專利名稱：噻唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種對(duì)TGF-β的I型受體激活素受體樣激酶5(ALK5)有抑制作用的化合物。本發(fā)明還涉及一種毛囊細(xì)胞生長促進(jìn)劑、一種生發(fā)劑以及一種育發(fā)劑，它們都含有ALK5的功能抑制劑作為活性成分。
背景技術(shù)：
轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)、激活蛋白、BMP等是屬于TGF-β超家族的分子。TGF-β有兩種不同的信號(hào)受體(I型和II型)，在它們各自的細(xì)胞中都存在絲氨酸/蘇氨酸激酶區(qū)。一旦TGF-β與受體結(jié)合，I型受體被II型受體磷酸化，從而被激活，因而通過Smad2/3途徑或TAB1/TAK1途徑將信號(hào)傳遞到細(xì)胞核內(nèi)。
顯然，TGF-β具有很多生理作用，眾所周知，其中之一是TGF-β具有通過促進(jìn)構(gòu)成胞外基質(zhì)的蛋白質(zhì)的生成和抑止其分解將胞外基質(zhì)聚積于組織中的特性(Massague，Ann Rev Cell Biol 6，597-641(1990))。因此，TGF-β的持續(xù)過量生成和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的激活可能引起多種纖維化疾病。例如，就腎臟而言，已知TGF-β與腎小球腎炎或糖尿病性腎病等腎病中出現(xiàn)的纖維化或腎小球腎炎密切相關(guān)(Okuda等，J Clin Invest 86，453-462(1990)，Border等，Nature 346，371-374(1990))。肝臟方面，已知TGF-β能促使非實(shí)質(zhì)細(xì)胞的胞外基質(zhì)的生成，進(jìn)而引起肝纖維化和肝硬化(Barnard等，Biochim Biophys Acta1032，79-87(1990))。此外，TGF-β機(jī)能亢進(jìn)引起的胞外基質(zhì)聚積是實(shí)質(zhì)性纖維化相關(guān)的肺纖維化或增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病等難治疾病的病因之一。
根據(jù)報(bào)道，ALK5抑制劑能通過阻滯TGF-β/Smad信號(hào)來抑制由TGF-β引起的胞外基質(zhì)聚積(Grygielko等，ASN 2002 F-FC022)，因此認(rèn)為該抑制劑可用作治療或預(yù)防腎、肝或肺等的纖維化相關(guān)的各種疾病的藥物。
另一方面，已知TGF-β對(duì)上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血細(xì)胞或淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞具有顯著的抑制生長作用(Soma等，J InvestDermatol 111，948-954(1998))。至于毛囊，有報(bào)道稱TGF-β的超表達(dá)引起了毛囊細(xì)胞的生長阻抑/調(diào)亡，從而使毛發(fā)周期由毛發(fā)生長初期變成毛發(fā)生長終期，因此TGF-β顯然與脫發(fā)癥的發(fā)展密切相關(guān)(Foitzik等，F(xiàn)ASEB J 14，752-760(2000))。
但是，現(xiàn)有研究沒有充分闡明毛囊細(xì)胞的生長阻抑/調(diào)亡主要由哪一條來自TGF-β受體的信號(hào)途徑引起。因此尚沒有報(bào)道利用ALK5抑制劑阻滯TGF-β/Smad信號(hào)來治療/預(yù)防脫發(fā)癥的效果。
WO00/61576A、WO01/72737A、WO01/62756A、WO02/40468A、WO03/87304A等雖然報(bào)道了對(duì)TGF-β的I型受體激活素受體樣激酶5(ALK5)有抑制作用的物質(zhì)，但沒有涉及本發(fā)明所述的噻唑基咪唑化合物。
此外，雖然WO99/03837A、WO96/03387A、WO03/62215A、WO01/85723A、WO01/44203A、JP2001163861A、JP07112975A、美國專利No.6,770,663、WO04/005264A等已廣泛報(bào)道了與本發(fā)明化合物結(jié)構(gòu)相似的咪唑化合物，這些化合物對(duì)激活素受體樣激酶5(ALK5)的抑制作用尚沒有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在提供一種TGF-β的I型受體ALK5的抑制物質(zhì)及其新作用的基礎(chǔ)上提供一種生發(fā)劑或育發(fā)劑。
基于為解決所述技術(shù)問題而進(jìn)行的各種調(diào)研結(jié)果，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)ALK5抑制劑能抑制TGF-β引起的毛囊細(xì)胞生長阻抑，同時(shí)發(fā)現(xiàn)了某類能抑制ALK5的新化合物，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)制備上述化合物以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的中間體。
本發(fā)明提供一種式(I)表示的噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中，
X1和X2互不相同，表示硫原子或碳原子；R1表示苯基；被選自鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羥基、具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷氧基和具有1-6個(gè)碳原子的烷基氨基的1-5個(gè)基團(tuán)取代的苯基；與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)或非芳香雜環(huán)稠合的苯基；吡啶基；喹啉基；異喹啉基；或與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)稠合的吡啶基；R2表示氫原子、鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、被1-5個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、具有1-6個(gè)碳原子的烷酰基或具有1-5個(gè)碳原子的羥烷基；和A為式 或 表示的基團(tuán)，其中R3表示氫原子；羥基；具有1-6個(gè)碳原子的烷基；具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷基；或被羥基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、被具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、或被具有1-6個(gè)碳原子的烷基氨基取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基取代的具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷基；R4表示苯基；被選自鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、氨基甲?；颓杌?-5個(gè)基團(tuán)取代的苯基；氫原子；具有1-12個(gè)碳原子的烷基；具有2-12個(gè)碳原子的烯基；具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羥基、具有8-12個(gè)碳原子的烷氧基苯基烷氧基、苯二甲酰亞氨基、甲苯磺酰氧基或嗎啉代取代的具有1-12個(gè)碳原子的烷基；被1-5個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基；被氧代基取代的具有3-9個(gè)碳原子的環(huán)烷基；四氫吡喃基；4-哌啶基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷基或叔丁氧羰基取代的哌啶基；環(huán)己烷螺-2′-(1，3-二氧雜環(huán)戊基)(シクロヘキサンスピロ-2’-(1，3-ジォキソラニル)基)；吡咯烷-2-酮-5-基；式-Y1-Z1-NR5-Z2-Y2-R6表示的基團(tuán)，其中Y1和Y2相同或互不相同，表示單鍵或具有1-12個(gè)碳原子的亞烷基；R5表示氫原子或具有1-12個(gè)碳原子的烷基；
Z1和Z2相同或互不相同，表示單鍵；具有1-7個(gè)碳原子的亞烷基；-CO-；-CO2-；-SO2-或-OCO-；以及R6表示具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；被1-3個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基；具有2-6個(gè)碳原子的烯基；具有2-6個(gè)碳原子的炔基；氨基；被選自具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基和叔丁氧羰基的1-2個(gè)基團(tuán)取代的氨基；哌啶子基；哌啶基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷基取代的哌啶基；吡咯烷基；哌嗪基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷基取代的哌嗪基；嗎啉代；羥基；具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基；被羥基或被具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基；氧雜環(huán)丁烷-2-基；四氫呋喃基；四氫吡喃基；氫原子；苯基；被具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基取代的苯基；或與上述結(jié)構(gòu)式中的氮原子連接時(shí)成環(huán)的基團(tuán)；或式-Y3-CO-R41表示的基團(tuán)，其中Y3表示單鍵或具有1-7個(gè)碳原子的亞烷基；R41表示羥基；具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基；哌啶子基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有5-10碳原子的嗎啉代烷基或具有2-14個(gè)碳原子的烷基氨基烷基取代的哌嗪-1-基；或嗎啉代。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是一種含有上述噻唑基咪唑衍生物或其藥學(xué)上可以接受的鹽為活性成分的ALK5抑制劑。
此外，本發(fā)明的又一個(gè)方面是一種含有用于抑制TGF-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的ALK5功能的物質(zhì)為活性成分的育發(fā)劑，因此本發(fā)明提供了一種作用機(jī)理不同于傳統(tǒng)的育發(fā)劑的全新概念。
另外，本發(fā)明的再一個(gè)方面是一種制備式(I)表示的化合物的中間體，其中上述式(I)中的A部分為下述基團(tuán)， 或 其中X3表示氫原子或鹵原子。
本發(fā)明式(I)表示的化合物優(yōu)選R2為氫原子、鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基或被1-5個(gè)鹵原子取代的具有1-6碳原子的烷基的化合物。較優(yōu)選R2為具有1-6個(gè)碳原子的烷基或三氟甲基的化合物。更優(yōu)選R2為甲基或三氟甲基的化合物。
R1為與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳雜環(huán)或非芳香雜環(huán)稠合的苯基的化合物為優(yōu)選化合物。X1為硫原子且X2為碳原子的化合物也是優(yōu)選化合物。
這里使用的術(shù)語“育發(fā)劑”雖然指用于誘導(dǎo)生發(fā)、促進(jìn)長頭或防止脫發(fā)癥的藥物或準(zhǔn)藥物，但應(yīng)廣義理解該術(shù)語的意思，不應(yīng)局限于某種意思。例如當(dāng)本發(fā)明育發(fā)劑用作藥物時(shí)，可適用于改善或防止斑禿或男性型禿發(fā)，但本發(fā)明育發(fā)劑的應(yīng)用不僅限于此。
本發(fā)明揭示，抑制ALK5功能的物質(zhì)可作為防止毛囊細(xì)胞機(jī)能減退的改善劑或預(yù)防藥物。
抑制ALK5功能的物質(zhì)是指當(dāng)TGF-β受體傳出信號(hào)時(shí)抑制Samd2和Samd3發(fā)生磷酸化的物質(zhì)，例如本發(fā)明的權(quán)利要求1-6所例舉的化合物。由于上述作用機(jī)理能完全抑制TGF-β對(duì)毛囊細(xì)胞(即毛發(fā)角蛋白生成細(xì)胞)的阻抑生長效果，該物質(zhì)有望對(duì)傳統(tǒng)育發(fā)劑所不能改善或預(yù)防的癥狀有效果。
此外，該物質(zhì)與具有其它功效的其它生發(fā)劑或育發(fā)劑結(jié)合使用時(shí)有望產(chǎn)生增效效果。
雖然根據(jù)其性質(zhì)，本發(fā)明育發(fā)劑可以以不同的劑量和劑型進(jìn)行給藥，鑒于連續(xù)給藥的必要性，優(yōu)選外用或口服該物質(zhì)。不能用統(tǒng)一的數(shù)值來表示所有物質(zhì)的劑量。但對(duì)于化合物1-202和228-249，以洗劑、軟膏劑或凝膠劑進(jìn)行外用時(shí)，其使用劑量應(yīng)達(dá)到0.0001-10重量％左右，優(yōu)選0.001-5重量％，更優(yōu)選0.001-1重量％；或者，以散劑或膠囊劑進(jìn)行口服時(shí)，其使用劑量應(yīng)達(dá)到1-100mg/kg左右?？梢酝ㄟ^普通的制劑技術(shù)得到上述制劑。
本發(fā)明育發(fā)劑并非特別限定于某種劑型，但就外用制劑而言，含有ALK5抑制劑(如化合物1-202和228-249中的任一化合物)為活性成分的育發(fā)劑的優(yōu)選形式為水溶性組合物。一般地，在制備此類水溶性組合物時(shí)可以使用制備藥品、準(zhǔn)藥品或化妝品時(shí)常用的各種添加劑(保濕劑、增稠劑、防腐劑、抗氧化劑、香料和著色劑等)。本發(fā)明育發(fā)劑可制成頭發(fā)藥物、發(fā)油、發(fā)用摩絲或發(fā)膠等頭發(fā)調(diào)理組合物以及洗發(fā)精或護(hù)發(fā)素等洗發(fā)組合物，或者制成軟膏等。
