專利名稱：保護(hù)心臟的δ類阿片受體激動(dòng)劑和使用該激動(dòng)劑的方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及用于心臟保護(hù)治療的組合物和方法，更特別地，涉及調(diào)和缺血預(yù)處理的心臟保護(hù)效果的非肽δ類阿片受體激動(dòng)劑化合物。
相關(guān)技術(shù)描述失去血和氧的組織會(huì)遭受缺血性壞死或梗塞，并伴有可能的不可逆器官損害。在幸免于心肌梗塞的病人中，由于缺血損害而表現(xiàn)出活心肌層減少。然而，相對(duì)于那些沒有絞痛的人，有絞痛的人在心臟病發(fā)作前由于流向心肌的氧氣減少而顯示出較少的心肌層組織損害。因此，短暫的缺血具有保護(hù)心肌免受缺血損害的效果。
缺血預(yù)處理(PC)是一種在很多物種包括人類中被普遍證實(shí)的現(xiàn)象，由此通過預(yù)先短暫的局部缺血或缺氧，隨后進(jìn)行再灌注和再充氧來保護(hù)心肌不受嚴(yán)重缺血事故的影響。使用短持續(xù)時(shí)間、短暫的缺血來避免隨后更長(zhǎng)時(shí)間的缺血事故的損害已經(jīng)被Murry等人。證實(shí)(Circulation，1986741124-1136)。試驗(yàn)結(jié)果表明，在嚴(yán)重長(zhǎng)期缺血事故前已經(jīng)用短期缺血進(jìn)行預(yù)處理的犬類心臟中組織壞死減少了約30％。缺血預(yù)處理現(xiàn)象在用于治療患有缺血性心臟病的病人方面已引起極大的臨床關(guān)注。
缺血預(yù)處理需要身體上血液供應(yīng)減少，這對(duì)大多數(shù)病人來說是困難的或不切實(shí)際的。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)鍛煉具有持續(xù)約24小時(shí)的缺血預(yù)處理的效果，但很多病人身體上不能達(dá)到從缺血預(yù)處理中受益所需的心輸出量水平。在冠狀動(dòng)脈架搭橋手術(shù)之前由大動(dòng)脈搭橋引起的間歇缺血已經(jīng)被用作缺血預(yù)處理的臨床應(yīng)用。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在手術(shù)過程之后，有過心肌預(yù)處理的病人的心輸出量顯著較高。相對(duì)于沒有預(yù)處理的病人，預(yù)處理過的病人還顯示出改善的手術(shù)后血液動(dòng)力學(xué)行為。然而，多個(gè)潛在的問題和大動(dòng)脈搭橋以實(shí)現(xiàn)向心肌的供血減少相關(guān)，因此，需要具有一種通過藥理學(xué)方法加強(qiáng)缺血預(yù)處理的治療。
已經(jīng)確定許多膜受體與預(yù)處理有關(guān)，包括類阿片受體。三個(gè)主要的類阿片受體亞型為μ、κ和δ。δ類阿片受體刺激在即使不冬眠的動(dòng)物中也能模仿自然的冬眠，已經(jīng)被報(bào)道能夠在向組織供氧最小時(shí)提高組織存活。同樣地，還證明了δ類阿片受體刺激與缺血預(yù)處理有關(guān)。利用肽和非肽δ類阿片受體激動(dòng)劑誘導(dǎo)缺血預(yù)處理的效果進(jìn)行了大量研究。Schultz和Gross(U.S.Patent No.6,103,722)測(cè)試了許多表現(xiàn)出缺血預(yù)處理效果的非肽δ類阿片受體化合物，包括(-)-2-甲基-4a.α-(3-羥苯基)-1，2，3，4，4a，5，12，12a.β-八氫喹啉并[2，3]異喹啉(TAN67(-))；(±)-4-((αR*)-α-((2S*，5R*)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-羥芐基)-N，N二乙基苯甲酰胺(BW373U86)；and(+)-4-[(αR)-α-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-3-甲氧基芐基]-N，N-二乙基苯甲酰胺(SNC80).
然而，這些非肽化合物不是沒有問題，尤其是因?yàn)檫@些化合物被認(rèn)為是止痛藥，并且已經(jīng)知道幾種化合物由于這些化合物通過血腦屏障而導(dǎo)致服藥對(duì)象的發(fā)作。
同樣地，需要具有一種通過藥理學(xué)方法加強(qiáng)缺血預(yù)處理的治療，該治療避免了與向心肌供血減少相關(guān)的問題以及施用一些δ類阿片受體激動(dòng)劑化合物導(dǎo)致的潛在發(fā)作。
發(fā)明概述一方面，本發(fā)明涉及治療缺血損害和/或?qū)崿F(xiàn)缺血預(yù)處理的治療組合物，該組合物包含有效量的下式的二芳基甲基哌嗪化合物或其藥學(xué)上可接受的酯或鹽
其中Z選自由以下基團(tuán)氫；鹵素；C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基；C1-C6鹵代烷基；C1-C6烷氧基；C3-C6環(huán)烷氧基；具有式SR8的硫化物，其中R8為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6環(huán)烷基、具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳基烷基、或C5-C10芳基；具有式SOR8的亞砜，其中R8同上所述；具有式SO2R8的砜，其中R8同上所述；腈；C1-C6?；痪哂惺絅HCO2R8的烷氧羰基氨基(氨甲?；?，其中R8同上所述；羧酸、或其酯、酰胺或鹽；具有式CH2NR9R10的氨甲基，其中R9和R10可以相同或不同，并且可以為氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C2-C6羥烷基、C2-C6甲氧烷基、C3-C6環(huán)烷基或C5-C10芳基，或者R9和R10共同形成5或6個(gè)原子的環(huán)，環(huán)上的原子選自N和C組成的組；具有式CONR9R10的氨甲酰基，其中R9和R10同上所述，或其C2-C30肽共軛物；和具有式SO2NR9R10的磺酰胺，其中R9和R10同上所述；和X選自由氫、羥基、鹵素和烷氧基組成的組。
本發(fā)明的另一方面涉及一種減輕患者中缺血損害的方法，該方法包括施用有效量的治療組合物，該治療組合物包括下式的二芳基甲基哌嗪化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽或酯。
本發(fā)明的還一方面涉及一種減輕患者中缺血損害和/或?qū)崿F(xiàn)缺血預(yù)處理的方法，該方法包括給所述患者施用有效量的下式的δ類阿片受體
或其藥學(xué)可接受的鹽或酯。
優(yōu)選地，本發(fā)明的二芳基甲基哌嗪化合物為主要作用于外周δ類阿片受體的非止痛化合物。二芳基甲基哌嗪化合物可以在幾個(gè)不同的有效時(shí)間段施用，包括與缺血事故發(fā)作同時(shí)；在缺血發(fā)作前作為預(yù)防療法來防止那些處于缺血性心臟病癥狀階段的病人的疾病的發(fā)展；可能有血塊或其它類型心臟缺血危險(xiǎn)的病人的手術(shù)前；或在缺血事故發(fā)作之后；本發(fā)明化合物的功效可以采用受影響區(qū)域的非侵害性臨床成像方法例如核磁共振(MRI)成像以確定損害面積的大小進(jìn)行評(píng)價(jià)。
另一方面，本發(fā)明涉及能保持離體器官存活能力的溶液，該溶液包含下式的化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽或酯，且濃度能有效地保護(hù)器官免受缺血損傷。離體器官可以包括但不限于心臟、肝臟、腎臟、角膜和/或肺。
治療組合物可以通過任何合適的給藥方式施用，例如，選自下組的給藥形式包括口服、直腸、局部、舌下、粘膜、鼻、眼、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、透皮、脊椎、鞘內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、蛛網(wǎng)膜下、支氣管、淋巴和子宮內(nèi)給藥。
本發(fā)明的又一方面涉及哺乳動(dòng)物中抗長(zhǎng)期缺血發(fā)作和再灌注損傷的方法，該方法包括施用有效量的下式的δ類阿片受體激動(dòng)劑 或其藥學(xué)可接受的酯或鹽；和具有抗缺血效果的第二種化合物，包括用于抵抗缺血事故后心臟功能下降的鹽酸精氨酸，和其它起類似作用的氧化一氮潛在源。
本發(fā)明的各種其它方面、特征和實(shí)施方式將在接下來的公開內(nèi)容和附加權(quán)利要求中變得更充分明顯。
附圖簡(jiǎn)述

圖1顯示了在對(duì)照和治療動(dòng)物中梗塞大小的組織學(xué)樣本。
