專(zhuān)利名稱(chēng)：新型二氯－苯基吡啶并[2,3－d]嘧啶類(lèi)衍生物、它們的制備及作為藥學(xué)試劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新型的雙環(huán)吡啶并[2，3-d]嘧啶類(lèi)，涉及它們的制備方法，含有它們的藥劑及它們的制備，以及這些化合物作為藥學(xué)活性試劑的用途。
某些取代的雙環(huán)氮雜環(huán)類(lèi)對(duì)于它們的蛋白激酶以及它們的酪氨酸激酶抑制活性在本領(lǐng)域是已知的。WO 02/090360公開(kāi)了吡啶并[2，3-d]嘧啶類(lèi)，其用作激酶酶抑制劑并且用于治療過(guò)增生性疾病。
WO 03/000011公開(kāi)了吡啶并[2，3-d]嘧啶的含磷衍生物，其用作蛋白激酶抑制劑并且通常用于治療骨病、癌癥和信號(hào)疾病。
WO 96/15128公開(kāi)了6-芳基-吡啶并[2，3-d]嘧啶，其用作蛋白酪氨酸激酶的抑制劑并且用于治療動(dòng)脈粥樣硬化、再狹窄、銀屑病、細(xì)菌感染和癌癥。
盡管在上述文獻(xiàn)中記載了進(jìn)展，但是，對(duì)于僅指定少數(shù)的、具有改善的治療指數(shù)如改善的活性、耐受性、選擇性或穩(wěn)定性的新化合物保留有需要。
本發(fā)明的衍生物是下面通式的新化合物
(式I)，其中R1是-C(O)-NH-烷基或-C(O)-N(烷基)2，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-NH(烷基)；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-NH2；-O-烷基；-雜環(huán)基；-NH-雜環(huán)基；-NH-S(O)2-烷基；-S(O)2-NH2；或-S(O)-烷基，所有的烷基任選被-OH取代；或以下基團(tuán)-CN；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-雜環(huán)基；-C(O)-NH-NH-C(O)-NH2；或-C(O)-NH-NH-C(O)-烷基，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代
-NH(烷基)；或-N(烷基)2；并且R2是鹵素；雜環(huán)基；烷基；-NH-C(O)-烷基；-NH-S(O)2-烷基；-(CH2)m-S(O)2-NH2；-(CH2)m-S(O)2-N(烷基)2；-(CH2)m-S(O)2-NH-(烷基)；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有的烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；X是-CH＝或-N＝；m是0、1、2、3、4、5或6；n是0、1或2；及其藥用鹽。
根據(jù)本發(fā)明的化合物顯示出作為蛋白激酶抑制劑的活性，特別是src家族酪氨酸激酶抑制劑活性，因而可用于治療由所述酪氨酸激酶介導(dǎo)的疾病。酪氨酸激酶家族通過(guò)磷酸化多肽和蛋白質(zhì)的酪氨酸殘基在細(xì)胞信號(hào)和細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)中起重要作用。已知酪氨酸激酶的不當(dāng)活化和多種病態(tài)有關(guān)，這些病態(tài)包括炎性的、免疫的、CNS紊亂，或者腫瘤病癥，或者骨病。例如，參見(jiàn)Susva，M.等，Trends Pharmacol.Sci.，21(2000)489-495；Biscardi，J.S.等，Adv.Cancer Res.76(2000)61-119。
可以將本發(fā)明的化合物用作活性藥劑，用于防止和治療例如移植排斥、炎性腸綜合征、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、再狹窄、變應(yīng)性哮喘、阿爾茨海默病、帕金森病、中風(fēng)、骨質(zhì)疏松癥、癌癥和良性增生。
令人驚奇地發(fā)現(xiàn)與本領(lǐng)域中已知的化合物相比，本發(fā)明的化合物顯示出改善的代謝穩(wěn)定和/或選擇性，以及至少相同的抗src-酪氨酸激酶的活性。
本發(fā)明的目的在于式I的化合物及其藥用鹽以及它們的對(duì)映異構(gòu)體形式、上述化合物的制備、含有它們的藥劑及它們的制備以及上述化合物在控制或預(yù)防疾病，特別是如上所述的疾病和病癥中的應(yīng)用，或在制備相應(yīng)藥劑中的應(yīng)用。
如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)″烷基″是指含有1至6個(gè)，優(yōu)選1至4個(gè)碳原子的飽和的、直鏈或支鏈烴基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-丁基、叔丁基、正戊基、正己基以及它們的異構(gòu)體?！叭芜x取代的”烷基是如上所定義的烷基，其是未被取代，或被一次取代的，或如果可能，被兩次取代的。
如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“(C1-C4)烷基”指含有1至4個(gè)碳原子的飽和的、直鏈或支鏈烴基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-丁基、叔丁基。
如本文所用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基”是指5至10元的、單-或雙環(huán)的、芳香或非芳香烴基，其中1至3個(gè)，優(yōu)選1或2個(gè)碳原子被氮原子、氧原子或硫原子或-S(O)2-基團(tuán)所代替。所述的雜環(huán)基任選被烷基，氧或-C(O)-NH2取代一次或數(shù)次。實(shí)例是2-氧代-咪唑烷-1-基；吡咯烷-2-基；吡咯烷-3-基；2-氧代-吡咯烷-1-基；1-甲基-吡咯烷-2-基；咪唑-4-基；吡唑-3-基；2-甲基-吡唑-3-基；1-甲基-吡唑-5-基；1，5-二甲基-吡唑-3-基；4-氨基甲?；?吡唑-3-基；哌啶-3-基；哌啶-4-基；1-甲基-哌啶-4-基；嗎啉-4-基；吡啶-2-基；1-氮雜-雙環(huán)[2.2.2]辛-3-基或4，4-二氧代-2，3-二氫-苯并[1，4]氧硫雜環(huán)己二烯-6-基。
如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)鹵素是指氟、氯、溴和碘，優(yōu)選氟、氯和溴，并且更優(yōu)選氟和氯。
優(yōu)選式I中的取代基R2位于對(duì)位或間位。
本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案是式I的化合物，其中X是-CH＝；
