專利名稱：一種預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，具體地說是銀杏提取物和柿葉組成的藥物組合物。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病是一種嚴(yán)重危害人類健康的常見疾病。在目前我國傳染病已被基本控制的情況下，該類疾病相對更為常見，且成為死亡的主要原因之一。在我國，心腦血管疾病患者人數(shù)呈逐年上升的趨勢，年齡呈年輕化趨勢，嚴(yán)重的威脅者人民的健康和生活。據(jù)統(tǒng)計，我國每年因心腦血管疾病造成死亡的人數(shù)約有260萬，平均每小時死亡300人；我國15歲以上人群高血壓患病率約為14％，比30年前增加了一倍。全國約有高血壓患者1億左右。更嚴(yán)重的是，30歲左右發(fā)生心肌梗塞、腦梗塞和腦溢血的患者越來越多。由于目前尚缺乏理想的治療藥物，且化學(xué)藥物的濫用，不良反應(yīng)發(fā)生率高，人們更青睞于由天然植物組成的中藥。本發(fā)明結(jié)合中醫(yī)理論和現(xiàn)代藥理研究，將由銀杏提取物和柿葉提取物組成的藥物組合物應(yīng)用于心腦血管疾病的治療，不僅有良好的市場前景，而且具有重要的社會意義。
銀杏(Ginkgo hiloba L.)為銀杏科銀杏屬植物。銀杏樹出現(xiàn)于二億年前，在冰川世紀(jì)幾近滅種，僅在我國幸存，被達爾文成為“活化石”，現(xiàn)在許多國家也有栽培。銀杏的種子、根、葉均可以作為藥用?！侗静菥V目》記載“其性味甘苦而澀，入肺、腎二經(jīng)，有定喘止咳、止帶濁、縮小便”的功效。現(xiàn)在國內(nèi)外對銀杏的系統(tǒng)研究開發(fā)及其活躍，歐洲開發(fā)的銀杏葉制劑的銷售額名列所有藥物的前5名?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明銀杏葉提取物對性血管有獨特的作用，它有擴張血管和解除痙攣作用，還有擴張冠脈血管增加冠脈流量的作用。
柿葉味苦、性寒。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為其有止咳定喘、生津止渴、活血止血、療瘡等功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)柿葉能增加動物冠脈血流量和降低冠脈阻力的作用，其醇提取物還能改善麻醉狗心臟泵功能、降低心肌耗氧量、改善全身血液循環(huán)，臨床上其注射液已用于治療高血壓。
山楂葉為薔薇科植物山里紅Crataegus pinnatifida Bge.Var.major N.E.Br.或山楂Grataegus pinnatifida Bge.的干燥葉。夏、秋二季采收，晾干。氣微，味澀、微苦。歸肝經(jīng)。傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為山楂有消食健胃、行氣散淤功能，能用于肉食積滯，胃脘脹滿，瀉痢腹痛，淤血經(jīng)閉，產(chǎn)后淤阻，心腹刺痛，疝氣疼痛，高脂血癥等。近代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)山楂還有抑制血小板聚集，抗血栓形成作用，抗心肌梗塞、心絞痛作用，強心作用和降壓作用。藥典記錄其主要功能有活血化瘀，理氣通脈。用于氣滯血淤，胸悶憋氣，心悸健忘，眩暈耳鳴。
苦碟子為菊科植物抱莖荬菜的當(dāng)年生干燥全草。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為其有清熱解毒、排膿之功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)將其用于治療腦血栓形成及其后遺癥、腦栓塞、血栓閉塞性脈管炎、血栓性靜脈炎、冠心病、心絞痛、心肌梗死心率失常等心腦血管疾病。
經(jīng)我們研究發(fā)現(xiàn)，銀杏提取物和柿葉提取物的組合應(yīng)用能發(fā)揮良好的協(xié)同作用，增強藥物在治療心腦血管方面的效果，是一種有效的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物。同時，銀杏提取物與山楂葉提取物或苦碟子提取物組合應(yīng)用也能產(chǎn)生類似的協(xié)同作用，發(fā)揮相近的藥效作用。

