專利名稱：一種治療缺血性中風(fēng)急性期的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療缺血性中風(fēng)的藥物，具體涉及一種以中草藥為原料制備的中成藥，本發(fā)明還涉及該藥物的制備方法。
目前臨床上用于缺血性中風(fēng)急性期的西藥有鏈激酶、蝮蛇抗栓酶等，但存在著容易引起出血等的副作用，中藥注射液有醒腦靜、清開靈注射液等，雖然對治療缺血性中風(fēng)有一定療效，但都有一定的適應(yīng)證或局限性，有的藥療效不太確切。
本發(fā)明的另一目的在于提供該藥物的制備方法。
本發(fā)明提供的一種治療缺血性中風(fēng)急性期的藥物，是由下述重量配比的原料制成的藥劑丹參18～25、赤芍15～21、石菖蒲8～12。
上述用于治療缺血性中風(fēng)急性期的藥物，可以制成藥劑學(xué)上所說的多種劑型，如注射液、膠囊或片劑。
將上述重量配比的原料制成本發(fā)明藥物的方法，包括以下步驟(1)取丹參，加6～15倍量水，加熱煎煮2～4次，每次0.5～3小時，合并水提液，減壓濃縮至相對密度1.10～1.15，加5％的明膠水溶液，不斷攪拌，至上清液不產(chǎn)生沉淀為止，靜置30～60分鐘，加乙醇至含醇量達(dá)70～80％，攪拌均勻，冷藏24～72小時，濾過，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.20～1.35，真空干燥，得丹參提取物；(2)取赤芍，粉碎成粗粉，加6～12倍量70～80％乙醇，加熱回流2～4次，每次1～3小時，合并醇提液，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.15，冷藏24～72小時，濾過，濾液用等量水飽和正丁醇萃取3～6次，合并正丁醇液，減壓回收正丁醇，殘留物真空干燥，得赤芍提取物；(3)取石菖蒲，粉碎成1～2cm粗粒，加8～12倍量水，加熱蒸餾8～14小時，收集石菖蒲揮發(fā)油；(4)取石菖蒲揮發(fā)油于注射用水中混懸，緩緩加入泊洛沙姆攪拌使溶液澄明，置于配液容器中，加入丹參提取物、赤芍提取物，攪拌使溶解，調(diào)pH值至7.0，濾過，濾液加氯化鈉，補(bǔ)加注射用水，用微孔濾膜濾過，灌注入處理好的輸液瓶中，滅菌，制得注射液。
本發(fā)明藥物用于缺血性中風(fēng)急性期治療，具有活血祛瘀、化痰通絡(luò)作用。臨床試驗結(jié)果表明，本發(fā)明中藥注射液對腦栓塞具有良好的治療作用，可明顯增加腦局部血流量，改善腦栓塞所致的偏癱體證，縮小腦內(nèi)梗死面積，減輕腦水腫和神經(jīng)細(xì)胞的繼發(fā)性損害；明顯抑制血小板聚集與血栓的形成；有效地延長血液的凝血時間，并延長凝血酶時間、凝血酶原時間和部分凝血活酶時間，降低血纖維蛋白原濃度；對急性腦缺氧具明顯的保護(hù)作用，對腦血管阻力沒有明顯影響；對缺氧復(fù)氧引起的大腦神經(jīng)原損傷有明顯的保護(hù)作用。
下面結(jié)合實施例及主要藥效學(xué)試驗對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
2.取赤芍180g，粉碎成粗粉，加6倍量70％乙醇，加熱回流二次，每次2小時，合并兩次醇提液，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.15(50℃)，冷藏72小時，濾過，濾液用等量水飽和正丁醇萃取4次，合并正丁醇液，減壓回收正丁醇，殘留物真空干燥，得赤芍提取物。
3.取石菖蒲120g，粉碎成1～2cm粗粒，加8倍量水，加熱蒸餾1 0小時，收集揮發(fā)油。
4.取石菖蒲揮發(fā)油于700ml注射用水中混懸，緩緩加入8g泊洛沙姆攪拌使溶液澄明，置于配液容器中，加入丹參提取物、赤芍提取物，攪拌使溶解，用40％氫氧化鈉調(diào)pH值7.0，濾過，濾液加2.5g氯化鈉，補(bǔ)加注射用水至1000ml，用0.2μm微孔濾膜濾過，灌注入處理好的100ml輸液瓶中，塞入丁基橡膠塞，軋壓鋁塑組合瓶蓋，滅菌，制得本發(fā)明中藥注射液。
