專利名稱：一種治療缺血性中風的中藥組合物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物，特別涉及治療缺血性中風的中藥組合物，同時涉及該組合物的制備方法和質量控制方法。
在近年報道的有關中成藥治療中風后遺癥臨床文獻中，可用于治療中風后遺癥的中藥注射液有復方丹參注射液、復方川芎注射液，脈絡寧注射液、復方活血注射液、刺五加注射液、燈盞花注射液、三七注射液、通脈舒絡液等，其成份多以活血化瘀藥物為主，臨床總有效率87.5-98.3％不等，痊愈率可達66.3-74.3％；口服制劑有康寶口服液、水蛭口服液、中風回春丸、通脈丸、抗栓片等，臨床總有效率也達87-98％。上述研究從不同角度反映了近年國內應用中醫(yī)藥治療中風后遺癥所取得的進展，顯示了中醫(yī)藥在這一領域的獨特優(yōu)勢，同時，對上述研究的客觀分析表明，補氣活血法治療中風后遺癥具有更為顯著的療效優(yōu)勢。
臨床用于治療中風后遺癥偏癱的中藥制劑雖不少，由于組方原則、劑型及臨床療效方面的諸多局限，療效顯著、安全性好、使用方便的中藥制劑仍為臨床所需要。

發(fā)明內容
本發(fā)明的一個目的在于公開一種新的治療缺血性中風中藥組合物；本發(fā)明的另一個目的在于公開制備一種新的治療缺血性中風中藥組合物的方法；本發(fā)明目的還在于公開一種新的中藥組合物的質量控制方法。本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成及配比如下(按重量份)黃芪430-520重量份 丹參290-340重量份 水蛭80-120重量份大黃90-120重量份 木香70-120重量份 僵蠶80-120重量份雞血藤70-120重量份所述水蛭優(yōu)選燙水蛭，大黃優(yōu)選酒制大黃，僵蠶優(yōu)選炒僵蠶。
本藥物組合物的制備方法以上七味，取丹參的一半量與水蛭粉碎成細粉，備用；木香與丹參剩余部分用5-7倍量85-95％乙醇回流提取1-3小時，濾過，濾液在20-70℃，-0.05Mpa--0.09MPa減壓回收乙醇，濃縮液備用；丹參和木香的藥渣與黃芪、僵蠶、雞血藤、大黃用水煎煮兩次，第一次加8-12倍量的水煎煮1-3小時，第二次加7-9倍量的水煎煮1-2小時，合并煎煮液，濾過，濃縮50-60℃至相對密度1.25-1.35，合并上述濃縮液，并與藥材細粉混勻，60-75℃，-0.06Mpa--0.08MPa減壓干燥，經過常規(guī)工序直接或加入藥學上可接受的賦型劑制成臨床可接受的劑型，如片劑、口服液體制劑、膠囊、顆粒劑、注射劑等。本組合物制成藥劑的質量控制方法包括鑒別和/或含量測定。
鑒別方法包括下列方法中的一種和/或幾種a.取本組合物制劑，置顯微鏡下觀察肌纖維無色或淡棕黃色，多單根離散，偶有數根成束，彎曲或局部扭曲，有時局部膨大或不均勻增厚；木栓細胞黃棕色，表面觀呈類方形或多角形；壁稍厚，彎曲或平直，胞腔內常含紅棕色色素，經水合氯醛液透化后色素溶解；b.取本組合物制劑5g，加甲醇50ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取2-4次，每次15-25ml，合并乙醚液，揮干乙醚，殘渣加氯仿5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；再取大黃酸對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以12-18∶4-6∶1-2石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光斑點；置氨氣中熏后，日光下檢視，斑點變?yōu)榧t色；c.取本組合物制劑5g，加甲醇50ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取2-4次，每次15-25ml，合并乙醚液，取乙醚提取后的水液，用水飽和的正丁醇提取2-4次，每次15-25ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的氨水洗滌2-4次，每次15-25ml，棄去氨水溶液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各6μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以60-70∶30-40∶8-12氯仿-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8-12％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以70-85∶18-25甲醇-水為流動相；檢測波長為270nm，理論板數按丹參酮IIA峰計算，應不低于2000；對照品溶液的制備，精密稱取丹參酮IIA對照品10mg，置100ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得，每1ml中含丹參酮IIA 4ug；供試品溶液的制備，取本組合物制劑0.15g，精密稱定，置100ml磨口三角瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜濾過，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本組合物制劑每單位量含丹參以丹參酮IIA(C19H18O3)計，不得少于0.30-0.45mg。上述單位量是指含相當1.322g原藥材的成品藥劑量。
本發(fā)明組合物具有很好的益氣活血、化瘀通絡功能，可以改善缺血性中風氣虛血瘀證患者的語言表達、面癱、眼征、上肢癱、下肢癱、指癱、趾癱、綜合功能，無毒副作用。
下面實驗例用于進一步說明本發(fā)明。
藥效學研究證明，本組合物制劑具有減輕腦缺血大鼠腦水腫、毛細血管通透性及腦組織病理改變，增加狗腦血流量和降低腦血管阻力，抑制大鼠體內、體外血栓形成及體內血小板聚集，延長凝血時間等方面作用，改善正常大鼠及血瘀證家兔血液流變學、降低高脂血癥大鼠脂質含量。急性毒性試驗表明實驗動物最大耐受量為46g/kg；長期毒性試驗表明實驗動物經3個月用藥未見明顯毒副作用。實驗例1本組合物制劑(芪參藤膠囊)藥效學試驗一、實驗性大鼠腦缺血的影響實驗材料動物SD種雄性大鼠，體重160±30g，由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。
藥物芪參藤膠囊內容物浸膏(藥物名稱芪參藤膠囊)。含生藥1.15g/mL，由陜西省西安國藥廠研究所提供，實驗時以蒸餾水為溶劑配制成所需濃度。維腦路通注射液，太原第二制藥廠出品，批號901258方法和結果(一)、參藤膠囊對急性不完全性腦缺血大鼠腦含水量和腦指數的影響。
取SD種雄性大鼠60只，體重160±30g，隨機分為6組，每組10只。①假手術對照組(蒸餾水10ml/kg)；②腦缺血模型組(蒸餾水10mL/kg)；③陽性藥維腦路通對照組(100ml/kg)；④芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；⑤芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；⑥芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)。每天灌胃給藥一次，連續(xù)7天，容量1ml/100g，第7天給藥后1h，3％戊巴比妥鈉35mg/kg腹腔注射麻醉，手術暴露頸總動脈，除假手術組外，各組大鼠結扎兩側頸總動脈，3h后快速斷頭取腦稱重，計算腦指數(腦指數＝100·腦濕重/體重)。然后在110℃烤箱中烤至恒重，計算腦含水量(腦含水量＝100％·(濕重—干重)/濕重)。結果見表1。表1 芪參藤膠囊對急性不完全性腦缺血大鼠腦含水量和腦指數的影響(X±S)組 別劑量 動物數 腦含水量腦指數(g/kg)(％)假手術對照組10ml10 77.79±0.70 1.10±0.06腦缺血模型組10ml10 78.68±0.63 1.26±0.07維腦路通組 0.1 10 77.84*±0.75* 1.17±0.07*芪參藤膠囊小劑量組1.0 10 77.79±0.89*1.19±0.08芪參藤膠囊中劑量組3.0 10 78.11±0.48*1.18±0.05*芪參藤膠囊大劑量組6.0 10 77.84±0.69*1.15±0.05**與腦缺血模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01結果表明，與腦缺血模型組比較，維腦路通組和芪參藤膠囊各劑量組均可顯著降低腦缺血大鼠腦含水量，芪參藤膠囊大、中劑量組及維腦路通組還可使腦缺血大鼠腦指數明顯減小。說明芪參藤膠囊具有減輕腦缺血大鼠腦水腫作用。