本發(fā)明育發(fā)劑的劑型為液體藥劑時(shí)，ALK5抑制劑(如化合物1-202和228-249中的任一化合物)充分與純凈水、磷酸緩沖液等合適的緩沖液、鹽水、林格溶液或洛克溶液等生理鹽水溶液、乙醇、甘油以及常用的表面活性劑混合以制備滅菌水溶液、非水溶液、混懸液、脂質(zhì)體或乳劑等形式的藥物。該制劑以頭皮用液體制劑的形式局部外用。在這種情況下，液體制劑可以直接涂抹在頭皮上，也可以通過注射噴嘴進(jìn)行噴涂。
本發(fā)明育發(fā)劑的劑型為半固體制劑時(shí)，ALK5抑制劑(如化合物1-202和228-249中的任一化合物)可與脂肪、脂肪油、羊毛脂、凡士林、石蠟、蠟、軟膏、樹脂、塑料、二醇類、高級(jí)醇、甘油、水、乳化劑、混懸劑等混合，然后以軟膏劑或霜?jiǎng)┑韧庥盟幬镄问骄植坑盟帯?br> 本發(fā)明育發(fā)劑的劑型為固體制劑時(shí)，ALK5抑制劑(如化合物1-202和228-249中的任一化合物)與合適的添加劑適當(dāng)混合以制備散劑或粉劑等外用藥。或者，需要時(shí)可以將抑制劑溶解或混懸于溶劑中以制備施用于頭皮的固體制劑。
此外，對(duì)于口服用藥，ALK5抑制劑(如化合物1-202和228-249中的任一化合物)可與藥學(xué)上可接受的載體(賦形劑、粘合劑、崩解劑、矯味劑、芳香劑和乳化劑等)、稀釋劑、增溶劑等混合，所得到的藥物通過常規(guī)技術(shù)制備成片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、糖漿劑、混懸劑、溶液劑等優(yōu)選劑型。
在本發(fā)明中，鹵原子為氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
具有1-6個(gè)碳原子的烷基指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和烷基，包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、異戊基、新戊基、叔戊基和正己基。
具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，包括例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基和己氧基。
具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷氧基指含有7-12個(gè)碳原子的苯基烷氧基，包括例如芐氧基和苯乙氧基。
具有1-6個(gè)碳原子的烷基氨基指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的單烷基氨基或二烷基氨基，包括例如甲氨基、乙氨基和N，N-二甲氨基。
與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)或非芳香雜環(huán)稠合的苯基包括例如苯并噻唑基、苯并唑基和苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯基。
與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)稠合的吡啶基包括例如吡唑并吡啶基、咪唑并吡啶基和三唑并吡啶基。
具有1-6個(gè)碳原子的烷酰基指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷?；ɡ缂柞；⒁阴；?、丙?；?、丁?；?、異丁?；⑽祯；?、己酰基和新戊?；?。
具有1-5個(gè)碳原子的羥烷基指含有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈羥烷基，包括例如羥甲基、1-羥乙基和2-羥乙基。
具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷基指含有7-12個(gè)碳原子的苯基烷基，包括例如芐基和苯乙基。
具有1-12個(gè)碳原子的烷基指含有1-12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和烷基，包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、1-乙基-丙基、正己基和正十二烷基。
具有2-12個(gè)碳原子的烯基指含有2-12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烯基，包括例如乙烯基、1-丙烯基、烯丙基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基、己烯基和十二碳烯基。
具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基指含有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基，包括例如環(huán)丙基、異丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。
具有8-12個(gè)碳原子的烷氧基苯基烷氧基指苯環(huán)被烷氧基取代的含有8-12個(gè)碳原子的苯基烷氧基，包括例如4-甲氧基芐氧基和4-甲氧基苯乙氧基。
被氧代基取代的具有3-9個(gè)碳原子的環(huán)烷基指在環(huán)上被氧代基取代的含有3-9個(gè)碳原子的環(huán)烷基，包括例如4-氧代環(huán)己基。
四氫吡喃基包括例如2-四氫吡喃基、3-四氫吡喃基和4-四氫吡喃基。
具有1-12個(gè)碳原子的亞烷基指含有1-12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，包括例如亞甲基、亞乙基、1，3-亞丙基、1，4-亞丁基、1，5-亞戊基、1，6-亞己基和十二亞甲基。
具有1-7個(gè)碳原子的亞烷基指含有1-7個(gè)碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，包括例如亞甲基、亞乙基、1，3-亞丙基、1，4-亞丁基、1，5-亞戊基、1，6-亞己基和七亞甲基。
具有2-6個(gè)碳原子的烯基指含有2-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烯基，包括例如乙烯基、1-丙烯基、烯丙基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基和己烯基。
具有2-6個(gè)碳原子的炔基指含有2-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈炔基，包括例如乙炔基、1-丙炔基和2-丙炔基。
哌啶基包括例如2-哌啶基、3-哌啶基和4-哌啶基。
吡咯烷基包括例如2-吡咯烷基、3-吡咯烷基和4-吡咯烷基。
哌嗪基包括例如2-哌嗪基和3-哌嗪基。
四氫呋喃基包括例如2-四氫呋喃基和3-四氫呋喃基。
被具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基取代的苯基包括例如4-甲氧基苯基。
具有5-10個(gè)碳原子的嗎啉代烷基指被嗎啉代取代的含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，包括例如嗎啉代甲基、1-嗎啉代乙基和2-嗎啉代乙基。
具有2-14個(gè)碳原子的烷基氨基烷基指被含有1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的一烷基氨基或二烷基氨基取代的含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，包括例如N-甲基氨基甲基、N-乙基氨基甲基、N，N-二甲基氨基甲基和N，N-二甲基氨基乙基。
被1-5個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基指被1-5個(gè)鹵原子取代的含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，包括例如氯甲基、三氟甲基和五氟乙基。
此外，藥學(xué)上可接受的鹽為堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銨鹽、烷基銨鹽等，或者為無機(jī)酸鹽或有機(jī)酸鹽。上述鹽的例子包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、銨鹽、鋁鹽、三乙基銨鹽、醋酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、甲酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、丁二酸乙酯鹽、乳糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡庚糖酸鹽、安息香酸鹽、甲基磺酸鹽、乙基磺酸鹽、2-羥乙基磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、天冬氨酸鹽、谷氨酸鹽、己二酸鹽、半胱氨酸鹽、N-乙酰半胱氨酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、氫碘酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、苦味酸鹽、硫氰酸鹽、十一酸鹽、丙烯酸類聚合物的鹽和羧基乙烯基聚合物的鹽。
本發(fā)明的最佳實(shí)施方式舉例說，本發(fā)明化合物可以通過下述方法合成。在四(三苯基膦)合鈀等催化劑和堿的存在下，式(a)表示的化合物 (其中R1的定義同前述定義)和式(b)表示的化合物 (其中X1、X2和R2的定義同前述定義，X代表鹵原子)在溶劑中發(fā)生偶合反應(yīng)合成式(c)表示的本發(fā)明化合物 (其中X1、X2、R1和R2的定義同前述定義)。
此外，產(chǎn)物化合物(c)可以通過諸如在二甲基亞砜中接觸氯化鈀(II)或在丙酮-緩沖溶液中接觸高錳酸鉀等方法氧化，合成式(d)表示的本發(fā)明化合物
(其中X1、X2、R1和R2的定義同前述定義)。
另外，式(e)表示的化合物R4-CHO (e)(其中R4的定義同前述定義)與乙酸銨在溶劑中發(fā)生反應(yīng)合成式(f)表示的本發(fā)明化合物 (其中X1、X2、R1、R2和R4的定義同前述定義)。
或者，本發(fā)明化合物也可以通過以下例舉的方法合成。即式(g)表示的化合物 (其中R3的定義同前述定義)和上述式(d)化合物以及乙酸銨在溶劑中發(fā)生反應(yīng)合成式(f)表示的本發(fā)明化合物
(其中X1、X2、R1、R2和R4的定義同前述定義)。
此外，本發(fā)明化合物也可以通過以下例舉的方法合成。即式(c)表示的本發(fā)明化合物 (其中X1、X2、R1和R2的定義同前述定義)可通過在溶劑中用硫酸汞(II)和硫酸處理進(jìn)行水合反應(yīng)等方法合成式(h)或(i)表示的本發(fā)明化合物 (其中X1、X2、R1和R2的定義同前述定義)或上述式(h)和(i)化合物的混合物。式(h)化合物或(i)化合物或者式(h)和(i)化合物的混合物可進(jìn)一步在鹽酸水溶液中用亞硝酸鈉處理等方法得到式(j)或式(k)表示的化合物 (其中X1、X2、R1和R2的定義同前述定義)或上述式(j)和(k)化合物的混合物，并進(jìn)一步在溶劑中與式(e)表示的化合物R4-CHO(e)(其中R4的定義同前述定義)及乙酸銨反應(yīng)。然后用亞磷酸三乙酯等在溶劑中(任選地)還原所得組合物，得到式(f)表示的本發(fā)明化合物。
(其中X1、X2、R1、R2和R4的定義同前述定義)。
本發(fā)明化合物也可以用諸如下述方法合成。即式(I)表示的化合物R1-CH2CO2H(I)
(其中R1的定義同前述定義)通過?；u與N，O-二甲基羥胺在溶劑中反應(yīng)或在縮合劑(如1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽)的存在下與N，O-二甲基羥胺縮合，可得到式(m)表示的化合物 (其中R1的定義同前述定義)，然后式(n)表示的化合物與正丁基鋰等堿在溶劑中反應(yīng) (其中R2的定義同前述定義，X’表示鹵原子或氫原子)。所得陰離子可以與上述式(m)化合物反應(yīng)，合成式(o)表示的本發(fā)明化合物 (其中R1和R2的定義同前述定義)。式(o)化合物可進(jìn)一步在溶劑中被溴化銅(II)等鹵化，合成式(p)表示的本發(fā)明化合物
(其中R1和R2的定義同前述定義，X表示鹵原子)。然后，式(p)表示的化合物與式(q)表示的化合物 (其中R4的定義同前述定義)在溶劑中反應(yīng)，合成式(r)表示的本發(fā)明化合物 (其中R1、R2和R4的定義同前述定義)。另外，在氫化鈉等堿的存在下，式(r)表示的化合物與式(s)表示的化合物R3-X″(s)(其中R3的定義同前述定義，X″表示鹵原子)在溶劑中反應(yīng)，然后可合成出式(t)或式(u)表示的本發(fā)明化合物
(其中R1、R2、R3和R4的定義同前述定義)或上述式(t)及式(u)化合物的混合物。
本發(fā)明化合物也可以通過互換上述方法得到的本發(fā)明化合物中的R1、R2、R3和R4來合成。
上述反應(yīng)中所使用的堿的例子為堿金屬鹽，如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈉、二甲亞砜鈉鹽、氫化鈉、氨基鈉、叔丁基鉀；三乙胺、二異丙胺、吡咯烷和哌啶等胺類；醋酸鈉和醋酸鉀。至于反應(yīng)溶劑，可以用在反應(yīng)過程中呈惰性的溶劑，包括水；甲醇、乙醇、異丙醇和叔丁醇等醇類；二烷和四氫呋喃等醚類；二甲基甲酰胺、二甲亞砜、吡啶、二氯甲烷、氯仿、丙酮和乙酸。
實(shí)施例現(xiàn)通過實(shí)施例和試驗(yàn)例對(duì)本發(fā)明做詳細(xì)說明。
實(shí)施例1
化合物217的合成在2-碘-4-甲基噻唑(2.50g)的乙腈(50ml)溶液中加入三乙胺(25ml)、四(三苯基膦)合鈀(642mg)和5-乙炔基-苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯(1.79g)，然后在回流條件下攪拌混合物4小時(shí)。蒸除溶劑后，用使用乙酸乙酯、氯仿和己烷混合溶劑的硅膠快速柱色譜純化所得殘留物，得到標(biāo)題化合物(2.38g)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.49(3H，d，J＝0.9Hz)，6.01(2H，s)，6.81(1H，d，J＝8.1Hz)，6.91(1H，d，J＝0.9Hz)，7.01(1H，d，J＝1.6Hz)，7.13(1H，dd，J＝8.1，1.6Hz)mp111.5-112.0℃實(shí)施例2化合物203的合成 在化合物217(1.91g)的二甲亞砜(13ml)溶液中加入氯化鈀(H)(139mg)，然后在125℃下攪拌混合物3小時(shí)。該溶液經(jīng)乙酸乙酯稀釋后過濾，所得溶液依次用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。用使用乙酸乙酯和己烷混合溶劑的硅膠快速柱色譜純化所得殘留物，得到標(biāo)題化合物(960mg)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.52(3H，d，J＝0.9Hz)，6.09(2H，s)，6.88(1H，d，J＝8.7Hz)，7.40(1H，d，J＝0.9Hz)，7.48-7.54(2H，m)mp131.5-132.5℃實(shí)施例3化合物8的合成