R1是-C(O)-NH-烷基，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-NH(烷基)；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-NH2；-O-烷基；-雜環(huán)基；-NH-雜環(huán)基；-NH-S(O)2-烷基；-S(O)2-NH2；或-S(O)-烷基，所有的烷基任選被-OH取代；并且R2具有上面給出的含義。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是式I的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH-甲基；或-C(O)-NH-乙基，所述的甲基或乙基是未取代的或被以下基團(tuán)取代一次的-OH；-吡咯烷基；或-NH-S(O)2-CH3；并且R2具有上面給出的含義。
本發(fā)明的再一個(gè)實(shí)施方案是式I的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH-乙基或-C(O)-NH-甲基，所述的乙基或甲基被以下基團(tuán)取代一次
-OH；或-吡咯烷基；并且R2是嗎啉-4-基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有的烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；以及其藥用鹽。
這種化合物是例如6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸((R)-1-吡咯烷-2-基甲基)-酰胺；或6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸((R)-1-吡咯烷-2-基甲基)-酰胺。
本發(fā)明的又一個(gè)實(shí)施方案是式I的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH-(CH2)2-NH-S(O)2-CH3；并且R2是嗎啉-4-基；
4-甲基-哌嗪-1-基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有的烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；以及其藥用鹽。
這樣的化合物是例如6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺酰基氨基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺酰基氨基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-(3-甲磺?；被?苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-[3-(2-羥基-乙硫基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺；或6-(2，6-二氯-苯基)-2-(3-甲硫基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺。
本發(fā)明的再另一個(gè)實(shí)施方案是式I的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH2；并且R2是嗎啉-4-基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有的烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；以及其藥用鹽。
這樣的化合物是例如6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸酰胺；或6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸酰胺。
本發(fā)明的再另一個(gè)實(shí)施方案是式I的化合物，其中X是-CH＝；R1是-CN；并且R2是嗎啉-4-基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有的烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；
-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；以及其藥用鹽。
這樣的化合物是例如6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-腈；6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-腈；或6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-腈。
本發(fā)明的再另一個(gè)實(shí)施方案是式I的化合物，其中X是-N＝；R1是-C(O)-NH-(CH2)2-NH-S(O)2-CH3；并且R2是烷基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有的烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；以及其藥用鹽。
這樣的化合物是例如6-(2，6-二氯-苯基)-2-(6-甲基-吡啶-3-基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺。
本發(fā)明的再另一個(gè)實(shí)施方案是一種制備根據(jù)本發(fā)明的化合物的方法，其中(a)將通式(II)化合物中的硫醚基 式(II)，轉(zhuǎn)變成為相應(yīng)的亞砜基，該亞砜基被(b)相應(yīng)的式(II-A)的苯胺取代 式(II-A)其中R2和X具有上面所給出的含義，得到通式(IV)的化合物 (IV)，(c)將式(IV)中的-COOH基轉(zhuǎn)變成為式(I)的酰胺衍生物；并且
(d)如果需要，將從(c)得到的伯酰胺衍生物進(jìn)一步轉(zhuǎn)變?yōu)槠湎鄳?yīng)的式(I)的7-腈衍生物；并且(e)如果需要，將從(c)或(d)得到的、所述通式(I)的化合物，轉(zhuǎn)變成為藥用鹽。