發(fā)明內(nèi)容
經(jīng)過我們大量的科學(xué)研究和臨床試驗，發(fā)現(xiàn)了銀杏葉提取物和柿提取物的組合藥物有很強的預(yù)防和治療心腦血管疾病的作用，并對此發(fā)明做了進一步的完善，將這種組合物制成便于臨床實施應(yīng)用的藥物制劑。
本發(fā)明的一個目的是提供一種能有效預(yù)防和治療心腦血管疾病的銀杏提取物和柿葉提取物的藥物組合物，經(jīng)藥理和臨床試驗證明其作用比單獨使用以上各組分更為有效。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種制備以上藥物組合物的生產(chǎn)工藝。
取銀杏葉粗粉1kg，加10L50％乙醇溶液回流提取三次，每次1小時(第一次先浸泡12小時)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至稠膏，加乙醇溶液使含醇量達90％，取上清液，回收乙醇，濃縮至稠膏，70℃減壓干燥，粉碎過100目篩，加2.5L正己烷回流2小時，回收正己烷，殘渣加水0.8L，用10％鹽酸溶液調(diào)pH值至2，煮沸30分鐘，冷藏過夜，過濾，濾液用10％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至3.5，上已處理好的ADS-17大孔吸附樹脂柱(樹脂用量與藥材比為1∶8)吸附，分別用注射用水和5％乙醇溶液12L洗脫，棄去洗脫液，再用40％乙醇溶液12L洗脫，洗脫速度為134ml/min，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮至稠膏，轉(zhuǎn)移到潔凈環(huán)境下，70℃減壓干燥，得銀杏葉提取物備用。
稱取柿葉粗粉1kg，加，70％乙醇10L，浸泡30分鐘，回流提取1小時，過濾，藥渣再加70乙醇11，回流提取1小時，過濾，重復(fù)，合并三次濾液，回收乙醇后，用NaOH調(diào)pH值至13，離心，濃縮，加乙醇含量達70％，靜置過夜，濾取上清液，回收乙醇，加水溶解，濾過，濾液用醋酸乙酯提取5次，合并醋酸乙酯，回收醋酸乙酯，加水溶解，上聚酰胺柱，用蒸餾水洗至洗脫液無色，用70％乙醇洗脫，調(diào)解流速為5-10ml/min，收集洗脫液，低壓低溫回收酒精、濃縮、減壓噴霧干燥得柿葉提取物。
山楂的提取方法取山楂果肉，以60％乙醇回流提取2次，每次1.5小時。合并提取液，回收乙醇，加入適量蒸餾水，拌勻，加入CaCl2，靜置過夜。離心，分別收集上清液，用氨水調(diào)pH至7-8，分別加入大孔吸附樹脂柱中，調(diào)節(jié)流速為5ml/min，用蒸餾水洗去雜質(zhì)，以乙醇為流動相解吸附，回收乙醇得山楂提取物。
苦碟子的提取方法取抱莖苦碟子1000g，用水煎煮二次，第一次加10-12倍量水煎煮1小時，第二次加6-8倍量水煎煮0.5小時，合并兩次煎煮液，濃縮液加CaO，調(diào)pH至10，放置，高速離心，取上清液上大孔樹脂用水沖洗至流出液無色，再用80％乙醇洗脫，至流出液為淡黃色，停止洗脫，洗脫液回收乙醇至流浸膏狀，加95％乙醇沉淀，濾過，減壓干燥，得苦碟子提取物。
本發(fā)明的藥物組合物的配方如下銀杏提取物1-99重量比 柿葉提取物1-99重量比采用現(xiàn)有的醫(yī)藥工業(yè)領(lǐng)域的制劑技術(shù)，可以將上述配方的藥物組合物制成各種適合臨床使用的藥物劑型。
以下內(nèi)容為驗證本發(fā)明藥物組合物的藥理學(xué)和臨床研究試驗結(jié)果本發(fā)明藥物具有益氣活血、祛瘀通絡(luò)之功能，用于治療心腦血管病，如冠心病心絞痛、心肌梗塞、腦梗塞等。以下通過藥理試驗對本發(fā)明的藥理作用作進一步說明(1)小鼠急性腦缺氧實驗昆明種小鼠50只，體重18～22g，隨機分成5組，每組10只。設(shè)為空白對照組、本發(fā)明藥物高中低劑量組(4.0g/kg、2.0g/kg、1.0g/kg)、舒血寧(1ml/kg)陽性對照組。腹腔給藥3天后，斷頭，記錄小鼠斷頭后張口次數(shù)及喘息時間。
表1藥物對小鼠斷頭后張口喘息時間的影響(n＝10，x±s)

注與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