在化合物203(893mg)和4-氰基苯甲醛(510mg)的乙酸(40ml)溶液中加入乙酸銨(1.50g)，然后在回流條件下攪拌混合物4小時(shí)。蒸除溶劑后，用氨水中和該溶液，用氯仿萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。用甲醇和氯仿重結(jié)晶所得殘留物，得到標(biāo)題化合物(575mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.36(3H，s)，6.10(2H，s)，7.06(1H，d，J＝7.6Hz)，7.20(1H，s)，7.55(1H，bd，J＝7.6Hz)，7.73(1H，bs)，7.97(2H，d，J＝8.3Hz)，8.26(2H，d，J＝8.3Hz)，13.05(1H，brs)實(shí)施例4化合物9的合成 在化合物8(575mg)的叔丁醇(100ml)溶液中加入氫氧化鉀(584mg)，然后在回流條件下將混合物攪拌過夜。蒸除溶劑后，用乙酸乙酯稀釋該溶液并用水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。用甲醇重結(jié)晶所得殘留物，得到標(biāo)題化合物(556mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.36(3H，s)，6.10(2H，s)，7.05(1H，d，J＝8.1Hz)，7.18(1H，s)，7.42(1H，brs)，7.58(1H，bd，J＝8.1Hz)，7.75(1H，bs)，7.94-8.08(3H，m)，8.15(2H，d，J＝8.2Hz)，12.87(1H，brs)mp276.0-277.0℃實(shí)施例5化合物213的合成 (1)在苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-乙酸(30.0g)的甲苯(200ml)溶液中加入亞硫酰氯(39.6g)和1滴二甲基甲酰胺，然后在60℃下攪拌混合物2.5小時(shí)，蒸除溶劑后得到未純化的苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-乙酰氯。0℃下，在N，O-二甲基羥胺(19.5g)鹽酸鹽的甲苯(200ml)溶液中加入氫氧化鈉(20.0g)水(150ml)溶液，再加入未純化的苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-乙酰氯后攪拌混合物3小時(shí)。反應(yīng)混合物用甲苯萃取、經(jīng)無水硫酸鎂干燥，蒸除溶劑后得到未純化的2-苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(35.4g)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm3.19(3H，s)，3.64(3H，s)，3.67(2H，s)，5.82(2H，s)，6.71-6.83(3H，m)(2)在-70℃下，在4-甲基噻唑(8.0g)的四氫呋喃(150ml)溶液中滴加2.6M正丁基鋰的己烷(34ml)溶液，攪拌混合物30分鐘。然后滴入2-苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(20.0g)的四氫呋喃(20ml)溶液，攪拌混合物1小時(shí)。在該溶液中加入飽和氯化銨水溶液后，用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)使用乙酸乙酯和己烷混合溶劑的硅膠快速柱色譜純化得到2-苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙酮(19.3g)1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.56(3H，d，J＝0.9Hz)，4.34(2H，s)，5.93(2H，s)，6.76(1H，d，J＝7.8Hz)，6.80(1H，dd，J＝7.8，1.6Hz)，6.86(1H，d，J＝1.6Hz)，7.25(1H，q，J＝0.9Hz)(3)在2-苯并(1，3)間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙酮(19.3g)的乙酸乙酯(200ml)和氯仿(200ml)混合溶液中加入溴化銅(II)(24.7g)，在回流條件下攪拌混合物3小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)使用乙酸乙酯和氯仿混合溶劑的硅膠快速柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(8.96g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.54(3H，d，J＝0.9Hz)，5.95-5.99(2H，m)，6.75(1H，d，J＝8.1Hz)，6.78(1H，s)，7.09(1H，dd，J＝7.9，1.9Hz)，7.21(1H，d，J＝1.9Hz)，7.32(1H，q，J＝0.9Hz)實(shí)施例6化合物20的合成 在化合物213(1.83g)的乙腈(20ml)溶液中加入1-乙酰胍(1.63g)，在回流條件下攪拌混合物16小時(shí)。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋該溶液后依次用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)過使用氯仿和己烷混合溶劑的NH硅膠(Chromatorex，由FujiSilysia Chemical LTD.生產(chǎn))快速柱色譜洗脫。洗脫的殘留物用乙酸乙酯和己烷混合溶劑重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(590mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.09(3H，s)，2.34(3H，d，J＝0.9Hz)，6.07(2H，s)，6.98(1H，d，J＝8.2Hz)，7.13(1H，d，J＝0.9Hz)，7.45(1H，dd，J＝8.2，1.7Hz)，7.78(1H，d，J＝1.7Hz)，11.28(1H，bs)，11.76(1H，bs)mp169.0-173.0℃實(shí)施例7化合物19的合成 在化合物20(578mg)的甲醇(10ml)和水(10ml)混合溶液中加入濃硫酸(0.58ml)，在回流條件下攪拌混合物3小時(shí)。加入氫氧化鉀水溶液使該反應(yīng)液呈堿性，然后用氯仿萃取該溶液三次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)使用甲醇和氯仿混合溶劑的NH硅膠快速柱色譜洗脫。洗脫的殘留物用氯仿和己烷混合溶劑重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(260mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.39(3H，d，J＝0.9Hz)，6.00(2H，s)，6.60(1H，d，J＝0.9Hz)，6.84(1H，d，J＝7.9Hz)，7.15(1H，dd，J＝7.9，1.7Hz)，7.19(1H，d，J＝1.7Hz)mp205.5-208.0℃實(shí)施例8化合物21的合成
在化合物19(70mg)的吡啶(0.7ml)溶液中加入正丁基氯(36μl)，在室溫下攪拌混合物2.5小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，然后依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌該混合物。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)過使用氯仿溶劑的NH硅膠柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(84mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm0.93(3H，t J＝7.3Hz)，1.63(2H，qt，J＝7.3，7.3Hz)，2.28-2.41(5H，m)，6.07(2H，s)，6.98(1H，d，J＝8.1Hz)，7.12(1H，s)，7.46(1H，brd，J＝8.1Hz)，7.79(1H，brs)，11.25(1H，brs)，11.78(1H，brs)實(shí)施例9化合物135的合成 在化合物203(1.50g)和4-(1，3-二氧-1，3-二氫異吲哚-2-基)丁醛(1.78g)的四氫呋喃(55ml)溶液中加入乙酸銨(4.20g)的甲醇(55ml)溶液，在回流條件下攪拌混合物2.5小時(shí)。蒸除溶劑后，用氯仿稀釋溶液，然后用飽和碳酸鈉水溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)過使用甲醇和氯仿混合溶劑的硅膠快速柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(970mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.05-2.10(2H，m)，2.32(3H，d，J＝0.8Hz)，2.70(2H，t，J＝7.7Hz)，3.70(2H，t，J＝6.8Hz)，6.06(2H，s)，6.98(1H，d，J＝8.2Hz)，7.07(1H，d，J＝1.1Hz)，7.46(1H，dd，J＝8.2，1.9Hz)，7.77-7.84(5H，m)，12.19(1H，s)
實(shí)施例10化合物29的合成 在化合物135(928mg)的乙醇(50ml)溶液中加入一水合肼(984mg)，在回流條件下攪拌混合物3小時(shí)。蒸除溶劑后，所得殘留物經(jīng)使用甲醇和氯仿混合溶劑的NH硅膠柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(458mg)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm1.90(2H，tt，J＝6.4，6.4Hz)，2.43(3H，d，J＝0.9Hz)，2.84-3.01(4H，m)，5.99(2H，s)，6.69(1H，d，J＝0.9Hz)，6.84(1H，d，J＝8.1Hz)，7.26(1H，dd J＝8.1，1.7Hz)，7.38(1H，d，J＝1.7Hz)實(shí)施例11化合物30的合成 在化合物29(80mg)、丁酸(25mg)和一水合1-羥基苯并三唑(38mg)的二甲基甲酰胺(0.8ml)溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳二亞胺鹽酸鹽(54mg)，室溫下將混合物攪拌過夜。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物后依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)過使用甲醇和氯仿混合溶劑的NH硅膠柱色譜洗脫。洗脫的殘留物用乙酸乙酯和己烷混合溶劑重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(18mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.96(3H，t，J＝7.4Hz)，1.69(2H，qt，J＝7.4，7.4Hz)，1.80-1.94(2H，m)，2.22(2H，t，J＝7.4Hz)，2.45(3H，d，J＝0.9Hz)，2.79(t，J＝6.2Hz)，3.40(2H，td，J＝6.2，5.9Hz)，5.99(2H，s)，6.03(1H，brs)，6.72(1H，s)，6.87(1H，d，J＝8.1Hz)，7.39(1H，brd，J＝8.1Hz)，7.55(1H，brs)mp134.0-139.0℃實(shí)施例12化合物31的合成 在甲醛(73mg)的四氫呋喃(2ml)溶液中加入化合物29(100mg)和乙酸(51μl)，室溫下攪拌混合物30分鐘。在此反應(yīng)混合物中加入三乙酸基硼氫化鈉(248mg)，攪拌16小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入碳酸氫鈉水溶液。用乙酸乙酯萃取該混合物兩次。合并的有機(jī)層后經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)過使用甲醇和氯仿混合溶劑的NH硅膠柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(74mg)。
1H NMR(200MHz，DMSO-d6)δppm1.82(2H，tt，J＝7.7，6.9Hz)，2.15(6H，s)，2.28(2H，t，J＝6.9Hz)，2.35(3H，d，J＝0.9Hz)，2.66(2H，t，J＝7.7Hz)，6.07(2H，s)，6.99(1H，d，J＝8.1Hz)，7.09(1H，d，J＝0.9Hz)，7.46(1H，brd，J＝8.1Hz)，7.75(1H，brs)，12.33(1H，brs)
實(shí)施例13化合物167的合成 在化合物203(1.50g)和6-氧代己酸甲酯(1.38g)的四氫呋喃(20ml)和甲醇(10ml)混合溶液中加入乙酸銨(4.20g)，在回流條件下攪拌混合物4小時(shí)。蒸除溶劑后用氯仿稀釋該溶液，用飽和碳酸鈉水溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)過使用甲醇和氯仿混合溶劑的硅膠快速柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(797mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm1.67-1.90(4H，m)，2.39(2H，t，J＝6.9Hz)，2.43(3H，d，J＝1.1Hz)，2.81(2H，t，J＝7.2Hz)，3.69(3H，s)，6.00(2H，s)，6.69(1H，bs)，6.86(1H，d，J＝8.1Hz)，7.17-7.37(2H，m)mp158.0-159.0℃實(shí)施例14化合物41的合成