發(fā)明詳述及其優(yōu)選實(shí)施方案在本發(fā)明的主要方面，給患者施用在下文中更充分描述的二芳基甲基哌嗪化合物以調(diào)和缺血預(yù)處理，由此達(dá)到組織壞死減少、缺血后收縮功能改善以及缺血后節(jié)律障礙發(fā)生減少。根據(jù)本發(fā)明的治療可有利地包括單一療法治療，其中將本發(fā)明的化合物作為治療組合物中的單一治療藥劑施用，或聯(lián)合療法治療，其中可與其它被施用以調(diào)和矯正性或保護(hù)性心臟反應(yīng)的心臟治療藥劑同期如同時(shí)或依次地施用根據(jù)本發(fā)明的組合物。其它的心臟治療藥劑可包括但不限于硝酸鹽、β-腎上腺素阻斷劑、鈣通道拮抗劑、ACE抑制劑、非肽血管緊張素II拮抗劑、IIb/IIIa拮抗劑和阿司匹林。
根據(jù)本發(fā)明，本文使用的術(shù)語“烷基”旨在被廣泛地理解為包括(i)具有直鏈和支鏈特征的烷基；(ii)未取代和取代的烷基，其中取代烷基的取代基可包括任何與這種烷基相適合并且不會(huì)妨礙二芳基甲基哌嗪化合物預(yù)定用途的療效的空間上可接受的取代基(取代烷基的取代基例子包括鹵素(如氟、氯、溴和碘)、氨基、酰氨基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、羥基等)；(iii)飽和烷基和不飽和烷基，后者包括基團(tuán)如烯基取代的烷基(如烯丙基、甲代烯丙基、丙代烯丙基(propallyl)、丁烯基甲基等)、炔基取代的烷基和任何其它與這種烷基相適合并且不會(huì)妨礙二芳基甲基哌嗪化合物預(yù)定用途的療效的含有空間上可接受的不飽和度的烷基；和(iv)包括鍵合或橋接部分例如雜原子如氮、氧、硫等的烷基。
根據(jù)本發(fā)明，本文使用的術(shù)語“芳基”旨在被廣泛地理解為是指碳環(huán)(如苯基、萘基)和雜環(huán)芳香基(如吡啶基、噻吩基、呋喃基等)，并包括未取代和取代的芳基，其中取代芳基的取代基可包括與這種芳基相適合并且不會(huì)妨礙二芳基甲基哌嗪δ類阿片受體激動(dòng)劑預(yù)定用途的療效的任何空間上可接受的取代基。取代芳基的取代基例子包括氫、一種或多種鹵素(如氟、氯、溴和碘)、氨基、酰氨基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、硝基、三氟甲基、羥基、包含C1-C4烷基部分的羥烷基等。
式(1)、(2)和(3)的化合物的藥學(xué)上可接受酯的例子包括式(1)中X＝OH的化合物中羥基的羧酸酯，和式(2)和(3)化合物中羥基的羧酸酯，其中酯基團(tuán)中羧酸部分的非羰基部分選自直鏈或支鏈烷基(如正丙基、叔丁基、正丁基)、烷氧烷基(如甲氧基甲基)、芳基烷基(如芐基)、芳氧基烷基(如苯氧基甲基)和芳基(如苯基)；烷基磺?；⒎蓟酋；蚍蓟榛酋；?如甲基磺?；?；氨基酸酯(如L-纈氨?；騆-異亮氨酰)；二羧酸酯(如半琥珀酸酯)；碳酸酯(如乙氧羰基)；氨基甲酸酯(如二甲基甲酰胺、(2-氨乙基)甲酰胺)；和無機(jī)酯(如一磷酸酯-、二磷酸酯或三磷酸酯)。
式(1)、(2)和(3)的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽的例子包括來源于合適的堿的鹽，所述堿如堿金屬(例如鈉、鉀)、堿土金屬(例如鈣、鎂)、銨和NR’4+(其中R’為C1-C4烷基)。氨基的藥學(xué)上可接受的鹽包括以下物質(zhì)的鹽有機(jī)羧酸如醋酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、乳糖酸、富馬酸和琥珀酸；有機(jī)磺酸如甲基磺酸、乙基磺酸、羥乙磺酸、苯磺酸和對(duì)甲苯磺酸；和無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸和氨基磺酸。具有羥基的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽由所述化合物的陰離子結(jié)合適當(dāng)?shù)年栯x子如Na+、NH4+或NR’4+(其中R’為例如C1-4烷基)組成。
本發(fā)明還考慮獸醫(yī)用和人醫(yī)用的藥物制劑，該藥物制劑包含本發(fā)明的一種或多種二芳基甲基哌嗪化合物作為活性劑。
在這種藥物制劑中，活性劑優(yōu)選與一種或多種為此使用的藥學(xué)上可接受的載體和任選的任何其它治療成分一起使用。從與制劑中其它成分相適合的意義上講，載體必須是藥學(xué)上可接受的，并不會(huì)對(duì)其接受者過度有害。如上所述，提供有效量的活性劑以獲得最佳的藥理學(xué)作用，并提供適宜的量以獲得最佳日劑量。
制劑包括適于腸胃外給藥和非腸胃外給藥的那些，具體的給藥方式包括口服、直腸、局部、舌下、粘膜、鼻、眼、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、透皮、脊椎、鞘內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、蛛網(wǎng)膜下、支氣管、淋巴和子宮內(nèi)給藥。
當(dāng)在包括液體溶液的制劑中使用二芳基甲基哌嗪化合物時(shí)，可有利地在腸胃外施用該制劑。當(dāng)在液體懸浮液制劑中或作為生物相容載體制劑中的粉劑使用二芳基甲基哌嗪化合物時(shí)，可有利地經(jīng)口服、直腸或支氣管施用制劑。
當(dāng)直接以粉狀固體的形式使用二芳基甲基哌嗪化合物時(shí)，可有利地口服施用?？蛇x擇地，通過載氣中粉末霧化，經(jīng)支氣管施用，以形成能由病人從包括適當(dāng)噴霧器裝置的呼吸線路中吸入的氣態(tài)分散物。
在有些應(yīng)用中，可有利地以“向量化”形式使用二芳基甲基哌嗪化合物，如在脂質(zhì)體或其它膠囊密封介質(zhì)中密封活性劑，或在適當(dāng)?shù)纳锓肿尤邕x自蛋白質(zhì)、脂蛋白、糖蛋白和多糖的那些分子上例如通過共價(jià)鍵、螯合作用或聯(lián)合配位來固定活性劑。
可便利地以單元?jiǎng)┬托问教峁┌景l(fā)明二芳基甲基哌嗪化合物的制劑，并可通過藥劑學(xué)領(lǐng)域中眾所周知的任何一種方法來制備。這些方法通常包括將二芳基甲基哌嗪化合物與構(gòu)成一種或多種助劑的載體進(jìn)行締合的步驟。典型地，通過均勻且密切地將二芳基甲基哌嗪化合物與液體載體、細(xì)碎的固體載體或二者進(jìn)行締合，然后，根據(jù)需要，將產(chǎn)物成形為所需制劑的劑型來制備制劑。
可以以分散單元如膠囊、扁囊劑、片劑或錠劑的形式提供本發(fā)明的適于口服給藥的制劑，其各自包含預(yù)定量的二芳基甲基哌嗪化合物作為粉劑或顆粒劑；或以水溶液或非水液體的懸浮液提供，如糖漿、酏劑、乳劑或頓服劑。
可通過壓縮或模壓制成片劑，任選地加入一種或多種助劑?？赏ㄟ^在合適的機(jī)器上壓縮來制備壓縮片劑，其中二芳基甲基哌嗪化合物為自由流動(dòng)形式如粉末或顆粒，并任選地與粘合劑、崩解劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑或拔染劑混合?？赏ㄟ^在合適的機(jī)器上模壓來制成包含粉狀二芳基甲基哌嗪化合物和適當(dāng)載體的混合物的模壓片劑。
可通過向糖如蔗糖的濃縮水溶液中加入本發(fā)明的化合物來制成糖漿，還可向該糖漿中加入任何助劑。這類助劑可包括調(diào)味劑、合適的防腐劑、防止糖結(jié)晶劑和提高任何其它成分溶解度的藥劑，如多羥基醇，例如丙三醇或山梨糖醇。
適于腸胃外給藥的制劑便利地包括本發(fā)明化合物的無菌水制劑，該制劑優(yōu)選地與接受者的血液濃度相同(如生理鹽水溶液)。這類制劑可包括懸浮劑、增稠劑和脂質(zhì)體或其它被設(shè)計(jì)為使化合物達(dá)到血液成分或一種或多種器官的微顆粒體系。可以以單位劑量或多劑量形式提供制劑。
鼻噴霧制劑包括具有防腐劑和等滲劑的本發(fā)明化合物的純化水溶液。優(yōu)選將這類制劑調(diào)節(jié)到與鼻粘膜相適應(yīng)的pH和等滲狀態(tài)。
可以以具有合適載體如可可脂、氫化脂或氫化脂肪羧酸的栓劑形式提供用于直腸給藥的制劑。
通過與鼻噴霧劑類似的方法制備眼用制劑，除了優(yōu)選將pH和等滲因子調(diào)整到與眼匹配。
局部用制劑包括溶于或懸浮于一種或多種介質(zhì)如礦物油、石油、多羥基醇的本發(fā)明化合物、或其它用于局部藥物制劑的主要成分。
通過在觸變或凝膠狀載體如纖維素類介質(zhì)例如甲基纖維素或羥乙基纖維素中混入本發(fā)明化合物，來制備透皮制劑，然后在透皮設(shè)備中包裝得到的制劑，以確保與穿戴者皮膚接觸時(shí)的安全。
除了上述成分，本發(fā)明的制劑還可包括一種或多種助劑，其選自稀釋劑、緩沖劑、調(diào)味劑、粘合劑、崩解劑、表面活性劑、增稠劑、潤滑劑、防腐劑(包括抗氧化劑)等。
有時(shí)，為了延長(zhǎng)本發(fā)明的二芳基甲基哌嗪化合物的效果，需要減緩從皮下或肌肉注射時(shí)二芳基甲基哌嗪化合物的吸收。這可以通過使用水溶解性差的晶體或無定形材料的液體懸浮液來實(shí)現(xiàn)。于是二芳基甲基哌嗪化合物的吸收速率取決于其溶解速率，其又取決于晶體大小和結(jié)晶形式?？蛇x擇地，腸胃外施用的二芳基甲基哌嗪化合物的延時(shí)吸收通過在油性媒介物中溶解或懸浮藥物實(shí)現(xiàn)。