2.取赤芍200g，粉碎成粗粉，加8倍量80％乙醇，加熱回流3次，每次2小時，合并醇提液，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.15(50℃)，冷藏28小時，濾過，濾液用等量水飽和正丁醇萃取5次，合并正丁醇液，減壓回收正丁醇，殘留物真空干燥，得赤芍提取物。
3.取石菖蒲80g，粉碎成1～2cm粗粒，加10倍量水，加熱蒸餾12小時，收集揮發(fā)油。
4.取石菖蒲揮發(fā)油于700ml注射用水中混懸，緩緩加入8g泊洛沙姆攪拌使溶液澄明，置于配液容器中，加入丹參提取物、赤芍提取物，攪拌使溶解，用40％氫氧化鈉調(diào)pH值6.5，濾過，濾液加2.59g氯化鈉，補(bǔ)加注射用水至1000ml，用0.2μm微孔濾膜濾過，灌注入處理好的100ml輸液瓶中，塞入丁基橡膠塞，軋壓鋁塑組合瓶蓋，滅菌，制得本發(fā)明注射液。主要藥效學(xué)試驗試驗?zāi)康目疾毂景l(fā)明注射液對實驗動物主要藥效學(xué)指標(biāo)的影響，以判定其療效，為該藥的臨床應(yīng)用提供藥效學(xué)依據(jù)。受試藥物名稱本發(fā)明注射液規(guī)格臨床用50.0g生藥/100ml/瓶；提供實驗用規(guī)格2.5g生藥/ml。溶劑氯化鈉注射液，云南省東川市制藥廠出品，批號19990414。劑量設(shè)置本發(fā)明注射液成人臨床擬用法、用量靜脈注射(iv)，100ml/次，1次/日。若以每日注射100ml，成人以60kg計算，則成人日用量為0.83g生藥/kg。依據(jù)文獻(xiàn)換算各種動物的等效量為小鼠用量等效量為7.50g/kg；大鼠用量等效量為5.83g/kg；兔用量等效量為4.17g/kg；犬用量等效量為2.50g/kg劑量設(shè)置理由根據(jù)成人臨床擬日用藥量及現(xiàn)有藥品濃度和動物最大給藥體積，用實驗動物與人藥量轉(zhuǎn)換因子計算方法，計算出動物用藥量的等效量，設(shè)計小、大鼠、家兔及犬的大劑量、中劑量、小劑量分別為小鼠用藥小劑量為3.75g/kg；中劑量為7.50g/kg；大劑量為15.00g/kg。
大鼠用藥小劑量為2.92g/kg；中劑量為5.83g/kg；大劑量為11.66g/kg。
兔用藥小劑量為2.08g/kg；中劑量為4.17g/kg；大劑量為8.33g/kg。
犬用藥小劑量為1.25g/kg；中劑量為2.50g/kg；大劑量為5.00g/kg藥物稀釋方法取同一批號的各實驗所用藥品，用生理鹽水配制，每日現(xiàn)配現(xiàn)用。各種動物給藥容積分別為小鼠為0.1ml/10g體重；大鼠為1.0ml/100g體重；犬給藥是將所用藥物用生理鹽水稀釋至30ml靜脈點滴。給藥途徑與擬推薦的臨床用藥途徑一致，小鼠，大鼠為靜脈注射，犬為靜脈點滴。試驗對照空白對照組給等體積的生理鹽水。數(shù)據(jù)處理所有實驗數(shù)據(jù)以x±s表示。計量數(shù)據(jù)由SAS統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析及組間比較。動物清潔級昆明種小鼠，體重18-22g，雌雄各半；合格證粵檢證字第99A063號及2000A058號；清潔級Sprague-Dawley(SD)大鼠，雄性體重220-310g，合格證號粵檢證字第99A064號及2000A034號；新西蘭大白兔，體重1.5-2.5kg，雌雄不限，合格證號粵檢證字第2000A036號；雜種犬，體重10-15kg，雌雄兼用，均由第一軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供。
飼養(yǎng)條件動物進(jìn)入清潔級動物實驗室(粵檢證字第99B023號及2000A018)后，小鼠每籠放養(yǎng)10只，大鼠每籠放養(yǎng)5只，兔每籠1只，飼養(yǎng)3天后啟用，由專人飼養(yǎng)管理。動物室燈光12小時照明，通風(fēng)和空調(diào)設(shè)備良好，室溫控制在25±1℃，相對濕度為40-60％。實驗室按常規(guī)定期消毒。陽性對照藥脈絡(luò)寧注射液選藥依據(jù)此藥系腦中風(fēng)治療臨床常用中成藥。
規(guī)格100g生藥/10ml，批號980609，南京金陵藥業(yè)集團(tuán)公司生產(chǎn)。
