專利名稱：一種含三七總皂苷和黃芪提取物的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含有三七總皂苷和黃芪提取物的藥用組合物及其制劑和制備方法。
2、背景技術(shù)我國是心血管疾病的高發(fā)區(qū)，每年全國死于心腦血管疾病者約300萬人，平均每天7000人，即每12秒鐘就有一個生命被奪去。1000萬人因心腦血管疾病致殘。我國現(xiàn)有心腦血管患者約7300萬人(此數(shù)字未含潛在患者)。此外，心血管疾病發(fā)病率和死亡率還有逐年上升的趨勢。心腦血管疾病急性發(fā)作致死率極高，存活者經(jīng)常會留下不同程度的后遺癥，如偏癱、失語、口眼歪斜等，或者頻發(fā)心絞痛、心率失常，使生活質(zhì)量降低，給病人及家屬帶來沉重的身心和經(jīng)濟負擔(dān)。心腦缺血后影響能量代謝，繼發(fā)乳酸堆積、鈣超載、自由基損傷等多種變化。采用復(fù)方制劑多靶點逆轉(zhuǎn)或改善這些變化，提高綜合療效是藥物治療的重要目標。
三七為五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根，具有散瘀止血，消腫定痛的功效。三七總皂苷是三七的主要有效成分，藥理實驗證明，三七總皂苷對心肌有保護作用，對大鼠、家兔、犬的心肌缺血-再灌注損傷有很強的保護作用；具有抗冠心病作用，可增加冠脈血流量，改善心肌微循環(huán)，調(diào)整心肌缺血缺氧的狀態(tài)；對腦組織有保護作用，能使全腦或局灶性腦缺血后再灌注水腫明顯減輕，血腦屏障通透性改善，局部血流量顯著增加；具有擴血管和降壓的作用，可阻斷去甲腎上腺素所致的Ca2+內(nèi)流作用；另外還有鎮(zhèn)痛、抗炎、降血脂、免疫調(diào)節(jié)等多種藥理作用。三七總皂苷原料已有上市，共有云南植物藥業(yè)有限公司(批準文號Z53020140)，云南金不換(集團)有限公司藥業(yè)分公司(批準文號Z53020013)，昆明制藥集團股份有限公司(批準文號Z53021369)等十家生產(chǎn)。
黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，黃芪對心血管系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、腎功能、物質(zhì)代謝及腫瘤等均有良好的作用，可使減少的血細胞數(shù)恢復(fù)正常，擴張冠狀動脈，改善心臟功能，增加抗氧能力，防止脂質(zhì)過氧化，改善腎臟功能，防止肝糖原減少，抗衰老，增強機體非特異性免疫和增強機體抵抗力。
三七總皂苷的注射劑已上市，具有活血祛瘀、通脈活絡(luò)的功效，用于中風(fēng)偏癱、淤血阻絡(luò)及腦血管病后遺癥、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞屬瘀血阻滯者。黃芪注射液也有上市，具有益氣養(yǎng)元、扶正祛邪、養(yǎng)心通脈、健脾利濕的功效，用于心氣虛損、血脈瘀阻之病毒性心肌炎、心功能不全及脾虛濕困之肝炎。但有關(guān)三七總皂苷和黃芪提取物二者的組合物未見報道。
3、發(fā)明內(nèi)容為了滿足臨床需要，解決上述問題，本發(fā)明提供了一種主要由三七總皂苷和黃芪提取物組成的新的藥物組合物及其制備方法和用途。三七總皂苷與黃芪提取物組兩者合用，可以協(xié)同發(fā)揮保護心臟、耐缺氧、抗血栓的作用，可用于用于腦梗阻，冠心病，心絞痛屬氣滯血瘀型者。本發(fā)明的藥理實驗結(jié)果證明，兩者合用，藥效顯著增強。
本發(fā)明提供的藥物組合物，其中三七總皂苷與黃芪提取物的重量配比為1∶0.005～8，優(yōu)選為1∶0.01～4，最佳為1∶0.1～2。
上述藥物組合物，可協(xié)同發(fā)揮擴張冠狀動脈，改善心臟功能，增加抗氧能力，防止脂質(zhì)過氧化的功能，可用于腦梗阻，冠心病，心絞痛屬氣滯血瘀型者。
上述藥物組合物，可制成任何一種臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型，如注射劑、口服常釋劑型、緩釋控釋劑型、顆粒劑、丸劑、口服液體劑，優(yōu)選為注射劑。
本發(fā)明提供的藥物組合物，其中三七總皂苷的含量限度，參照國家中成藥標準匯編腦系經(jīng)絡(luò)肢體分冊中注射用血栓通(凍干)的標準，將其定為按干燥品計算，含三七皂苷R1應(yīng)不低于2.0％；含人參皂苷Rg1應(yīng)不低于28.0％；含人參皂苷Rb1應(yīng)不低于25.0％。含三七皂苷R1、人參皂苷Rg1及人參皂苷Rb1的總含量應(yīng)不低于55.0％。
