專利名稱：由Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)構(gòu)成的青光眼治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合構(gòu)成的青光眼治療劑。
背景技術(shù)：
青光眼是一種由各種病因引起眼壓升高、眼球內(nèi)部組織(視網(wǎng)膜、視神經(jīng)等)受到損害而導(dǎo)致的有致盲危險性的難治性眼科疾病。青光眼的治療方法一般為降低眼壓療法，代表性的療法有藥物療法、激光療法、手術(shù)療法等。
藥物療法中使用交感神經(jīng)激動劑(腎上腺素等非選擇性激動劑、阿可樂定(apraclonidine)等α2激動劑)、交感神經(jīng)阻斷劑(噻嗎洛爾、苯呋洛爾等β阻斷劑、鹽酸布那唑嗪等α1阻斷劑)、副交感神經(jīng)興奮劑(匹魯卡品等)、碳酸脫水酶抑制劑(乙酰唑胺等)、前列腺素類(烏諾前列酮異丙酯、拉坦前列素、曲伏前列素、比馬前列胺)等藥物。
最近，作為基于新型作用機理的青光眼治療藥開發(fā)了Rho激酶抑制劑(國際公開WO00/09162號)。非專利文獻1公開了Rho激酶抑制劑通過促進經(jīng)由小梁網(wǎng)的房水流出以降低眼壓，IOVS，42(1)，137-144(2001)、IOVS，42(5)，1029-1037(2001)中進一步公開了其作用機理為小梁細胞的細胞骨架的重新構(gòu)建。
此前研究并報道了將具有降低眼壓作用的藥物相互組合使用以治療青光眼。例如，日本專利2726672號公報報道了將交感神經(jīng)阻斷劑和前列腺素類物質(zhì)組合進行給藥的方法。另外，國際公開WO 02/38158號公開了將具有降低眼壓作用的幾種藥物組合對眼睛給藥以治療青光眼的方法。
但是，所有報道都沒有關(guān)于Rho激酶抑制劑的記載，當(dāng)然也沒有關(guān)于其與前列腺素類物質(zhì)并用效果的記載。
如上所述，目前為止，完全沒有關(guān)于將Rho激酶抑制劑與前列腺素類物質(zhì)組合時的青光眼治療效果的研究和報道。

發(fā)明內(nèi)容
研究Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合制成的青光眼治療劑的效用是一個非常有趣的課題。
本發(fā)明人等深入地研究了將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合產(chǎn)生的效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，將上述藥物組合使用與各藥物單獨使用時相比，眼壓降低作用有所增強和/或作用的持續(xù)性有所提高，從而完成了本發(fā)明。詳細的試驗方法和結(jié)果在后述的藥理試驗項中進行說明，可以看出通過將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)相互組合，可以使眼壓降低作用顯著增強和/或作用的持續(xù)性顯著提高。
本發(fā)明為一種青光眼治療劑，是將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合制成的，所述成分可相互補充和/或增強其治療作用。
給藥方式可以為Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)以各自的制劑形式給藥，即合并給藥；也可以將它們制成1種制劑給藥、即以合劑的形式給藥。
本發(fā)明中所述的Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)也包括鹽的形態(tài)。上述化合物含有氨基等堿性基團時，也可以與鹽酸、硝酸等無機酸成鹽，或者與草酸、琥珀酸、醋酸等有機酸成鹽；含有羧基等酸性基團時，也可以與鈉、鉀等堿金屬成鹽，或與鈣等堿土類金屬成鹽。
另外，本發(fā)明中所述的Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)也包括酯類等衍生物。酯類具體可以舉出例如甲基酯、乙基酯、異丙基酯等烷基酯。
本發(fā)明的特征為將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合使用以治療青光眼。
本發(fā)明中所述的Rho激酶抑制劑是指阻斷隨著Rho活化而被活化的絲氨酸/蘇氨酸激酶的化合物。例如可以舉出阻斷ROKα(ROCK-II)、p160ROCK(ROKβ、ROCK-I)及其它具有絲氨酸/蘇氨酸激酶活性的蛋白質(zhì)的化合物。Rho激酶抑制劑具體可以舉出WO 98/06433、WO 00/09162中公開的(R)-反式-N-(吡啶一4-基)-4-(1-氨基乙基)環(huán)己烷羧酰胺、(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯酰胺等Rho激酶抑制劑；或者WO 97/23222、Nature，389，990-994(1997)中公開的1-(5-異喹啉磺?；?高哌嗪、1-(5-異喹啉磺?；?-2-甲基哌嗪等Rho激酶抑制劑；WO 01/56988中公開的(1-芐基吡咯烷-3-基)-(1 H-吲唑-5-基)胺等Rho激酶抑制劑；WO 02/100833中公開的(1-芐基哌啶-4-基)-(1H-吲唑-5-基)胺等Rho激酶抑制劑；WO 02/076976中公開的N-[2-(4-氟苯基)-6，7-二甲氧基-4-喹唑啉基]-N-(1 H-吲唑-5-基)胺等Rho激酶抑制劑；WO 02/076977中公開的N-4-(1H-吲唑-5-基)-6，7-二甲氧基-N-2-吡啶-4-基-喹唑啉-2，4-二胺等Rho激酶抑制劑；WO 99/64011中公開的4-甲基-5-(2-甲基-[1，4]苯甲二氮卓一1-磺?；?異喹啉等Rho激酶抑制劑。
