專利名稱：一種抗腫瘤的丹皮酚注射乳劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療腫瘤的丹皮酚注射乳劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
丹皮酚是牡丹皮的主要活性成分之一，具有廣泛的藥理活性，包括解熱、鎮(zhèn)痛、抗菌消炎、抗動脈粥樣硬化，抑制血小板聚集及增強細(xì)胞免疫功能和抗氧化作用等。近年來關(guān)于丹皮酚的體內(nèi)外抗腫瘤作用逐漸引起業(yè)內(nèi)人士的關(guān)注。
丹皮酚是脂溶性藥物，具異嗅，味微辣，溶于乙醇、甲醇，于冷水中不溶，熱水中微溶，易升華，現(xiàn)有軟膏、糖衣片等劑型?？诜瑒┤艹鏊俾事?，生物利用度低；而注射劑穩(wěn)定性差且用藥劑量大(大約17mg/Kg)，抗癌治療注射給藥可采取包合、增溶及脂質(zhì)體包載等劑型，這些劑型制備復(fù)雜、不穩(wěn)定，藥物含量低，難以滿足要求。
靈芝多糖也用于抗腫瘤的治療，但其為水溶性藥物，不能與丹皮酚進(jìn)行有機的結(jié)合。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明為了克服以上技術(shù)的不足，提供了一種治療腫瘤效果好、起效快、藥物含量高、適合于注射的乳劑，以及上述藥物的制備方法。
本發(fā)明是通過以下措施來實現(xiàn)的本發(fā)明的抗腫瘤的丹皮酚注射乳劑，由脂溶性丹皮酚和水溶性靈芝多糖作為有效成分制成的注射用乳劑。
本發(fā)明的丹皮酚注射乳劑，是由以下重量組分的原料制成丹皮酚 10～70mg，靈芝多糖20～100mg，油相30～150mg.
水相2～5ml，乳化劑 適量，助乳化劑適量。
本發(fā)明的丹皮酚注射乳劑，所述的油相為亞油酸乙酯、植物油、油酸及其酯、肉豆寇酸及其酯的至少一種；所述的乳化劑為聚氧乙烯蓖麻油、Poloxmer 188、磷脂、泊洛沙姆、吐溫20、40、60、80、聚乙二醇的至少一種；所述的助乳化劑為1，2丙二醇、甘油、低分子量PEG的至少一種；所述水相含有磷酸緩沖液、葡萄糖緩沖液的至少一種。
本發(fā)明的丹皮酚注射乳劑的制備方法，包括以下步驟
(1)丹皮酚研碎置適宜容器中與油相充分混合溶解成透明溶液；將乳化劑及助乳化劑用適量油相溶解后轉(zhuǎn)移到上述溶液中，充分混合均勻制得含藥油相；(2)靈芝多糖置適宜容器中與水相混合溶解制成含藥水相；(3)低速攪拌下向含藥油相中緩慢加入含藥水相，然后，進(jìn)行超聲處理制得均勻乳液；乳液再經(jīng)微孔濾膜整粒除菌后罐裝制得注射乳劑。
本發(fā)明中丹皮酚化學(xué)名為2-羥基-4-甲氧基-苯乙酮，分子式C9H10O3，分子量166.18。
本發(fā)明采用注射乳劑，選擇合適種類和比例的乳化劑(如磷脂、泊洛沙姆、吐溫類、山梨醇酯類等)、助乳化劑(如丙二醇、甘油、低分子量PEG)和油相(如油酸、亞油酸及酯、月桂醇等)制成注射用乳劑，即解決了丹皮酚溶解度差、藥物含量低、物理性質(zhì)不穩(wěn)定、有異味和刺激性的問題，同時，又解決了丹皮酚與靈芝多糖不能混合的難題。
制備本發(fā)明的乳劑，其特征是注射劑與微乳劑技術(shù)的綜合，選擇的油相、乳化劑及助乳化劑均是注射用人體可接受的輔料。此乳劑藥物含量高(含量可達(dá)15mg/ml)，穩(wěn)定性好(常溫下注射乳劑可保存三個月以上而不發(fā)生分層、絮凝等現(xiàn)象)，乳粒大小在200nm以下，分散均勻，經(jīng)注射途徑給藥藥物吸收快，生物利用度高。通過建立此分散系，丹皮酚的溶解度在無乙醇的條件下大大提高，克服了其在水中分散的困難，從而可在低劑量注射的條件下獲得較高的藥效，降低了用藥的刺激性，提高了患者的順應(yīng)性。制備簡便，易于擴(kuò)大生產(chǎn)。
本發(fā)明將丹皮酚與靈芝多糖利用乳化劑，制成的丹皮酚注射乳劑，用于治療腫瘤，發(fā)現(xiàn)具有意想不到的治療效果，具有起效快，藥物含量高，抑瘤效果好，毒副作用小。其制備方法具有生產(chǎn)條件及設(shè)備簡單、成本低廉，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。
(四)具體實施例1.實施例1藥物1 丹皮酚70mg；藥物2 靈芝多糖 30mg；水相 生理鹽水 5ml油相 亞油酸乙酯150mg乳化劑1聚氧乙烯蓖麻油適量乳化劑2Poloxmer 188 適量助乳化劑 1，2丙二醇適量。