試驗結(jié)果本發(fā)明藥物與舒血寧均能明顯延長小鼠斷頭張口次數(shù)及喘息時間，高、中劑量與空白對照組比較具有極顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，低劑量與空白組比較有顯著性差異(P＜0.05)。本發(fā)明藥物高劑量組效果優(yōu)于舒血寧組，中劑量組與舒血寧組相當(dāng)，表明本發(fā)明藥物腹腔給約后能提高小鼠抗急性缺氧能力，使小鼠耗氧和耗能明顯降低，具有保護腦組織缺氧和組織缺氧損傷，改善腦能量代謝。
(2)體內(nèi)抗血小板聚集實驗健康家兔30只，體重2.0～2.5kg，雌雄均用，隨機分成5組，每組6只，即等體積空白溶液組、1.0、2.0、4.0g/kg的本發(fā)明藥物組和1mg/kg的舒血寧注射液組。上述各組均以5.0ml/kg體重經(jīng)耳緣靜脈注射給藥。給藥前取血一次，給藥后10、30、60、90和120min分別取血，制備PRP和PPP，觀察藥物靜脈注射后對PAF誘導(dǎo)血小板聚集功能的影響。
表2藥物對PAF誘導(dǎo)血小板聚集的影響(n＝10，x±s)

注(1)與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。(2)括號內(nèi)為抑制率。
實驗結(jié)果表明，本發(fā)明藥物靜脈注射后，對PAF誘導(dǎo)的血小板聚集功能物明顯抑制作用，注射后30和60分鐘抑制PAF引起的血小板聚集作用非常明顯。高劑量(4.0mg/kg)，注射后10min起效，于60min達最大抑制作用，抗PAF作用持續(xù)至120min；舒血寧注射液的作用特點與本發(fā)明藥物高劑量相似，注射后30min、60min、90min，本發(fā)明藥物的抗PAF作用強度明顯高于1ml/kg舒血寧注射液組。
(3)電刺激大鼠頸動脈血栓形成試驗雄性SD大鼠50只，體重190～230g，隨機分成5組，每組10只，即空白溶液組(等體積)、1.0、2.0、4.0g/kg的本發(fā)明藥物組和1ml/kg的舒血寧注射液組。上述各組腹腔注射1次/d，共2次，于末次給藥30min后，腹腔注射30mg/kg戊巴比妥鈉麻醉大鼠，分離左頸總動脈，以不銹鋼電極置于頸總動脈下，以1.5mA直流電刺激動脈，遠心端放置溫度傳感器。打開儀器開關(guān)，隨動脈內(nèi)血栓形成，血流阻斷，溫度下降，儀器自動報警，顯示血栓形成時間。實驗數(shù)據(jù)用Studentt-檢驗行統(tǒng)計學(xué)處理。
表3藥物對電刺激大鼠頸動脈血栓形成時間的影響(n＝10，x±s)

注與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
試驗結(jié)果顯示本發(fā)明藥物靜脈注射后，呈劑量相關(guān)性明顯延長電刺激大鼠頸動脈的血栓形成時間；1mg/kg舒血寧注射液組的血栓形成時間與2.0mg/kg本發(fā)明藥物相當(dāng)。
(4)對膠原蛋白-腎上腺素誘發(fā)小鼠體內(nèi)血栓形成的影響取健康小鼠，18～20g，50只，雌雄各半，隨機分為5個組，每組10只，即生理鹽水組(等體積)，1ml/kg的舒血寧注射液組，1.0、2.0、4.0g/kg的本發(fā)明藥物組。各組每日給藥一次，連續(xù)7大，末次給藥后30分鐘，尾靜脈注射膠原蛋白(225μg/只)與腎上腺素(9μg/只)的混合誘導(dǎo)劑，注射后即觀察5分鐘之內(nèi)小鼠死亡數(shù)和15分鐘內(nèi)小鼠偏癱的恢復(fù)數(shù)，計算小鼠腦血栓的保護率。
表4藥物對膠原蛋白-腎上腺素誘發(fā)小鼠體內(nèi)血栓形成的影響(n＝10，x±s)


注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
實驗結(jié)果本發(fā)明藥對膠原蛋白-腎上腺素誘發(fā)小鼠體內(nèi)血栓有明顯的保護作用(P＜0.01)。本發(fā)明藥高劑量作用效果與舒血寧注射液效果相當(dāng)。
(5)抗心肌缺血試驗取大鼠50只，隨機分為5組，即生理鹽水對照組(等容積)，1mg/kg的舒血寧注射液組，1.0、2.0、4.0g/kg的本發(fā)明藥物組。各組動物腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉后，尾靜脈注射垂體后葉素(Pit)，于15s、30s、1min、2min、5min記錄心電圖。待心電圖回復(fù)正常后，腹腔注射給藥，30min后，尾靜脈注射Pit，同上記錄心電圖，觀察給藥前后T波及S-T段的變化。實驗數(shù)據(jù)用Studentt-檢驗行統(tǒng)計學(xué)處理。