前列腺素類物質(zhì)只要是具有降低眼壓的作用并對治療青光眼有效的前列腺素類物質(zhì)即可。具有降低眼壓作用的前列腺素類具體可以舉出，特開昭59-1418中公開的前列腺素類物質(zhì)(特別是前列腺素F2α之類的天然前列腺素)、特表平3-501025中公開的拉坦前列素等前列腺素類物質(zhì)、特開平2-108中公開的烏諾前列酮異丙酯等前列腺素類物質(zhì)、特表平8-501310中公開的比馬前列素(Bimatoprost)等前列腺素類物質(zhì)、特開平10-182465中公開的曲伏前列素(Travoprost)等前列腺素類物質(zhì)等，特別優(yōu)選使用已作為青光眼治療劑出售的拉坦前列素、烏諾前列酮異丙酯、比馬前列素(Bimatoprost)、曲伏前列素(Travoprost)。
本發(fā)明中所述的青光眼有原發(fā)性開角型青光眼、正常眼壓青光眼、房水產(chǎn)生過多型青光眼、高眼壓癥、急性閉角型青光眼、慢性閉角型青光眼、混合型青光眼、類固醇性青光眼、淀粉樣變性(amyloid)青光眼、新生血管性青光眼、惡性青光眼、水晶體的囊性青光眼、虹膜高褶型青光眼(plateau-iris syndrome)等。
作為實施本發(fā)明的制劑，可以是將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)各自配方的2種制劑，也可以為配合了各成分的1種制劑。上述制劑化不需要特殊的技術(shù)，可以利用廣泛采用的技術(shù)進行制劑化。給藥方式優(yōu)選眼局部給藥，劑型優(yōu)選滴眼劑或眼軟膏。
將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)分別制劑化時，可以依照各種公知的方法進行配制。例如Rho激酶抑制劑的制劑可以參照上述國際公開專利公報(WO 00/09162、WO 97/23222)中記載的制劑例進行配制。前列腺素類物質(zhì)的制劑可以參照上述日本公開專利公報或者日本公表專利公報(特開昭59-1418、特表平3-501025、特開平2-108、特表平8-501310、特開平10-182465)中記載的制劑例進行配制，特別是也可以使用已經(jīng)作為青光眼治療劑出售的拉坦前列素、烏諾前列酮異丙酯、比馬前列素、曲伏前列素等市售制劑。
Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)二者配合的制劑也可以按照公知的方法進行配制。例如滴眼劑，可以根據(jù)需要使用氯化鈉、濃甘油等等滲劑；磷酸鈉、醋酸鈉等緩沖劑；聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯、硬脂酸聚烴氧40酯、聚氧乙烯硬化蓖麻油等表面活性劑；枸櫞酸鈉、乙二胺四乙酸鈉等穩(wěn)定劑；苯扎氯胺、對羥基苯甲酸酯等防腐劑等進行配制。pH只要在眼科制劑所允許的范圍內(nèi)即可，優(yōu)選pH在4～8的范圍內(nèi)。在后述的實施例項中記載了一部分制劑例作為參考，但本發(fā)明的范圍并不受限于后述制劑例。
Rho激酶抑制劑及前列腺素類物質(zhì)的給藥量可以根據(jù)患者的癥狀、年齡、劑型、給藥途徑等進行決定。下面以滴眼給藥為例進行簡單說明。Rho激酶抑制劑的給藥量因藥物的種類而不同，通常1日給藥量在0.025～10000μg的范圍內(nèi)，可以每日給藥1次，也可以分數(shù)次給藥，用量可以根據(jù)患者的年齡、癥狀等進行適當(dāng)?shù)脑鰷p。
前列腺素類物質(zhì)的給藥量因藥物的種類而不同，通常1日給藥量在0.1～1000μg的范圍內(nèi)，可在1日內(nèi)1次或分數(shù)次給藥。具體而言，拉坦前列素通常使用的1日劑量為1～5μg、烏諾前列酮異丙酯通常使用的1日劑量為30～300μg，上述用量可以根據(jù)患者的年齡、癥狀等進行適當(dāng)?shù)脑鰷p。另外，其它前列腺素類物質(zhì)也可以基于同樣的標(biāo)準(zhǔn)決定其用量。
上述給藥量也適合將Rho激酶抑制劑與前列腺素類物質(zhì)并用給藥的情況，但在使用Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)二者配合制得的制劑進行給藥時，配制出適當(dāng)?shù)剡x擇了配合比例的制劑，使1日給藥量為上述各成分的用量或其以下，將該配合制劑1日1次或分數(shù)次給藥。