2.實施例2藥物1 丹皮酚30mg；藥物2 靈芝多糖 60mg；水相 5％葡萄糖輸液 3ml油相 精制植物油50mg乳化劑1聚氧乙烯蓖麻油適量乳化劑2吐溫80適量助乳化劑1，2丙二醇適量。
3.實施例3藥物1 丹皮酚10mg；藥物2 靈芝多糖 80mg；水相pH＝7.4等滲磷酸緩沖液 5ml油相注射用油 100mg乳化劑1 卵磷脂適量乳化劑2 Poloxmer 188 適量助乳化劑PEG400適量。
上述藥物乳劑的制備方法為將丹皮酚研碎置適宜容器中與油相充分混合溶解成透明溶液；將乳化劑1、乳化劑2及助乳化劑用適量油相溶解后轉(zhuǎn)移到上述溶液中，充分混合均勻制得含藥油相；將靈芝多糖置適宜容器中與水相混合溶解制成含藥水相；在低速攪拌下向含藥油相中緩慢加入含藥水相，然后，進(jìn)行超聲處理制得均勻乳液；乳液再經(jīng)微孔濾膜整粒除菌后罐裝制得注射乳劑。
上述藥物乳劑的用法與用量靜脈注射，一日一次，每次3-5ml。
取實施例1的注射藥劑，進(jìn)行以下藥理毒理實驗1.急性毒性研究丹皮酚給小鼠口服用藥的LD50為3430mg/kg。本發(fā)明受劑型所限最大濃度為丹皮酚15mg/ml，小鼠一次腹腔給藥1ml/20g，即丹皮酚750mg/kg·d，觀察各實驗小鼠的一般狀態(tài)良好，外觀、毛色、大便、活動等均正常，未見明顯毒副作用。表明本發(fā)明丹皮酚小鼠腹腔注射的最大給藥量在750mg/kg·d以上。安全低毒。
2.藥效學(xué)研究2.1本發(fā)明的微乳對小鼠S180肉瘤的體內(nèi)抑瘤作用在無菌條件下抽取生長7d的S180腹水型肉瘤小鼠腹水，用生理鹽水調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為1×106/L，接種于健康昆明種小鼠右腋皮下，每只0.2ml，隨機分成模型對照組，陽性藥康萊特2.5g/kg組和本發(fā)明乳劑20mg/kg、45mg/kg、94mg/kg三劑量組。每組12只小鼠，接種24h后腹腔給藥，每日1次，連用10d。停藥次日處死小鼠，稱體重和瘤重。按下列公式計算抑瘤率。抑瘤率(％)＝{1-實驗組平均瘤重/對照組平均瘤種}×100％。試驗重復(fù)三次，結(jié)果見表1表1對S180肉瘤的抑瘤作用(三次重復(fù)，n＝36)組別 劑量 藥前體重(g) 藥后體重(g) 平均瘤重(g) 抑瘤率(％)模型對照 NS 21.4±1.4 28.9±2.14 1.42±0.89康萊特2.5g/kg 21.6±0.6925.6±1.51 1.10±0.7722.4本發(fā)明乳 94mg/kg 21.6±2.2722.4±2.37 0.62±0.4356.3劑本發(fā)明乳 45mg/kg 21.3±1.4925.4±2.24 0.92±0.5735.1劑本發(fā)明乳 20mg/kg 21.4±1.5827.1±2.91.18±0.6416.7劑表1看出本發(fā)明乳劑20～100mg/kg·d，連續(xù)10d腹腔注射 對小鼠右腋皮下接種的S180肉瘤的生長即有明顯抑制作用，其抑瘤率16～56％之間，隨著劑量的增加抗腫瘤作用增強。表明本發(fā)明乳劑腹腔注射有明顯的抑瘤作用，該作用有明顯的量效關(guān)系。
2.2本發(fā)明的微乳對小鼠艾氏腹水癌(EAC實體型)的體內(nèi)抑瘤作用在無菌條件下抽取生長7d的艾氏腹水癌小鼠腹水，用生理鹽水調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為1×106/L，接種于小鼠右腋皮下，每只0.2ml，隨機分成模型對照組，陽性藥康萊特2.5g/kg組和本發(fā)明乳劑20mg/kg、45mg/kg、94mg/kg三劑量組。每組12只小鼠，接種24h后灌胃給藥，每日1次，連用10d。停藥次日處死小鼠，稱體重和瘤重。按下列公式計算抑瘤率。
抑瘤率(％)＝{1-實驗組平均瘤重/對照組平均瘤種}×100％表2對EAC實體型的抑瘤作用(三次重復(fù)，n＝36)組別劑量 藥前體重 藥后體重 平均瘤重 抑瘤率模型對照NS 21.3±0.9726.3±2.69 0.99±0.25康萊特 2.5g/kg 22.1±0.9824.1±1.93 0.75±0.35 24.8本發(fā)明乳劑 94mg/kg 21.4±0.9725.7±2.46 0.80±0.29 46.0本發(fā)明乳劑 45mg/kg 22.2±1.3726.1±1.12 0.73±0.27 26.6本發(fā)明乳劑 20mg/kg 21.9±0.8422.7±1.60.54±0.20 19.1表2看出本發(fā)明乳劑20～94mg/kg·d，連續(xù)10d腹腔注射 對小鼠右腋皮下接種的EAC實體型的生長即有明顯抑制作用，其抑瘤率19～46％之間，隨著劑量的增加抗腫瘤作用增強。表明本發(fā)明乳劑腹腔注射對EAC實體型有明顯的抑瘤作用，且該作用有明顯的量效關(guān)系。
