專利名稱：用于抑制環(huán)加氧酶和/或5－脂氧化酶的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于預(yù)防或治療由環(huán)加氧酶(以下簡稱‘COX，’)和/或5-脂氧化酶(以下簡稱‘5-LO，’)介導(dǎo)的生理性或病理性病癥的組合物，所述組合物包含鉤藤屬(Unicaria genus)植物或其提取物，特別是單獨的鉤藤屬植物和另外還包含黃芩(Scutellariabaicalensis)和/或茶樹(Camellia sinensis)提取物。
背景領(lǐng)域由于社會經(jīng)濟的發(fā)展導(dǎo)致的生活水平的提高和生活方式的改變，以及平均壽命的增加，隨著老齡化人口的增加，已給疾病的方面帶來巨大的變化，慢性疾病在死亡的病因中的份量已超過流行病?，F(xiàn)在，慢性病在醫(yī)療花費上的增加、所需的醫(yī)療標(biāo)準(zhǔn)的增加、尋找降低其的方法等方面吸引了更多的社會經(jīng)濟關(guān)注。最具代表性的慢性病包括關(guān)節(jié)炎、認(rèn)知功能的降低、皮炎、胃炎、高血壓、糖尿病、牙周炎等。
關(guān)節(jié)炎是限制人類的日常生活活動的最重要的病因，且在女性和老人中發(fā)病頻率特別高?？蓪㈥P(guān)節(jié)炎分成骨關(guān)節(jié)炎(退行性關(guān)節(jié)炎)和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
由于身體關(guān)節(jié)的退化導(dǎo)致產(chǎn)生骨關(guān)節(jié)炎，其伴隨著源于骨之間的連接區(qū)域(臀部、膝蓋、頸、腰、手指、足趾指節(jié)等)的關(guān)節(jié)軟骨的磨損或破壞的疼痛和炎癥。一般地，關(guān)節(jié)軟骨被破壞并可再生，但如果被破壞的量超過再生軟骨的量，那么關(guān)節(jié)軟骨吸收碰撞的量將減少或被磨破。從而，關(guān)節(jié)之間的骨相互之間會撞在一起，然后產(chǎn)生巨痛。這樣的關(guān)節(jié)軟骨的破壞是骨關(guān)節(jié)炎的開始，如果不進行治療將導(dǎo)致巨痛。
類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是以多種方式在許多關(guān)節(jié)中發(fā)生的炎性自身免疫疾病。在關(guān)節(jié)炎患者的情況下，在關(guān)節(jié)的滑膜組織開始超常增生的同時，巨噬細胞、樹突狀細胞和激活的T淋巴細胞和B淋巴細胞遷移入滑膜組織，且多形核細胞在滑膜液中和軟骨的表面上積累以誘導(dǎo)炎癥。推斷滑膜組織的這種炎癥是由T淋巴細胞和不再被識別的自身抗原的反應(yīng)誘導(dǎo)的。在該反應(yīng)中，浸潤入大部分組織的T淋巴細胞不在細胞表面顯示激活標(biāo)記，且細胞因子也幾乎不表達。然而，在具有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎癥狀的滑膜組織和滑液中觀察到大量來源于巨噬細胞的細胞因子。代表性的細胞因子包括已知刺激滑膜成纖維細胞生長的白細胞介素-1(IL-1)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。這些實驗結(jié)果支持這樣的理論，即T細胞在誘導(dǎo)滑膜組織的炎癥中起著非常重要的作用，此后由源于激活的滑膜細胞的細胞因子保持炎癥癥狀[Carson D.A.等人，J.Clin.Invest.，87，pp379-383，1991Tighe H.等人，J.Exp.Med.，177，pp10-118，1993Burmester G.R.等人，Arthritis Rheum，40，pp5-18，1997Panayi G.S.，Curr.Opin.Rheumatol.，9，pp236-240，1997]。
為了減輕疼痛(包括關(guān)節(jié)炎)通常使用止痛藥或抗炎藥，代表性的藥物是具有COX抑制性效應(yīng)的NSAID(非類固醇類抗炎藥)[UK-1，RBraham，B Dawson，C Goodman，The effect of glucosaminesupplementation on people experiencing regular knee pain，Br.J.Sports.Med.2003；3745-49]。NSAID例如阿斯匹林是最好出售的處方藥物，且用于治療退行性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、頭痛，因為其對消炎、減輕發(fā)燒和緩和疼痛是有效的。在這些NASID用于關(guān)節(jié)炎的情況下，其輕微地改善了癥狀，但不能阻止關(guān)節(jié)區(qū)域的軟骨損失也不能阻止疾病的進展。此外，其具有嚴(yán)重的副作用如引起胃腸疾病，從而大約一半采用NASID的患者在一年內(nèi)停止使用它們。因此，存在對新的治療劑的需要。已開發(fā)了選擇性抑制COX-2的藥物或同時抑制COX-2和5-LO的治療劑。
當(dāng)來自細胞膜的花生四烯酸的分離和代謝在許多途徑中產(chǎn)生促炎癥反應(yīng)代謝產(chǎn)物時，引起炎癥反應(yīng)。導(dǎo)致炎癥的兩個重要途徑，COX-2和5-LO，是在花生四烯酸(AA)級聯(lián)反應(yīng)中起著重要作用的酶，且這些途徑和產(chǎn)生分別在引發(fā)和促進炎癥反應(yīng)中起著重要作用的白細胞三烯和前列腺素E的途徑同時發(fā)生。COX是在細胞膜的磷脂轉(zhuǎn)變成花生四烯酸后在花生四烯酸轉(zhuǎn)變成前列腺素(以下簡稱‘PGs’)的過程中起著催化劑作用的酶。依賴于其種類，該產(chǎn)生的PG可刺激平滑肌收縮，和根據(jù)動物的不同而減少或增加血壓或血液粘聚力。此外，其起著加速膜中的離子運輸、刺激炎癥和阻止脂質(zhì)組織中的脂質(zhì)降解的作用。因此，作為產(chǎn)生這些炎癥介質(zhì)的原因的酶已成為針對炎癥治療的許多新藥的靶，所述炎癥是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、皮炎、認(rèn)知功能相關(guān)性疾病和癌癥或退行性疾病的病因。
在本領(lǐng)域內(nèi)已知兩類COX，COX-1和COX-2。COX-1如終如一地在大多數(shù)組織中表達，且起著“管家基因”的作用。即，其參與PG的產(chǎn)生和擴張血管以維持腎功能和血小板血栓烷的產(chǎn)生，所述PG存在于胃粘膜中。
COX-2不在大多數(shù)正常的組織中表達，且在疾病或生理性病癥下由以前表達的生長因子誘導(dǎo)。特別地，已知其由導(dǎo)致促炎癥的細胞因子廣泛誘導(dǎo)。
已沿用至今的用于治療炎癥的NSAID甚至抑制在正常組織中一貫表達的COX-1，從而導(dǎo)致副作用例如胃粘膜侵蝕、潰瘍等。最近，已發(fā)展了作為改善該狀況的新藥物的COX-2選擇性抑制劑。塞來考昔是現(xiàn)在在臨床上用作抗炎劑和抗癌劑的代表性COX-2選擇性抑制劑。其對于骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療和存在于具有家族性腺瘤性息肉病(FAP)的患者的結(jié)腸中的息肉的數(shù)目的減少是有效的。
