專利名稱：具有心血管活性的n-芳基取代-1h-吡咯衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有心血管活性的N-芳基取代-1H-吡咯衍生物，具體為N-[4-(取代芳雜環(huán)甲基)苯基]-1H-取代吡咯類化合物、含有所述化合物的藥物組合物和所述化合物在治療高血壓、充血性心衰以及通過阻斷血管緊張素II(AII)受體來治療其它疾病或病癥中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
血管緊張素II(AII)受體拮抗劑是近年來研究開發(fā)的一種重要的治療高血壓和充血性心衰的藥物，因?yàn)槠渥饔冒悬c(diǎn)不同于臨床上正在應(yīng)用的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑(如卡托普利、依那普利等)，因此它們不具有ACE抑制劑所引起的血管水腫、干咳等副作用，更容易為高血壓患者，特別是老年患者所接受，具有療效好，副作用小，安全可靠的特點(diǎn)。(參見Levens NR，et al，Pharmacol Toxicol，1992，71241～245；Duncia JV，et al，Med Res Rev，1992，12149-158；Ashton WT，Exp.Opin.Invest.Drugs 1994，3，1105；Burnier，M.Circulation 2001，103，904)目前已經(jīng)開發(fā)上市的一些AII受體拮抗劑類藥物(如氯沙坦、纈沙坦等)分子中均含有聯(lián)苯四氮唑的結(jié)構(gòu)，其制備過程中需使用選擇性保護(hù)基，以及價(jià)格昂貴的其它原輔材料，且反應(yīng)步驟較多，并需要多種原材料。(參見Stephen PW，et al，Synthetic Communications，1992，22(20)2971～2977；Diabe HB，et al，Heterocycles，1993，35(1)121～123；Ronald KR，etal，J Org Chem，1993，58(19)5023～5024；EP 0470795A，1992-12-02；Carini DJ，et al，US5138069(1988，1992 both to Du Dont)；Carini DJ，et al，EP 253310；Carini DJ，et al，J Med Chem，1991，34(8)2525-2543)。

發(fā)明內(nèi)容
為尋找制備方便，并具有更佳心血管活性的A II受體拮抗劑類新藥，本發(fā)明找到了N-[4-(取代芳雜環(huán)甲基)苯基)-1H-取代吡咯類結(jié)構(gòu)的新化合物，從而提供了一系列具有通式(I)結(jié)構(gòu)特性的衍生物。通式(I)拓展了現(xiàn)有AII受體拮抗劑類藥物的結(jié)構(gòu)特征和結(jié)構(gòu)范圍。
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是研究新結(jié)構(gòu)類型的具有A II受體拮抗活性的化合物，并進(jìn)一步提供一種治療高血壓、充血性心衰及其它疾病或病癥的藥物組合物，其療效優(yōu)于現(xiàn)有藥物氯沙坦。本發(fā)明的另一目的是提供上述藥用組合物在制備通過阻斷AII受體來治療其它疾病或病癥的藥物方面的用途。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案通式(I)的化合物或其可藥用鹽 其中Ar表示雜芳基或雜環(huán)基，且通過雜原子與N-(4-甲基苯基)-1H-取代吡咯結(jié)構(gòu)中的甲基相連；X選自氫、(C1-C6)直鏈或支鏈的烷基、(C2-C6)直鏈或支鏈的鏈烯基、(C2-C6)直鏈或支鏈的炔基、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷氧基，X與Ar表示的雜芳基或雜環(huán)基中的碳原子直接相連；Y選自氫、(C1-C6)直鏈或支鏈的烷基、三員、四員、五員或六員環(huán)烷基、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷氧基、苯基、羥基、醛基、羧基、酯基、胺基、酰胺基，Y與Ar表示的雜芳基或雜環(huán)基中的碳原子或雜原子直接相連；Y可被進(jìn)一步取代；R1選自羧基、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷基羧基、四氮唑基、N-烷基取代四氮唑基、羧烷基氨甲?；⑼榛被酋；?、氨磺?；⑼檠豸驶坊酋；?、芳基胺磺酰基；R2選自氫、鹵素。
通式(I)的化合物或其可藥用鹽，其中Ar表示雜芳基或雜環(huán)基為含1～3個(gè)選自N或O的雜原子的芳雜環(huán)取代基；X選自氫或(C1-C4)直鏈或支鏈的烷基，(C1-C4)直鏈或支鏈的烷氧基；X與Ar中兩個(gè)雜原子之間的碳原子直接相連；Y選自氫、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷基、三員、四員、五員或六員環(huán)烷基、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷氧基、苯基、羥基、醛基、羧基、酯基、胺基、酰胺基，Y被下述基團(tuán)取代鹵素、羥基、羧基、酯基、硝基、氰基、任選被1-3個(gè)氟原子取代的(C1-C4)直鏈或支鏈的烷基；Y與Ar表示的雜芳基或雜環(huán)基中的碳原子或雜原子直接相連；Ar上X與Y的相對位置為間隔1-3個(gè)原子；R1與R2之間相隔1-2個(gè)原子。
所述通式(I)的化合物或其可藥用鹽，其中R1選自(C1-C4)直鏈的烷基羧基、N-(C1-C4)烷基取代四氮唑基、(C1-C4)羧烷基氨甲?；?、N-(C1-C4)烷基氨磺?；?、氨磺酰基、(C1-C4)烷氧羰基胺磺?；?、芳?；坊酋；?；R2選自氫、氯、溴、碘；R1與R2分別在N原子的鄰位取代；其中Ar為含1-3個(gè)選自N或O的雜原子的五員、六員、九員或十員雜芳基或雜環(huán)基；X選自氫、(C1-C4)直鏈烷基、(C1-C4)直鏈烷氧基；Y選自氫、C4直鏈烷基、四員、五員或六員環(huán)烷基、C4直鏈烷氧基、苯基、羥基、羧基、酯基、胺基、酰胺基；Y被鹵素、硝基、氰基、任選被1-3個(gè)氟原子取代的(C1-C4)直鏈烷基取代。
通式(I)中較好的化合物或其可藥用鹽是R1選自(C1-C2)直鏈烷基羧基、N-(C1-C2)取代四氮唑基、(C1-C2)羧烷基氨甲酰基、C4烷基氨磺?；?、氨磺?；?C1-C4)烷氧羰基胺磺?；?、芳甲酰胺磺?；籖2選自氫、氯、溴。
通式(I)中較好的化合物或其可藥用鹽還有Ar選自含2個(gè)N的五員雜芳基、含3個(gè)N的五員雜芳基、含2個(gè)N的六員雜芳基、含3個(gè)N的十員雜芳基、含2個(gè)N的九員雜芳基、含1個(gè)N的十員雜芳基、含2個(gè)N的十員雜芳基、含1個(gè)N及1個(gè)O的六員雜環(huán)基；Y選自氫、四員、五員或六員環(huán)烷基、苯基、羧基、酯基、胺基、酰胺基，Y與芳雜環(huán)中的碳或氮原子直接相連；Y被氯、溴、硝基、氰基、三氟甲基取代，或者同時(shí)被二個(gè)氯原子取代。
通式(I)的化合物或其可藥用鹽更為理想的是其中Ar選自咪唑基、苯駢咪唑基、咪唑駢吡啶基、1，2，3-三唑啉酮基、喹啉基、嘧啶基、吡啶駢嘧啶基、嗎啉基、喹唑酮基；R1選自羧基、四氮唑基、羧甲基氨甲?；?、叔丁基氨磺?；?、氨磺酰基、(C1-C2)烷氧羰基胺磺酰基、苯甲酰胺磺酰基；R2選自氫、溴。
前述通式(I)中最為理想的化合物或其可藥用鹽選自其中Ar表示苯駢咪唑基、1，2，3-三唑啉酮基，吡啶駢咪唑基；Y表示氫、五員或六員環(huán)烷基、苯基、羧基、酯基、胺基或酰胺基；Y被氯、硝基、三氟甲基或者同時(shí)被二個(gè)氯原子取代；X表示(C1-C4)直鏈烷基、(C1-C4)直鏈烷氧基；R1表示羧基或四氮唑基；R2表示氫或溴。