表5藥物對垂體后葉素引起的T波增高的影響(n＝10，x±s)(T波升高最大值)

注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表6藥物對垂體后葉素引起的S-T段上移的影響(n＝10，x±s)(S-T段上移最大值)

注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
試驗結(jié)果表明本發(fā)明藥物高、中、低劑量均能明顯對抗垂體后葉素引起的T波及S-T段升高(P＜0.05)，表明本發(fā)明藥物具有較明顯的抗心肌缺血作用，高劑量其效果優(yōu)于陽性藥舒血寧注射液。
具體實施例以下為結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明所作的進一步的詳細描述，并不對本發(fā)明作任何限制實施例1膠囊處方及工藝處方 (按1000粒計)銀杏提取物 20g柿葉提取物 20g淀粉 150ml微粉硅膠 10g制成 1000粒取銀杏葉粗粉1kg，加10L50％乙醇溶液回流提取三次，每次1小時(第一次先浸泡12小時)，合并提取液，回收乙醇，濃縮至稠膏，加乙醇溶液使含醇量達90％，取上清液，回收乙醇，濃縮至稠膏，70℃減壓干燥，粉碎過100目篩，加2.5L正己烷回流2小時，回收正己烷，殘渣加水0.8L，用10％鹽酸溶液調(diào)pH值至2，煮沸30分鐘，冷藏過夜，過濾，濾液用10％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至3.5，上已處理好的ADS-17大孔吸附樹脂柱(樹脂用量與藥材比為1∶8)吸附，分別用注射用水和5％乙醇溶液12L洗脫，棄去洗脫液，再用40％乙醇溶液12L洗脫，洗脫速度為134ml/min，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮至稠膏，轉(zhuǎn)移到潔凈環(huán)境下，70℃減壓干燥，得銀杏葉提取物備用。
稱取柿葉粗粉1kg，加，70％乙醇10L，浸泡30分鐘，回流提取1小時，過濾，藥渣再加70乙醇1L，回流提取1小時，過濾，重復(fù)，合并三次濾液，回收乙醇后，用NaOH調(diào)pH值至13，離心，濃縮，加乙醇含量達70％，靜置過夜，濾取上清液，回收乙醇，加水溶解，濾過，濾液用醋酸乙酯提取5次，合并醋酸乙酯，回收醋酸乙酯，加水溶解，上聚酰胺柱，用蒸餾水洗至洗脫液無色，用70％乙醇洗脫，調(diào)解流速為5-10ml/min，收集洗脫液，低壓低溫回收酒精、濃縮、減壓噴霧干燥得柿葉提取物。
山楂的提取方法取山楂果肉，以60％乙醇回流提取2次，每次1.5小時。合并提取液，回收乙醇，加入適量蒸餾水，拌勻，加入CaCl2，靜置過夜。離心，分別收集上清液，用氨水調(diào)pH至7-8，分別加入大孔吸附樹脂柱中，調(diào)節(jié)流速為5ml/min，用蒸餾水洗去雜質(zhì)，以乙醇為流動相解吸附，回收乙醇得山楂提取物。
苦碟子的提取方法取抱莖苦碟子1000g，用水煎煮二次，第一次加10-12倍量水煎煮1小時，第二次加6-8倍量水煎煮0.5小時，合并兩次煎煮液，濃縮液加CaO，調(diào)pH至10，放置，高速離心，取上清液上大孔樹脂用水沖洗至流出液無色，再用80％乙醇洗脫，至流出液為淡黃色，停止洗脫，洗脫液回收乙醇至流浸膏狀，加95％乙醇沉淀，濾過，減壓干燥，得苦碟子提取物。
取處方量銀杏提取物、柿葉提取物、淀粉，微粉硅膠混均，裝膠囊。
實施例2粉針處方及工藝處方(按1000瓶計)銀杏提取物 10g柿葉提取物 10g甘露醇 250g注射用水10g制成1000瓶提取方法同上。成型工藝為取處方量銀杏提取物、柿葉提取物、甘露醇、聚乙二醇400、80％處方量注射用水溶解；初濾后再用0.2um微孔濾膜精濾；補足注射用水至全量；分裝；凍干；包裝。
實例3注射液處方及工藝處方 (按1000瓶計)銀杏提取物10g柿葉提取物10g注射用水 加至2000ml制成 1000瓶提取方法同上。成型工藝為取處方量銀杏提取物、柿葉提取物、50％處方量注射用水溶解；活性炭初濾后再用0.2um微孔濾膜精濾；補足注射用水至全量；測定含量；分裝；滅菌；燈檢；包裝。