圖1為表示各給藥組眼壓經(jīng)時變化的曲線圖。其中眼壓以從初期眼壓開始的變化值表示?！鯙榛衔顰和烏諾前列酮異丙酯并用的給藥組，■為化合物A單獨給藥組，△為烏諾前列酮異丙酯單獨給藥組，○為對照組。
圖2為表示各給藥組眼壓經(jīng)時變化的曲線圖。其中眼壓以從初期眼壓開始的變化值表示?！鯙榛衔顱和烏諾前列酮異丙酯并用的給藥組，■為化合物B單獨給藥組，△為烏諾前列酮異丙酯單獨給藥組，○為對照組。
圖3為表示各給藥組眼壓經(jīng)時變化的曲線圖。其中眼壓以從初期眼壓開始的變化值表示。□為化合物A和拉坦前列素并用的給藥組，■為化合物A單獨給藥組，△為拉坦前列素單獨給藥組，○為對照組。
圖4為表示各給藥組眼壓經(jīng)時變化的曲線圖。其中眼壓以從初期眼壓開始的變化值表示?！鯙榛衔顱和拉坦前列素并用的給藥組，■為化合物B單獨給藥組，△為拉坦前列素單獨給藥組，○為對照組。
具體實施例方式
以下以制劑例和藥理試驗作為實施例進行說明，其目的是為了更加好的理解本發(fā)明，并不能限定本發(fā)明的范圍。
實施例[制劑例]以下說明本發(fā)明中配合了Rho激酶抑制劑((R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯酰胺二鹽酸鹽)和前列腺素類物質(zhì)(烏諾前列酮異丙酯)的滴眼劑的普通制劑例。
滴眼劑(100ml中)(R)-(+)-N-(1 H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯酰胺二鹽酸鹽 0.3g烏諾前列酮異丙酯0.06g硼酸0.2g濃甘油 0.25g苯扎氯胺0.005g稀鹽酸 適量氫氧化鈉適量蒸餾水 適量可改變上述配方中Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)的種類及配合量，并且適當(dāng)改變添加劑的用量，以配制出所需組成及所需濃度的滴眼液。
為了檢驗Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合的有效性，研究了將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)并用對日本白色家兔(種系JW，性別雄性)或食蟹猴(性別雄性)進行給藥后的眼壓降低效果。Rho激酶抑制劑使用(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯酰胺二鹽酸鹽[化合物A]或者1-(5-異喹啉磺酰基)高哌嗪二鹽酸鹽[化合物B]，前列腺素類物質(zhì)使用烏諾前列酮異丙酯或者拉坦前列素。
(試驗化合物溶液的配制)
1.Rho激酶抑制劑溶液的配制將Rho激酶抑制劑溶解于生理鹽水之后，加入氫氧化鈉來中和溶液(pH6.0～7.0)，從而配制出所需濃度的Rho激酶抑制劑溶液。
2.前列腺素類物質(zhì)溶液的配制直接使用市售的烏諾前列酮異丙酯滴眼液(商品名Rescula滴眼液)或者拉坦前列素滴眼液(商品名Xalatan滴眼液)，或者用生理鹽水稀釋，配制出所需濃度的前列腺素類物質(zhì)溶液。
(試驗方法)以下研究了Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)并用給藥時的眼壓降低效果。為了比較對照，也研究了Rho激酶抑制劑單獨給藥或者前列腺素類物質(zhì)單獨給藥時的眼壓降低效果。對照組中只給予基液(生理鹽水)。試驗動物使用日本白色家兔(種系JW，性別雄性)或者食蟹猴(性別雄性)。
(給藥方法及測定方法)1.Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)并用給藥1)給試驗動物的雙眼各點1滴0.4％鹽酸羥丁普魯卡因進行局部麻醉。
2)在臨給予試驗化合物之前測定眼壓，作為初期眼壓。
3)用Rho激酶抑制劑溶液對試驗動物的一只眼滴眼給藥(對側(cè)眼不作處理)。由于不能同時以前列腺素類物質(zhì)溶液進行滴眼給藥，因而間隔少許時間(約5分鐘)后對同一只眼進行前列腺素類物質(zhì)溶液的滴眼給藥。
4)在點眼給予Rho激酶抑制劑溶液后的2小時、4小時、6小時及8小時后分別對兩眼點以1滴0.4％鹽酸羥丁普魯卡因進行局部麻醉后，測定眼壓。眼壓測定3次，其平均值在結(jié)果中示出。
需要說明的是，下述試驗例中的試驗2測定了2小時、4小時及6小時后的眼壓。
2.Rho激酶抑制劑單獨給藥用生理鹽水代替前列腺素類物質(zhì)溶液，除此之外，用與上述并用給藥試驗同樣的方法進行試驗。
3.前列腺素類物質(zhì)單獨給藥用生理鹽水代替Rho激酶抑制劑溶液，除此之外，用與上述并用給藥試驗同樣的方法進行試驗。
4.對照組用生理鹽水代替Rho激酶抑制劑溶液及前列腺素類物質(zhì)溶液，除此之外，用與上述并用給藥試驗同樣的方法進行試驗。
(試驗1～4)各試驗中使用的Rho激酶抑制劑溶液、前列腺素類物質(zhì)溶液以及試驗動物在表1中給出。
按照上述(試驗方法)以及(給藥方法和測定方法)，進行了試驗1～4。
表1

(結(jié)果及分析)試驗1的結(jié)果由圖1示出、試驗2的結(jié)果由圖2示出、試驗3的結(jié)果由圖3示出、試驗4的結(jié)果由圖4示出。眼壓為從初期眼壓開始的變化值。