(二)、芪參藤膠囊對急性不完全性腦缺血大鼠腦血管通透性的影響取SD種雄性大鼠60只，體重160±30g，隨機分為6組，每組10只。①假手術對照組(蒸餾水10mL/kg)；②腦缺血模型組(蒸餾水10mL/kg)；③維腦路通對照組(100mL/kg)；④芪參藤膠囊小劑量組(1.0g/kg)；⑤芪參藤膠囊中劑量組(3.0g/kg)；⑥芪參藤膠囊大劑量組(6.0g/kg)。每天灌胃給藥一次，連續(xù)7天，容量1L/100g，第7天給藥后1h，3％戊巴比妥鈉35mg/kg腹腔注射麻醉，手術暴露頸總動脈，舌下靜脈注射伊文思藍50mg/kg。除假手術外，各組大鼠注射伊文思藍后5min，結扎兩側頸總動脈，3h后快速斷頭取腦稱重，隨后將腦浸泡于甲酰胺溶液中，45℃恒溫，72h后待腦組織中色素全部浸出，取色素液用721型分光光度計，620mm波長比色，并根據標準曲線計算腦內伊文思藍含量，用μg/g腦濕重表示，結果見表2。表2 芪丹癱膠囊對急性不完全性腦缺血大鼠腦血管通透性的影響(X±S)組別 劑量 動物數 腦組織伊文思藍含量(g/kg) (ug/g)假手術對照組 10ml108.07±1.12腦缺血模型組 10ml109.54±1.10維腦路通組0.1 108.34±1.02*芪參藤膠囊小劑量組 1.0 108.75±1.07芪參藤膠囊中劑量組 3.0 108.39±0.86*芪參藤膠囊大劑量組 6.0 108.52±0.785*與腦缺血模型組比較，*P＜0.05結果表明，與腦缺血模型比較，芪參藤膠囊大、中劑量組和維腦路通組均可明顯降低腦缺血大鼠腦內伊文思藍含量，芪參藤膠囊小劑量組大鼠腦內伊文思藍含量降低不明顯(P＞0.05)。說明，芪參藤膠囊具有減輕腦缺血大鼠腦血管通透性作用。
(三)、芪參藤膠囊對急性不完全性腦缺血大鼠腦組織形態(tài)學的影響取SD種雄性大鼠60只，體重160±30g，，隨機分為6組，每組10只。①假手術對照組(蒸餾水10mL/kg)；②腦缺血模型組(蒸餾水10mL/kg)；③維腦路通對照組(100mL/kg)；④芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；⑤芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；⑥芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)。每天灌胃給藥一次，連續(xù)7天，容量1ml/100g。第7天給藥后1h，3％戊巴比妥鈉35mg/kg腹腔注射麻醉，手術暴露頸總動脈，除假手術外，其余各組大鼠結扎兩側頸總動脈，3h后快速斷頭取腦，10％甲醛固定，冠狀切取大腦，常規(guī)脫水，石蠟包埋制片，HE染色，光鏡下進行組織形態(tài)學檢查。
結果表明，假手術對照組大鼠腦神經組織正常，核膜核仁清楚，胞漿透亮或淡染，神經細胞、毛細血管和小血管周圍都有產生一道空隙。腦缺血的模型組大鼠腦神經膠質細胞腫脹。神經細胞胞體變小，胞漿和胞核模糊、染色深，神經細胞、毛細血管和小血管周圍空隙增大，間質疏松。芪參藤膠囊各劑量組和維腦路通組均可不同程度減輕腦缺血大鼠腦組織神經膠質細胞腫脹和間質疏松，使腦組織神經細胞染色減淡，細胞濃縮減輕。說明芪參藤膠囊可使缺血性大鼠腦組織病理改變減輕。
二、芪參藤膠囊對狗腦血流量、腦血管阻力、血壓和心率的影響實驗材料動物健康成年雜種狗，雌雄兼用，體重10～16kg，由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。
藥物芪參藤膠囊內容物浸膏(藥物名稱芪參藤膠囊)，含生藥1.15g/ml，由陜西省西安國藥廠研究所提供，實驗時以生理鹽水為溶劑配制成所需濃度。鹽酸罌粟堿注射液，青海制藥廠出品，批號930521。
方法和結果取成年雜種狗24只，雌雄兼用，體重10-16kg，實驗分4組，①生理鹽水對照組(5ml/kg)；②陽性藥罌粟堿對照組(0.005g/kg)；③芪參藤膠囊小劑量組(2g/kg)；④芪參藤膠囊大劑量組(4g/kg)。3％戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈注射麻醉后，分離左側頸總動脈，結扎頸外動脈分支，頸總動脈套上適宜的卡式探頭并連接于MFV-1200型電磁流量計測量腦血流量。右側股動脈插管接壓力換能器測量血壓，針型電極刺入四肢皮下，測II導聯(lián)心電圖。上述各項指標均同步記錄于RM-6000型多導生理記錄儀。手術后30min，待各項指標穩(wěn)定后，十二指腸給受試藥，記錄給藥前及給藥后15，30，45，60min腦血流量，收縮壓(SAP)，舒張壓(DAP)，平均動脈壓(MAP)及心率等指標變化。實驗時，每次先給生理鹽水，測量對照組各項指標，隨后再給罌粟堿或芪參藤膠囊。實驗結束后，取出全腦稱重，除以2，計算每分鐘每100g腦重的腦血流量及腦血管阻力。結果見表3-表5。
表3 芪參藤膠囊對狗腦血流量的影響(x±s)

與給藥前比較，*P＜0.05
表4 芪參藤膠囊對狗腦血管阻力的影響(x±s)組別 劑量動物 每分鐘100腦重的腦血流量[1KPa(100g腦重·ml/min)](g/kg)數 給藥前15min 30min45min 60min生理鹽水 5ml 24 0.153±0.019 0.152±0.0190.152±0.019 0.153±0.0190.153±0.019對照組罌粟堿組 0.00580.153±0.019 0.125±0.012** 0.131±0.013*0.138±0.012* 0.146±0.017芪參藤膠囊 280.149±0.017 0.129±0.016* 0.133±0.016*0.137±0.0120.143±0.014小劑量組芪參藤膠囊 480.147±0.016 0.128±0.015* 0.125±0.017** 0.131±0.014* 0.130±0.015大劑量組與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01表5 芪參藤膠囊對狗收縮壓(SAP)，舒張壓(DAP)，平均動脈壓(MAP)及心率的影響(x±s)生理鹽水對照組(5ml/kg) 罌栗堿組 芪參藤膠囊小劑量組芪參藤膠囊大劑量組(n＝24)(0.005g/kg)(n＝8) (2g/kg)(n＝8) (4g/kg)(n＝8)DAP MAPSAPDAPMAP HR SAP (KPS (KPSHR SAP DAP MAPHRSAP DAPMAPHR(KPS) (KPS) (KPS) (b/min) (KPS) ))(b/min) (KPS) (KKPS) (KPS) (b/min)(KPS) (KPS) (KPS) (b/min)175±16± 19± 163±給藥前22±3 15±2 18±2 23±324±5 17±3 18±3 193±2823±3 16±2 17±3 187±2121 22 18168±181±15min 23±3 15±2 17±2 22±3 15±218±2 24±4 17±3 18±4 183±2425±4 17±3 18±4 185±2427 24*164±183±30min 23±3 16±2 17±2 21±4 15±317±3 23±3 18±4 19±4 190±3424±5 16±3 18±4 193±2628 24*169±45min 22±2 15±2 18±2 21±315±318±3176±28 24±3 18±3 18±4 187±3124±4 17±4 17±3 198±2924166±60min 22±3 15±2 18±2 22±315±418±3170±26 24±3 18±3 17±4 197±3823±4 16±3 17±3 203±3226結果表明，與給藥前比較，生理鹽水對照組對狗腦血流量、腦血管阻力、血壓及心率等各項指標均明顯影響。芪參藤膠囊大、小劑量組及鹽酸罌粟堿組可明顯增加狗腦血流量，減小腦血管阻力，芪參藤膠囊明顯作用時間可維持約30min，但對心率及血壓無明顯影響。說明芪參藤膠囊具有改善腦供血作用。
三、芪參藤膠囊對大鼠血栓形成的影響實驗材料動物SD種大鼠，雌雄各半，體重200-400g，由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。
藥物芪參藤膠囊內容物浸膏(藥物名稱芪參藤膠囊)，含生藥1.15g/ml，由陜西省西安國藥廠研究所提供，實驗時以蒸餾水為溶劑配制成所需濃度。肝素鈉，上海浦江應用生物化學研究所生產，批號930407。
