪)、三嗪、四唑和二唑(呋咱)的C6雜芳基。包含稠合環(huán)的C5-20雜環(huán)基(其中一些是C5-20雜芳基)的實例包括但不限于，衍生自苯并呋喃、異苯并呋喃、吲哚、異吲哚、嘌呤(例如，腺嘌呤、鳥嘌呤)、苯并噻吩、苯并咪唑的C9雜環(huán)基；衍生自喹啉、異喹啉、苯并二嗪、吡啶并吡啶、喹喔啉的C10雜環(huán)基；衍生自咔唑、硫芴、二苯并呋喃的C13雜環(huán)基；衍生自吖啶、夾氧蒽、吩氧硫雜環(huán)己二烯(phenoxathiin)、吩嗪、吩嗪、吩噻嗪的C14雜環(huán)基。上述C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基和C5-20芳基，無論是單獨的還是作為另一取代基的組成部分，其本身可以是未取代的或被一個或多個選自其自身和下列其他取代基的基團(tuán)所取代。鹵素-F、-Cl、-Br和-I。羥基-OH。醚-OR，其中R是醚取代基，例如，C1-7烴基(也稱作C1-7烴氧基，如下所述)、C3-20雜環(huán)基(也稱作C3-20雜環(huán)氧基)，或C5-20芳基(也稱作C5-20芳氧基)，優(yōu)選C1-7烴基。C1-7烴氧基-OR，其中R是C1-7烴基。C1-7烴氧基的實例包括但不限于，-OCH3(甲氧基)、-OCH2CH3(乙氧基)和-OC(CH3)3(叔丁氧基)。氧代(酮基、-酮)＝O。帶有氧代基團(tuán)(＝O)作為取代基的環(huán)狀化合物和/或基團(tuán)的實例包括但不限于，碳環(huán)例如環(huán)戊酮和環(huán)己酮；雜環(huán)，例如吡喃酮、吡咯烷酮、吡唑酮、吡唑啉酮、哌啶酮、哌啶二酮、哌嗪二酮和咪唑烷酮；環(huán)狀酸酐，包括但不限于馬來酸酐和琥珀酸酐；環(huán)碳酸酯，例如碳酸亞丙酯；酰亞胺，包括但不限于，琥珀酰亞胺和馬來酰亞胺；內(nèi)酯(環(huán)酯，-O-C(＝O)-在環(huán)內(nèi))，包括但不限于，β-丙內(nèi)酯、γ-丁內(nèi)酯、δ-戊內(nèi)酯和ε-己內(nèi)酯；和內(nèi)酰胺(環(huán)狀酰胺，-NH-C(＝O)-在環(huán)內(nèi))，包括但不限于，β-丙內(nèi)酰胺、γ-丁內(nèi)酰胺(2-吡咯烷酮)、δ-戊內(nèi)酰胺和ε-己內(nèi)酰胺。亞氨基(亞胺)＝NR，其中R是亞氨基取代基，例如，氫、C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選氫或C1-7烴基。亞氨基的實例包括但不限于，＝NH、＝NMe、＝NEt和＝NPh。甲?；?甲醛，甲醛基)-C(＝O)H。?；?酮基)-C(＝O)R，其中R是?；〈?，C1-7烴基(也稱為C1-7烴基酰基或C1-7烴酰基)、C3-20雜環(huán)基(也稱為C3-20雜環(huán)基?；?或C5-20芳基(也稱為C5-20芳?；?，優(yōu)選C1-7烴基。?；膶嵗ǖ幌抻?，-C(＝O)CH3(乙?；?、-C(＝O)CH2CH3(丙?；?、-C(＝O)C(CH3)3(丁?；?和-C(＝O)Ph(苯甲?；?、苯酮)。羧基(羧酸)-COOH。酯(羧酸酯、氧羰基)-C(＝O)OR，其中R是酯基取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基。酯基的實例包括但不限于，-C(＝O)OCH3、-C(＝O)OCH2CH3、-C(＝O)OC(CH3)3和-C(＝O)OPh。酰氧基(反酯)-OC(＝O)R，其中R是酰氧基取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基。酰氧基的實例包括但不限于，-OC(＝O)CH3(乙酰氧基)、-OC(＝O)CH2CH3、-OC(＝O)C(CH3)3、-OC(＝O)Ph和-OC(＝O)CH2Ph。氨酰基(氨基甲?；?、氨基羰基、甲酰胺基)-C(＝O)NR1R2，其中R1和R2彼此獨立地是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基。氨?；膶嵗ǖ幌抻?C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)N(CH3)2，-C(＝O)NHCH2CH3和-C(＝O)N(CH2CH3)2，以及其中R1和R2與其所連接的氮原子一起形成雜環(huán)結(jié)構(gòu)的氨?；?，例如，1-哌啶基羰基、嗎啉代羰基、硫代嗎啉代羰基和1-哌嗪基羰基。酰氨基(?；被?-NR1C(＝O)R2，其中R1是酰胺取代基，例如，氫、C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選氫或C1-7烴基，R2是?；〈?，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選氫或C1-7烴基。酰氨基的實例包括但不限于，-NHC(＝O)CH3，-NHC(＝O)CH2CH3和-NHC(＝O)Ph。R1和R2可以一起形成環(huán)結(jié)構(gòu)，如同在例如，琥珀酰亞氨基、馬來酰亞氨基和鄰鄰苯二甲酰亞氨基中那樣琥珀酰亞氨基馬來酰亞氨基鄰苯二甲酰亞氨基酰基脲基-N(R1)C(O)NR2C(O)R3，其中R1和R2彼此獨立地是脲基取代基，例如，氫、C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選氫或C1-7烴基。R3是上述關(guān)于?；x的酰基。?；寤膶嵗ǖ幌抻?，-NHCONHC(O)H、-NHCONMeC(O)H、-NHCONEtC(O)H、-NHCONMeC(O)Me、-NHCONEtC(O)Et、-NMeCONHC(O)Et、-NMeCONHC(O)Me、-NMeCONHC(O)Et、-NMeCONMeC(O)Me、-NMeCONEtC(O)Et和-NMeCONHC(O)Ph。氨基甲酸酯-NR1-C(O)-OR2，其中R1是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基并且R2是上述關(guān)于酯基所定義的酯基。氨基甲酸酯基的實例包括但不限于，-NH-C(O)-O-Me、-NMe-C(O)-O-Me、-NH-C(O)-O-Et、-NMe-C(O)-O-叔丁基和-NH-C(O)-O-Ph。硫代氨?；?硫代氨基甲酰基)-C(＝S)NR1R2，其中R1和R2彼此獨立地是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基。硫代氨?；膶嵗ǖ幌抻?，-C(＝S)NH2、-C(＝S)NHCH3、-C(＝S)N(CH3)2和-C(＝S)NHCH2CH3。四唑基具有4個氮原子和1個碳原子的5員芳環(huán)，氨基-NR1R2，其中R1和R2彼此獨立地是氨基取代基，例如，氫、C1-7烴基(也稱作為C1-7烴基氨基或二-C1-7烴基氨基)、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選H或C1-7烴基，或者，在“環(huán)狀”氨基的情況中，R1和R2與其所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的雜環(huán)。氨基的實例包括但不限于，-NH2、-NHCH3、-NHC(CH3)2、-N(CH3)2、-N(CH2CH3)2和-NHPh。環(huán)狀氨基的實例包括但不限于，1-氮雜環(huán)丙基、1-氮雜環(huán)丁基、1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、嗎啉代和硫代嗎啉代。亞氨基＝NR，其中R是亞氨基取代基，例如，氫、C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選H或C1-7烴基。脒-C(＝NR)NR2，其中各R是脒取代基，例如，氫、C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選H或C1-7烴基。脒基的實例是-C(＝NH)NH2。聯(lián)氨羰基(肼基羰基)-C(O)-NN-R1，其中R1是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基。連氮基的實例包括但不限于，-C(O)-NN-H、-C(O)-NN-Me、-C(O)-NN-Et、-C(O)-NN-Ph和-C(O)-NN-CH2-Ph。硝基-NO2。亞硝基-NO。疊氮基-N3。氰基(腈，甲腈)-CN。異氰基-NC。氰氧基-OCN。異氰氧基-NCO。氰硫基(硫氰酸根合)-SCN。異氰硫基(異硫氰酸根合)-NCS。巰基(硫氫基)-SH。硫醚(硫化物)-SR，其中R是硫醚取代基，例如，C1-7烴基(也稱為C1-7烷硫基)、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基。C1-7烷硫基的實例包括但不限于，-SCH3和-SCH2CH3。二硫化物-SS-R，其中R是二硫化物取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基(在此也稱作C1-7烴基二硫化物)。C1-7烴基二硫化物的實例包括但不限于，-SSCH3和-SSCH2CH3。砜(磺?；?-S(＝O)2R，其中R是砜取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基。砜基的實例包括但不限于，-S(＝O)2CH3(甲烷磺?；?、甲磺酰基)、-S(＝O)2CF3(三氟甲磺酰基)、-S(＝O)2CH2CH3、-S(＝O)2C4F9(九氟丁磺酰基)、-S(＝O)2CH2CF3(三氟乙磺酰基)、-S(＝O)2Ph(苯基磺?；?、4-甲基苯基磺?；?對甲苯磺?；?、4-溴苯基磺酰基(對溴苯磺?；?和4-硝基苯基(對硝基苯磺?；?。亞磺酰(亞磺?；?、亞砜)-S(＝O)R，其中R是亞磺酰取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基。亞磺酰基的實例包括但不限于，-S(＝O)CH3和-S(＝O)CH2CH3?；酋Ｑ趸?OS(＝O)2R，其中R是磺酰氧基取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基?；酋Ｑ趸膶嵗ǖ幌抻冢?OS(＝O)2CH3和-OS(＝O)2CH2CH3。亞磺酰氧基-OS(＝O)R，其中R是亞磺酰氧基取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基。亞磺酰氧基的實例包括但不限于，-OS(＝O)CH3和-OS(＝O)CH2CH3。磺氨基-NR1S(＝O)2OH，其中R1是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基?；前被膶嵗ǖ幌抻?，-NHS(＝O)2OH和-N(CH3)S(＝O)2OH?