在化合物167(767mg)的甲醇(25ml)溶液中加入氫氧化鈉(227mg)水(10ml)溶液，在回流條件下攪拌混合物1小時(shí)。用2N鹽酸水溶液中和該溶液后用氯仿萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑得到標(biāo)題化合物(790mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm1.82(2H，m)，2.05(2H，m)，2.42(3H，s)，2.53(2H，t，J＝6.8Hz)，3.28(2H，t，J＝7.8Hz)，6.03(2H，s)，6.89(1H，d，J＝0.9Hz)，6.89(1H，d，J＝8.1Hz)，7.14(1H，d，J＝1.7Hz)，7.20(1H，dd，J＝8.1，1.7Hz)實(shí)施例15 化合物42的合成在化合物41(120mg)、正丙胺(21mg)和一水合1-羥基苯并三唑(49mg)的N，N-二甲基甲酰胺(1.2ml)溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(69mg)，室溫下將混合物攪拌過夜。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物后依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)使用甲醇和氯仿混合溶劑的硅膠快速柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(51mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.91(3H，t，J＝7.3Hz)，1.51(2H，qt，J＝7.3，7.3Hz)，1.69-1.91(4H，m)，2.27(2H，t，J＝6.4Hz)，2.44(3H，d，J＝0.9Hz)，2.84(2H，t，J＝6.7Hz)，3.21(2H，td，J＝7.3，6.1Hz)，5.76(1H，brs)，6.00(2H，s)，6.71(1H，d，J＝0.9Hz)，6.86(1H，d，J＝8.1Hz)，7.33(1H，brd，J＝8.1Hz)，7.43(1H，brs)
實(shí)施例16化合物45的合成 在化合物41(131mg)的氯仿(1ml)溶液中加入亞硫酰氯(0.3ml)，在回流條件下攪拌混合物2.5小時(shí)，蒸除溶劑后在反應(yīng)混合物中加入28％氨水，用氯仿萃取該混合物兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物經(jīng)使用甲醇和氯仿混合溶劑的硅膠快速柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(42mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm1.48-1.75(4H，m)，2.09(2H，t，J＝7.2Hz)，2.34(3H，d，J＝1.0Hz)，2.64(2H，t，J＝7.5Hz)，6.07(2H，s)，6.72(1H，bs)，6.99(1H，d，J＝8.2Hz)，7.09(1H，d，J＝1.0Hz)，7.26(1H，bs)，7.50(1H，dd，J＝8.2，1.7Hz)，7.82(1H，d，J＝1.7Hz)，12.21(1H，brs)實(shí)施例17化合物216的合成
(1)在6-溴苯并噻唑(53.3g)的三乙胺(260ml)溶液中加入三甲基甲硅烷基乙炔(106ml)、碘化銅(I)(0.948g)和二(三苯基膦)二氯化鈀(II)(1.75g)，在80℃下攪拌混合物2.5小時(shí)。蒸除溶劑后將所得殘留物裝入短柱(硅膠；己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)進(jìn)行洗脫。洗脫的殘留物用己烷-乙酸乙酯混合溶劑重結(jié)晶后得到無色粉末狀6-三甲基甲硅烷基乙炔基苯并噻唑(20.0g)(mp104.5-105.0℃)。通過將濾液反復(fù)重結(jié)晶(正己烷-乙酸乙酯)得到無色粉末狀的二級(jí)結(jié)晶(12.1g)、三級(jí)結(jié)晶(9.68g)和四級(jí)結(jié)晶(4.61g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.27(9H，s)，7.60(1H，dd，J＝8.5，1.6Hz)，8.05(1H，dd，J＝8.5，0.6Hz)，8.09(1H，dd，J＝1.6，0.6Hz)，9.03(1H，s) (2)在6-三甲基甲硅烷基乙炔基苯并噻唑(45.1g)的甲醇(600ml)溶液中加入碳酸鉀(29.7g)，室溫下攪拌混合物1.5小時(shí)。過濾反應(yīng)液，依次用甲醇和乙酸乙酯洗滌所得產(chǎn)物。濃縮濾液，加入水后用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機(jī)層，經(jīng)無水硫酸鎂干燥。蒸除溶劑后用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝4∶1→1∶1)純化殘留物得到淺黃色固體6-乙炔基苯并噻唑(mp47.5-49.0℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm3.16(1H，s)，7.63(1H，dd，J＝8.4，1.6Hz)，8.08(1H，dd，J＝8.5，0.6Hz)，8.11(1H，d，J＝1.4Hz)，9.04(1H，s)
(3)在氮?dú)夥障拢?-乙炔基苯并噻唑(29.5g)和2-碘-4-甲基噻唑的乙腈(600ml)溶液中加入三乙胺(280ml)和四(三苯基膦)合鈀(6.8g)。在氮?dú)夥障拢訜峄亓髟撊芤?小時(shí)。蒸除溶劑后用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1→1∶1)純化殘留物得到淺黃色粉末狀標(biāo)題化合物(41.2g)(mp116.0-117.0℃)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm2.51(3H，d，J＝0.9Hz)，6.96(1H，d，J＝0.9Hz)，7.71(1H，dd，J＝8.4，1.8Hz)，8.12(1H，d，J＝7.9Hz)，8.20(1H，d，J＝1.8Hz)，9.07(1H，s)實(shí)施例18化合物204的合成 在化合物216(40.0g)的丙酮(3.01)-緩沖液*(1.81)混合溶液中加入高錳酸鉀(49.3g)，室溫下攪拌混合物30分鐘。用冰冷卻反應(yīng)液，緩慢加入亞硝酸鈉(20.7g)后滴加10％硫酸(210ml)。在用冰冷卻條件下攪拌溶液30分鐘后用氯仿萃取上清液，水層用氯仿進(jìn)一步萃取。合并的有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。蒸除溶劑后用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1→1∶1)純化殘留物得到淺黃色粉末狀標(biāo)題化合物(30.1g)(mp134.5-135.5℃)。
緩沖液*碳酸氫鈉(6.8g)和無水硫酸鎂(68.0g)溶于水(3.01)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.51(3H，d，J＝0.8Hz)，7.45(1H，d，J＝0.8Hz)，8.16(1H，dd，J＝8.5，1.7Hz)，8.26(1H，dd，J＝8.5，0.6Hz)，8.64(1H，dd，J＝1.7，0.6Hz)，9.23(1H，s)實(shí)施例19化合物16的合成 在化合物204(200mg)和4-氰基苯甲醛(109mg)的乙酸(8.0m1)溶液中加入乙酸銨(321mg)，在回流條件下攪拌混合物2小時(shí)后在室溫下攪拌14小時(shí)。反應(yīng)液中加入水，用28％氨水中和，用氯仿萃取該溶液兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。所得殘留物用氯仿洗滌，濾出結(jié)晶得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(138mg)(mp295.0-295.5℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.34(3H，s)，7.24(1H，s)，8.00(2H，d，J＝8.5Hz)，8.10-8.37(4H，m)，8.86(1H，brs)，9.48(1H，s)，13.33(1H，brs)實(shí)施例20化合物50的合成
在化合物16(130mg)和碳酸鉀(148mg)的二甲亞砜(5.2ml)懸浮液中加入過氧化氫溶液(1.56ml)，100℃下攪拌混合物1小時(shí)。冷卻懸浮液至室溫，加入水后濾出所沉淀的結(jié)晶。用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝100∶0→90∶10)純化結(jié)晶后進(jìn)行重結(jié)晶(氯仿-甲醇-正己烷)得到淺黃色粉末狀標(biāo)題化合物(75.4mg)(mp＞300℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.34(3H，s)，7.22(1H，s)，7.44(1H，brs)，8.00-8.20(7H，m)，8.87(1H，brs)，9.47(1H，s)，13.15(1H，brs)實(shí)施例21 化合物71的合成(1)在-70℃下，在叔丁氧羰基氨基乙酸甲酯(2.00g)的甲苯(40ml)溶液中滴加1.02M氫化二異丁基鋁的甲苯(27ml)溶液，攪拌混合物1小時(shí)。在-70℃下向反應(yīng)液中加入甲醇(10ml)進(jìn)行猝滅，然后放置升溫至室溫。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋后用1N鹽酸水溶液洗滌。有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)硅藻土過濾、無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物經(jīng)硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝60∶40→30∶70)純化得到無色油狀(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(895mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm1.46(9H，s)，4.05-4.11(2H，m)，5.18(1H，s)，9.66(1H，s) (2)在化合物204(300mg)和(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(294mg)的四氫呋喃(10ml)溶液中加入乙酸銨(811mg)的甲醇(5.0ml)溶液，室溫下攪拌混合物2小時(shí)。在反應(yīng)液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液進(jìn)行中和，然后用乙酸乙酯萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物經(jīng)硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝40∶60→20∶80)純化得到淡黃色無定形的標(biāo)題化合物(291mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm1.49(9H，s)，2.44(3H，d，J＝0.9Hz)，4.43(2H，d，J＝6.1Hz)，5.29(1H，brs)，6.76(1H，s)，7.86(1H，dd，J＝8.5，1.8Hz)，8.18(1H，d，J＝8.4Hz)，8.55(1H，brs)，9.04(1H，s)實(shí)施例22化合物70的合成 在化合物71(100mg)的氯仿(10ml)溶液中加入4N鹽酸/二烷(1.0ml)，室溫下攪拌混合物1.5小時(shí)，蒸除溶劑后對(duì)殘留物進(jìn)行重結(jié)晶(甲醇-二乙醚)得到淺棕色粉末狀標(biāo)題化合物(80mg)(mp229.0-233.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.37(3H，d，J＝0.9Hz)，4.16-4.25(2H，m)，7.22(1H，d，J＝0.9Hz)，8.08(1H，dd，J＝8.6，1.8Hz)，8.18(1H，d，J＝8.5Hz)，8.60(3H，br)，8.90(1H，d，J＝0.9Hz)，9.47(1H，s)實(shí)施例23化合物72的合成 在化合物204(2.00g)和(1，3-二氧代-1，3-二氫吲哚-2-基)乙醛(2.00g)的四氫呋喃(70ml)溶液中加入乙酸銨(5.40g)的甲醇(50ml)溶液，室溫下攪拌混合物3.5小時(shí)。在反應(yīng)液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液進(jìn)行中和，然后用乙酸乙酯萃取三次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物經(jīng)硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝40∶60→20∶80)，(氯仿∶甲醇＝95∶5)和(氯仿∶乙酸乙酯＝35∶65)純化三次，得到淡黃色粉末狀的標(biāo)題化合物(1.90g)(mp250.5-255.0℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.44(3H，d，J＝0.8Hz)，5.08(2H，s)，6.74(1H，brs)，7.71-7.94(6H，m)，8.16(1H，d，J＝8.5Hz)，9.03(1H，s)實(shí)施例24化合物105的合成