方法和結果(一)、參藤膠囊對大鼠體內栓形成的影響取SD種大鼠40只，雌雄各半，體重350±50g，隨機分為5組，每組8只。①空白對照組(蒸餾水10ml/kg)；②陽性藥肝素鈉組(4000u/kg)；③芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；④芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；⑤芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)?？瞻讓φ战M和芪參藤膠囊大、中、小劑量組每天灌胃給藥一次，連續(xù)7天，容量1ml/100g，第7天陽性藥肝素鈉組肌肉注射給藥肝素鈉4000u/kg，各組大鼠分別給藥后1h，3％戊巴比妥鈉35mg/kg腹腔注射麻醉，分離右頸總動脈及左頸外靜脈。取一特制的聚乙烯管內置6cm長絲線一條，以肝素生理鹽水(50u/ml)充滿聚乙烯管，將聚乙烯管的一端插入左頸外靜脈后，由聚乙烯管注入肝素50u/kg抗凝，然后再將聚乙烯管的另一端插入右頸總動脈。血液經聚乙烯管循環(huán)15min，取出絲線稱重，減去絲線干重即為血栓溫重。結果見表6。
表6 芪參藤膠囊對大鼠體內血栓形成的影響(x±s)組 別劑量 動物數 血栓濕重(g/kg) (mg)空白對照組10ml814.0±0.9肝素鈉組 4000u 811.3±0.9**芪參藤膠囊小劑量組1.0 813.0±0.8*芪參藤膠囊中劑量組3.0 812.5±0.8**芪參藤膠囊大劑量組6.0 812.3±1.0**與空白對照比較，*P＜0.05， **P＜0.01結果表明，與空白對照組比較，芪參藤膠囊大、中、小劑量組和肝素鈉組可不同程度明顯減輕大鼠體內血栓濕重。說明芪參藤膠囊具有防止血栓形成作用。
(二)芪參藤膠囊對大鼠體外血栓形成的影響取SD種大鼠50只，雌雄各半，體重245±35g，隨機分為5組，每組10只。①空白對照組(蒸餾水10ml/kg)；②陽性藥肝素鈉組(4000u/kg)；③芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；④芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；⑤芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)?？瞻讓φ战M和芪丹愈膠囊各劑量組每天灌胃給藥一次，連續(xù)7天，容量1ml/100g，陽性藥肝素鈉組于第7天肌肉注射給藥肝素鈉4000u/kg。第7天各組大鼠分別給藥后1h，3％戊巴比妥鈉35mg/kg腹腔注射麻醉，頸總動脈插管取血1.8ml，迅速注入塑料環(huán)內，立刻將塑料環(huán)套在ANCOM9103-B型血栓形成儀(北京科建傳感技術公司產品)轉盤上，以17±1轉/min，線速度4377mm/min旋轉15min后取下(旋轉塑料環(huán)與地面夾角為74°)，用濾紙吸去余血，分別測血栓長度與濕重，結果見表7。
表7 芪參藤膠囊對大鼠體外血栓形成的影響(x±s)組別 劑量 動物 血栓長度 血栓濕重(g/kg)數 (mm) (mg)空白對照組10ml 8 41.4±10.5101.6±7.7肝素鈉組 4000u 8 0.9±1.5**2.1±3.5**芪參藤膠囊小劑1.0 8 26.6±5.7** 76.4±11.5**量組芪參藤膠囊中劑3.0 8 24.9±4.3** 71.7±7.7**量組芪參藤膠囊大劑6.0 8 20.6±5.8** 55.7±11.6**量組與空白對照比較，**P＜0.01結果表明，與空白對照組比較，芪參藤膠囊各劑量組和肝素鈉組均可明顯減小大鼠體外血栓長度和血栓濕重。說明芪參藤膠囊具有防止體內血栓形成和擴大作用。
四、芪參藤膠囊對腎上腺素致聚作用下大鼠體內循環(huán)血小板聚集比率的影響實驗材料動物SD種大鼠，雌雄各半，體重250±30g，由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。
藥物芪參藤膠囊內容物浸膏(藥物名稱芪參藤膠囊)，含生藥1.15g/ml，由陜西省西安國藥廠研究所提供，實驗時以蒸餾水為溶劑配制成所需濃度。復方丹參注射液，含丹參、降香各2g/ml上海第一制藥廠出品，批號929030。鹽酸腎上腺素，山東新華制藥廠出品，批號920522。
方法和結果取SD種大鼠60只，雌雄各半，體重250±30g，隨機分為6組，每組10只。①空白對照組(蒸餾水10ml/kg)；②腎上腺素致聚模型組(蒸餾水10ml/kg)；③陽性藥復方丹參組(0.4g/kg)；④芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；⑤芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；⑥芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)。每天灌胃給藥一次，連續(xù)7天，容量1ml/100g，第7天給藥后1h斷頭取血1.8ml，200u/ml肝素鈉0.2ml抗凝，隨后加入腎上腺素，誘導血小板聚集，腎上腺素終濃度為20umol/l?；靹蚝蠓謩e取0.5ml加入2mlEDTA緩沖液和2ml含的福爾馬林的EDTA緩沖液，離心(1000g/min，10min)得兩個多血小板血漿溶液，分別置于顯微鏡下進行血小板計數，并根據公式求血小板聚集比率(PAR)結果見表8。 EDTA緩沖液配方0.077MEDTA3ml加0.1M×10倍濃磷酸鹽緩沖液5ml，再加蒸餾水12ml。福爾馬林-EDTA緩沖液配方0.077MEDTA3ml加4％福爾馬林5ml，加0.1M×10倍濃磷酸鹽緩沖液2ml，再加蒸餾水10ml。上述兩種緩沖液PH均為7.4。表8 芪參藤膠囊對腎上腺素致聚作用下大鼠體內循環(huán)血小板聚集比率的影響(x±s)組別 劑量 動物數 血小板聚集比率(g/kg)空白對照組 10ml10 0.93±0.17腎上腺素致聚模型組 10ml10 0.25±0.07復方丹參組 0.4 10 0.57±0.14**芪參藤膠囊小劑量組 1.0 10 0.72±0.29**芪參藤膠囊中劑量組 3.0 10 0.79±0.15**芪參藤膠囊大劑量組 6.0 10 0.85±0.12**
與腎上腺素致聚模型組比較，**P＜0.01結果表明，與腎上腺素致聚模型組比較，芪參藤膠囊各劑量組及復方丹參組均可明顯提高血小板聚集比率。說明芪參藤膠囊具有抑制血小板聚集作用。
五、芪參藤膠囊對小鼠凝血時間的影響實驗材料動物ICR種大鼠，體重20±2g，雌雄各半，由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。
藥物芪參藤膠囊內容物浸膏(藥物名稱芪參藤膠囊)，含生藥1.15g/ml，由陜西省西安藥廠研究所提供，實驗時以蒸餾水為溶劑配制成所需濃度。肝素鈉，上海浦江應用生物化學研究所生產，批號930407。
方法和結果取ICR種小鼠50只，雌雄各半，體重20±2g，隨機分為5組，每組10只。①空白對照組(蒸餾水10ml/kg)；②陽性藥肝素鈉組(4000u/kg)；③芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；④芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；⑤芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)?？瞻讓φ战M和芪參藤膠囊大、中、小劑量組每天灌胃給藥一次，連續(xù)7天，容量0.1ml/10g，第7天，陽性藥肝素鈉組肌肉注射給藥肝素鈉4000u/kg，各組小鼠分別給藥后1h，眼眶取血，玻片法測凝血時間，結果見表9。
表9 芪參藤膠囊對小鼠凝血時間的影響(x±s)組別 劑量 動物數 凝血時間(g/kg) (min)空白對照組10ml 10 1.8±0.9肝素鈉組 10ml 10 5.7±1.5**芪參藤膠囊小劑量組1.0 10 2.8±0.9*芪參藤膠囊中劑量組3.0 10 2.7±0.8*芪參藤膠囊大劑量組6.0 10 3.2±1.1**與空白對照比較，**P＜0.05；**P＜0.01結果表明，與空白對照組比較，芪參藤膠囊大、中、小劑量組和肝素鈉組均可不同程度明顯延長小鼠凝血時間。說明芪參藤膠囊具有抗凝血作用。
六、芪參藤膠囊對血液流變學的影響實驗材料動物SD種大鼠，雌雄各半，體重225±35g。家兔，雌雄各半，體重2.3±0.2kg。由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。
藥物芪參藤膠囊內容物浸膏(藥物名稱芪參藤膠囊)，含生藥1.15g/ml，由陜西省西安國藥廠研究所提供，實驗時以蒸餾水為溶劑配制成所需濃度。復方丹參注射液，含丹參、降香各2g/ml，上海第一制藥廠出品，批號929030。右旋糖酐(平均分子量MW為35-40萬)，天津市生化制品廠出品。