可通過在可生物降解聚合物如聚交酯-聚乙交酯中形成至少一種本發(fā)明化合物的微膠囊基質(zhì)來制備可注射的貯存形式。根據(jù)活性組分和聚合物的比例，和所采用的具體的聚合物的特性，可以控制活性組分的釋放速率。其它可生物降解聚合物的例子包括聚(原酸酯)和聚(酐)。貯存可注射制劑也通過將活性組分裝在和身體組織相容的脂質(zhì)體或微乳中制備?？勺⑸洳牧峡梢酝ㄟ^例如用細(xì)菌保留過濾器過濾來滅菌。
根據(jù)治療的具體情況，可以以任何合適的治療上有效且安全的劑量給動(dòng)物患者施用本發(fā)明的化合物，這可由本領(lǐng)域內(nèi)的熟練技術(shù)人員容易地確定，并不需要過度的試驗(yàn)。
通常，盡管根據(jù)所涉及的具體條件，在本發(fā)明的主要實(shí)施中可很大程度地改變治療使用的本發(fā)明化合物的有效劑量，這可由本領(lǐng)域內(nèi)的熟練技術(shù)人員容易地確定，但是對(duì)于本文描述的每一種附屬組合物，以及為獲得本文所述每種條件下的治療中的治療益處，本發(fā)明化合物的適宜治療劑量在10微克(μg)至100毫克(mg)/千克接受者體重/天的范圍內(nèi)，優(yōu)選在50μg至75mg/千克體重/天的范圍內(nèi)，最優(yōu)選在100μg至50mg/千克體重/天的范圍內(nèi)?？稍谌斓倪m宜間隔內(nèi)施用二次、三次、四次、五次、六次或更多次子劑量的方式提供所需劑量，尤其是快要手術(shù)時(shí)。此外，單一劑量時(shí)間的選擇優(yōu)選在缺血發(fā)作后直到4小時(shí)內(nèi)。需要的劑量可重復(fù)多次以為心肌提供更多的對(duì)任何后續(xù)更長(zhǎng)時(shí)間缺血發(fā)作的抵抗力。
以下實(shí)施例說明了可有利地用于合成本發(fā)明化合物的合成過程。
實(shí)施例14-{(2R，5S)-4-[(R)-(4-二乙基氨基甲?；交?(3-羥基苯基)甲基]-2，5-二甲基-1-哌嗪基甲基}苯甲酸 在室溫下將3-溴苯酚(400g，2.31mol)、叔丁基氯代二甲基硅烷(391mg，2.54mol)和咪唑(346g，5.08mol)的5000mL二氯甲烷溶液攪拌過夜。將反應(yīng)溶液倒入2000mL水中，分層。在通過硅膠填料(400g，二氧化硅60，230-400目)前，用1N氫氧化鈉水溶液(3×1500mL)和水(2×1500mL)洗滌有機(jī)層。用二氯甲烷(2×500mL)洗滌硅膠，合并濾液，并在減壓下除去溶劑，得到669g(98.4％)透明淺黃色液體狀的3-溴代苯氧基-叔丁基二甲基硅烷。1H NMR(300MHz，CDCl3)7.1(m，2H)；7.0(br s，1H)；6.75(m，1H)；1.0(s，9H)；δ0.2(s，6H)。
在回流下將3-溴代苯氧基-叔丁基二甲基硅烷(45.97g，160mmol)和1，2-二溴乙烷(6.01g，32mmol)混合物的150mL無抑制劑的無水四氫呋喃溶液緩慢加入到鎂屑混合物(4.28g，176mmol)的400mL無抑制劑的無水四氫呋喃溶液中，形成3-叔丁基二甲基甲硅烷氧苯基溴化鎂。在回流下攪拌1小時(shí)后，將透明淺棕色溶液冷卻到室溫。
將4-羧基苯甲醛(100.3g，0.67mol)溶解/懸浮在甲苯(1200mL)中，加入N，N-二甲基甲酰胺(0.15mL)，并在滴加亞硫酰氯(53.5mL，87.2g，0.73mol)時(shí)攪拌懸浮液。在氮?dú)庀录訜岱磻?yīng)混合物以回流，并攪拌2小時(shí)，其間大量但不是全部醛酸進(jìn)入溶液。再加入一定量的亞硫酰氯(20mL，32.6g，0.27mol)并回流持續(xù)過夜。蒸發(fā)透明的反應(yīng)混合物，并將殘余物溶解到無水四氫呋喃(1500mL)中。在冰/水浴中冷卻溶液，并向攪拌的溶液中滴加二乙胺(173mL，122g，1.67mol(2.5當(dāng)量))。移去冰浴并持續(xù)攪拌2.5小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物以除去白色結(jié)晶二乙胺氫氯化物副產(chǎn)物。用乙酸乙酯(2×600mL)洗滌晶體，并留下洗滌物。蒸發(fā)四氫呋喃濾出液，并將殘余物溶解在乙酸乙酯洗滌物中。依次用1M鹽酸(2×600mL)、水(2×300mL)、稀釋的碳酸鈉溶液(飽和液∶H20/1∶1，2×600mL)、水(2×300mL)和飽和氯化鈉溶液(300mL)洗滌溶液。分離有機(jī)層，在無水硫酸鈉上干燥并蒸發(fā)產(chǎn)生淡褐色油狀的4-甲酰-N，N-二乙基苯甲酰胺，使用其時(shí)無需進(jìn)一步純化。(收率115.7g，84％)在裝有冷凝器和Dean-Stark收集器的3L圓底燒瓶中，將4-甲酰-N，N-二乙基苯甲酰胺(20.53g，100mmol)、苯并三唑(11.91g，100mmol)和(2R，5S)-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(15.43g，100mmol，ChirotechTechnology，Ltd.，Cambridge，England)用1000mL甲苯混合。在氮?dú)庀录訜岱磻?yīng)物以回流，直到在收集器中觀察不到額外的水(大約3小時(shí))。將反應(yīng)物冷卻至室溫，并在真空下濃縮留下大約300mL的體積。在氮?dú)庀孪虮讲⑷蚣雍衔镏屑尤霟o水四氫呋喃(500mL)并攪拌得到完全的溶液。在室溫下通過雙頭針將該溶液加入到溴化3-叔丁基二甲基甲硅烷氧苯基鎂(上述)的溶液中。攪拌1.5小時(shí)后，通過加入飽和氯化銨水溶液(50mL)來結(jié)束反應(yīng)，并攪拌15分鐘。加入無水硫酸鎂(50g)，攪拌1.5小時(shí)，并過濾反應(yīng)物。在減壓下除去溶劑并將殘余物溶解到乙酸乙酯(1000mL)中。用1M氫氧化鈉(5×400mL)、水(4×400mL)和飽和氯化鈉水溶液(400mL)洗滌乙酸乙酯溶液。在無水硫酸鎂上干燥有機(jī)層，并除去溶劑得到深色油。將油溶解在500mL四氫呋喃和300mL3M鹽酸中，并在室溫下攪拌1.5小時(shí)。用水(300mL)稀釋反應(yīng)，并在真空下濃縮至約原體積的一半。用戊烷(2×500mL)萃取溶液。用5M氫氧化鈉將水溶液層調(diào)節(jié)到PH8-9并用乙酸乙酯(250Ml)萃取。分離層，并用另外的乙酸乙酯(250mL)萃取含水部分。用飽和氯化鈉水溶液洗滌合并的有機(jī)萃取物，在無水硫酸鈉上干燥，并在減壓下除去溶劑得到褐色油。將該殘留物溶解在乙酸乙酯中(25mL)，用可靠的化合物的晶體接晶種，并結(jié)晶過夜(Michael J.Bishop and Robert W.McNutt，Seed Crystals Obtained From Hot 2-propanol With Addition of Water，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1995)，5，1311-14)。將晶體進(jìn)行過濾，用少量冷乙酸乙酯洗滌固體。在5mmHg和室溫下進(jìn)行干燥產(chǎn)生白色晶體狀的4-[(R)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(3-羥苯基)甲基]-N，N-二乙基苯甲酰胺。產(chǎn)品在HPLC上顯示單峰(Zorbax RX C8，4.6mm×25cm，MeOH中等濃度的40％0.01M NH4OAc，3分鐘；線性梯度至100％MeOH，45分鐘；等濃度的MeOH，5分鐘；1.0mL/min；obs＝210nm，Rt＝32.21min)。C27H37N3O2的計(jì)算值％C，74.45；H，8.56；N，9.65.測(cè)量值％C，74.48；H，8.60；N，9.62.1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.42(d，J＝8.1Hz，2H)；7.28(d，J＝8.4Hz，2H)；7.08(t，J＝7.8Hz，1H)；6.64-6.57(m，3H)；5.94-5.83(m，1H)；5.22(d，J＝8.7Hz，1H)；5.18(s，1H)；5.14(br s，1H)；3.60-3.47(m，2H)；3.42(dd，J＝5.2，13.7Hz，1H)；3.37-3.20(br m，2H)；2.91(dd，J＝8.1，13.5Hz，1H)；2.85(dd，J＝2.6，11.4Hz，1H)；2.70-2.47(m，3H)；2.17(t，J＝10.7Hz，1H)；1.98(t，J＝11.1Hz，1H)；1.23(m，3H)；1.14(d，J＝6.1Hz，3H，與m，3H重疊)；1.02(d，J＝6.2Hz，3H).
