專利名稱：用生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑制備納米雄黃膠體及納米雄黃的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥納米雄黃的制備方法，特別是用生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑制備納米雄黃膠體及納米雄黃的方法。
背景技術(shù)：
雄黃作為一種礦物中藥，在我國第一部藥物專著《神農(nóng)本草經(jīng)》中已有記載。長期以來用于治疥癬、惡瘡及蛇蟲咬傷等癥。自二十世紀(jì)五十年代，我國學(xué)者率先將含雄黃的復(fù)方制劑或原藥雄黃，用于臨床治療血液系統(tǒng)及人體其他部位的腫癌，具有較高的安全緩解率。然而，雄黃作為一種含砷的化合物，對機(jī)體的作用表現(xiàn)為雙相性，在殺死癌細(xì)胞和細(xì)菌的同時(shí)，也表現(xiàn)出毒性，可抑制含硫基酶的活性，阻止細(xì)胞氧化、呼吸、干擾組織代謝，使中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂等，嚴(yán)重的還可致癌致畸。研究表明，雄黃的毒副作用與其使用劑量，存在狀態(tài)及與其他物質(zhì)的拮抗或協(xié)同作用有關(guān)，有學(xué)者用高純化的雄黃治療惡性血液病取得滿意療效，還有學(xué)者用納米雄黃代替?zhèn)鹘y(tǒng)的雄黃，發(fā)現(xiàn)具有明顯的尺寸效應(yīng)，納米雄黃可增強(qiáng)藥效，降低毒性。目前，納米雄黃的制作方法通常采用的是物理方法，即用氣流、球磨等外力，使物料顆粒之間發(fā)生碰撞、沖擊和摩擦而粉碎，使粒徑達(dá)到微米/納米級水平，已有的物理法有(1)氣流粉碎法雄黃粗粉在高速氣流作用下通過氣流粉碎機(jī)，控制氣壓和流速調(diào)節(jié)粒度；(2)細(xì)珠研磨法雄黃粗粉用直徑1mm的氧化鋯細(xì)珠研磨約2小時(shí)，轉(zhuǎn)速為500r/min；(3)微射流法水飛雄黃過500目篩，適當(dāng)加熱蒸餾水，攪拌而制得；(4)高能球磨法將雄黃粗粉置于配有深冷外套的真空或惰性氣氛的球磨罐中，裝入一定比例的磨球，控制高能球磨機(jī)的轉(zhuǎn)速和時(shí)間。
采用物理法制備納米雄黃具有生產(chǎn)過程連續(xù)、生產(chǎn)能力大，自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)。具體是(1)純度低物理法加工納米雄黃受原料雄黃礦品位的制約，不可避免會帶入雌黃(As2S3)、砒霜(As2O3)、金屬離子等雜質(zhì)，對雜質(zhì)含量高的低品位雄黃不能直接加工。
(2)粒徑無法調(diào)控物理法加工納米雄黃的粒徑很難得到尺度分散均一的粒子，對于小粒徑(＜1μm)的納米雄黃更難均勻加工得到。
(3)穩(wěn)定性差由于納米雄黃比表面積大，不僅容易氧化，而且容易團(tuán)聚。
(4)水溶性差物理法加工的納米雄黃水溶性差，降低了其生物利用度，往往只能采取口服、外用的給藥方式。
(5)藥效單一物理法加工的納米雄黃活性成分單一，故藥效單一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是要公開一種用生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑制備納米雄黃膠體的方法。用該法制備的納米雄黃純度高，粒徑均一，尺寸可調(diào)，形貌可變，水溶性好，可解決現(xiàn)有納米雄黃難溶于水、易氧化、易團(tuán)聚、毒性較大的問題。