(1)在化合物72(1.88g)的乙醇(45ml)懸浮液中加入一水合肼(2.12g)，室溫下攪拌混合物24小時(shí)。在該反應(yīng)液中加入甲醇和氯仿以完全溶解其中的沉淀。在溶液中加入NH硅膠后蒸除溶劑。殘留物用NH硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝95∶5)純化后用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝90∶10→氯仿∶甲醇∶氨＝100∶10∶1)純化得到淺黃色無定形的游離態(tài)化合物70(761mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.44(3H，d，J＝1.1Hz)，4.12(2H，s)，6.73(1H，br)，7.87(1H，dd，J＝8.5，1.7Hz)，8.17(1H，dd，J＝8.5，0.5Hz)，8.47(1H，br)，9.03(1H，s) (2)用冰冷卻下，在游離態(tài)化合物70(600mg)和三乙胺(370mg)的氯仿(15.0ml)溶液中滴加丁酰氯(0.21ml)。在用冰冷卻下攪拌30分鐘后向反應(yīng)液中加入水，用氯仿萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(乙酸乙酯→氯仿∶甲醇＝90∶10)純化，重結(jié)晶(乙酸乙酯→己烷)純化物得到黃色粉末狀標(biāo)題化合物(441mg)(mp190.0-191.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm0.89(3H，t，J＝7.4Hz)，1.47-1.64(2H，m)，2.14(2H，t，J＝7.5Hz)，2.34(3H，s)，4.36(2H，d，J＝5.6Hz)，7.15(1H，d，J＝0.9Hz)，8.08(1H，s)，8.14(1H，d，J＝8.5Hz)，8.34(1H，t，J＝5.1Hz)，8.85(1H，s)，9.43(1H，s)，12.72(1H，s)實(shí)施例25化合物88的合成 用冰冷卻下，在氫化鈉(13mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2.0ml)懸浮液中加入化合物72(100mg)，攪拌混合物10分鐘，用冰冷卻下，在該懸浮液中加入甲基碘(0.14ml)，在用冰冷卻下攪拌1.5小時(shí)。在反應(yīng)液中加入鹽水，用氯仿萃取。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(乙酸乙酯)純化后，重結(jié)晶(乙酸乙酯-己烷)純化物得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(35mg)(mp257.0-259.5℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.28(3H，d，J＝0.9Hz)，3.65(3H，s)，5.06(2H，s)，6.60(1H，d，J＝0.9Hz)，7.56(1H，dd，J＝8.4，1.7Hz)，7.72-7.93(4H，m)，8.11(1H，d，J＝1.6Hz)，8.23(1H，d，J＝8.5Hz)，9.09(1H，s)濃縮濾液得到下述結(jié)構(gòu)式表示的無色無定形的2-(4-苯并噻唑-6-基-1-甲基-5-(4-甲基噻唑-2-基)-1H-咪唑-2-基甲基)異吲哚-1，3-二酮(15mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.54(3H，d，J＝1.1Hz)，3.87(3H，s)，5.05(2H，s)，6.95(1H，d，J＝0.9Hz)，7.52(1H，dd，J＝8.5，1.7Hz)，7.72-7.93(4H，m)，7.96(1H，dd，J＝8.5，0.6Hz)，8.17(1H，dd，J＝1.7，0.5Hz)，8.93(1H，s)
實(shí)施例26化合物89的合成 在化合物88(328mg)的甲醇(5.0ml)懸浮液中加入一水合肼(290mg)，室溫下攪拌混合物3小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)液后用氯仿萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝90∶10→氯仿∶甲醇∶氨＝100∶10∶1)純化得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(166mg)(mp183.0-184.5℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.36(3H，d，J＝0.9Hz)，3.52(3H，s)，4.06(2H，s)，6.61(1H，d，J＝0.9Hz)，7.56(1H，dd，J＝8.5，1.6Hz)，8.10(1H，dd，J＝1.6，0.5Hz)，8.26(1H，dd，J＝8.4，0.5Hz)，9.10(1H，s)實(shí)施例27化合物90的合成
用冰冷卻條件下，在化合物89(159mg)和三乙胺(101mg)的氯仿(5.0ml)溶液中滴加丁酰氯(0.06ml)。用冰冷卻下，攪拌1小時(shí)后向反應(yīng)液中加入水，用氯仿萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝9∶1)純化后用NH硅膠柱色譜(乙酸乙酯)純化，重結(jié)晶(乙酸乙酯-己烷)純化物得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(137mg)(mp212.5-213.5℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm0.88(3H，t，J＝7.4Hz)，1.47-1.63(2H，m)，2.09-2.18(5H，m)，3.47(3H，s)，4.46(2H，d，J＝5.8Hz)，7.04(1H，d，J＝0.9Hz)，7.64(1H，dd，J＝8.5，1.7Hz)，8.17(1H，dd，J＝8.5，0.5Hz)，8.34(1H，dd，J＝1.7，0.5Hz)，8.46(1H，brt，J＝5.6Hz)，9.49(1H，s)實(shí)施例28化合物95的合成 (1)用冰冷卻條件下，在2-(甲氨基)乙醇(3.0g)和三乙胺(11.0ml)的氯仿(30ml)溶液中滴加丁酰氯(4.6ml)。用冰冷卻下攪拌混合物20分鐘后在反應(yīng)液中加入水，混合物用氯仿萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝2∶3→1∶4，然后氯仿∶甲醇＝9∶1)純化后得到淺黃色油狀N-(羥乙基)-N-甲基丁酰胺(2.8g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.91-1.02(3H，m)，1.58-1.77(2H，m)，2.26-2.46(2H，m)，2.96和3.07(3H，2s)，3.47和3.56(2H，2t，J＝5.7Hz)，3.78(2H，t，J＝5.1Hz) (2)在N-(羥乙基)-N-甲基丁酰胺(600mg)的二氯甲烷(6.0ml)溶液中加入Dess-Martin試劑(1.9g)。室溫下攪拌混合物1.5小時(shí)。蒸除溶劑得到未純化的N-甲基-N-(2-氧代乙基)丁酰胺粗品結(jié)晶。在N-甲基-N-(2-氧代乙基)丁酰胺和化合物204(301mg)的四氫呋喃(15ml)溶液中加入乙酸銨(820mg)的甲醇(5.0ml)溶液，室溫下攪拌混合物14小時(shí)。用飽和碳酸氫鈉水溶液中和反應(yīng)液后用乙酸乙酯萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用NH硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝35∶65→氯仿∶甲醇＝95∶5)純化后經(jīng)過重結(jié)晶(乙酸乙酯-己烷)得到淺黃色粉末狀標(biāo)題化合物(233mg)(mp175.0-175.5℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm0.87-0.98(3H，m)，1.48-1.67(2H，m)，2.26-2.44(5H，m)，2.90和3.07(3H，2s)，4.63(2H，s)，7.15(1H，m)，8.03-8.19(2H，m)，8.84(1H，m)，9.44(1H，d，J＝1.2Hz)，12.67和12.84(1H，2br)實(shí)施例29化合物96的合成
(1)-78℃下，在(2-氧代吡咯烷-1-基)乙酸甲酯(1.01g)的甲苯(10ml)溶液中滴加1.02M氫化二異丁基鋁的甲苯(16ml)溶液，攪拌混合物1小時(shí)。-78℃下在反應(yīng)液中加入甲醇進(jìn)行猝滅，然后用1N鹽酸水溶液稀釋并攪拌升溫至室溫。用硅藻土過濾反應(yīng)液后使濾液干燥。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝95∶5→90∶10)純化得到無色油狀2-氧代吡咯烷-1-基-乙醛(120mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.04-2.20(2H，m)，2.46(2H，t，J＝8.2Hz)，3.47(2H，t，J＝8.2Hz)，4.17(2H，s)，9.61(1H，s) (2)在2-氧代吡咯烷-1-基-乙醛(120mg)和化合物204(230mg)的四氫呋喃(10ml)溶液中加入乙酸銨(640ml)的甲苯(5.0ml)溶液，室溫下攪拌混合物1.5小時(shí)。反應(yīng)液用飽和碳酸氫鈉水溶液中和后用氯仿萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用NH硅膠柱色譜(乙酸乙酯→氯仿∶甲醇＝90∶10)純化后重結(jié)晶(氯仿-乙酸乙酯-己烷)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(161mg)(mp209.5-210.5℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm
1.90-2.05(2H，m)，2.25-2.33(2H，m)，2.33(3H，s)，3.43(2H，t，J＝7.2Hz)，4.50(2H，s)，7.15(1H，d，J＝1.1Hz)，8.08(1H，brs)，8.13(1H，d，J＝8.4Hz)，8.81(1H，brs)，9.43(1H，s)，12.82(1H，br)實(shí)施例30化合物197的合成 (1)用冰冷卻條件下，在氫化鈉(181mg)的N，N-二甲基甲酰胺(5.0ml)懸浮液中加入唑烷-2-酮(331mg)，攪拌混合物20分鐘。用冰冷卻下，在該懸浮液中滴加2-溴乙氧基甲基苯(1.11g)的N，N-二甲基甲酰胺(3.0ml)溶液，然后在室溫下攪拌混合物1小時(shí)。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋，用鹽水洗滌兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝2∶3)純化得到無色油狀3-(2-芐氧乙基)唑烷-2-酮(281mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm3.46-3.52(2H，m)，3.63-3.72(4H，m)，4.25-4.34(2H，m)，4.53(2H，s)，7.27-7.40(5H，m) (2)在3-(2-芐氧乙基)唑烷-2-酮(278mg)的甲醇(10ml)溶液中加入20％氫氧化鈀(138mg)，在氫氣氛及室溫下攪拌混合物2小時(shí)。反應(yīng)液用硅藻土過濾后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝90∶10)純化得到無色油狀3-(2-羥乙基)唑烷-2-酮(144mg)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm2.29(1H，br)，3.39-3.47(2H，m)，3.64-3.77(2H，m)，3.78-3.89(2H，m)，4.30-4.43(2H，m) (3)在3-(2-羥乙基)唑烷-2-酮(144mg)的二氯甲烷(5.0ml)溶液中加入Dess-Martin試劑(516mg)。室溫下攪拌混合物1小時(shí)。蒸除溶劑得到未純化的(2-氧代唑烷-3-基)乙醛粗品結(jié)晶。在(2-氧代唑烷-3-基)乙醛和化合物204(286mg)的四氫呋喃(10ml)懸浮液中加入乙酸銨(771mg)的甲醇(5.0ml)溶液，室溫下攪拌混合物2周。反應(yīng)液用飽和碳酸氫鈉水溶液中和后用乙酸乙酯萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用NH硅膠柱色譜(氯仿→氯仿∶甲醇＝95∶5)純化后經(jīng)過重結(jié)晶(甲醇-乙酸乙酯-己烷)得到無色粉末狀目標(biāo)(149mg)(mp232.0-233.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.34(3H，s)，3.60-3.68(2H，m)，4.28-4.36(2H，m)，4.49(2H，s)，7.16(1H，d，J＝0.9Hz)，8.08(1H，br)，8.14(1H，d，J＝8.4Hz)，8.83(1H，br)，9.44(1H，s)，12.93(1H，br)實(shí)施例31化合物138的合成
在乙醛酸乙酯(45％水溶液，2.36g)和化合物204(2.0g)的四氫呋喃(60ml)溶液中加入乙酸銨(5.35g)的甲醇(40ml)溶液，室溫下攪拌混合物12小時(shí)。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋后依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝5∶5→3∶7→1∶9)純化后用NH硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝50∶1)純化，然后通過重結(jié)晶(乙酸乙酯-己烷)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(1.01g)(mp238.5-239.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm1.37(3H，t，J＝7.1Hz)，2.31(3H，s)，4.40(2H，q，J＝6.8Hz)，7.24(1H，s)，8.03(1H，d，J＝8.7Hz)，8.14(1H，d，J＝8.5Hz)，8.74(1H，s)，9.48(1H，s)，14.02(1H，s)實(shí)施例32化合物82的合成 在-40℃下，在氫化鋁鋰(134mg)的四氫呋喃(30ml)懸浮液中加入化合物138(700mg)，攪拌混合物直至溫度升至0℃，繼續(xù)在0℃下攪拌30分鐘。反應(yīng)液中加入2N鹽酸水溶液，攪拌5分鐘。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋后依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝20∶1→10∶1)純化和重結(jié)晶(氯仿-甲醇-己烷)得到淺橙色粉末狀標(biāo)題化合物(309mg)(mp222.0-223.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.34(3H，d，J＝0.8Hz)，4.53(2H，s)，5.50(1H，brs)，7.15(1H，d，J＝0.9Hz)，8.05-8.18(2H，m)，8.87(1H，brs)，9.43(1H，s)，12.80(1H，br)實(shí)施例33化合物198的合成 在化合物82(239mg)、氯化銅(I)(7mg)和吡啶(1.0ml)的甲苯(2.0ml)懸浮液中加入異氰酸乙酯(57mg)，在50℃下攪拌混合物2小時(shí)。溶液中加入水并用氯仿萃取。有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝30∶1)純化后重結(jié)晶(乙酸乙酯-己烷)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(151mg)(mp144.0-145.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm1.04(3H，t，J＝7.2Hz)，2.34(3H，s)，2.99-3.12(2H，m)，5.04(2H，s)，7.18(1H，d，J＝0.8Hz)，7.34(1H，brt，J＝5.7Hz)，8.03-8.20(2H，m)，8.90(1H，brs)，9.45(1H，s)，13.06(1H，brs)實(shí)施例34