在更詳細(xì)的描述中，由通式(Ia)表示其中R1是通過(guò)酰胺基連接的式(I)的化合物?？梢杂墒?II)的羧酸，使用對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)，來(lái)制備這樣的化合物。通式(Ia)的化合物的合成示于方案1中，其中R3具有上面對(duì)于R1給出的含義，而沒(méi)有-CN基團(tuán)，因此R3是-C(O)-NH-烷基或-C(O)-N(烷基)2，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-NH(烷基)；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-NH2；-O-烷基；-雜環(huán)基；-NH-雜環(huán)基；-NH-S(O)2-烷基；-S(O)2-NH2；或-S(O)-烷基，所有的烷基任選被-OH取代；或以下基團(tuán)-C(O)-NH2；-C(O)-NH-雜環(huán)基；-C(O)-NH-NH-C(O)-NH2；或-C(O)-NH-NH-C(O)-烷基，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-NH(烷基)；或
-N(烷基)2；并且R2和X具有上面給出的含義。
可以由本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知可以應(yīng)用于制備化學(xué)相關(guān)化合物的任何方法，來(lái)制備通式(I)的衍生物或其藥用鹽。這些方法，當(dāng)用于制備式(I)的二嗪衍生物或其藥用鹽時(shí)，是作為本發(fā)明的另外特征提供的，并且由下面方案1至方案4的代表性實(shí)例所舉例說(shuō)明，其中，除非另外指出，R1、R2和X具有上面所給出的含義。必須的原料是可商購(gòu)的或可以通過(guò)有機(jī)化學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)程序得到的。在后面的實(shí)施例中描述了這樣的原料的制備。備選地，可以通過(guò)與在有機(jī)化學(xué)家的普通技術(shù)之內(nèi)的程序相類(lèi)似的程序得到必須的原料。
方案1
備選地，根據(jù)方案2，可以將羧酸(II)首先轉(zhuǎn)變成羧酰胺(V)，隨后由苯胺類(lèi)在2位上取代，其中R3、R2和X具有上面給出的含義。
方案2 可以由常規(guī)方法，例如用SOCl2或POCl3脫水，將其中R3是-C(O)-NH2的式(Ia)或(V)的伯酰胺轉(zhuǎn)變成通式(Ib)的腈。根據(jù)方案3，可以由已知的吡啶衍生物(VII)制備所述的式(Ib)的腈，其中R2和X具有上面所給出的含義，并且L是適宜的離去基團(tuán)。
方案3 步驟1可以將式(B)的3-(2，6-二氯-苯基)-丙酮酸或通常的芳基丙酮酸與適宜的式(A)的嘧啶甲醛縮合，得到化合物(II)?？梢栽趬A性條件下，例如用在水或甲醇(MeOH)中的氫氧化鈉(NaOH)，或在二甲基甲酰胺(DMF)、1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)或四氫呋喃(THF)中的1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(DBU)或叔丁醇鉀(KOtBu)，進(jìn)行所述的縮合反應(yīng)。備選地，在乙酸鈉存在，在乙酸中進(jìn)行縮合反應(yīng)。反應(yīng)溫度范圍為室溫(RT)至150℃。
步驟2、6和10可以將式(II)、(V)或(IX)的吡啶并嘧啶類(lèi)2位上的甲硫基或備選地，任何其它烷硫基或芳硫基通過(guò)氧化為相應(yīng)的式(III)、(VI)或(X)的砜或亞砜而轉(zhuǎn)變?yōu)檫m宜的離去基團(tuán)。適宜的試劑是例如，在-40℃至+65℃范圍的溫度下、在惰性溶劑如二氯甲烷(CH2Cl2)、氯仿(CHCl3)或甲基叔丁基醚(MTBE)中的3-氯過(guò)氧苯甲酸(mCPBA)或2-苯磺酰基-3-苯基-氧雜氮丙啶(oxaziridine)。
步驟3、7和11來(lái)自步驟2、6或10的亞砜或砜可以以純的形式或作為粗產(chǎn)物與苯胺類(lèi)反應(yīng)，得到式(IV)的2-苯胺基取代的吡啶并嘧啶類(lèi)，(Ia，方案2)或(Ib)?？梢栽谧鳛槿軇┻^(guò)量的苯胺或在惰性溶劑如CH2Cl2、甲苯、乙腈、DMF、二甲基亞砜(DMSO)或NMP中，并且在0℃至150℃范圍內(nèi)的溫度下進(jìn)行該反應(yīng)?？梢约尤胨崛缛宜?TFA)或鹽酸(HCl)以催化該反應(yīng)。如果已經(jīng)將mCPBA用于前面的氧化步驟，所生成的在粗反應(yīng)混合物中存在的間氯苯甲酸可以起催化劑的作用。
步驟4和5可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的標(biāo)準(zhǔn)程序，將適宜的式(IV)或(II，方案2)的羧酸轉(zhuǎn)變?yōu)槭?Ia，方案1)或(V)的酰胺衍生物。例如，可以首先將該酸通過(guò)與碳二亞胺或碳酰二咪唑或草酰氯反應(yīng)而活化，然后在沒(méi)有分離的情況下與適宜的取代胺或氨反應(yīng)。最好在惰性溶劑如THF、CH2Cl2或NMP中，在0℃至150℃的溫度下進(jìn)行此反應(yīng)。
步驟8(VIII)中的適宜的離去基團(tuán)“L”可以是三氟甲磺酸酯，其可以通過(guò)在堿如三乙胺(NEt3)、吡啶、叔丁醇鉀(KOtBu)，二異丙基氨基化鋰(LDA)、NaH，或K2CO3的存在下，由(VII)與在惰性溶劑如THF或CH2Cl2或NMP中的三氟甲磺酸酐(Tf2O)或N-苯基甲磺酰亞胺(PhN(Tf)2)反應(yīng)來(lái)制備。另一種離去基團(tuán)是氯或溴原子，其可以通過(guò)用POCl3或POBr3鹵化吡啶酮來(lái)引入。
步驟9式(VIII)中的離去基團(tuán)“L”可以被在RT至180℃的惰性溶劑如二甘醇二甲醚、DMF、NMP或環(huán)丁砜中的無(wú)機(jī)氰化物所取代，所述的無(wú)機(jī)氰化物如氰化鉀、氰化鈉(NaCN)或氰化銅(CuCN)，得到(IX)。優(yōu)選地，該反應(yīng)也可以由過(guò)渡金屬催化劑如Pd-或Ni催化劑催化。在此情況下，可以采用氰化鋅(Zn(CN)2)作為氰化物源。
R3或R2中的某些側(cè)鏈在反應(yīng)順序的過(guò)程中可能需要保護(hù)。這里，可以采用本領(lǐng)域所周知的標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)和脫保護(hù)程序。例如，可以以叔丁氧碳基(Boc)或芐氧碳基保護(hù)的形式使用伯胺和仲胺，并且可以作為最后的反應(yīng)步驟通過(guò)用酸如HCl或三氟乙酸(TFA)處理而將保護(hù)基團(tuán)除去。