上述藥物組合物中，黃芪提取物的優(yōu)選制備工藝如下取黃芪，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)g，用乙醇沉淀處理2次，第一次溶液中含乙醇量為75％，第二次為85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當(dāng)于原藥材10g，用注射用水稀釋至每1ml相當(dāng)于原藥材1g，冷藏放置12小時，濾過，濾液減壓濃縮、真空干燥，即得。
通過上述工藝制備的黃芪提取物，總皂苷含量不低于50％，黃芪甲苷含量不低于2.0％。
上述藥物組合物中，黃芪提取物還可以通過下列工藝制備，但不應(yīng)將此理解為上述藥物組合物中金銀花提取物僅限于下列制備工藝。
工藝一取黃芪，加水煎煮三次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)g，用乙醇沉淀處理2次，第一次溶液中含乙醇量為60％，第二次為85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當(dāng)于原藥材10g，用注射用水稀釋至每1ml相當(dāng)于原藥材1g，冷藏放置12小時，濾過，濾液減壓濃縮、真空干燥，即得。經(jīng)含量測定，通過本工藝制備的黃芪提取物，總皂苷含量為32.14％，黃芪甲苷含量1.42％。
工藝二取黃芪，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)g，用乙醇沉淀處理1次使含乙醇量為60％，冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當(dāng)于原藥材10g，用注射用水稀釋至每1ml相當(dāng)于原藥材1g，冷藏放置12小時，濾過，濾液減壓濃縮、真空干燥，即得。經(jīng)含量測定，通過本工藝制備的黃芪提取物，總皂苷含量為42.24％，黃芪甲苷含量1.78％。
工藝三取黃芪，加水煎煮2次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)g，用乙醇沉淀處理2次，第一次溶液中含乙醇量為75％，第二次為85％，每次均冷藏放置，濾過，濾液減壓濃縮、真空干燥，即得。經(jīng)含量測定，通過本工藝制備的黃芪提取物，總皂苷含量為32.89％，黃芪甲苷含量1.17％。
工藝四取黃芪，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)g，用乙醇沉淀處理1次使含乙醇量為85％，冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當(dāng)于原藥材10g，用注射用水稀釋至每1ml相當(dāng)于原藥材1g，冷藏放置12小時，濾過，濾液減壓濃縮、真空干燥，即得。經(jīng)含量測定，通過本工藝制備的黃芪提取物，總皂苷含量為40.24％，黃芪甲苷含量1.87％。
工藝五取黃芪，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)g，用乙醇沉淀處理2次，第一次溶液中含乙醇量為75％，第二次為85％，每次均冷藏放置，回收乙醇并濃縮至每1ml相當(dāng)于原藥材10g，用注射用水稀釋至每1ml相當(dāng)于原藥材1g，冷藏放置12小時，濾過，濾液減壓濃縮、真空干燥，即得。經(jīng)含量測定，通過本工藝制備的黃芪提取物，總皂苷含量為55.23％，黃芪甲苷含量2.15％。
上述藥物組合物，黃芪提取物中有效成分含量確切，以三七總皂苷和黃芪提取物直接投料，制備工藝簡便，避免了由于原藥材質(zhì)量差異造成的制劑質(zhì)量差異較大的缺點，制劑質(zhì)量有很大的提高，療效更確切。
下列試驗例進一步說明本發(fā)明。
試驗例1 黃芪提取工藝篩選試驗1.水提工藝篩選試驗加水量、提取時間和提取次數(shù)對提取結(jié)果的影響較大，因此以總皂苷含量和浸膏得率為指標，用正交試驗法考察三種因素對提取結(jié)果的影響。因素及水平設(shè)計見表1。
表1黃芪水提工藝考察因素水平表
試驗方法稱取黃芪100g，共9份，按表2各列號的要求提取，合并提取液，濾過，濾液濃縮并定容至500ml，備用。
總皂苷的含量測定對照品溶液的制備 精密稱取于105℃干燥至恒重的黃芪甲苷對照品約10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含黃芪甲苷干品0.1mg)。
供試品溶液的制備 精密量取樣品液50ml，置水浴上蒸至約15ml，移至分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌兩次，每次10ml，棄去水液，正丁醇至水浴上蒸干，殘渣加甲醇溶解，移至25ml量瓶中，并加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法精密量取對照品溶液、供試品溶液各1ml，置25ml鈉氏比色管，置水浴中蒸干，放冷，加新鮮配制的5％香草醛—冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.6ml，搖勻，放置5分鐘，置沸水浴中顯色15分鐘，取出，立即置冰浴中冷卻至室溫，加入8ml冰醋酸，搖勻，照紫外—可見分光光度法(《中國藥典》2005年版—部附錄VA)，在538nm波長處測定吸光度，計算，即得。結(jié)果見表2。