；酋０被?NR1S(＝O)2R，其中R1是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基并且R是磺酰氨基取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基?；酋０被膶嵗ǖ幌抻?，-NHS(＝O)2CH3和-N(CH3)S(＝O)2C6H5。亞磺酰氨基-NR1S(＝O)R，其中R1是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基并且R是亞磺酰氨基取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基。亞磺酰氨基的實例包括但不限于，-NHS(＝O)CH3和-N(CH3)S(＝O)C6H5。氨磺?；?S(＝O)NR1R2，其中R1和R2彼此獨立地是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基。氨磺酰基的實例包括但不限于，-S(＝O)NH2、-S(＝O)NH(CH3)、-S(＝O)N(CH3)2、-S(＝O)NH(CH2CH3)、-S(＝O)N(CH2CH3)2和-S(＝O)NHPh?；酋０被?NR1S(＝O)2R，其中R1是關(guān)于氨基所定義的氨基取代基并且R是磺酰氨基取代基，例如，C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選C1-7烴基?；酋０被膶嵗ǖ幌抻?，-NHS(＝O)2CH3和-N(CH3)S(＝O)2C6H5。一類特定的磺酰氨基是衍生自磺內(nèi)酰胺的那些-在這些基團(tuán)中，R1和R之一是C5-20芳基，優(yōu)選苯基，而R1和R中的另一個是與C5-20芳基相連的雙齒基團(tuán)，例如衍生自C1-7烴基的雙齒基團(tuán)。此類基團(tuán)的實例包括但不限于2，3-二氫-苯并[d]異噻唑-1，1-二氧化物-2-基1，3-二氫-苯并[c]異噻唑-2，2-二氧化物-1-基3，4-二氫-2H-苯并[e][1，2]噻嗪-1，1-二氧化物-2-基氨基亞磷酸酯-OP(OR1)-NR22，其中R1和R2是氨基亞磷酸酯取代基，例如，-H、(取代或未取代的)C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選-H、C1-7烴基或C5-20芳基。氨基亞磷酸酯基的實例包括但不限于-OP(OCH2CH3)-N(CH3)2、-OP(OCH2CH3)-N(i-Pr)2和-OP(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2。氨基磷酸酯-OP(＝O)(OR1)-NR22，其中R1和R2是氨基磷酸酯取代基，例如，-H、(取代或未取代的)C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，優(yōu)選-H、C1-7烴基或C5-20芳基。氨基磷酸酯的實例包括但不限于，-OP(＝O)(OCH2CH3)-N(CH3)2、-OP(＝O)(OCH2CH3)-N(i-Pr)2和-OP(＝O)(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2。在許多情況中，取代基本身可以被取代。例如，C1-7烴氧基可以被例如C1-7烴基取代(也稱作為C1-7烴基-C1-7烴氧基)，例如，環(huán)己基甲氧基；被C3-20雜環(huán)基取代(也稱作為C3-20雜環(huán)基-C1-7烴氧基)，例如鄰苯二甲酰亞氨基乙氧基；或被C5-20芳基取代(也稱作為C5-20芳基-C1-7烴氧基)，例如，芐氧基。在此使用的術(shù)語“C1-5亞烴基”是指通過除去具有1-5個碳原子(除非另有說明)的脂族直鏈烴化合物的二個氫原子得到的二價部分，所述除去的兩個氫原子可均來自相同的碳原子，或者分別來自兩個不同的碳原子，它可以是飽和、部分不飽和或完全不飽和的。因此，術(shù)語“亞烴基”包括以下討論的亞類亞鏈烯基、亞鏈炔基等。飽和C1-5亞烴基的實例包括但不限于，-(CH2)n-，其中，n為1-5的整數(shù)，例如，-CH2-(亞甲基)、-CH2CH2-(亞乙基)、-CH2CH2CH2-(亞丙基)和-CH2CH2CH2CH2-(亞丁基)。部分不飽和的C1-5亞烴基的實例包括但不限于，-CH＝CH-(亞乙烯基)、-CH＝CH-CH2-、-CH2-CH＝CH2-、-CH＝CH-CH2-CH2-、-CH＝CH-CH2-CH2-CH2-、-CH＝CH-CH＝CH-和-CH＝CH-CH＝CH-CH2-。以上列舉的取代基可為在亞烴基上的取代基。包括的其他形式以上描述還包括這些取代基的已知的離子、鹽、溶劑化物和保護(hù)的形式。例如，所提到的羧酸(-COOH)還包括其陰離子(羧酸根)形式(-COO-)、鹽或溶劑化物，以及常規(guī)的保護(hù)形式。同樣，所提到的氨基包括氨基的質(zhì)子化形式(-N+HR1R2)、鹽或溶劑化物，例如鹽酸鹽，以及氨基的常規(guī)保護(hù)形式。同樣地，所提到的羥基還包括其陰離子形式(-O-)、鹽或溶劑化物，以及羥基的常規(guī)保護(hù)形式。異構(gòu)體、鹽、溶劑化物、保護(hù)形式和前藥某些化合物可存在一種或多種特定的幾何異構(gòu)、旋光、對映異構(gòu)、非對映異構(gòu)、差向異構(gòu)、立體異構(gòu)、互變異構(gòu)、構(gòu)像異構(gòu)或端基異構(gòu)形式，包括但不限于，順式-和反式-形式；E-和Z-形式；c-、t-和r-形式；內(nèi)型-和外型-形式；R-、S-和內(nèi)消旋-形式；D-和L-形式；d-和l-形式；(+)和(-)形式；酮-、烯醇-和烯醇陰離子-形式；順-和反-式；順錯-和反錯-形式；α-和β-形式；軸向和平伏形式；船式-、椅式-、扭轉(zhuǎn)-、信封-和半椅式-形式；和其組合形式，此后總稱為“異構(gòu)體”(或“異構(gòu)形式”)。注意，除了下面討論的互變異構(gòu)體之外，不包括在本文所述的術(shù)語“異構(gòu)體”之內(nèi)的是結(jié)構(gòu)(或組成)異構(gòu)體(即原子之間的連接不同而不僅僅是原子空間位置不同的異構(gòu)體)。例如，當(dāng)提到甲氧基(-OCH3)時，并不包括其結(jié)構(gòu)異構(gòu)體羥基甲基(-CH2OH)。同樣地，所提到的鄰-氯苯基也不包括其結(jié)構(gòu)異構(gòu)體間-氯苯基。然而，當(dāng)提到一類結(jié)構(gòu)時，則可以包括屬于該類的各種結(jié)構(gòu)異構(gòu)形式(例如，C1-7烴基包括正丙基和異丙基；丁基包括正-、異-、仲-和叔丁基；甲氧基苯基包括鄰-、間-和對-甲氧基苯基)。上述排除不涉及互變異構(gòu)體，例如，酮-、烯醇-和烯醇陰離子形式，例如，下列互變異構(gòu)體對酮/烯醇(如下所示)、亞胺/烯胺、酰胺/亞氨基醇、脒/醚、亞硝基/肟、硫酮/烯硫醇、N-亞硝基/羥基偶氮和硝基/酸式-硝基。酮烯醇烯醇陰離子注意，術(shù)語“異構(gòu)體”特別包括具有一個或多個同位素取代的化合物。例如，H可以是任何同位素形式，包括1H、2H(D)和3H(T)；C可以是任何同位素形式，包括12C，13C和14C；O可以是任何同位素形式，包括16O和18O等。除非另有說明，否則所提到的具體化合物包括其所有異構(gòu)形式，包括其(完全或部分)外消旋及其它的混合物。這些異構(gòu)體的制備(例如不對稱合成)和分離(例如，分級結(jié)晶和色譜法)方法或者是現(xiàn)有技術(shù)中已知的，或者很容易利用本文教導(dǎo)的方法或已知的方法通過已知方式獲得。除非另有說明，否則所提到的具體化合物還包括其離子、鹽、溶劑化物和保護(hù)的形式，例如，如下所述。通常優(yōu)選或需要制備、提純和/或處理活性化合物的相應(yīng)的鹽，例如，可藥用鹽。可藥用鹽的實例在Berge等，1977，“可藥用鹽(PharmaceuticallyAcceptableSalts)”，J.Pharm.Sci.，Vol.66，pp.1-19中進(jìn)行了討論。例如，如果該化合物是陰離子或帶有可以是陰離子的官能團(tuán)(例如，-COOH可以是-COO-)，則可以與適當(dāng)?shù)年栯x子形成鹽。適當(dāng)無機(jī)陽離子的實例包括但不限于，堿金屬離子例如Na+和K+，堿土金屬陽離子例如Ca2+和Mg2+和其他陽離子例如Al3+。適當(dāng)有機(jī)陽離子的實例包括但不限于，銨離子(即，NH4+)和取代的銨離子(例如，NH3R+、NH2R2+、NHR3+、NR4+)。一些適當(dāng)取代的銨離子的實例是衍生自下列物質(zhì)的那些乙胺、二乙胺、二環(huán)己基胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、芐胺、苯基芐胺、膽堿、葡甲胺和氨丁三醇，以及氨基酸，例如賴氨酸和精氨酸。常規(guī)季銨離子的實例是N(CH3)4+。如果該化合物是陽離子或帶有可以是陽離子的官能團(tuán)(例如，-NH2可以是-NH3+)，則可以與適當(dāng)?shù)年庪x子形成鹽。適當(dāng)無機(jī)陰離子的實例包括但不限于，衍生自下列無機(jī)酸的那些鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、亞硫酸、硝酸、亞硝酸、磷酸和亞磷酸。適當(dāng)有機(jī)陰離子的實例包括但不限于，衍生自下列有機(jī)酸的那些乙酸、丙酸、琥珀酸、羥乙酸、硬脂酸、棕櫚酸、乳酸、蘋果酸、樸酸、酒石酸、檸檬酸、葡糖酸、抗壞血酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、天冬氨酸、苯甲酸、肉桂酸、丙酮酸、水楊酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富馬酸、苯基磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、乙烷二磺酸、草酸、泛酸、羥乙磺酸、戊酸、乳糖酸和葡糖酸。適當(dāng)?shù)木酆衔镪庪x子的實例包括但不限于，衍生自下列聚合物酸的那些鞣酸、羧甲基纖維素。通常優(yōu)選或需要制備、提純和/或處理所述活性化合物的相應(yīng)溶劑化物。在此使用的術(shù)語“溶劑化物”在一般意義上是指溶質(zhì)(例如活性化合物、活性化合物的鹽)和溶劑的復(fù)合物。如果溶劑是水，則該溶劑化物可以稱為水合物，例如，一水合物、二水合物、三水合物等。通常優(yōu)選或需要制備、提純和/或處理化學(xué)保護(hù)的形式的所述活性化合物。在此使用的術(shù)語“化學(xué)保護(hù)的形式”是指其中一個或多個反應(yīng)性官能團(tuán)被保護(hù)以避免發(fā)生不希望的化學(xué)反應(yīng)的化合物，也就是說，是被保護(hù)的或保護(hù)基團(tuán)(也稱作被掩蔽或掩蔽基團(tuán)或者被封閉或封閉基團(tuán))的形式。