專利名稱：新的7-氮雜吲哚、其作為磷酸二酯酶4的抑制劑的應(yīng)用和其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通式1取代的7-氮雜吲哚化合物， 其合成方法，含有這些化合物的藥物制劑，以及這些化合物的藥物應(yīng)用，所述化合物是磷酸二酯酶4的抑制劑，可作為活性組分用于治療可通過用本發(fā)明化合物抑制免疫活性細胞(例如巨噬細胞和淋巴細胞)中的磷酸二酯酶4的活性來影響的疾病。
現(xiàn)有技術(shù)遞質(zhì)激活細胞膜的受體會導(dǎo)致“第二信使”系統(tǒng)的激活。腺苷酸環(huán)化酶由AMP和GMP合成活性環(huán)AMP(cAMP)或環(huán)GMP(cGMP)。這導(dǎo)致例如平滑肌細胞松弛或炎性細胞中的介質(zhì)的釋放或合成受到抑制。磷酸二酯酶(PDE)打破“第二信使”cAMP和cGMP。迄今為止已知有11個PDE酶家族(PDE1-PDE11)，它們的不同在于其底物特異性(cAMP、cGMP或二者)及其對其它底物的依賴性(例如鈣調(diào)蛋白)。這些同工酶在體內(nèi)具有不同功能，并且在個體類型細胞中有不同表現(xiàn)(Beavo J.A.，M.Conti和R.J.Heaslip，多樣的環(huán)核苷酸磷酸二酯酶.Mol.Pharmacol.1994，46399-405；Hall I.P.，同工酶選擇性磷酸二酯酶抑制劑可能的臨床應(yīng)用，Br.J.clin.Pharmacol.1993，351-7)。抑制不同類型的PDE同工酶導(dǎo)致cAMP和/或cGMP在細胞中聚集，這可用于治療(Torphy TJ.，G.P.Livi，Christensen，用于治療哮喘的新的磷酸二酯酶抑制劑，Drug News and Perspectives 1993，6203-214)。
在對于過敏炎癥很重要的細胞中(淋巴細胞、肥大細胞、嗜酸性粒細胞、巨噬細胞)，主要的PDE同工酶是4型(Torphy，J.T.和Undem B.J.，磷酸二酯酶抑制劑治療哮喘的新選擇.Thorax 1991，46512-523)。因此，用合適的抑制劑抑制PDE4視為治療多種變態(tài)反應(yīng)引起的疾病的重要開始(Schudt Ch.，Dent G.和Rabe K.，磷酸二酯酶抑制劑，Academic Press London 1996)。
磷酸二酯酶4抑制劑的一個重要特征是抑制腫瘤壞死因子α(TNFα)從炎性細胞中釋放。TNFα是影響多種生物過程的重要的促炎性細胞因子。TNFα從例如激活的巨噬細胞、激活的T淋巴細胞、肥大細胞、嗜堿粒細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞和腦中的星形細胞釋放。其自身對于中性白細胞、嗜酸性細胞、成纖維細胞和內(nèi)皮細胞有激活作用，結(jié)果釋放出不同的組織破壞性介質(zhì)。在單核細胞、巨噬細胞和T淋巴細胞中，TNFα導(dǎo)致另外的促炎性細胞因子例如GM-CSF(粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子)或白介素-8的生成增加。由于其促進炎癥和分解代謝作用，TNFα在多種疾病中起著關(guān)鍵作用，這些疾病有例如呼吸道炎癥、關(guān)節(jié)炎癥、內(nèi)毒素性休克、組織排斥、AIDS和多種其它免疫疾病。因此，磷酸二酯酶4抑制劑也適于治療與TNFα有關(guān)的這樣的疾病。
慢性堵塞性肺病(COPD)廣布于人群中。例如，在發(fā)達國家中，COPD疾病占所有疾病花費的大約10-15％，在美國，有約25％的死亡是由該疾病引起的(Norman P.COPD新的發(fā)展和治療機會，DrugNews Perspect.11(7)，431-437，1998)；然而，在死亡時，大多數(shù)患者的年齡大于55歲(Nolte，D.慢性支氣管炎-一種多因素起源全民性疾病.Atemw.-Lungenkrkh.20(5)，260-267，1994)。據(jù)WHP估計，在未來20年中，COPD將成為第三大死因。
慢性堵塞性肺病(COPD)的合并了慢性支氣管炎的不同綜合征與排痰性咳嗽以及進行性和不可逆肺功能退化(特別是呼氣受影響)的癥狀。該疾病的病程是發(fā)作性的，并且通常并發(fā)有細菌感染(Rennard S.I.COPD定義的概述，流行病學，以及影響其發(fā)展的因素.Chest，113(4)Suppl.，235S-241 S，1998)。在該疾病的病程中，肺功能穩(wěn)定地降低，肺逐漸變得氣腫，并且患者的呼吸窘迫很明顯。該疾病明顯損害患者的生命質(zhì)量(呼吸淺促、鍛煉耐力低)，并顯著縮短其估計壽命。除了環(huán)境因素以外，主要的危險因素是吸煙(Kummer F.哮喘和COPD.Atemw.-Lungenkrkh.20(5)，299-302，1994；Rennard S.I.COPD定義的概述，流行病學，以及影響其發(fā)展的因素.Chest，113(4)Suppl.，235S-241S，1998)，并且男性患病的比例比女性高。在將來，由于習慣的改變以及女性吸煙者的不斷增多，這種現(xiàn)象將會改變。
目前治療的目標僅是減輕癥狀，而不是介入該疾病進行的原因。使用可與毒蕈堿拮抗劑(例如異丙阿托品)聯(lián)合使用的長效β2激動劑(例如沙美特羅)能通過擴張支氣管來改善肺功能，并且可日常使用(NormanP.COPD新的發(fā)展和治療機會，Drug News Perspect.11(7)，431-437，1998)。必須用抗生素治療的細菌感染在COPD發(fā)作中起關(guān)鍵作用(Wilson R.感染在COPD中的作用，Chest，113(4)Suppl.，242S-248S，1998；Grossman R.F.抗生素的價值以及抗生素治療加重COPD的結(jié)果.Chest，113(4)Suppl.，249S-255S，1998)。該疾病的治療仍然不能令人滿意，特別是在肺功能連續(xù)降低方面更是如此。攻擊炎性介質(zhì)、蛋白酶或粘著分子的新的治療方法可能非常有前途(Barnes P.J.慢性堵塞性疾病藥物開發(fā)的新機會，TiPS 10(19)，415-423，1998)，在支氣管中發(fā)現(xiàn)了通過嗜中性粒細胞支配的慢性炎癥，其獨立于與該疾病并發(fā)的細菌感染。除了別的之外，由嗜中性粒細胞釋放的介質(zhì)和酶是在呼吸道中觀察到的結(jié)構(gòu)性變化(肺氣腫)的原因。因此，抑制嗜中性粒細胞的活動是預(yù)防或延遲COPD進行(肺功能參數(shù)退化)的合理起點。激活粒細胞的一個重要刺激是促炎性細胞因子THFα(腫瘤壞死因子)。例如，已知THFα刺激嗜中性粒細胞形成氧自由基(Jersmann，H.P.A.，D.A.Rathjen和FerranteA.通過TNFα提高LPS-引起的中性白細胞氧自由基生成，Infection and Immunity，4，1744-1747，1998)。PDE4抑制劑可非常有效地抑制多種細胞釋放TNAα，并因此抑制嗜中性粒細胞的活動。非特異性PDE抑制劑己酮可可堿能夠抑制氧自由基生成以及嗜中性粒細胞噬吞細胞的能力(Wenisch，C.；K.Zedtwitz-Liebenstein，B.Parschalk和Graninger W.通過流式細胞術(shù)評價的己酮可可堿在體外對中性白細胞反應(yīng)性氧生成和噬吞細胞的能力的影響，Clin.Drug Invest.，13(2)99-104，1997)。
