專利名稱：一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，具體地說是淫羊藿和知母有效提取物組成的藥物組合物。
背景技術(shù)：
骨科疾病是一個(gè)世界范圍的、越來越引起人們重視的健康問題。例如，目前全世界約2億人患有骨質(zhì)疏松，其發(fā)病率已躍居常見病、多發(fā)病的第七位。最新研究表明，在我國一直被認(rèn)為是老年人特有疾病的骨質(zhì)疏松癥，實(shí)際上在兒童時(shí)期就已存在。隨著人口老齡化日趨明顯，作為中老年多發(fā)的退行性疾病--骨質(zhì)疏松癥及其并發(fā)癥，已成為一個(gè)社會(huì)性的健康問題而備受老年病學(xué)者的關(guān)注，并引起了社會(huì)的高度重視。目前醫(yī)學(xué)上還未有安全而有效的根治方法，幫助已疏松的骨骼恢復(fù)原狀。骨科方面還有關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)增生等疾病的發(fā)病率也越來越高，嚴(yán)重影響了人們的生活質(zhì)量的提高。因此，開發(fā)一種能有效預(yù)防和治療骨科疾病的藥物有重要的醫(yī)學(xué)和社會(huì)意義。
淫羊藿為小檗科淫羊藿屬植物淫羊藿的葉?！侗静菥V目》記載其具有“益精氣，堅(jiān)筋骨，補(bǔ)腰膝，強(qiáng)心力”等功效；淫羊藿的作用廣泛，如對(duì)心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗炎、抗骨質(zhì)疏松、抗衰老、抗腫瘤等均用作用。淫羊藿是傳統(tǒng)的補(bǔ)腎壯陽中藥，傳統(tǒng)中藥中許多治療骨質(zhì)疏松癥的方劑中均含有淫羊藿?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明淫羊藿的主要化學(xué)成分為黃酮與多糖，大量的研究表面淫羊藿治療骨質(zhì)疏松癥的有效部位為黃酮(中國天然藥物，2004，7，2(4)，235-239)，它能促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖和(或)增強(qiáng)其礦化能力，有效的防治骨質(zhì)疏松癥。
知母為百合科植物知母(Anemarrhena asphodeloides)的根莖，味苦甘，性寒、入肺、胃、腎經(jīng)。具有清熱瀉火、生津潤(rùn)燥等功效。知母化學(xué)成分主要為甾體皂苷、雙苯吡酮類(芒果苷、異芒果苷)、木脂素類、多糖類(知母多糖A~D)、有機(jī)酸類(煙酸、鞣酸等)、大量的粘液質(zhì)、微量無素(鐵、鋅、銅、錳、鈷、鎳等，其中以鐵、鋅含量最高)、其它(二十五烷酸乙烯酯、β-谷甾醇、β-豆甾醇)。知母主含皂苷，根莖含皂苷約6％。知母芒果苷有顯著的抗炎作用。動(dòng)物模型證實(shí)知母總多糖(TPA)對(duì)多種致炎劑引起的急性毛細(xì)血管通透性增高、炎性滲出增加及組織水腫均有明顯的抑制作用。對(duì)慢性肉芽腫增生有顯著抑制作用。研究認(rèn)為，TPA可增強(qiáng)腎上腺功能，減少ACTH分泌、釋放，并且抑制PGE的合成或釋放。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中治療骨科疾病的藥物通常是含雌激素的化學(xué)藥物，臨床使用時(shí)藥物副作用大，中藥因其療效獨(dú)特和副作用小而深得醫(yī)生和患者的青睞。檢索現(xiàn)有的文獻(xiàn)和專利發(fā)現(xiàn)淫羊藿和知母廣泛用于中醫(yī)治療骨質(zhì)疏松和抗炎的方劑中，但其處方通常是多味甚至幾十味中藥同時(shí)使用，使用方法通常為簡(jiǎn)單的丸劑和散劑。我們研究發(fā)現(xiàn)僅淫羊藿和知母兩種藥物提取物組成的組方便能很好的發(fā)揮它們的協(xié)同作用，與它們單獨(dú)使用相比能顯著的提高藥效和臨床療效。經(jīng)研究，我將這種藥物組合物制成臨床上先進(jìn)的膠囊、注射劑和注射用凍干粉針劑，提高了藥效也為臨床使用提供了一種起效快，療效明確的治療骨科疾病全新的中藥注射劑。同時(shí)簡(jiǎn)化了組方和藥物制備方法便于工業(yè)實(shí)施和臨床應(yīng)用，為臨床預(yù)防與治療骨科疾病提供了一種新的有效的藥物組合。