通過保護(hù)反應(yīng)性官能團(tuán)，可以進(jìn)行涉及其他未保護(hù)反應(yīng)性官能團(tuán)的反應(yīng)而不影響被保護(hù)的基團(tuán)；保護(hù)基可以在基本上不影響分子的其余部分的條件下脫除，通常在隨后的步驟中進(jìn)行。參見，例如，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis(T.Green和P.Wuts，Wiley，1999)。例如，羥基可以保護(hù)成為醚(-OR)或酯(-OC(＝O)R)，例如，成為叔丁基醚；芐基、二苯甲基(二苯基甲基)或三苯甲基(三苯基甲基)醚；三甲基硅烷基或叔丁基二甲基硅烷基醚；或乙酰基酯(-OC(＝O)CH3、-OAc)。例如，醛或酮基可以分別保護(hù)為縮醛或縮酮，其中羰基(＞C＝O)通過與例如伯醇反應(yīng)轉(zhuǎn)化為二醚(＞C(OR)2)。醛或酮基很容易通過用大大過量的水在酸的存在下水解來再生。例如，氨基可以保護(hù)為例如酰胺或尿烷，例如，成為甲基酰胺(-NHCO-CH3)；芐氧基酰胺(-NHCO-OCH2C6H5，-NH-Cbz)；叔丁氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)3，-NH-Boc)；2-聯(lián)苯-2-丙氧基酰胺(-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5，-NH-Bpoc)；9-芴基甲氧基酰胺(-NH-Fmoc)、6-硝基藜蘆基氧基酰胺(-NH-Nvoc)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基酰胺(-NH-Teoc)、2，2，2-三氯乙氧基酰胺(-NH-Troc)、烯丙氧基酰胺(-NH-Alloc)、2-(苯基磺酰基)乙氧基酰胺(-NH-Psec)；或者，在適當(dāng)?shù)那闆r中，成為N-氧化物(＞NO$)。例如，羧酸基團(tuán)可以保護(hù)成為酯，例如，成為C1-7烴基酯(例如甲酯；叔丁酯)；C1-7鹵代烴基酯(例如，C1-7三鹵代烴基酯)；三C1-7烴基甲硅烷基-C1-7烴基酯；或C5-20芳基-C1-7烴基酯(例如芐基酯；硝基芐基酯)；或成為酰胺，例如，成為甲基酰胺。例如，硫醇基團(tuán)可以保護(hù)成為硫醚(-SR)，例如，成為芐基硫醚；乙酰氨基甲基醚(-S-CH2NHC(＝O)CH3)。通常優(yōu)選或需要制備、提純和/或處理前藥形式的所述活性化合物。在此使用的術(shù)語“前藥”是指當(dāng)被代謝(例如在體內(nèi))時可生成所需活性化合物的化合物。通常，所述的前藥是無活性的，或比活性化合物的活性低，但可以提供有利于處理、給藥或代謝的性質(zhì)。例如，一些前藥是活性化合物的酯(例如生理可接受的代謝不穩(wěn)定的酯)。在代謝過程中，酯基(-C(＝O)OR)斷裂生成活性藥物。此類酯可以通過酯化反應(yīng)形成，例如通過母體化合物中的任何羧酸基團(tuán)(-C(＝O)OH)的酯化反應(yīng)形成，并且如果需要的話，可將該母體化合物中存在的任何其他反應(yīng)性基團(tuán)預(yù)先進(jìn)行保護(hù)，然后在需要時脫保護(hù)。所述代謝不穩(wěn)定的酯的實例包括其中R是C1-7烴基(例如-Me、-Et)；C1-7氨基烴基(例如氨基乙基；2-(N，N-二乙基氨基)乙基；2-(4-嗎啉代)乙基)；和酰氧基-C1-7烴基(例如酰氧基甲基；酰氧基乙基；例如新戊酰基氧基甲基；乙酰氧基甲基；1-乙酰氧基乙基；1-(1-甲氧基-1-甲基)乙基-羰基氧基乙基；1-(苯甲酰氧基)乙基；異丙氧基-羰基氧基甲基；1-異丙氧基-羰基氧基乙基；環(huán)己基-羰基氧基甲基；1-環(huán)己基-羰基氧基乙基；環(huán)己基氧基-羰基氧基甲基；1-環(huán)己基氧基-羰基氧基乙基；(4-四氫吡喃基氧基)羰基氧基甲基；1-(4-四氫吡喃基氧基)羰基氧基乙基；(4-四氫吡喃基)羰基氧基甲基；和1-(4-四氫吡喃基)羰基氧基乙基)的那些。另外，某些前藥可在酶的作用下激活生成活性化合物，或是在進(jìn)一步的化學(xué)反應(yīng)后生成活性化合物的化合物。例如，所述的前藥可以是糖衍生物或其他糖苷結(jié)合物，或可以是氨基酸酯衍生物。選擇性抑制‘選擇性抑制’是指對一種酶的抑制作用比對其他一種或多種酶的抑制作用程度更大。通過將化合物抑制一種酶的50％活性時所需要的濃度(IC50)與同一化合物抑制其他酶的50％活性時所需的濃度(IC50)進(jìn)行比較可以測定出這種選擇性(參見下文)。結(jié)果用比例表示。如果該比例大于1，則該被測化合物在其抑制作用上具有一定選擇性。本發(fā)明的化合物優(yōu)選對DNA-PK具有比對PI3-激酶高3、10、20或50倍的選擇性。本發(fā)明的化合物優(yōu)選對DNA-PK具有比對ATM高5、10、50或100倍的選擇性。優(yōu)選用于測定選擇性的IC50是利用WO03/024949所述的方法測定的，上述文獻(xiàn)引入本文作為參考。進(jìn)一步的優(yōu)選當(dāng)Q為-NH-C(＝O)-時，X優(yōu)選NR4R5。進(jìn)一步優(yōu)選的是，Y為取代或未取代的C1-3亞烴基，更優(yōu)選取代或未取代的C1-2亞烴基，首選C1-2亞烴基。當(dāng)Q為-O-且X為NR4R5時，則Y優(yōu)選取代或未取代的C1-3亞烴基，更優(yōu)選取代或未取代的C1-2亞烴基，首選C1-2亞烴基。在某些實施方案中，R4和R5優(yōu)選獨立地選自H和取代或未取代的C1-7烴基，更優(yōu)選H和取代或未取代的C1-4烴基，首選H和取代或未取代的C1-2烴基。優(yōu)選的任選的取代基包括但不限于羥基、甲氧基、-NH2、取代或未取代的C6-芳基和取代或未取代的C5-6雜環(huán)基。在其它實施方案中，R4和R5可以與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的含氮雜環(huán)。優(yōu)選地，雜環(huán)具有5-7個環(huán)原子。優(yōu)選的基團(tuán)的實例包括嗎啉代、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基和四氫吡咯基。這些基團(tuán)可被取代，特別優(yōu)選的基團(tuán)為取代或未取代的哌嗪基，其中，取代基優(yōu)選在對位的氮原子上。優(yōu)選的N-取代基包括取代或未取代的C1-4烴基、取代或未取代的C6芳基和?；?具有C1-4烴基作為?；〈?。本發(fā)明的某些優(yōu)選化合物可由式II表示其中R1、R2和Q如式I所定義；n為1-7，優(yōu)選1-4，首選1或2；和R8選自氫、取代或未取代的C1-7烴基(優(yōu)選取代或未取代的C1-4烴基)，取代或未取代的C5-20芳基(優(yōu)選取代或未取代的C6芳基)和酰基(其中，酰基取代基優(yōu)選C1-4烴基)。優(yōu)選R6和R7可與上述R4和R5相同。式I(和式II)中，當(dāng)R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的雜環(huán)時，這可以構(gòu)成如上定義的C4-20雜環(huán)基的一部分(除了含有最少4個環(huán)原子之外)，它必須包含至少一個氮環(huán)原子。優(yōu)選R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成具有5、6或7個，更優(yōu)選6個環(huán)原子的雜環(huán)。含有一個氮原子的單環(huán)包括氮雜環(huán)丁烷、吡咯烷(四氫吡咯)、吡咯啉(例如，3-吡咯啉、2，5-二氫吡咯)、2H-吡咯或3H-吡咯(異吡咯、異氮雜環(huán)戊二烯)、哌啶、二氫吡啶、四氫吡啶和氮雜；含有兩個氮原子的單環(huán)包括咪唑烷、吡唑烷(二氮雜環(huán)戊烷)、咪唑啉、吡唑啉(二氫吡唑)和哌嗪；含一個氮和一個氧的單環(huán)包括四氫唑、二氫唑、四氫異唑、二氫異唑、嗎啉、四氫嗪、二氫嗪和嗪；含一個氮和一個硫的單環(huán)包括噻唑啉、噻唑烷和硫代嗎啉。優(yōu)選的環(huán)是那些除氮以外還含有一個雜原子的環(huán)，特別優(yōu)選的雜原子是氧和硫。因此優(yōu)選的基團(tuán)包括嗎啉代、硫代嗎啉代、噻唑啉基。沒有其他雜原子的優(yōu)選基團(tuán)包括1-吡咯烷基。首選的基團(tuán)是嗎啉代和硫代嗎啉代。如上所述，這些雜環(huán)基本身可以被取代；一類優(yōu)選的取代基是C1-7烴基。當(dāng)雜環(huán)基是嗎啉代時，取代基優(yōu)選是甲基或乙基，并且更優(yōu)選甲基。唯一的甲基取代基首選在2位。除了上面列出的單環(huán)基團(tuán)外，還包括具有橋連和交叉連接的環(huán)。其中，含有氮和氧原子的此類環(huán)的實例是它們分別稱作8-氧雜-3-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基、6-氧雜-3-氮雜-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基、2-氧雜-5-氮雜-雙環(huán)[2.2.1]庚-5-基和7-氧雜-3-氮雜-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基。一般合成方法其中Q為-NH-C(＝O)-的式I化合物可由式1表示式1其中-Y-X不為C1-7烴基的這些化合物可由式2化合物通過與適宜的胺或硫醇反應(yīng)來制備式2其中L為氯或溴。該反應(yīng)可在室溫下進(jìn)行，或者，如果需要的話，可在加熱下進(jìn)行。式2的化合物可通過使式3的化合物式3與式4的化合物反應(yīng)來合成式4該反應(yīng)在有機(jī)堿如三乙胺的存在下進(jìn)行。其中-Y-X為C1-7烴基的式1化合物可通過使式3化合物與式4a化合物反應(yīng)來合成式4a該反應(yīng)在有機(jī)堿如三乙胺的存在下進(jìn)行。式3化合物可通過還原式5化合物來合成式5反應(yīng)采用適宜的還原劑，如在乙酸中的鋅。式5化合物可通過使式6和7的化合物進(jìn)行的Suzuki-Miyaura偶聯(lián)反應(yīng)合成式6式7該方法如WO03/024949(合成路線7c)所述，所采用的硼酸酯可用等價的硼基團(tuán)代替。式7化合物的合成路線如WO03/024949(合成路線6)所述。其中-Y-X為C1-7烴基的式1化合物也可通過式8和9化合物的Suzuki-Miyaura偶聯(lián)反應(yīng)合成式8式9式8化合物可由式10化合物通過與適宜的酸酐反應(yīng)合成式10反應(yīng)例如在吡啶中進(jìn)行。