參與在炎癥反應(yīng)中將花生四烯酸代謝成化學(xué)遞質(zhì)的代謝過程的另一種酶是脂氧化酶。存在三種脂氧化酶，5-、12-和15-脂氧化酶，其中5-脂氧化酶參與通過5-HPETE從花生四烯酸合成白細胞三烯A4、B4、C4、D4、E4(LTA4、LTB4、LTC4、LTD4、LTE4)等的合成過程。Samuelsson等人公開了在這些白細胞三烯中，LTB4是在炎癥反應(yīng)的第二階段中起作用的白細胞中的一種產(chǎn)物，且主要在多形核白細胞(PMNL)中生物合成，且已知顯示功能例如白細胞凝集、浸潤、趨化性和溶酶體酶的分離等。且，許多科學(xué)家已進行了5-LO激活相關(guān)性因子和用于抑制這些激活作用的藥物開發(fā)的研究，但收效甚微，只有ETYA和BW755C已被發(fā)展為藥物[Kyung-rak MIN等人，Activation of 5-lipoxygenase andleukotriene B4biosynthesis inhibiting material，Pharmacology，第33(6)卷，319-323(1989)]。
COX抑制劑的反應(yīng)機制和大多數(shù)常規(guī)的NSAID相同，因此將COX用于治療許多病癥例如由短暫病癥和慢性病癥(其中炎癥起著重要作用)中的炎癥產(chǎn)生的疼痛和腫脹。短暫病癥是指輕微擦傷、曬傷、接觸傳染性皮炎、頭痛、月經(jīng)痛等。慢性疾病是指認(rèn)識機能的疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎等。
COX抑制劑也用于皮膚病癥如皮膚硬結(jié)(skin scleroma)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)[Goebel等人，Chem.Res.Tox.，12488-500，1999，Patrono等人，J.Clin.Invest.，761011-1018，1985]。此外，COX抑制劑也用于減輕炎癥性但非風(fēng)濕樣皮膚病癥例如牛皮癬，其中其通過減少因前列腺素的過度產(chǎn)生而導(dǎo)致的炎癥來顯示直接的效應(yīng)[Fogh等人，Acta Derm Venerologica，73191-193，1993]。
除了其用作抗炎藥的用途外，COX抑制劑在癌癥治療中起著潛在的作用。在許多人類惡性腫瘤中已觀察到COX的過度表達，且COX抑制劑顯示對于遭受皮膚癌、乳腺癌和膀胱癌的動物的治療是有效的。盡管未完全鑒定反應(yīng)機制，但已顯示COX的過度表達抑制細胞死亡和增加致瘤細胞類型的侵襲性[Dempke等人，J.Can.Res.Clin.Oncol.，127411-417，2001，Moore和Simmons，Current Med.Chem.，71131-44，2000]。
此外，由于近年來科技術(shù)進步的原因，已確定了COX表達、全身性炎癥和老年癡呆癥的發(fā)病機理之間的相互關(guān)系[Ho等人，Arch.Neurol.，58487-92，2001]。在動物模型中，過度表達COX酶的轉(zhuǎn)基因小鼠具有更易受傷害的神經(jīng)元。NIA(美國國家老人學(xué)研究院National Institute on Aging)開始了驗證NSAID是否可延遲老年癡呆癥的進展的臨床試驗，且許多報導(dǎo)顯示炎癥反應(yīng)中產(chǎn)生的COX的抑制有助于認(rèn)知功能的改善[Cernak I.，ExpBrain Res.，147(2)193-9，2002，Casolini P.，J Neurosci Res.，68(3)337-43，2002，Andreasson KI.，J Neurosci.，21(20)8198-209，2001]。此外，證明了COX抑制劑對于精神病是有效的[Muller N.，Expert Opin Investig Drugs，13(8)1033-44，2004]。
此外，有報導(dǎo)顯示抑制COX-2和5-LO兩者的抑制劑在小鼠模型中抑制年老心臟的動脈管收縮[Gok等人，Pharmacology，604146，2000].
黑兒茶(Uncaria gambir)是屬于茜草家族的植物。其自然地生長于整個東印度群島，且在馬來西亞、中國、印度、蘇門答臘島和文萊被栽培。白色的花開于葉腋處。當(dāng)花凋落時，花柄彎曲成鉤狀以纏繞其他植物。在播種黑兒茶種子一年后，每隔4至8個月，可通過切割和提取葉莖的末端獲得所謂的水提取物。主要可從6年生的樹獲得該水提取物。當(dāng)樹長至大約15年時，應(yīng)當(dāng)耕犁土壤以分離根部。該水提取物包含d-和dl-兒茶素(兒茶酚)、鞣酸、槲皮素、和生物堿黑兒茶堿。
黑兒茶的提取物用于藥用目的，也主要用于棕色染料或皮革制革。特別地，東南亞的一些人通過將和水混合的黑兒茶涂抹在Bin-ran-za上來食用該混合物。作為收斂劑的水提取物廣泛地用于生產(chǎn)嚼服藥物例如In-dan。按照Dong-Eui治療法，將所述水提取物作為用于傷口、口中的瘡、血便、血尿、咯血、白帶和其他皮膚病的收斂劑或凝血劑[韓國食品與藥品管理局(Korea Food and DrugAdministration)]。此外，Dong-Eui-Bo-Gam教導(dǎo)可將黑兒茶作為“saengbomyungdan、yangmaechang、chunpochang、whanchang和gyungbundok.”用于因腫脹的腱和骨引起的疼痛的治療。
黃芩(Scutellariae Radix)是指屬于唇形科屬的黃芩(Scutellaria baicalensis)(多年生草本植物)的根。該植物是多年生的且在2年后的7月至9月開花。莖生長得直且粗，但在肥沃的土壤中，其生長歪斜或甚至倒伏。莖的高度在40至60cm范圍內(nèi)，葉是對稱的且呈避雷針形狀，無葉柄?；ㄊ强偁罨ㄐ?，且在枝的末端聚集和開花，花的形狀是唇形的和開放的。在種植3至4年后的秋季或春季采集根，然后在除去周皮后，將其風(fēng)干并用于藥物目的。此時，根的顏色是黃色。一般地，該藥草的木質(zhì)部和薄壁組織都很大，從而髓大部分是空的，因此一般稱為腐朽髓。然而，在日本，其具有充實的髓的鮮根被稱為Cha-geum，具有空髓的根稱為Sook-geum、粉碎的根稱為Pyun-geum等。在韓國，其也被稱為Ko-Geum、Won-geum、Kyung-geum，、Kong-jang等。
黃芩，中國藥用植物，包含大量的無B環(huán)類黃酮，所述無B環(huán)類黃酮包括黃芩黃素(baicalein)、黃芩苷(baicalin)、漢黃芩黃素(wogonin)和baicalenoside。常規(guī)地，黃芩用于病癥的治療，所述治療包括排除、清瀉火氣、濕溫、夏季發(fā)熱綜合癥、煩渴、癰、猩紅熱、痢疾、嘔血和鼻衄。此外，其還用于預(yù)防流產(chǎn)?，F(xiàn)在黃芩在臨床上用于治療病癥，包括兒科細菌性腹瀉、高血壓、支氣管哮喘和上呼吸道感染。報導(dǎo)顯示黃岑根的治療支氣管哮喘的藥理作用和無B環(huán)類黃酮的存在以及嗜酸性粒細胞浸潤相關(guān)性嗜酸性粒細胞活化趨化因子的抑制相關(guān)聯(lián)[Nakajima等人，(2001)Planta Med.67(2)132-135]。