不同的PDE4抑制劑是已知的。主要有黃嘌呤衍生物、環(huán)戊苯吡酮類似物或Nitraquazone衍生物(Karlsson J-A，和Aldos D.，用于治療哮喘的磷酸二酯酶4抑制劑，Exp.Opin.Ther.Patents 1997，7989-1003中對其作了概述)。直到現(xiàn)在，還不能將任何這些化合物帶到臨床應(yīng)用階段。必須注意，已知的PDE4抑制劑還具有不同的副作用例如惡心和嘔吐；到目前為止，不能充分地抑制這些副作用。處于該原因，需要發(fā)現(xiàn)具有更好的治療范圍的新的PDE4抑制劑。
迄今為止，僅有相當少的文件描述了使用7-氮雜吲哚化合物來開發(fā)用于不同適應(yīng)癥的新活性組分。
在日本專利JP 10120681(Fujisawa Pharmaceutical Co.，Ltd.)中，要求保護下述通式所示的5-和7-氮雜吲哚化合物 其中R1可代表氫或短的烷基，R2可代表氫、鹵素、短的烷基、環(huán)烷基、烷基羰基或鏈烷?；?，R3代表鏈烷?；⒈Ｗo的羧基、氰基或取代的氨基甲?；?。L代表短的亞烷基。Q代表取代的芳基和雜環(huán)基。A1和A2當中，一個代表氮，另一個代表CH。這些化合物不同于本發(fā)明化合物，特別是取代基R2和R3不同，R1和A2部分不同。在該專利中，所述化合物是作為特定的cGMP磷酸二酯酶(PDE5)抑制劑要求保護。其中提出了不同的心臟循環(huán)疾病、支氣管炎、哮喘、鼻炎、陽痿、糖尿病并發(fā)癥和青光眼作為應(yīng)用領(lǐng)域。
L.N.Yakhontov，S.S.Liberman，D.M.Krasnokutskaya等人在Khim.-Farm.Zh.8(11)，1974，5-9描述了不同的3-氨基烷基-4-氮雜吲哚和3-氨基烷基-7-氮雜吲哚的合成。對于3-(2-氨基乙基)-7-氮雜吲哚，描述了抑郁或抗抑郁作用。其中提出了3-氨基甲基-7-氮雜吲哚的降血壓作用。
A.J.Verbiscar在J.Med.Chem.15(2)，1972，149-52中描述了下式所示化合物，
并確定了該化合物的抗瘧疾作用。
在專利US 650223(Sterling Drug Inc.)中，描述了由相應(yīng)的2-或3-氰基烷基-7-氮雜吲哚合成不同的2-(咪唑啉-2-基)-烷基-7-氮雜吲哚和3-(咪唑啉-2-基)-烷基-7-氮雜吲哚，并要求保護這些化合物作為血管收縮劑的應(yīng)用。
至今7-氮雜吲哚化合物沒有用作PDE4抑制劑。
本發(fā)明描述本發(fā)明涉及通式1的取代的7-氮雜吲哚化合物， 其中n可以是1或2，且R1代表-C1-10直鏈或支鏈烷基，所述烷基可任選被下列基團取代一次或多次-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-SO2C6-14芳基、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-COOH、-(CO)C1-5烷基，具有有3-14個環(huán)單元的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)飽和或單不飽和或多不飽和的碳環(huán)，具有有5-15個環(huán)單元和1-6個優(yōu)選為N、O和S的雜原子的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)飽和或單不飽和或多不飽和的雜環(huán)，其中，C6-14芳基和碳環(huán)取代基和雜環(huán)取代基本身可以任選地被R4單取代或多取代，-C2-10單不飽和或多不飽和直鏈或支鏈鏈烯基，所述鏈烯基可任選被下列基團取代一次或多次-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-SO2C6-14芳基、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-COOH、-(CO)C1-5烷基，具有有3-14個環(huán)單元的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)飽和或單不飽和或多不飽和的碳環(huán)，具有有5-15個環(huán)單元和1-6個優(yōu)選為N、O和S的雜原子的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)飽和或單不飽和或多不飽和的雜環(huán)，其中，C6-14芳基和碳環(huán)取代基和雜環(huán)取代基本身可以任選被R4單取代或多取代，R2和R3可相同或不同，二者當中只有一個可代表氫，此外，R2和R3可代表-C1-5-烷基，所述烷基任選被下列基團單取代或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-S-C1-6-烷基、-苯基、-吡啶基，-苯基，所述苯基可任選被下列基團單取代或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-3-烷基、-N(C1-3-烷基)2、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3烷基、-F、-Cl、-Br、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3-烷基，-吡啶基，所述吡啶基可任選被下列基團單取代或多取代-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3烷基、-Cl、-Br、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3-烷基，和 -NR2R3基可一起代表
其中R4代表-H、-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOC1-6烷基、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-6烷基、-(CO)C1-6烷基、-(CS)C1-6烷基、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOC1-6烷基、-SO2C1-6烷基。
在本發(fā)明式17-氮雜吲哚中，R1優(yōu)選為C1-C10-烷基。這樣的烷基可以是直鏈、支鏈或環(huán)狀，并且優(yōu)選為直鏈的。尤其優(yōu)選的是具有1-6個、甚至更優(yōu)選1-4個碳原子的烷基。在另一優(yōu)選的實施方案中，R1代表C2-C10鏈烯基、優(yōu)選C2-C6鏈烯基、最優(yōu)選C2-C4-鏈烯基。該鏈烯基可以是單不飽和或多不飽和的，例如二不飽和或三不飽和的。鏈烯基中，可以涉及直鏈、支鏈或環(huán)狀烴基。尤其優(yōu)選的是R1，其中烷基或鏈烯基是單取代或多取代的，例如二取代的、三取代的、四取代的或五取代的。在尤其優(yōu)選的實施方案中，R1是取代的C1烷基-(即甲基)。在上文給出的R1烷基或鏈烯基的取代基當中，取代基-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-C1-C4-烷氧基是特別優(yōu)選的。此外，這樣的取代基是優(yōu)選的，其中任選存在的烷基具有1-4個碳原子，任選存在的芳基具有6-10個碳原子。在碳環(huán)當中，苯基是優(yōu)選的，尤其是取代的苯基，其優(yōu)選被下列基團取代-F、-Cl、-Br、-I、C1-C6-烷氧基或羥基。在雜環(huán)基當中，具有至少一個選自N、O或S的雜原子的雜環(huán)基是優(yōu)選的。在雜環(huán)基當中，特別優(yōu)選的是吡啶基和異噁唑基，尤其是3，5-二甲基異噁唑基。稠合碳環(huán)取代基的一個實例是萘基。