實例4片劑處方及工藝處方 (按1000片計)銀杏提取物 20g柿葉提取物 20g淀粉 150g羥丙基纖維素 7g羥甲基淀粉鈉 7g微粉硅膠 10g制成 1000片提取方法同上。成型工藝為取處方量銀杏提取物、柿葉提取物、淀粉，羧甲基淀粉鈉，用5％羥丙基纖維素作黏合劑，制軟材，20目篩制粒，60℃干燥，加入微粉硅膠整粒，壓片。
實例5滴丸處方及工藝處方(按1000粒計)銀杏提取物 20g柿葉提取物 20g聚乙二醇6000 200g制成 1000粒提取方法同上。成型工藝為取聚乙二醇6000于油浴上加熱至90-100℃，待全部溶解后，加入銀杏提取物、柿葉提取物、攪拌至溶解，轉(zhuǎn)移至貯液瓶中，密閉并保溫再80-90℃，調(diào)節(jié)滴液定量閥門，滴入10-15℃的液體石蠟中，將形成的滴丸瀝干并擦除液體石蠟，干燥。
權(quán)利要求
1.一種預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的配方為銀杏提取物1-99重量比，柿葉提取物1-99重量比。
2.一種預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的配方為銀杏提取物45-55重量比，柿葉提取物45-55重量比。
3.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其中的柿葉提取物可以用山楂葉提取物代替。
4.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其中的柿葉提取物可以用苦碟子提取物代替。
5.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其中的銀杏提取物可以用銀杏原藥材代替，柿葉提取物可用柿葉原藥材代替。
6.按照權(quán)利要求2所述的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其中的山楂葉提取物可以用山楂葉原藥材代替。
7.按照權(quán)利要求3所述的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其中的苦碟子提取物可以用苦碟子原藥材代替。
8.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于銀杏提取物中銀杏黃酮重量比為10-100，柿葉提取物中柿葉黃酮的重量比為10-100。
9.按照權(quán)利要求2所述的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于山楂葉提取物中山楂黃酮重量比為10-100，苦碟子提取物中苦碟子黃酮的重量比為10-100。
10.按照權(quán)利要求1所述的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于其臨床上適用于治療高血壓、冠心病、心絞痛、心肌梗塞、淤血型肺心病、缺血性腦病、腦血栓等心腦血管疾病。
11.按照權(quán)利要求1所述預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于它的劑型是適合臨床應(yīng)用的注射液(包括輸液、凍干粉針)、丸劑、滴丸、片劑(包括分散片、口崩片等)、緩釋片、膠囊、軟膠囊、顆粒劑、散劑、錠劑、煎膏劑、口服液(合劑)、糖漿劑、軟膏劑、搽劑、涂膜劑等藥劑學(xué)上可以接受的劑型中的任何一種藥物劑型。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種能有效的預(yù)防和治療心腦血管疾病的藥物組合物，即銀杏和柿葉提取物組成的藥物組合物。它們的組合應(yīng)用有良好的協(xié)同作用提高了藥效，藥理試驗表明這種藥物組合物具有益氣活血、祛淤通絡(luò)之功效，對心腦血管疾病具有獨特的療效。
文檔編號A61P9/10GK1907319SQ20051008883
公開日2007年2月7日 申請日期2005年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月2日
發(fā)明者孫毅 申請人:孫毅