通式I的化合物可以含有一個(gè)或幾個(gè)手性中心，且隨后可以以外消旋或旋光形式存在?？梢园凑展姆椒▽⑼庀锓蛛x成對(duì)映體。例如，通過(guò)與旋光酸反應(yīng)可以由外消旋混合物形成可以通過(guò)結(jié)晶分離的非對(duì)映體鹽，所述的旋光酸如D-或L-酒石酸、扁桃酸、蘋(píng)果酸、乳酸或樟腦磺酸。另一方面，還可以通過(guò)使用在商購(gòu)的手性HPLC-相上進(jìn)行的色譜法分離對(duì)映體。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可以以其藥用鹽形式存在。術(shù)語(yǔ)″藥用鹽″指的是保持式I化合物的生物有效性和特性且由適宜的非毒性有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸或有機(jī)堿或無(wú)機(jī)堿形成的常用酸加成鹽或堿加成鹽。酸加成鹽包括例如來(lái)源于無(wú)機(jī)酸和那些來(lái)源于有機(jī)酸的那些鹽，所述的無(wú)機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸；所述的有機(jī)酸如對(duì)-甲苯磺酸、水楊酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸、乳酸、富馬酸等。堿加成的鹽包括那些來(lái)源于銨、鉀、鈉的鹽和季銨氫氧化物，如氫氧化四甲基銨的那些鹽。將藥物化合物化學(xué)修飾成鹽是藥物化學(xué)工作者眾所周知的技術(shù)，目的是為使化合物獲得改善的物理和化學(xué)穩(wěn)定性、吸濕性、流動(dòng)性和溶解性。其例如描述于Bastin，R.J.等，Organic Proc.Res.Dev.4(2000)427-435。
可以將根據(jù)本發(fā)明的化合物及其藥用鹽作為藥劑使用，例如藥物制劑形式。可以通過(guò)口服、例如以片劑、包衣片、錠劑、硬明膠膠囊和軟明膠膠囊、溶液、乳劑或混懸劑形式給予所述藥物制劑。然而，還可以通過(guò)直腸、例如以栓劑形式或通過(guò)非腸道、例如以注射液形式進(jìn)行給藥。
可以通過(guò)用藥物上惰性的、無(wú)機(jī)或有機(jī)載體加工根據(jù)本發(fā)明的化合物而得到上述藥物制劑。例如，可以將乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽等用作片劑、包衣片、錠劑和硬明膠膠囊的載體。用于軟明膠膠囊的適宜載體為例如植物油、蠟、脂肪、半固體和液體多元醇類(lèi)等。然而，隨活性物質(zhì)特性的不同，就軟明膠膠囊而言通常不需要載體。用于生產(chǎn)溶液和糖漿劑的適宜載體例如有水、多元醇類(lèi)、甘油、植物油等。用于栓劑的適宜載體例如有天然或硬化油、蠟、脂肪、半固體或液體多元醇類(lèi)等。
此外，藥物制劑可以含有防腐劑、加溶劑、穩(wěn)定劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、增甜劑、著色劑、調(diào)味劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以含有其它治療上有價(jià)值的物質(zhì)。
通過(guò)使用下列步驟得到藥物制劑1.將4.0g玻璃珠稱(chēng)入定制的管GL 25，4cm(該珠填充半支管)。
2.加入50mg化合物、用刮刀(spatulum)分散并渦旋。
3.加入2ml明膠溶液(重量珠∶明膠溶液＝2∶1)并渦旋。
4.加蓋并用鋁箔包封以避光。
5.為研磨物制備平衡重。
6.在Retsch研磨機(jī)中以20/s研磨4小時(shí)(對(duì)某些物質(zhì)以30/s研磨達(dá)24小時(shí))。
7.通過(guò)以400g離心2分鐘，在與接收小瓶連接的過(guò)濾儲(chǔ)蓄器上用兩層濾膜(100μm)從珠上提取混懸劑。
8.將提取物移入量筒。
9.用小體積反復(fù)洗滌(本文為1ml步驟)至達(dá)到終體積或提取物澄清。
10.用明膠填充至終體積并勻化。
上述描述的制備產(chǎn)生具有1至10μm顆粒大小的式I化合物的微混懸劑。該混懸劑適合于口服應(yīng)用且用于下述體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)測(cè)試。
src-家族酪氨酸激酶的抑制根據(jù)本發(fā)明的化合物作為src-家族酪氨酸激酶的抑制劑的活性是通過(guò)使用下面的試驗(yàn)顯示的。如本文所用的，Ro是指肽NH2-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2；Ja133-Ro是指肽Ja133-G-氨基辛酸-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，其中Ja133是LightCycler-Red 640-N-羥基琥珀酰亞胺酯；PT66是指磷酸酪氨酸特定抗體，其可以檢測(cè)蛋白酪氨酸激酶的磷酸化(phoyphorylated)酪氨酸；并且TCEP是指三(2-羧基乙基)膦Lck Cisbio Mab PT66-K是指抗-磷酸酪氨酸(PT66)-穴狀化合物；并且Src EG&G Wallac PT66Eu-W1024是指Eu3+-標(biāo)記的抗-磷酸酪氨酸(PT66)-穴狀化合物。
SRC抑制劑試驗(yàn)參數(shù)反應(yīng)混合物ATP5μM肽(Ro+Ja133-Ro)10μMJa133-Ro 196nMRo 9.8μMPT66 230ng/ml試驗(yàn)緩沖液4mM MgCl22mM TCEP50mM HEPES0.1％吐溫20pH 7.3酶2.5U/ml抑制劑最大25μM最小0.42nM材料Eu-標(biāo)記的磷酸酪氨酸抗體-用于Lck Cisbio Mab PT66-K，-用于Src EG&G Wallac PT66 Eu-W1024(均可商購(gòu))。
肽RoNH2-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，和Ja133-RoJa133-G-氨基辛酸-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，其中Ja133是LightCycler-Red640-N-羥基琥珀酰亞胺酯；這兩種肽都是在Zinsser SMP350肽合成儀上用優(yōu)化固相肽合成法合成的(Merrifield，F(xiàn)ed.Proc.Fed.Amer.Soc.Exp.Biol.21(1962)412)。簡(jiǎn)言之，通過(guò)重復(fù)共軛結(jié)合20倍過(guò)量的氨基酸，每種氨基酸都根據(jù)側(cè)鏈功能用臨時(shí)的哌啶不穩(wěn)定的Fmoc-以及永久的酸不穩(wěn)定叔丁基-、BOC-和叔丁氧基保護(hù)，在160mg(22.8μmol尺度)的Rink-Linker改性的聚苯乙烯固相上組裝所述肽。將底物序列AEEEIYGEFEAKKKK的N-末端再安裝上間隔氨基酸氨基辛酸和甘氨酸。在斷開(kāi)N-末端臨時(shí)保護(hù)基后，用1.5倍量的LightCycler-Red 640-N-羥基琥珀酰亞胺酯(購(gòu)自Roche Diagnostics GmbH)和三乙胺標(biāo)記仍然附著和保護(hù)著的肽。3小時(shí)后，用二甲基甲酰胺和異丙醇沖洗樹(shù)脂，直至藍(lán)色樹(shù)脂的洗脫物變無(wú)色。將全保護(hù)和標(biāo)記的肽從固相中除去，并且通過(guò)用80％三氟乙酸、10％乙二硫醇、5％苯硫基甲烷(Thioanisol)和5％水的混合物進(jìn)行處理，除去永久保護(hù)基。通過(guò)制備型反相HPLC純化最后分離底物。純化后得到12.2mg RP-HPLC單峰純的藍(lán)色材料(凍干物)。用MALDI質(zhì)譜[2720.0]證實(shí)為同一物。