特別優(yōu)選地，R1代表包含環(huán)狀烴基的基團，例如代表環(huán)丙基甲基，代表直鏈烴基，例如正己基，代表被烷氧基取代的直鏈烴基，例如2-甲氧基乙基，代表支鏈烴基，例如異丁基，代表不飽和烴基，例如代表2-甲基丙烯-3-基，或代表含有芳基的可任選被取代的烴基，例如代表4-氟芐基、3-甲氧基芐基、4-甲氧基芐基、4-氯芐基、4-甲基芐基、3-羥基芐基或4-羥基芐基，代表含有雜芳烴的基團，例如代表4-吡啶基甲基或3，5-二甲基異噁唑-4-甲基，或代表含有稠合芳烴的基團，例如1-萘基甲基。
在優(yōu)選的實施方案中，氮原子上的取代基R2和R3可表示任選取代的C1-C5烷基、優(yōu)選C1-C3烷基、特別優(yōu)選C1烷基(即甲基)。
一個R2或/和R3優(yōu)選代表包含雜芳烴的基團，例如4-吡啶基甲基，其中所述雜芳烴可進一步被取代，優(yōu)選被鹵素取代，例如3，5-二氯-4-吡啶基。在另一個優(yōu)選的實施方案中，R2或/和R3是嗎啉代基團。另外優(yōu)選的是包含芳烴的R2和R3，其中所述芳烴優(yōu)選被取代，特別是被鹵素或羧基取代，例如2，6-二氯苯基、4-羧基苯基、4-乙氧基羰基苯基、3，4-二甲氧基苯基。另外優(yōu)選地R2和R3都是甲氧基乙基。在另一優(yōu)選的實施方案中，R2或R3代表下列基團 或者基團-NR2R3一起代表 此外，本發(fā)明涉及式1化合物的生理可耐受鹽。
生理可耐受鹽可通過用無機酸或有機酸中和堿或者用無機堿或有機堿中和酸來以常規(guī)方法獲得?？商峒暗臒o機酸有例如鹽酸、硫酸、磷酸或氫溴酸，可提及的有機酸有例如羧酸、硫代酸或磺酸，例如乙酸、酒石酸、乳酸、丙酸、乙醇酸、丙二酸、馬來酸、富馬酸、鞣酸、琥珀酸、藻酸、苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、檸檬酸、蘋果酸、水楊酸、3-氨基水楊酸、抗壞血酸、撲酸、煙酸、異煙酸、草酸、氨基酸、甲磺酸、乙磺酸、2-羥基乙磺酸、乙-1，2-二磺酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸或萘-2-磺酸?？商峒暗臒o機堿有例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨，可提及的有機堿有例如胺，但優(yōu)選叔胺，例如三甲胺、三乙胺、吡啶、N，N-二甲基苯胺、喹啉、異喹啉、α-甲基吡啶、β-甲基吡啶、γ-甲基吡啶、喹哪啶或嘧啶。
此外，式1化合物的生理可耐受鹽可通過按照本身已知方法用季銨化劑將含有叔氨基的衍生物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的季銨鹽來獲得?？商峒暗募句@化劑有例如烷基鹵，例如甲基碘、乙基溴和正丙基氯，以及芳基烷基鹵，例如芐基氯或2-苯基乙基溴。
此外，對于具有不對稱碳原子的式1化合物，本發(fā)明涉及D型、L型和D，L-混合物，當式1化合物具有幾個不對稱碳原子時，還涉及非對映異構(gòu)體形式?？赏ㄟ^本身已知方法，例如用旋光性酸將含有不對稱碳原子并且通常以外消旋體形式獲得的式1化合物分離成旋光異構(gòu)體。然而，也可以在開始時使用旋光性原料，之后獲得相應(yīng)的旋光性或非對映異構(gòu)化合物作為終產(chǎn)物。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物具有重要的藥理性質(zhì)，可用于治療。
本發(fā)明化合物是TNFα釋放抑制劑。
因此，本發(fā)明化合物可用于抑制TNFα釋放。
因此，本發(fā)明的目的是，式1化合物及其鹽，和含有這些化合物或其鹽的藥物制劑可用于治療抑制TNFα對于其治療有用的疾病。
這些疾病包括例如關(guān)節(jié)炎癥，包括關(guān)節(jié)炎和類風濕性關(guān)節(jié)炎，以及其它關(guān)節(jié)炎性疾病，例如類風濕性脊椎炎和骨關(guān)節(jié)炎。其它可能的應(yīng)用是治療患有下列疾病的患者骨質(zhì)疏松、膿毒癥、膿毒性休克、格蘭氏陰性膿毒癥、中毒性休克綜合征、呼吸窘迫綜合征、哮喘和其它慢性肺病、骨吸收疾病或移植排斥反應(yīng)或其它自身免疫性疾病，例如紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、腎小球性腎炎和眼色素層炎、胰島素依賴性糖尿病和慢性脫髓鞘。
此外，本發(fā)明化合物還可用于治療感染，例如病毒感染和寄生蟲感染，例如治療瘧疾、利什曼病、感染引起的發(fā)燒、感染引起的肌肉疼痛、AIDS和惡病質(zhì)。
本發(fā)明化合物是磷酸二酯酶4抑制劑。
因此，本發(fā)明化合物可用于抑制磷酸二酯酶4。
因此，本發(fā)明的目的是，式1化合物和其鹽，和含有這些化合物或其鹽的藥物制劑可用于治療抑制磷酸二酯酶4對于其治療有用的疾病。
因此，本發(fā)明化合物可用作支氣管擴張劑和哮喘預(yù)防劑。式1化合物還是嗜酸性細胞聚集及其活性的抑制劑。所以本發(fā)明化合物還可用于治療其中嗜酸性細胞起作用的疾病。這些疾病包括例如呼吸道炎性疾病例如支氣管哮喘、過敏性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、特應(yīng)性皮炎、濕疹、過敏性脈管炎、嗜酸性細胞引起的炎癥，例如嗜酸細胞性筋膜炎、嗜酸細胞性肺炎和PIE綜合征(嗜酸性細胞增多的肺浸潤)、蕁麻疹、潰瘍性結(jié)膜炎、局限性回腸炎和增殖性皮膚病，例如牛皮癬和角化病。
本發(fā)明的目的是，式1化合物和其鹽可在體外抑制TNFα釋放和在大鼠體內(nèi)抑制LPS引起的肺中性白細胞浸潤。所發(fā)現(xiàn)的所有這些重要的藥理性質(zhì)證實了式1化合物和其鹽，和含有這些化合物和其鹽的藥物制劑可用于治療慢性堵塞性肺病。
此外，本發(fā)明化合物具有神經(jīng)保護性質(zhì)，并且可用于治療保護神經(jīng)對其治療有用的疾病。這樣的疾病是例如老年癡呆(阿爾茨海默氏病)、記憶遺失、帕金森氏病、抑郁癥、中風和間歇性跛行。
本發(fā)明化合物的其它可能應(yīng)用是預(yù)防和治療前列腺疾病，例如良性前列腺增生、頻尿、夜尿癥，以及治療失禁、尿石引起的絞痛和男性與女性性功能障礙。
本發(fā)明化合物還可用于抑制由于反復(fù)使用鎮(zhèn)痛劑，例如嗎啡而發(fā)展成藥物依賴性，以及用于降低當反復(fù)使用這些鎮(zhèn)痛劑時發(fā)展成耐藥性。
為了制備藥物，除了常規(guī)輔助劑、載體和添加劑外還使用有效劑量的本發(fā)明化合物或其鹽。
活性組分的劑量可根據(jù)其給藥途徑、患者的年齡、體重、欲治療的疾病的性質(zhì)和嚴重程度以及類似因素而改變。