浸膏得率的測定精密量取各樣品溶液25ml，置已恒重的蒸發(fā)皿中，于水浴蒸干后，在105℃干燥3小時，移置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。計算浸膏得率。結(jié)果見表2。
表2黃芪提取工藝考察正交試驗表
表3黃芪提取工藝方差分析表
F0.05(2，2)＝19.00F0.05(2，2)＝99.00由表2、表3結(jié)果可以看出，加水量是影響黃芪提取的主要因素，提取時間和提取次數(shù)對其影響不大，結(jié)合工業(yè)生產(chǎn)，參考浸膏得率，確定黃芪提取工藝為A2B2C3，即取黃芪，加水煎煮三次，每次1.5小時，第—次加水8倍量，第二次、第三次各加水6倍量。
2.醇沉工藝的考察第一次醇沉濃度的考察試驗方法稱取黃芪200g，共3份，分別加水煎煮三次，每次1.5小時，第一次加水8倍量，第二次、第三次各加水6倍量，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)，放冷，分別緩緩加入乙醇使其含醇量為65％、75％、85％，攪勻，靜置12小時，濾過，濾液回收乙醇，并定容至1000ml。精密量取50ml與25ml，照1項下含量測定與浸膏得率測定方法，測定總皂苷的含量和浸膏得率。試驗結(jié)果見表4。
表4第一次醇沉濃度考察試驗結(jié)果
由表4結(jié)果可以看出，當(dāng)醇沉濃度為75％時，既能保證總皂苷的含量，又能達到除雜的目的，因此選擇第一次醇沉濃度為75％。
第二次醇沉濃度的考察試驗方法稱取黃芪200g，共3份，分別加水煎煮三次，每次1.5小時，第一次加水8倍量，第二次、第三次各加水6倍量，合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.25(60℃)g，用乙醇沉淀處理2次，第一次溶液中含乙醇量為75％，第二次分別為80％、85％、90％，每次均冷藏放置，濾過，回收乙醇，濃縮并定容至1000ml。精密量取50ml與25ml，照1項下含量測定與浸膏得率測定方法，測定總皂苷的含量和浸膏得率。試驗結(jié)果見表5。
表5第二次醇沉濃度考察試驗結(jié)果
由表5結(jié)果可以看出，當(dāng)醇沉濃度為85％時，既能保證總皂苷的含量，又能達到除雜的目的，因此選擇第二次醇沉濃度為85％。
試驗例2 黃芪提取物鑒別試驗鑒別試驗一 取本品0.01g，加甲醇20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱(100～120目，5g，內(nèi)徑10～15mm)上，用40％甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗滌2次，每次20ml；棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷—甲醇—水(13∶7∶2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈(365nm)下顯相同的橙黃色熒光斑點。
鑒別試驗二 取本品0.01g，加乙醇30ml，加熱回流20分鐘，濾過，濾液加0.3％氫氧化鈉溶液15ml使溶解，濾過，濾液用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5～6，用乙酸乙脂15ml振搖提取，分取乙酸乙脂液，用鋪有無水硫酸鈉的濾紙濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙脂1ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷—甲醇(10∶1)作為展開劑，展開，取出，涼干，置氨蒸氣中熏后置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點。
試驗例3 黃芪提取物含量測定試驗總皂苷的含量測定對照品溶液的制備 精密稱取于105℃干燥至恒重的黃芪甲苷對照品約10mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含黃芪甲苷干品0.1mg)。