方法和結果(一)、芪參藤膠囊對正常大鼠血液流變學的影響取SD種大鼠50只，雌雄各半，體重225±35g，隨機分為5組，每組10只。①空白對照組(蒸餾水10ml/kg)；②陽性藥復方丹參組(0.4g/kg)；③芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；④芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；⑤芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)。每天灌胃給藥一次，連續(xù)7天，容量1ml/100g，第7天給藥后1h，尾靜脈采血，微量壓積管測定法測紅細胞壓積，溫氏管測紅細胞沉降率。隨后斷頭取血，用LG-III型粘度計測血漿粘度、全血粘度，并根據公式求全血還原粘度〔還原粘度＝(全血粘度-1)/紅細胞壓積〕。結果見表10。表10 芪參藤膠囊對正常大鼠全血栓粘度、血漿粘度、全血還原粘度、紅細胞壓積和紅細胞沉降率的影響(x±s)全面粘度組別 劑量動物 高切 低切 血漿粘度 還原粘度 壓積(g/kg)數 (200.S)-1(40.S)-1(mpa.s) (mpa.s) (％) 血沉(mm/b)空白對照組 10ml 10 4.66±0.81 10.89±3.14 3.44±0.54 8.83±2.08 41.86±4.11 4.36±3.77復方丹參組 0.4 10 3.74±0.56** 7.01±1.23** 2.66±0.63** 7.02±1.63* 37.75±3.46* 1.26±1.04*芪參藤膠囊小 1.0 10 4.15±0.71** 8.82±1.69* 3.01±0.42* 7.39±1.42 41.42±1.39 2.08±1.67*劑量組芪參藤膠囊中 3.0 10 3.85±0.68* 7.75±1.05** 2.86±0.39* 6.87±1.88* 41.95±3.21 1.65±0.89*劑量組芪參藤膠囊大 6.0 10 3.61±0.29** 7.07±0.48** 2.74±0.19** 7.21±1.24* 40.60±1.90 0.79±0.89**劑量組與空白對照比較，*P＜0.05，**P＜0.01結果表明，與空白對照組比較，芪參藤膠囊大劑量組全血粘度，血漿粘度，還原粘度和血沉明顯降低。芪參藤膠囊各劑量組對紅細胞壓積均無明顯影響。說明芪參藤膠囊具有抑制血細胞聚集，降低血液粘度作用，但對紅細胞大小及數量可能無明顯影響。
(二)、芪參藤膠囊對高分子右旋糖酐致家兔血瘀證的血液流變學影響。
取家兔36只，雌雄各半，體重2.3±0.2kg，隨機分為6組，每組6只。①空白對照組(蒸餾水20ml/kg)；②血瘀證模型組(蒸餾水20ml/kg)；③陽性藥復方丹參組(0.4g/kg)；④芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；⑤芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；⑥芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)每天灌胃給藥一次，連續(xù)6天，容量20ml/kg，第6天下午，除空白對照組外，其余各組家兔沿耳緣靜脈注射10％高分子右旋糖酐(MW35-40萬)4ml/kg。16h后再灌胃給受試藥一次，并于給藥后1h，心臟抽血，測血漿粘度，全血粘度，紅細胞壓積和紅細胞沉降率，并根據公式求全血還原粘度。結果見表11。表11 芪參藤膠囊對高分子右旋糖酐(MW35～40萬)致家兔血瘀證的全血粘度、血漿粘度、還原粘度、紅細胞壓積及沉降率的影響(x±s)全面粘度組別劑量 動物 高切 低切 血漿粘度 還原粘度 壓積 血沉(g/kg) 數(200.S)-1(40.S)-1(mpa.s) (mpa.s) (％) (mm/b)空白對照組 20ml 64.78±1.08 13.23±2.09 4.28±0.58 9.19±3.1142.13±6.34 2.13±0.97血瘀證模型 20ml 67.85±1.24 16.89±1.64 6.87±0.77 15.62±2.10 36.67±4.79 3.83±1.04組復方丹參組 0.4 65.17±1.78* 14.01±1.74* 5.14±1.06**12.60±1.88* 38.18±5.28* 2.53±0.87*芪參藤膠囊 1.0 66.28±0.78** 14.85±1.38* 5.48±1.18* 13.87±2.38 35.85±4.89 2.62±1.12*小劑量組芪參藤膠囊 3.0 65.98±1.06* 15.02±1.06* 5.28±1.12* 18.31±1.25* 35.19±5.74 2.24±0.69*中劑量組芪參藤膠囊 6.0 6 5.54±1.51* 14.47±1.85* 4.98±0.87**12.89±1.83* 38.47±6.7 2.35±0.85*大劑量組與血瘀證模型比較，*P＜0.05，**P＜0.01結果表明，與血瘀證模型組比較，芪參藤膠囊大、中劑量組和復方丹參組均可明顯降低全血粘度、血漿粘度、還原粘度及血沉，芪參藤膠囊小劑量組可顯著降低全血粘度和血漿粘度，但對紅細胞壓積均無明顯影響。說明芪參藤膠囊具有降低血液粘度，改善血瘀證血液流變學作用。
七、芪參藤膠囊對高分子右旋糖酐致急性微循環(huán)障礙家兔眼結膜微循環(huán)的影響實驗材料動物健康家兔，雌雄兼用，體重1.9±0.3kg，由西安醫(yī)科大學動物中心提供。
藥物芪參藤膠囊內容物浸膏(藥物名稱芪參藤膠囊)，含生藥1.15g/ml，由陜西省西安國藥廠研究所提供，實驗時以生理鹽水為溶劑配制成所需濃度。復方丹參注射液，含丹參、降香各2g/ml，上海第一制藥廠出品，批號929030。右旋糖酐(MW35-40萬)，天津市生化制品廠出品。
方法和結果取家兔30只，雌雄兼用，體重1.9±0.3kg，隨機分為5組，每組6只。①生理鹽水對照組(5ml/kg，十二指腸給藥；0.1ml，表面滴注)；②陽性藥復方丹參對照組(0.4g/kg，十二指腸給藥；0.15g/0.1ml，表面滴注)；③芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg，十二指腸給藥；0.029g/0.1ml，表面滴注)；④芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg，十二指腸給藥；0.058g/0.1ml，表面滴注)；⑤芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg，十二指腸給藥；0.115g/0.1ml，表面滴注)。實驗時將家兔用3％戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈注射麻醉，側臥固定，用開瞼器張開眼瞼，在落射光源下放大30-60倍顯微鏡觀察。隨即自耳繃靜脈注射10％右旋糖酐(MW35-40萬)生理鹽水溶液4ml/kg，15min后記錄微循環(huán)障礙兔眼結膜微血管流速、流態(tài)、管徑和固定區(qū)域毛細血管交點數。流態(tài)分級0級，為直線(線粒)狀；1級，為虛(粒)線狀；II級，為粒(絮)狀；III級，為淤滯狀，以及血管中無紅細胞流過。先觀察左眼結膜微循環(huán)，隨后滴注0.1ml受試藥于眼球結膜表面，5min后記錄左眼微循環(huán)各項指標變化(表12)。沖洗左眼，再觀察右眼結膜微循環(huán)，開腹，十二指腸給受試藥，30min后記錄右眼微循環(huán)各項指標變化(表13)。實驗采用給藥前后身自對照。表12 芪參藤膠囊表面滴注對兔眼結膜微血管流速、管徑和固定區(qū)域毛細血管交點數的影響(x±s)流 速 管 徑 交點計數組 別劑量動物 (μm/s) (μm) (條)(g/0.1ml) 數 給藥前 給藥后 給藥前 給藥后 給藥前 給藥后生理鹽水對0.1ml6 75±10 72±9 37.4±6.5 38.8±7.14.8±0.5 4.0±0.7照組復方丹參組0.15 6 81±13 134±14** 42.9±7.3 51.3±8.8* 5.7±0.7 6.6±0.7*芪參藤膠囊0.0296 87±18 143±19** 36.8±7.1 46.8±7.4* 5.8±0.6 6.8±0.8*小劑量組芪參藤膠囊0.0586 72±16 124±14** 46.1±7.6 57.2±7.9* 6.2±0.7 7.3±0.8*中劑量組芪參藤膠囊0.1156 76±15 133±17** 33.5±8.1 47.3±8.4* 5.4±0.8 6.5±0.9*大劑量組與給藥前比較，*P＜0.05，**P＜0.01表13 芪參藤膠囊十二指腸給花對兔眼結膜微血管流速、管徑及固定區(qū)域毛細血管交點數的影響(x±s)流 速 管 徑 交點計數組 別 劑量 動物數 (μm/s) (μm)(條)(g/kg) 給藥前 給藥后 給藥前 給藥后 給藥前給藥后生理鹽水對照組 5ml669.3±8.7 63.8±10.3 51.4±10.6 52.6±12.74.5±0.4 4.3±0.6復方丹參組0.4654.8±8.2 68.6±12.3* 48.4±9.065.6±13.0* 5.2±0.8 6.3±0.9*芪參藤膠囊 1.0664.6±7.2 74.5±8.4* 42.9±11.9 53.9±13.64.8±0.6 5.4±0.9小劑量組芪參藤膠囊 3.0672.9±8.5 86.4±14.7* 56.3±13.2 76.1±14.6* 5.6±0.7 6.6±0.8*中劑量組芪參藤膠囊 6.0658.9±8.6 72.1±11.8* 44.5±10.1 60.8±11.8* 6.7±0.9 8.0±1.1*大劑量組與給藥前比較，*P＜0.05結果表明，與給藥前比較，表面滴注及十二指腸給藥生理鹽水對兔眼結膜微循環(huán)均無明顯影響。兔眼結膜表面滴注給藥，芪參藤膠囊各劑量組和復方丹參組微血管流速明顯加快，管徑變粗，毛細血管交點數增多，各組6例動物均可見流態(tài)由III級變?yōu)镮I級或I級，血細胞聚集程度減輕。十二指腸給藥，芪參藤膠囊大、中劑量組和丹參組微血管流速明顯加快，管徑變粗，毛細血管交點數增多，血液流態(tài)各有5例由III級變?yōu)镮I級或I級。以上結果說明芪參藤膠囊具有改善微循環(huán)障礙作用。