在氮?dú)夂褪覝叵?，使用催化劑溶液?-[(R)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(3-羥苯基)-甲基]-N，N-二乙基苯甲酰胺(10.89g，25mmol)和硫代水楊酸(4.63g，30mmol)的無水四氫呋喃(50mL)溶液攪拌1.5小時(shí)，該催化劑溶液通過在四氫呋喃(10mL)中溶解雙(二亞芐基丙酮)鈀(0.718g，1.25mmol)和1，4-雙(二苯基膦基)丁烷(0.533mg，1.25mmol)來制備。(J.P.Genet，S.Lemaire-Audoire，M.Savignac，Tetrahedron Letters，36，1267-1270(1995))。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物，在乙酸乙酯(150mL)和碳酸鈉水溶液間分配殘余物。分離層，向有機(jī)層中加入二乙醚(250mL)。用5％碳酸鈉溶液(2×150mL)萃取有機(jī)層。用戊烷(500mL)稀釋有機(jī)層，并用3M鹽酸(6×30mL)萃取。使用飽和碳酸鈉水溶液將該水溶液調(diào)整到pH9-10，并用二氯甲烷(3×100mL)萃取。在無水硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)萃取物，并在減壓下除去溶劑，得到易碎淺黃色泡沫體狀的4-[(R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(3-羥苯基)甲基]-N，N-二乙基苯甲酰胺(10.24g)。產(chǎn)品在HPLC上顯示單峰(Zorbax C-8，MeOH中等濃度的40％0.01M NH4OAc，3分鐘；線性梯度至100％MeOH，45分鐘；等濃度的MeOH，5分鐘；1.0mL/min；obs＝210nm，Rt＝19.24min)。C24H33N3O20.1EtOAc·0.4CH2Cl2的計(jì)算值％C，67.96；H，7.96；N，9.59.測(cè)量值％C，67.90；H，8.03；N，9.54.1HNMR(CDCl3，300MHz)δ7.42(d，J＝8.1Hz，2H)；7.26(d，J＝8.3Hz，2H)；7.11(t，J＝7.8Hz，1H)；6.72(d，J＝8.1Hz，1H)；6.65(s，1H)；6.59(d，J＝7.6Hz，1H)；5.16(s，1H)；4.93(v br s，2H)；3.51(br m，2H)；3.27(br m，2H)；3.02-2.97(m，1H)；2.92(d，J＝10.5Hz，1H)；2.66(br d，J＝8.5Hz，2H)；2.60-2.45(m，1H)；1.84(dd，J＝11.3，8.3Hz，1H)；1.27-1.15(m，3H)；1.10(d，J＝6.1Hz，3H與m，3H重疊)；1.02(d，J＝6.1Hz，3H).
4-{(2R，5S)-4-[(R)-(4-二乙基氨基甲?；交?(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基-1-哌嗪甲基}苯甲酸方法A還原性烷基化將冰醋酸(0.635mL，11.1mmol)加入到4-[(R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)-(3-羥苯基)甲基]-N，N-二乙基苯甲酰胺(1.98g，5mmol)和4-羧基苯甲醛(1.50g，10mmol)的無水四氫呋喃(35mL)溶液中。在輕輕攪拌下，以50-100mg分份加入三乙酸硼氫化鈉(2.12g，10mmol)，在每次添加后允許起泡消退。用HPLC檢測(cè)反應(yīng)不存在原料。在室溫下攪拌16小時(shí)后，加入另外的4-羧基苯甲醛(0.75g，5mmol)，乙酸(0.318mL，5mmol)和三乙酸氫硼化鈉(1.06g，5mmol)。再攪拌4小時(shí)后，在減壓下濃縮反應(yīng)混合物，在乙酸乙酯(50mL)和3M鹽酸(10mL)間分配殘余物。分離層，用3M鹽酸(5×10mL)再次萃取有機(jī)層。使用飽和碳酸鈉水溶液將該水溶液調(diào)整到pH4.5-5，并用二氯甲烷(3×50mL)萃取。在無水硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)萃取物，并在減壓下除去溶劑，得到易碎白色泡沫體狀的4-{(2R，5S)-4-[(R)-(4-二乙基氨基甲酰基苯基)(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基-1-哌嗪基-甲基}苯甲酸(2.34g)。產(chǎn)品在HPLC上顯示單峰(Zorbax RX-C8，4.6mm×25cm，MeOH中等濃度的40％0.01M NH4OAc，3分鐘；線性梯度至100％MeOH，45分鐘；等濃度的MeOH，5分鐘；1.0mL/min；obs＝210nm，Rt＝13.75min)。
將4-{(2R，5S)-4-[(R)-(4-二乙基氨基甲?；交?(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基-1-哌嗪基-甲基}苯甲酸(2.09g，3.5mmol)溶解到乙醇(6mL)中，并加入0.986N鹽酸(3.60mL)。用蒸餾水(30mL)稀釋該溶液，過濾，快速冷凍，并凍干得到白色固體(2.17g)C32H39N3O4·1.6HCl·1.6H2O計(jì)算值％C，62.31；H，7.16；N，6.81；Cl，9.20.測(cè)量值％C，62.32；H，7.19；N，6.74；Cl，9.28.1H NMR(D2O+50％v/v 1-MNaOD in D2O，300MHz)δ7.57(d，J＝8.1Hz，2H)；7.17(d，J＝8.0Hz，2H)；7.11(d，J＝8.1Hz，2H)；6.99(d，J＝8.1Hz，2H)；6.81(t，J＝7.8Hz，1H)；6.30(s，1H)；6.29(部分重疊d，J＝7.5，1H)；6.13(d，J＝7.5Hz，1H)；4.89(s，1H)；3.78(d，J＝12.7Hz，1H)；3.22(q，J＝7.2Hz，2H)；3.05(d，J＝12.9Hz，1H)；2.95(q，J＝7.2Hz，2H)；2.60(d，J＝11.2Hz，1H)；2.35(d，J＝11.4Hz，1H)；2.31-2.19(m，2H)；1.87-1.74(m，2H)；0.94(t，J＝7.3Hz，3H)；0.87(t，J＝7.3Hz，3H)；0.77(d，J＝6.3Hz，3H)；0.75(d，J＝6.3Hz，3H；二者雙重線重疊)。
方法B直接烷基化將乙腈(15mL)中的4-[(R)-((2S，5R)-2，5-二甲基-1-哌嗪基)(3-羥苯基)甲基]-N，N-二乙基苯甲酰胺(1.41g，3.56mmol)加到碘化鈉(80mg，0.53mmol)中，并在先后加入三乙胺(2.0mL，14.3mmol)和4-(溴代甲基)苯甲酸甲酯期間進(jìn)行攪拌。在氮?dú)庀旅芊夥磻?yīng)混合物，在環(huán)境溫度下攪拌20小時(shí)。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物在乙酸乙酯(50mL)和水(25mL)之間分配。分離有機(jī)層，含水層用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。用5％碳酸鈉溶液(2×50mL)然后用水(50mL)萃取合并的有機(jī)萃取物。有機(jī)層用戊烷(100mL)稀釋，并用1M鹽酸(5×30mL)萃取。使用飽和碳酸鈉水溶液將該水溶液調(diào)整到pH8.5-9，并用二氯甲烷(3×50mL)進(jìn)行萃取。在無水硫酸鈉和硫酸鎂上干燥合并的有機(jī)萃取物。在減壓下除去溶劑，得到淡黃色固體(1.90g)。將殘余物溶解在二氯甲烷(5mL)中，涂在預(yù)先充填(4×7cm)的Biotage硅膠柱上并用A在B中的20％至60％溶液梯度進(jìn)行洗脫[A＝乙酸乙酯和2％NH4OH，B＝二氯甲烷]。在減壓下濃縮包含產(chǎn)品的所需餾分[硅膠t.l.c.(EtOAc和2％NH4OH∶CH2Cl2/1∶1)Rf＝0.39]，并在2mmHg和室溫下進(jìn)一步干燥，產(chǎn)生乳白色固體狀的4-{(2R，5S)-4-[(R)-(4-二乙基氨基甲?；交?(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基-1-哌嗪基甲基}苯甲酸甲酯(1.34g)。C33H41N3O4的計(jì)算值％C，72.90；H，7.60；N，7.73.測(cè)量值％C，72.68；H，7.57；N，7.64.1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.95(d，J＝8.4Hz，2H)；7.44(d，J＝8.1Hz，2H)；7.37(d，J＝8.2Hz，2H)；7.28(d，J＝8.2Hz，2H)；7.14(t，J＝7.8Hz，1H)；6.73-6.69(m，2H)；6.64(s，1H)；6.05(br s，1H)；5.00(s，1H)；3.94(d，J＝14Hz，1H部分和s，3H重疊)；3.89(s，3H)；3.54(br m，2H)；3.29(br m，2H)；3.24(d，J＝14Hz，1H)；2.68-2.53(m，4H)；2.05-1.94(m，2H)；1.26(br m，3H)；1.23(br m，3H)；1.06(重疊d，J＝5.9Hz，3H)；1.04(重疊d，J＝5.9Hz，3H)。
將該固體(0.88g，1.62mmol)溶解在乙醇(10mL)中，以約1mL的等分試樣加入2.5M氫氧化鈉溶液(6.4mL，16mmol)。在最后加入后，略微渾濁的反應(yīng)混合物澄清5分鐘，產(chǎn)生黃色溶液，在環(huán)境溫度下攪拌該溶液16小時(shí)。用等體積的水稀釋該溶液，通過蒸發(fā)除去乙醇和估計(jì)為50％的水相體積。用3M鹽酸將溶液調(diào)整到pH4。得到的絮狀白色固體通過過濾進(jìn)行收集，用少量冷水洗滌。在空氣干燥后，在5mmHg真空和室溫下進(jìn)一步干燥該固體，產(chǎn)生標(biāo)題化合物(0.90g，85.9％)。通過HPLC證明該物質(zhì)和方法A制得的化合物相同。C32H39N3O4·1.5NaCl·1.6H2O的計(jì)算值％C，59.48；H，6.58；N，6.50.測(cè)量值％C，59.50；H，6.45；N，6.32.1H NMR((d6-DMSO+20％ v/v 1-MNaOD inD2O，300MHz)；δ0.93(d，J＝6.0Hz，3H)；0.98(d，J＝5.9Hz，3H；二者雙重線重疊br m，6H)；1.9(m，2H)；2.54(m，2H，因DMSO而部分模糊)；3.13(br m，2H)；3.22(d，J＝14.2Hz，1H)；3.34(br m，2H)；3.71(d，J＝14.0Hz，1H)；4.66(s，1H)；5.97(d，J＝6.9Hz，1H)；6.16(d，J＝7.9，1H)；6.23(s，1H)；6.72(t，J＝7.7Hz，1H)；7.16(d，J＝7.8Hz，4H)；7.38(d，J＝8.1Hz，2H)；7.72(d，J＝8.1Hz，2H).質(zhì)譜(ESI-，DP-120V，MeOH)；m/z529.0，(M+，100％)；528，((M-1)+，57％)；512.6，((M-17)+，95％)。
實(shí)施例24-{(2R，5S)-4-[(S)-(4-二乙基氨基甲?；交?(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基-1-哌嗪甲基}苯甲酸 在2000mL的三頸圓底燒瓶中稱量4-羧基苯甲醛(100g，666mmol)，并在氮?dú)庀略?200mL甲苯中攪拌。向混合物中加入亞硫酰氯(53.5mL，733mmol)，然后加入0.15mL二甲基甲酰胺。將裝有氯化鈣干燥管的回流冷凝器置于燒瓶上。將反應(yīng)物置于油浴中并在保持低于120℃的浴溫下加熱。在得到透明溶液后，使混合物回流1小時(shí)，然后冷卻至室溫。用無水甲苯稀釋溶液，并在真空下除去所有的揮發(fā)物。
將粗酰基氯溶解在1500mL干四氫呋喃中，并在冰/水浴中冷卻。通過滴加漏斗逐滴加入二乙胺(173mL，1.67mol，2.5當(dāng)量)。使渾濁溶液在1小時(shí)內(nèi)升溫至室溫，并攪拌過夜。過濾反應(yīng)混合物以除去白色結(jié)晶鹽酸二乙胺副產(chǎn)物。用乙酸乙酯(2×600mL)洗滌晶體。蒸發(fā)四氫呋喃濾液，將殘余物溶解在乙酸乙酯洗滌物中。依次用1M鹽酸(2×600mL)、水(2×300mL)、稀釋的碳酸鈉溶液(飽和液∶H2O，1∶1，2×600mL)、水(2×300mL)和飽和氯化鈉溶液(300mL)洗滌溶液。分離有機(jī)層，在硫酸鈉上干燥，在真空下除去溶劑。得到淡黃色油狀的4-甲酰-N，N-二乙基苯甲酰胺(117.14g)，使用其時(shí)無需進(jìn)一步純化(85％未色譜純化的收率)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.09-1.25(m，6H)；3.19-3.31(d，J＝6.4Hz，2H)；3.54-3.56(d，J＝6.6Hz，2H)；7.49-7.52(d，J＝8.1Hz，2H)；7.89-7.92(d，J＝8.2Hz，2H)；9.98(s，1H).