酶Upstate Lck(p56lck，活性)，Upstate Src(p60c-src，部分純化)，均購(gòu)自UBI。
時(shí)間分辨的熒光分析讀數(shù)器Perkin Elmer，Wallac Viktor 1420-040多標(biāo)記計(jì)數(shù)器；液體處理系統(tǒng)Beckman Coulter，Biomek 2000。
ATP、吐溫20、HEPES購(gòu)自Roche Molecular Biochemicals，MgCl2和MnCl2購(gòu)自Merck Eurolab，TCEP購(gòu)自Pierce，384孔小體積熒光板購(gòu)自Falcon。
試驗(yàn)描述首先將酶和相應(yīng)量的根據(jù)本發(fā)明的抑制劑在水溶液中于15℃預(yù)溫育15分鐘。然后，通過(guò)加入包含ATP、肽和PT66的反應(yīng)混合物并進(jìn)行振蕩，開(kāi)始磷酸化反應(yīng)。立即在合適的孔板讀數(shù)器中使用時(shí)間分辨的熒光光譜監(jiān)測(cè)該反應(yīng)的進(jìn)程。
使用非線性曲線擬合(Excelfit軟件(ID Business Solution Ltd.，Guilford，Surrey，UK))，可以從反應(yīng)速度獲得IC50值。
腫瘤抑制作用的體內(nèi)試驗(yàn)為了產(chǎn)生原發(fā)瘤，用1ml注射器和26G針頭將HT-29結(jié)腸癌細(xì)胞(2.5×106，體積為100μl)皮下注射到雌性Severe Combined Immunodeficient(SCID)小鼠的左肋中。HT-29細(xì)胞最初獲自NCI，并保藏在運(yùn)行的細(xì)胞庫(kù)中。在實(shí)驗(yàn)前將細(xì)胞解凍并體外培養(yǎng)擴(kuò)大。在第9天將小鼠分到治療組。分組(每組12只小鼠)時(shí)，將小鼠隨機(jī)分組，使每組的平均原發(fā)瘤體積約為120mm3。將測(cè)試化合物以在7.5％明膠、0.22％NaCl中的懸浮液形式每天口服給藥一次，基于實(shí)際體重，給藥體積為10ml/kg。治療開(kāi)始于第10天并一直進(jìn)行到第30天，即研究的最后一天。在腫瘤細(xì)胞植入后第7天開(kāi)始，每周測(cè)量?jī)纱纹は略l(fā)瘤，用電子測(cè)徑器測(cè)量?jī)蓚€(gè)方向(長(zhǎng)度和寬度)。原發(fā)瘤體積用公式V[mm3]＝(長(zhǎng)度[mm]×寬度[mm]×寬度[mm])/2計(jì)算。另外，所有動(dòng)物的體重每周至少記錄兩次。最后，在研究結(jié)束時(shí)，取出腫瘤并稱(chēng)重。
提供下面的實(shí)施例、參考文獻(xiàn)以幫助理解本發(fā)明，其真正的范圍列出在后附權(quán)利要求中。應(yīng)當(dāng)理解的是，在沒(méi)有離開(kāi)本發(fā)明的精神的情況下，可以在所列出的程序中進(jìn)行修飾。
原料a)3-(2，6-二氯苯基)-2-氧代丙酸乙酯將12.4g鎂粉通過(guò)在Ar氣氛下干式攪拌1小時(shí)而活化。加入250ml無(wú)水乙醚。將25g 2，6-二氯芐基溴溶解于150ml乙醚中，并且將10ml的此溶液加入至攪拌的鎂懸浮液中。加入少量的碘，并且混合物溫和地溫?zé)?0分鐘，以開(kāi)始反應(yīng)。然后，將余量的2，6-二氯芐基溴溶液在室溫(RT)于1小時(shí)加入，接著使混合物回流2小時(shí)。
將上述的格利雅溶液冷卻至-30℃，并且迅速地加入至預(yù)冷卻至-50℃的29,5g草酸二乙酯在150ml乙醚中的溶液。使該混合物達(dá)到RT，并且進(jìn)行室溫下的攪拌另外14小時(shí)。
將該混合物用HCl水溶液洗滌，干燥并且真空濃縮。通過(guò)過(guò)濾分離出第一批8,1g的晶體標(biāo)題化合物。在70℃/20mbar下蒸發(fā)所有揮發(fā)物后，得到第二批8,7g。
b)3-(2，6-二氯苯基)-2-氧代丙酸將在70ml乙醇中的8,1g上述乙酯與50ml 1,6M NaOH在RT下一起攪拌4小時(shí)。將該混合物用二氯甲烷稀釋?zhuān)⑶矣肏Cl水溶液酸化至pH為1-2，然后用二氯甲烷萃取。用1M NaOH萃取合并的二氯甲烷相，再次酸化水相，并且再用二氯甲烷萃取一次。真空蒸發(fā)溶劑，得到5,0g的標(biāo)題化合物。
c)6-(2，6-二氯-苯基)-2-甲硫基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸將3,0g來(lái)自上面b)的產(chǎn)物溶解于20ml無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，并且冷卻至-20℃。慢慢地加入2,55g叔丁醇鉀。在-10℃，加入1,777g的4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-醛，并且將該混合物溫?zé)嶂?0℃。用另外30mlDMF稀釋得到的懸浮物，并且繼續(xù)在70℃下的攪拌3小時(shí)。
將混合物冷卻至RT，并且用300ml水稀釋。通過(guò)用HCl酸化至pH1-2，粗產(chǎn)物沉淀，并且將其濾出，并進(jìn)一步由色譜(二氧化硅，乙酸乙酯+5％乙酸)純化。
得到1,35g的標(biāo)題化合物。
d)6-(2，6-二氯-苯基)-2-甲硫基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺將0,45g上面c)的產(chǎn)物溶解于10ml無(wú)水DMF中，加入0,215g碳酰二咪唑并且將混合物在RT攪拌1小時(shí)。滴加在4ml DMF中的0,228g 2-甲基磺?；被?乙胺，并且將混合物攪拌另外2小時(shí)。將混合物用200ml水稀釋。粗標(biāo)題產(chǎn)物沉淀，并且通過(guò)過(guò)濾收集。用二氯甲烷萃取濾液，有機(jī)相干燥和蒸發(fā)，并且將剩余物與第一次沉淀的粗產(chǎn)物合并。經(jīng)二氧化硅色譜得到375mg的標(biāo)題化合物。
e)2-({[6-(2，6-二氯-苯基)-2-甲硫基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羰基]-氨基}-甲基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯類(lèi)似于上面的d)，采用0,2g的原料c)、0,096g 1，1′-碳酰二咪唑(CDI)和0,153g(R)-2-氨基甲基-1-Boc-吡咯烷(購(gòu)自Astatech)。