供試品溶液的制備 取本品0.1g，精密稱定，加水25ml使溶解，移至分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌兩次，每次10ml，棄去水液，正丁醇至水浴上蒸干，殘渣加甲醇溶解，移至25ml量瓶中，并加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 精密量取對照品溶液、供試品溶液各1ml，置25ml鈉氏比色管，置水浴中蒸干，放冷，加新鮮配制的5％香草醛—冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.6ml，搖勻，放置5分鐘，置沸水浴中顯色15分鐘，取出，立即置冰浴中冷卻至室溫，加入8ml冰醋酸，搖勻，照紫外—可見分光光度法(《中國藥典》2005年版一部附錄VA)，在538nm波長處測定吸光度，計算，即得。
黃芪甲苷的含量測定照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VID)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以乙睛—水(32∶68)為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器。理論板數(shù)以黃芪甲苷峰計算不低于4000。
對照品溶液得制備 精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 精密稱取本品0.04g，精密稱定，置索氏提取器中，甲甲醇40ml，冷侵過夜，再加甲醇適量，加熱回流4小時，提取液回收溶劑并濃縮至干，殘渣加水10ml，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘渣加水5ml使溶解，方冷，通過D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑1.5cm，長12cm)，以水50ml洗脫，棄去水液，再用40％乙醇30ml洗脫，棄去洗脫液，繼用70％乙醇80ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液10μl、20μl與供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點對數(shù)方程計算，即得。
三批黃芪提取物中總皂苷、黃芪甲苷的含量和得率見表6。
表6黃芪提取物的含量測定結(jié)果和得率
綜上所述，本發(fā)明所提供的黃芪提取物，總皂苷含量不低于50％，黃芪甲苷含量不低于2％。
以下實驗例為對三七總皂苷和黃芪提取物合并用藥的藥效學(xué)研究。
實驗例4 對大鼠實驗性心肌梗塞范圍的影響供試品三七總皂苷注射液，自制，規(guī)格2ml:50mg；黃芪注射液，自制，規(guī)格2ml:50mg；三七總皂苷，市購，含量57.6％；黃芪提取物，自制，其中總黃酮含量58.37％，黃芪甲苷含量2.56％；組合物注射液均為按照下表中的配比自制。
分組及給藥Wister雄性大鼠110只，體重247.8±30.8g，按體重隨機分為11組生理鹽水對照組；三七總皂苷組、黃芪注射液組、組合物注射液組。尾靜脈給藥。
(1)大鼠實驗性心肌梗死模型動物戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(45mg/kg)，仰位固定。氣管插管，在肋骨左側(cè)作2cm的縱切口，近胸骨側(cè)剪斷第3、第4肋軟骨，打開胸腔后，連接人工呼吸機(通氣量2ml/100g，50次/min)。剪開心包膜，暴露心臟，冠狀動脈左前降支根部穿線以備結(jié)扎，記錄標準II導(dǎo)聯(lián)心電圖，穩(wěn)定10分鐘，結(jié)扎冠狀動脈左前降支，關(guān)閉胸腔。用針筒吸出動物喉部分泌物，使動物恢復(fù)自主呼吸。結(jié)扎冠狀動脈15min后，靜脈給藥。結(jié)扎冠狀動脈4小時后，摘取心臟，在結(jié)扎線以下橫切5片，進行氯化硝基四氮唑藍(N-BT)染色，計算心肌梗死區(qū)面積占心室及心臟面積的百分比，并進行統(tǒng)計學(xué)處理(t檢驗)。實驗結(jié)果見表1。
表1不同配比的組合物對大鼠實驗性心肌梗塞范圍的影響
注與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果由表1中的數(shù)據(jù)可以看出，三七總皂苷與黃芪提取物從1∶0.01到1∶4各配比組，均能顯著縮小大鼠實驗性心肌梗死的面積，且組合物注射液組的療效優(yōu)于單用三七總皂苷注射液組和單用黃芪注射液組，提示兩者有協(xié)同作用。其中以三七總皂苷與黃芪提取物1∶0.1～1∶2的組療效更好。
實驗例5 對大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的影響供試品三七總皂苷注射液，自制，規(guī)格2ml∶50mg；黃芪注射液，自制，規(guī)格2ml∶50mg；三七總皂苷，市購，含量57.6％；黃芪提取物，自制，其中總黃酮含量58.37％，黃芪甲苷含量2.56％；組合物注射液均為按照下表中的配比自制。