將3-碘苯酚(110g，500mmol)和咪唑(93.6g，1735mmol，2.75當(dāng)量)置于2000mL燒瓶中的1150mL干二氯甲烷中，并在氮?dú)庀略诒?水浴中冷卻到15℃。將200mL干二氯甲烷中的氯化叔丁基二甲基甲硅烷(82.9g，550mmol)通過滴加漏斗逐滴加入到反應(yīng)物中。在氮?dú)庀聦⒎磻?yīng)混合物攪拌過夜，進(jìn)行過濾，用二氯甲烷洗滌。用水(400mL)、0.4N NaOH溶液(600mL)和水(2×300mL)洗滌合并的萃取物。用Na2SO4/NaCl干燥有機(jī)層，蒸發(fā)產(chǎn)生淡黃色油(166g)。
在室溫和氮?dú)庀聦?-碘代苯氧基-叔丁基二甲基硅烷(48.85g，146mmol)放入裝有180mL干四氫呋喃的250mL燒瓶中。通過滴加漏斗加入異丙基氯化鎂(73mL，146mmol，四氫呋喃中2.0M溶液)以形成淺黃色的溶液。在室溫下攪拌反應(yīng)物1小時(shí)。期間，在另一個(gè)1000mL燒瓶中將30g 4-甲酰-N，N-二乙基苯甲酰胺溶解在300mL干四氫呋喃中，并在氮?dú)庀吕鋮s到-72℃。將新制備的3-苯氧基-叔丁基-二甲基硅烷氯化鎂緩慢加入到1000mL燒瓶中。監(jiān)控轉(zhuǎn)移速率以保持反應(yīng)溫度在-70℃以下。使反應(yīng)物在攪拌過夜時(shí)升溫至室溫。用24mL飽和氯化銨水溶液終止混合物，并用600mL二乙醚稀釋，先后用600mL水和150mL飽和氯化鈉溶液洗滌。用硫酸鈉干燥醚溶液，除去溶劑得到黃色油狀的粗4-{[3-(叔丁基二甲基硅烷氧)苯基]羥甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺。粗產(chǎn)率為～100％。粗產(chǎn)品在20％乙酸乙酯戊烷溶液中形成漿液。得到的白色沉淀通過過濾進(jìn)行收集，用戊烷洗滌，干燥過夜(30mmHg，40℃)。
將4-{[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]羥甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺(50g，120.9mmol)溶解在800mL二氯甲烷中，逐滴加入13.23mL(181.3mmol)亞硫酰氯。在室溫下攪拌反應(yīng)物溶液5小時(shí)，在真空下除去溶劑。用色譜法在硅膠(戊烷中17％EtOAc，然后戊烷中17％EtOAc)上純化殘余的黃色油，得到黃色油狀的所需產(chǎn)品22.58g(52.26mmol)。
將純4-{[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]氯代甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺(22.58g，52.26mmol)溶解在350mL干乙腈中。加入碘化鈉(7.83g，52.26mmol)、二異丙基乙胺(13.69mL，78.39mmol)和(2R，5S)-1-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪(8.06g，52.26mmol)。在回流下和氮?dú)庀聰嚢杌旌衔?小時(shí)。在減壓下除去乙腈，將反應(yīng)混合物倒入乙酸乙酯(400mL)和碳酸鉀溶液(150mL 2M水溶液)中。分離有機(jī)層，用水和鹽水洗滌，在固體碳酸鉀上干燥，并在真空下濃縮。得到深褐色油狀的粗產(chǎn)品(30g)，粗產(chǎn)率為～100％。
用色譜法在硅膠上純化粗產(chǎn)品得到兩種二苯甲基差向異構(gòu)體。先用20％EtOAc的戊烷進(jìn)行洗脫，然后逐步采用戊烷中30％、40％、50％和80％的EtOAc洗脫，得到11.00g(20.00mmol)黃色油狀的4-{(R)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪-1-基)[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺和9.27g 4-{(S)-((2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪-1-基)[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-苯基]甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺(16.86mmol，黃色油)。利用薄層色譜法(TLC)與實(shí)施例1中描述的已知純異構(gòu)體比較來識(shí)別這些異構(gòu)體。
將4-{(S)-(2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪-1-基)[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)苯基]甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺(9.27g，16.86mmol)先后溶解在35mL干乙腈和氟化四乙胺二水合物(4.69g，25.29mmol)中，攪拌過夜。反應(yīng)溶液濃縮至干燥，將殘余物溶解在40mL乙酸乙酯中，用2％NaHCO3水溶液(3×40mL)和水(40mL)萃取。將有機(jī)層在硫酸鈉上干燥，蒸發(fā)得到8.55g紅色無定形固體狀的4-{(S)-(2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基哌嗪-1-基)[3-羥苯基]甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺。
在硫代水楊酸存在條件下采用實(shí)施例1中討論的Genet的方法用Pd(dba)2/DPPB除去烯丙基。濃縮反應(yīng)物，將殘余物倒入200mL乙酸乙酯和300mL二乙醚中。用340mL水洗滌后，用10％檸檬酸(5×80mL)萃取有機(jī)溶液。過濾合并的酸性萃取物以除去少量的懸浮固體，用15％NaOH溶液將pH調(diào)整到8-8.5。用二氯甲烷(3×300mL)萃取得到的油狀懸浮液。干燥(Na2SO4/MgSO4)合并的有機(jī)溶液，在減壓下濃縮。殘余物為淺橙色的固體。
將4-[(S)-((2S，5R)-2，5-二甲基哌嗪-1-基)(3-羥苯基)甲基]-N，N-二乙基苯甲酰胺(0.51g，1.29mmol)溶解在10mL干乙腈中。加入碘化鈉(20mg，0.13mmol)，在先后加入三乙胺(0.72mL，5.16mmol)和4-(溴代甲基)苯甲酸甲酯(0.59g，2.58mmol)過程中在氮?dú)夂褪覝叵聰嚢璺磻?yīng)物。在氮?dú)庀聦⒎磻?yīng)混合物攪拌過夜。通過蒸發(fā)除去溶劑，在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液間分配殘余物。用水洗滌有機(jī)層，在Na2SO4/MgSO4上干燥，在減壓下濃縮。用色普法在硅膠(CH2Cl2中50％EtOAc)上純化殘余的淺黃色油，得到0.45g(0.83mmol)白色無定形固體狀的4-{(2R，5S)-4-[(S)-(4-二乙基氨基甲酰基苯基)(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基-1-哌嗪基甲基}-苯甲酸甲酯。
用3mL乙醇中的1mL10％NaOH溶液水解上述酯。蒸發(fā)反應(yīng)混合物至干燥，加入2mL水。用2mL EtOAc/Et2O萃取溶液兩次以除去雜質(zhì)，然后逐滴加入1M HCl至pH4-4.5的沉淀點(diǎn)。形成白色凝膠，通過過濾收集，用少量冷水洗滌。在真空烘箱(30mmHg，40℃)中干燥4-{(2R，5S)-4-[(S)-(4-二乙基氨基甲?；交?(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基哌嗪-1-基甲基}苯甲酸得到180mg白色固體。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ0.98-1.16(m，12H)；1.89-2.05(m，2H)；2.48-2.65(m，5H)；3.10-3.50(m，5H)；3.76-3.80(d，J＝13.9Hz，1H)；4.94(s，1H)；6.53-6.95(d，J＝8.0Hz，1H)；6.75-6.85(m，2H)；7.02-7.09(t，1H)；7.29-7.40(m，6H)；7.80-7.84(d，J＝8.3Hz，2H)；9.29(s，1H)。
實(shí)施例33-{(2R，5S)-4-[(R)-(4-二乙基氨基甲酰基苯基)(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基-1-哌嗪基甲基}苯甲酸 將4-{(R)-(2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)-[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-苯基]甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺(11.00g，20.0mmol，實(shí)施例2)溶解在40mL干乙腈中，加入氟化四乙胺二水合物(5.56g，30.00mmol)，攪拌過夜。將反應(yīng)溶液濃縮至干燥，將殘余物溶解在40mL乙酸乙酯中，用2％NaHCO3水溶液(3×40mL)和水(40mL)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)層在硫酸鈉上干燥，蒸發(fā)得到8.55g紅色無定形固體狀的4-{(R)-(2S，5R)-4-烯丙基-2，5-二甲基-哌嗪-1-基)[3-羥苯基]甲基}-N，N-二乙基苯甲酰胺(10.30g)。