發(fā)明內(nèi)容
經(jīng)過我們大量的科學(xué)研究和臨床試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了淫羊藿提取物與知母提取物的組合物有很強(qiáng)的預(yù)防和治療骨科疾病的作用，并對(duì)此發(fā)明做了進(jìn)一步的完善，將這種組合物制成便于臨床實(shí)施應(yīng)用的藥物制劑。
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種能有效預(yù)防和治療骨科疾病的淫羊藿提取物與知母提取物的藥物組合物，經(jīng)藥理和臨床試驗(yàn)證明其作用比單獨(dú)使用淫羊藿和知母更為有效。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備以上組合物的生產(chǎn)工藝。
稱取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，蒸干得淫羊藿總黃酮。
取知母干燥根莖用80~90℃的水浸3次。每次5h，合并水浸液，濃縮。濃縮液經(jīng)大孔樹脂碎柱色譜，收集10％~70％乙醇洗脫部分，回收溶劑至干，得知母總皂甙。
本發(fā)明的藥物組合物的配方如下淫羊藿提取物1-99重量比知母提取物1-99重量比采用現(xiàn)有的醫(yī)藥工業(yè)領(lǐng)域的制劑技術(shù)，可以將上述配方的藥物組合物制成各種適合臨床使用的藥物劑型。
以下內(nèi)容為驗(yàn)證本發(fā)明藥物組合物的藥理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果(1)本品對(duì)實(shí)驗(yàn)性骨質(zhì)疏松癥的影響試驗(yàn)動(dòng)物Wistar大鼠60只，雌性，16周齡，體重220~240g。
實(shí)驗(yàn)儀器雙能X線骨密度檢測(cè)量?jī)x美國Nodand公司生產(chǎn)，儀器型號(hào)XR226.
實(shí)驗(yàn)方法大鼠實(shí)驗(yàn)性骨質(zhì)疏松癥實(shí)驗(yàn)各組大鼠分籠飼養(yǎng)于不銹鋼金屬籠內(nèi)，每籠5只，室溫調(diào)節(jié)在22-26℃，濕度控制在50％~70％，自由飲食和攝水。動(dòng)物稱重，采用分層隨機(jī)法將大鼠60只分為6組，即空白對(duì)照組0.9％氯化鈉注射液(10ml/kg)；模型對(duì)照組0.9％氯化鈉注射液(10ml/kg)；本品大劑量組(500mg/Kg)；本品中劑量組(250mg/Kg)；本品小劑量組(125mg/Kg)；治療骨質(zhì)疏松藥物對(duì)照組骨松寶顆粒劑(2.7g/Kg)。
實(shí)驗(yàn)過程中每組稱重一次，根據(jù)大鼠體重調(diào)節(jié)給藥量。空白組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中只給等量生理鹽水，模型組、骨松寶顆粒劑組、本品膠囊各劑量組于實(shí)驗(yàn)第1~15天均給予維甲酸(70mg·g-1Dd-1)灌胃，同時(shí)骨松寶顆粒組加服骨松寶顆粒，本品組加服本品各相應(yīng)的劑量，14d后各組停用維甲酸，空白組、模型組給于等量生理鹽水，給藥組繼續(xù)給予所試藥物，劑量不變，第29天，麻醉動(dòng)物并腹主動(dòng)脈取血，分離血清用全自動(dòng)生化儀測(cè)定血鈣、血磷，處死動(dòng)物，分離了兩側(cè)完整的股骨、第2~4腰椎進(jìn)行骨密度的檢測(cè)。
試驗(yàn)結(jié)果表1本品膠囊對(duì)大鼠骨密度變化的影響(x±s，n＝10)


注與模型對(duì)照組比較，*P＜0.05；**P＜0.01本品對(duì)大鼠骨密度的影響本品高、中、低劑量組對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠骨質(zhì)疏松癥導(dǎo)致的骨密度降低有明顯抑制作用，可升高大鼠股骨和腰椎骨密度的作用(P＜0.05~0.001)，骨松寶也有升高大鼠股骨和腰椎骨密度的作用(P＜0.05)。
表2 本品膠囊對(duì)大鼠血鈣、血磷的影響(x±s，n＝10)

本品對(duì)大鼠血鈣、血磷的影響本品三個(gè)劑量組對(duì)維甲酸性導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥大鼠的血鈣水平有顯著的升高作用，和模型組比較有顯著差異(P＜0.05)，骨松寶也有升高大鼠血鈣、血磷的作用(P＜0.05)。本品對(duì)大鼠血磷無明顯作用。
(2)鎮(zhèn)痛作用2.1小鼠化學(xué)刺激法引起擬痛反應(yīng)(扭體法)實(shí)驗(yàn)一級(jí)ICR小鼠60只，體重18～22g，隨機(jī)分為5組，每組12只，雌雄各半，分組及給藥情況見表3。
表3 對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響試驗(yàn)給藥及分組情況