日劑量可作為每天施用一次的單一劑量給藥，或者每天分成兩次或更多次劑量給藥，并且通常為0.001-100mg。
口服、非胃腸道、靜脈內(nèi)、透皮、局部、吸入和鼻內(nèi)給藥制劑是優(yōu)選的施用形式。
可使用制劑的常用藥物劑型，例如片劑、包衣片劑、膠囊、可分散粉劑、粒劑、水溶液、水或油懸浮液、糖漿、液劑或滴劑。
固體形式的藥物可含有惰性組分和載體，例如碳酸鈣、磷酸鈣、磷酸鈉、乳糖、淀粉、甘露醇、藻酸鹽、明膠、瓜爾膠、硬脂酸鎂、硬脂酸鋁、甲基纖維素、滑石粉、高度分散的二氧化硅、硅油、較高分子量脂肪酸(例如硬脂酸)、明膠、瓊脂、植物或動物脂肪和油、固體高分子量聚合物(例如聚乙二醇)；適于口服給藥的制劑如合適可含有另外的調(diào)味劑和/或甜料。
液體形式的藥物可滅菌和/或可任選含有輔助劑，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、滲透劑、乳化劑、涂布劑、助溶劑，用于控制滲透壓或用于起緩沖作用的鹽、糖或糖醇和/或粘度調(diào)節(jié)劑。
這樣的添加劑是例如酒石酸鹽和檸檬酸鹽緩沖劑、乙醇、絡(luò)合劑(例如乙二胺四乙酸及其無毒的鹽)。為了控制粘度，可使用高分子量聚合物，例如液體聚氧化乙烯、微晶纖維素例如羧甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖或明膠。固體載體物質(zhì)是例如淀粉、乳糖、甘露醇、甲基纖維素、滑石粉、高度分散的二氧化硅、較高分子量脂肪酸(例如硬脂酸)、明膠、瓊脂、磷酸鈣、硬脂酸鎂、動物和植物脂肪、固體高分子量聚合物例如聚乙二醇。
用于非胃腸道或局部施用的油懸浮液可含有植物的合成或半合成油，例如其在脂肪酸鏈中具有8-22個碳原子的液體脂肪酸酯，所述脂肪酸是例如棕櫚酸、月桂酸、十三烷酸、十七烷酸、硬脂酸、二十烷酸、肉豆蔻酸、二十二烷酸、十五烷酸、亞油酸、反油酸、巴西勒酸、芥酸或油酸，這些脂肪酸被具有1-6個碳原子的一元-三元醇酯化，所述醇是例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇或其異構(gòu)體，乙二醇或甘油。這樣的脂肪酸酯是例如常規(guī)市售Miglyole、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸異丙酯、PEG-6癸酸、飽和脂肪醇的辛酸/癸酸酯、聚氧化乙烯甘油三油酸酯、油酸乙酯、蠟狀脂肪酸酯例如合成的鴨尾腺脂肪、椰油脂肪酸的異丙酯、油酸油酯、油酸癸酯、乳酸乙酯、鄰苯二甲酸二丁酯、己二酸二異丙酯、多元醇的脂肪酸酯等。同樣合適的有不同粘度的硅油或脂肪醇，例如異十三烷醇、2-辛基十二烷醇、鯨蠟基硬脂醇或油醇、脂肪酸，例如油酸。此外，可使用植物油例如蓖麻油、杏仁油、橄欖油、芝麻油、棉子油、花生油或豆油。
作為溶劑、凝膠形成劑和助溶劑，可使用水或可與水混溶的溶劑。例如，可使用醇，例如乙醇或異丙醇、苯甲醇、2-辛基十二烷醇、聚乙二醇、鄰苯二甲酸酯、己二酸酯、丙二醇、甘油、一縮二丙二醇、三丙二醇、蠟、甲基溶纖劑、溶纖劑、酯、嗎啉、二氧雜環(huán)己烷、二甲亞砜、二甲基甲酰胺、四氫呋喃、環(huán)己酮等。
作為成膜劑，可以使用可溶解在或膨脹在水和有機溶劑中的纖維素醚，例如羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素或可溶性淀粉。
介于凝膠形成劑和成膜劑之間的混合形式也完全是可能的。在本發(fā)明中可尤其使用離子大分子例如羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸、聚異丁烯酸和其鹽、支鏈淀粉半羥乙酸鈉、藻酸或作為鈉鹽的丙二醇藻酸酯、阿拉伯膠、黃原膠、瓜爾膠或角叉菜膠。
作為其它制劑輔料，可使用下列物質(zhì)甘油、不同粘度的石蠟、三乙醇胺、膠原、尿囊素、Novantisolsure。為了制備所需制劑，可能還需要使用表面活性劑、乳化劑或潤濕劑，例如月桂基硫酸鈉、脂肪醇醚硫酸鹽、N-月桂基-β-亞氨基二丙酸二鈉、聚乙氧基化蓖麻油或脫水山梨醇一油酸酯、脫水山梨醇一硬脂酸酯、聚山梨醇酯(例如吐溫)、鯨蠟醇、卵磷脂、甘油一硬脂酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、烷基苯酚聚乙二醇醚、氯化鯨蠟基三甲基銨或一烷基或二烷基聚乙二醇醚正磷酸一乙醇胺鹽，穩(wěn)定劑例如蒙脫石或膠態(tài)二氧化硅來穩(wěn)定乳液，或為防止活性物質(zhì)分解，例如抗氧化劑，如生育酚或丁基羥基茴香醚，或防腐劑，例如對羥基苯甲酸酯同樣也是任選地需要的，以便制備所需的制劑。
非胃腸道給藥制劑還可以存在于分隔的劑量單位形式，例如安瓿或小瓶中。優(yōu)選使用活性組分的溶液，尤其是水溶液，和特別是等滲溶液；然而，還可以使用懸浮液。這些注射劑型可作為最終的制劑獲得，或者在使用前首先直接通過將任選與其它固體載體物質(zhì)在一起的活性化合物例如冷凍干燥物與所需溶劑或懸浮劑混合來直接制得。
鼻內(nèi)給藥制劑可作為作為水或油溶液或者水或油懸浮液存在。其還可以作為在使用前用合適的溶劑或懸浮劑配制的冷凍干燥物存在。
制劑的制備、向容器內(nèi)的填充和密封是在常規(guī)抗微生物和無菌條件下進行的。
本發(fā)明還涉及制備本發(fā)明化合物的方法。
依據(jù)本發(fā)明，其中R1、R2、R3具有上述含義，且n＝1的通式1化合物是這樣合成的
首先通過本身已知方法，用酰氯，優(yōu)選用亞硫酰氯或草酰氯將其中R1具有相同含義的式2所示7-氮雜吲哚-3-甲酸 轉(zhuǎn)化成類似的式3所示7-氮雜吲哚-3-甲酰氯 然后通過與伯胺或仲胺反應(yīng)將分離出的式3所示7-氮雜吲哚-3-甲酰氯轉(zhuǎn)化成其中R1、R2、R3具有上述含義，且n＝1的通式1的本發(fā)明化合物。該反應(yīng)在輔助性堿存在下有利地進行。作為輔助性堿，可使用用作反應(yīng)物的過量胺，叔胺，優(yōu)選吡啶或三乙胺，和無機堿，優(yōu)選堿金屬氫氧化物或堿金屬氫化物。
依據(jù)本發(fā)明，其中R1、R2、R3具有上述含義，且n＝2的通式1化合物是這樣合成的
首先按照已知方法，通過用草酰氯?；瘜⑵渲蠷1具有相同含義的式4所示7-氮雜吲哚 轉(zhuǎn)化成類似的式5所示7-氮雜吲哚-3-基乙醛酰氯 然后通過與伯胺或仲胺反應(yīng)由式5所示7-氮雜吲哚-3-基乙醛酰氯形成其中R1、R2、R3具有上述含義，且n＝2的通式1本發(fā)明化合物。該反應(yīng)在輔助性堿存在下有利地進行。作為輔助性堿，可使用用作反應(yīng)物的過量胺，叔胺，優(yōu)選吡啶或三乙胺，和無機堿，優(yōu)選堿金屬氫氧化物或堿金屬氫化物。
實施例合成其中n＝1的式1本發(fā)明化合物的方法的實施例實施例1N-(4-吡啶基甲基)-1-環(huán)丙基甲基-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺將1-環(huán)丙基甲基-7-氮雜吲哚-3-甲酸(1.87g，8.6mmol)懸浮在15ml二氯甲烷中。在用水冷卻下加入1.8mL草酰氯(17.4mmol)。將該反應(yīng)混合物攪拌8小時，期間結(jié)晶出1-環(huán)丙基甲基-7-氮雜吲哚-3-甲酰氯。分離出該結(jié)晶，并溶解在18ml四氫呋喃(THF)中。