在硫代水楊酸存在條件下采用實(shí)施例1中討論的Genet的方法，用Pd(dba)2/DPPB除去烯丙基。濃縮反應(yīng)物，將殘余物倒入200mL乙酸乙酯和300mL二乙醚中。用340mL水洗滌后，用10％檸檬酸(5×80mL)萃取有機(jī)溶液。過濾合并的酸性萃取物以除去少量的懸浮固體，用15％NaOH溶液將pH調(diào)整到8-8.5。用二氯甲烷(3×300mL)萃取得到的油狀懸浮液。干燥(Na2SO4/MgSO4)合并的有機(jī)萃取物，在減壓下濃縮。殘余物為淺橙色的固體。
將4-[(R)-((2S，5R)-2，5-二甲基哌嗪-1-基)(3-羥苯基)甲基]-N，N-二乙基苯-甲酰胺(2.50g，6.32mmol)和3-羧基苯甲醛(1.90g，12.64mmol)置于裝有60mL四氫呋喃和0.80mL(13.91mmol)乙酸的250mL燒瓶中。在室溫下攪拌反應(yīng)物20分鐘，分批加入三乙酸硼氫化鈉(2.68g，12.64mmol)。反應(yīng)溶液變得非常渾濁，在氮?dú)庀旅芊?，攪拌過夜。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干燥，在乙酸乙酯(60mL)和3M HCl(12mL)之間分配。用另外的5×12mL 3M HCl萃取有機(jī)層。用0.5M NaOH溶液和Na2CO3固體調(diào)整合并的含水萃取物至pH4-4.5。得到的凝膠通過過濾收集，并將其溶解在30mL 0.5M NaOH溶液中，用20mL EtOAc/Et2O萃取兩次以除去雜質(zhì)。向水溶液中逐滴加入1M HCL至pH4.5-5的沉淀點(diǎn)。得到的白色溶膠通過過濾收集，用少量冷水洗滌。在真空烘箱(30mmHg，40℃)中干燥3-{(2R，5S)-4-[(R)-(4-二乙基氨基甲酰基苯基)-(3-羥苯基)甲基]-2，5-二甲基哌嗪-1-基甲基}苯甲酸得到1.55g白色固體。1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ0.99-1.20(m，12H)；1.89-2.05(m，2H)；2.48-2.65(m，5H)；3.06-3.57(m，5H)；3.78-3.83(d，J＝12.5Hz，1H)；4.94(s，1H)；6.63-6.84(m，3H)；7.09-7.91(m，9H)；9.36(s，1H)。
實(shí)施例4在小鼠輸精管(Mouse Vas Deferens ED50)受體系統(tǒng)中評(píng)價(jià)如上所識(shí)別的具有式(3)的化合物(下文稱為化合物1)的體外類阿片受體活性。所采用的確定受體活性的分析過程如下所述。
體外生物測(cè)定除去小鼠的輸精管(MVD)，CD-1株(Harlan，Raleigh，NC)，并在裝有改良的Mg++自由Krebs緩沖液的器官浴室中將其懸掛在鉑電極之間，拉力為0.5g，緩沖液成分(毫摩爾)如下NaCl，117.5；KCl，4.75；CaCl2，2.6；KH2PO4，1.20；NaHCO3，24.5；以及葡萄糖，11。用95％O2/5％CO2使緩沖液飽和，并保持在37℃。在超大電壓下用10-Hz脈沖串刺激組織400毫秒；串的間隔為10秒；在最大電壓下脈沖持續(xù)時(shí)間為1.0毫秒。在1uM CTOP(一種高選擇型的μ類拮抗劑；K.Gulya，J.T.Pelton，V.J.Hruby and H.I.Yamamura，Life Sci.382221-2229，(1986))和15nM非-BNI(一種選擇性κ類 拮抗劑；P.S.Portoghese，A.W.Lipkowski，和A.E.Takemori，Life Sci.40，1287(1987))存在的條件下通過向器官浴中加入合適濃度的測(cè)試化合物和在加入下一次更高濃度前得到最大響應(yīng)來測(cè)定δ類受體活性。μ類受體活性采用相似的方式進(jìn)行測(cè)定，但是在3M TIPP(一種高選擇型的δ類拮抗劑；P.W.Schiller，T.M.-D.Nguyen，G.Weltrowska，B.C.Wilkes，B.J.Marsden，C.Lemieux，和N.N.Chung，Proc.Natl.Acad.Sci.89，11871(1992))和15nM選擇性κ類拮抗劑非-BNI存在的條件下。
κ受體活性在1uM高選擇性μ類拮抗劑CTOP和3uM高選擇性δ類拮抗劑TIPP存在的條件下進(jìn)行測(cè)定。
在變化累計(jì)濃度下測(cè)定化合物電誘導(dǎo)肌肉收縮的抑制百分比。從顯示劑量濃度對(duì)響應(yīng)的曲線中外推ED50值(J.A.H.Lord，A.A.Waterfield，J.Hughes，H.W.Kosterlitz，Nature 267，495，(1977))。結(jié)果在下表1中列出。
表1 實(shí)施例5在大鼠腦膜(μ和δ類阿片)中和在豚鼠小腦(κ類阿片受體)中評(píng)價(jià)化合物1的體外類阿片受體親和力。從大鼠整腦或豚鼠小腦中制備用于放射性配體結(jié)合的膜，大鼠和豚鼠由Pel-Freeze Biological Inc.(Rogers，AR.)提供。將組織在50mM TRIS(三[羥甲基]氨基甲烷)緩沖液(pH7.4)中均化，該緩沖液包含50μg/ml大豆胰島素抑制劑、1mM EDTA(乙二胺四乙酸)和100μM PMSF(氟化苯基甲基硫酰)。將均化的腦組織在500×g下離心30分鐘(4℃)以除去大的碎片。對(duì)上清液polytronically聲波處理10秒鐘(P.E.設(shè)置2，4℃)。用10mM TRIS-蔗糖緩沖液(pH7.4)加入蔗糖溶液至終濃度0.35M，然后將腦膜在40,000×g下離心30分鐘(4℃)。用包含50μg/ml大豆胰島素抑制劑、1mM EDTA和100μMPMSF的10mM TRIS緩沖液(pH7.4)洗滌膜小球兩次。
在包含50μg/ml大豆胰島素抑制劑、1mM EDTA、5mM MgCl2和100μM PMSF的10mM TRIS緩沖液(pH7.4)中進(jìn)行放射性配體結(jié)合分析。采用從New England Nuclear購買的氚標(biāo)記的DAMGO(μ)、Deltorphin II(δ)或U69593(κ)作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)中的配體(2-3×10-10M終濃度)，對(duì)照實(shí)驗(yàn)的非特異性結(jié)合由0.5×10-6M納洛酮(從SIGMAChemical Co.購買)定義。所有的結(jié)合分析都在室溫下進(jìn)行90分鐘，然后使用Brandel半自動(dòng)細(xì)胞收集器(型號(hào)M48，Brandel，Gaithersburg，MD)用50mM TRIS緩沖液(4℃，pH7.4)在GF/C玻璃纖維過濾器(Whatman，Hillsboro，OR)上快速過濾來終止。用50mM TRIS緩沖液(4℃，pH7.4)洗滌過濾器兩次，將過濾器放置在液體閃爍放射性物質(zhì)(cocktail)中，用Beckman LS 6500閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)結(jié)合放射性。從完整的濃度-效果曲線中確定具有式(3)的化合物(1)抑制放射性同位素示蹤的DAMGO(μ)、Deltorphin II(δ)或U69593(κ)結(jié)合的能力。使用計(jì)算機(jī)程序Prism(GraphPad Software Inc.，San Diego，CA)，采用放射性配體結(jié)合數(shù)據(jù)的一元(one-site)非線性回歸分析確定IC50值。然后采用Cheng-Prusoff方程(Cheng Y and Prusoff WH(1973)，Relationshipbetween the inhibition constant(Ki)and the concentration of inhibitorwhich causes 50 percent inhibition(I50)of a enzymatic reaction；BiochemPharm.，223099-3108.)將IC50值轉(zhuǎn)換成Ki值。
放射性配體結(jié)合分析的結(jié)果在以下表2中列出。
表2 結(jié)果顯然，具有式(3)的化合物(1)對(duì)所測(cè)試的不同種類的受體顯示了獨(dú)特的和不同的結(jié)合親和力。由抑制標(biāo)記化合物結(jié)合需要非常低的濃度說明了該化合物對(duì)δ類受體的強(qiáng)親和力。
實(shí)施例6用夾尾測(cè)試分析大鼠中痛覺喪失。采用靜脈方式施用化合物1。得到1-2小時(shí)期間的疼痛反應(yīng)值。在尾部(離尾末端1英寸)放置一個(gè)動(dòng)脈夾持續(xù)一小段時(shí)間，直到發(fā)生逃避反應(yīng)(即擺尾或發(fā)聲)。用秒表記錄逃避反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)間。采用20秒的截止時(shí)間以防止不必要的組織損傷。觀察大鼠的發(fā)聲或身體運(yùn)動(dòng)的疼痛反應(yīng)。以秒記錄引起疼痛反應(yīng)所需時(shí)間作為夾尾反應(yīng)時(shí)間。
通過一半動(dòng)物在20秒內(nèi)對(duì)動(dòng)脈夾壓迫不表現(xiàn)出任何痛痛反應(yīng)時(shí)的劑量來確定止痛能力中痛覺喪失能力的ED50值(最大有效劑量的一半，ED50)。如表3所示，化合物1不顯示止痛活性，這表明被測(cè)試化合物不通過血腦屏障，被認(rèn)為是一種非止痛的化合物。而且，該化合物主要作用于外周δ類阿片受體。更重要的是，即使在50mg/kg的高劑量下，也沒有觀察到任何測(cè)試動(dòng)物的發(fā)作，表明化合物(1)主要限于外周δ受體。