本發(fā)明包括一種用于治療哺乳動物，優(yōu)選于治療人類疾病或病癥的藥物組合物，其包括治療高血壓、充血性心衰、心肌肥厚、血管痙攣和通過阻斷血管緊張素II(AII)受體來治療其它疾病或病癥的有效量的通式(I)的化合物或其鹽和可藥用載體。
本發(fā)明還包括通式(I)的化合物或其鹽在制備治療高血壓、充血性心衰、心肌肥厚、血管痙攣或利尿藥以及通過阻斷A II受體來治療其它病癥的藥物中的應(yīng)用。
在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，Ar是苯駢咪唑基，Y是氫、羧基或酯基，X是未取代的(C1-C6)烷基。X與Ar中的碳原子直接相連。更優(yōu)選X是(C1-C4)烷基。Y是羧基或酯基，Y與Ar中的碳原子直接相連。R1為羧基或四氮唑基。優(yōu)選四氮唑基。R2選自氫或溴，優(yōu)選氫。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及上述式(I)化合物或其可藥用鹽，但Ar選自1，2，3-三唑啉酮基，Y選自氫、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、苯基，優(yōu)選苯基，且Y可以進(jìn)一步被鹵素、硝基、三氟甲基取代。優(yōu)選被硝基、三氟甲基或氯取代。X是(C3-C4)烷基。R1為羧基或四氮唑基。R2選自氫或溴。
在一個(gè)更為優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及上述式(I)化合物或其可藥用鹽，其中Ar選自1，2，3-三唑啉酮基，X為C4烷基，X與Ar中的碳原子直接相連。Y選自苯基，Y與Ar中的氮原子直接相連，且Y進(jìn)一步被氯取代。優(yōu)選Y同時(shí)被兩個(gè)氯原子取代。R1為四氮唑基。R2選自氫。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及上述式(I)化合物或其可藥用鹽，Ar選自咪唑駢吡啶基，Y是氫、胺基或酰胺基，X是未取代的(C1-C6)烷基。優(yōu)選X為(C1-C4)烷基。Y為胺基或酰胺基。R1為羧基或四氮唑基。R2選自氫、氯或溴。優(yōu)選氫或溴。
在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及上述式(I)化合物或其可藥用鹽，Ar選自咪唑駢吡啶基，X為C4烷基，X與Ar中的碳原子直接相連，Y為酰胺基，并與Ar中的碳原子直接相連，R1為四氮唑基，R2選自氫。
式(I)化合物可以根據(jù)下述反應(yīng)圖解和描述制備。除非另外說明，在下文圖解和描述中的Ar、X、Y、R1、R2以及式(I)的結(jié)構(gòu)與上文相同。
反應(yīng)解1
反應(yīng)解2
反應(yīng)解3 參照反應(yīng)圖解1，在酸性條件下，由2，5-二甲氧基-四氫呋喃(II)，與對甲苯胺環(huán)合，形成相應(yīng)的式(III)化合物，(通常在諸如多聚磷酸、冰醋酸、丙酸的酸性介質(zhì)中，優(yōu)選在冰醋酸中，在約0～150℃下進(jìn)行上述反應(yīng)1～3天，優(yōu)選在100～150℃進(jìn)行上述反應(yīng)3h。當(dāng)L＝CN時(shí)，式(III)可經(jīng)Vilsmeyer法鄰位甲?；?，成肟，脫水制得相應(yīng)的式(IV)化合物(參見Philipe RB，et al，J Med Chem，1993，36101～110)。
其中甲?；磻?yīng)在-20～-10℃條件下，加入N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和三氯氧磷(POCl3)，在0～60℃，優(yōu)選在室溫下，加入式(III)化合物和DMF。POCl3與式(III)化合物的摩爾比為2.5～1.2，較優(yōu)選的摩爾比為2.0～1.0。在二甲亞砜(DMSO)，N，N-二甲基乙酰胺(DMA)，N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)或DMF的極性溶劑中，在0～120℃進(jìn)行上述反應(yīng)1～2天，優(yōu)選在100～120℃反應(yīng)3h。將所得式(III)的甲?；镉诩状?、乙醇和/或二氧六環(huán)中，與經(jīng)堿性物質(zhì)處理過的鹽酸羥胺反應(yīng)成肟，上述堿性物質(zhì)為NaHCO3、KHCO3或Na2CO3，較優(yōu)選的是Na2CO3。反應(yīng)溫度為0～100℃，反應(yīng)時(shí)間1天，較優(yōu)選的為50～100℃，反應(yīng)時(shí)間5h。隨后，將式(III)化合物的肟基取代物在無水的極性溶液中，加少量堿，經(jīng)碳酸二酯脫水處理得式(IV)化合物，或在醋酐溶劑中，0～150℃反應(yīng)10小時(shí)，較優(yōu)選的是在醋酐中回流1～3h獲得式(IV)化合物。
采用合適的鹵代方法，可以將式(IV)化合物上引入單取代鹵素R2制備式(Va)化合物，例如，在自由基引發(fā)劑(如光照過氧化物、偶氮二異丁腈)的條件下，用N-溴-丁二酰亞胺(NBS)，N-溴-肽酰亞胺(NBP)，N-氯-丁二酰亞胺(NCS)和/或N-碘-丁二酰亞胺(NIS)在非極性惰性溶劑(諸如四氯化碳、氯仿、苯、石油醚)中進(jìn)行鹵取代反應(yīng)，制得式(Va)化合物。
采用本技術(shù)領(lǐng)域的公知方法，將式(IV)化合物溶于甲醇、乙醇和/或乙二醇中，經(jīng)堿性水解，酸化，酰化，酯化制備式(Vb)化合物。上述制備方法中，堿性物質(zhì)為醇鈉、醇鉀、氫氧化鉀和/或氫氧化鈉。?；瘎轷Ｂ?、酰溴，在0～50℃范圍內(nèi)進(jìn)行酰化反應(yīng)，較好的溫度是室溫。酯化反應(yīng)的溶劑可以是甲醇和/或乙醇，溫度范圍為-10～40℃。
如反應(yīng)圖解2所述，選取不同取代的芳雜環(huán)化合物式(VI)與上述反應(yīng)圖解1中獲得的式(Va)化合物進(jìn)行反應(yīng)，制備式(I)目標(biāo)產(chǎn)物。其中式(VI)化合物是市售的或可由本領(lǐng)域一般技術(shù)人員已知方法制得的中間體化合物，在堿存在下，式(VI)化合物與式(Va)化合物進(jìn)行N-烷基化反應(yīng)，形成相應(yīng)的式(VII)化合物(參見Ronald KR，et al，J Org Chem，1993，585023～5024)。通常在以下極性溶劑中反應(yīng)，如二甲基亞砜(DMSO)，N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，N，N-二甲基乙酰胺(DMA)或N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)的極性溶劑中，優(yōu)選在DMF中，在0～100℃反應(yīng)1天，更優(yōu)選在25～50℃進(jìn)行上述反應(yīng)2h。合適的堿包括無水碳酸鈉(Na2CO3)、無水碳酸鉀(K2CO3)、氫氧化鈉(NaOH)、氫氧化鉀(KOH)、氫化鈉(NaH)。其中優(yōu)選NaH。
式(VII)化合物在特定的試劑和條件下，諸如甲苯或二甲苯的惰性溶劑中，與三丁基氯化錫或三甲基氯化錫、疊氮鈉一起加熱回流1～3天，經(jīng)1，3-偶極加成反應(yīng)，酸性水解制得目標(biāo)產(chǎn)物(I)。所采用的特定的用于上述轉(zhuǎn)化的試劑和條件，例如，David JC，et al，J Med Chem，1991，34(8)2525～2543和Duncia JV，et al，J Med Chem，1990，33，1312～1329所述。