式9化合物可由式8化合物通過與適宜的硼試劑反應(yīng)合成。其中Q為-O-且X選自SR3或NR4R5的式I化合物可由式11表示式11其中X’表示SR3或NR4R5。這些化合物可由式12化合物通過與適宜的胺或硫醇反應(yīng)來合成式12其中L為氯或溴。該反應(yīng)可在室溫下進(jìn)行，或者需要時也可加熱。式12化合物可通過使式13化合物式13與式14化合物反應(yīng)來合成式14反應(yīng)在例如碳酸鉀的存在下進(jìn)行。式13化合物可由式3化合物采用重氮化-水解過程來合成。首先將氨基轉(zhuǎn)化成重氮氟硼酸鹽，例如采用HBF4和亞硝酸丁酯，然后進(jìn)行水解，例如采用氧化亞銅(I)-硝酸銅(II)水溶液進(jìn)行水解。其中Q為-O-且X為-C(＝O)-NR6R7的式I化合物可由式15表示式15其中X”表示NR6R7。這些化合物可由式16的化合物通過與適宜的胺反應(yīng)來合成式16反應(yīng)在HBTU和HOBT的存在下進(jìn)行。式16的化合物可由式17的化合物通過與氫氧化鈉在甲醇中反應(yīng)制得式17式17的化合物可通過式10化合物與式18化合物反應(yīng)合成式18反應(yīng)在例如碳酸鉀的存在下進(jìn)行。本發(fā)明化合物的用途本發(fā)明提供了活性化合物，具體地講，有活性的8-[1-取代的-硫芴-4-基]-2-嗎啉-4-基-苯并吡喃-4-酮。在此使用的術(shù)語“活性”是指能夠抑制DNA-PK活性的化合物，并且具體包括具有固有活性的化合物(藥物)以及該類化合物的前藥，所述的前藥本身可以具有很小的或沒有固有活性。下面的實施例將描述評估特定化合物的DNA-PK抑制作用的分析方法。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種抑制細(xì)胞中DNA-PK的方法，包括使該細(xì)胞與有效量的活性化合物接觸，所述化合物優(yōu)選是藥學(xué)可接受的組合物的形式。該方法可以在體外或體內(nèi)進(jìn)行。例如，可以使細(xì)胞的樣本(例如得自腫瘤)在體外生長并且使活性化合物和具有已知治療作用的藥物聯(lián)合與所述細(xì)胞接觸，并且觀察該化合物對這些細(xì)胞產(chǎn)生的治療作用的增強(qiáng)。本發(fā)明進(jìn)一步提供了可以抑制DNA-PK活性的活性化合物以及抑制DNA-PK活性的方法，該方法包括使細(xì)胞與有效量的活性化合物在體外或在體內(nèi)接觸。本發(fā)明還提供用于治療人或動物機(jī)體的方法中的活性化合物。該方法可以包括向所述個體施用治療有效量的活性化合物，優(yōu)選是藥物組合物的形式。本文在治療病癥的上下文中使用的術(shù)語“治療”一般是指治療和療法，無論針對的是人體還是動物(例如獸醫(yī)用途)，其中獲得了一定的所需治療效果，例如，阻止病癥的進(jìn)程，并且包括減慢進(jìn)展的速度、使進(jìn)展速度停止、改善病癥和治愈病癥。治療還包括預(yù)防措施(即預(yù)防)。在此使用的術(shù)語“治療有效量”是指活性化合物或物質(zhì)、含有該活性化合物的組合物或劑型的量，該量可以有效地產(chǎn)生一定的所需治療效果，相稱地具有合理的有益作用/危險比。給藥無論是系統(tǒng)性地/外周性地或在所需的作用位點，活性化合物或含有該活性化合物的藥物組合物均可以通過任何常規(guī)給藥途徑施用給個體，包括但不限于，口服(例如吞服)；局部(包括例如透皮、鼻內(nèi)、經(jīng)眼、經(jīng)頰和舌下)；肺部(例如通過吸入或吹入療法使用，例如氣霧劑，例如經(jīng)口腔或鼻)；直腸；陰道；腸胃外，例如，通過注射，包括皮下、真皮內(nèi)、肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、心內(nèi)、鞘內(nèi)、脊柱內(nèi)、囊內(nèi)、囊下、眼眶內(nèi)、腹膜內(nèi)、氣管內(nèi)、表皮下、關(guān)節(jié)內(nèi)、蛛網(wǎng)膜內(nèi)和胸骨內(nèi)；通過植入儲庫制劑，例如，皮下或肌肉內(nèi)植入。所述的個體可以是真核生物、動物、脊椎動物、哺乳動物、嚙齒類動物(例如豚鼠、倉鼠、大鼠、小鼠)、鼠科動物(例如小鼠)、犬科動物(例如狗)、貓科動物(例如貓)、馬類(例如馬)、靈長類動物、類人猿(例如猴或無尾猴)、猴(例如狨、狒狒)、無尾猴(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩、長臂猿)或人。制劑雖然所述的活性化合物可以單獨給藥，但優(yōu)選它作為含有至少一種如上所述的活性化合物和一種或多種藥學(xué)可接受的載體、輔劑、賦形劑、稀釋劑、填充劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、潤滑劑和所屬領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的其他材料以及任選的其他治療或預(yù)防藥物的藥物組合物(例如制劑)的形式存在。因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供如上定義的藥物組合物和制備該藥物組合物的方法，該方法包括將至少一種如上定義的活性化合物與一種或多種藥學(xué)可接受的載體、賦形劑、緩沖劑、輔劑、穩(wěn)定劑或本文所述的其他材料混合。在此使用的術(shù)語“藥學(xué)可接受的”是指，在合理的醫(yī)學(xué)判斷的范疇內(nèi)，適合用于與個體(例如人體)的組織相接觸而沒有過度的毒性、刺激性、變應(yīng)性反應(yīng)或其他問題或并發(fā)癥且具有合理的有益作用/危險比的化合物、物質(zhì)、組合物和/或劑型。從與該制劑的其他組分相容的意義上，各載體、賦形劑等也必須是“可接受的”。適宜的載體、賦形劑等可以參見標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)書籍，例如，Reminitegton’sPharmaceuticalSciences，第18版，MackPublishingCompany，Easton，Pa.，1990。該制劑一般可以以單位劑型存在且通過任何制藥領(lǐng)域熟知的方法制成。所述的方法包括使該活性化合物與構(gòu)成一種或多種附加組分的載體混合的步驟。通常，通過使該活性化合物與液體載體或微粉狀的固體載體或兩者均勻且緊密地混合，并且隨后如果必要使產(chǎn)物成形來制備所述的制劑。制劑可以是液體、溶液、混懸劑、乳劑、酏劑、糖漿劑、片劑、糖錠、顆粒劑、散劑、膠囊劑、囊形片、丸劑、安瓿劑、栓劑、陰道栓、軟膏、凝膠、糊劑、霜劑、噴霧劑、霧劑、泡沫劑、洗劑、油、大藥丸、干藥糖劑或氣霧劑的形式。適合口服給藥(例如吞服)的制劑可以以離散的單位存在，例如各自含有預(yù)定量的活性化合物的膠囊、囊形片或片劑；以散劑或顆粒劑的形式存在；以存在于水或非水液體中的溶液或混懸液的形式存在；或以水包油液體乳劑或油包水液體乳劑的形式存在；以大藥丸的形式存在；以干藥糖劑的形式存在；或以糊劑的形式存在。片劑可以通過常規(guī)的方式制備，例如，壓縮或模制，可任選的含有一種或多種輔助組分。壓縮的片劑可以通過在適當(dāng)設(shè)備中將自由流動形式(例如粉末或顆粒)的活性化合物壓縮來制備，其中還可任選的混有一種或多種粘合劑(例如聚乙烯吡咯烷酮、明膠、阿拉伯膠、山梨糖醇、黃芪膠、羥丙甲基纖維素)；填充劑或稀釋劑(例如乳糖、微晶纖維素、磷酸氫鈣)；潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石粉、硅膠)；崩解劑(例如羥乙酸淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)；表面活性劑或分散劑或濕潤劑(例如十二烷基硫酸鈉)；和防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、山梨酸)。模制片劑可以通過在適當(dāng)設(shè)備中模制用惰性液體稀釋劑濕潤的粉狀化合物的混合物來制備。片劑可以任選地進(jìn)行包衣或刻線，并且可以配制成能夠緩釋或控釋其中的活性化合物的形式，例如，使用不同比例的羥丙甲基纖維素來達(dá)到所需的釋放性能。片劑可以任選地帶有腸溶包衣，以便能夠在腸道部分而不是胃中釋放。適合局部給藥的制劑(例如透皮、鼻內(nèi)、經(jīng)眼、經(jīng)頰和舌下)可以配制成軟膏、霜劑、混懸劑、洗劑、粉劑、溶液、糊劑、凝膠、噴霧劑、氣霧劑或油?；蛘撸苿┛梢园ㄙN劑或敷料，例如浸有活性化合物和任選的一種或多種賦形劑或稀釋劑的繃帶或粘性硬膏劑。適合局部給藥至口腔內(nèi)的制劑包括在矯味基質(zhì)(通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃芪膠)內(nèi)含有活性化合物的糖錠；在惰性基質(zhì)(例如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)內(nèi)含有活性化合物的錠劑；和在適當(dāng)液體載體內(nèi)含有活性化合物的漱口劑。適合局部給藥到眼部的制劑包括滴眼劑，其中將活性化合物溶解或懸浮在適當(dāng)?shù)妮d體、尤其是活性化合物的水性溶劑內(nèi)。其中的載體是固體的適合對鼻給藥的制劑包括具有一定粒度的粗粉，例如，在約20-約500微米的范圍內(nèi)，其以嗅吸的方式給藥，即經(jīng)鼻腔從與鼻子近距離的容器快速吸入粉末。其中的載體是液體的適于以例如鼻噴霧劑、滴鼻劑或通過霧化器給藥的氣霧劑的形式給藥的制劑包括活性化合物的水或油溶液。適于通過吸入給藥的制劑包括那些以由加壓包裝產(chǎn)生的氣霧噴霧劑的形式存在的制劑，該制劑使用適當(dāng)?shù)膾伾鋭缍榷淄?、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適當(dāng)氣體。適合經(jīng)皮膚局部給藥的制劑包括軟膏、霜劑和乳劑。當(dāng)配制為軟膏時，該活性化合物可以任選地與石蠟或水混溶的軟膏基質(zhì)一起使用?；蛘?，可將活性化合物用水包油霜劑基質(zhì)配制成霜劑。如果需要，霜劑基質(zhì)的水相中可以含有，例如，至少約30％w/w的多元醇，即，具有兩個或多個羥基的醇，例如丙二醇、丁-1，3-二醇、甘露糖醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇及其混合物。局部制劑優(yōu)選含有可提高活性化合物通過皮膚或其它患病區(qū)域吸收或滲透的化合物。此類透皮促進(jìn)劑的實例包括二甲亞砜和相關(guān)類似物。當(dāng)配制為局部用乳劑時，油相可以任選地僅含有乳化劑(或者也可稱為利瀉劑)，或者可以含有至少一種乳化劑與脂肪或油或者與脂肪和油兩者的混合物。