近年來作為健康食物吸引關(guān)注的茶樹(Camellia sinensis)包含許多有用的組分。在所述組分中，兒茶素化合物具有相對高的抗氧化作用，且很多關(guān)于其的研究在進行中。茶樹中的兒茶素化合物包括表沒食子兒茶素(EGC)、表兒茶素(EC)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)等。除了優(yōu)秀的抗氧化作用外，兒茶素化合物具有這樣的作用如抗癌作用、免疫系統(tǒng)增強、皮膚癌預(yù)防、抗血栓作用、心臟病預(yù)防、膽固醇預(yù)防等作用。因此，一直在飲料和制藥領(lǐng)域內(nèi)對茶樹中的該兒茶素化合物進行研究。所述研究一直在中國活躍地進行著，且在中國，茶樹的許多產(chǎn)品已被商品化。Simingshan natural biological product Co.，Ltd.，China tianbaobiochemical plant和HealthLand Supplies Ltd.，等是已進行茶樹提取物的銷售和研究的龍頭公司。在日本，作為對兒茶素化合物研究的結(jié)果，由Daedong pharmaceuticals Co.，Ltd生產(chǎn)的‘β-兒茶素’和由Samjung agriculture and forestry Co.，Ltd生產(chǎn)的‘兒茶素化合物粉劑’已被商品化，且已傾注持續(xù)的研究和投資以發(fā)展具有更高產(chǎn)量和經(jīng)濟的方法。
茶樹的另一種有效成分，多酚黃酮，抑制由于一定量的COX-2、NFκB(核因子κB)和bcl-X(L)基因的mRNA而變成癌性的結(jié)腸細胞的生長。如可從下面舉例說明的基本結(jié)構(gòu)中所看到的，無B環(huán)黃酮和無B環(huán)黃酮醇是芳香化合物中取代基不存在于B環(huán)結(jié)構(gòu)中的類黃酮化合物的特定種類[Korean Patent Laid-open Publication No.10-2004-0025884].
已有報導(dǎo)顯示鉤藤屬植物(包括黑兒茶)可用作抗炎藥物。特別地，還不清楚黑兒茶和黃芩和/或茶樹的組合是否可用作抗炎藥，特別是預(yù)防或治療由COX途徑和/或5-LO途徑介導(dǎo)的疾病和病癥包括骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的抗炎藥。
本發(fā)明的公開內(nèi)容和西方先進國家中的發(fā)展策略截然不同，本發(fā)明者已持續(xù)地研究天然產(chǎn)品以發(fā)展新的COX和/或5-LO抑制性藥物。作為結(jié)果，其發(fā)現(xiàn)鉤藤屬植物(包括黑兒茶)具有COX和/或5-LO抑制作用。此外，為發(fā)現(xiàn)和所述提取物一起顯示協(xié)同效應(yīng)的天然藥物，其已使用體外試驗(COX-1和2，5-LO)和體內(nèi)試驗[腫脹，CIA(Collagenase Induced Arthritis)模型]以及GAG分析進行了許多實驗，以確定關(guān)節(jié)保護效應(yīng)。作為結(jié)果，其還發(fā)現(xiàn)組合黃芩提取物和/或茶樹提取物的混合物顯示對COX和/或5-LO抑制活性的極大提高的協(xié)同效應(yīng)，且使用COLBY公式(COLBY S.R.，Calculating synergistic and antagonistic response of herbicidecombinations，Weeds 15，20-22，1967)測量協(xié)同效應(yīng)以完成本發(fā)明。
因此，本發(fā)明的目的是提供組合物，所述組合物用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥，其包含顯示COX和/或5-LO抑制作用的新的植物(即，鉤藤屬植物)提取物或另外還包含黃芩提取物和/或茶樹提取物。
本發(fā)明的另一個目的是提供用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的組合物，所述組合物包含黃芩提取物和/或茶樹提取物。
本發(fā)明的另一個目的是提供預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的上述組合物的用途。
本發(fā)明的另一個目的是提供通過給哺乳動物施用治療有效量的上述組合物來預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供制備用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的試劑的方法，通過將鉤藤屬植物和黃岑提取物和/或茶樹提取物混合，或?qū)ⅫS岑提取物和茶樹提取物混合來制備所述試劑。
附圖概述

圖1是顯示實施例1和2的消炎活性的圖。
圖2是顯示實施例5至8的消炎活性的圖。
圖3是顯示實施例5和實施例1和3的消炎活性的圖。
圖4是顯示實施例6和實施例1和4的消炎活性的圖。
圖5是顯示實施例7的消炎活性的圖。
圖6是顯示實施例8和實施例3和4的消炎活性的圖。
圖7是顯示在施用實施例5后顯示小鼠的爪的腫脹隨時間變化的圖。
圖8是顯示在施用實施例5后顯示關(guān)節(jié)炎指數(shù)隨時間變化的圖。
圖9是顯示在施用實施例5后顯示CIA小鼠關(guān)節(jié)的軟骨組織的圖。
圖10是顯示實驗例1至4的關(guān)節(jié)保護效應(yīng)的圖。
圖11是實驗例5至8的關(guān)節(jié)保護效應(yīng)的圖。
進行本發(fā)明的最佳模型為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的、包含鉤藤屬植物或其提取物的組合物。
本發(fā)明也提供了用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的、包含所述鉤藤屬植物和額外地黃芩提取物和/或茶樹提取物的組合物。
本發(fā)明也提供了用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的、包含黃芩提取物和/或茶樹提取物的組合物。
本發(fā)明也提供了使用包含鉤藤屬和其提取物的組合物、包含黃芩提取物和茶樹提取物的組合物和包含鉤藤屬植物或其提取物和黃岑提取物和/或茶樹提取物的組合物預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的用途。
本發(fā)明也提供了通過給哺乳動物施用治療有效量的包含鉤藤屬植物或其提取物的組合物、或包含黃芩提取物和茶樹提取物的組合物來預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的方法。