將氫化鈉(60％，1.14g)懸浮在21ml THF中。在約10℃攪拌下，滴加0.93g 4-氨基甲基吡啶(8.6mmol)在21ml THF中的溶液。約15分鐘后，將先前制備的1-環(huán)丙基甲基-7-氮雜吲哚-3-甲酰氯溶液滴加到該反應(yīng)混合物中。然后將整個混合物回流3小時。冷卻后，將該反應(yīng)混合物與36mL乙酸乙酯和36mL水混合。分離各相，用水洗滌有機相。蒸餾出溶劑，將殘余物從乙醇中重結(jié)晶。
產(chǎn)量1.3g(理論值的50％)熔點187-189℃使用上述合成方法，可合成多種其它的其中n＝1的式1化合物，例如下面列出的化合物


合成其中n＝2的式1本發(fā)明化合物的方法的實施例實施例12N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(3-甲氧基芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺將1-(3-甲氧基芐基)-7-氮雜吲哚(3.57g，15mmol)溶解在50mL叔丁基甲基醚中。在攪拌下于0℃滴加1.54mL草酰氯(18mmol)在10mL叔丁基甲基醚中的溶液。然后將該混合物回流2小時，之后將溶劑真空蒸餾。獲得了1-(3-甲氧基芐基)-7-氮雜吲哚-3-基-乙醛酰氯，為固體殘余物，將其懸浮在50mL四氫呋喃(THF)中。
在-5℃向2g氫化鈉在20ml THF內(nèi)的懸浮液中滴加2.4g 4-氨基-3，5-二氯吡啶(15mmol)在30mL THF中的溶液。然后在攪拌下將該混合物于20℃保持1小時。然后在約0℃滴加先前制備的1-(3-甲氧基芐基)-7-氮雜吲哚-3-基-乙醛酰氯的懸浮液。最后將該反應(yīng)混合物回流4小時，然后真空除去溶劑。將殘余物與50mL乙酸乙酯和50mL水攪拌。分離各相，用水洗滌有機相。將溶劑真空蒸餾掉，將殘余物從異丙醇中重結(jié)晶。
產(chǎn)量3.5g(理論值的51.5％)熔點165-167℃使用上述合成方法，可合成多種其它的其中n＝2的式1化合物，例如下面列出的化合物



本發(fā)明化合物是磷酸二酯酶4以及TNFα釋放的強抑制劑。例如通過抑制哮喘晚期反應(yīng)(嗜酸性細胞增多)以及通過作用于變應(yīng)原引起的主動致敏的Brown Norway大鼠的血管滲透性來在體內(nèi)證實治療可能性。
抑制磷酸二酯酶在得自人多形核淋巴細胞(PMNL)的酶制備物中測定PDE 4活性，用得自人血小板的PDE測定PDE2、3和5活性。用檸檬酸鹽防止人血液凝結(jié)。通過在室溫以700×g離心20分鐘將上清液中的富含血小板的血漿與紅細胞和白細胞分離開。通過超聲將血小板裂解，并且在PDE3和PDE5測定中使用。為了測定PDE2活性，在陰離子交換柱上通過NaCl梯度純化胞質(zhì)血小板級分，獲得了用于測定的PED2峰。之后通過葡聚糖沉降，然后用Ficoll-Paque梯度離心來分離出用于PDE4測定的PMNL。將細胞洗滌2次后，通過加入10mL低滲緩沖液(155mMNH4Cl，10mM NaHCO3，0.1mM EDTA，pH＝7.4)將仍然含有的紅細胞在4℃裂解6分鐘。將仍然完整的PMNL用PBS洗滌兩次，并通過超聲裂解。通過在4℃以48000×g離心1小時所獲得的上清液含有PDE4的胞質(zhì)級分，并用于PDE 4測定。
使用作了某些改動的Thompson等人描述的方法來測定磷酸二酯酶活性(Thompson，W.J.和Appleman M.M.，環(huán)核苷酸磷酸二酯酶的測定和多種分子形式的酶的分離，Adv.Cycl.Nucl.Res.1979，10，69-92)。
反應(yīng)混合物含有50 mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、不同濃度的抑制劑、相應(yīng)的酶制備物以及測定各種同工酶所需的其它組分(見下文)。通過加入底物0.5μM[3H]-cAMP或[3H]-cGMP(每個測試約6000 CPM)來開始反應(yīng)。終體積為100ml。將測試底物作為在DMSO中的貯備液混合。該反應(yīng)混合物中的DMSO濃度為1％v/v。該濃度的DMSO不影響PDE活性。通過加入底物開始反應(yīng)后，將樣本在37℃培養(yǎng)30分鐘。通過將測試管在110℃加熱2分鐘來停止反應(yīng)。將樣本在冰上再保持10分鐘。加入30μL 5′-核苷酸酶(1mg/mL，從衲脊響尾蛇的蛇毒懸浮液制備的)，然后在37℃培養(yǎng)10分鐘。將樣本在冰上停止反應(yīng)，加入400μL Dowex-水-乙醇(1+1+1)的混合物，充分混合，在冰上再培養(yǎng)15分鐘。將反應(yīng)容器以3000×g離心20分鐘。將等分試樣的上清液(200μL)直接轉(zhuǎn)移到閃爍容器中。加入3mL閃爍體后，在β計數(shù)器中測定樣本。
使用[3H]-cAMP作為測定PDE4、3和2活性的底物，使用[3H]-cGMP作為測定PDE5活性的底物。對于PDE4的測定，在100μM環(huán)戊苯吡酮存在下測定非特異性酶活性，對于對于PDE3和5的測定，在100μM IBMX存在下測定非特異性酶活性，并從測試值中減去非特異性酶活性值。PDE3測定的培養(yǎng)混合物含有10μM環(huán)戊苯吡酮以抑制可能的PDE4沾污。用Amersham Company的SPA測定測試PDE2。該測定是在PDE2激活物(5μM cGMP)存在下進行的。
對于本發(fā)明化合物，測定的抑制磷酸二酯酶4的IC50值為10-9-10-5M。對2、3和5型PDE的選擇性為100-10000的因數(shù)。
例如，下表中總結(jié)了所選實施例化合物的抑制PDE4的結(jié)果

抑制從鼻息肉細胞釋放TNFα該實驗布置與Campbell，A.M.和Bousquet J.描述的方法基本上相同(H1-阻斷劑的抗過敏活性，Int.Arch.Allergy Immunol.，1993，101，308-310)。鼻息肉形成原料(得自已經(jīng)進行過手術(shù)治療的患者的材料)。
將組織用RPMI 1640洗滌，然后用蛋白酶(2.0mg/ml)、膠原酶(1.5mg/ml)、透明質(zhì)酸酶(0.75mg/ml)和DNA酶(0.05mg/ml)于37℃溶解(aufgeschlossen)2小時(1g組織和4mL含有酶的RPMI 1640)。將所得細胞—上皮細胞、單核細胞、巨噬細胞、淋巴細胞、成纖維細胞和粒細胞的混合物過濾，通過在培養(yǎng)溶液中反復(fù)離心來洗滌，加入人IgE來被動致敏，將細胞懸浮液在RPMI 1640(補充抗生素、10％胎牛血清、2mM谷氨酰胺和25mM Hepes)中稀釋至2百萬個細胞/mL的濃度。將懸浮液分配在6孔細胞培養(yǎng)平板上(1ml/孔)。將細胞與不同濃度的測試物預(yù)培養(yǎng)30分鐘，然后通過加入抗-IgE(7.2μg/mL)進行刺激以釋放TNFα。約18小時后發(fā)生了向培養(yǎng)基內(nèi)的最大釋放。在該期間，將細胞在37℃和5％二氧化碳下培養(yǎng)。通過離心(以4000rpm離心5分鐘)來收集培養(yǎng)基(上清液)，并在-70℃保持直至測定細胞因子。用所謂的三明治ELISA(基礎(chǔ)材料Pharmingen)測定上清液中的TNFα，使用該方法可測定濃度為30-1000pg/mL的細胞因子。