分組及給藥Wister雄性大鼠110只，體重250.4±30.5g，按體重隨機分為11組生理鹽水對照組；三七總皂苷組、黃芪注射液組、組合物注射液組。尾靜脈給藥。
空白對照組給予等容積生理鹽水，給藥20分鐘后開始試驗。動物用2.5％戊巴比妥鈉(25mg/kg)腹腔注射麻醉，將大鼠仰臥位固定，分離右側(cè)頸總動脈，采用電流損傷頸動脈內(nèi)膜法，用BT87-3實驗性體內(nèi)血栓形成儀測定不同組別動物頸動脈血栓形成時間。將電極置放在頸動脈上對其進行電刺激(2mA，7min)，以感應(yīng)電極連續(xù)測量動脈遠端表面溫度，觀察動脈溫度突降時間。記錄電刺激開始至主動脈溫度突降的時間，該時間定為頸動脈血栓形成時間(超過3000秒者以3000秒計)。實驗結(jié)果見表2。
表2不同配比的組合物對大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的影響
注與空白對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果由表2中的數(shù)據(jù)可以看出，三七總皂苷與黃芪提取物從1∶0.01到1∶4各配比組，均可使大鼠頸動脈內(nèi)血栓形成的時間延長，且組合物注射液組的療效優(yōu)于單用三七總皂苷注射液組和單用黃芪注射液組，提示兩者有協(xié)同作用。其中以三七總皂苷與黃芪提取物1∶0.1～1∶2組大鼠動脈內(nèi)血栓形成時間比其它配比的組合物組延長更為明顯。
實驗例6 對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響供試品三七總皂苷注射液，自制，規(guī)格2ml∶50mg；黃芪注射液，自制，規(guī)格2ml∶50mg；三七總皂苷，市購，含量57.6％；黃芪提取物，自制，其中總黃酮含量58.37％，黃芪甲苷含量2.56％；組合物注射液按照1∶0.1、1∶0.4、1∶2的配比自制。
分組及給藥小鼠60只，體重22±5g，按體重隨機分為6組生理鹽水對照組；環(huán)磷酰胺(CP)25mg/kg組、三七總皂苷25mg/kg+CP25mg/kg組、黃芪提取物25mg/kg+CP25mg/kg組、組合物25mg/kg+CP25mg/kg組。每組10只小鼠，體重灌胃量1μl/g。每日上午10:00～10:30給三七總皂苷、黃芪提取物及組合物，下午4:00～4:30給CP，連續(xù)給藥21d。
小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能測定于給藥后第22天給予小鼠腹腔注射0.2ml 5％CRBC懸液，16～18h后處死動物，腹腔注入Hank’s工作液2ml，輕揉腹部，吸出腹腔液，滴在玻片上，37℃恒溫保濕30min，Giemsa-wright-PB染色10min，油鏡下計數(shù)100個巨噬細胞中吞噬CRBC總數(shù)和100個巨噬細胞中吞有CRBC的巨噬細胞數(shù)目。結(jié)果見表3。
表3組合物對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響
注與生理鹽水組比較，*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果表3中的數(shù)據(jù)顯示，與生理鹽水組比較，三七總皂苷、黃芪提取物、組合物組(1∶0.1～1∶2范圍)均能使環(huán)磷酰胺所致的免疫功能低下小鼠的腹腔巨噬細胞吞噬功能增強，且組合物注射液組合物增強免疫的效果比單用三七總皂苷注射液組和單用黃芪注射液組的效果好。
具體實施方式
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進一步的詳細說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實施例中各劑型的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料替換，或者減少、增加。