用法與用量靜脈注射或滴注，10g生藥/ml，10ml/次。按此換算各種動物用量等效量如下小鼠為15.0g/kg，大鼠為11.67g/kg，犬為5.00g/kg。本發(fā)明注射液對急性腦梗塞的治療作用1.對大鼠大腦中動脈栓線法局灶性腦缺血再灌注損傷模型的治療作用1.1方法將大鼠用10％水合氯醛3ml/kg腹腔注射(ip)麻醉，頸正中切口，分離、結(jié)扎右側(cè)頸總動脈、頸外動脈及其分支動脈。分離右側(cè)頸內(nèi)動脈，沿頸內(nèi)動脈向下分離翼顎動脈，根部結(jié)扎該分支。在頸內(nèi)動脈近端備線、遠(yuǎn)端放置動脈夾，頸總動脈分叉處切口，插入4-0尼龍線，其深度為17～20mm，栓線進(jìn)入頸內(nèi)動脈，入顱至大腦前動脈，阻斷大腦中動脈所有血流來源。撤掉動脈夾，扎緊備線，外留1cm長線頭，縫合皮膚。缺血1小時后靜脈注射(iv)給藥或iv生理鹽水。缺血2h后再灌注，勿需再次麻醉和切開皮膚，輕輕提拉所留線頭至有阻力時提示尼龍線頭端已至頸總動脈切口處，血流再通。假手術(shù)組除不插線外，其余步驟同上。存活鼠再灌注24h后，觀察大鼠行為學(xué)變化，進(jìn)行神經(jīng)病學(xué)評分。
參考Zea Longa的5分制評分標(biāo)準(zhǔn)0分，無神經(jīng)損傷癥狀；1分，不能完全伸展對側(cè)前爪；2分，向外側(cè)轉(zhuǎn)圈；
3分，向?qū)?cè)傾倒；4分，不能自發(fā)行走，意識喪失。
腦含水量測定神經(jīng)病學(xué)評分后，快速斷頭取鼠大腦。一部分分別稱左右腦半球濕重，置120℃烤箱烘干至恒重，按以下公式計算腦組織含水量，腦組織含水量(％)＝(濕重-干重)/濕重×100％。
腦梗塞范圍的測定另一部分大鼠斷頭取腦，去掉嗅球、小腦和低位腦干后切成5片，以紅四氮唑(TTC)染色。正常組織經(jīng)染色后呈紅色，梗塞組織呈白色。用圖像分析儀計算梗塞組織重量占總腦重的百分比作為梗塞范圍。
病理檢查將TTC染色后的腦片置10％福爾馬林中固定，經(jīng)脫水、包埋、切片、染色等步驟制備組織切片，并用JEM1200-EX透射電子顯微鏡(日本電子)進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)的觀察。
觀察指標(biāo)及觀察時間觀察大鼠行為學(xué)、腦水腫、腦梗塞、組織形態(tài)學(xué)的變化。觀察時間為再灌注后24小時。
數(shù)據(jù)及統(tǒng)計學(xué)處理實驗數(shù)據(jù)用x±s表示，采用方差分析和Student t test進(jìn)行顯著性檢驗。
腦梗塞模型大鼠分組假手術(shù)組20只；模型(給予溶劑治療)組20只本發(fā)明注射液iv小劑量組20只；本發(fā)明注射液iv中劑量組20只本發(fā)明注射液iv大劑量組20只；脈絡(luò)寧注射液iv治療組20只。1.2結(jié)果一般觀察經(jīng)過腦梗塞的大鼠麻醉清醒后即有偏癱樣癥狀出現(xiàn)。主要表現(xiàn)為不同程度的手術(shù)對側(cè)前肢內(nèi)收，肩內(nèi)旋，肌張力降低，推右肩向?qū)?cè)移動，抵抗阻力降低，甚至有些動物還出現(xiàn)不停地向一側(cè)轉(zhuǎn)圈現(xiàn)象。與模型組(生理鹽水治療)比較，術(shù)后模型組動物的一般狀態(tài)較差，活動減少，大多數(shù)動物體重有所下降，而各治療組動物一般狀況均有明顯的改善。
隨機(jī)選取各實驗組前8只大鼠進(jìn)行神經(jīng)病學(xué)評分，術(shù)后24h的行為評分本發(fā)明各劑量治療組和脈絡(luò)寧治療組均有明顯低的行為學(xué)評分，統(tǒng)計分析有顯著差異(P＜0.01)。iv本發(fā)明注射液高、中組大鼠與模型組比較，大鼠的行為障礙明顯地改善，有些動物基本恢復(fù)正常。假手術(shù)組動物行為無異常(見表1)。