各組動(dòng)物按上表給藥，除陽性組于注射醋酸前15min一次性腹腔注射給藥，其它各組每天給藥1次，連續(xù)7天，于末次給藥后45min，各鼠腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，觀察15min內(nèi)各動(dòng)物扭體反應(yīng)次數(shù)。計(jì)算藥物鎮(zhèn)痛百分率。
結(jié)果見表4表4 對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響

注與空白對(duì)照組比較，***p＜0.001；**p＜0.01。
表4結(jié)果表明，本專業(yè)品對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)具有明顯抑制作用，與空白對(duì)照組比較，高劑量組p＜0.001，中劑量組p＜0.01，提示本品對(duì)醋酸致痛具有明顯止痛作用。
2.2熱傳導(dǎo)引起小鼠擬痛反應(yīng)(熱板法)實(shí)驗(yàn)一級(jí)ICR小鼠，體重18～22g，雌性；RB-200智能熱板儀，程控溫度55±0.5℃，以小鼠舔后足為致痛指標(biāo)，出現(xiàn)舔后足時(shí)所用的時(shí)間即為其痛閾值，測(cè)量各鼠正常痛閾值，選澤正常痛閾值在5～30s之間的小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，分組及給藥情況見表5。
表5 對(duì)小鼠熱板致痛的影響試驗(yàn)給藥及分組情況

測(cè)定正常痛閾值后，各組動(dòng)物按上表給藥，給藥后30、60、90min(度冷丁組為15、60、90min)分別測(cè)定各鼠給藥后痛閾值，計(jì)算痛閾提高百分率。
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS10.0軟件單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。
結(jié)果見表6。
表6 對(duì)小鼠熱板致痛的影響

與空白對(duì)照組比較，***p＜0.001；**p＜0.01；*p＜0.05。
表6結(jié)果表明，本品能明顯提高熱板致痛小鼠的痛閾值，與空白對(duì)照組比較，60min時(shí)高中低劑量組p＜0.01，90min時(shí)高、中劑量組p＜0.05。提示本品對(duì)熱板致痛小鼠有明顯的止痛作用。
(3)本品膠囊抗炎癥實(shí)驗(yàn)研究3.1對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響雄性ICR小鼠60只，按體重隨機(jī)分為模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組，本品膠囊高、中、低劑量組，共5組，每組12只。高中低劑量組大鼠分別灌胃給予本品500、250、125mg/kg，陽性對(duì)照組灌胃給予醋酸地塞米松片1.0mg/kg，模型組給予等體積生理鹽水，每大1次，連續(xù)7天，末次給藥后1小時(shí)，將50μl二甲苯涂于每只小鼠右耳前后兩面。4小時(shí)后脫頸處死，剪下雙耳，用直徑為8mm不銹鋼沖子沖下左右耳片，稱重，以兩耳片重量之差作為衡量腫脹程度的指標(biāo)，抗炎作用強(qiáng)度以抑制率(％)表示，用SPSS11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果見表7。
表7 對(duì)小鼠耳腫脹的影響(x±s)


與模型對(duì)照組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本品膠囊對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用，其高劑量組與模型組比較有極顯著差異。
3.2對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性升高的抑制作用雄性ICR小鼠60只，按體重隨機(jī)分為模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組，本品膠囊高、中、低劑量組，共5組，每組12只。高中低劑量組大鼠分別灌胃給予本品500、250、125mg/kg，陽性對(duì)照組灌胃給予醋酸地塞米松片1.0mg/kg，模型組給予等體積生理鹽水，每天1次，連續(xù)7天，于末次給藥后30min，尾靜脈注射0.5％伊文思藍(lán)溶液0.1ml/10g體重，立即腹腔注射0.6％冰醋酸溶液0.2ml/只。20min后，剪開腹腔皮膚，用5ml生理鹽水沖洗腹腔，吸出全部腹腔洗液，于751型分光光度計(jì)上測(cè)量其吸光值。以O(shè)D值反映其腹腔毛細(xì)血管通透性情況。結(jié)果見表8。
表8 對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的影響(x±s)