本發(fā)明的具體工藝步驟是1、將雄黃礦物原料粉碎，制得雄黃粗粉；2、將雄黃粗粉，用0.1～3M的鹽酸浸泡1～12小時(shí)，并不斷攪拌，之后用蒸餾水沖洗、過濾，棄濾液，得到除去了砒霜(As2O3)的雄黃粉末；3、用0.5～6M的鹽酸浸泡上述雄黃粉末1～24小時(shí)，再用蒸餾水沖洗至中性，再過濾，棄濾液，得除去了Ca、Mg、Fe、Sb等雜質(zhì)元素的雄黃粉末；在第2、3工藝步驟的過程中，涉及的化學(xué)反應(yīng)有
4、將上述預(yù)處理后的雄黃粉末，在惰性氣體N2或CO2的保護(hù)下，用0.001～6M的Na2S的溶液浸泡，保持pH值為10～13，攪拌，過濾，棄渣，保留濾液；5、將上述所得濾液，恒溫30～85℃，在惰性氣體N2或CO2的保護(hù)下，加入0.1～6M的鹽酸，調(diào)節(jié)pH至3～7，在劇烈攪拌下，加入重量份數(shù)為納米雄黃重量份數(shù)1～100倍的活性生物大分子溶液作模板，攪拌，并根據(jù)粒徑要求陳化1小時(shí)至60天，即制得以該生物大分子為模板調(diào)控形貌與粒徑的納米雄黃膠體，密封、避光、室溫下貯存；6、將納米雄黃膠體進(jìn)一步真空干燥，得到以生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑的納米雄黃。
所述的活性生物大分子溶液模板為三類第一類蛋白質(zhì)，包括血清白蛋白，(α-、β-、γ-)干擾素，血紅蛋白，免疫球蛋白等；第二類，生物多糖，包括淀粉，殼聚糖，羧甲基纖維素鈉等；第三類，高分子化合物包括聚乙烯吡咯烷酮等，所制得的以活性生物大分子為模板的納米雄黃膠體中，納米雄黃為主活性成份，生物大分子模板為次活性成份，蒸餾水為溶劑，各組份的重量份為主活性成份1重量份的納米雄黃次活性成份1～100重量份的生物大分子模板溶劑 1000～100000重量份的蒸餾水控制納米雄黃形貌與粒徑是通過改變所用生物大分子模板的種類來實(shí)現(xiàn)。
控制納米雄黃的粒徑大小，是通過改變生物大分子的種類、用量及陳化條件來實(shí)現(xiàn)。
本發(fā)明制得的納米雄黃具有如下優(yōu)點(diǎn)(1)純度高本發(fā)明以天然雄黃礦物為原料，采用化學(xué)法去除砒霜、金屬離子等雜質(zhì)，得到的納米雄黃純度高。
(2)粒徑與形貌可以調(diào)控本發(fā)明以生物大分子為模板，通過改變模板的種類、用量及陳化條件調(diào)控納米雄黃的形貌與粒徑可簡單地制備粒徑分布均一的納米雄黃，并易制備超細(xì)粒徑(1～10nm)的納米雄黃。
(3)穩(wěn)定性強(qiáng)本發(fā)明制備的納米雄黃分散在生物大分子模板中，不易團(tuán)聚，不易氧化，避光可穩(wěn)定貯存。
(4)水溶性好本發(fā)明制備的水溶性的納米雄黃溶膠，解決雄黃不(難)溶于水的難題，可提高雄黃生物利用度，并可方便制成針劑、口服液、外用藥，擴(kuò)展雄黃的給藥途徑。
(5)藥效強(qiáng)本發(fā)明采用的一些生物大分子本身具有正面生理活性，能調(diào)節(jié)人體免疫機(jī)能，與納米雄黃作用后具有正向協(xié)同效應(yīng)，增強(qiáng)了納米雄黃的藥效，降低其毒副作用。
經(jīng)體外抗癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及抗菌實(shí)驗(yàn)證明，以生物大分子為模板制備的納米雄黃具有細(xì)胞毒性顯著，抗菌效果明顯的特征。以KB(人體鼻咽癌)細(xì)胞為例，50％抑制率時(shí)，納米雄黃濃度低于1.8μg/mL，而雄黃濃度超過9.0μg/mL，藥效提高5倍。對金葡萄MIC最低抑菌濃度，納米雄黃為62.5μg/mL，雄黃為5mg/mL，藥效提高80倍。


圖1為本發(fā)明工藝流程示意圖。
(五)具體實(shí)施例實(shí)施例1 以血清白蛋白為生物大分子模板制備納米雄黃膠體與納米雄黃按圖1工藝流程步驟，I～V制得的濾液，在N2保護(hù)下，加入濃度為0.1～1M的鹽酸，調(diào)節(jié)pH3～7，在劇烈的攪拌下，加入濃度為10-5mol·L-1的血清白蛋白(蛋白質(zhì)類)溶液，其重量份為納米雄黃重份的40～70倍，陳化1～6小時(shí)，制得以血清白蛋白為模板的納米雄黃膠體。其中，納米雄黃近似球形，粒徑為1～20nm，將上述納米雄黃膠體進(jìn)一步真空干燥，即得到以血清白蛋白為模板的納米雄黃。