本發(fā)明也提供了通過以0.1～10∶0.1～10的重量比將鉤藤屬植物或其提取物和黃岑提取物和/或茶樹提取物混合或以0.1～10∶0.1～10的重量比將黃岑提取物和茶樹提取物混合來制備用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的試劑的方法。
優(yōu)選地選擇一種或多種鉤藤屬植物，所述植物選自黑兒茶、U.attenuata Korth.、U.borneensis Havil.、U.callophyllaKorth.、U.elliptica R.Br.、U.guianensis(Aubl.)Gmel.、U.homomalla Miq.、U.lanosa var.glabrata(B1.)Ridsd.、U.macrophylla Wall.、U.rhynchophylla Miq.、U.sinensis(Oliv.)Havil.、U.tomentosa(Willd.)DC.、U.yunnanensis Hsia K.C.、U.hirsuta Havil.和U.lanosa var.appendiculata f.setiloba(Benth.)Ridsd.，特別優(yōu)選地使用黑兒茶。
在本發(fā)明組合物中，可以可商購獲得的常規(guī)藥草材料的形式使用鉤藤屬植物、黃岑和茶樹，且也可通過藥草、枝、殼、葉、芽、根、內(nèi)皮等形式，優(yōu)選地以粉末或提取物的形式使用黃岑和茶樹。
可通過用水、有機溶劑或其混合溶劑提取鉤藤屬植物、黃岑和茶樹來使用本發(fā)明的鉤藤屬植物、黃芩和茶樹提取物。所有常規(guī)溶劑可用作上述有機溶劑，優(yōu)選地極性溶劑例如水、C1-4醇等，或非極性溶劑例如正-己烷、二氯甲烷等或其混合溶劑。
本發(fā)明的非極性溶劑提取物包括用選自正-己烷、二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯的非極性溶劑，優(yōu)選地正-己烷、二氯甲烷、或乙酸乙酯萃取的提取物。此外，本發(fā)明的極性溶劑提取物包括用選自丙酮、水、C1-4醇例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等或異丙醇的極性溶劑萃取的提取物。
可通過常規(guī)的方法例如熱水提取、超聲降解法等進行上述提取，且可將提取物的凍干制品用于本發(fā)明組合物。
此外，可通過常規(guī)的分級分離法或?qū)游鲞M一步純化所述提取物，且這些分級分離的材料或純化的材料也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
本發(fā)明的組合物顯示優(yōu)良的COX和/或5-LO抑制效應(yīng)，且通過使用天然的草藥可用于預(yù)防或治療由不同的COX途徑和/或5-LO途徑介導(dǎo)的疾病和病癥(特別地包括骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)而無任何副作用。
在本說明書中，術(shù)語，“由COX和/或5-LO途徑介導(dǎo)的生理性和病理性病癥”包括，例如，選自炎性疾病、月經(jīng)痛、動脈硬化、心臟病發(fā)作、肥胖癥、糖尿病、X綜合征、認(rèn)知功能下降的疾病、老年癡呆癥、呼吸系統(tǒng)變應(yīng)性反應(yīng)、慢性靜脈功能不全、痔瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性緊張性頭痛、偏頭痛、炎性腸病、由病毒、細菌和孢子引起的局部感染、曬傷、燒傷、接觸傳染性皮炎、黑色素瘤和癌癥的疾病和病癥。
在本發(fā)明的組合物中，可單獨地使用鉤藤屬植物，特別是黑兒茶，但優(yōu)選地使用組合的組合物，即將鉤藤屬植物或其提取物額外地和黃芩提取物、茶樹提取物、或黃岑和茶樹的提取物混合以顯示協(xié)同效應(yīng)。
特別地，如下列實驗性實施例中所顯示的，單獨的黃岑不顯示COX和/或5-LO抑制效應(yīng)。然而，令人驚奇的是，當(dāng)將鉤藤屬植物，特別是黑兒茶提取物和黃岑和/或茶樹提取物一起施用時，和當(dāng)施用黃岑和茶樹提取物的組合物時，觀察到協(xié)同效應(yīng)。
在本發(fā)明的組合物中，使用COLBY公式(COLBY S.R.，Calculatingsynergistic and antagonistic response of herbicidecombinations，Weeds 15，20-22，1967)測量和確認(rèn)在施用所述組合物時，和提取物的單獨施用相比的協(xié)同效應(yīng)。
如上所述，當(dāng)將鉤藤屬植物，特別是黑兒茶和黃岑和/或茶樹提取物一起使用時，其黑兒茶∶黃岑∶茶樹的重量比可為0.1～10∶0.1～10∶0.1～10，優(yōu)選地1～10∶1～10∶1～10，優(yōu)選地1～7∶1～7∶1～7。且，當(dāng)將黃岑和茶樹組合時，其可以0.1～10∶0.1～10、優(yōu)選地1～10∶1～10、更優(yōu)選地1～7∶1～7的重量比混合。
可按照制藥領(lǐng)域內(nèi)的方法，通過將本發(fā)明的組合物和藥物可接受的媒介物、賦形劑等混合來將其配制成常規(guī)的藥劑，例如，溶液例如飲料、糖漿劑、膠囊劑、顆粒、片劑、粉劑、丸劑、軟膏劑和乳劑、皮膚外用制劑例如凝膠劑等；且所述組合物可通過口服或胃腸外施用。優(yōu)選地，可在飲食之前或之后以膠囊劑、片劑和飲料的形式施用本發(fā)明的組合物以獲得快速效應(yīng)。
包含本發(fā)明的組合物的膠囊劑、片劑、粉劑、顆粒劑、溶液、丸劑等優(yōu)選地用作藥物或保健品。在本發(fā)明中，“保健品”是指通過使用具有對人體有用的功能的物質(zhì)或成分，以片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、溶液、丸劑等形式制備和加工的食物產(chǎn)品。
依賴于活性成分至身體的吸收程度、排泄率、年齡、體重、性別和患者的身體狀況、治療疾病的嚴(yán)重度等適當(dāng)?shù)厥┯帽景l(fā)明的組合物。然而，一般地，優(yōu)選地以每天0.01～500mg/kg，優(yōu)選地0.1～200mg/kg，每天1至3次給成人施用溶液形式的本發(fā)明組合物。在其他制劑中，可口服施用基于上述的溶液劑量的合適的量。
在下文中，將參考下列實施例更詳細地描述本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍不應(yīng)當(dāng)被解釋為以任何方式受其限制。
實施例1)黑兒茶、黃岑和茶樹提取物的制備實施例1.黑兒茶熱水提取物的制備用熱蒸氣蒸黑兒茶的嫩葉(50g)。然后，通過加入純化水并擠出汁液來提取它們，緩慢地冷卻和重結(jié)晶收集的汁液溶液以產(chǎn)生7.87g黑兒茶提取物粉劑(產(chǎn)率15.74％)。
實施例2.黑兒茶乙醇提取物的制備通過加入乙醇并擠出汁液來提取黑兒茶的嫩葉(50g)，緩慢地冷卻和再結(jié)晶收集的汁液溶液以產(chǎn)生7.65g黑兒茶提取物粉劑(產(chǎn)率15.3％)。