參照反應(yīng)圖解3，按上述方法獲得不同取代的芳雜環(huán)化合物式(VI)，將式(VI)與上述反應(yīng)圖解1中制得的式(Vb)化合物，用與上述類似的將式(Va)轉(zhuǎn)化成式(VII)化合物的方法，進(jìn)行N-烴化反應(yīng)，在極性溶劑N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或N，N-二甲基乙酰胺(DMA)中，優(yōu)選在DMF中，在NaH存在下于25～50℃進(jìn)行上述反應(yīng)2～3h，制備式(VIII)化合物。由化合物式(VIII)在NaOH與甲醇溶液介質(zhì)中進(jìn)行水解反應(yīng)2～8h，其中NaOH溶液的濃度為5％～30％，優(yōu)選5％～10％，NaOH與甲醇的體積比為1∶3。較優(yōu)選的是1∶2。反應(yīng)合適的溫度為50℃～100℃，優(yōu)選在回流狀態(tài)下進(jìn)行反應(yīng)。本領(lǐng)域一般技術(shù)人員可以將式(VIII)化合物的羧酸酯衍生物轉(zhuǎn)化成式(I)目標(biāo)產(chǎn)物。
采用常規(guī)方法，用一化學(xué)當(dāng)量的可藥用堿處理相應(yīng)游離酸的溶液或懸浮液，可以制得式(I)化合物的可藥用鹽，可以列舉的堿是鈉、鉀和鈣。
化合物的選擇性與作用強(qiáng)度研究實(shí)驗(yàn)方法根據(jù)(Edwards RM，et al，J Pharmocol ExpTher，1992，260175-181)和(Lather C，et al，J Pharmocol Exp Ther，1993，265826-831)用木棒猛擊家兔頭部，將其擊昏，手術(shù)迅速暴露心臟，分離主動脈，盡量靠近心臟處剪取胸主動脈，置于飽和氧的Kerbs液中(mmol/LNaCl 118，KCl 4.7，CaCl21.7，NaHCO325，MgSO4·7H2O 1.2，KH2PO441.2，Glucae 10.1 PH＝7.4)，去除血管周圍的結(jié)締組織，剪成3-4mm寬的動脈環(huán)，置于37℃的恒溫水浴槽中，通氧。動脈環(huán)連于張力換能器，通過自動平衡記錄儀記錄收縮反應(yīng)，每隔20min換一次培養(yǎng)液，平衡1.5h，待基線穩(wěn)定后開始實(shí)驗(yàn)。
新化合物半數(shù)抑制濃度(IC50)測定的方法(根據(jù)Cazaubou C，et al，J Pharmocol Exp Ther.，1993，265812-818)AII受體拮抗劑的IC50一般以其抑制動脈環(huán)對10nmAII(相當(dāng)于90％)的收縮反應(yīng)能力來測定，每隔40min用AII刺激一次，以第二次AII刺激引起的最大收縮反應(yīng)為對照，并以Kerbs液洗至基線，加入AII受體拮抗劑類的新化合物孵育30min后加入10nmAII，刺激動脈環(huán)，達(dá)到最大收縮。
腎性高血壓大鼠(RHR)模型的制備方法
本試驗(yàn)采用“二腎一夾”型高血壓病理模型(參見徐叔云等，藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，第二版1991816-820)。雄性SD大鼠(180-200g)稱重后，腹腔注射戊巴比妥鈉(45mg/kg)麻醉后，俯臥位固定，剪去背側(cè)部毛(肋骨下緣)，先后用酒精和碘酒消毒皮膚。剪開腰背部皮膚，從腰肌和腹肌交界處分開，暴露腎臟，用沙氏鑷輕輕拉住腎臟，用玻璃分針分開脂肪，暴露腎動脈，再用玻璃分針在遠(yuǎn)處分離與腎動脈伴行的腎靜脈，以及結(jié)締組織膜，用彎眼科無齒鑷從下將腎動脈獨(dú)立出來，在近主動脈端將內(nèi)徑為0.2mm的動脈環(huán)套上，用棉線扎緊小環(huán)，以動脈環(huán)尚能前后移動為佳。把腎放入原位，依次縫合肌肉和皮膚，傷口處滴上慶大霉素注射液，并用2萬單位的青霉素連續(xù)腹腔注射三天，以防感染，術(shù)后三周，大鼠血壓明顯升高，表明“二腎一夾”型高血壓病理模型造模成功。
化合物對清醒RHR血壓的影響實(shí)驗(yàn)方法(參見傅繼華等，中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào)1995，26(4)230-233；徐叔云等，藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，第二版1991804-811)采用大鼠尾動脈脈搏測壓法，心臟收縮產(chǎn)生壓力，驅(qū)動血液在血管內(nèi)運(yùn)行的同時(shí)，對血管壁也產(chǎn)生壓力，此壓力可通過皮下組織傳至皮膚。在大鼠尾根部套上加壓袖口，當(dāng)壓力加大到超過收縮壓時(shí)，血流通過中斷；壓力逐漸降低到等于或稍低于收縮壓時(shí)，血流通過，血壓脈搏出現(xiàn)；繼續(xù)減壓至舒張壓時(shí)，脈搏恢復(fù)加壓前水平；檢測這種脈搏進(jìn)化時(shí)的瞬間壓力，即得血壓值。脈搏訊號可通過壓力換能器檢測并自動顯示。實(shí)驗(yàn)室溫度保持在20℃以上，大鼠放入專門設(shè)計(jì)的大鼠測壓固定器內(nèi)。將大鼠尾依次穿過尾套和脈搏換能器，將其腹面平放于傳感器上，并壓上固定的壓片，調(diào)整尾巴位置和儀器增益，使尾動脈脈搏足夠大。用手泵大氣加壓，使尾套內(nèi)壓力升高至主脈搏完全消失，在加壓2.66-3.99Kpa(20-30mmHg)，然后緩緩放氣減壓至脈搏訊號恢復(fù)起始水平，記錄血壓。
化合物逆轉(zhuǎn)心肌肥厚作用的研究方法參見文獻(xiàn)方法(RonaG，et al，Am.Physiol.，1995，67443-445)，略作改進(jìn)造模，連續(xù)每日以20、10及5mg/kg劑量遞減皮下注射異丙腎上腺素，再以3mg/kg維持S.C.7日，第7天開始尾靜脈注射受試藥，造模結(jié)束后，大鼠摘眼球取血，制備血清，處死大鼠測心臟重量，左心室壁厚及重量，取心尖部以戊二醛固定，作電鏡組織學(xué)觀察，剩余右心室肌作組織勻漿，分別測定心肌蛋白含量，心肌丙二醛(MDA)含量，心肌超氧化歧化酶(SOD)及血清乳酸脫氫酶(LDH)活力，計(jì)算心臟重量參數(shù)。
藥理實(shí)驗(yàn)證明式(I)化合物在抑制AII誘發(fā)的兔主動脈收縮反應(yīng)模型中具有較好的生物活性，且在10-5M的AII存在下，對去甲腎上腺素，氯化鉀的濃度-收縮效應(yīng)曲線不產(chǎn)生影響，說明它們是選擇性的AT1受體拮抗劑。
藥理實(shí)驗(yàn)表明在樣品劑量為3～10mg/kg時(shí)，式(I)化合物靜注或口服給藥均能劑量依賴性地降低腎型高血壓大鼠的血壓，作用時(shí)間持續(xù)24h以上。
初步生物活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示式(I)化合物中有6個(gè)化合物對AII引起的兔主動脈環(huán)收縮抑制生物活性大于陽性藥氯沙坦，具體結(jié)果見表1。
表1部分實(shí)施例對AII引起的兔主動脈環(huán)收縮抑制活性組別 IC50(M)氯沙坦 2.4×10-8實(shí)施例13 8.2×10-9實(shí)施例16 1.5×10-8實(shí)施例21 1.2×10-8實(shí)施例22 1.0×10-9實(shí)施例24 6.7×10-9實(shí)施例29 7.3×10-9具體實(shí)施方式
下面實(shí)施例說明式(I)化合物的制備，所有溫度都是℃。
實(shí)施例11-(4-甲基苯基)-1H-吡咯將2，5-二甲氧基-四氫呋喃(25g，0.19mol)，對甲苯胺(20.6g，0.19mol)溶于冰HAc 80ml中，加熱回流3h，濃縮，殘余物進(jìn)行水蒸汽蒸餾，制得白色晶體標(biāo)題化合物23g(76％)，mp.80～82℃。
實(shí)施例21-(4-甲基苯基)-2-甲?；?1H-吡咯無水條件下，將DMF(20g，0.28mol)冰鹽浴冷卻，緩慢滴加POCl3(43g，0.28mol)，滴畢，升至室溫，攪拌20min，再向其中滴入1-(4-甲基苯基)-1H-吡咯(22g，0.14mol)的DMF溶液100ml，滴畢，在100～120℃反應(yīng)3h。冷卻，倒入冰中，以10％NaOH調(diào)PH＝9，乙酸乙酯60ml×3萃取，無水Na2SO4干燥，濃縮得紅色油狀物，為標(biāo)題化合物22g(81％)，直接用于下一步反應(yīng)。