表3 實(shí)施例7在閉塞Sprague-Dawley大鼠離體心臟左前降支(LAD)冠狀動(dòng)脈前約15分鐘，以1nM、2nM和10nM的濃度施用化合物1。通過大動(dòng)脈以Langendorff方式用充氧Krebs-Henseleit緩沖液逆行灌注離體心臟。由35分鐘局部缺血和隨后的120分鐘再灌注誘發(fā)梗塞。使6-0縫合線通過(LAD)冠狀動(dòng)脈的主分支以形成套圈。
通過拉緊LAD周圍的套圈引起局部缺血。在35分鐘缺血時(shí)間后，松開套圈，用充氧的生理緩沖液再灌注心臟120分鐘。在再灌注結(jié)束時(shí)重新拉緊LAD閉塞器，通過大動(dòng)脈向心臟中注射含0.125％伊文思藍(lán)的鹽水，以可視化非缺血區(qū)域。將心臟組織切片，用含1.5％氯化三苯四唑(TTC)的生理緩沖液染色15分鐘后估算梗塞的大小。在10％緩沖福爾馬林中固定后，將切片安裝在載波片之間，用掃描儀數(shù)字化獲得圖像。用Adobe Photoshop 5.0處理圖像。采用Optimas 6.2圖像分析軟件，用計(jì)算機(jī)化測(cè)面法測(cè)定非缺血區(qū)域、在危險(xiǎn)中的區(qū)域以及梗塞。
圖1顯示了一個(gè)這樣組的結(jié)果，其圖示了來自用1nM化合物1緊急治療后的對(duì)照和治療動(dòng)物的離體心臟組織中梗塞大小的組織學(xué)染色切片。發(fā)現(xiàn)相對(duì)于對(duì)照組的梗塞，預(yù)處理使梗塞大小減少71％。
表4顯示了以本制備中化合物1引起的在危險(xiǎn)中區(qū)域的百分比(％IS/AAR)表示的缺血性損害的減少。
表4
在對(duì)照條件下，35分鐘局部性缺血導(dǎo)致在危險(xiǎn)中區(qū)域的54.7±1.2％的細(xì)胞損傷。2nM化合物1產(chǎn)生最大的保護(hù)，防止了對(duì)照組中出現(xiàn)的幾乎90％的損傷。
表5中列出了局部性缺血35分鐘和120分鐘再灌注后測(cè)量的血液動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
表5
HRXDP，心率x形成壓；+dP/dt，收縮變力性(inotropy)；-dP/dt，lustitropy；CF，冠脈流量血液動(dòng)力學(xué)參數(shù)結(jié)果表明，未進(jìn)行藥理學(xué)預(yù)處理時(shí)在HRXDP參數(shù)中有61.8％的抑制，在收縮和舒張壓中至少有50％的抑制，伴有冠脈流量減小。相反，如果將動(dòng)物用本發(fā)明化合物1進(jìn)行預(yù)處理，心臟參數(shù)有很大改善。一般地說，心臟組織的機(jī)能為正常的至少75％，某些參數(shù)達(dá)90％。這些結(jié)果表明，當(dāng)在缺血事故前施用時(shí)，化合物1能夠起到心臟保護(hù)作用。
實(shí)施例8通過腹膜內(nèi)注射戊巴比妥鈉使測(cè)試動(dòng)物(大鼠)麻醉。沿中間胸骨線上反折皮膚，產(chǎn)生一個(gè)中線切口。通過嚙齒動(dòng)物呼吸器(Harvard嚙齒動(dòng)物呼吸器)用混有氧氣的空氣提供流通空氣。注意到和在有知覺的大鼠身上所看到一樣的正常胸廓擴(kuò)張。需要精密的解剖，通過用胸骨切開術(shù)用剪刀沿胸骨左側(cè)切穿肋骨至大約中胸骨的側(cè)切打開胸腔。在胸骨的最前面需要精密的解剖以避免大的雙側(cè)靜脈匯流。用5-0絲或單纖絲縫合線使胸腔收縮。用錐形針使7-0絲縫合線在距離正常定位的左心耳尖端1-3mm的冠狀動(dòng)脈左前支下面穿過進(jìn)行綁扎。將PE-10管的1-mm部分放置在容器的頂端，在管的頂端系一個(gè)結(jié)以閉塞冠狀動(dòng)脈。閉塞35分鐘后，通過用標(biāo)號(hào)11的手術(shù)刀片切斷PE-10管頂端的結(jié)進(jìn)行再灌注。在綁扎LAD冠狀動(dòng)脈前15分鐘，以0.1mg/kg或1.0mg/kg的劑量靜脈施用化合物1。通過在缺血和再灌注后用伊文斯藍(lán)和TTC染色2小時(shí)、24小時(shí)和167小時(shí)來測(cè)定梗塞大小。
將化合物1溶解在0.9％的鹽水中，并注射到測(cè)試動(dòng)物中。使LAD冠狀動(dòng)脈再閉塞，將專利藍(lán)染料注射到靜脈導(dǎo)管中將心臟正常灌注區(qū)域染色。切除心臟，去除左心室，并切成橫斷面的切片。這一過程可以使正常區(qū)域、非缺血區(qū)域、在危險(xiǎn)中的區(qū)域和梗塞大小可視化。將TTC用作指示劑以分開活組織和非活組織(Klein，H.H.，等.，VirchowsArch(1981)393287-297)。將組織在10％甲醛溶液中儲(chǔ)存過夜。次日，用實(shí)施例7中所描述的數(shù)字圖像技術(shù)將梗塞大小(IS)計(jì)算為在危險(xiǎn)中區(qū)域的百分比(％)。
發(fā)現(xiàn)相對(duì)于對(duì)照組，在用化合物1預(yù)處理的大鼠中梗塞大小明顯較小，如表6所示。
表6
用化合物1進(jìn)行預(yù)處理表明，相對(duì)于對(duì)照組，在緊急施用后梗塞大小減少48％。在初始治療約7天后，相對(duì)于沒有治療的對(duì)照組，梗塞大小仍顯示減少43％。
實(shí)施例9用Inactin(硫化布塔巴比妥鈉鹽，178mg/kg i.p.)或氨基甲酸乙酯(1.2g/kg i.p.)麻醉雄性大鼠。當(dāng)達(dá)到手術(shù)平面后，進(jìn)行氣管切開術(shù)(pe-240管)，將該動(dòng)物在頸靜脈(用于i.v.化合物和染料施用)和頸動(dòng)脈(用于測(cè)量血壓)中插入pe-50管，然后將動(dòng)物置于和氧氣源相連的呼吸機(jī)(Harvard，型號(hào)683)，在36-42bpm下進(jìn)行人工呼吸。將頸動(dòng)脈導(dǎo)管通過三通注射器閥門連接到PT300壓力傳感器，用于測(cè)量動(dòng)脈血壓和心率。在動(dòng)物已經(jīng)穩(wěn)定后，從頸動(dòng)脈導(dǎo)管中抽出少量血樣(150微升)，用于血內(nèi)氣體分析。
在第五肋間間隔進(jìn)行左胸廓切開術(shù)，然后進(jìn)行心包切開術(shù)和調(diào)整左心耳以顯示左冠狀動(dòng)脈的位置。使繃帶(6-0聚丙烯紡織纖維)通過左心耳下邊至左心室的右部分。縫合線末端穿過在一端裝有法蘭以形成圈套的聚乙烯管。通過拉緊縫合線和采用止血鉗將圈套夾在心外膜表面來閉塞冠狀動(dòng)脈。通過心外膜發(fā)紺和血壓降低來核實(shí)冠狀動(dòng)脈的閉塞。保持閉塞30分鐘，通過解夾套圈開始再灌注，通過顯示心外膜充血反應(yīng)證實(shí)。再灌注的時(shí)間為1.5-2小時(shí)。在再灌注期間的最后，用套圈再次閉塞冠狀動(dòng)脈，通過i.v.導(dǎo)管注射專利藍(lán)染料(.4Ml 10％w/v鹽水)。在染料已經(jīng)通過循環(huán)分散后，立即去除心臟?？焖俪バ姆亢陀倚氖?，將剩下的左心室切成4-5個(gè)切片。將定義為正常(染成藍(lán)色)的區(qū)域同危險(xiǎn)區(qū)域(AAR，未染成藍(lán)色)分離，并將組織放入盛有100mMKH2PO4和0.187％氯化2，3，5-三苯基四唑(TTC)的單獨(dú)20mL的小瓶?jī)?nèi)，在37℃下孵育5至10分鐘。然后將組織放在裝有10％緩沖甲醛溶液的單獨(dú)的小瓶中，過夜固定。從非梗塞區(qū)域分割出梗塞區(qū)域，用重量法測(cè)量正常；AAR、非梗塞；和梗塞組織。
在閉塞LAD前5分鐘(預(yù)缺血施用)通過i.v.導(dǎo)管以范圍從0.01mg/kg至1.0mg/kg的劑量注射化合物1。
在下表7中提供了由兩個(gè)單獨(dú)的實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果。
表7
在兩個(gè)測(cè)試研究中化合物1的施用一直到1.0mg/kg的劑量都產(chǎn)生了明顯的保護(hù)效果。對(duì)照組顯示了在危險(xiǎn)中區(qū)域(AAR)～50-55％的缺血損傷。以劑量高于0.1施用的化合物1在兩個(gè)研究中防止了這一損傷的約30至40％。
實(shí)施例10采用與實(shí)施例9中所述相同的實(shí)驗(yàn)方法，只是在解除閉塞LDA的繃帶前立即施用化合物1(即在初始缺血性損傷后和再灌注之前立即施用)。在該模型中以0.3mg/kg對(duì)化合物1進(jìn)行測(cè)試，顯示了明顯的保護(hù)效果。
對(duì)照缺血性損傷為危險(xiǎn)中區(qū)域的～50％，如實(shí)施例9中的對(duì)照組一樣。然而，當(dāng)在再灌注損害時(shí)施用化合物1防止了30-40％這樣的損傷，和實(shí)施例9中所描述的在缺血性損傷前形成對(duì)比。
**********盡管這里根據(jù)本發(fā)明的具體方面、特征和示例性實(shí)施方式描述了本發(fā)明，但可以理解到本發(fā)明的應(yīng)用不限于此，而是能擴(kuò)展到并包括大量的其它方面、特征和實(shí)施方式。因此，此后提出的權(quán)利要求書旨在能據(jù)此被廣泛認(rèn)為包括在其精神和范圍內(nèi)的所有這些方面、特征和
權(quán)利要求