實施例3.黃岑提取物的制備將黃芩(50g)置于1L圓底燒瓶中，然后加入純化水(350ml)，在80℃于回流條件下提取2小時。冷卻、過濾和濃縮提取物，產(chǎn)生16.5g黃岑提取物粉劑(產(chǎn)率32.95％)。
實施例4.茶樹提取物的制備將茶樹(50g)置于1L圓底燒瓶中，然后加入含水乙醇(500ml)，在85℃于回流條件下提取3小時。冷卻、過濾和濃縮提取物，產(chǎn)生13.5g茶樹提取物粉劑(產(chǎn)率27％)。
實施例9.其他鉤藤屬植物的提取將Uncaria sinensis(Olv.)Havil.(50g)置于1L圓底燒瓶中，然后加入純化水(500ml)，在回流條件下提取5小時。冷卻、過濾和濃縮提取物，產(chǎn)生7g Uncaria sinensi提取物粉劑(產(chǎn)率14％)。
2)混合物的制備實施例5.黑兒茶和黃芩的混合物的配制如下制備黑兒茶和黃芩的混合物。

實施例6.黑兒茶和茶樹的混合物的制備如下制備黑兒茶和茶樹的混合物。

實施例7.黑兒茶、黃芩和茶樹的混合物的制備如下制備黑兒茶、黃芩和茶樹的混合物。

實施例8.黃芩和茶樹的混合物的制備如下制備黃芩和茶樹的混合物。

實驗性實施例1)COX和/或5-LO抑制活性的檢測(1)COX抑制活性的檢測①試驗材料-材料COX分析試劑盒(Cayman，Cat#760111)、吲哚美辛(Cayman，Cat#70270)、AA-861(Biomol，Cat#EI-216)、H2O2(Aldrich，Cat#216763)-樣品實施例1至8-濃度10、50、500、1000μg/ml②檢測方法將分析緩沖液(160μl)和血紅素(10μl)置于背景小孔(Background Wells)中。將分析緩沖液(150μl)、血紅素(10μl)和酶(COX-1或COX-2，10μl)置于100％的起始活性小孔(InitialActivity Well)中。將分析緩沖液(150μl)、血紅素(10μl)和酶(COX-1或COX-2，10μl)置于抑制劑小孔(Inhibitor Well)中。將溶解在DMSO中的樣品(10μl)置于抑制劑小孔中。將用于溶解樣品的溶劑DMSO(10μl)，而非樣品，置于100％的起始活性小孔和背景小孔中。在緩慢地?fù)u動后，將其在25℃下反應(yīng)5分鐘。將20μl比色底物加入每個小孔。然后，將20μl花生四烯酸加入每個小孔(終濃度100μM)。在緩慢搖動后，讓其在25℃下反應(yīng)5分鐘。停止反應(yīng)，測量590nm(590～611nm)處的吸光率，然后通過下列計算公式以百分比計算試驗組和對照組比較的相對活性。
-計算公式抑制的％＝{(100％-抑制)/(100％-空白))×100③試驗結(jié)果單一提取物和混合物的對COX-1、2的50％抵制活性(單位μg/ml)

④結(jié)論在單一提取物中，根據(jù)實施例1＝實施例2□實施例3的結(jié)果，黑兒茶提取物顯示優(yōu)良的COX抑制活性。且，其中所述單一提取物以適當(dāng)?shù)谋壤旌系幕旌辖M合物顯示以實施例6＞實施例7＞實施例8＞實施例5的順序排列的COX抑制活性。
如從上述試驗所知的，黑兒茶粗提取物(實施例1和實施例2)顯示優(yōu)良的COX抑制活性，而黃芩的5-LO抑制活性不顯著。然而，令人驚奇的是，所述提取物的混合物顯示協(xié)同作用的COX抑制活性。
(2)5-LO(LTB4產(chǎn)品抑制)①試驗材料RPMI1640培養(yǎng)基sigma Cet#R8758T75瓶Corning(430641)抗生素Gibco(15240-062)FBSbiowhittaker(14-471QM)微量管sarstedt(72.690)PBSbiowhittaker(17-512F)離心機Hanil(micro-12)-樣品實施例1至8-濃度0.025、0.05、1、20μg/ml(實施例1至3)0.005、0.05、0.5、5μg/ml(實施例4至7)②試驗方法在5％CO2和37℃的條件下，將HT-29細胞系(韓國細胞系文庫Korea Cell Line Bank)在T15培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)于20mL RPMI 1640培養(yǎng)基(10％的FBS)中，且將所述細胞系每周傳代2-3次。將HT-29細胞系以1.5-2.0×105/小孔/2ml播種于6孔培養(yǎng)板中，然后在5％ CO2和37℃的條件下培養(yǎng)直至其顯示大約60-70％的融合。在除去培養(yǎng)基后，用PBS(biowhittaker，17-512F)洗滌細胞2-3次，然后向其中加入2mL新培養(yǎng)基(5％FBS，biowhittaker，14-471QM)。處理樣品使其終濃度為0、0.005、0.05、0.5和5μg/ml。此外，處理LPS以達到1μg/ml的終濃度。以用于溶解樣品的溶劑(低于0.1％ DMSO)，而非樣品，處理未處理的N-對照。P-對照只用LPS處理。將每個樣品在5％ CO2和37℃的條件下反應(yīng)24小時。在反應(yīng)停止后，用PBS洗滌細胞兩次，用刮器刮取細胞，將其置于微量管中，然后在超過10,000rpm下離心5分鐘，之后收集細胞。在棄去上清液后，向其中只保留沉淀的管中加入裂解緩沖液并在冰中處理5分鐘，然后細胞被破壞。將其在超過10,000rpm下離心5分鐘后，留下細胞碎片且只將上清液收集入新的管中。將該樣品在-70℃下貯存直至用于LTB4ELISA分析。
用試劑盒中的EIA緩沖液以1/20稀釋細胞裂解物。將LTB4標(biāo)準(zhǔn)制備為0、0.04、0.1、0.2、0.4、1.0、2.0和4.0μg/ml。通過用EIA緩沖液以1/50將其稀釋來制備白細胞三烯C4酶綴合物。將50μl標(biāo)準(zhǔn)或樣品和50μl稀釋的酶綴合物置于包被有抗體的96孔板中。在緩慢搖動后，讓其在室溫下加蓋反應(yīng)1小時。
在反應(yīng)停止后，用300μl洗滌緩沖液洗滌板3次。向板中加入150μl底物，然后在緩慢搖動下反應(yīng)30分鐘。測量650nm處的吸光率，通過下列計算公式以百分比計算和對照組相比的試驗組的相對活性。按照Bradford蛋白的量對各值進行標(biāo)準(zhǔn)化。
-計算公式抑制的％＝[(NC-PC)-(NC-S)/(NC-PC)]×100③試驗結(jié)果單一提取物和混合物的對5-LO的50％抑制活性(單位μg/ml)

④結(jié)論單一提取物的5-LO抑制活性的順序是實施例1＝實施例2□實施例3。且，其中以適當(dāng)比例混合所述單一提取物的混合物以實施例6＞實施例7≥實施例8＞實施例5的順序顯示5-LO抑制活性。和上述關(guān)于COX-1、2的試驗相似，在本試驗中，黑兒茶粗提取物也顯示優(yōu)良的5-LO抑制，而黃芩提取物的5-LO抑制活性不顯著。然而，令人驚奇的是，所述提取物的混合物顯示協(xié)同作用的5-LO抑制活性。
(3)耳腫脹抑制試驗(腫脹抑制試驗)