實(shí)施例31-(4-甲基苯基)-2-肟基-1H-吡咯將上述紅色油狀物(15g，0.08mol)溶于甲醇110ml中，加熱回流，滴加溶于鹽酸羥胺(5.6，0.08mol)和Na2CO3(8.5，0.08mol)的水溶液55ml，滴畢，回流5h，抽濾，蒸除甲醇，殘余物用乙酸乙酯50ml×3提取，無水Na2SO4干燥，濃縮得黃色油狀物，為標(biāo)題化合物14g(90％)。
實(shí)施例41-(4-甲基苯基)-1H-吡咯-2-腈將上述黃色油狀物(14g，0.07mol)溶于Ac2O 60ml中，回流3h，濃縮，快速柱層析(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶10)，得白色晶體標(biāo)題化合物10g(80％)，mp.56～57℃。
IR(KBr)vcm-12250實(shí)施例51-(4-溴甲基苯基)-1H-吡咯-2-腈將1-(4-甲基苯基)-1H-吡咯-2-腈(9.2g，0.05mol)，NBS(9.8g，0.055mol)，溶于CCl4120ml中，加入AIBN(0.5g，3mmol)，回流3h，冷卻，抽濾，濃縮，殘留物以石油醚/乙酸乙酯研磨，得白色固體標(biāo)題化合物(11.6g，89％)，mp.70～73℃。
FABMS261(M+1)1HNMR(CDCl3)δ4.50(s，2H)，6.32(m，1H)，6.85～7.30(m，6H)實(shí)施例61-(4-甲基苯基)-1H-吡咯-2-羧酸將1-(4-甲基苯基)-1H-吡咯-2-腈(7.3g，40mmol)，乙二醇60ml和KOH 20g混合，升溫至165℃，攪拌反應(yīng)4h，倒入冰水中，濃鹽酸調(diào)PH＝4，抽濾得白色固體標(biāo)題化合物8.5g(98％)，mp.181～183℃IR(KBr)cm-12554，1680，1597，15141HNMR(CDCl3)δ2.37(s，3H)，6.24(m，1H)，6.85～7.28(m，6H)，11.15(d，1H)實(shí)施例71-(4-甲基苯基)-1H-吡咯-2-羧酸甲酯將1-(4-甲基苯基)-1H-吡咯-2-羧酸(6.1g，30mmol)分批加入氯化亞砜30ml中，25℃攪拌4h，減壓蒸除氯化亞砜，再加苯蒸餾帶盡殘余氯化亞砜，得淡黃色油狀物1-(4-甲基苯基)-1H-吡咯-2-甲酰氯，冰浴下滴加無水甲醇30ml至上述化合物中，室溫?cái)嚢?h，濃縮至干，殘余物溶于乙酸乙酯，水洗，無水Na2SO4干燥，濃縮，加入石油醚研磨，析出白色固體固體標(biāo)題化合物6g(92％)，mp 73～74℃。
IR(KBr)cm-12960，1700，1620，1520，8201HNMR(CDCl3)δ2.38(s，3H)，3.68(s，3H)，6.25(m，1H)，6.85～7.36(m，6H)實(shí)施例81-(4-溴甲基苯基)-1H-吡咯-2-羧酸甲酯將1-(4-甲基苯基)-1H-吡咯-2-羧酸甲酯(4.3g，20mmol)溶于CCl480ml中，加入NBS(3.6g，20mmol)，AIBN(0.22g，1.41mmol)，回流反應(yīng)10h，冷卻過濾，濾液濃縮至干，加入乙酸乙酯和石油醚研磨，得淡黃色固體固體標(biāo)題化合物3.8g(65％)，mp 82～84℃。
1HNMR(CDCl3)δ3.70(s，3H)，4.50(s，2H)，6.26(m，1H)，6.8～7.5(m，6H)實(shí)施例92-乙酰氨基苯甲酸乙酯將鄰氨基苯甲酸乙酯(12.5g，76mmol)溶于吡啶50ml，冰浴冷卻，緩慢滴入乙酰氯(6g，76mmol)的甲苯溶液30ml，約1.5h滴完，撤去冰浴，于室溫下攪拌3h，抽濾，濾液濃縮，加入適量的水研磨，即得淡黃色固體標(biāo)題化合物14.2g(90％)，mp 68～70℃。
IR(KBr)vcm-13256、2978、1709、1686、1606、1592實(shí)施例103-硝基-2-(N-乙酰胺基)苯甲酸乙酯在三頸瓶中加入乙酸酐50ml，攪拌下，加入發(fā)煙硝酸(2.8ml，0.04mol)，溫度穩(wěn)定后，加1滴濃硫酸，再分批加入2-乙酰氨基苯甲酸乙酯(4g，0.02mol)，控制溫度低于10℃，約30min加完，撤去冰浴，室溫?cái)嚢?h，將反應(yīng)液傾入冰水中，用乙酸乙酯提取，有機(jī)層用飽和NaHCO3溶液洗滌至中性，再用飽和NaCl溶液洗一次，無水MgSO4干燥，濃縮殘余物，進(jìn)行快速柱層析(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶8～1∶4)，洗脫下來的第一組份經(jīng)濃縮，用異丙醚重結(jié)晶，得白色片狀晶體1.2g(25％)為5-硝基-2-(N-乙酰氨基)苯甲酸乙酯，mp150～151℃。
1HNMR(CDCl3)δ1.47(t，2H)，2.30(s，3H)，4.45(q，2H)，8.36(q，1H)，8.93(q，2H)，11.40(s，1H)洗脫下來的第二組份經(jīng)濃縮，用異丙醚重結(jié)晶，得白色針狀晶體標(biāo)題化合物2.3g(46％)，mp 94～96℃。
1HNMR(CDCl3)δ1.43(t，3H)，2.25(s，3H)，4.50(q，2H)，7.27(t，1H)，8.07(q，1H)，8.22(q，1H)，10.39(s，1H)實(shí)施例113-硝基-2-{N-[[(2-氰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]乙酰]胺基}苯甲酸乙酯將3-硝基-2-(N-乙酰胺基)苯甲酸乙酯(0.5g，1.98mmol)溶于DMF 5ml，加入K2CO3(0.3g，2.17mmol)攪拌0.5h，滴加1-(4-溴甲基苯基)-1H-吡咯-2-腈(0.57g，2.17mmol)的DMF溶液4ml，25℃攪拌反應(yīng)24h，倒入飽和NaCl溶液50ml中，乙酸乙酯提取，無水MgSO4干燥，濃縮，殘余物快速柱層析(乙酸乙酯∶石油醚＝3∶1～2∶1)，得淡黃色油狀物，加入乙醚，析出白色固體標(biāo)題化合物0.51g(60％)，mp 164～166℃。
IR(KBr)vcm-12215、1728、1615、1510實(shí)施例122-甲基-1-[4-(2-氰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-1H-苯駢咪唑-7-羧酸乙酯將3-硝基-2-{N-[[(2-氰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]乙酰]胺基}苯甲酸乙酯(1g，2.31mmol)溶于無水甲醇30ml，攪拌下，加入濃鹽酸1.5ml，分批加入鐵粉(0.8g，14.4mmol)，加畢攪拌10min，升溫回流8h，抽濾，濾液濃縮，殘余物加水稀釋，用6N NaOH調(diào)PH＝7，氯仿提取，飽和食鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，濃縮，快速柱層析(氯仿)，得淡黃色固體標(biāo)題化合物0.67g(76％)，mp 156～158℃。
1HNMR(CDCl3)δ1.25(t，3H)，2.70(s，3H)，4.15(q，2H)，5.20(s，2H)，6.65(d，2H)，6.95(d，2H)，7.67～7.77(m，3H)，7.82～7.95(3H)實(shí)施例132-甲基-1-{4-[2-(1H-四氮唑-5-基)-1H-吡咯-1-基]苯甲基}-1H-苯駢咪唑-7-羧酸乙酯N2保護(hù)下，將2-甲基-1-[4-(2-氰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-1H-苯駢咪唑-7-羧酸乙酯(0.5g，1.3mmol)溶于二甲苯25ml，加入NaN3(0.09g，1.3mmol)，Bu3SnCl(0.4ml，1.3mmol)，回流50h，冷卻至70℃，抽濾，熱的二甲苯5ml洗滌，合并濾液濃縮，殘余物溶于無水甲醇15ml，通入干燥HCl至飽和(PH＝2)，室溫?cái)嚢柽^夜，濃縮，殘余物柱層析(丙酮∶石油醚＝1∶2；丙酮∶甲醇＝95∶5)，得淡黃色固體標(biāo)題化合物0.26g(47％)，mp 208～210℃。