優(yōu)選同時含有親水性乳化劑和作為穩(wěn)定劑的親脂性乳化劑。還優(yōu)選包括油和脂肪兩者。并且，含有或不含有穩(wěn)定劑的乳化劑組成了所謂的乳化蠟，該蠟與油和/或脂肪組成所謂的乳化軟膏基質(zhì)，它構(gòu)成霜劑制劑的油分散相。適當(dāng)?shù)娜榛瘎┖腿閯┓€(wěn)定劑包括吐溫60、司盤80、鯨蠟硬脂醇、肉豆蔻醇、甘油基一硬脂酸酯和十二烷基硫酸鈉。制劑對于適當(dāng)油或脂肪的選擇是基于獲得所需的美容特性，因為所述活性化合物在大多數(shù)可能用于藥物乳劑中的油內(nèi)的溶解度可能非常低。因此該霜劑應(yīng)當(dāng)優(yōu)選是不油膩、不染色且可洗掉的產(chǎn)品，并且具有可以避免從管或其他容器中泄漏出來的適當(dāng)稠度?？梢允褂弥辨溁蛑ф?、一-或二元烷基酯例如二-異己二酸酯、硬脂酸異鯨蠟酯、椰子脂肪酸的丙二醇二酯、肉豆蔻酸異丙酯、油酸癸酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫚酸2-乙基己酯或一種稱作CrodamolCAP的支鏈酯的混合物，最后三種是優(yōu)選的酯。這些物質(zhì)可以單獨使用或合用，這取決于所需的性質(zhì)?；蛘?，可以使用高熔點脂類例如白色軟石蠟和/或液體石蠟或其他礦物油。適合直腸給藥的制劑可以以栓劑的形式存在，栓劑使用的適當(dāng)基質(zhì)包括，例如，可可脂或水楊酸酯。適合陰道給藥的制劑可以以陰道栓、棉塞、霜劑、凝膠、糊劑、泡沫劑或噴霧劑的形式存在，其中含有活性化合物以及本領(lǐng)域已知的適宜載體。適合腸胃外給藥的制劑(例如通過注射，包括皮膚、皮下、肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)和真皮內(nèi)給藥)包括含水和非水的等滲、無熱原、無菌注射溶液，其可以含有抗氧劑、緩沖劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、抑菌劑和使該制劑與接受者的血液等滲的溶質(zhì)；以及可以含有助懸劑和增稠劑的水和非水無菌混懸液；和脂質(zhì)體或其他微粒體系，它們被設(shè)計用來將化合物靶向于血液組分或其它一種或多種器官。適用于此類制劑的適當(dāng)?shù)葷B載體的實例包括氯化鈉注射液、林格氏溶液或乳酸化林格氏注射液。通常，活性化合物在該溶液中的濃度是約1ng/ml-約10μg/ml，例如約10ng/ml-約1μg/ml。該制劑可以存在于單位劑量或多劑量的密封容器內(nèi)，例如，安瓿和小瓶，并且可以儲存在冷凍干燥(凍干)條件下，使用之前僅僅需要加入無菌液體載體，例如注射用水即可。即時注射溶液和混懸液可以由無菌粉末、顆粒和片劑制備。制劑可以是設(shè)計為使活性化合物靶向于血液組分或一種或多種器官的脂質(zhì)體或其他微粒體系的形式。劑量應(yīng)理解活性化合物和含有活性化合物的組合物的適當(dāng)劑量可以隨著患者的不同而改變。確定最佳劑量一般包括在治療效益的水平與本發(fā)明治療的任何危險或有害副作用之間取得平衡。選擇劑量水平應(yīng)取決于多種因素，包括但不限于，特定化合物的活性、給藥途徑、給藥的時間、化合物的排泄速率、治療的持續(xù)時間、合用的其他藥物、化合物和/或物質(zhì)，以及患者的年齡、性別、體重、狀況、一般健康狀況和在先病史?；衔锏慕o藥量和給藥途徑最終由主治醫(yī)師來決定，盡管通常該劑量應(yīng)在作用位點達(dá)到可獲得預(yù)期效果并且同時不會引起大的有害或損害性副作用的局部濃度。體內(nèi)給藥可以在整個治療過程中以單次給藥、連續(xù)或間隔給藥的方式來實現(xiàn)(例如以適當(dāng)?shù)臅r間間隔分次給藥)。測定最有效的給藥方式和給藥劑量的方法是所屬領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的且應(yīng)隨療法中采用的制劑、治療的目的、被治療的靶細(xì)胞和被治療的個體而變化?？梢赃M(jìn)行一次或多次給藥并且由主治醫(yī)師來選擇劑量水平和方式。通常，活性化合物的適當(dāng)劑量在約100μg-約250mg/kg個體體重/天的范圍內(nèi)。當(dāng)所述的活性化合物是鹽、酯、前藥等時，給藥量是基于母體化合物計算的，因此所用的實際重量成比例地增加。實施例提供以下實施例僅僅為了舉例說明本發(fā)明而不是為了限定上述本發(fā)明的范圍。首字母縮拼詞為了方便，將許多化學(xué)基團(tuán)用公知的縮寫表示，包括但不限于，甲基(Me)、乙基(Et)、正丙基(nPr)、異丙基(iPr)、正丁基(nBu)、叔丁基(tBu)、正己基(nHex)、環(huán)己基(cHex)、苯基(Ph)、聯(lián)苯基(biPh)、芐基(Bn)、萘基(naph)、甲氧基(MeO)、乙氧基(EtO)、苯甲?；?Bz)和乙?；?Ac)。為了方便，將許多化合物用公知的縮寫表示，包括但不限于，甲醇(MeOH)、乙醇(EtOH)、異丙醇(i-PrOH)、甲基乙基酮(MEK)、乙醚或二乙基醚(Et2O)、乙酸(AcOH)、二氯甲烷(DCM)、三氟乙酸(TFA)、二甲基甲酰胺(DMF)、四氫呋喃(THF)和二甲基亞砜(DMSO)。一般實驗方法采用MerckKieselgel60F254玻璃支撐板進(jìn)行薄層色譜。用UV燈(254nm)觀察玻璃板。采用E.M.Merck提供的硅膠60(粒徑40-63μ)進(jìn)行快速色譜。在300MHz下采用BrukerDPX-300儀器記錄1HNMR光譜。以四甲基硅烷參照化學(xué)位移。庫(Iibrary)樣品的純化與鑒定樣品在GilsonLC裝置中進(jìn)行純化。流動相A-0.1％TFA水溶液，流動相B-乙腈，流速6ml/min.，梯度-通常在90％A/10％B下開始進(jìn)行1分鐘，15分鐘后升至97％B，保持2分鐘，然后返回初始條件。柱JonesChromatographyGenesis4μC18柱，10mm×250mm。根據(jù)在254nm下的UV檢測值采集峰。以正離子方式用FinneganLCQ儀器記錄質(zhì)譜。流動相A-0.1％甲酸水溶液，流動相B-乙腈，流速2ml/min.，梯度-通常在95％A/15％B下開始進(jìn)行1分鐘，5分鐘后升至98％B，保持3分鐘，然后返回初始條件。柱Phenomenex5μLunaC18柱，4.6mm×50mm。在254nm下進(jìn)行UV檢測，在210-600nm下進(jìn)行PDA檢測掃描。其它化合物的質(zhì)譜非庫(non-library)化合物和中間體的質(zhì)譜采用MicromassZQ儀器(單四極，以電噴射電離方式操作)記錄，采用Waters600HPLC泵和2700自動進(jìn)樣器。流動相A-0.1％甲酸水溶液，流動相B-0.1％甲酸的乙腈溶液，流速2.0ml/min.，梯度-在3分鐘內(nèi)由5％B至95％B，保持3分鐘。柱不同的柱子，但一般是C1850mm×4.6mm(CurrentlyGenesis4μ，JonesChromatogrpahy)。PDA檢測Waters996，掃描范圍210-400nm。關(guān)健中間體的合成(a)嗎啉-4-基-8-(1′-硝基硫芴-4′-基)苯并吡喃-4-酮(viii)硫芴-4-酚(i)向冷卻中的(-78℃)硫芴(20.8g，113mmol)的無水THF(400ml)溶液中加入叔丁基鋰(1.7M戊烷溶液；100ml，170mmol)。將反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1小時，然后升至室溫并繼續(xù)攪拌16小時。然后將混合物冷卻至0℃，并經(jīng)套管以緩慢的細(xì)流向琥珀色反應(yīng)混合物中加入乙基溴化鎂(1MTHF溶液；170ml，170mmol)。再將反應(yīng)物升至室溫，繼續(xù)攪拌30分鐘。在反應(yīng)容器上連接回流冷凝器，然后將氧氣鼓泡通過溶液40分鐘。再將混合物攪拌1小時，然后小心地傾倒至碎冰上，用濃鹽酸酸化至pH3。將混合物用乙酸乙酯萃取(3×80ml)。將有機(jī)萃取液用3M氫氧化鈉溶液處理直到pH達(dá)到10。分離出堿性水層，用2M鹽酸酸化至pH3，使油性固體沉淀出來。將固體溶解于乙醚(150ml)，用MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，采用乙醇∶水(1∶1)(250ml)進(jìn)行重結(jié)晶，得到淺黃色的固體，其相應(yīng)于標(biāo)題化合物(21.6g，96％)，無需進(jìn)行進(jìn)一步純化。m/z(LC-MS，ESP)，RT＝3.64min，(M+H)＝201.14-甲氧基-硫芴(ii)向硫芴-4-酚(i)(14.2g，71.0mmol)的丙酮(500ml)溶液中加入粉末碳酸鉀(14.72g，106.5mmol)和甲基碘(4.43ml，71mmol)。將混合物加熱回流并攪拌16小時。然后，將混合物冷卻，并用CeliteTM墊過濾。將形成的濾液真空濃縮，得到油狀殘余物，將其用二氯甲烷(100ml)稀釋，用1MNaOH和飽和鹽水溶液洗滌。將有機(jī)層用MgSO4干燥，過濾并真空濃縮，得到淺黃色固體，其相應(yīng)于標(biāo)題化合物，其不經(jīng)任何進(jìn)一步純化即可使用。(15.2g，100％)m/z(LC-MS，ESP)，RT＝4.22min，(M+H)＝215.1。4-甲氧基-1-硝基-硫芴(iii)將4-甲氧基-硫芴(ii)(4.3g，20.0mmol)溶解于冰醋酸(60ml)中，向溶液中以滴加的方式加入發(fā)煙硝酸(3.37ml)，以確?；旌衔锏臏囟炔簧粮哂?5℃。將黃色的懸浮液繼續(xù)攪拌45分鐘，然后小心地倒入水(200ml)中并攪拌15分鐘。過濾除去黃色固體，用足量的水和己烷進(jìn)行充分洗滌。將獲得的殘余物進(jìn)行真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體，其不經(jīng)任何進(jìn)一步純化即可使用。(5.19g，97％)m/z(LC-MS，ESP)，RT＝4.15min，(M+H)＝260.1。1-硝基-硫芴-4-酚(iv)將固體吡啶鹽酸鹽(1kg，8.7mol)加至4-甲氧基-1-硝基-硫芴(iii)(35.44g，187mmol)中，將反應(yīng)物充分混合然后在連續(xù)攪拌下加熱至165℃。將混合物在該條件下保持8小時，冷卻，用水(500ml)稀釋，用二氯甲烷(3×200ml)萃取。將3M氫氧化鈉溶液加至有機(jī)萃取液中直到從溶液中沉淀出深色固體沉淀物。除去濾液并用濃鹽酸酸化至pH1。將酸化后形成的亮黃色固體濾出，用水洗滌并干燥，得到標(biāo)題化合物，其純度適宜，無需進(jìn)一步純化即可使用。(35.44g，77％)m/z(LC-MS，ESP)，RT＝3.69min，(M+H)＝246.2，(M-H)＝244.1。