①試驗材料-試驗動物ICR小鼠(Daehan Bio Link)-炎癥誘導(dǎo)花生四烯酸(2mg/20μl)-樣品實施例1至8-陽性對照吲哚美辛(25，50mg/kg)-濃度50、75、100mg/kg②試驗方法在炎癥產(chǎn)生之前24小時和1小時時，給試驗動物(ICR小鼠，Daehan Bio Link)施用試驗材料。然后，以2mg/20μl的濃度給試驗動物的右耳施用花生四烯酸，給左耳施用作為對照溶劑的丙酮，然后用測徑器測量用于溶劑比較的耳的厚度。作為對照材料，在施用花生四烯酸之前24小時和1小時，口服施用吲哚美辛，其是NSAID的代表性消炎和消炎止痛藥。在第1、2和3小時時測量對其施用花生四烯酸和丙酮的試驗動物的耳的厚度。
③結(jié)論實施例1和2的消炎活性顯示于圖1；實施例5和實施例1、3的消炎活性顯示于圖3；實施例6和實施例1、4的消炎活性顯示于圖4；實施例7和實施例1、3、4的消炎活性顯示于圖5；和實施例8和實施例1、4的消炎活性顯示于圖6(*P＜0.05，**P＜0.01)。
如從上面圖1至圖6所知的，黑兒茶單一提取物和其混合物顯示消炎作用。特別地，實施例1顯示比實施例3更強的消炎作用，且其實施例5的混合物(100mg/kg)顯示來自單一提取物的混合的協(xié)同效應(yīng)。且，為實施例1和3的混合物的實施例5顯示消炎活性的濃度依賴性增加的趨勢。
如上所示，當(dāng)將實施例1和實施例3或?qū)嵤├?混合時，或?qū)嵤├?和實施例4混合時，和單獨的實施例1相比，組合物(實施例5至8)顯示改善的耳腫脹抑制作用。
(4)通過CIA模型進行的消炎活性的驗證①試驗材料-試驗動物DBA/1小鼠(Oriental Co.，Ltd.)
-陽性對照吲哚美辛(50mg/kg)-對照材料葡糖胺(250mg/kg)-樣品實施例5-濃度100、200mg/kg②試驗方法使用8周的DBA/1小鼠(Oriental Co.，Ltd)誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎。為免疫小鼠，給小鼠的尾部施用100μg懸浮CFA(完全弗氏佐劑)的膠原。21天后，100μg懸浮CFA(完全弗氏佐劑)的膠原誘導(dǎo)了關(guān)節(jié)炎。從第21天，將小鼠分為5組，每組5只小鼠，且給小鼠施用制備的提取物直至第56天。每周一次，測量小鼠的重量、具有腫脹的爪的厚度和分?jǐn)?shù)(0正常，1輕微發(fā)紅，2足指腫脹，3全面嚴(yán)重的腫脹，4整個足趾和關(guān)節(jié)的最嚴(yán)重腫脹)。在第56天，收集其血液；對小鼠進行尸檢；在固定和脫鈣的過程后用HE(蘇木精和曙紅)對其腫脹的爪染色；然后通過顯微鏡觀察關(guān)節(jié)組織。
③結(jié)論在施用膠原后，小鼠爪的腫脹隨時間流逝的改變和關(guān)節(jié)炎指數(shù)隨時間流逝的改變分別顯示于圖7和圖8(*P＜0.05)。且，施用實施例5后的CIA小鼠關(guān)節(jié)的軟骨組織顯示于圖9。
如從上面圖7至圖9中所知的，和對照組相比，實施例5施用組為大約20％的有效性。觀察到和對照組與葡糖胺施用組相比，關(guān)節(jié)組織的破壞和免疫細胞的浸潤顯著減少。
2)關(guān)節(jié)保護試驗(1)GAG分析①試驗材料-材料6-孔板(Corning 3516)、Dulbecco’s改良Eagle’s培養(yǎng)基(DMEM，Biowhittaker)、加熱滅活的胎牛血清白蛋白(FBS)、青霉素-鏈霉素(Gibco)、IL-1α(R&D 200LA-002)和BlyscanGlycosaminoglycan分析試劑盒(Biocolor B1000)-樣品實施例1至8-對照材料葡糖胺
-濃度5、50、500μg/ml-試驗動物獲自Samtako(Kyunggi-provence，Osan-si)的新西蘭白兔(2.0kg，9周)②試驗方法-軟骨外植塊培養(yǎng)從9周的兔子收集膝關(guān)節(jié)軟骨。然后，將收集的軟骨置于DMEM(5％FBS、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml)中并在37℃下的CO2培養(yǎng)基中穩(wěn)定24小時。在處理樣品前，將每一個軟骨切成一定大小的薄片并置于24孔中。處理制備的樣品和IL-1α(5ng/ml)。在37℃、5％ CO2培養(yǎng)基中將經(jīng)處理的樣品反應(yīng)60小時后，收集上清液并在-20℃下貯存，且在下一次試驗中使用。
-GAG分析為測量上清液的GAG分泌程度，使用Blyscan分析試劑盒。測量656nm處的吸光率，通過下列公式以百分比計算和對照組相比的試驗組的相對活性。
-計算公式計算公式＝[(PC-樣品)-(PC-NC)]×100NC陰性對照，PC陽性對照，S樣品③試驗結(jié)果實施例1至4和5至8的關(guān)節(jié)保護作用分別顯示于圖10和圖11中。
④結(jié)論特別地，實施例1至4和5至8在≤50μg/ml的濃度上顯示關(guān)節(jié)保護作用。
配制的實施例1溶液的制備實施例6的提取物20g糖 10g異構(gòu)化糖 10g檸檬的味道 適當(dāng)?shù)牧考尤爰兓蟮目偭?100ml
按照溶液的常規(guī)制備方法混合上述組分，并將其滅菌以產(chǎn)生溶液。
配制的實施例2溶液的制備實施例的提取物130mg糖 10mg異構(gòu)化糖 10mg檸檬的味道 適當(dāng)?shù)牧考尤爰兓蟮目偭?100ml按照溶液的常規(guī)制備方法混合上述的組分并將其滅菌以產(chǎn)生溶液。
配制的實施例3膠囊劑的制備實施例的提取物7500mg乳糖 50mg淀粉 50mg滑石粉 2mg硬脂酸鎂 適當(dāng)?shù)牧堪凑漳z囊劑的常規(guī)制備方法混合上述組分并將其裝填入膠囊中以產(chǎn)生膠囊劑。
配制的實施例4膠囊劑的制備實施例的提取物8500mg乳糖 50mg淀粉 50mg滑石粉 2mg硬脂酸鎂 適當(dāng)?shù)牧堪凑漳z囊劑的常規(guī)制備方法混合上述組分并將其裝填入明膠膠囊中以產(chǎn)生膠囊劑。
配制的實施例5膠囊劑的制備實施例的提取物5500mg乳糖 50mg淀粉 50mg滑石粉 2mg硬脂酸鎂 適當(dāng)?shù)牧堪凑漳z囊劑的常規(guī)制備方法混合上述組分并將其裝填入膠囊中以產(chǎn)生膠囊劑。
配制的實施例6膠囊劑的制備實施例的提取物1700mg乳糖 50mg淀粉 50mg滑石粉 2mg硬脂酸鎂 適當(dāng)?shù)牧堪凑漳z囊劑的常規(guī)制備方法混合上述組分并將其裝填入膠囊中以產(chǎn)生膠囊劑。
配制的實施例6軟膏劑的制備實施例5的提取物200g白凡士林 100g硬脂醇 150g聚氧乙烯氫化蓖麻油 40g單硬脂酸甘油酯 20g丙二醇 100g對羥基苯甲酸甲酯 1g對羥基苯甲酸丙酯 1g按照軟膏劑的常規(guī)制備方法混合上述組分以產(chǎn)生軟膏劑。