IR(KBr)vcm-13414、3130、2980、1712、1605、1527、1285、756FABMS428(M+1)1HNMR(CDCl3)δ1.22(t，3H)，2.57～2.66(s，3H)，4.23(q，2H)，5.80(s，2H)，6.98(d，2H)，7.28(t，1H)，7.47～7.59(m，4H)，7.69～7.75(m，2H)，7.94(d，1H)實(shí)施例143-硝基-2-{N-[[(2-甲氧羰基-1H-吡咯-1-基)-苯甲基]乙酰]胺基}苯甲酸乙酯將3-硝基-2-(N-乙酰胺基)苯甲酸乙酯(0.5g，1.98mmol)溶于DMF溶液5ml，加入NaH(0.048g，1.98mmol)，攪拌反應(yīng)10min，滴加1-(4-溴甲基苯基)-1H-吡咯-2-羧酸甲酯(0.65g，2.2mmol)的DMF溶液5ml，25℃反應(yīng)24h，倒入飽和NaCl溶液50ml中，乙酸乙酯提取，無水MgSO4干燥，濃縮，殘余物快速柱層析(乙酸乙酯∶石油醚＝3∶1～2∶1)，得淡黃色油狀物標(biāo)題化合物0.57g(62％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.30(t，3H)，1.85(s，3H)，3.70(s，3H)，4.20(q，2H)，4.80(d，1H)，4.95(d，1H)，6.85(m，1H)，6.96～7.05(m，3H)，7.25(t，2H)，7.63(t，1H)，8.10(m，3H)實(shí)施例152-甲基-1-[4-(2-甲氧羰基-1H-吡咯-1-基)-苯甲基]-1H-苯駢咪唑-7-羧酸乙酯將3-硝基-2-{N-[[(2-甲氧羰基-1H-吡咯-1-基)-苯甲基]乙酰]胺基}苯甲酸乙酯(0.5g，1.0mmol)溶于無水甲醇25ml，攪拌下，加入濃鹽酸1.5ml，分批加入鐵粉(0.4g，7.2mmol)，加畢攪拌10min，升溫回流8h，抽濾，濾液濃縮，殘余物加水稀釋，用6N NaOH調(diào)PH＝7，過濾，濾液用乙酸乙酯提取，飽和食鹽水洗滌，無水MgSO4干燥，過濾，濃縮，快速柱層析(乙酸乙酯∶石油醚＝3∶1～2∶1)，得淡黃色油狀物標(biāo)題化合物0.32g(68％)。
1HNMR(CDCl3)δ1.23(t，3H)，2.65(s，3H)，3.67(s，3H)，4.20(q，2H)，5.22(s，2H)，6.63(d，1H)，6.85(m，3H)，7.01～7.25(m，2H)，7.19～7.25(m，2H)，7.55～7.73(m，1H)，7.80～7.85(m，1H)實(shí)施例162-甲基-1-[4-(2-羧基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-1H-苯駢咪唑-7-羧酸將2-甲基-1-[4-(2-甲氧羰基-1H-吡咯-1-基)-苯甲基]-1H-苯駢咪唑-7-羧酸乙酯(0.3g，0.68mmol)溶于甲醇15ml，加入10％NaOH 15ml，25℃攪拌反應(yīng)10h，蒸除甲醇，殘余物加水20ml溶解，過濾，濾液用10％鹽酸調(diào)PH＝4，濾集白色固體，快速柱層析(氯仿∶甲醇＝20∶1)，得白色固體標(biāo)題化合物0.18g(71％)，mp 135～137℃。
IR(KBr)vcm-13413、3133、3001、2596、1699、1651、1515、1253、1123FAB MS376(M+1)1HNMR(CDCl3)δ2.55(s，3H)，5.90～5.93(d，2H)，6.48～6.92(m，3H)，7.15～7.18(m，2H)，7.23～7.31(m，2H)，7.65～7.82(d，1H)，7.82～7.84(d，1H)實(shí)施例172-氨基-3，5-二硝基吡啶冰浴冷卻下，在三頸瓶中加入濃H2SO4(20ml，0.36mol)，攪拌下，分批加入2-氨基-3-硝基吡啶(1.4g，0.01mol)，控制溫度小于25℃，原料全部溶解后，逐滴加入發(fā)煙硝酸(1.2ml，0.02mol)，加畢，升至25℃，攪拌反應(yīng)24h，把反應(yīng)液傾入50ml冰水中，用40％的NaOH堿化，調(diào)PH為7～8，析晶，室溫下放置1h，抽濾、烘干，用THF∶MeOH(1∶1)重結(jié)晶，得黃色針狀晶體標(biāo)題化合物1.69g(90％)，mp 190～192℃(Lit.mp 191～193℃)。
1HNMR(DMSO-d6)δ8.69(s，1H)，8.96(d，1H)，9.17(d，1H)，9.25(s，1H)；1HNMR(DMSO-d6+D20)δ3.88(s，2H)，9.00(d，1H)，9.16(d，1H)實(shí)施例182，3，5-三氨基吡啶鹽酸鹽將2-氨基-3，5-二硝基吡啶(0.73g，4mmol)，用THF∶MeOH(1∶1)50ml溶解，加入新鮮制備的Raney-Ni 2.5ml。于常溫常壓下進(jìn)行氫化，8h后吸氫已經(jīng)完全(約546ml)。N2保護(hù)下，抽濾至濃鹽酸2.0ml中，攪拌過夜，析出黃色固體標(biāo)題化合物0.6g(95％)。
IR(KBr)vcm-13400、1690、1514實(shí)施例196-正戊酰胺基-2-正丁基咪唑[5，4-b]駢吡啶在50ml三頸瓶中加入PPA 10ml，正戊酸(1.4ml，6.5mmol)，升溫至100℃，加入2，3，5-三氨基吡啶鹽酸鹽(0.7g，3mmol)，加畢，升溫至150℃，攪拌反應(yīng)6h，冷卻，將反應(yīng)液緩慢傾入冰水80ml中，用濃NH3·H2O堿化PH＝5，析出棕色油狀物，過濾，濾液繼續(xù)用濃NH3·H2O堿化PH＝7～8，析出固體，放置1h，抽濾得淡黃色固體標(biāo)題化合物0.6g(54.7％)，mp 204～206℃。
1HNMR(DMSO-d6)δ0.92(m，6H)，1.34(m，4H)，1.58(m，2H)，1.75(m，2H)，2.34(t，2H)，2.80(t，2H)，8.24(s，1H)，8.31(s，1H)，10.05(s，1H)，12.51(s，1H)實(shí)施例202-正丁基-1-[4-(2-氰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-6-正戊酰胺基-1H-咪唑駢[5，4-b]吡啶將6-正戊酰胺基-2-正丁基咪唑[5，4-b]駢吡啶(0.5g，1.82mmol)溶于DMF 5ml，加入NaH(0.075g，1.82mmol)，攪拌反應(yīng)10min，再滴加1-(4-溴甲基苯基)-1H-吡咯-2-腈(0.55g，2.09mmol)的DMF溶液5ml，加完升至25℃，攪拌反應(yīng)24h，倒入飽和食鹽水中，乙酸乙酯提取，無水MgSO4干燥，濃縮，殘余物快速柱層析(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1，乙酸乙酯)，得黃色油狀物標(biāo)題化合物0.35g(42.3％)。
IR(KBr)vcm-13229，2957，2219、1686、1514、1250實(shí)施例212-正丁基-1-{4-[2-(1H-四氮唑-5-基)-1H-吡咯-1-基]苯甲基}-6-胺基-1H-咪唑駢[5，4-b]吡啶N2保護(hù)下，將2-正丁基-1-[4-(2-氰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-6-正戊酰胺基-1H-咪唑駢[5，4-b]吡啶(0.35g，0.77mmol)，NaN3(0.05g，0.77mmol)，n-Bu3SnCl(0.21ml，0.77mmol)溶于二甲苯20ml，回流反應(yīng)50h，濃縮，殘余物溶于無水甲醇，通HCl至PH＝2，于25℃攪拌10h，蒸除甲醇，殘余物溶于10％NaOH，乙酸乙酯提取，水層用濃鹽酸調(diào)PH＝4，再用乙酸乙酯提取，酯層用無水MgSO4干燥，濃縮得黃色固體標(biāo)題化合物0.2g(52.3％)，mp102～104℃。