1.一種治療缺血性損傷的治療組合物，該組合物包括有效量的下式的二芳基甲基哌嗪化合物或其藥學(xué)上可接受的酯或鹽 其中Z選自下列基團(tuán)氫；鹵素；C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基；C1-C6鹵代烷基；C1-C6烷氧基；C3-C6環(huán)烷氧基；具有式SR8的硫化物，其中R8為C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C6環(huán)烷基、具有C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳基烷基、或C5-C10芳基；具有式SOR8的亞砜，其中R8同上所述；具有式SO2R8的砜，其中R8同上所述；腈；C1-C6?；痪哂惺絅HCO2R8的烷氧羰基氨基(氨基甲?；?，其中R8同上所述；羧酸、或其酯、酰胺或鹽；具有式CH2NR9R10的氨甲基，其中R9和R10相同或不同，并且可以為氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C2-C6羥烷基、C2-C6甲氧烷基、C3-C6環(huán)烷基或C5-C10芳基，或者R9和R10共同形成5或6個(gè)原子的環(huán)，環(huán)上的原子選自N和C；具有式CONR9R10的氨甲?；渲蠷9和R10同上所述，或其C2-C30肽共軛物；和具有式SO2NR9R10的磺酰胺，其中R9和R10同上所述；和X選自氫、羥基、鹵素和烷氧基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中組合物還包括有效量的用于治療心臟疾病的第二種化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中第二種化合物選自硝酸鹽、β-腎上腺素阻斷劑、鈣通道拮抗劑、ACE抑制劑、非肽血管緊張素II拮抗劑、IIb/IIIa拮抗劑和阿司匹林。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的組合物，其中第二種化合物和二芳基甲基哌嗪化合物同期施用。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所述二芳基甲基哌嗪化合物為非止痛化合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其中所述二芳基甲基哌嗪化合物主要作用于外周δ類阿片受體。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中二芳基甲基哌嗪化合物在與缺血事故發(fā)作同時(shí)、缺血發(fā)作前、手術(shù)前、或缺血事故發(fā)作后施用。
8.一種減輕患者缺血性損害的方法，該方法包括施用有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的組合物。
9.一種治療缺血性損害的治療組合物，該組合物包括有效量的下式的非止痛的二芳基甲基哌嗪化合物 或其藥學(xué)可接受的酯或鹽。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的組合物，其中組合物還包含用于調(diào)和保護(hù)性或矯正性心臟反應(yīng)或活性的第二種化合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的組合物，其中第二種化合物選自硝酸鹽、β-腎上腺素阻斷劑、鈣通道拮抗劑、ACE抑制劑、非肽血管緊張素II拮抗劑、IIb/IIIa拮抗劑和阿司匹林。
12.根據(jù)權(quán)利要求10的組合物，其中第二種化合物和二芳基甲基哌嗪化合物同期施用。
13.根據(jù)權(quán)利要求9的組合物，其中非止痛的二芳基甲基哌嗪化合物在與缺血事故發(fā)作同時(shí)、缺血發(fā)作前、手術(shù)前、或缺血事故發(fā)作后施用。
14.一種減輕患者缺血性損害的方法，該方法包括施用有效量的包含下式的非止痛二芳基甲基哌嗪化合物的治療組合物 或其藥學(xué)可接受的鹽或酯。
15.一種治療缺血性損害的治療組合物，該組合物包括有效量的下式的非止痛二芳基甲基哌嗪化合物 或其藥學(xué)可接受的酯或鹽。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，其中組合物還包括用于調(diào)和保護(hù)性或矯正性心臟反應(yīng)或活性的第二種化合物。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中第二種化合物選自硝酸鹽、β-腎上腺素阻斷劑、鈣通道拮抗劑、ACE抑制劑、非肽血管緊張素II拮抗劑、IIb/IIIa拮抗劑和阿司匹林。
18.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中組合物還包括藥學(xué)可接受的載體。
19.根據(jù)權(quán)利要求15的組合物，其中二芳基甲基哌嗪化合物在與缺血事故發(fā)作同時(shí)、缺血發(fā)作前、手術(shù)前、或缺血事故發(fā)作后施用。
20.一種減輕心臟組織缺血性損害的方法，該方法包括給所述哺乳動(dòng)物施用有效量的下式的非止痛二芳基甲基哌嗪化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽或酯。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中在缺血事故發(fā)作的同時(shí)多次施用二芳基甲基哌嗪化合物。
22.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中二芳基甲基哌嗪化合物作為預(yù)防療法給患者施用，以防止處于缺血性心臟病癥狀階段的個(gè)體的疾病發(fā)展。
23.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中二芳基甲基哌嗪化合物在缺血事故發(fā)作后施用。
24.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，該方法還包括施用實(shí)現(xiàn)保護(hù)性或矯正性心臟反應(yīng)的第二種化合物。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，其中第二種化合物選自硝酸鹽、β-腎上腺素阻斷劑、鈣通道拮抗劑、ACE抑制劑、非肽血管緊張素II拮抗劑、IIb/IIIa拮抗劑和阿司匹林。
26.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，其中第二種化合物和二芳基甲基哌嗪化合物同期施用。
27.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中二芳基甲基哌嗪化合物以選自以下的給藥方式施用腸胃外、非腸胃外、口服、直腸、局部、鼻、眼、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、透皮、脊椎、鞘內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、蛛網(wǎng)膜下、舌下、口腔粘膜、支氣管、淋巴和子宮內(nèi)給藥。
28.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中哺乳動(dòng)物為人。
29.一種離體器官用的保存溶液，該溶液包含下式的化合物 或其藥學(xué)可接受的鹽或酯。
30.權(quán)利要求29的溶液，其中離體器官選自心臟、肝臟、腎臟、角膜、肺及其組合。
31.一種防止哺乳動(dòng)物缺血和再灌注損害的方法，該方法包括給哺乳動(dòng)物施用有效量的下式的δ類阿片受體激動(dòng)劑 或其藥學(xué)可接受的酯或鹽；和實(shí)現(xiàn)抗缺血效果的第二種化合物。
32.權(quán)利要求31的方法，其中第二種化合物為鹽酸精氨酸。
33.一種實(shí)現(xiàn)患者心臟組織缺血預(yù)處理的方法，該方法包括給患者施用有效量的下式的二芳基甲基哌嗪化合物 或其藥學(xué)可接受的酯或鹽。
34.權(quán)利要求33的方法，其中化合物以選自以下的給藥方式施用腸胃外、非腸胃外、口服、直腸、局部、鼻、眼、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、透皮、脊椎、鞘內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、蛛網(wǎng)膜下、舌下、口腔粘膜、支氣管、淋巴和子宮內(nèi)給藥。
35.根據(jù)權(quán)利要求33的方法，該方法還包括施用實(shí)現(xiàn)保護(hù)性或矯正性心臟反應(yīng)的第二種化合物。
36.根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中第二種化合物選自硝酸鹽、β-腎上腺素阻斷劑、鈣通道拮抗劑、ACE抑制劑、非肽血管緊張素II拮抗劑、IIb/IIIa拮抗劑和阿司匹林。
37.根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中第二種化合物和二芳基甲基哌嗪化合物同期施用。
38.一種防止患者潛在缺血且不引起患者的受體調(diào)和痛覺喪失的方法，該方法包括施用有效量的權(quán)利要求33的二芳基甲基哌嗪化合物。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的方法，其中患者為人。
40.根據(jù)權(quán)利要求39的方法，其中二芳基甲基哌嗪化合物通過口服施用。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過采用調(diào)和缺血預(yù)處理心臟保護(hù)效果的非肽δ類阿片受體激動(dòng)劑化合物用于心臟保護(hù)的組合物和治療方法。該化合物用于減輕和心臟組織缺血和再灌注相關(guān)的損害。而且，所述化合物可在保存離體器官活性的溶液中使用。
文檔編號(hào)A61K31/495GK1697657SQ200480000012
公開日2005年11月16日 申請(qǐng)日期2004年1月2日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月2日
發(fā)明者張寬仁, 威廉·彭德格斯特, 彼得·J·真戈, 馬欣 申請(qǐng)人:安達(dá)制藥公司