工業(yè)適用性包含黑兒茶提取物的本發(fā)明組合物顯示優(yōu)良的COX和/或5-LO抑制活性，另外還包含黃芩提取物和/或茶樹提取物的本發(fā)明組合物顯示協(xié)同效應(yīng)，且黃芩和茶樹提取物的聯(lián)合組合物也顯示協(xié)同效應(yīng)。從天然的材料獲得本發(fā)明的組合物，因而其顯示優(yōu)良的COX和/或5-LO抑制活性而無副作用的危險，從而可用于預(yù)防或治療疾病，所述疾病包括炎性疾病、月經(jīng)痛、動脈硬化、心臟病發(fā)作、肥胖癥、糖尿病、X綜合征、認(rèn)知功能的疾病、老年癡呆癥、呼吸系統(tǒng)變應(yīng)性反應(yīng)、慢性靜脈功能不全、痔瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性緊張性頭痛、偏頭痛、炎性腸病、由病毒、細菌和孢子引起的局部感染、曬傷、燒傷、接觸傳染性皮炎、黑色素瘤和癌癥。此外，本發(fā)明組合物可用于預(yù)防或治療不同的炎性疾病，包括，特別是骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。
權(quán)利要求
1.用于預(yù)防或治療由環(huán)加氧酶(COX)和/或5-脂氧化合酶(5-LO)介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的、包含鉤藤屬植物或其提取物的組合物。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥選自炎性疾病、月經(jīng)痛、動脈硬化、心臟病發(fā)作、肥胖癥、糖尿病、X綜合征、認(rèn)知功能的疾病、老年癡呆癥、呼吸系統(tǒng)變應(yīng)性反應(yīng)、慢性靜脈功能不全、痔瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性緊張性頭痛、偏頭痛、炎性腸病、由病毒、細菌和孢子引起的局部感染、曬傷、燒傷、接觸傳染性皮炎、黑色素瘤和癌癥。
3.權(quán)利要求2的組合物，其中由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥是炎性疾病。
4.權(quán)利要求1的組合物，其中鉤藤屬植物選自Uncariagambir、U.attenuata Korth.、U.borneensis Havil.、U.callophylla Korth.、U.elliptica R.Br.、U.guianensis(Aubl.)Gmel.、U.homomalla Miq.、U.lanosa var.glabrata(Bl.)Ridsd.、U.macrophylla Wall.、U.rhynchophylla Miq.、U.sinensis(Oliv.)Havil.、U.tomentosa(Willd.)DC.、U.yunnanensis Hsia K.C.、U.hirsuta Havil.和U.lanosa var.appendiculata f.setiloba(Benth.)Ridsd。
5.權(quán)利要求4的組合物，其中所述鉤藤屬植物是黑兒茶。
6.權(quán)利要求1至5中任一項的組合物，其另外還包含黃岑提取物和/或茶樹提取物。
7.權(quán)利要求6的組合物，其中用一種或多種選自水、丙酮、或C1-4醇和異丙醇的極性溶劑提取所述提取物。
8.權(quán)利要求6的組合物，其中黑兒茶∶黃芩∶茶樹的重量比是0.1～10∶0.1～10∶0.1～10。
9.用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的、包含黃岑提取物和茶樹提取物的組合物。
10.權(quán)利要求9的組合物，其中所述由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥選自炎性疾病、月經(jīng)痛、動脈硬化、心臟病發(fā)作、肥胖癥、糖尿病、X綜合征、認(rèn)知功能的疾病、老年癡呆癥、呼吸系統(tǒng)變應(yīng)性反應(yīng)、慢性靜脈功能不全、痔瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性緊張性頭痛、偏頭痛、炎性腸病、由病毒、細菌和孢子引起的局部感染、曬傷、燒傷、接觸傳染性皮炎、黑色素瘤和癌癥。
11.權(quán)利要求10的組合物，其中所述由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥是炎性疾病。
12.權(quán)利要求9的組合物，其中用一種或多種選自水、丙酮、或C1-4醇和異丙醇的極性溶劑提取所述提取物。
13.權(quán)利要求9的組合物，其中黃芩∶茶樹的重量比是0.1～10∶0.1～10。
14..權(quán)利要求3或11的組合物，其中所述炎性疾病是骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
15.鉤藤屬植物或其提取物的預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的用途。
16.權(quán)利要求15的用途，其中所述由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥選自炎性疾病、月經(jīng)痛、動脈硬化、心臟病發(fā)作、肥胖癥、糖尿病、X綜合征、認(rèn)知功能的疾病、老年癡呆癥、呼吸系統(tǒng)變應(yīng)性反應(yīng)、慢性靜脈功能不全、痔瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性緊張性頭痛、偏頭痛、炎性腸病、由病毒、細菌和孢子引起的局部感染、曬傷、燒傷、接觸傳染性皮炎、黑色素瘤和癌癥。
17.權(quán)利要求16的用途，其中所述由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥是炎性疾病。
18.權(quán)利要求15的用途，其中所述鉤藤屬植物選自Uncariagambir、U.attenuata Korth.、U.borneensis Havil.、U.callophylla Korth.、U.elliptica R.Br.、U.guianensis(Aubl.)Gmel.、U.homomalla Miq.、U.lanosa var.glabrata(Bl.)Ridsd.、U.macrophylla Wall.、U.rhynchophylla Miq.、U.sinensis(Oliv.)Havil.、U.tomentosa(Willd.)DC.、U.yunnanensis Hsia K.C.、U.hirsuta Havil.和U.lanosa var.appendiculata f.setiloba(Benth.)Ridsd。
19.權(quán)利要求18的用途，其中所述鉤藤屬植物是黑兒茶。
20.包含黃岑提取物和茶樹提取物的組合物的預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的用途。