八、芪參藤膠囊對大鼠高脂血癥脂質含量的影響實驗材料動物SD種大鼠，雄性，體重180±25g，由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。
藥物芪參藤膠囊內容物浸膏(藥物名稱芪參藤膠囊)，含生藥1.15g/ml，由陜西省西安國藥廠研究所提供，實驗時以蒸餾水為溶劑配制成所需濃度。絞股藍總甙片，陜西安康中藥廠出品，批號930212。
方法和結果取SD種雄性大鼠60只，體重180±25g，隨機分為6組，每組10只。①空白對照組(蒸餾水10ml/kg)；②高脂血證模型組(蒸餾水10ml/kg)；③陽性藥絞股藍總甙組(0.05g/kg)；④芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)；⑤芪參藤膠囊中劑量組(3g/kg)；(6)芪參藤膠囊大劑量組(6g/kg)。每天灌胃給藥一次，連續(xù)14天，容量1ml/100g。同時除空白對照組外，其余各組動物均喂給高脂飼料(4％膽固醇、10％豬油、0.5％膽汁酸和85.5％基礎飼料)。第14天，給藥后1h，斷頭取血，酶法測定血清總膽固醇及甘油三酯含量，結果見表14。表14 芪參藤膠囊對實驗性高脂血癥大鼠血清總膽固醇及甘油三酯含量的影響(x±s)組 別 劑量動物數 總膽固醇甘油三酯(g/kg) (mmol/L)(mmol/L)空白對照組 10ml 10 1.627±0.1640.466±0.147高脂血癥模型組 10ml 10 2.460±0.3920.970±0.312絞股藍總甙組0.05 10 1.658±0.263** 0.476±0.158**芪參藤膠囊小劑量組1.0 10 1.777±0.476** 0.428±0.118**芪參藤膠囊中劑量組3.0 10 1.803±0.349** 0.417±0.120**芪參藤膠囊大劑量組6.0 10 1.741±0.352** 0.415±0.119**與高脂血癥模型組比較，**P＜0.01結果表明，與高脂血癥模型組比較，芪參藤膠囊各劑量組及絞股藍總甙組均可明顯降低大血清總膽固醇及甘油三酯含量。說明芪參藤膠囊具有降低高脂血癥大鼠血脂作用。
九、芪參藤膠囊對小鼠腦缺血后能量代謝及代謝產物的影響實驗材料動物ICR種小鼠，雌雄各半，體重202g，由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。藥物芪參藤膠囊浸膏，含生藥1.15/ml，由陜西省西安國藥研究所提供。尼莫地平片，哈爾濱制藥三廠出品批號940901，各藥臨用時用蒸餾水配成所需濃度。
方法和結果取ICR種小鼠60只，雌雄各半，體重20±2g隨機分成6組，每組10只。(1)假手術對照組(蒸餾水10ml/kg)；(2)腦缺血模型組(10ml/kg)；(3)陽性藥尼莫地平組(5ml/kg)；(4)芪參藤膠囊小劑量組(1.5g/kg)；(5)芪參藤膠囊中劑量組(3.0g/kg)；(6)芪參藤膠囊大劑量組(6.0/kg)。各組動物每天灌胃給藥一次，容量0.1ml/10g，連續(xù)6天。第6天，灌胃給藥后1h，各組動物腹腔注射1％鹽酸氯胺酮50ml/kg淺麻醉，手術暴露雙側頸總動脈及迷走神經。除假手術對照組外，零號手術線結扎其余各組小鼠雙側頸總動脈及迷走神經。在結扎左側時，先在頸總動脈及其伴行的迷走神經下置一直徑為0.17mm細鋼絲，結扎后抽出鋼絲，形成左頸總動脈部分狹窄。手術后6h，各組動物斷頭初四，并迅速將頭置液氮中，10min厚剝離全腦并除去腦橋以下組織，其余組織稱重，隨后置1ml Tris-HCL緩沖液(0℃，Ph7.4)中均勻漿30秒(700轉/分)，總溶液再加至3ml，于冷凍離心機內(4℃)3000轉/分離心30分，取上清液，酚學法測乳酸(LA)、ATP，、磷酸肌酸(pcr)、葡萄糖(Glu)、次黃嘌呤(Hx)等含量，一次提取比色法測游離脂肪酸(FFA)含量，反應比色法測脂質過氧化產物丙二醛(MDA)量，鄰苯三酚自氧化法測超氧化物歧化酶(SOD)活性，并求出每克腦組織中各指標含量或活性，結果見表15。表15 芪參藤膠囊對小鼠腦缺血后能量代謝及代謝產物的影響(X±S)劑量動物數 LA ATPPCr GLu Hx FFA MDASOD組 別 (g/kg) (只) (umol/g) (umol/g) (umol/g) (umol/g) (umol/g) (nmol/g)(nmol/g) (u/g)假手術對照組 10ml10 2.90±0.332.10±0.26 2.43±0.25 1.71±0.67 0.99±0.42 175.1±34.1 113.7±78.91643.6±164.2腦缺血模型組 10ml10 8.16±1.071.28±0.28 0.84±0.18 1.38±0.54 2.71±0.72 491.6±62.3 259.7±83.21581.6±164.6尼莫地平組 0.005 10 5.21±1.24** 1.63±0.33* 1.08±0.26* 1.29±0.82 2.10±0.53* 318.1±125.7** 194±137.31591.5±154.7芪參藤小劑量組 1.5 10 6.67±1.23** 1.59±0.30* 0.97±0.20 1.40±0.73 2.04±0.67* 413.5±87.9*166.9±98.9*1641.3±147.8芪參藤中劑量組 3.0 10 6.22±0.89** 1.62±0.35* 1.03±0.21* 1.22±0.47 2.13±0.43* 398.6±71.6** 167.6±87.8*1610.4±157.7芪參藤大劑量組 6.0 10 4.09±0.90** 1.70±0.44* 1.15±0.30* 1.35±0.94 1.96±0.46* 378.4±110.8* 159.4±82.8*1585.0±116.2與缺血模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01結果表明，與腦缺血模型組比較，芪參藤膠囊各劑量組腦組織乳酸含量、次黃嘌呤含量、游離脂肪酸含量及脂質過氧化產物丙二醛含量均不同程度明顯減少，而ATP含量，磷酸肌酸含量則均不同程度明顯增高，但葡萄糖含量和超氧化物歧化酶活性變化不顯著。說明芪參藤膠囊具有改善缺血后腦組織能量代謝及腦組織缺氧狀況，降低缺氧組織過氧化物含量等作用。
十、芪參藤膠囊對大鼠自身血凝塊致腦梗塞的影響實驗材料動物SD種大鼠，雌雄各半，體重280±30g，由西安醫(yī)科大學實驗動物中心提供。藥物芪參藤膠囊浸膏；含原生藥1.15g/ml，由陜西西安國藥研究所提供。尼莫地平片，哈爾濱制藥三廠出品，批號940901，各藥臨用時以蒸餾水為溶劑配制成所需濃度。