與模型對(duì)照組比較*p＜0.05，**p＜0.01。
注表中動(dòng)物數(shù)為注射成功、納入統(tǒng)計(jì)分析的小鼠數(shù)。
上表結(jié)果表明，本品膠囊對(duì)醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加具有明顯的抑制作用，高劑量組與模型對(duì)照組比較有顯著差異。
具體實(shí)施例以下為結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步的詳細(xì)描述，并不對(duì)本發(fā)明作任何限制
實(shí)施例1膠囊處方及工藝處方(按1000粒計(jì))淫羊藿提取物20g知母提取物 20g淀粉150ml微粉硅膠10g制成1000粒稱取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，蒸干得淫羊藿總黃酮。
取知母干燥根莖用80~90℃的水浸3次。每次5h，合并水浸液，濃縮。濃縮液經(jīng)大孔樹脂碎柱色譜，收集10％~70％乙醇洗脫部分，回收溶劑至干，得知母總皂甙。
取處方量淫羊藿提取物、知母提取物、淀粉，微粉硅膠混均，裝膠囊。
實(shí)施例2粉針處方及工藝處方(按1000瓶計(jì))淫羊藿提取物10g知母提取物 5g甘露醇 250g制成1000瓶提取方法同上。成型工藝為取處方量淫羊藿提取物、知母提取物、甘露醇、聚乙二醇400、80％處方量注射用水溶解；初濾后再用0.2um微孔濾膜精濾；補(bǔ)足注射用水至全量；分裝；凍干；包裝。
實(shí)例3注射液處方及工藝處方(按1000瓶計(jì))淫羊藿提取物 10g知母提取物5g注射用水 加至2000ml制成 1000瓶提取方法同上。成型工藝為取處方量淫羊藿提取物、知母提取物、50％處方量注射用水溶解；活性炭初濾后再用0.2um微孔濾膜精濾；補(bǔ)足注射用水至全量；測(cè)定含量；分裝；滅菌；燈檢；包裝。
實(shí)例4片劑處方及工藝處方 (按1000片計(jì))淫羊藿提取物 20g知母提取物20g淀粉 150g羥丙基纖維素 7g羥甲基淀粉鈉 7g微粉硅膠 10g制成 1000片提取方法同上。成型工藝為取處方量淫羊藿提取物、知母提取物、淀粉，羧甲基淀粉鈉，用5％羥丙基纖維素作黏合劑，制軟材，20目篩制粒，60℃干燥，加入微粉硅膠整粒，壓片。
實(shí)例5滴丸處方及工藝處方 (按1000粒計(jì))淫羊藿提取物 20g知母提取物20g聚乙二醇6000 200g制成 1000粒提取方法同上。成型工藝為取聚乙二醇6000于油浴上加熱至90-100℃，待全部溶解后，加入淫羊藿提取物和知母提取物攪拌至溶解，轉(zhuǎn)移至貯液瓶中，密閉并保溫再80-90℃，調(diào)節(jié)滴液定量閥門，滴入10-15℃的液體石蠟中，將形成的滴丸瀝干并擦除液體石蠟，干燥。
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的配方為淫羊藿提取物1-99重量比，知母提取物1-99重量比。
2.一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的配方為淫羊藿提取物55-70重量比，知母提取物30-45重量比。
3.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療科疾病的藥物組合物，其特征在于淫羊藿提取物可用淫羊藿原藥材代替，知母提取物可用知母原藥材代替。
4.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療科疾病的藥物組合物，其特征在于淫羊藿提取物中淫羊藿總黃酮重量比為10-100，知母提取物中知母總皂甙重量比為10-100。
5.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物，其特征在于其臨床上適用于治療骨質(zhì)疏松癥、關(guān)節(jié)疾病、骨質(zhì)增生，骨髓炎和筋骨傷痛等骨科疾病。
6.按照權(quán)利要求1所述預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥和抗炎的藥物組合物，其特征在于它的劑型是適合臨床應(yīng)用的注射液(包括輸液、凍干粉針)、丸劑、滴丸、片劑(包括分散片、口崩片等)、緩釋片、膠囊、軟膠囊、顆粒劑、散劑、錠劑、煎膏劑、口服液(合劑)、糖漿劑、軟膏劑、搽劑、涂膜劑等藥劑學(xué)上可以接受的劑型中的任何一種藥物劑型。
7.一種預(yù)防和治療骨科疾病的藥物組合物的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟(1)稱取淫羊藿5kg，加10倍量的70％乙醇提取3次，每次1.5小時(shí)，回收乙醇，水浴濃縮，蒸干得淫羊藿提取物；(2)取知母干燥根莖用80~90℃的水浸3次。每次5h，合并水浸液，濃縮。濃縮液經(jīng)大孔樹脂碎柱色譜，收集10％~70％乙醇洗脫部分，回收溶劑至干，得知母提取物；(3)取10g淫羊藿提取物、5g知母提取物、50％處方量注射用水溶解；活性炭初濾后再用0.2um微孔濾膜精濾；補(bǔ)足注射用水至全量；測(cè)定含量；分裝；滅菌；燈檢；包裝，制成本發(fā)明的中藥注射劑1000瓶。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種能有效的預(yù)防和治療骨科疾病的中藥組合物，即淫羊藿和知母組成的藥物組合物。它們的組合應(yīng)用在預(yù)防和治療骨科疾病方面有很好的協(xié)同作用，治療效果明顯，強(qiáng)于淫羊藿和知母單獨(dú)應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K9/08GK1907424SQ20051008883
公開日2007年2月7日 申請(qǐng)日期2005年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月2日
發(fā)明者孫毅 申請(qǐng)人:孫毅