化合物81的合成 (1)在氮?dú)夥占?70℃下，在5-丙基二氫呋喃-2-酮(1.50g)的甲苯(30ml)溶液中滴加1.02M氫化二異丁基鋁的甲苯(23.4ml)溶液，50分鐘滴加完畢。-70℃下攪拌混合物1小時(shí)。-70℃下向反應(yīng)液中加入甲醇(3.0ml)進(jìn)行猝滅，然后放置升溫至室溫。反應(yīng)液中加入10％檸檬酸水溶液后攪拌5分鐘。用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液，用鹽水洗滌有機(jī)層。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物經(jīng)硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝90∶10→80∶20)純化得到無色油狀5-丙基四氫呋喃-2-醇(440mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.9-0.98(3H，m)，1.29-2.21(7H，m)，2.45-2.56(1H，m)，3.94-4.26(1H，m)，5.41-5.60(1H，m) (2)在化合物204(741mg)和5-丙基四氫呋喃-2-醇(435mg)的四氫呋喃(25ml)溶液中加入乙酸銨(1.98g)的甲醇(18ml)溶液，室溫下攪拌混合物13小時(shí)。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋后依次用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。用硅膠柱色譜(乙酸乙酯→氯仿∶甲醇＝40∶1)純化殘留物。純化物溶于甲醇，加入4N鹽酸/乙酸乙酯溶液。蒸除溶劑后，通過重結(jié)晶(甲醇-乙酸乙酯)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(165mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm0.82-0.96(3H，m)，1.25-1.49(4H，m)，1.70-2.09(2H，m)，2.33-2.48(3H，m)，2.90-3.29(2H，m)，3.51(1H，m)，7.37(1H，s)，7.84(1H，dd，J＝8.5，1.8Hz)，8.29(1H，d，J＝8.5Hz)，8.61(1H，d，J＝1.7Hz)，9.58(1H，s)實(shí)施例35化合物201的合成 在游離態(tài)化合物81(342mg)的二氯甲烷(7.0ml)溶液中加入Dess-Martin試劑(400mg)。室溫下攪拌混合物2小時(shí)。反應(yīng)液中加入水并用氯仿萃取。有機(jī)層用鹽水洗滌后經(jīng)無水硫酸鎂干燥，然后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1→3∶7→1∶9)純化后經(jīng)過重結(jié)晶(乙酸乙酯-己烷)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(225mg)(mp145.0-146.0℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.93(3H，t，J＝7.4Hz)，1.58-1.71(2H，m)，2.44(3H，d，J＝0.9Hz)，2.44-2.50(2H，m)，2.95-3.11(4H，m)，6.72(1H，d，J＝0.9Hz)，7.86(1H，dd，J＝8.5，1.8Hz)，8.16(1H，dd，J＝8.5，0.6Hz)，8.48(1H，br)，9.03(1H，s)實(shí)施例36化合物73的合成
(1)在2-丁氨基乙醇(3.00g)的氯仿(30ml)溶液中滴加二碳酸二叔丁酯(5.87g)，室溫下攪拌混合物15分鐘。蒸除溶劑得到無色油狀丁基-(2-羥乙基)氨基甲酸叔丁酯(6.10g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.93(3H，t，J＝7.3Hz)，1.22-1.56(13H，m)，3.22(2H，t，J＝7.3Hz)，3.38(2H，t，J＝5.1Hz)，3.69-3.80(2H，m) (2)室溫下，在丁基-(2-羥乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.00g)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入Dess-Martin試劑(2.15g)。室溫下攪拌混合物15分鐘。蒸除溶劑后用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝80∶20→75∶25)純化殘留物得到無色油狀丁基-(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(755mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.93(3H，t，J＝7.2Hz)，1.20-1.55(13H，m)，3.19-3.36(2H，m)，3.82(1H，s)，3.92(1H，s)，9.58(1H，s)
(3)在化合物204(750mg)和丁基-(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(728mg)的四氫呋喃(30ml)溶液中加入乙酸銨(2.00g)的甲醇(20ml)溶液，室溫下攪拌混合物1小時(shí)。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋后依次用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑。用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝80∶20→50∶50)純化殘留物得到無色無定形的標(biāo)題化合物(862mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm0.88(3H，t，J＝7.2Hz)，1.20-1.59(13H，m)，2.34(3H，s)，3.29(2H，brs)，4.46(2H，brs)，7.14(1H，s)，8.02-8.18(2H，m)，8.86(1H，brs)，9.43(1H，s)，12.73(1H，brs)實(shí)施例37化合物74的合成 室溫下將化合物73(875mg)的10％鹽酸/甲醇(10ml)溶液攪拌4小時(shí)。在反應(yīng)液中加入4N鹽酸/二烷(1.0ml)溶液后室溫下攪拌30分鐘。蒸除溶劑后殘留物經(jīng)過重結(jié)晶(甲醇-二乙醚)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(730mg)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm0.91(3H，t，J＝7.4Hz)，1.31-1.45(2H，m)，1.62-1.75(2H，m)，2.38(3H，d，J＝1.1Hz)，3.00-3.15(2H，m)，4.32-4.41(2H，m)，7.25(1H，d，J＝0.9Hz)，8.12(1H，dd，J＝8.7，1.8Hz)，8.19(1H，dd，J＝8.7，0.6Hz)，8.94(1H，d，J＝1.2Hz)，9.49(1H，s)，9.69(2H，brs)實(shí)施例38化合物78的合成 (1)在哌啶-4-基甲醇(2.00g)在乙酸乙酯(20ml)和四氫呋喃(10ml)混合溶劑中的溶液中加入二碳酸二叔丁酯(4.17g)，室溫下攪拌混合物22小時(shí)。蒸除溶劑，殘留物中加入乙酸乙酯并依次用飽和氯化銨水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑得到淺粉紅色油狀4-羥甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.06g)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm1.02-1.82(5H，m)，1.46(9H，s)，2.59-2.81(2H，m)，3.43-3.59(2H，m)，4.02-4.23(2H，m) (2)在4-羥甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.00g)的二氯甲烷(40ml)溶液中加入Dess-Martin試劑(7.89g)。室溫下攪拌混合物1.5小時(shí)。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋后依次用1％氫氧化鈉水溶液和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑，殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1→1∶1)純化得到無色油狀4-甲酰哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.43g)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm1.46(9H，s)，1.38-1.99(4H，m)，2.41(1H，m)，2.83-3.03(2H，m)，3.87-4.08(2H，m)，9.66(1H，s) (3)在化合物204(2.00g)和4-甲酰哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.22g)的四氫呋喃(70ml)溶液中加入乙酸銨(5.35g)的甲醇(35ml)溶液，室溫下攪拌混合物15小時(shí)。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋后依次用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝50∶1→20∶1)純化得到淺黃色無定形的標(biāo)題化合物(3.27g)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm1.47(9H，s)，1.67-2.17(4H，m)，2.43(3H，d，J＝0.9Hz)，2.76-3.09(3H，m)，4.13-4.33(2H，m)，6.68(1H，s)，7.85(1H，dd，J＝8.6，1.5Hz)，8.17(1H，d，J＝8.4Hz)，8.30(1H，s)，9.02(1H，s)實(shí)施例39化合物77的合成 在化合物78(2.00g)的甲醇(20ml)溶液中加入4N鹽酸/乙酸乙酯溶液(10.4ml)，室溫下攪拌混合物1小時(shí)，然后在50℃下攪拌1.5小時(shí)。用氯仿稀釋反應(yīng)液后用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機(jī)層。在水層中加入氯化鈉使之飽和，然后用氯仿萃取。合并的有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑，殘留物用NH硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝50∶1→20∶1)純化后經(jīng)過重結(jié)晶(乙酸乙酯)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(793mg)(mp199.5-200.5℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm1.76-2.17(4H，m)，2.45(3H，d，J＝0.9Hz)，2.72-2.85(2H，m)，3.02(1H，m)，3.20-3.32(2H，m)，6.68(1H，brs)，7.85(1H，dd，J＝8.5，1.7Hz)，8.17(1H，dd，J＝8.5，0.3Hz)，8.32(1H，br)，9.03(1H，s)實(shí)施例40化合物226的合成 (1)用冰冷卻條件下在2-氨基-5-甲基噻唑(2.00g)的乙腈(20ml)懸浮液中加入亞硝酸叔丁酯(1.99g)后，緩慢加入溴化銅(II)(4.30g)。0℃下攪拌該懸浮液3小時(shí)，反應(yīng)液中加入1N鹽酸(100ml)后用乙酸乙酯(200ml)萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(中性；己烷∶乙酸乙酯＝80∶20)純化得到黃色油狀2-溴-5-甲基噻唑(1.31g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.44(3H，d，J＝1.2Hz)，7.25(1H，d，J＝1.1Hz)
(2)-78℃下，在2-溴-5-甲基噻唑(1.00g)的四氫呋喃(10ml)溶液中滴加2.59M正丁基鋰的己烷(2.40ml)溶液，相同溫度下攪拌混合物40分鐘。-78℃下滴加入碘(1.55g)的四氫呋喃(5ml)溶液，相同溫度下攪拌混合物30分鐘。在反應(yīng)液中加入飽和氯化銨水溶液(20ml)以使反應(yīng)猝滅。放置該溶液至室溫。該溶液中加入水(20ml)并用乙酸乙酯(100ml)萃取兩次。有機(jī)層用飽和硫代硫酸鈉水溶液(50ml)洗滌后經(jīng)無水硫酸鎂干燥。蒸除溶劑后用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝85∶15)純化殘留物得到棕色油狀2-碘-5-甲基噻唑(764mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm(300MHz，CDCl3)δppm2.47(3H，d，J＝1.2Hz)，7.26(1H，d，J＝1.2Hz) (3)在氮?dú)夥障?，在?shí)施例17-(2)合成的6-乙炔基苯并噻唑(483mg)和2-碘-5-甲基噻唑(740mg)的乙腈(10ml)溶液中加入三乙胺(15ml)和四(三苯基膦)合鈀(179mg)。在氮?dú)夥障录訜峄亓髟摲磻?yīng)液6小時(shí)。蒸除溶劑后用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝85∶15→50∶50)純化殘留物得到黃色粉末狀標(biāo)題化合物(601mg)(mp137.0-140.0℃)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm2.53(3H，d，J＝1.1Hz)，7.53(1H，d，J＝1.1Hz)，7.71(1H，dd，J＝8.5，1.6Hz)，8.13(1H，dd，J＝8.5，0.6Hz)，8.20(1H，dd，J＝1.6，0.5Hz)，9.07(1H，s)