未用抗IgE刺激的細胞幾乎不產(chǎn)生任何THFα；另一方面，刺激的細胞分泌大量TNFα，可通過PDE4抑制劑減少TNFα的量，減少程度與劑量有關(guān)。由不同濃度測試物的抑制百分比(用抗IgE刺激的細胞的TNFα釋放＝100％)計算IC50(達到50％抑制的濃度)。
測定的本發(fā)明化合物的IC50值為10-7-10-5M。
例如，下表中總結(jié)了所選實施例化合物的抑制TNFα釋放的結(jié)果

抑制使用主動致敏的Brown Norway大鼠的吸入卵白蛋白攻擊48小時后的晚期嗜酸性細胞增多在已經(jīng)進行過抗卵白蛋白(OVA)的主動致敏的雄性Brown Norway大鼠(200-250g)中，測試本發(fā)明化合物對肺嗜酸性細胞增多浸潤的抑制作用。通過在第1、14和21天給每只大鼠皮下注射10μg OVA和20mg氫氧化鋁助劑在0.5mL生理鹽水溶液中的懸浮液來給大鼠致敏。此外，每只動物同時接受0.25mL腹膜內(nèi)注射的百日咳桿菌(Bordetellapertussis)疫苗稀釋物。在實驗的第28天，將動物單獨置于開口的1L有機玻璃盒子中，該盒子與頭鼻暴露裝置連接。將動物暴露于1.0％卵白蛋白懸浮液的氣霧劑中(變應(yīng)原攻擊)。卵白蛋白氣霧劑是用通過壓縮空氣(0.2MPa)驅(qū)動的噴霧器(Bird Micronebulizer，Palm Springs CA，USA)產(chǎn)生的。暴露時間是1小時，標準對照是用0.9％鹽溶液的氣霧劑噴霧1小時。
變應(yīng)原攻擊48小時后，有大量嗜酸性粒細胞遷移到動物的肺內(nèi)。同時，用過量烏拉坦(1.5g/kg體重，i.p.)將動物麻醉，用3×4mL Hank’s平衡溶液進行支氣管肺泡灌洗。然后用自動細胞鑒別裝置(BayerDiaghostics Technicon H1E)測定匯集的BAL液體的總細胞數(shù)目和嗜酸性粒細胞數(shù)目。對于每只動物，如下所示計算以百萬/動物表示的BAL中的嗜酸性細胞(EOS)EOS/μl×收集的BAL(mL)＝EOS/動物。
每次測試運行2個對照組(用生理鹽水溶液噴霧和用OVA溶液噴霧)。
依據(jù)下述公式計算用測試物治療的實驗組的嗜酸性細胞增多的抑制百分比{((OVAC-SC)-(OVAD-SC))/(OVAC-SC)}×100％＝％抑制(SC＝用0.9％鹽溶液攻擊的載體治療對照組；OVAC＝用1％卵白蛋白懸浮液攻擊的載體治療對照組；OVAD＝用1％卵白蛋白懸浮液攻擊的測試物治療的實驗組)測試物是在變應(yīng)原攻擊前2小時，作為在10％聚乙二醇300和0.5％5-羥基乙基纖維素中的懸浮液腹膜內(nèi)或口服施用的。對照組是依據(jù)測試物的施用形式用載體治療。
以10mg/kg的劑量腹膜內(nèi)施用后，本發(fā)明化合物將晚期嗜酸性細胞增多抑制劑了30％-100％，以30mg/kg的劑量口服施用后，本發(fā)明化合物將晚期嗜酸性細胞增多抑制劑了30％-75％。
因此，本發(fā)明化合物特別適于制備用于治療與嗜酸性細胞活動有關(guān)的疾病的藥物。
例如，下表中總結(jié)了所選實施例化合物的抑制嗜酸性細胞增多的結(jié)果

抑制Lewis大鼠中脂多糖(LPS)引起的中性白細胞增多在雄性Lewis大鼠(250-350g)中測試本發(fā)明化合物對肺中性白細胞浸潤的抑制作用。在實驗的當天，將動物單獨置于開口的1L有機玻璃盒子中，該盒子與頭鼻暴露裝置連接。將動物暴露于脂多糖懸浮液(100μg LPS/mL 0.1％羥基胺在PBS中的溶液)的氣霧劑中(LPS攻擊)中。LPS/羥基胺氣霧劑是用通過壓縮空氣(0.2MPa)驅(qū)動的噴霧器(BirdMicronebulizer，Palm Springs CA，USA)產(chǎn)生的。暴露時間是40分鐘，標準對照是用0.1％羥基胺在PBS中的溶液的氣霧劑噴霧40分鐘。
LPS攻擊6小時后，有大量中性粒細胞遷移到動物的肺內(nèi)。同時，用過量烏拉坦(1.5g/kg體重，i.p.)將動物麻醉，用3×4mL Hank’s平衡溶液進行支氣管肺泡灌洗。然后用自動細胞鑒別裝置(BayerDiagnostics Technicon H1E)測定匯集的BAL液體的總細胞數(shù)目和中性粒細胞數(shù)目。對于每只動物，如下所示計算以百萬/動物表示的BAL中的中性白細胞(NEUTRO)NEUTRO/μl×收集的BAL(mL)＝NEUTRO/動物。
每次測試運行2個對照組(用0.1％羥基胺在PBS中的溶液噴霧和用100μgLPS/mL 0.1％羥基胺在PBS中的溶液)。
依據(jù)下述公式計算用測試物治療的實驗組的中性白細胞增多的抑制百分比{((LPSC-SC)-(LPSD-SC))/(LPSC-SC)}×100％＝％抑制(SC＝用0.1％羥基胺溶液攻擊的載體治療對照組；LPSC＝用LPS(100μg/mL 0.1％羥基胺溶液)攻擊的載體治療對照組；LPSD＝用LPS(100μg/mL 0.1％羥基胺溶液)攻擊的測試物治療的實驗組)測試物是在LPS攻擊前2小時，作為在10％聚乙二醇300和0.5％5-羥基乙基纖維素中的懸浮液口服施用的。對照組是依據(jù)測試物的施用形式用載體治療。
以1mg/kg的劑量口服施用后，本發(fā)明化合物將中性白細胞增多抑制劑了40％-90％。因此，本發(fā)明化合物特別適于制備用于治療與中性白細胞活動有關(guān)的疾病的藥物。
例如，下表中總結(jié)了所選實施例化合物的抑制中性白細胞增多的結(jié)果

權(quán)利要求書(按照條約第19條的修改)17.制備權(quán)利要求16的藥物的方法，其特征在于將一種或多種權(quán)利要求1-5任一項的化合物和常規(guī)生理可耐受載體和/或稀釋劑或其它輔助劑一起加工成藥物制劑或/和制成可治療使用的形式。
18.單獨或彼此組合或與載體和/或稀釋劑或其它輔助劑組合的權(quán)利要求1-5任一項的化合物和/或權(quán)利要求16或17的藥物制劑的應(yīng)用。
19.權(quán)利要求1-3任一項的通式1化合物，其中所述化合物是N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[(1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基)]乙醛酰胺。
權(quán)利要求
1.通式1的7-氮雜吲哚， 其中n可以是1或2，且R1代表-C1-10直鏈或支鏈烷基，所述烷基未取代或被下列基團取代一次或多次-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-SO2C6-14芳基、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6- 