將在DMF中的反應(yīng)混合物稀釋于100ml水中，并且通過(guò)過(guò)濾分離沉淀的粗產(chǎn)物。用HCl酸化濾液，并且用二氯甲烷萃取。將來(lái)自上面的粗沉淀物溶解于二氯甲烷，并且用稀HCl洗滌，然后與另外的二氯甲烷萃取物合并。剩余物經(jīng)在二氧化硅上的蒸發(fā)和色譜得到152mg的標(biāo)題產(chǎn)物。
f)6-(2，6-二氯-苯基)-2-甲硫基-8H-吡啶[2，3-d]嘧啶-7-酮向5,0g 4-氨基-2-甲硫基嘧啶-5-甲醛在50ml四氫化萘中的混合物中，順序地加入10,91g 2，6-二氯苯基乙酸、10,76g三乙胺和22,45g新戊酰氯。將混合物于190℃攪拌30分鐘，然后加入另外的2,04ml新戊酰氯。30分鐘后，加入另一份2,04ml新戊酰氯，并且將溫度升高至195℃。在另外的30分鐘和60分鐘之后，加入另兩份新戊酰氯，最后在195℃再繼續(xù)攪拌1小時(shí)。
真空除去約40ml的溶劑，加入100ml乙醚，并且通過(guò)過(guò)濾分離沉淀的粗產(chǎn)物。用乙醚和水洗滌粗產(chǎn)物，得到4,16g的標(biāo)題化合物。
g)三氟-甲磺酸6-(2，6-二氯-苯基)-2-甲硫基-吡啶[2，3-d]嘧啶-7-基酯將4,0g的原料f)懸浮于20ml無(wú)水N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)中，并且用0,562g的60％氫化鈉處理。于40℃攪拌30分鐘之后，將混合物冷卻至RT，并且加入7,02g N-苯基三氟甲烷磺酰亞胺。RT下45分鐘后，加入另外的2,01g N-苯基三氟甲烷磺酰亞胺，并且繼續(xù)攪拌另外30分鐘。
于60℃，真空除去溶劑，并且通過(guò)二氧化硅上的色譜純化剩余物，得到5,38g的標(biāo)題產(chǎn)物，其含有約25％N-苯基三氟甲烷磺酰胺。將2,4g的該材料通過(guò)溶解于二氯甲烷中并且用碳酸鈉水溶液洗滌而進(jìn)一步純化，得到1,72g，其在下一步驟中使用。
h)6-(2，6-二氯-苯基)-2-甲硫基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-腈將來(lái)自上面的1,72g原料g)在17,5ml無(wú)水NMP中用0,423g四-(三苯膦基)鈀(O)和0,859g氰化鋅于90℃處理75分鐘。真空蒸發(fā)溶劑，并且剩余物經(jīng)二氧化硅色譜純化，得到0,50g的標(biāo)題化合物。
最終產(chǎn)物實(shí)施例16-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(吡咯烷-2-基甲基)-酰胺將36mg的70％間氯過(guò)苯甲酸(mCPBA)溶解于4ml二氯甲烷中，并且通過(guò)在硫酸鈉上過(guò)濾干燥該溶液。在RT下，將干燥的mCPBA溶液加入至75mg的原料e)在4ml二氯甲烷中的溶液，并且由TLC監(jiān)測(cè)氧化反應(yīng)。在1小時(shí)后，原料被消耗掉，并且通過(guò)加入幾滴的二甲硫醚而淬滅過(guò)量的mCPBA。加入37mg 4-嗎啉代苯胺，并且在RT下繼續(xù)攪拌14小時(shí)。
用二氯甲烷稀釋混合物，并且用10％乙酸水溶液洗滌。蒸發(fā)有機(jī)相，剩余物經(jīng)色譜純化得到67mg Boc保護(hù)的標(biāo)題產(chǎn)物。
將上述物質(zhì)溶解于2ml二氯甲烷中，并且與2ml 2M的HCl的乙醚溶液一起于RT攪拌3小時(shí)。通過(guò)過(guò)濾分離沉淀物，溶解于少量的甲醇中，并且用碳酸氫鉀水溶液和二氯甲烷的混合物稀釋。分離二氯甲烷相，干燥并且蒸發(fā)，得到41mg的標(biāo)題產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3)9.15(s，1H)；8.47(br s，1H)；7.95(s，1H)；7.69(br m，3H)；7.40(d，2H)；7.26(t，1H)；6.98(d，2H)；3.89(t，4H)；3.48(m，1H)；3.34(m，1H)；3.17(m，5H)；2.94(m，2H)；1.60-2.00(m，3H)；1.40(m，1H)；實(shí)施例26-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺類(lèi)似于實(shí)施例1，將50mg的原料d)用在二氯甲烷中的29mg mCPBA于RT氧化。
加入22mg 4-(4-甲基哌嗪基)苯胺，并且將混合物于RT攪拌14小時(shí)。在用另外10ml二氯甲烷稀釋后，用水洗滌混合物，將有機(jī)相干燥，蒸發(fā)，并且進(jìn)一步由二氧化硅色譜(二氯甲烷19/甲醇1/氨水0,5)。得到44mg的標(biāo)題產(chǎn)物。
1H-NMR(CD3OD)9.28(s，1H)；8.18(s，1H)；7.78(br d，2H)；7.48(d，2H)；7.36(t，1H)；7.03(d，2H)；4.60(br s，1H)；3.46(t，2H)；3.26(t)和3.22(t，共6H)；3.20(s，3H)；2.65(t，4H)；2.36(s，3H)。
實(shí)施例36-(2，6-二氯-苯基)-2-[3-(2-羥基-乙硫基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺類(lèi)似于實(shí)施例1，將60mg的原料d)用mCPBA氧化。
加入27mg的3-(2-羥基乙硫基)苯胺，并且將反應(yīng)混合物于RT攪拌15小時(shí)。用10ml二氯甲烷稀釋?zhuān)?0％的乙酸水溶液洗滌混合物，干燥且蒸發(fā)。首先由二氧化硅柱色譜(二氯甲烷/甲醇)，隨后由制備型HPLC-MS，并且最后由制備型二氧化硅TLC(二氯甲烷/甲醇)純化，得到12mg標(biāo)題產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3)9.21(s，1H)；8.91(br s，1H)；8.07(s，1H)；7.83(br s，1H)；7.77(s，1H)；7.43(d，2H)；7.31(t，1H)；7.25(m，1H)；7.05(d，1H)；6.85(br s和d，2H)；5.67(br，1H)；4.13(m，2H)；3.58(m，2H)；3.35(m，4H)；2.93(s，3H)。
實(shí)施例46-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-腈將在3，5ml二氯甲烷中的100mg的原料h)用301mg 2-苯磺?；?3-苯基-氧雜氮丙啶于RT處理。5,5小時(shí)之后，通過(guò)加入70mg二甲硫醚而使過(guò)量的氧化試劑淬滅。加入在2,5ml NMP中的265mg 4-(2-羥基乙基)苯胺，并且于RT攪拌混合物18,5小時(shí)。