21.權(quán)利要求20的用途，其中所述由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥選自炎性疾病、月經(jīng)痛、動脈硬化、心臟病發(fā)作、肥胖癥、糖尿病、X綜合征、認(rèn)知功能的疾病、老年癡呆癥、呼吸系統(tǒng)變應(yīng)性反應(yīng)、慢性靜脈功能不全、痔瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性緊張性頭痛、偏頭痛、炎性腸病、由病毒、細菌和孢子引起的局部感染、曬傷、燒傷、接觸傳染性皮炎、黑色素瘤和癌癥。
22.權(quán)利要求21的用途，其中所述由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥是炎性疾病。
23.權(quán)利要求9的用途，其中用一種或多種選自水、丙酮、或C1-4醇和異丙醇的極性溶劑提取所述提取物。
24.權(quán)利要求20的用途，其中黃芩∶茶樹的重量比是0.1～10∶0.1～10。
25.權(quán)利要求17或22的用途，其中所述炎性疾病是骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
26.用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的組合物的用途，所述組合物包含，i)鉤藤屬植物或其提取物，和ii)黃岑提取物和/或茶樹提取物。
27.權(quán)利要求26的用途，其中所述鉤藤屬植物是黑兒茶。
28.權(quán)利要求26的用途，其中黑兒茶∶黃岑∶茶樹的重量比是0.1～10∶0.1～10∶0.1～10。
29.用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的方法，其包括給哺乳動物施用治療有效量的包含鉤藤屬植物或其提取物的組合物。
30.權(quán)利要求29的方法，其中由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥選自炎性疾病、月經(jīng)痛、動脈硬化、心臟病發(fā)作、肥胖癥、糖尿病、X綜合征、認(rèn)知功能的疾病、老年癡呆癥、呼吸系統(tǒng)變應(yīng)性反應(yīng)、慢性靜脈功能不全、痔瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性緊張性頭痛、偏頭痛、炎性腸病、由病毒、細菌和孢子引起的局部感染、曬傷、燒傷、接觸傳染性皮炎、黑色素瘤和癌癥。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥是炎性病癥。
32.權(quán)利要求29的方法，其中所述鉤藤屬植物選自Uncariagambir、U.attenuata Korth.、U.borneensis Havil.、U.callophylla Korth.、U.elliptica R.Br.、U.guianensis(Aubl.)Gmel.、U.homomalla Miq.、U.lanosa var.glabrata(Bl.)Ridsd.、U.macrophylla Wall.、U.rhynchophylla Miq.、U.sinensis(Oliv.)Havil.、U.tomentosa(Willd.)DC.、U.yunnanensis Hsia K.C.、U.hirsuta Havil.和U.lanosa var.appendiculata f.setiloba(Benth.)Ridsd。
33.權(quán)利要求32的方法，其中所述鉤藤屬是黑兒茶。
34.權(quán)利要求29至33中任一項的方法，其中所述組合物另外還包含黃芩提取物和/或茶樹提取物。
35.權(quán)利要求34的方法，其中用一種或多種選自水、丙酮、或C1-4醇和異丙醇的極性溶劑提取所述提取物。
36.權(quán)利要求34的方法，其中黑兒茶∶黃芩∶茶樹的重量比是0.1～10∶0.1～10∶0.1～10。
37.用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的方法，其包括給哺乳動物施用治療有效量的包含黃岑和茶樹提取物的組合物。
38.權(quán)利要求37的方法，其中由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥選自炎性疾病、月經(jīng)痛、動脈硬化、心臟病發(fā)作、肥胖癥、糖尿病、X綜合征、認(rèn)知功能的疾病、老年癡呆癥、呼吸系統(tǒng)變應(yīng)性反應(yīng)、慢性靜脈功能不全、痔瘡、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、慢性緊張性頭痛、偏頭痛、炎性腸病、由病毒、細菌和孢子引起的局部感染、曬傷、燒傷、接觸傳染性皮炎、黑色素瘤和癌癥。
39.權(quán)利要求38的方法，其中由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥是炎性病癥。
40.權(quán)利要求37的方法，其中用一種或多種選自水、丙酮、或C1-4醇和異丙醇的極性溶劑提取所述提取物。
41.權(quán)利要求37的方法，其中黃岑∶茶樹的重量比例是0.1～10∶0.1～10。
42.權(quán)利要求31或39的方法，其中所述炎性病癥是骨關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
43.制備用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的藥物的方法，通過將鉤藤屬植物或其提取物和黃岑提取物和/或茶樹提取物以0.1～10∶0.1～10的重量比混合來進行配制。
44.權(quán)利要求43的方法，其中以0.1～10∶0.1～10∶0.1～10的重量比混合黑兒茶、黃芩和茶花。
45.配制用于預(yù)防或治療由COX和/或5-LO介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的藥物的方法，通過將黃芩提取物和茶樹提取物以0.1～10∶0.1～10的重量比混合來進行配制。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于預(yù)防或治療由環(huán)加氧酶(COX)和/或5－脂氧化酶(5－LO)介導(dǎo)的生理性和病理性病癥的、包含鉤藤屬植物，特別是黑兒茶，或其提取物的組合物，和涉及所述鉤藤屬植物提取物和黃芩提取物和/或茶樹提取物的聯(lián)合組合物。本發(fā)明組合物顯示優(yōu)良的COX和/或5－LO抑制作用，從而可用于預(yù)防或治療由不同的COX途徑和/或5－LO途徑介導(dǎo)的疾病和病癥，包括骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
文檔編號A61K36/82GK101035552SQ200580033554
公開日2007年9月12日 申請日期2005年9月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月1日
發(fā)明者趙臺衡, 禹盛植, 車智敏, 金東善, 李映澈, 都善吉, 金種漢, 金泰佑, 成喜善 申請人:株式會社優(yōu)力竟