IR(KBr)vcm-13473，2958，1605、15161HNMR(CDCl3)δ0.75(t，3H)，1.08(m，2H)，1.47(m，2H)，2.42(m，2H)，3.95(m，2H)，5.29(s，2H)，6.45(m，1H)，6.89～7.05(m，4H)，7.40～7.48(m，2H)，7.52～7.60(m，1H)，7.72～7.79(m，1H)實(shí)施例222-正丁基-1-{4-[2-(1H-四氮唑-5-基)-1H-吡咯-1-基]苯甲基}-6-正戊酰胺基-1H-咪唑駢[5，4-b]吡啶將2-正丁基-1-{4-[2-(1H-四氮唑-5-基)-1H-吡咯-1-基]苯甲基}-6-胺基-1H-咪唑駢[5，4-b]吡啶(0.62g，1.5mmol)，溶于THF/DMF(25/5mmol)中，冷卻至-10℃，加入Et3N(0.32ml，3.1mmol)，滴加戊酰氯(0.18g，1.5mmol)，滴畢，于0℃攪拌4h，加入二氯甲烷15ml，依次用飽和NaHCO3溶液、飽和NaCl水溶液洗滌，無水MgSO4干燥，濃縮，柱層析(丙酮∶石油醚＝4∶1～2∶1)，得淡黃色固體標(biāo)題化合物0.60g(81％)，mp 138～140℃。
IR(KBr)vcm-13415，2959，1724、1605、1516FABMS 498(M+1)1HNMR(DMSO)δ0.82(t，3H)，0.95(t，3H)，1.20(m，2H)，1.47(m，2H)，1.64(m，2H)，1.82(m，2H)，2.13(t，2H)，2.89(t，2H)，5.02(s，2H)，6.35(m，1H)，7.00～7.07(m，3H)，7.28～7.35(m，3H)，7.75(m，1H)，8.06(m，1H)實(shí)施例232-正丁基-1-[4-(2-甲氧羰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-6-正戊酰胺基-1H-咪唑駢[5，4-b]吡啶將6-正戊酰胺基-2-正丁基咪唑[5，4-b]駢吡啶(0.4g，1.46mmol)溶于DMF 6ml，加入NaH(0.065g，1.46mmol)，攪拌反應(yīng)10min，再滴加1-(4-溴甲基苯基)-1H-吡咯-2-酸甲酯(0.52g，1.77mmol)的DMF溶液5ml，加完升溫至25℃，攪拌反應(yīng)24h，倒入飽和食鹽水中，乙酸乙酯提取，無水MgSO4干燥，濃縮，殘余物快速柱層析(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1～4∶1)，得黃色油狀物標(biāo)題化合物0.2g(28.6％)。
IR(KBr)vcm-13228，3129，2957、1690、1644、1502、1261、759實(shí)施例24
2-正丁基-1-[4-(2-羧基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-6-正戊酰胺基-1H-咪唑駢[5，4-b]吡啶將2-正丁基-1-[4-(2-甲氧羰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-6-正戊酰胺基-1H-咪唑駢[5，4-b]吡啶(0.2g，0.41mmol)溶于甲醇15ml，10％NaOH 15ml混合，于25℃攪拌反應(yīng)8h，蒸除甲醇，殘余物加水溶解，過濾，濾液用濃鹽酸調(diào)PH＝4，濾集白色固體，快速柱層析(CHCl3∶MeOH＝10∶1)，得白色晶體標(biāo)題化合物0.15g(73％)，mp 129～131℃。
IR(KBr)vcm-13436，3308，2958、2599、1690、1671、1502FABMS 474(M+1)1HNMR(DMSO)δ0.82～0.93(m，6H)，1.31～1.38(m，4H)，1.58～1.65(m，4H)，2.23(t，2H)，2.91(t，2H)，5.59(d，2H)，6.24～6.45(m，1H)，6.96～7.10(m，1H)，7.19～7.32(m，5H)，8.30～8.49(m，2H)，10.22(s，1H)。
實(shí)施例25戊亞胺酸乙酯鹽酸鹽無水條件下，將P2O5干燥分餾的戊腈(20g，0.24mol)，絕對無水乙醇(12.0g，0.26mol)溶于絕對無水乙醚20ml，冰鹽浴冷卻至-10℃以下，通入干燥的HCl氣體約(9g，0.24mol)，反應(yīng)液冰箱放置(-18℃以下)，析出白色透明晶體，抽濾，冰的無水乙醚15ml×3洗滌。于真空干燥器(下置P2O5及KOH)保存、干燥后得白色針狀晶體標(biāo)題化合物36g(80％)，mp50-52℃。
IR(KBr)vcm-12959、2929、1650、1535、1380，1335實(shí)施例26N-乙氧羰基-戊亞胺酸乙酯將戊亞胺酸乙酯鹽酸鹽(15.4g，93mmol)，迅速溶于K2CO3(W/W33％，)33ml中，混合液迅速用乙醚40ml×3提取，無水Na2SO4干燥，室溫濃縮，得無色油狀物戊亞胺酸乙酯9.6g(80％)。無水條件下，將所得無色油狀物(9.6g，74mmol)溶于干燥的CH2Cl2120ml中，加入三乙胺(6.7g，74mmol)，冰鹽浴下攪拌，將氯甲酸乙酯(7.2g，74mmol)溶于干燥CH2Cl220ml(-10℃以下)滴入，滴畢，升至室溫繼續(xù)攪拌3h，濃縮，殘余物加入正己烷研磨、抽濾，濾液濃縮，得黃色油狀物標(biāo)題化合物12.7g(85％)。
IR(KBr)vcm-12960、2934、1720、1665實(shí)施例275-正丁基-2-(2-6-二氯苯基)-2，4-二氫-3H-1，2，4-三唑-3-酮(8)將2，6-二氯苯肼(2.6g，14.6mmol)，N-乙氧羰基-戊亞胺酸乙酯(3.0g，15mmol)，溶于甲苯25ml中，于50℃攪拌2h，再加入三乙胺(1.6g，15.8mmol)，升溫至90℃，攪拌16h，冷卻，濃縮，殘余物用石油醚/乙酸乙酯調(diào)晶，得白色晶體標(biāo)題化合物3.5g(73％)，mp168～170℃。
IR(KBr)vcm-13156，3066，1702，1597，1568，1480，1444實(shí)施例285-正丁基-4-[4-(2-氰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-2，4-二氫-2-(2-6-二氯苯基)-3H-1，2，4-三唑-3-酮將5-正丁基-2-(2-6-二氯苯基)-2，4-二氫-3H-1，2，4-三唑-3-酮(1.7g，5.8mmol)溶于DMF25ml中，加入NaH(0.28g，7.0mmol)(60％)，于50℃攪拌1h，冷卻，滴加1-(4-溴甲基苯基)-1H-吡咯-2-腈(1.83g，7.0mmol)的DMF溶液10ml，滴畢，升溫至50℃攪拌2h，將反應(yīng)液傾入飽和食鹽水150ml中，用乙酸乙酯30ml×3提取，無水Na2SO4干燥，濃縮，快速柱層析(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3～1∶1)，得淡黃色固體標(biāo)題化合物2.1g(76％)。
IR(KBr)vcm-12216，1722，1611，1583，1517，1453實(shí)施例295-正丁基-4-[4-[(2-(1H-四氮唑-5-基)-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-2，4-二氫-2-(2-6-二氯苯基)-3H-1，2，4-三唑-3-酮在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將5-正丁基-4-[4-(2-氰基-1H-吡咯-1-基)苯甲基]-2，4-二氫-2-(2-6-二氯苯基)-3H-1，2，4-三唑-3-酮(2.0g，4.3mmol)，NaN3(0.45g，6.9mmol)，n-Bu3SnCl(2.2g，6.8mmol)溶于二甲苯60ml中，回流反應(yīng)50h，趁熱抽濾，用熱的二甲苯洗滌，合并濾液濃縮，殘余物溶于無水甲醇25ml，通入干燥HCl氣體至飽和(PH＝2)，室溫?cái)嚢?4h，濃縮，殘余物快速柱層析(石油醚∶丙酮＝4∶1～2∶1)，得白色固體標(biāo)題化合物1.1g(52％)，mp.100-102℃。