實施例1水針的制備處方1三七總皂苷 25g黃芪提取物 0.25g丙二醇 300ml注射用水 加至1000ml共制備 200支處方2三七總皂苷 25g黃芪提取物 1.25g丙二醇 300ml注射用水 加至1000ml共制備 200支處方3三七總皂苷25g黃芪提取物2.5g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方4三七總皂苷25g黃芪提取物4g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方5三七總皂苷25g黃芪提取物5g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方6三七總皂苷25g黃芪提取物8g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方7三七總皂苷25g黃芪提取物10g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方8三七總皂苷25g黃芪提取物15g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方9三七總皂苷25g黃芪提取物16g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方10三七總皂苷25g黃芪提取物20g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方11三七總皂苷25g黃芪提取物25g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支處方12三七總皂苷25g黃芪提取物50g丙二醇300ml注射用水 加至1000ml共制備200支制備工藝
1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量20％的注射用水，加入處方量的黃芪提取物，加熱攪拌溶解完全。將三七總皂苷加丙二醇加熱攪拌溶解完全。
3)合并上述兩溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的PH值。
6)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)將溶液熔封于玻璃安瓿中。
9)100℃流通蒸汽滅菌30分鐘。
10)趁熱將樣品放入0.01％的亞甲藍溶液中檢漏。
11)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例2粉針的制備處方1三七總皂苷25g黃芪提取物0.25g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方2三七總皂苷25g黃芪提取物0.5g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方3三七總皂苷25g黃芪提取物1g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方4三七總皂苷25g黃芪提取物4g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方5三七總皂苷25g黃芪提取物5g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方6三七總皂苷25g黃芪提取物8g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方7三七總皂苷25g黃芪提取物10g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方9三七總皂苷25g黃芪提取物15g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方10三七總皂苷25g黃芪提取物16g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方11三七總皂苷25g黃芪提取物20g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方12三七總皂苷25g黃芪提取物25g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支處方7三七總皂苷25g黃芪提取物50g聚山梨酯80100g甘露醇300g無菌注射用水 加至1000ml共制備200支制備工藝1)首先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進行無菌處理。
2)按照處方量稱取原輔料。
3)將聚山梨酯80制成20％的水溶液，將三七總皂苷加入加熱攪拌溶解完全，將黃芪提取物用配液量20％的無菌注射用水溶解完全。合并上市溶液，再加入甘露醇加熱攪拌溶解完全，補加無菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的PH值。
6)經(jīng)0.22um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞。將樣品放入凍干機中冷凍干燥。預(yù)凍-45℃5小時，低溫真空干燥-45℃～0℃20小時，然后升溫至25℃真空干燥3小時。