方法和結果取SD大鼠60只，雌雄各半，體重280±30g，隨機分成6組，每組10只。(1)假手術對照組(蒸餾水10ml/kg)(2)腦梗塞模型組(蒸餾水10ml/kg)；(3)陽性尼莫地平組(5mg/kg)；(4)芪參藤膠囊小劑量組(1g/kg)(5)芪參藤膠囊小中劑量組(3g/kg)；(6)芪參藤膠囊小大劑量組(6g/kg)。每天灌胃給藥一次，容量1ml/100g，連續(xù)5天。第3天除假手術組外，各組動物每鼠心臟取血0.2ml，分別置試管中，室溫下放置48h后形成血凝塊，分離血清并加入0.8ml生理鹽水，注射器裝上4號針頭抽取數次，制成血凝塊生理鹽水混懸液備用。第5天，各組動物灌胃給藥后，腹腔注射5％鹽酸氯胺酮100/kg麻醉，仰臥固定，皮膚剪毛消毒，切開頸部，分離右側頸總，頸內和頸外動脈，頸總動脈遠心端下穿線，用動脈夾分別夾閉頸外動脈和頸總動脈近心端，抽取0.2ml動物自身血凝塊生理鹽水混懸液(假手術對照組抽取0.2ml生理鹽水)，注入頸總動脈，隨后提拉線繩阻斷頸總動脈遠心端血流，用血管栓塞劑TH膠(中外合資深圳南光醫(yī)用膠有限公司出品)粘合針孔，1min后，依次恢復頸總動脈遠心端，近心端和頸外動脈血流，縫合肌肉及皮膚，術后再繼續(xù)灌胃給藥4天，并分別與術后3天和第4天采用輻射式電路箱進行學習記憶訓練、測試，以動物受電擊后能從起步區(qū)直接進入安全區(qū)為正確反映，記錄各組動物每鼠10次受試中的正確反映次數，求出正確反映率。結果見表1。電迷路箱三壁長、寬、高分別為30、15、12cm、箱頂上蓋玻璃，箱底輔間距為1cm寬的銅柵，有CJS1132以路生理刺激儀(實地科技產品研制所)通以電壓100V，波寬40ms，頻率64Hz的電脈沖。末次測試完后，立即斷頭處死大鼠，取腦置于中性福爾馬林液中固定，以視交叉為標準向前、后各作2mm厚的冠狀切面二塊，常規(guī)脫水包埋，HE染色，顯微鏡下檢查梗塞范圍及其周圍的腦組織變化。
表16 芪參藤膠囊對自身血凝塊致腦梗塞大鼠學習記憶的影響(X±S)組別 劑量動物數 正確反映率(％)(g/kg)(只) 訓 練 測 試假手術對照組10ml 10 0.58±0.10 0.65±0.11腦梗塞模型組10ml 10 0.28±0.15 0.33±0.11尼莫地平組0.00510 0.46±0.13* 0.58±0.15**芪參藤膠囊小劑量組110 0.44±0.11* 0.49±0.14*芪參藤膠囊中劑量組310 0.52±0.12**0.61±0.13**芪參藤腔囊大劑量組610 0.54±0.11**0.66±0.14**與腦梗塞模型比較，*P＜0.05，**P＜0.01結果表明，與腦梗塞模型組比較，芪丹癱愈膠囊各劑量組和尼莫地平組大鼠電迷路訓練、測試正確反應率明顯提高。組織學檢查表明，假手術對照組動物組織未見梗死病灶，神經元、神經膠質、神經纖維等均未見異常病變；腦梗塞模型組有7例動物腦組織內可見不同程度的灶狀梗死區(qū)，其內神經元、神經纖維變性、壞死、消失，周圍可見泡沫細胞和膠質細胞增生，部分壞死灶泡沫細胞聚集較多；小劑量組有3例動物腦組織出現(xiàn)梗死灶，中、大劑量組和尼莫地平組各有一例出現(xiàn)梗死灶，但梗死范圍均較模型組為小，且周圍泡沫細胞及膠質細胞增生均較少。
說明芪丹癱愈膠囊可改善自身血凝塊腦梗塞大鼠腦功能，減少腦梗死范圍和腦組織損傷程度，對缺血性腦梗塞有一定防治作用。實驗例2本發(fā)明組合物制劑(芪參藤膠囊)II、III期臨床試驗一、臨床研究方案臨床研究入選病例采取隨機、雙盲、對照法，其性別、年齡、病程、病情、癥候積分等指標與對照組相比均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，兩組具有可比性。中醫(yī)診斷標準參照國家中醫(yī)藥管理局腦病急癥科研協(xié)作組起草制訂的《中風診斷療效評定標準(試行)》，西醫(yī)診斷標準參照1995年全國第四屆腦血管病會議《腦血管疾病診斷要點》的動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死，并依據納入和排隊病例標準對入選病例進行嚴格篩選。
觀測性指標分為安全性觀測和療效性觀察兩部分。前者包括一般體檢項目，血、尿、便常規(guī)化驗，心電圖、肝功能(AST、ALT)、腎功能(BUN、CRE)；后者包括語言及運動功能，神經系統(tǒng)癥狀、體征，中醫(yī)癥狀、舌、脈變化，頭顱CT掃描，血液流變學檢查，血脂檢查，經顱多普勒(TCD)檢查。
療效判定標準以中風病計分和氣虛血瘀證癥狀計分，分別評定語言、運動功能的恢復程度和癥狀改善情況。
二、觀察結果II期臨床觀察按照隨機、雙盲、多中心平行對照的方法，III期臨床觀察按照隨機對照單盲的方法，對符合診斷標準和納入標準，經排除標準篩選的入選病例，作為受試對象。設對照組和治療組，以腦安膠囊為陽性對照藥，按1∶1的比例分別給予腦安膠囊每次2粒，每日2次/芪參藤膠囊每次3粒，每日3次，飯后溫開水送服，觀察四周。結果如下
II期臨床共觀察了符合入選標準缺血性中風病人200例(對照組、治療組各100例)，經統(tǒng)計(計數資料采用卡方檢驗，計量資料采用t檢驗，等級資料采用Ridit分析，相關分析采用相關性檢驗)，治療組總有效率為87.00％，基本恢復率及顯著進步率為41.00％，對照組總有效率為77.00％，基本恢復率及顯著進步率為21.00％，治療組療效明顯優(yōu)于對照組，兩組相比差異有非常顯著性意義。在治療中醫(yī)證候療效方面，治療組總有效率86.00％，愈顯率49.00％，對照組總有效率67.00％，愈顯率23.00％，兩組比較，總有效率、愈顯率及中醫(yī)證候積分均有非常顯著性意義，治療組療效明顯優(yōu)于對照組。對各單項指標的分析顯示，在改善上肢癱、下肢癱、指癱、趾癱方面，治療組療效明顯優(yōu)于對照組在改善半身不遂、偏身麻木、口舌歪斜、面色 白、氣短乏力、汗自出、心悸、舌質舌體舌苔、脈象方面治療組療效優(yōu)于對照組；在改善下肢癱、舌強語謇、舌質舌體、舌苔方面，治療組起效時間快于對照組。通過與療效相關因素的分析，發(fā)現(xiàn)病人病情與療效呈負相關性。對治療前后血液流變學的分析結果顯示，治療組的紅細胞變形能力、全血粘度中切、血漿粘度較對照組均有顯著改善，而血脂無顯著性改變。臨床試驗過程中治療組除有兩例病人發(fā)生輕度惡心外，未見明顯副作用。安全性檢查證明，本藥臨床應用安全性好。
III期共觀察了符合入選標準缺血性中風病人400例(治療組300例，對照組100例)，經統(tǒng)計(計數資料采用卡方檢驗，計量資料采用t檢驗，等級資料采用Ridit分析，相關分析采用相關性檢驗)，治療組總有效率為87.67％，基本恢復率及顯著進步率為41.67％，對照組總有效率為73.00％，基本恢復率及顯著進步率為24.00％，兩組相比差異有非常顯著性意義，治療組療效明顯優(yōu)于對照組。在中醫(yī)證候療效方面，治療組的總有效率88.67％，愈顯率40.33％，對照組總有效率74.00％，愈顯率17.00％，兩組比較總有效率、愈顯率和中醫(yī)證候積分均有顯著性意義，治療組療效明顯優(yōu)于對照組。對各單項指標的分析顯示，在改善面癱、上肢癱、下肢癱、綜合功能方面，治療組療效明顯優(yōu)于對照組在改善半身不遂、口舌歪斜、面色 白、心悸、舌質舌體舌苔、脈象方面治療組療效明顯優(yōu)于對照組在改善便溏方面，治療組起效時間快于對照組。通過與療效相關因素的分析，發(fā)現(xiàn)病人病情、病程與療效呈負相關性。治療前后血液流變學，治療組的全血粘度低切與對照組比較有顯著性差異；血脂則無明顯變化。臨床試驗過程中除治療組有兩例病人發(fā)生輕微惡心外，未見其它明顯副反應。經安全性檢查證明本藥臨床應用安全性好。
二、研究結論芪參藤膠囊具有益氣活血、化瘀通絡功能，用量每次3粒，每日3次，4周為一療程，可以改善缺血性中風氣虛血瘀證患者的語言表達、面癱、眼征、上肢癱、下肢癱、指癱、趾癱、綜合功能、降低中風病積分及中醫(yī)證候積分，其中在改善面癱、上肢癱、下肢癱、、指癱、趾癱、綜合功能方面，治療組療效明顯優(yōu)于對照組。在治療中醫(yī)證候方面療效明顯優(yōu)于腦安膠囊，其中在改善半身不遂、偏身麻木、口舌歪斜、面色 白、氣短乏力、汗自出、心悸、舌質舌體舌苔、脈象方面治療組療效明顯優(yōu)于對照組。在改善便溏、下肢癱、舌強語謇、舌質舌體、舌苔方面，治療組起效時間明顯快于對照組。除個別患者有惡心外未見明顯副反應。經安全性檢驗證明本藥安全可靠。以上研究表明芪參藤膠囊能改善缺血性中風氣虛血瘀證病人神經功能缺損的作用，促進功能恢復，其療效優(yōu)于對照藥物腦安膠囊，證明該藥可以在臨床實驗例3本發(fā)明組合物制劑(芪參藤膠囊)長期毒性實驗實驗進行了二種性別SD種大鼠三個月灌胃給藥芪參藤膠囊24g/kg、12g/kg、6g/kg(按體表面積折算，大約分別為人用量的60，30，15倍)三個劑量組的長期毒性實驗。給藥后逐日動物一般狀況，每二周稱體重一次。末次給藥24h后各組空腹處死14只動物，進行血常規(guī)5項，血液生化學10項，臟體比11項檢查，并參15個臟器進行病理學檢查。結果表明，與空白對照組比較，除大劑量組血紅蛋白，谷丙轉氨酶，中劑量組谷草轉氨酶經統(tǒng)計處理有明顯差異外(但數值均在正常范圍內)，其余各項指標均無異常。各組剩余的6只動物停藥二周后，再進行上述各項指標檢查，結果均無異常。說明大鼠三個月長期灌胃給藥芪參藤膠囊未發(fā)現(xiàn)明顯毒性反應。下述實施例均能實現(xiàn)上述實驗例的效果。實施例1膠囊劑黃芪475g丹參317g水蛭(燙)106g大黃(酒制)106g 木香106g僵蠶(炒)106g雞血藤106g以上七味，取丹參的一半量與水蛭粉碎成細粉，備用；木香與丹參剩余部分用6倍量95％乙醇回流提取2小時，濾過，濾液在40-50℃，-0.06Mpa--0.08MPa減壓回收乙醇，濃縮液備用；丹參和木香的藥渣與黃芪、僵蠶、雞血藤、大黃用水煎煮兩次，第一次加10倍量的水煎煮2小時，第二次加8倍量的水煎煮1小時，合并煎煮液，濾過，濃縮50-60℃至相對密度1.30-1.35，合并上述濃縮液，并與藥材細粉混勻，70℃，-0.06Mpa--0.08MPa減壓干燥，粉碎，細粉用85％乙醇制顆粒，干燥，整粒，用淀粉補至330g，裝膠囊，共制成膠囊1000粒，即得。