表1 本發(fā)明注射液對大鼠大腦中動脈梗塞后的神經(jīng)病學(xué)評分影響(x±s)組別 劑量n 神經(jīng)病學(xué)評分(g/kg)假手術(shù)- 8 0模型 - 8 1.5±0.707脈絡(luò)寧11.67 8 0.7±0.675*本發(fā)明2.928 0.8±0.6325.838 0.5±0.527**11.66 8 0.3±0.483***與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001腦含水量從表2可以看出，各組大鼠未梗塞的左側(cè)大腦的濕重，干重均無明顯的差別；而對于梗塞的右側(cè)腦組織，模型組腦含水量顯著高于假手術(shù)組；本發(fā)明注射液大劑量組和中劑量組則顯著低于模型對照組，而與假手術(shù)組接近，本發(fā)明注射液小劑量組的腦含水量雖有降低趨勢，但與模型對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義，脈絡(luò)寧注射液治療組也有降低腦含水量的作用。
表2 腦梗塞大鼠腦含水量的比較(x±s，n＝8)組別 劑量 左腦 右腦(g/kg) 濕重(mg) 干重(mg)含水量(％) 濕重(mg) 干重(mg) 含水量(％)假手術(shù) 784.6±34.2 180.1±10.9 77.0±0.93 793.1±55.2 182.8±17.9 77.0±0.93模型組 813.1±20.6 187.1±11.8 77.0±1.32 838.1±64.2 171.6±12.1 79.5±0.73##脈絡(luò)寧 11.67 813.6±41.5 186.9±14.8 77.0±1.01 862.6±29.6 181.8±10.3 78.3±1.37#本發(fā)明 2.92 814.9±39.9 188.1±18.1 76.9±1.43 847.1±42.8 179.0±5.51 78.7±0.295.83 826.0±37.9 189.8±10.7 77.0±1.14 833.0±53.7 179.5±11.9 78.4±1.05#11.66 835.1±38.8 190.8±18.9 77.2±1.35 865.8±45.9 193.0±15.0 77.7±0.88##與假手術(shù)組比較，**P＜0.01； 與模型組比較#P＜0.05，##P＜0.01。大鼠腦梗塞范圍的觀察及本發(fā)明注射液對梗塞范圍的影響由于TTC染色適合于腦缺血24～48h內(nèi)檢測腦梗塞情況，本實驗是腦梗塞后24h利用TTC染色技術(shù)檢查腦梗塞程度(見附圖
)。由表3可以看出，腦缺血再灌注24h后腦組織梗塞程度明顯，梗塞面積占總腦面積的36.68±10.51％。本發(fā)明注射液和脈絡(luò)寧注射液給藥后，使腦梗塞面積百分比明顯下降。假手術(shù)組動物未見腦梗塞發(fā)生。
表3 本發(fā)明注射液對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用(x±s)組別 n 劑量(g/kg) 梗塞面積(％)模型組10 036.68±10.51脈絡(luò)寧8 11.6713.32±4.77***本發(fā)明8 2.92 19.96±7.28**8 5.83 12.13±7.45***9 11.668.05±2.5****與模型組比較，**P＜0.01，***P＜0.001。大鼠腦梗塞后組織形態(tài)學(xué)變化及本發(fā)明注射液的影響大鼠經(jīng)腦梗塞術(shù)后24h，病灶側(cè)腦表面蒼白、無光，腦表面血管較對側(cè)充血，血管數(shù)目也有所增多，位于嗅束和大腦下靜脈之間的一段大腦中動脈顏色變暗。術(shù)后48h病灶側(cè)腦組織水腫明顯，隨時間延長逐漸出現(xiàn)軟化。在光鏡下觀察腦組織切片，可見大腦中動脈內(nèi)有血栓形成，血栓成分主要是血小板、紅細(xì)胞和纖維蛋白，表現(xiàn)為混合血栓的特征。腦組織主要呈缺血性改變，隨時間延長，缺血軟化灶范圍和深度有所增加。假手術(shù)組無明顯病理改變。
經(jīng)本發(fā)明治療后的動物，肉眼即可見大腦中動脈較對照組動物紅潤，組織切片示血栓明顯減輕甚至完全溶解。腦組織缺血程度減輕，只有小片軟化灶。而脈絡(luò)寧組的動物，血栓也明顯減輕。各實驗組大腦組織病理學(xué)改變?nèi)缦录偈中g(shù)組神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，細(xì)胞核未見腫脹，核仁清楚，虎斑清晰可見，細(xì)胞周圍間隙略擴(kuò)大，毛細(xì)血管內(nèi)有輕微充血，呈輕度變性水腫改變。