實(shí)施例2 以羧甲基纖維素鈉為生物大分子模板制備的納米雄黃膠體及納米雄黃按實(shí)例1所述工藝步驟，加入濃度為0.1～0.5％羧甲基纖維素納(生物多糖類)，其重量份為納米雄黃重量份的30～50倍，陳化，制得以羧甲基纖維素納為模板的納米雄黃膠體。通過改變陳化時(shí)間可得到不同尺寸的納米雄黃，陳化1小時(shí)～10天，得到粒徑為10～100nm的樹枝狀納米雄黃；陳化11～60天，得到粒徑為100nm～5μm的樹枝狀納米雄黃，將上述納米雄黃膠體進(jìn)一步真空干燥，即得到以羧甲基纖維素鈉為模板的納米雄黃。
實(shí)施例3 以聚乙烯吡咯烷酮為生物大分子模板制備納米雄黃膠體及納米雄黃按實(shí)例1所述工藝步驟，加入濃度為0.1～0.6％的聚乙烯吡咯烷酮(高分子化合物)，其重份為納米雄黃重份的10～40倍，陳化1～12小時(shí)，得到以聚乙烯吡咯烷酮為模板的納米雄黃膠體。其中，納米雄黃近似為球形，粒徑為10～80nm，將上述納米雄黃膠體進(jìn)一步真空干燥，即得到以聚乙烯吡咯烷酮為模板的納米雄黃。
權(quán)利要求
1.一種用生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑制備納米雄黃膠體及納米雄黃的方法，包括粉碎，其特征是(1)將粉碎后的雄黃粗粉用0.1～3M的鹽酸浸泡1～12小時(shí)，攪拌，用蒸餾水沖洗，過濾，棄濾液，得到去除砒霜(As2O3)的雄黃粉末；(2)用0.5～6M的鹽酸浸泡上述雄黃粉末1～24小時(shí)，蒸餾水沖洗至中性，過濾，棄濾液，得去除雜質(zhì)元素的雄黃粉末；(3)將上述預(yù)處理后的雄黃粉末，在惰性氣體N2或CO2的保護(hù)下，用0.001～6M Na2S溶液浸泡，保持pH在10～13，攪拌、過濾，棄渣，保留濾液；(4)將濾液恒溫30～85℃，惰性氣體N2或CO2保護(hù)，加入0.1～6M的鹽酸，調(diào)節(jié)pH至3～7，在劇烈的攪拌下，加入重量份數(shù)為納米雄黃重量份數(shù)1～100倍的活性生物大分子溶液作模板，攪拌，并根據(jù)粒徑要求陳化1小時(shí)到60天，制得用該生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑的納米雄黃膠體；(5)將納米雄黃膠體進(jìn)一步真空干燥得到用生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑的納米雄黃。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑制備納米雄黃膠體及納米雄黃的方法，其特征是所述的活性生物大分子溶液模板分為三類第一類蛋白質(zhì)第二類生物多糖第三類高分子化合物
全文摘要
本發(fā)明提供一種用生物大分子模板調(diào)控形貌與粒徑制備納米雄黃膠體及納米雄黃的方法。其特征是采用化學(xué)法去除天然雄黃礦中的砒霜及雜質(zhì)元素，以生物大分子為模板調(diào)控形貌與粒徑制得納米雄黃膠體及納米雄黃，通過改變模板種類及陳化條件可得到不同形貌與粒徑的納米雄黃。本發(fā)明所用加工原料廣，制得的納米雄黃純度高，粒徑均勻，水溶性好，不易氧化與團(tuán)聚，與模板分子具有正面協(xié)同作用，可明顯增強(qiáng)雄黃抗菌、抗腫瘤的藥效，提高雄黃的生物利用度，降低雄黃的毒副作用，并能擴(kuò)展雄黃的給藥途徑。
文檔編號A61K9/00GK1827118SQ200510020488
公開日2006年9月6日 申請日期2005年3月5日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月5日
發(fā)明者沈星燦, 梁宏, 陳韻, 郭艷芳, 韋靜 申請人:廣西師范大學(xué)