三氟-甲磺酸1-硝基-硫芴-4-基酯(v)向冷卻中的(-5℃)1-硝基-硫芴-4-酚(iv)(5.37g，22.0mmol)的二氯甲烷(75ml)懸浮液中加入三乙胺(9.20ml，66.00mmol)，三乙胺使懸浮液完全溶解。然后，通過注射器向混合物中滴加三氟甲磺酸酐(5.85ml，33.00mmol)。將混合物在該溫度下攪拌1小時，然后倒至碎冰上。使冰熔化，將混合物用CH2Cl2(3×20ml)萃取。將合并后的有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮，得到淡琥珀色油，采用硅膠墊對其進(jìn)行洗脫(純CH2Cl2)，得到標(biāo)題化合物，為足夠純的形式，可不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。(8.30g，99％)m/z(LC-MS，ESP)，RT＝4.40min，不能離子化。嗎啉-4-基-8-(1′-硝基硫芴-4′-基)苯并吡喃-4-酮(viii)在氬氣氛下，在干凈的干燥燒瓶中加入三氟甲磺酸1-硝基-硫芴-4-基酯(v)(250mg，0.66mmol)、雙(頻哪醇基)二硼(185mg，0.73mmol)、乙酸鉀(390mg，3.98mmol)、PdCl2(dppf)(27mg，0.033mmol)和dppf(19mg，0.033mmol)。真空下將燒瓶抽空并用氬氣沖洗三次。加入二烷(20ml)，將反應(yīng)混合物在90℃下攪拌12小時。將反應(yīng)混合物用DCM(100ml)稀釋并將有機(jī)層依次用水(3×30ml)、鹽水(1×30ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，真空蒸出溶劑，得到硝基硼酸酯(vi)，其不經(jīng)任何進(jìn)一步純化即可使用。將vi(280mg，0.79mmol)、苯并吡喃酮-8-三氟甲磺酸酯(vii)(298mg，0.79mmol)、PdCl2(dppf)(19.3mg，0.024mmol)和Cs2CO3(770mg，2.36mmol)的混合物用氬氣沖洗三次，然后加入THF(20ml)。將反應(yīng)混合物在回流下攪拌12小時。真空除去溶劑，將殘余物溶解于DCM(100ml)，用水(2×30ml)、鹽水(1×30ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，真空蒸出溶劑，得到標(biāo)題化合物(viii)。將粗產(chǎn)物進(jìn)行柱色譜純化，用2-5％甲醇的DCM溶液洗脫。m.p＝179℃；Rf＝0.28(DCM/MeOH95/5)；LC-MSES+460。IR(薄膜)1681，1619，1559，1404cm-1；UVλmax＝240nm。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.27(dd，J＝7.8；1.6Hz，1H)；8.09(d，J＝7.5Hz，1H)；7.83(d，J＝7.9Hz，1H)；7.78(d，J＝7.1Hz，1H)；7.66(dd，J＝7.5；1.6Hz，1H)；7.42-7.52(m，4H)；5.45(s，1H)；3.40-3.47(m，4H)；3.00-3.03(m，4H)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ176.9；162.5；150.8；151.7；143.4；140.5；135.9；133.5；131.6；129.0；127.5；127.4；127.0；125.8；125.6；125.4；124.1；123.1；120.8；87.6；66.0；44.9。(b)8-(1′-氨基硫芴-4′-基)-2-嗎啉-4-基-苯并吡喃-4-酮(ix)向硝基硫芴衍生物(viii)(810mg，1.77mmol)的乙酸(30ml)懸浮液中加入鋅粉(1.16g，17.70mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。用硅藻土過濾反應(yīng)混合物，依次用甲醇(4×50ml)和DCM(2×50ml)洗滌，將合并后的濾液減壓蒸發(fā)。將殘余的固體與水(100ml)一起攪拌，加入氨水(25ml)。過濾收集形成的沉淀固體，進(jìn)行硅膠色譜純化，用2-5％甲醇的DCM溶液作為洗脫劑。Rf＝0.28(DCM/MeOH95/5)；IR(薄膜)3326，3211，2962，2902，2851，1729，1615，1555。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.14-8.20(m，2H)；7.74(dd，J＝7.7；1.1Hz，1H)；7.67(dd，J＝7.4；1.7Hz，1H)；7.34-7.49(m，4H)；7.22(d，J＝7.8Hz，1H)；6.82(d，J＝7.8Hz，1H)；5.48(s，1H，＝CH)；4.55(br，-NH，2H)；3.42-3.46(m，4H)；3.03-3.06(m，4H)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ177.6；162.5；151.7；144.2；141.6；138.9；135.8；134.1；132.8；129.1；128.9；126.0；125.7；125.3；125.1；125.0；123.8；123.7；123.1；123.0；122.0；113.1；87.18；66.4；45.0。(c)2-氯-N-[4-(2-嗎啉-4-基-4-氧代-4H-苯并吡喃-8-基)-硫芴-1-基]-乙酰胺(A)向氨基硫芴衍生物(ix，1mol當(dāng)量)的無水DMA(12ml)溶液中加入三乙胺(2.2mol當(dāng)量)和氯乙酰氯(1.1mol當(dāng)量)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時。(d)3-溴-N-[4-(2-嗎啉-4-基-4-氧代-4H-苯并吡喃-8-基)-硫芴-1-基]-丙酰胺(B)向氨基硫芴衍生物(ix；1mol當(dāng)量)的無水DMA溶液中加入三乙胺(2.2mol當(dāng)量)和3-溴丙酰氯(1.1mol當(dāng)量)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時。(e)8-(1-羥基-硫芴-4-基)-2-嗎啉-4-基-苯并吡喃-4-酮(x)將氨基硫芴衍生物(ix)(1mmol)懸浮于乙醇(40ml)中，在室溫下滴加入HBF4(15mmol)。攪拌15分鐘后，反應(yīng)混合物變成澄清的溶液，將其冷卻至0℃，加入亞硝酸叔丁酯(2mmol)。30分鐘后，將反應(yīng)混合物用乙醚(80ml)稀釋。濾出沉淀出來的固體，用乙醚(2×20ml)洗滌然后干燥。將固體加至硝酸銅(300mmol)在1L水中的溶液中，所述溶液中包含氧化亞銅(1mmol)，將溶液在室溫下攪拌1小時。將水溶液過濾，得到褐色固體產(chǎn)物，將其進(jìn)行硅膠柱色譜純化，用2-5％甲醇/DCM洗脫。(f)8-[1-(2-溴-乙氧基)-硫芴-4-基]-2-嗎啉-4-基-苯并吡喃-4-酮(C)向1-羥基硫芴(x；1mol當(dāng)量)的無水DMF(20ml)溶液中加入碳酸鉀(1.1mol當(dāng)量)和二溴乙烷(1.1mol當(dāng)量)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時。(g)[4-(2-嗎啉-4-基-4-氧代-4H-苯并吡喃-8-基)-硫芴-1-氧基]-乙酸鈉(D)將羥基化合物(x)懸浮于無水DMF中，加入碳酸鉀，再加入溴乙酸甲酯，然后將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌過夜。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用水、鹽水洗滌，干燥，濃縮，得到甲基酯，為黃色固體。通過HPLC和LC-MS來監(jiān)視反應(yīng)進(jìn)程。將該酯溶解于甲醇中，加入NaOH水溶液。將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌1小時，此時HPLC和LC-MS顯示不存在甲基酯。將反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)至干，得到鈉鹽(D)。實施例1將2-氯-N-[4-(2-嗎啉-4-基-4-氧代-4H-苯并吡喃-8-基)-硫芴-1-基]-乙酰胺(A)的等分試樣(0.5ml)分別加至包含用于合成的各種胺的小瓶中。將反應(yīng)混合物平行地在室溫下攪拌12小時，用最少體積的甲醇稀釋，然后將形成的化合物純化。代表性分析數(shù)據(jù)化合物11HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.27(1H，s，-NH)，8.44(1H，m，Ar)，8.29(1H，d，J＝7.85Hz，Ar)，8.04(1H，d，J＝8.04Hz，Ar)，7.86(2H，m，Ar)，7.55(4H，m，Ar)，6.59(1H，s，＝CH-)，4.01(4H，m，-NCH2CH2-)，3.82(2H，s，-NCH2)，3.53(4H，m，-NCH2CH2-)，3.26(4H，m，-NCH2CH2-)，3.18(4H，m，-NCH2CH2-)。M.p.165℃。化合物21HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.80(1H，s，-NH)，8.26(1H，m，Ar)，8.19(1H，dd，J＝1.6Hz，Ar)，7.70(2H，m，Ar)，7.48(2H，m，Ar)，7.38(3H，m，Ar)，6.15(1H，s，＝CH-)，4.10(2H，s，-NCH2)，3.42(6H，m，-NCH2CH2-)，3.09(7H，m，-NCH2CH2-)，1.95(5H，m，-CH2CH2-)。M.p.188℃?；衔?7(油)1HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.15(1H，s，-NH)，8.22(2H，t，J＝7.93Hz，Ar)，7.74(2H，t，J＝7.64Hz，Ar)，7.58(1H，d，J＝7.95Hz，Ar)，7.50(1H，d，J＝7.67Hz，Ar)，7.36(3H，m，Ar)，6.58(1H，s，＝CH-)，3.53(2H，s，-NCH2)，3.45(4H，m，-NCH2CH2-)，3.20(6H，m，-NCH2CH2-)，3.03(2H，m，-NCH2)，2.91(6H，s，-NCH3)，2.56(3H，s，-NCH3)?