實(shí)施例41化合物227的合成 在化合物226(593mg)的丙酮(45.7ml)-緩沖液*(25.5ml)混合溶液中加入高錳酸鉀(733mg)，室溫下攪拌混合物30分鐘。用冰冷卻反應(yīng)液，緩慢加入亞硝酸鈉(297mg)后滴加10％硫酸(3.0ml)。用冰冷卻條件下攪拌溶液15分鐘后向反應(yīng)液中加入氯仿(100ml)和水(30ml)，然后用硅藻土過濾反應(yīng)液。分離濾液，用氯仿(100ml)再次萃取水層。合并的有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑，用硅膠柱色譜(中性；己烷∶乙酸乙酯＝65∶35→45∶55)、(中性；己烷∶乙酸乙酯＝5∶95)兩次純化殘留物得到黃色粉末狀標(biāo)題化合物(424mg)(mp154.0-155.0℃)。
緩沖液*碳酸氫鈉(6.8g)和無水硫酸鎂(68.0g)溶于水(3.01)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.65(3H，d，J＝1.1Hz)，7.78(1H，d，J＝1.1Hz)，8.15(1H，dd，J＝8.5，1.7Hz)，8.24(1H，dd，J＝8.5，0.6Hz)，8.63(1H，dd，J＝1.7，0.6Hz)，9.22(1H，s)實(shí)施例42化合物228的合成
在化合物227(414mg)的四氫呋喃(10ml)溶液中加入乙醛(0.15ml)和乙酸銨(900mg)的甲醇(10ml)溶液，室溫下攪拌混合物13小時(shí)。在反應(yīng)液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(70ml)進(jìn)行中和，用乙酸乙酯(150ml)萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑，用硅膠柱色譜(乙酸乙酯→氯仿∶甲醇＝90∶10)純化殘留物后經(jīng)過重結(jié)晶(正己烷-乙酸乙酯)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(230mg)(mp210.0-211.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.37(3H，s)，2.42(3H，s)，7.44(1H，brs)，8.09-8.15(2H，m)，8.78(1H，br)，9.42(1H，s)，12.53(1H，br)實(shí)施例43化合物239的合成 (1)在1-(2-羥乙基)-2-咪唑烷酮(7.67g)的N，N-二甲基甲酰胺(75ml)溶液中加入咪唑(9.63g)和叔丁基二甲基氯硅烷(9.77g)，室溫下攪拌混合物2小時(shí)。反應(yīng)液中加入水并用乙酸乙酯稀釋，然后用鹽水洗滌有機(jī)層。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝35∶65→0∶100)純化殘留物后得到無色固體狀1-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]咪唑烷-2-酮(8.73g)(mp53.5-57.0℃)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm0.06(6H，s)，0.89(9H，s)，3.30(2H，t，J＝5.3Hz)，3.34-3.46(2H，m)，3.54-3.65(2H，m)，3.74(2H，t，J＝5.3Hz) (2)用己烷洗滌氫化鈉(393mg)兩次后加入四氫呋喃(10ml)。將容器置于冰浴中冷卻，保持容器內(nèi)溫度低于10℃的條件下，向容器中滴加1-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]咪唑烷-2-酮(2.00g)的四氫呋喃(10ml)溶液。攪拌該溶液15分鐘后在相同溫度下滴加碘代甲烷(766μl)，室溫下攪拌混合物20分鐘。加水使反應(yīng)猝滅，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)液。依次用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌混合液。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝35∶65→0∶100，氯仿∶甲醇＝4∶1)純化得到油狀物質(zhì)混合物(*)。將所有的水層合并濃縮，所得殘留物懸浮于氯仿-甲醇混合物中，然后過濾該混合物。所得物經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物和先前得到的油狀物質(zhì)混合物(*)經(jīng)硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝9∶1)純化得到淡黃色油狀1-(2-羥乙基)-3-甲基咪唑烷-2-酮(907mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm2.80(3H，s)，3.29-3.45(6H，m)，3.74-3.79(2H，m)
(3)在1-(2-羥乙基)-3-甲基咪唑烷-2-酮(372mg)的氯仿(10ml)溶液中加入Dess-Martin試劑(1.094g)。室溫下攪拌混合物1.5小時(shí)。在該反應(yīng)液中加入甲醇(10ml)、化合物204(400mg)和乙酸銨(856mg)，室溫下攪拌2.5小時(shí)。反應(yīng)液用氯仿稀釋后用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝20∶1→15∶1)，(氯仿∶丙酮＝2∶1→1∶1)和NH型硅膠柱色譜(氯仿)三次純化后經(jīng)過重結(jié)晶(乙酸乙酯-二乙醚)得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(27mg)(mp232.0-233.5℃)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm2.45(3H，d，J＝0.9Hz)，2.83(3H，s)，3.30-3.54(4H，m)，4.47(2H，s)，6.75(1H，s)，7.89(1H，dd，J＝8.6，1.5Hz)，8.12-8.21(1H，m)，9.03(1H，s)實(shí)施例44化合物240的合成 (1)用己烷洗滌氫化鈉(393mg)兩次后加入四氫呋喃(10ml)。將容器置于冰浴中冷卻，保持容器內(nèi)溫度低于10℃條件下，向容器中滴加實(shí)施例43-(1)合成的化合物(2.00g)的四氫呋喃(10ml)溶液。攪拌該溶液5分鐘后在相同溫度下滴加二碳酸二叔丁酯(2.31g)的四氫呋喃(10ml)溶液。室溫下攪拌混合物2小時(shí)后在50℃下攪拌18小時(shí)。在該反應(yīng)混合物中依次加入飽和氯化銨水溶液和乙酸乙酯。有機(jī)層經(jīng)鹽水洗滌和無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)純化得到無色粉末狀3-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]-2-氧代咪唑烷-1-羧酸叔丁酯(1.54g)(mp35.5-45.5℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm0.05(6H，s)，0.89(9H，s)，1.53(9H，s)，3.35(2H，t，J＝5.2Hz)，3.48-3.55(2H，m)，3.71-3.79(4H，m) (2)在3-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]-2-氧代咪唑烷-1-羧酸叔丁酯(1.50g)的四氫呋喃(15ml)溶液中加入1.0M正四丁基氟化銨的四氫呋喃(4.35ml)溶液，室溫下攪拌混合物1小時(shí)。在反應(yīng)液中加入甲醇(1ml)，蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝20∶1→10∶1)純化得到無色油狀3-(2-羥乙基)-2-氧代咪唑烷-1-羧酸叔丁酯(940mg)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm1.39-1.58(9H，m)，3.27-3.86(8H，m) (3)在3-(2-羥乙基)-2-氧代咪唑烷-1-羧酸叔丁酯(800mg)的氯仿(8ml)溶液中加入Dess-Martin試劑(1.47g)。室溫下攪拌混合物1小時(shí)。該混合反應(yīng)物經(jīng)乙酸乙酯稀釋，用硅藻土過濾，蒸除濾液中的溶劑。在殘留物中加入四氫呋喃(30ml)、甲醇(15ml)、化合物204(1.00g)和乙酸銨(2.14g)，室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)液用氯仿稀釋后用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。水層用氯仿萃取。合并有機(jī)層并經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝40∶1→20∶1)純化后得到淺黃色無定形的3-[5-苯并噻唑-6-基-4-(4-甲基噻唑-2-基)-1H-咪唑-2-基甲基]-2-氧代咪唑烷-1-羧酸叔丁酯(983mg)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm1.49(9H，s)，2.44(3H，d，J＝0.9Hz)，3.50-3.58(2H，m)，3.76-3.84(2H，m)，4.58(2H，s)，6.76(1H，s)，7.88-7.96(1H，m)，8.14(1H，d，J＝8.7Hz)，9.03(1H，s) (4)在3-[5-苯并噻唑-6-基-4-(4-甲基噻唑-2-基)-1H-咪唑-2-基甲基]-2-氧代咪唑烷-1-羧酸叔丁酯(800mg)的甲醇(8ml)溶液中加入4N鹽酸/乙酸乙酯(4.03ml)，室溫下攪拌混合物18小時(shí)。反應(yīng)液用氯仿稀釋后用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。水層用氯仿萃取。合并有機(jī)層并經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝20∶1→10∶1)純化后經(jīng)過重結(jié)晶(氯仿-乙酸乙酯)得到無色粉末狀的標(biāo)題化合物(392mg)(mp236.0-237.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.34(3H，s)，3.23-3.32(2H，m)，3.40-3.48(2H，m)，4.35(2H，s)，6.53(1H，s)，7.16(1H，d，J＝0.9Hz)，8.10-8.17(2H，m)，8.86(1H，brs)，9.44(1H，s)，12.83(1H，brs)實(shí)施例45化合物242的合成
(1)用冰冷卻條件下，在氧化鉻(VI)的水(3ml)溶液中依次加入硫酸(2.86ml)和水(6ml)。用冰冷卻至內(nèi)溫保持在20℃以下的條件下，在該溶液中滴加2-羥甲基氧雜環(huán)丁烷(1.00g)的丙酮(22ml)溶液，室溫下攪拌混合物2小時(shí)。加入2-丙醇使反應(yīng)猝滅。反應(yīng)液用乙酸乙酯稀釋，用硅藻土過濾。濾液用鹽水洗滌，水層用乙酸乙酯萃取兩次。合并有機(jī)層并經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(中性，氯仿∶甲醇＝9∶1→4∶1)純化得到淺黃色油狀氧雜環(huán)丁烷-2-羧酸(83mg)。
1H NMR(200MHz，CDCl3)δppm2.70-2.90(1H，m)，3.01-3.21(1H，m)，4.68-4.87(2H，m)，5.19(1H，dd，J＝9.2，6.6Hz) (2)在化合物70(301mg)、氧雜環(huán)丁烷-2-羧酸(74mg)和一水合1-羥基苯并三唑(118mg)的N，N-二甲基甲酰胺(1.5ml)溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(167mg)，室溫下攪拌混合物3小時(shí)。反應(yīng)混合物用氯仿稀釋后用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。水層用氯仿萃取兩次。合并有機(jī)層并經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(氯仿∶甲醇＝30∶1→15∶1)純化后經(jīng)過重結(jié)晶(氯仿-乙酸乙酯)得到無色粉末狀的標(biāo)題化合物(265mg)(mp224.5-226.5℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm
2.34(3H，s)，2.52-2.63(1H，m)，2.86-3.00(1H，m)，4.38-4.67(4H，m)，4.99(1H，dd，J＝9.0，6.5Hz)，7.15(1H，d，J＝0.9Hz)，8.03-8.17(2H，m)，8.52(1H，t，J＝5.8Hz)，8.87(1H，s)，9.44(1H，s)，12.72(1H，s)表1所列的化合物按照實(shí)施例1-48所述的方法，用相應(yīng)的材料制得。
實(shí)施例46化合物250的合成 (1)用冰冷卻的條件下，在2-氨基-4-三氟甲基噻唑(1.00g)的乙腈(10ml)溶液中滴加亞硝酸叔丁酯(679mg)后逐步加入碘化銅(I)(1.25g)。0℃下攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，然后加入1N鹽酸(100ml)并用乙酸乙酯(100ml)萃取兩次。在有機(jī)層中加入硅膠后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝80∶20)純化得到棕色固體狀2-碘-4-三氟甲基噻唑(747mg)(mp35.5-36.0℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm7.75(1H，q，J＝0.9Hz) (2)在氮?dú)夥障?，在?shí)施例17-(2)合成的6-乙炔基苯并噻唑(402mg)和2-碘-4-三氟甲基噻唑(708mg)的乙腈(8ml)溶液中加入三乙胺(12.5ml)和四(三苯基膦)合鈀(151mg)，在氮?dú)夥障录訜峄亓?小時(shí)。蒸除溶劑后，殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝85∶15→70∶30)純化得到黃色粉末狀標(biāo)題化合物(573mg)(mp153.0-154.0℃)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm7.74(1H，dd，J＝8.5，1.6Hz)，7.81(1H，q，J＝0.9Hz)，8.16(1H，dd，J＝8.5，0.6Hz)，8.24(1H，dd，J＝1.7，0.6Hz)，9.11(1H，s)實(shí)施例47化合物251的合成 在化合物250(562mg)的丙酮(35.9ml)-緩沖液*(20.0ml)混合溶液中加入高錳酸鉀(572mg)，室溫下攪拌該混合物30分鐘。用冰冷卻反應(yīng)混合物，緩慢加入亞硝酸鈉(234mg)后滴加10％硫酸(2.4ml)。用冰冷卻條件下，攪拌該溶液15分鐘，向反應(yīng)液中加入氯仿(100ml)和水(30ml)后用硅藻土過濾所得溶液。分離濾液，水層用氯仿(100ml)再次萃取。合并的有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(中性；己烷∶乙酸乙酯＝50∶50)純化得到黃色粉末狀標(biāo)題化合物(113mg)(mp163.5-164.5℃)。