9)凍干結(jié)束，壓塞，軋蓋。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例3氯化鈉輸液的制備處方1三七總皂苷25g黃芪提取物4g聚山梨酯80100g氯化鈉900g注射用水 加至10000ml共制備100瓶處方2三七總皂苷25g黃芪提取物5g聚山梨酯80100g氯化鈉900g注射用水 加至10000ml共制備100瓶處方3三七總皂苷25g黃芪提取物8g聚山梨酯80100g氯化鈉900g注射用水 加至10000ml共制備100瓶處方4三七總皂苷25g黃芪提取物10g聚山梨酯80100g氯化鈉900g注射用水 加至10000ml共制備100瓶處方5三七總皂苷25g黃芪提取物20g聚山梨酯80100g氯化鈉900g注射用水 加至10000ml共制備100瓶制備工藝1)前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將聚山梨酯80配制成20％的水溶液，將三七總皂苷加入加熱攪拌溶解完全，將黃芪提取物加入配液量20％的注射用水溶解完全。將氯化鈉用配液量40％的注射用水溶解完全。
3)合并上述溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的PH值。
6)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例4葡萄糖輸液的制備處方1三七總皂苷25g黃芪提取物4g聚山梨酯80100g葡萄糖5000g注射用水 加至10000ml共制備100瓶處方2三七總皂苷25g黃芪提取物5g聚山梨酯80100g葡萄糖5000g注射用水 加至10000ml共制備100瓶處方3三七總皂苷25g黃芪提取物8g聚山梨酯80100g葡萄糖5000g注射用水 加至10000ml共制備100瓶處方4三七總皂苷25g黃芪提取物10g聚山梨酯80100g葡萄糖5000g注射用水 加至10000ml共制備100瓶處方5三七總皂苷25g黃芪提取物20g聚山梨酯80100g葡萄糖5000g注射用水 加至10000ml共制備100瓶制備工藝1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)將聚山梨酯80配制成20％的水溶液，將三七總皂苷加入加熱攪拌溶解完全，將黃芪提取物加入配液量20％的注射用水溶解完全。將葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全。
3)合并兩溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭。測定并調(diào)節(jié)溶液的PH值。
6)經(jīng)0.45um的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例5片的制備處方1三七總皂苷250g黃芪提取物50g淀粉 60.0g微晶纖維素40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 2.0g羧甲淀粉鈉4.0g共制備1000片處方2三七總皂苷250g黃芪提取物100g淀粉 60.0g微晶纖維素40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 2.0g羧甲淀粉鈉4.0g共制備1000片處方3三七總皂苷250g黃芪提取物200g淀粉 60.0g微晶纖維素40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 2.0g羧甲淀粉鈉4.0g共制備1000片制備工藝1)將三七總皂苷和黃芪提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將三七總皂苷、黃芪提取物、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的片重壓片。
10)品全檢，包裝入庫。
實施例6膠囊的制備處方1三七總皂苷250g黃芪提取物50g淀粉 60.0g微晶纖維素20.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 1.0g共制備1000粒處方2三七總皂苷250g黃芪提取物100g淀粉 60.0g微晶纖維素20.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 1.0g共制備1000粒制備工藝1)將三七總皂苷和黃芪提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將三七總皂苷、黃芪提取物、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的裝量裝入膠囊。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例7顆粒的制備處方1三七總皂苷250g黃芪提取物50g糖粉 700.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備1000包處方2三七總皂苷250g黃芪提取物50g糖粉 600.0g2％HPMC50％乙醇溶液 適量共制備1000包制備工藝1)將蔗糖粉碎過100目篩備用。將三七總皂苷和黃芪提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原輔料。