IR(KBr)vcm-13116，2957，1715、1606、1595，1517FABMS 509(M+1)1HNMR(CDCl3)δ0.78(t，3H)，1.24(m，2H)，1.51(m，2H)，2.34(t，2H)，4.63(s，2H)，6.19(t，1H)，6.67-6.75(t，2H)，6.84～6.94(m，4H)，7.18(m，1H)，7.28～7.31(m，2H)實(shí)施例30對清醒腎性高血壓大鼠(RHR)血壓的影響前面已描述了本發(fā)明式(I)化合物或其可藥用鹽具有治療高血壓、充血性心衰以及通過阻斷AII受體來治療其它疾病或病癥的作用，現(xiàn)以實(shí)施例29的化合物為例，對其進(jìn)行詳細(xì)說明。
1、本實(shí)驗(yàn)采用“二腎一夾”性高血壓病理模型，麻醉插管法測血壓同前述。實(shí)驗(yàn)分為四組，分別為氯沙坦組，化合物實(shí)施例29(3mg/kg、1mg/kg)組，陽性對照組(給予溶媒含5％NaHCO3的生理鹽水0.5ml/100g)。每組8只，尾靜脈注射給藥，分別記錄給藥前及給藥后1、5、15、30、60、90、120、150min時(shí)RHR的血壓和心率，計(jì)算MAP。
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過本實(shí)驗(yàn)可見氯沙坦組(3mg/kg)的最大降壓幅度為15.2％，化合物實(shí)施例29(3mg/kg，1mg/kg)組均可明顯降低RHR的血壓，最大降壓幅度分別為19.4％，16.3％，降壓持續(xù)時(shí)間約為150min，與對照組比有顯著性差異(P＜0.01)，與給藥前相比有顯著性差異(P＜0.01)，其降壓效應(yīng)呈一定的劑量相關(guān)性。同時(shí)化合物實(shí)施例29對RHR的心率沒有影響，與對照組相比沒有明顯差異(P＞0.05)，結(jié)果見表2、3。
表2實(shí)施例29對腎型高血壓大鼠血壓的影響(x±s，n＝8)劑量 平均動脈壓(mmHg)組別(mg/kg)0 1 5 15 30min對照組 134.08±12.3135.38±12.2 133.65±11.8 134.02±11.3 132.40±11.95氯沙坦 3136.04±12.1135.29±13.1 125.％±11.95*##122.63±13.7*##115.40±13.3**##實(shí)施例293134.80±9.8 129.30±12.2*#120.70±11.6*##113.80±10.6**##108.30±12.6**##1131.90±10.3123.60±10.9*##115.23±10.6**##109.92±11.1**##114.86±11.1**##(續(xù)表2)劑量 平均動脈壓(mmHg)組別(mg/kg)60 90 120150min對照組 129.17±13.7132.31±14.5 131.94±14.95 132.72±15.6氯沙坦 3 118.50±11.7**##117.10±10.7**##115.54±11.9**##119.27±15.0**##實(shí)施例29 3 113.50±12.0**##115.03±15.7**##118.05±14.1**##125.90±15.5**#1 115.87±11.2**##119.93±9.9*##119.72±10.2**##123.81±10.9*##*P＜0.05，**P＜0.0 1與給藥前比較#P＜0.05，##P＜0.01與空白對照組比較表3實(shí)施例29對腎型高血壓大鼠心率的影響(x±s，n＝8)劑量 心率(beats/min)組別(mg/kg)0 1 5 15 30min對照組 389±39 404±37387±26385±26379±37氯沙坦3 382±25 392±29382±22382±22378±23實(shí)施例29 3 387±24 391±27382±27381±26377±251 371±18 399±17398±24362±25365±15(續(xù)表3)劑量 心率(beats/min)組別(mg/kg) 60 90 120150min對照組 377±25374±40379±39380±37氯沙坦 3381±25376±32379±39380±32實(shí)施例293376±28378±21385±25388±341366±20366±24369±19371±24P＞0.05與給藥前比較P＞0.05與空白對照組比較實(shí)施例31實(shí)施例29對異丙腎上腺素所致大鼠心肌肥厚的逆轉(zhuǎn)作用大鼠48只，雌雄各半，隨機(jī)分為六組模型組、陽性組、氯沙坦組、化合物高、中、低劑量組(10mg/kg，3mg/kg，1mg/kg)。結(jié)果顯示，模型組的心室壁厚，心重/體重及左心室重/體重值與正常組相比明顯升高(P＜0.001)；心肌組織SOD活力降低，血清LDH活力升高，心肌組織MDA含量升高。電鏡下可見模型組心肌纖維排列紊亂，溶解斷裂，線粒體明顯腫脹破裂，而氯沙坦組和高、中劑量給藥組心臟重量參數(shù)改善，與模型組比有顯著差異(P＜0.01)，且心肌組織SOD獲利分別升高36.7％，40.7％，53.4％，血清LDH活力分別降低18.5％，16.2％，23.3％，心肌組織MDA含量分別下降42.9％，33％，45.8％，與模型組相比有顯著差異(P＜0.01)。電鏡下氯沙坦組和中劑量給藥組心肌組織及纖維，線粒體結(jié)構(gòu)改善，富含線粒體且腫脹程度明顯減輕。上述結(jié)果說明實(shí)施例29可逆轉(zhuǎn)異丙腎上腺素所致大鼠心肌肥厚，對心肌有一定的保護(hù)作用，且逆轉(zhuǎn)作用有一定的劑量相關(guān)性。研究結(jié)果見表4、5。
表4實(shí)施例29對異丙腎上腺素所致大鼠心肌肥厚的逆轉(zhuǎn)作用(x±s，n＝8)組別劑量(mg/kg)左心室厚度(mm)心重/體重(mg/g)左心室重/體重(mg/kg)對照組 3.64±0.313.57±0.14 1.90±0.10模型組 4.84±0.25△△△5.46±0.59△△△3.01±0.38△△△氯沙坦 10 4.04±0.27***4.32±0.30***2.44±0.41*實(shí)施例2910 4.08±0.39***4.84±0.32*2.56±0.28*3 4.16±0.41**4.44±0.49**2.39±0.36**1 4.76±0.20 5.10±0.44 2.72±0.26△△△P＜0.001與陽性對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001與空白對照組比較表5實(shí)施例29對異丙腎上腺素所致大鼠心肌肥厚的逆轉(zhuǎn)作用(x±s，n＝8)劑量 心肌SOD活力 血清LDH活力 心肌MDA含量組別(mg/kg)(Nu/mgprot) (U/L) (nmol/mgprot)對照組68.19±11.765768.88±868.14 1.27±0.38模型組37.97±11.74△△△8191.38±1085.38△△△2.64±0.83△△△氯沙坦 10 51.92±7.05*6678.50±637.72**1.51±0.46**實(shí)施例29 10 53.41±9.17*6863.75±1055.52*1.77±0.62*3 58.23±11.76**6279.50±1003.95**1.43±0.35**1 46.69±11.46 7094.13±1106.11 1.89±0.19*△△△P＜0.001與陽性對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01與空白對照組比較實(shí)施例32實(shí)施例29對AII收縮動脈環(huán)的濃度-效應(yīng)曲線的影響按累積濃度法加入AII，測定AII濃度-效應(yīng)曲線，并作為對照組，用Kerbs液沖洗標(biāo)本，待張力恢復(fù)到給藥前水平，加入實(shí)施例29與動脈環(huán)孵育30min，再重復(fù)以累積法加入AII，繪制濃度-效應(yīng)曲線。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果IC50的測定，按Scott地值法計(jì)算IC50，即以濃度為X軸，濃度/抑制效為Y軸，線性回歸可得直線方程y＝0.010x+7×10-11，γ＝0.9995，故可求得實(shí)施例29的IC50＝7.3×10-9M，具體結(jié)果見表6。