模型(生理鹽水)組左側(cè)大腦半球結(jié)構(gòu)基本正常，呈輕度水腫改變；右側(cè)見神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞周圍間隙明顯擴(kuò)大，細(xì)胞核腫脹明顯，核仁模糊，腦實質(zhì)內(nèi)有出血，毛細(xì)血管周圍間隙擴(kuò)大，成變性，壞死，出血改變。
脈絡(luò)寧注射液(11.67g/kg)組左側(cè)腦細(xì)胞結(jié)構(gòu)未見異常，僅見細(xì)胞周圍間隙略增大，呈輕度變形，水腫表現(xiàn)。右側(cè)神經(jīng)元及細(xì)胞核輕度腫脹，核仁不清，腦實質(zhì)細(xì)胞周圍間隙增大，毛細(xì)血管周圍有少量滲出性出血，呈變性，水腫及出血改變。
本發(fā)明注射液(2.92g/kg)組左側(cè)腦細(xì)胞結(jié)構(gòu)未見異常，細(xì)胞周圍間隙略增大。神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管周圍間隙略增大，細(xì)胞輕度水腫，核仁不清，毛細(xì)血管內(nèi)有充血，周圍間隙增大，呈變性，水腫改變。
本發(fā)明注射液(5.83g/kg)組左側(cè)腦細(xì)胞結(jié)構(gòu)未見異常，細(xì)胞周圍間隙略增大，呈輕度變形改變。右側(cè)神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管周圍間隙略增大，神經(jīng)元細(xì)胞核輕度腫脹，核仁不見，可見較多膠質(zhì)細(xì)胞增生，呈變性，水腫改變。
本發(fā)明注射液(11.66g/kg)組左側(cè)腦細(xì)胞結(jié)構(gòu)未見異常，細(xì)胞周圍間隙略增寬，呈輕度變形改變。右側(cè)神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管周圍間隙略增大，神經(jīng)元細(xì)胞核輕度腫脹，核仁清楚，可見較多胞質(zhì)細(xì)胞增生現(xiàn)象。呈變性，水腫改變。大鼠腦梗塞后超微結(jié)構(gòu)的觀察假手術(shù)組細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，可見完整的神經(jīng)元軸突，核膜完整，染色質(zhì)分布均勻，線粒體，高爾基體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)清晰可見。
模型(生理鹽水)組細(xì)胞腫脹，細(xì)胞器數(shù)量變少，染色質(zhì)凝聚，高爾基體池擴(kuò)大，空泡變，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，線粒體腫脹，線粒體嵴紊亂，結(jié)構(gòu)不清，周圍間隙擴(kuò)大。
脈絡(luò)寧注射液(11.67g/kg)組與本發(fā)明中劑量組變化相近。水腫程度稍重，染色質(zhì)凝聚，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基體及線粒體均有不同程度的腫脹。
本發(fā)明注射液(2.92g/kg)組缺血、再灌注損傷較重，核內(nèi)染色質(zhì)溶解。
本發(fā)明注射液(5.83g/kg)組水腫程度稍重，染色質(zhì)凝聚，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基體及線粒體均有不同程度的腫脹。
本發(fā)明注射液(11.66g/kg)組水腫程度較輕，細(xì)胞大致結(jié)構(gòu)存在，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體均有腫脹，線粒體嵴消失。2.對大鼠雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎致腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用2.1 方法將大鼠用10％水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉(ip)，頸正中切口，分離雙側(cè)頸總動脈，用大鼠動脈夾夾閉頸總動脈2h，使大鼠全腦不完全缺血，缺血1小時后靜脈注射(iv)給藥或iv生理鹽水，ig給藥。