3)將三七總皂苷、黃芪提取物與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加2％HPMC50％乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材，4)過20目篩制顆粒。
5)顆粒在60℃的條件下烘干。
6)干顆粒過18目篩整粒。
7)取樣，半成品化驗顆粒中主藥的含量，確定裝量。
8)包裝，成品全檢，包裝入庫。
實施例8軟膠囊的制備處方1三七總皂苷250g黃芪提取物50g大豆油200.0g大豆磷脂 30g蜂蠟 20g共制備1000粒處方2三七總皂苷250g黃芪提取物100g大豆油200.0g大豆磷脂 30g蜂蠟 20g共制備1000粒制備工藝將處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷，加入三七總皂苷和黃芪提取物研勻，壓制成軟膠囊即可。
實施例9滴丸的制備處方1三七總皂苷250g黃芪提取物50g聚乙二醇6000 600g制備工藝將聚乙二醇6000在水浴中加熱熔融，待全部熔融后加入三七總皂苷和黃芪提取物，攪拌溶解，60目篩過濾，保持60℃滴入冷至10℃以下的液體石蠟中制成丸。
實施例10口服液的制備處方
制備工藝1)取配液量20％的注射用水，加入處方量的黃芪提取物，加熱攪拌溶解完全。將三七總皂苷加丙二醇加熱攪拌溶解完全。
2)將苯甲酸鈉和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全。
3)合并上述溶液，補加水至全量。
4)過0.8um的微孔濾膜過濾。
5)半成品化驗。
6)灌裝。成品全檢，包裝入庫。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于它主要由三七總皂苷和黃芪提取物組成。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的三七總皂苷與黃芪提取物的重量配比為1∶0.005～8。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述的三七總皂苷與黃芪提取物的重量配比為1∶0.01～4。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于所述的三七總皂苷與黃芪提取物的重量配比為1∶0.1～2。
5.如權(quán)利要求1～4所述的任一藥物組合物，其特征在于該組合物在制備治療心腦血管疾病中的應(yīng)用。
6.如權(quán)利要求1～4所述的任一藥物組合物，其特征在于該組合物可制成任何一種臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型。
7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于該組合物臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型為注射劑。
8.如權(quán)利要求1～4所述的任一藥物組合物，其特征在于所述的黃芪提取物中黃芪總皂苷含量不低于50％，黃芪甲苷含量不低于2％。
9.如權(quán)利要求1～4所述的任一藥物組合物，其特征在于所述的三七總皂苷中三七皂苷R1的含量不低于2.0％、人參皂苷Rg1的含量不低于28.0％、人參皂苷Rb1的含量不低于25.0％。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種藥物組合物及其制備方法和用途，其主要由三七總皂苷和黃芪提取物組成，其重量配比范圍為1∶0.005～8；兩者可以單獨或與藥用輔料組合，制成臨床上臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型，如注射劑、口服常釋劑型、緩釋控釋劑型、顆粒劑、丸劑、口服液體劑等；兩者合用，可協(xié)同發(fā)揮擴張冠狀動脈，改善心臟功能，增加抗氧能力，防止脂質(zhì)過氧化的功能，可用于腦梗阻，冠心病，心絞痛屬氣滯血瘀型者。
文檔編號A61P9/10GK1919230SQ20051004441
公開日2007年2月28日 申請日期2005年8月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月23日
發(fā)明者蔡軍 申請人:蔡軍