功能與主治益氣活血、化瘀通絡。用于缺血性中風中經絡氣虛血瘀證之半身不遂、口舌歪斜、言語不利、肢體麻木等癥。
用法與用量口服，一次3粒，一日3次。實施例2顆粒劑黃芪500g 丹參330g 水蛭(燙)115g大黃(酒制)95g 木香80g僵蠶(炒)100g雞血藤90g以上七味，取丹參的一半量與水蛭粉碎成細粉，備用；木香與丹參剩余部分用6倍量95％乙醇回流提取2小時，濾過，濾液在40-60℃，-0.06Mpa--0.08MPa減壓回收乙醇，濃縮液備用；丹參和木香的藥渣與黃芪、僵蠶、雞血藤、大黃用水煎煮兩次，第一次加10倍量的水煎煮2小時，第二次加8倍量的水煎煮1小時，合并煎煮液，濾過，濃縮50-60℃至相對密度1.30-1.35，合并上述濃縮液，并與藥材細粉混勻，70℃，-0.06Mpa--0.08MPa減壓干燥，粉碎，細粉用85％7醇制顆粒，干燥，加入糊精及甜蜜素適量，經常規(guī)工序制成顆粒劑。實施例3片劑黃芪460g丹參300g水蛭(燙)90g大黃(酒制)110g 木香100g僵蠶(炒)100g雞血藤100g以上七味，取丹參的一半量與水蛭粉碎成細粉，備用；木香與丹參剩余部分用6倍量95％乙醇回流提取2小時，濾過，濾液在40-60℃，-0.06Mpa--0.08MPa減壓回收乙醇，濃縮液備用；丹參和木香的藥渣與黃芪、僵蠶、雞血藤、大黃用水煎煮兩次，第一次加10倍量的水煎煮2小時，第二次加8倍量的水煎煮1小時，合并煎煮液，濾過，濃縮50-60℃至相對密度1.30-1.35，合并上述濃縮液，并與藥材細粉混勻，70℃，-0.06Mpa--0.08MPa減壓干燥，粉碎，細粉用85％乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成1000片，包薄膜衣，即得。實施例4膠囊劑的質量控制方法鑒別a.取本品，置顯微鏡下觀察肌纖維無色或淡棕黃色，多單根離散，偶有數根成束，彎曲或局部扭曲，有時局部膨大或不均勻增厚；木栓細胞黃棕色，表面觀呈類方形或多角形；壁稍厚，彎曲或平直，胞腔內常含紅棕色色素，經水合氯醛液透化后色素溶解；b.取本品5g，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，揮干乙醚，殘渣加氯仿5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；再取大黃酸對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以15∶5∶1石油醚(30-60)-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光斑點；置氨氣中熏后，日光下檢視，斑點變?yōu)榧t色；
c.取本品5g，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，取乙醚提取后的水液，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的氨水洗滌三次，每次20ml，棄去氨水溶液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各6μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以65∶35∶10氯仿-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以77∶23甲醇-水為流動相；檢測波長為270nm，理論板數按丹參酮IIA峰計算，應不低于2000；對照品溶液的制備，精密稱取丹參酮IIA對照品10mg，置100ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得，每1ml中含丹參酮IIA 4ug；供試品溶液的制備，取本品10粒的內容物，研細，稱取0.15g，精密稱定，置100ml磨口三角瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，功率250W，頻率40KHz超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用0.45um微孔濾膜濾過，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含丹參以丹參酮IIA(C19H18O3)計，不得少于0.37mg。
權利要求
1.一種治療治療缺血性中風的中藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由下述原料藥制成的黃芪430-520重量份 丹參290-340重量份 水蛭80-120重量份大黃90-120重量份 木香70-120重量份 僵蠶80-120重量份雞血藤70-120重量份。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物是由下述原料藥制成的黃芪475重量份 丹參317重量份 水蛭106重量份大黃106重量份 木香106重量份 僵蠶106重量份雞血藤106重量份。
3.如權利要求1、2所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物中水蛭優(yōu)選燙水蛭，大黃優(yōu)選酒制大黃，僵蠶優(yōu)選炒僵蠶。
4.如權利要求3所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為以上七味，取丹參的一半量與水蛭粉碎成細粉，備用；木香與丹參剩余部分用5-7倍量85-95％乙醇回流提取1-3小時，濾過，濾液在20-70℃，-0.05Mpa--0.09MPa減壓回收乙醇，濃縮液備用；丹參和木香的藥渣與黃芪、僵蠶、雞血藤、大黃用水煎煮兩次，第一次加8-12倍量的水煎煮1-3小時，第二次加7-9倍量的水煎煮1-2小時，合并煎煮液，濾過，濃縮50-60℃至相對密度1.25-1.35，合并上述濃縮液，并與藥材細粉混勻，60-75℃，-0.06MPa--0.08MPa減壓干燥，經過常規(guī)工序直接或加入藥學上可接受的賦型劑制成臨床可接受的劑型，如片劑、口服液體制劑、膠囊、顆粒劑、注射劑。
5.如權利要求4所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于膠囊劑的制備方法為以上七味，取丹參的一半量與水蛭粉碎成細粉，備用；木香與丹參剩余部分用6倍量95％乙醇回流提取2小時，濾過，濾液在40-60℃，-0.06MPa-0.08MPa減壓回收乙醇，濃縮液備用；丹參和木香的藥渣與黃芪、僵蠶、雞血藤、大黃用水煎煮兩次，第一次加10倍量的水煎煮2小時，第二次加8倍量的水煎煮1小時，合并煎煮液，濾過，濃縮50-60℃至相對密度1.30-1.35，合并上述濃縮液，并與藥材細粉混勻，70℃，-0.06MPa--0.08MPa減壓干燥，粉碎，細粉用85％乙醇制顆粒，干燥，整粒，用淀粉補至330g，裝膠囊，即得。
6.如權利要求3所述的藥物組合物制劑的質量控制方法，其特征在于該方法中的鑒別方法包括如下鑒別中的一種或幾種a.取本組合物制劑，置顯微鏡下觀察肌纖維無色或淡棕黃色，多單根離散，偶有數根成束，彎曲或局部扭曲，有時局部膨大或不均勻增厚；木栓細胞黃棕色，表面觀呈類方形或多角形；壁稍厚，彎曲或平直，胞腔內常含紅棕色色素，經水合氯醛液透化后色素溶解；b.取本組合物制劑5g，加甲醇50ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取2-4次，每次15-25ml，合并乙醚液，揮干乙醚，殘渣加氯仿5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；再取大黃酸對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以12-18∶4-6∶1-2石油醚30-60℃-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光斑點；置氨氣中熏后，日光下檢視，斑點變?yōu)榧t色；c.取本組合物制劑5g，加甲醇50ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取2-4次，每次15-25ml，合并乙醚液，取乙醚提取后的水液，用水飽和的正丁醇提取2-4次，每次15-25ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的氨水洗滌2-4次，每次15-25ml，棄去氨水溶液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各6μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以60-70∶30-40∶8-12氯仿-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8-12％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