缺血2h后松開動脈夾，大鼠腦血液得以再灌注，再灌注24h后觀察大鼠以下有關(guān)指標(biāo)。血管通透性的測定大鼠經(jīng)腦缺血2h再灌注24h后iv 2％伊文氏藍(lán)(EB，Sigma產(chǎn)品)50mg/kg體重。取腦稱重，按1ml/1g用PBS液勻漿，4℃離心30分鐘，取上清液備用，用UV一265FM紫外分光光度計(日本島津公司)測定腦組織提取液中的EB含量(μg/g腦濕重)，實驗條件測定波長620nm。
從表4可以看出，模型組EB含量顯著高于假手術(shù)組；大劑量組、中劑量組與小劑量組顯著低于模型對照組，口服給藥組與模型組比較有顯著差異，但明顯不如注射給藥組。
表4 本發(fā)明注射液對腦梗塞大鼠血管通透性的影響(x±s，n＝10)組別 劑量(g/kg) EB含量(μg/g腦濕重)P值假手術(shù)組- 6.74±1.18 -模型組 - 12.8±1.63＜0.01脈絡(luò)寧 11.67 11.0±1.39＜0.05本發(fā)明 2.92 9.79±0.48＜0.015.83 9.63±0.28＜0.0111.66 9.70±0.32＜0.01口服給藥11.66 10.5±1.85＜0.05腦含水量大鼠腦缺血2h再灌注24h后快速斷頭取大腦。取全腦稱濕重，置120℃烤箱內(nèi)烘干至恒重，按以下公式計算腦組織含水量，腦組織含水量(％)＝(濕重-干重)/濕重×100％。
從表5可以看出，模型組腦含水量及腦指數(shù)顯著高于假手術(shù)組；大劑量組、中劑量組及低劑量組顯著低于模型對照組，而口服給藥組同模型組比較有差異，但不如注射給藥組明顯。
表5 本發(fā)明注射液對腦梗塞大鼠腦含水量的影響(x±s，n＝20)組別 劑量腦含水量 腦指數(shù)(g/kg)濕重(g) 干重(mg) 含水量(％)假手術(shù) 1.54±0.13354±39.5 77.1±0.84 0.55±0.019模型 0 1.91±0.12**346±30.2 81.8±0.86**0.70±0.015**脈絡(luò)寧 11.67 1.75±0.08##349±24.7 80.1±0.82##0.64±0.012#本發(fā)明 2.92 1.73±0.12##351±32.8 79.7±0.67##0.60±0.009##
5.83 1.75±0.12##376±38.678.5±0.92##0.59±0.005##11.661.67±0.04##348±20.979.2±1.04##0.60±0.016##ig給藥11.661.78±0.09#350±39.080.55±1.88#0.63±0.028#與假手術(shù)組比較，**P＜0.01；與模型組比較#P＜0.05，##P＜0.01。病理檢查將腦片置10％福爾馬林中固定，經(jīng)脫水、包埋、切片、HE染色等步驟制備組織切片。并用電子顯微鏡進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)的觀察。
假手術(shù)組神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本正常，細(xì)胞核未見腫脹，核仁清楚，虎斑清晰可見，細(xì)胞周圍間隙略擴(kuò)大，毛細(xì)血管內(nèi)有輕微充血，呈輕度變性水腫改變。
模型(生理鹽水治療)組腦膜血管間隙增大。神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞周圍間隙明顯擴(kuò)大，細(xì)胞腫脹明顯，核仁不清楚，虎斑消失，偶見細(xì)胞壞死灶。腦實質(zhì)細(xì)胞內(nèi)有充血，毛細(xì)血管周圍間隙增大，局部有些膠質(zhì)小細(xì)胞集結(jié)成團(tuán)。
脈絡(luò)寧注射液(11.67g/kg)組神經(jīng)元及細(xì)胞核輕度腫脹，核仁不清楚，神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞周圍間隙增大，毛細(xì)血管周圍有少量滲出性出血灶。