由圖1、圖2、圖3、圖4可以知，Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)的并用組比任一藥劑單獨給藥組，即Rho激酶抑制劑給藥組或者前列腺素類物質(zhì)給藥組，具有更加良好的眼壓降低作用，并且顯示出提高上述作用持續(xù)性的效果。由此可以確認，通過將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合使用可以獲得更良好的眼壓降低效果和/或提高持續(xù)性的效果。
產(chǎn)業(yè)實用性通過將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合對眼睛給藥，可增強降低眼壓的作用和/或提高上述作用的持續(xù)性。因此上述組合可有效地作為青光眼治療劑使用。
權(quán)利要求
1.一種青光眼治療劑，由Rho激酶抑制劑與前列腺素類物質(zhì)組合而成。
2.一種青光眼治療劑，其特征為，是由Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合而成，二者作用相互補充和/或增強。
3.如權(quán)利要求1或2所述的青光眼治療劑，其中所述的Rho激酶抑制劑為(R)-反式-N-(吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)環(huán)己烷羧酰胺、(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯酰胺、1-(5-異喹啉磺?；?高哌嗪、或者1-(5-異喹啉磺酰基)-2-甲基哌嗪。
4.如權(quán)利要求1或2所述的青光眼治療劑，其中所述的前列腺素類物質(zhì)為烏諾前列酮異丙酯、拉坦前列素、曲伏前列素或者比馬前列素。
5.一種青光眼治療方法，是將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合使用，并給予患者有效劑量的該組合物。
6.一種青光眼治療方法，其特征為，將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合，給予患者有效劑量的該組合物，使二者作用相互補充和/或增強。
7.如權(quán)利要求5或6所述的青光眼治療方法，其中所述的Rho激酶抑制劑為(R)-反式-N-(吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)環(huán)己烷羧酰胺、(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯酰胺、1-(5-異喹啉磺酰基)高哌嗪、或者1-(5-異喹啉磺?；?-2-甲基哌嗪。
8.如權(quán)利要求5或6所述的青光眼治療方法，其中所述的前列腺素類物質(zhì)為烏諾前列酮異丙酯、拉坦前列素、曲伏前列素或者比馬前列素。
9.Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)的組合在制造青光眼治療劑中的用途。
10.Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)的組合在制造青光眼治療劑中的用途，其特征為，Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)的作用相互補充和/或增強。
11.如權(quán)利要求9或10所述的Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)的組合的用途，其中所述的Rho激酶抑制劑為(R)-反式-N-(吡啶一4-基)-4-(1-氨基乙基)環(huán)己烷羧酰胺、(R)-(+)-N-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-4-(1-氨基乙基)苯酰胺、1-(5-異喹啉磺?；?高哌嗪、或者1-(5-異喹啉磺?；?-2-甲基哌嗪。
12.如權(quán)利要求9或10所述的Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)的組合的用途，其中所述的前列腺素類物質(zhì)為烏諾前列酮異丙酯、拉坦前列素、曲伏前列素或者比馬前列素。
全文摘要
本發(fā)明提供一種Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合得到的有效的青光眼治療劑。通過將Rho激酶抑制劑和前列腺素類物質(zhì)組合可以使其各自的降低眼壓的作用相互補充和/或增強。給藥方式可以為并用給藥，也可以制成合劑給藥。
文檔編號A61K31/4725GK1684689SQ0382330
公開日2005年10月19日 申請日期2003年8月29日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月29日
發(fā)明者中島正, 松木雄, 原英彰 申請人:參天制藥株式會社