表6實(shí)施例29濃度-抑制效應(yīng)的關(guān)系實(shí)施例29濃度 抑制百分率(％)3.00E-09 26.51±5.601.00E-08 60.44±13.603.00E-08 81.10±8.961.00E-07 90.00±7.83實(shí)施例29化合物對AII收縮動脈環(huán)的濃度-效應(yīng)曲線的影響結(jié)果顯示若干濃度的實(shí)施例29(10-9M～10-6M)均可使AII引起的家兔胸主動脈環(huán)收縮幅度降低，與對照組比較有顯著性差異(P＜0.01)，其表現(xiàn)在濃度-效應(yīng)曲線上可見曲線右移，并伴有最大反應(yīng)降低，結(jié)果提示實(shí)施例29具有AT1非競爭性拮抗劑特性，結(jié)果見表7。
表7實(shí)施例29對AII引起的兔動脈環(huán)收縮的濃度-效應(yīng)關(guān)系(x±s，n＝6)劑量 AII濃度(M)組別(M) 1×10-93×10-81×10-83×10-81×10-73×10-71×10-6對照 26.7±5.7 49.8±10.4 77.4±7.2 90.3±8.1 99.8±2.2實(shí)施例29 3×10-911.2±3.6**42.0±7.1**53.5±7.3**59.6±18.6**64.1±11.3**69.2±19.8**71.5±19.7**6×10-910.6±6.9**23.1±3.2**33.1±7.2**47.8±10.9**54.9±14.9**65.4±13.8**60.3±13.2**1×10-85.4±7.3**18.9±10.3**30.2±11.2**43.1±13.1**51.9±13.9**54.1±9.8**57.3±10.9**3×10-80.05±7.3**12.5±4.5**24.7±7.6**25.4±6.4**31.6±8.3**40.3±1.8**46.1±1.4**1×10-70.02±1.3**2.7±2.6**15.1±10.2**22.7±3.2**28.1±3.5**37.8±4.6**40.5±7.2****P＜0.01與空白對照組比較
權(quán)利要求
1.通式(I)的化合物或其可藥用鹽 其中Ar表示雜芳基或雜環(huán)基，且通過雜原子與N-(4-甲基苯基)-1H-取代吡咯結(jié)構(gòu)中的甲基相連；X選自氫、(C1-C6)直鏈或支鏈的烷基、(C2-C6)直鏈或支鏈的鏈烯基、(C2-C6)直鏈或支鏈的炔基、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷氧基，X與Ar表示的雜芳基或雜環(huán)基中的碳原子直接相連；Y選自氫、(C1-C6)直鏈或支鏈的烷基、三員、四員、五員或六員環(huán)烷基、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷氧基、苯基、羥基、醛基、羧基、酯基、胺基、酰胺基，Y與Ar表示的雜芳基或雜環(huán)基中的碳原子或雜原子直接相連；Y可被進(jìn)一步取代；R1選自羧基、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷基羧基、四氮唑基、N-烷基取代四氮唑基、羧烷基氨甲酰基、烷基氨磺?；?、氨磺酰基、烷氧羰基胺磺?；?、芳基胺磺?；?；R2選自氫、鹵素。
2.權(quán)利要求1的化合物或其可藥用鹽，其中Ar表示雜芳基或雜環(huán)基為含1～3個(gè)選自N或O的雜原子的芳雜環(huán)取代基；X選自氫或(C1-C4)直鏈或支鏈的烷基，(C1-C4)直鏈或支鏈的烷氧基；X與Ar中兩個(gè)雜原子之間的碳原子直接相連；Y選自氫、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷基、三員、四員、五員或六員環(huán)烷基、(C1-C4)直鏈或支鏈的烷氧基、苯基、羥基、醛基、羧基、酯基、胺基、酰胺基，Y被下述基團(tuán)取代鹵素、羥基、羧基、酯基、硝基、氰基、任選被1-3個(gè)氟原子取代的(C1-C4)直鏈或支鏈的烷基；Y與Ar表示的雜芳基或雜環(huán)基中的碳原子或雜原子直接相連；Ar上X與Y的相對位置為間隔1-3個(gè)原子；R1與R2之間相隔1-2個(gè)原子。
3.權(quán)利要求2的化合物或其可藥用鹽，其中R1選自(C1-C4)直鏈的烷基羧基、N-(C1-C4)烷基取代四氮唑基、(C1-C4)羧烷基氨甲?；?、N-(C1-C4)烷基氨磺?；?、氨磺?；?、(C1-C4)烷氧羰基胺磺酰基、芳?；坊酋；?；R2選自氫、氯、溴、碘；R1與R2分別在N原子的鄰位取代。
4.權(quán)利要求3的化合物或其可藥用鹽，其中Ar為含1-3個(gè)選自N或O的雜原子的五員、六員、九員或十員雜芳基或雜環(huán)基；X選自氫、(C1-C4)直鏈烷基、(C1-C4)直鏈烷氧基；Y選自氫、C4直鏈烷基、四員、五員或六員環(huán)烷基、C4直鏈烷氧基、苯基、羥基、羧基、酯基、胺基、酰胺基；Y被鹵素、硝基、氰基、任選被1-3個(gè)氟原子取代的(C1-C4)直鏈烷基取代。
5.權(quán)利要求4的化合物或其可藥用鹽，R1選自(C1-C2)直鏈烷基羧基、N-(C1-C2)取代四氮唑基、(C1-C2)羧烷基氨甲?；4烷基氨磺?；?、氨磺?；?、(C1-C4)烷氧羰基胺磺酰基、芳甲酰胺磺?；籖2選自氫、氯、溴。
6.權(quán)利要求5的化合物或其可藥用鹽，其中Ar選自含2個(gè)N的五員雜芳基、含3個(gè)N的五員雜芳基、含2個(gè)N的六員雜芳基、含3個(gè)N的十員雜芳基、含2個(gè)N的九員雜芳基、含1個(gè)N的十員雜芳基、含2個(gè)N的十員雜芳基、含1個(gè)N及1個(gè)O的六員雜環(huán)基；Y選自氫、四員、五員或六員環(huán)烷基、苯基、羧基、酯基、胺基、酰胺基，Y與芳雜環(huán)中的碳或氮原子直接相連；Y被氯、溴、硝基、氰基、三氟甲基取代，或者同時(shí)被二個(gè)氯原子取代。
7.權(quán)利要求6的化合物或其可藥用鹽，其中Ar選自咪唑基、苯駢咪唑基、咪唑駢吡啶基、1，2，3-三唑啉酮基、喹啉基、嘧啶基、吡啶駢嘧啶基、嗎啉基、喹唑酮基；R1選自羧基、四氮唑基、羧甲基氨甲酰基、叔丁基氨磺?；?、氨磺?；?C1-C2)烷氧羰基胺磺?；⒈郊柞０坊酋；?；R2選自氫、溴。
8.權(quán)利要求7的化合物或其可藥用鹽選自其中Ar表示苯駢咪唑基、1，2，3-三唑啉酮基，吡啶駢咪唑基；Y表示氫、五員或六員環(huán)烷基、苯基、羧基、酯基、胺基或酰胺基；Y被氯、硝基、三氟甲基或者同時(shí)被二個(gè)氯原子取代；X表示(C1-C4)直鏈烷基、(C1-C4)直鏈烷氧基；R1表示羧基或四氮唑基；R2表示氫或溴。
9.一種用于治療哺乳動物，優(yōu)選于治療人類疾病或病癥的藥物組合物，其包括治療高血壓、充血性心衰、心肌肥厚、血管痙攣和通過阻斷血管緊張素II(AII)受體來治療其它疾病或病癥有效量的權(quán)利要求1的化合物或其鹽和可藥用載體。
10.權(quán)利要求1的化合物或其鹽在制備治療高血壓、充血性心衰、心肌肥厚、血管痙攣或利尿藥以及通過阻斷AII受體來治療其它病癥的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)表示的具有心血管活性的N－芳基取代－1H－吡咯衍生物或其鹽，其具有血管緊張素II(AII)受體拮抗的活性，可用于治療心血管系統(tǒng)的疾病，如高血壓、充血性心衰、心肌肥厚、血管痙攣以及通過阻斷AII受體來治療的其它疾病或病癥。
文檔編號A61P9/12GK1544418SQ200310106428
公開日2004年11月10日 申請日期2003年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月26日
發(fā)明者吳曉明, 徐進(jìn)宜, 王秋娟 申請人:中國藥科大學(xué)