本發(fā)明注射液(2.92g/kg)組神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞周圍間隙增大。細(xì)胞輕度腫脹，核仁不清楚，毛細(xì)血管內(nèi)有充血，周圍間隙增大。
本發(fā)明注射液(5.83g/kg)組神經(jīng)元腦實質(zhì)細(xì)胞及毛細(xì)血管周圍間隙略增寬。神經(jīng)元細(xì)胞核輕度腫脹，核仁可見，可見較多膠質(zhì)細(xì)胞增生。
本發(fā)明注射液(11.66g/kg)組神經(jīng)元腦實質(zhì)細(xì)胞及毛細(xì)血管周圍間隙略增寬。神經(jīng)元細(xì)胞核輕度腫脹，核仁清楚，可見較多膠質(zhì)細(xì)胞增生現(xiàn)象。
本發(fā)明注射液口服給(11.66g/kg)組神經(jīng)元及腦實質(zhì)細(xì)胞周圍間隙增大。細(xì)胞腫脹較明顯，核仁不清楚，偶見細(xì)胞壞死灶，腦實質(zhì)細(xì)胞內(nèi)有輕度充血，毛細(xì)血管周圍間隙增大。
權(quán)利要求
1.一種治療缺血性中風(fēng)急性期的藥物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制成的藥劑丹 參18～25赤 芍15～21石菖蒲8～12。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療缺血性中風(fēng)急性期的藥物，其特征在于所述的藥劑是任何一種藥劑學(xué)上所說的劑型。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療缺血性中風(fēng)急性期的藥物，其特征在于所述的藥劑是注射液。
4.權(quán)利要求3所述的治療缺血性中風(fēng)急性期的藥物的制備方法，包括以下步驟(1)取丹參，加6～15倍量水，加熱煎煮2～4次，每次0.5～3小時，合并水提液，減壓濃縮至相對密度1.10～1.15，加5％的明膠水溶液，不斷攪拌，至上清液不產(chǎn)生沉淀為止，靜置30～60分鐘，加乙醇至含醇量達(dá)70～80％，攪拌均勻，冷藏24～72小時，濾過，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.20～1.35，真空干燥，得丹參提取物；(2)取赤芍，粉碎成粗粉，加6～12倍量70～80％乙醇，加熱回流2～4次，每次1～3小時，合并醇提液，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.10～1.15，冷藏24～72小時，濾過，濾液用等量水飽和正丁醇萃取3～6次，合并正丁醇液，減壓回收正丁醇，殘留物真空干燥，得赤芍提取物；(3)取石菖蒲，粉碎成1～2cm粗粒，加8～12倍量水，加熱蒸餾8～14小時，收集石菖蒲揮發(fā)油；(4)取石菖蒲揮發(fā)油于注射用水中混懸，緩緩加入泊洛沙姆攪拌使溶液澄明，置于配液容器中，加入丹參提取物、赤芍提取物，攪拌使溶解，調(diào)pH值至7.0，濾過，濾液加氯化鈉，補(bǔ)加注射用水，用微孔濾膜濾過，灌注入處理好的輸液瓶中，滅菌，制得注射液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療缺血性中風(fēng)急性期的藥物，它以丹參、赤芍和石菖蒲為原料，根據(jù)每味中藥的不同特性，經(jīng)過提取制成注射液。本發(fā)明藥物用于缺血性中風(fēng)急性期治療，具有活血祛瘀、化痰通絡(luò)作用。臨床試驗結(jié)果表明，本發(fā)明藥物對腦栓塞具有良好的治療作用，可明顯增加腦局部血流量，改善腦栓塞所致的偏癱體證，縮小腦內(nèi)梗死面積，減輕腦水腫和神經(jīng)細(xì)胞的繼發(fā)性損害；明顯抑制血小板聚集與血栓的形成；有效地延長血液的凝血時間；對缺氧復(fù)氧引起的大腦神經(jīng)原損傷有明顯的保護(hù)作用。
文檔編號A61P9/10GK1424081SQ0214969
公開日2003年6月18日 申請日期2002年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月20日
發(fā)明者張晴龍 申請人:張晴龍