7.如權利要求6所述的藥物組合物制劑的質量控制方法，其特征在于膠囊劑的鑒別方法包括如下鑒別中的一種或幾種a.取本品，置顯微鏡下觀察肌纖維無色或淡棕黃色，多單根離散，偶有數根成束，彎曲或局部扭曲，有時局部膨大或不均勻增厚；木栓細胞黃棕色，表面觀呈類方形或多角形；壁稍厚，彎曲或平直，胞腔內常含紅棕色色素，經水合氯醛液透化后色素溶解；b.取本品5g，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，揮干乙醚，殘渣加氯仿5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；再取大黃酸對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以15∶5∶1石油醚30-60℃-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光斑點；置氨氣中熏后，日光下檢視，斑點變?yōu)榧t色；c.取本品5g，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，取乙醚提取后的水液，用水飽和的正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的氨水洗滌三次，每次20ml，棄去氨水溶液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各6μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以65∶35∶10氯仿-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
8.如權利要求3所述的藥物組合物制劑的質量控制方法，其特征在于該方法中的含量測定方法為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以70-85∶18-25甲醇-水為流動相；檢測波長為270nm，理論板數按丹參酮IIA峰計算，應不低于2000；對照品溶液的制備，精密稱取丹參酮IIA對照品10mg，置100ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得，每1ml中含丹參酮IIA 4ug；供試品溶液的制備，取本組合物制劑0.15g，精密稱定，置100ml磨口三角瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜濾過，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本組合物制劑每單位量含丹參以丹參酮IIA計，不得少于0.30-0.45mg。
9.如權利要求8所述的藥物制劑的質量控制方法，其特征在于膠囊劑的含量測定方法為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以77∶23甲醇-水為流動相；檢測波長為270nm，理論板數按丹參酮IIA峰計算，應不低于2000；對照品溶液的制備，精密稱取丹參酮IIA對照品10mg，置100ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得，每1ml中含丹參酮IIA 4ug；供試品溶液的制備，取本品10粒的內容物，研細，稱取0.15g，精密稱定，置100ml磨口三角瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，功率250W，頻率40KHz超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用0.45um微孔濾膜濾過，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本品每粒含丹參以丹參酮IIA計，不得少于0.37mg。
10.如權利要求3所述的藥物組合物制劑的質量控制方法，其特征在于該方法包括以下步驟鑒別a.取本組合物制劑，置顯微鏡下觀察肌纖維無色或淡棕黃色，多單根離散，偶有數根成束，彎曲或局部扭曲，有時局部膨大或不均勻增厚；木栓細胞黃棕色，表面觀呈類方形或多角形；壁稍厚，彎曲或平直，胞腔內常含紅棕色色素，經水合氯醛液透化后色素溶解；b.取本組合物制劑5g，加甲醇50ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取2-4次，每次15-25ml，合并乙醚液，揮干乙醚，殘渣加氯仿5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；再取大黃酸對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以12-18∶4-6∶1-2石油醚30-60℃-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上，顯相同的五個橙黃色熒光斑點；置氨氣中熏后，日光下檢視，斑點變?yōu)榧t色；c.取本組合物制劑5g，加甲醇50ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用乙醚提取2-4次，每次15-25ml，合并乙醚液，取乙醚提取后的水液，用水飽和的正丁醇提取2-4次，每次15-25ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的氨水洗滌2-4次，每次15-25ml，棄去氨水溶液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各6μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以60-70∶30-40∶8-12氯仿-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8-12％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以70-85∶18-25甲醇-水為流動相；檢測波長為270nm，理論板數按丹參酮IIA峰計算，應不低于2000；對照品溶液的制備，精密稱取丹參酮IIA對照品10mg，置100ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻；精密量取1ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得，每1ml中含丹參酮IIA 4ug；供試品溶液的制備，取本組合物制劑0.15g，精密稱定，置100ml磨口三角瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用微孔濾膜濾過，即得；測定法，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本組合物制劑每單位量含丹參以丹參酮II A計，不得少于0.30-0.45mg。
11.如權利要求3所述的中藥組合物在制備治療缺血性中風氣虛血瘀證藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療缺血性中風的中藥組合物及其制備方法和質量控制方法。該組合物由黃芪、丹參、水蛭、大黃、木香、僵蠶、雞血藤組成。該中藥組合物制備時采用煎煮、乙醇提取方法，達到使有效藥物的充分發(fā)揮，同時本發(fā)明還提供了對該組合物進行成分鑒別、含量測定的質量控制方法。本發(fā)明組合物有很好的益氣活血、化瘀通絡作用，對治療缺血性中風效果明顯。
文檔編號A61P9/00GK1457853SQ0313114
公開日2003年11月26日 申請日期2003年5月14日 優(yōu)先權日2003年5月14日
發(fā)明者居小平, 李西秦 申請人:居小平