2.3本發(fā)明的微乳對小鼠H22肝癌的體內(nèi)抑瘤作用在無菌條件下抽取生長7d的腹水型H22肝癌小鼠腹水，用生理鹽水1∶3稀釋，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為1×109/L，接種于小鼠右腋皮下，每只0.2ml，隨機分成模型對照組，陽性藥康萊特2.5g/kg組和本發(fā)明乳劑20mg/kg、45mg/kg、94mg/kg三劑量組。每組12只小鼠，接種24h后灌胃給藥，每日1次，連用10d。停藥次日處死小鼠，稱體重和瘤重。計算抑瘤率方法同前。
表3對H22肝癌的抑瘤作用(三次重復(fù)，n＝36)組別劑量 藥前體重 藥后體重 平均瘤重抑瘤率模型對照NS21.3±0.92 26.3±2.65 1.31±0.35康萊特 2.5g/kg 22.2±0.97 24.1±1.90.87±0.38 33.15本發(fā)明乳劑 94mg/kg 21.9±0.83 22.9±1.77 0.60±0.19 54.14本發(fā)明乳劑 45mg/kg 22.2±1.40 26.1±1.10.85±0.33 34.14本發(fā)明乳劑 20mg/kg 21.5±0.97 25.2±2.45 0.97±0.38 25.64表3看出本發(fā)明乳劑20～94mg/kg·d，連續(xù)10d腹腔注射對小鼠有葉皮下接種的H22肝癌的生長即有明顯抑制作用，其抑瘤率25～54％之間，隨著劑量的增加抗腫瘤作用增強。表明本發(fā)明乳劑腹腔注射對H22肝癌有明顯的抑瘤作用，且該作用有明顯的量效關(guān)系。
權(quán)利要求
1.一種抗腫瘤的丹皮酚注射乳劑，其特征在于由脂溶性丹皮酚和水溶性靈芝多糖作為有效成分制成的注射用乳劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的丹皮酚注射乳劑，其特征在于是由以下重量組分的原料制成丹皮酚10～70mg，靈芝多糖 20～100mg，油相 30～150mg，水相 2～5ml，乳化劑適量，助乳化劑 適量。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的丹皮酚注射乳劑，其特征在于所述的油相為亞油酸乙酯、植物油、油酸及其酯、肉豆寇酸及其酯的至少一種；所述的乳化劑為聚氧乙烯蓖麻油、Poloxmer 188、磷脂、泊洛沙姆、吐溫20、40、60、80、聚乙二醇的至少一種；所述的助乳化劑為1，2丙二醇、甘油、低分子量PEG的至少一種；所述水相含有磷酸緩沖液、葡萄糖緩沖液的至少一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹皮酚注射乳劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)丹皮酚研碎置適宜容器中與油相充分混合溶解成透明溶液；將乳化劑及助乳化劑用適量油相溶解后轉(zhuǎn)移到上述溶液中，充分混合均勻制得含藥油相；(2)靈芝多糖置適宜容器中與水相混合溶解制成含藥水相；(3)低速攪拌下向含藥油相中緩慢加入含藥水相，然后，進(jìn)行超聲處理制得均勻乳液；乳液再經(jīng)微孔濾膜整粒除菌后罐裝制得注射乳劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療腫瘤的丹皮酚注射乳劑及其制備方法。本發(fā)明的治療腫瘤的丹皮酚注射乳劑，由脂溶性丹皮酚和水溶性靈芝多糖作為有效成分制成的注射用乳劑。本發(fā)明將丹皮酚與靈芝多糖利用乳化劑，制成的丹皮酚注射乳劑，用于治療腫瘤，發(fā)現(xiàn)具有意想不到的治療效果，具有起效快，藥物含量高，抑瘤效果好，毒副作用小。其制備方法具有生產(chǎn)條件及設(shè)備簡單、成本低廉，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。
文檔編號A61P35/00GK1682753SQ20051004253
公開日2005年10月19日 申請日期2005年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月4日
發(fā)明者武繼彪, 張貞麗, 胡新, 隋在云, 侯新樸 申請人:山東省中醫(yī)藥研究院