；衔?81HNMR(300MHz，CDCl3)δ10.26(1H，s，-NH)，8.32(1H，d，J＝6.42Hz，Ar)，8.20，(1H，d，J＝6.36Hz，Ar)，7.90(1H，m，Ar)，7.74(2H，m，Ar)，7.47(4H，m，Ar)，6.40(1H，s，＝CH-)，3.96(2H，m，-NCH2)，3.77(2H，s，-OCH2)，3.44(4H，m，-NCH2CH2-)，3.27(2H，d，J＝11.57Hz，-NCH2)，3.15(4H，s，-NCH2CH2-)，2.50(2H，m，-NCH2)。M.p.152℃?；衔?71HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.90(1H，s，-NH)，8.38(1H，m，Ar)，8.22(3H，m，Ar)，7.77(3H，m，Ar)，7.45(4H，m，Ar)，6.89(2H，m，Ar)，6.32(1H，s，＝CH-)，3.89(2H，bs，-NCH2)，3.51(4H，s，-NCH2CH2-)，3.46(4H，m，-NCH2CH2-)，3，17(4H，m，-NCH2CH2-)，3.03(4H，m，-NCH2CH2-)。M.p.171℃。實施例2將3-溴-N-[4-(2-嗎啉-4-基-4-氧代-4H-苯并吡喃-8-基)-硫芴-1-基]-丙酰胺(B)的等分試樣(0.5ml)分別加至包含用于合成的各種胺的小瓶中。將反應(yīng)混合物平行地在室溫下攪拌12小時，用最少體積的甲醇稀釋，然后將形成的化合物純化。代表性分析數(shù)據(jù)化合物481HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.32(1H，s，-NH)，8.22(2H，m，Ar)，7.73(2H，m，Ar)，7.58(1H，d，J＝7.82Hz，Ar)，7.40(4H，m，Ar)，6.12(1H，s，＝CH-)3.54(4H，m)，3.44(4H，m)，3.29(2H，m)，3.11(6H，m)，2.37(bs)，1.76(m)?；衔?31HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.19(1H，s，-NH)，8.20(2H，m，Ar)，7.69(2H，m，Ar)，7.53(1H，m，Ar)，7.41(1H，m，Ar)，6.00(1H，s，＝CH-)，4.16(1H，m)，3.68(2H，m)，3.42(8H，m)，3.06(4H，m)，2.62(8H，m)。M.p.148℃。實施例3將8-[1-(2-溴-乙氧基)-硫芴-4-基]-2-嗎啉-4-基-苯并吡喃-4-酮(C)的等分試樣(0.5ml)分別加至包含用于合成的各種胺的小瓶中。將反應(yīng)混合物平行地在室溫下攪拌12小時，用最少體積的甲醇稀釋，然后將形成的化合物純化。代表性分析數(shù)據(jù)化合物781HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.84(1H，m，Ar)，8.28(1H，d，J＝7.85Hz，Ar)，7.76(2H，m，Ar)，7.50(3H，m，Ar)，7.35(1H，d，J＝8.22Hz，Ar)，7.11(1H，d，J＝8.45Hz，Ar)，5.95(1H，s，＝CH)，5.07(2H，d，J＝9.50Hz，-OCH2)，4.47(1H，d，-OCH(CH3))，3.96(1H，d，-CH(CH3))，3.51(8H，m，-NCH2)，3.16(4H，m，-NCH2)，1.22(3H，d，J＝6.20Hz，-CH3)，1.12(3H，d，J＝6.24Hz，-CH3)。M.p.240℃?；衔?01HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.73(1H，dd，J＝5.12Hz，Ar)，8.01(1H，dd，J＝7.85Hz，Ar)，7.81(1H，dd，J＝7.54Hz，Ar)，7.73(1H，dd，J＝7.42Hz，Ar)，7.51(1H，d，J＝8.23Hz，Ar)，7.42(3H，m，Ar)，7.19(1H，d，J＝8.35Hz，Ar)，4.54(2H，m，-OCH2)，3.39(8H，t，J＝4.64Hz，N-CH2)，3.34(2H，m，N-CH2)，3.10(8H，t，J＝4.81Hz，N-CH2)，2.81(3H，s，N-CH3)。M.p.100℃?；衔?11HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.66(1H，dd，J＝9.39Hz，Ar)，7.99(1H，dd，J＝6.19Hz，Ar)，7.79(1H，dd，J＝5.97Hz，Ar)，7.72(1H，dd，J＝7.44Hz，Ar)，7.51(1H，d，J＝7.46Hz，Ar)，7.38(3H，m，Ar)，7.22(1H，d，J＝8.31Hz，Ar)，4.76(2H，t，J＝5.58Hz，-OCH2)，3.79(10H，m，-NCH2&-OCH2)，3.58(2H，m，-NCH2)，3.38(8H，t，J＝5.06Hz，-NCH2)，3.20(1H，s，-NH)，3.09(2H，t，J＝4.89Hz，-NCH2)。M.p.70℃。化合物831HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.55(1H，d，J＝6.67Hz，Ar)，7.99(1H，dd，J＝6.24Hz，Ar)，7.72(2H，m，Ar)，7.45(4H，m，Ar)，6.99(1H，d，J＝8.27Hz，Ar)，6.39(1H，s，＝CH)，4.58(2H，m，-OCH2)，3.54(3H，m，-CH(CH3)2&-NCH2)，3.45(12H，m，-NCH2)，3.17(4H，m，-NCH2)，1.32(6H，d，J＝6.67Hz，(CH3)2CH-)。M.p.158℃?；衔?71HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.57(1H，m，Ar)，8.29(1H，d，J＝7.85Hz，Ar)，7.82(2H，m，Ar)，7.51(4H，m，Ar)，7.12(1H，d，J＝8.23Hz，Ar)，6.59(1H，s，＝CH)，4.85(2H，m，-OCH2)，3.78(2H，m，-NCH2)，3.54(4H，m，-OCH2)，3.47(4H，m，-NCH2)，3.28(4H，m，-NCH2)，1.47(6H，t，J＝7.38Hz，-CH3)。M.p.147℃?；衔?81HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.68(1H，m，Ar)，8.02(1H，dd，J＝7.83Hz，Ar)，7.82(1H，m，Ar)，7.76(1H，dd，J＝7.34Hz，Ar)，7.45(1H，d，J＝7.52Hz，Ar)，7.40(2H，m，Ar).7.25(1H，d，J＝8.42Hz，Ar)，4.84(2H，m，-OCH2)，3.92(2H，m，-NCH2)，3.39(8H，m，-OCH2)，3.11(8H，m，-NCH2)，3.05(6H，s，(CH3)2N-)。M.p.166℃。實施例4將[4-(2-嗎啉-4-基-4-氧代-4H-苯并吡喃-8-基)-硫芴-1-氧基]-乙酸鈉(D)溶解于DMF中，分成15份等分試樣然后加入包含適宜胺的反應(yīng)管中。向每一反應(yīng)管中加入HBTU和HOBT的無水DMF溶液，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。然后將形成的產(chǎn)物純化。實施例58-(1′-乙?；被蜍?4′-基)-2-嗎啉-4-基-苯并吡喃-4-酮(103)(a)4-三氟甲磺酰基-硫芴-1-基胺(xi)將含鋅粉(1.17g，17.96mmol)和化合物三氟-甲磺酸1-硝基-硫芴-4-基酯(v)(1.13g，2.99mmol，1當(dāng)量)的冰醋酸(80mL)溶液在室溫下攪拌過夜。完成后，將溶液通過CeliteTM墊過濾。將CeliteTM濾餅用二氯甲烷洗滌，將有機(jī)相進(jìn)行真空濃縮。將粗產(chǎn)物進(jìn)行快速色譜純化(SiO2)(DCM/汽油4/6，然后6/4)，得到目的化合物，為白色固體(0.84g，收率80％)。m.p＝108℃；Rf＝0.34(DCM/汽油6/4)；LC-MSm/z348[M+1]1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.06-8.09(m，1H)；7.77-7.81(m，1H)；7.36-7.44(m，2H)；7.14(d，J＝8.6Hz，1H)；6.63(d，J＝8.6Hz，1H)；3.94(s，NH2)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ143.9；138.8；136.9；135.4；134.1；126.6；125.4；124.8；123.6；123.3；119.7；119.4(q，J＝317Hz，CF3)；113.0。(b)1-乙?；被蜍倘谆撬狨?xii)向氨基硫芴三氟甲磺酸酯(200mg，0.58mmol)的吡啶(4.0ml)溶液中滴加入乙酸酐(0.29ml，2.88mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時，用水(20ml)稀釋，用乙酸乙酯(3×10ml)萃取。將合并后的有機(jī)層依次用水(2×20ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×20ml)和鹽水(1×20ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并真空蒸發(fā)。將殘余的固體用汽油研制，得到標(biāo)題化合物(xii)。LC/MS(MeOH中)Tr＝3.15min。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ9.51(1H，s，NH)，8.48(1H，d，J＝8.1Hz)，8.25(1H，d，J＝7.42Hz)，7.71-7.53(4H，m)，2.33(3H，s，-CH3)。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ139.81，135.34，129.05，126.56，124.19，120.00，24.09。(c)2-嗎啉-4-基-8-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-4-基)-4a，8a-二氫-苯并吡喃-4-酮(xiii)將2-嗎啉-4-基-8-三氟甲磺?；?苯并吡喃-4-酮(vii)(1.0g，2.637mmol)、雙(頻哪醇基)二硼(0.803g，3.165mmol)和乙酸鉀(0.776g，7.911mmol)、1，4-二烷(30mL)的懸浮液脫氣，即，使氮氣鼓泡通過溶液15分鐘，同時進(jìn)行聲處理。