14芳基、-COOH、-(CO)C1-5烷基，具有有3-14個環(huán)單元的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)飽和或單不飽和或多不飽和的碳環(huán)，具有有5-15個環(huán)單元和1-6個優(yōu)選為N、O和S的雜原子的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)飽和或單不飽和或多不飽和的雜環(huán)，其中，C6-14芳基和碳環(huán)取代基和雜環(huán)取代基本身可未取代或被R4單取代或多取代，-C2-10單不飽和或多不飽和直鏈或支鏈鏈烯基，所述鏈烯基未取代或被下列基團取代一次或多次-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SO3H、-SO2C1-6烷基、-SO2C6-14芳基、-OSO2C1-6烷基、-OSO2C6-14芳基、-COOH、-(CO)C1-5烷基，具有有3-14個環(huán)單元的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)飽和或單不飽和或多不飽和的碳環(huán)，具有有5-15個環(huán)單元和1-6個優(yōu)選為N、O和S的雜原子的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)飽和或單不飽和或多不飽和的雜環(huán)，其中，C6-14芳基和碳環(huán)取代基和雜環(huán)取代基本身可以是未取代的或被R4單取代或多取代，R2和R3可相同或不同，二者當中只有一個可代表氫，此外，R2和R3可代表-C1-5-烷基，所述烷基未取代或被下列基團單取代或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-S-C1-6-烷基、苯基、吡啶基，-苯基，所述苯基未取代或被下列基團單取代或多取代-OH、-SH、-NH2、-NHC1-3-烷基、-N(C1-3-烷基)2、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3烷基、-F、-Cl、-Br、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3-烷基，-吡啶基，所述吡啶基未取代或被下列基團單取代或多取代-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-3烷基、-Cl、-Br、-O-C1-3-烷基、-S-C1-3-烷基，和 此外，-NR2R3基可一起代表 和R4代表-H、-OH、-SH、-NH2、-NHC1-6-烷基、-N(C1-6-烷基)2、-NHC6-14芳基、-N(C6-14芳基)2、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-NHCOC1-6烷基、-NO2、-CN、-COOH、-COOC1-6烷基、-(CO)C1-6烷基、-(CS)C1-6烷基、-F、-Cl、-Br、-I、-O-C1-6-烷基、-O-C6-14-芳基、-S-C1-6-烷基、-S-C6-14芳基、-SOC1-6烷基、-SO2C1-6烷基。
2.權(quán)利要求1的式1化合物的生理可耐受鹽，其特征在于所述鹽是通過用無機酸或有機酸中和堿或者通過用無機堿或有機堿中和酸或者通過將叔胺季銨化以生成季銨鹽而獲得的。
3.權(quán)利要求1或2的式1化合物，其中所述化合物具有不對稱碳原子，并且呈D-形式、L-形式或D，L-混合物的形式，或者當具有幾個不對稱碳原子時，呈非對映異構(gòu)體形式。
4.權(quán)利要求1-3任一項的式1化合物，其中n＝1，并且所述化合物選自N-(4-吡啶基甲基)-1-環(huán)丙基甲基-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-1-異丁基-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-1-己基-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-1-環(huán)丙基甲基-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺N-(4-吡啶基甲基)-1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-1-(4-甲氧基芐基)-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺N-(4-吡啶基甲基)-1-(4-氯芐基)-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-甲酰嗎啉N-(2，6-二氯苯基)-1-(2-甲基丙烯-3-基)-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺和N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-1-(4-吡啶基甲基)-7-氮雜吲哚-3-甲酰胺。
5.權(quán)利要求1-3任一項的式1化合物，其中n＝2，并且所述化合物選自N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(3-甲氧基芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(4-吡啶基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺鹽酸鹽N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(4-吡啶基)-[1-(4-氯芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺鹽酸鹽N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-4-氯芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-甲氧基芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(2，6-二氯苯基)-[l-(4-氯芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(4-羧基苯基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(4-乙氧基羰基苯基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(3，4-二甲氧基苯基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-甲基芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-羥基芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(3-羥基芐基)-7-氮雜吲哚-3-基)-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-(1-環(huán)丙基甲基-7-氮雜吲哚-3-基)-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-(1-己基-7-氮雜吲哚-3-基)-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-(1-異丁基-7-氮雜吲哚-3-基)-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2-甲基丙烯-3-基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(2-甲氧基乙基)-7-氮雜吲哚-3-基]乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(1-萘基甲基)-7-氮雜吲哚-3-基]乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(4-吡啶基甲基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-[1-(3，5-二甲基異噁唑-4-基甲基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N，N-二(2-甲氧基乙基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]乙醛酰胺[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛?；鶈徇鳾1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰基(S，S-二氧代嗎啉)[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛?；?4-甲基哌嗪)，N-(6-甲基尿嘧啶-5-基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(3，6-二甲基尿嘧啶-5-基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺N-(1，3，6-三甲基尿嘧啶-5-基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺和N-(1，2，4-4H-三唑-3-基)-[1-(4-氟芐基)-7-氮雜吲哚-3-基]-乙醛酰胺。
6.合成其中n＝1的權(quán)利要求1-4任一項的式1化合物的方法，其特征在于用酰氯將7-氮雜吲哚-3-甲酸轉(zhuǎn)化成類似的7-氮雜吲哚-3-甲酰氯，然后通過與伯胺或仲胺反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化成其中n＝1的式1本發(fā)明化合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法合成式1化合物，其特征在于使用亞硫酰氯或草酰氯作為酰氯來合成7-氮雜吲哚-3-甲酰氯。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的方法合成式1化合物，其特征在于在輔助性堿存在下，優(yōu)選在用作反應(yīng)物的過量胺，叔胺，例如吡啶或三乙胺，和無機堿，優(yōu)選堿金屬氫氧化物或堿金屬氫化物存在下將7-氮雜吲哚-3-甲酰氯與伯胺或仲胺反應(yīng)。
9.合成其中n＝2的權(quán)利要求1-3和5任一項的式1化合物的方法，其特征在于用草酰氯將7-氮雜吲哚轉(zhuǎn)化成類似的7-氮雜吲哚-3-基乙醛酰氯，然后通過與伯胺或仲胺反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化成其中n＝2的式1化合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法合成式1化合物，其特征在于在輔助性堿存在下，優(yōu)選在用作反應(yīng)物的過量胺，叔胺，例如吡啶或三乙胺，和無機堿，優(yōu)選堿金屬氫氧化物或堿金屬氫化物存在下將7-氮雜吲哚-3-基乙醛酰氯與伯胺或仲胺反應(yīng)。
11.權(quán)利要求1-5任一項的式1化合物作為治療活性組分在制備用于治療其中抑制TNFα對其治療有用的疾病的藥物中的應(yīng)用。
12.權(quán)利要求1-5任一項的式1化合物作為治療活性組分在制備用于治療其中抑制磷酸二酯酶4對其治療有用的疾病的藥物中的應(yīng)用。
13.權(quán)利要求1-5任一項的式1化合物作為治療活性組分在制備用于治療與嗜酸性細胞的作用有關(guān)的疾病的藥物中的應(yīng)用。
14.權(quán)利要求1-5任一項的式1化合物作為治療活性組分在制備用于治療與中性白細胞的作用有關(guān)的疾病的藥物中的應(yīng)用。
15.權(quán)利要求1-5任一項的化合物作為活性組分在制備下述用于治療和/或預(yù)防下列抑制TNFα對其治療有用的疾病的藥物和用作支氣管擴張藥的藥物，用于抑制發(fā)展成藥物依賴性和用于降低發(fā)展成耐藥性的藥物中的應(yīng)用尤其是關(guān)節(jié)炎癥、關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)炎性疾病、類風濕性脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松、膿毒癥、膿毒性休克、格蘭氏陰性膿毒癥、中毒性休克綜合征、呼吸窘迫綜合征、哮喘、慢性肺病、骨吸收疾病、移植排斥反應(yīng)、自身免疫性疾病、紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化、腎小球性腎炎、眼色素層炎、胰島素依賴性糖尿病、慢性脫髓鞘、病毒性疾病、病毒感染、寄生蟲感染、瘧疾、利什曼病、感染引起的發(fā)燒、感染引起的肌肉疼痛、AIDS、惡病質(zhì)，可通過抑制磷酸二酯酶4來治療的疾病、哮喘、其中嗜酸性細胞起作用的疾病、支氣管哮喘、過敏性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、特應(yīng)性皮炎、濕疹、過敏性脈管炎、嗜酸性細胞引起的炎癥、嗜酸細胞性筋膜炎、嗜酸細胞性肺炎、PIE綜合征、蕁麻疹、潰瘍性結(jié)膜炎、局限性回腸炎、增殖性皮膚病、牛皮癬、角化病、慢性堵塞性肺病、可通過神經(jīng)保護治療的疾病、老年癡呆、阿爾茨海默氏病、記憶遺失、帕金森氏病、抑郁癥、中風、間歇性跛行、前列腺疾病、良性前列腺增生、頻尿、夜尿癥、失禁、絞痛、尿石性絞痛和男性或女性性功能障礙。
16.藥物，其中除了常規(guī)生理可耐受載體和/或稀釋劑或輔助劑外還含有一種或多種權(quán)利要求1-5的化合物。
17.制備權(quán)利要求16的藥物的方法，其特征在于將一種或多種權(quán)利要求1-5任一項的化合物和常規(guī)生理可耐受載體和/或稀釋劑或其它輔助劑一起加工成藥物制劑或/和制成可治療使用的形式。
18.單獨或彼此組合或與載體和/或稀釋劑或其它輔助劑組合的權(quán)利要求1-5任一項的化合物和/或權(quán)利要求16或17的藥物制劑的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的7－氮雜吲哚化合物，其作為磷酸二酯酶4抑制劑的應(yīng)用，及其制備方法。
文檔編號A61P31/18GK1484644SQ01821535
公開日2004年3月24日 申請日期2001年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2000年10月27日
發(fā)明者N·赫夫根, U·埃格爾蘭德, T·克倫巴赫, D·馬克斯, S·斯策倫伊, H·庫斯, E·波利梅羅普洛斯, N 赫夫根, 仿奩章逅, 唄滓, 慫, 穸 嫉, 裝禿 申請人:埃爾比昂股份公司