真空除去溶劑，并且剩余物經(jīng)二氧化硅色譜純化，得到220mg被過(guò)量苯胺試劑污染的粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物溶解于乙酸乙酯中，并且用稀HCl水溶液洗滌。將有機(jī)相干燥、蒸發(fā)，并且最后用庚烷研磨剩余物，得到94mg的標(biāo)題產(chǎn)物。
1H-NMR(CDCl3)9.19(s，1H)；8.08(s，1H)；7.80(br m，2H)；7.63(br s，1H)；7.52(d，2H)；7.42(t，1H)；7.00(d，2H)；4.12(m，2H)；3.99(m，2H)；實(shí)施例56-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸酰胺在Ar氣氛下，將在1ml THF中的20mg來(lái)自實(shí)施例3中的產(chǎn)物與13,5mg三甲基硅醇鉀混合。將混合物在微波反應(yīng)器中加熱至100℃20分鐘。
將冷卻的反應(yīng)混合物用0,1ml水稀釋?zhuān)⑶壹尤肷倭垦趸X色譜材料。將懸浮液在真空下蒸發(fā)至干燥，并且將剩余物充填到二氧化硅色譜柱中。用乙酸乙酯6/庚烷1洗脫，得到6mg的標(biāo)題產(chǎn)物。
1H-NMR(DMSO-d6)10.24(br s，1H)；9.41(s，1H)；8.31(s，1H)；8.13(br s，1H)；7.92(m，2H)；7.56(m，3H)；7.42(t，1H)；6.99(d，2H)；4.87(t，1H)；4.00(t，2H)；3.73(m，2H)
實(shí)施例6類(lèi)似于實(shí)施例1中所述的程序，但使用如上所述的相應(yīng)原料，可以得到下面的化合物
實(shí)施例7類(lèi)似于實(shí)施例4中所述的程序，但使用如上所述的相應(yīng)原料，可以得到下面的化合物
實(shí)施例8類(lèi)似于實(shí)施例5中所述的程序，但使用如上所述的相應(yīng)原料，可以得到下面的化合物
參考文獻(xiàn)目錄Bastin，R.J.等，Organic Proc.Res.Dev.4(2000)427-435Biscardi，J.S.，等，Adv.Cancer Res.76(2000)61-119Merrifield，F(xiàn)ed.Proc.Fed.Amer.Soc.Exp.Biol.21(1962)412Susva，M.，等，Trends Pharmacol.Sci.，21(2000)489-495WO 02/090360WO 03/000011WO 96/15128
權(quán)利要求
1.式I的化合物 (式I)，其中R1是-C(O)-NH-烷基或-C(O)-N(烷基)2，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-NH(烷基)；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-NH2；-O-烷基；-雜環(huán)基；-NH-雜環(huán)基；-NH-S(O)2-烷基；-S(O)2-NH2；或-S(O)-烷基，所有的烷基任選被-OH取代；或以下基團(tuán)-CN；-C(O)-NH2；-C(O)-NH-雜環(huán)基；-C(O)-NH-NH-C(O)-NH2；或-C(O)-NH-NH-C(O)-烷基，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-NH(烷基)；或-N(烷基)2；并且R2是鹵素；雜環(huán)基；烷基；-NH-C(O)-烷基；-NH-S(O)2-烷基；-(CH2)m-S(O)2-NH2；-(CH2)m-S(O)2-N(烷基)2；-(CH2)m-S(O)2-NH-(烷基)；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有的烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；X是-CH＝或-N＝；m是0、1、2、3、4、5或6；n是0、1或2；及其藥用鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH-烷基，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-NH(烷基)；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-NH2；-O-烷基；-雜環(huán)基；-NH-雜環(huán)基；-NH-S(O)2-烷基；-S(O)2-NH2；或-S(O)-烷基，所有的烷基任選被-OH取代，并且R2具有權(quán)利要求1中所給出的含義。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH-甲基；或-C(O)-NH-乙基，所述的甲基或乙基是未取代的或被以下基團(tuán)取代一次的-OH；-吡咯烷基；或-NH-S(O)2-CH3；并且R2具有權(quán)利要求1中所給出的含義。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH-乙基或-C(O)-NH-甲基，所述的乙基或甲基被以下的基團(tuán)取代一次-OH；或-吡咯烷基；并且R2是嗎啉-4-基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；和其藥用鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸((R)-1-吡咯烷-2-基甲基)-酰胺；和6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸((R)-1-吡咯烷-2-基甲基)-酰胺。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH-(CH2)2-NH-S(O)2-CH3；并且R2是嗎啉-4-基；4-甲基-哌嗪-1-基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；和其藥用鹽。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺酰基氨基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺酰基氨基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-(3-甲磺?；被?苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺酰基氨基-乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-[3-(2-羥基-乙硫基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺；6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺；和6-(2，6-二氯-苯基)-2-(3-甲硫基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是-CH＝；R1是-C(O)-NH2；并且R2是嗎啉-4-基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；和其藥用鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的化合物6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸酰胺；和6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸酰胺。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是-CH＝；R1是-CN；并且R2是嗎啉-4-基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有烷基任選被以下基團(tuán)取代一次-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；和其藥用鹽。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的化合物6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-腈；6-(2，6-二氯-苯基)-2-(4-嗎啉-4-基-苯基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-腈；和6-(2，6-二氯-苯基)-2-[4-(2-羥基-乙氧基)-苯基氨基]-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-腈。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中X是-N＝；R1是-C(O)-NH-(CH2)2-NH-S(O)2-CH3；并且R2是烷基；-NH-S(O)2-CH3；-O-烷基；或-S(O)n-烷基，所有烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-O-烷基；-NH-烷基；或-N(烷基)2；n是0、1或2；和其藥用鹽。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的化合物6-(2，6-二氯-苯基)-2-(6-甲基-吡啶-3-基氨基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-羧酸(2-甲磺?；被?乙基)-酰胺。
14.一種通過(guò)進(jìn)行以下的反應(yīng)步驟制備根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物的方法(a)將通式(II)的化合物中的羧基轉(zhuǎn)變成 式(II)，相應(yīng)的式(V)的酰胺 式(V)，其中R3是-C(O)-NH-烷基或-C(O)-N(烷基)2，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-OH；-NH(烷基)；-N(烷基)2；-NH-C(O)-烷基；-C(O)-NH-烷基；-C(O)-N(烷基)2；-C(O)-NH2；-O-烷基；-雜環(huán)基；-NH-雜環(huán)基；-NH-S(O)2-烷基；-S(O)2-NH2；或-S(O)-烷基，所有烷基任選被-OH取代；或以下基團(tuán)C(O)-NH2；-C(O)-NH-雜環(huán)基；-C(O)-NH-NH-C(O)-NH2；或-C(O)-NH-NH-C(O)-烷基，所述的烷基任選被以下基團(tuán)取代-NH(烷基)；或-N(烷基)2；(b)將通式(V)的化合物中的甲硫基轉(zhuǎn)變成為相應(yīng)的式(VI)的亞砜 式(VI)，其中R3具有如上所給出的含義；(c)由相應(yīng)的式(II-A)的苯胺取代式(VI)的亞砜基 式(II-A)其中R2和X具有對(duì)于權(quán)利要求1中的式(I)所給出的含義，得到相應(yīng)的式(Ia)的化合物 式(Ia)其中R3具有如上所給出的含義；并且R2和X具有對(duì)于權(quán)利要求1中的式(I)所給出的含義，(d)如果需要，進(jìn)一步將從步驟(c)得到的式(Ia)的伯酰胺衍生物轉(zhuǎn)變?yōu)槠湎鄳?yīng)的根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)的7-腈衍生物；并且(e)如果需要，將從步驟(c)或(d)得到的、所述的式(I)的化合物轉(zhuǎn)變成藥用鹽。
15.一種藥劑，其含有與藥用輔劑一起的根據(jù)權(quán)利要求1至13中任何一項(xiàng)的一種或多種化合物作為活性成分。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的藥劑，其用于治療由src家族酪氨酸激酶的不適宜激活介導(dǎo)的疾病。
17.根據(jù)權(quán)利要求15的藥劑，其用于治療癌癥。
18.根據(jù)權(quán)利要求15的藥劑，其用于治療炎性疾病、免疫疾病、CNS疾病或骨病。
19.根據(jù)權(quán)利要求1至13中任何一項(xiàng)的一種或多種化合物在制備用于治療由src家族酪氨酸激酶的不適宜激活介導(dǎo)的疾病的藥劑中的應(yīng)用。
20.根據(jù)權(quán)利要求1至13中任何一項(xiàng)的一種或多種化合物在制備用于治療癌癥的藥劑中的應(yīng)用。
21.根據(jù)權(quán)利要求1至13中任何一項(xiàng)的一種或多種化合物作為src家族酪氨酸激酶抑制劑的應(yīng)用。
22.根據(jù)權(quán)利要求1至13中任何一項(xiàng)的一種或多種式I的化合物用于治療癌癥的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明描述的是通式I的化合物、它們的制備方法、含有它們的藥劑及它們的制備，以及這些化合物作為藥學(xué)活性試劑的用途。所述的化合物顯示出作為蛋白激酶抑制劑的活性，特別是src家族酪氨酸激酶抑制劑的活性，因此可以用于治療由所述酪氨酸激酶介導(dǎo)的疾病。
文檔編號(hào)A61K31/519GK1930163SQ200580007763
公開(kāi)日2007年3月14日 申請(qǐng)日期2005年3月14日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月15日
發(fā)明者K·霍諾爾德, W·舍費(fèi)爾, S·沙伊布利科 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司