然后，向反應(yīng)混合物中加入(1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(107mg，0.132mmol)和1，1-雙(二苯基膦基)二茂鐵(73mg，0.132mmol)。在氮氣氛下，將反應(yīng)物在90℃下加熱16小時。完成后，將溶液在乙醚中稀釋，將有機(jī)層用飽和NaCl溶液洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮，得到標(biāo)題化合物，為黑色固體(0.80g，收率85％)，無需純化即可使用。LC-MSm/z358[M+1]；1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.20(d，J＝6.3Hz，1H)；7.94(d，J＝7.2Hz，1H)；7.27(t，J＝7.5Hz，1H)；5.51(s，3H)；3.74-3.78(m，4H)；3.61-3.64(m，4H)1.19(s，12H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ178.0；162.0；158.1；140.6；129.6；124.7；86.8；84.3；83.5；66.5；45.1；25.4；24.9。(d)8-(1′-乙酰基氨基硫芴-4′-基)-2-嗎啉-4-基-苯并吡喃-4-酮(103)將xii(100mg，0.26mmol)、xiii(100mg，0.28mmol)、Pd(PPh3)4(14.5mg，0.013mmol)和碳酸鉀(106mg，0.768mmol)的混合物在真空下用氬氣沖洗3次，然后加入二烷(15ml)。將反應(yīng)混合物在85℃下攪拌12小時。將混合物用DCM(50ml)稀釋，將有機(jī)層依次用水(2×20ml)、鹽水(1×20ml)洗滌，干燥(Na2SO4)并真空除去溶劑。將殘余的固體進(jìn)行硅膠色譜純化，用5％甲醇的DCM溶液作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物(103)。Rt＝3.73min；m/z＝471.4；純度＝95％生物學(xué)實施例DNA-PK抑制作用為了評價所述化合物對DNA-PK的體外抑制作用，利用下列試驗測定IC50值。從海拉細(xì)胞核提取物中分離哺乳動物DNA-PK(500ng/ml)(Gell，D.和JacksonS.P.，NucleicAcidsRes.273494-3502(1999))，隨后用Q-瓊脂糖(凝膠)、S-瓊脂糖(凝膠)和肝素瓊脂糖對其進(jìn)行色譜處理。DNA-PK(250ng)活性在30℃下測量，總體積為40μl，在包含下述成分的緩沖液中在聚丙烯96孔板中進(jìn)行25mMHepes，pH7.4，12.5mMMgCl2，50mMKCl，1mMDTT，10％甘油，0.1％NP-40和1mg底物GST-p53N66(融合至谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的人野生型p53的氨基末端66個氨基酸殘基)。為評價混合物，加入不同濃度的抑制劑(在DMSO中，最終濃度為1％)。培養(yǎng)10分鐘后，加入ATP使最終濃度為50μM，同時加入30聚體的雙鏈DNA寡核苷酸(最終濃度為0.5ng/ml)以引發(fā)反應(yīng)。振蕩1小時后，向反應(yīng)物中加入150μl的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)，然后將5μl轉(zhuǎn)移至96孔不透明白色板中，每孔中包含45μlPBS，使GSTp53N66底物與孔結(jié)合1小時。為檢測DNA-PK引起的p53的絲氨酸15殘基上的磷酸化，采用p53磷酸絲氨酸-15抗體(CellSignalingTechnology)用于堿性ELISA過程。然后在ELISA中采用抗兔HRP結(jié)合的二級抗體(Pierce)，然后加入化學(xué)發(fā)光試劑(NENRenaissance)以通過化學(xué)發(fā)光檢測信號，用TopCountNXT(Packard)進(jìn)行計數(shù)。然后利用下面的公式計算各化合物的酶活性結(jié)果以IC50值(50％的酶活性被抑制時的濃度)進(jìn)行如下的討論。這些結(jié)果是用一系列不同的濃度測定的，一般是從10μM至0.01μM。這些IC50值用作確定增加的化合物效力的對比值。存活增效比例存活增效比例(SER)是2戈瑞放射后由DNA-PK抑制劑引起的細(xì)胞殺滅相對于未處理對照細(xì)胞的增效比例。DNA-PK抑制劑是以100nM的固定濃度使用。放射是由Faxitron43855D機(jī)器以1戈瑞/分鐘的放射劑量率提供。通過下面的公式計算在2戈瑞放射下的SER細(xì)胞殺滅的程度采用標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞集落存活試驗來檢測。簡單地說，將用組織培養(yǎng)液處理過的6孔板以適宜的濃度接種海拉細(xì)胞，使每孔的細(xì)胞為100-200個菌落，然后重新放回到培養(yǎng)室以使細(xì)胞附著。4小時后，向細(xì)胞中加入化合物或載體對照。然后，將細(xì)胞在抑制劑存在下培養(yǎng)1小時，然后采用Faxitron43855D柜式X射線機(jī)進(jìn)行照射。然后，再將細(xì)胞培養(yǎng)16小時，然后將培養(yǎng)基用不含DNA-PK抑制劑的新鮮培養(yǎng)基替換。8天后，將形成的菌落固定，用Giemsa(Sigma，Poole，UK)染色，并采用自動菌落計數(shù)儀(OxfordOptronicsLtd，Oxford，UK)進(jìn)行計數(shù)。按照以上描述計算數(shù)據(jù)。所有化合物均顯示出DNA-PK抑制活性，測得的IC50值低于約100nM。顯示出特殊的DNA-PK抑制功效、其IC50小于約10nM的化合物包括化合物5、18、23、24、25、26、29、32、51、53、60、81、82、83、84、85、86、88、90、91、95。所有化合物均顯示出SER值為1或更大。下述化合物的SER值為2或更大化合物1、4、13、24、26、32、34、38、40、41、48、53、56、80、82、84、88、89。權(quán)利要求1.式I的化合物和其異構(gòu)體、鹽、溶劑化物、化學(xué)保護(hù)的形式和前藥其中R1和R2獨立地選自氫、取代或未取代的C1-7烴基、C3-20雜環(huán)基或C5-20芳基，或者與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)；Q為-NH-C(＝O)-或-O-；Y為取代或未取代的C1-5亞烴基；X選自SR3或NR4R5，其中，R3、或R4和R5獨立地選自氫、取代或未取代的C1-7烴基、C5-20芳基或C3-20雜環(huán)基，或者，R4和R5與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)；如果Q為-O-，X還進(jìn)一步選自-C(＝O)-NR6R7，其中R6和R7獨立地選自氫、取代或未取代的C1-7烴基、C5-20芳基或C3-20雜環(huán)基，或者，R6和R7可以與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)；和如果Q為-NH-C(＝O)-，-Y-X還可進(jìn)一步選自C1-7烴基。2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中，Q為-NH-C(＝O)-或-O-。3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中，X為NR4R5。4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中，Y為取代或未取代的C1-3亞烴基。5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中，Y為C1-2亞烴基。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的化合物，其中R4和R5彼此獨立地選自H和取代或未取代的C1-7烴基，或者，R4和R5與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)。7.根據(jù)權(quán)利要求1的或式II的化合物其中R1、R2和Q如式I所定義；n為1-7；和R8選自氫、取代或未取代的C1-7烴基、取代或未取代的C5-20芳基和?；?.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的化合物，其中，R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成具有4-8個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)。9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中，R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成具有6個環(huán)原子的取代或未取代的雜環(huán)。10.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中，R1和R2與它們所連接的氮原子一起形成嗎啉或硫代嗎啉。11.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-10任一項所述的化合物以及可藥用載體或稀釋劑。12.用于治療方法的權(quán)利要求1-10任一項所述的化合物。13.權(quán)利要求1-10任一項所述的化合物在制備用于治療通過抑制DNA-PK而緩解的疾病的藥物中的用途。14.根據(jù)權(quán)利要求13的用途，其中，所述藥物用作在癌癥治療中的輔助劑或用于增強(qiáng)電離放射或化療劑對腫瘤細(xì)胞的治療效果。15.根據(jù)權(quán)利要求13的用途，其中，所述藥物用于治療由逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的疾病。全文摘要式I的化合物和其異構(gòu)體、鹽、溶劑化物、化學(xué)保護(hù)的形式和前藥，其中R文檔編號A61K31/551GK101061111SQ200580039550公開日2007年10月24日申請日期2005年9月20日優(yōu)先權(quán)日2004年9月20日發(fā)明者G·C·M·史密斯,N·M·B·馬丁,K·A·米尼爾,M·G·休默索恩,L·J·M·里戈雷奧,R·J·格里芬,B·T·戈爾丁,D·R·紐厄爾,H·A·卡爾弗特,N·J·柯廷,I·R·哈德卡斯?fàn)?K·薩拉瓦南申請人:庫多斯藥物有限公司,癌癥研究技術(shù)有限公司