緩沖液*碳酸氫鈉(6.8g)和無水硫酸鎂(68.0g)溶于水(3.01)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δppm8.14-8.32(3H，m)，8.69(1H，m)，9.27(1H，s)實(shí)施例48化合物244的合成
在化合物251(107mg)的四氫呋喃(5ml)溶液中加入乙醛(0.15ml)和乙酸銨(194mg)的甲醇(3ml)溶液，室溫下攪拌該混合物3.5小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入碳酸氫鈉水溶液(50ml)進(jìn)行中和，用乙酸乙酯(100ml)萃取兩次。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸除溶劑。殘留物用硅膠柱色譜(己烷∶乙酸乙酯＝30∶70→1∶99)和重結(jié)晶(正己烷-乙酸乙酯)純化得到無色粉末狀標(biāo)題化合物(25mg)(mp190.5-192.0℃)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm2.40(3H，s)，8.03(1H，dd，J＝8.6，1.5Hz)，8.15(1H，d，J＝8.6Hz)，8.34(1H，s)，8.89(1H，brs)，9.45(1H，s)，12.78(1H，br)
表1
























試驗(yàn)例1(Smad2/3磷酸化抑制活性試驗(yàn))在平板上接種A549細(xì)胞，用添加了10％FBS的Ham’s F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)過夜。用含有或不含所述化合物的相同培養(yǎng)基替換該培養(yǎng)基，再孵育2小時(shí)后加入終濃度為1ng/ml的TGF-β1，繼續(xù)孵育1小時(shí)。孵育完畢后撤除培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞后用RIPA溶液裂解細(xì)胞。用抗Smad2/3抗體使細(xì)胞裂解物溶液產(chǎn)生免疫沉淀反應(yīng)，然后進(jìn)行Western印跡試驗(yàn)。以兔抗磷酸化絲氨酸抗體作為初級(jí)抗體，HRP標(biāo)記的抗兔IgG抗體作為二級(jí)抗體，以ECL Western印跡檢測(cè)試劑作為檢測(cè)試劑，用Limi-Imager F1(Roche Diagnostics)測(cè)定發(fā)光量。
根據(jù)上述方法，測(cè)定各化合物抗TGF-β1刺激所引起的Smad2/3磷酸化的抑制活性，計(jì)算IC50值。
試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
表2

試驗(yàn)例2(毛囊細(xì)胞增殖試驗(yàn))按照Arase等人的方法(Arase等，J Dermatol sci 2，66-70(1991))，從人發(fā)中分離毛囊細(xì)胞并用KGM-1(Clonetics)培養(yǎng)。
將毛囊細(xì)胞接種于24孔板上，培養(yǎng)過夜后用另一個(gè)含有或不含所述化合物的培養(yǎng)基替換培養(yǎng)基，再孵育2小時(shí)后加入終濃度為0.1ng/ml的TGF-β1，繼續(xù)孵育72小時(shí)。在完成培養(yǎng)前2小時(shí)，以培養(yǎng)基的1/10量向培養(yǎng)基中加入Alamar blue試劑，測(cè)定培養(yǎng)基的熒光強(qiáng)度(Ex544nm，Em590nm)以確定活細(xì)胞的數(shù)量。

圖1顯示只給予TGF-β1以及同時(shí)給予TGF-β1和所述化合物時(shí)的活細(xì)胞數(shù)量，假設(shè)不添加TGF-β1培養(yǎng)細(xì)胞72小時(shí)后的活細(xì)胞數(shù)量為100％。
工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明化合物對(duì)TGF-β的I型受體ALK5有抑制活性，可用作治療或預(yù)防脫發(fā)癥或糖尿病性腎病等多種與TGF-β的I型受體ALK5相關(guān)的疾病的藥物。
權(quán)利要求
1.式 表示的一種噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中X1和X2互不相同，表示硫原子或碳原子；R1表示苯基；被選自鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羥基、具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷氧基和具有1-6個(gè)碳原子的烷基氨基的1-5個(gè)基團(tuán)取代的苯基；與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)或非芳香雜環(huán)稠合的苯基；吡啶基；喹啉基；異喹啉基；或與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)稠合的吡啶基；R2表示氫原子、鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、被1-5個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、具有1-6個(gè)碳原子的烷?；蚓哂?-5個(gè)碳原子的羥烷基；和A為式 表示的基團(tuán)，其中R5表示氫原子；羥基；具有1-6個(gè)碳原子的烷基；具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷基；或被羥基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、被具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基或被具有1-6個(gè)碳原子的烷基氨基取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基取代的具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷基；R4表示苯基；被選自鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、氨基甲?；颓杌?-5個(gè)基團(tuán)取代的苯基；氫原子；具有1-12個(gè)碳原子的烷基；具有2-12個(gè)碳原子的烯基；具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羥基、具有8-12個(gè)碳原子的烷氧基苯基烷氧基、苯二甲酰亞氨基、甲苯磺酰氧基或嗎啉代取代的具有1-12個(gè)碳原子的烷基；被1-5個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基；被氧代基取代的具有3-9個(gè)碳原子的環(huán)烷基；四氫吡喃基；4-哌啶基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷基或叔丁氧羰基取代的哌啶基；環(huán)己烷螺-2′-(1，3-二氧雜環(huán)戊基)；吡咯烷-2-酮-5-基；式-Y1-Z1-NR5-Z2-Y2-R6表示的基團(tuán)，其中Y1和Y2相同或互不相同，表示單鍵或具有1-12個(gè)碳原子的亞烷基；R5表示氫原子或具有1-12個(gè)碳原子的烷基；Z1和Z2相同或互不相同，表示單鍵；具有1-7個(gè)碳原子的亞烷基；-CO-；-CO2-；-SO2-或-OCO-；以及R6表示具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基；被1-3個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基；具有2-6個(gè)碳原子的烯基；具有2-6個(gè)碳原子的炔基；氨基；被選自具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基和叔丁氧羰基的1-2個(gè)基團(tuán)取代的氨基；哌啶子基；哌啶基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷基取代的哌啶基；吡咯烷基；哌嗪基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷基取代的哌嗪基；嗎啉代；羥基；具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基；被羥基或具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基；氧雜環(huán)丁烷-2-基；四氫呋喃基；四氫吡喃基；氫原子；苯基；被具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基取代的苯基；或與上述結(jié)構(gòu)式中的氮原子連接時(shí)成環(huán)的基團(tuán)；或由結(jié)構(gòu)式-Y3-CO-R41表示的基團(tuán)，其中Y3表示單鍵或具有1-7個(gè)碳原子的亞烷基；R41表示羥基；具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基；哌啶子基；被具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有5-10碳原子的嗎啉代烷基或具有2-14個(gè)碳原子的烷基氨基烷基取代的哌嗪-1-基；或嗎啉代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2是氫原子、鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基或被1-5個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2是具有1-6個(gè)碳原子的烷基或三氟甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2是甲基或三氟甲基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一權(quán)利要求所述的噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1是與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)或非芳香雜環(huán)稠合的苯基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一權(quán)利要求所述的噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中X1是硫原子，X2是碳原子。
7.一種以根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一權(quán)利要求所述的噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽為活性成分的ALK5抑制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的ALK5抑制劑，作為腎小球腎炎、糖尿病性腎病、肝纖維化、肝硬化、肺纖維化、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病或脫發(fā)癥的治療藥或育發(fā)劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的ALK5抑制劑，作為外用藥。
10.以ALK5抑制劑作為活性成分的毛囊增殖刺激劑。
11.以ALK5抑制劑作為活性成分的生發(fā)劑或育發(fā)劑。
12.式 表示的噻唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中X1和X2互不相同，表示硫原子或碳原子；R1表示苯基；被選自鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、羥基、具有7-12個(gè)碳原子的苯基烷氧基和具有1-6個(gè)碳原子的烷基氨基的1-5個(gè)基團(tuán)取代的苯基；與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)或非芳香雜環(huán)稠合的苯基；吡啶基；喹啉基；異喹啉基；或與含有至少1個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-7元芳香雜環(huán)稠合的吡啶基；R2表示氫原子、鹵原子、具有1-6個(gè)碳原子的烷基、被1-5個(gè)鹵原子取代的具有1-6個(gè)碳原子的烷基、具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、具有1-6個(gè)碳原子的烷?；蚓哂?-5個(gè)碳原子的羥烷基；和A1為式 表示的基團(tuán)，其中X3表示氫原子、鹵原子或具有1-6個(gè)碳原子的烷基。
全文摘要
式(Ⅰ)表示的噻唑基咪唑衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽(其中X
文檔編號(hào)A61K45/00GK1956979SQ20058001426
公開日2007年5月2日 申請(qǐng)日期2005年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月5日
發(fā)明者佐藤正和, 松永結(jié)子, 淺沼肇, 天田英明, 小網(wǎng)武史, 高山哲男, 藪內(nèi)哲也, 鹽澤史康, 片貝博典, 梅宮廣樹, 池田明子 申請(qǐng)人:大正制藥株式會(huì)社