專利名稱：作為血管升壓素拮抗劑的非肽取代的螺苯并氮雜的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的非肽取代的血管升壓素受體拮抗劑。更具體地說，本發(fā)明化合物阻斷肽激素血管升壓素與其受體的結(jié)合并因而用于治療包括血管阻力增高和心機(jī)能不全的疾病。
背景技術(shù)：
血管升壓素是最初由垂體后葉腺分泌的非肽激素。該激素通過血管V-1和腎的V-2受體亞型發(fā)揮其作用。血管升壓素的作用包括子宮、膀胱，及平滑肌的收縮；糖原分解的促進(jìn)；血小板聚合的誘導(dǎo)；垂體后葉促腎上腺皮質(zhì)激素的釋放及腎的水重吸收的促進(jìn)。作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的神經(jīng)遞質(zhì)，血管升壓素可以影響攻擊行為、性行為、應(yīng)激反應(yīng)、社會(huì)行為及記憶。V-1a受體介導(dǎo)血管升壓素的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用、平滑肌的收縮及肝糖原分解的作用，而V-1b受體介導(dǎo)血管升壓素的垂體后葉的作用。推測(cè)V-2受體僅在腎中存在，通過刺激腺苷酸環(huán)化酶影響血管升壓素的抗利尿的作用。
升高血漿血管升壓素濃度似乎在充血性心力衰竭的發(fā)病機(jī)理中起作用(P.A.Van Zwieten，Progr.Pharmacol.Clin.Pharmacol.1990，7，49)。作為對(duì)治療充血性心力衰竭的一個(gè)進(jìn)展，非肽血管升壓素V-2受體拮抗劑誘導(dǎo)充血性心力衰竭的有知覺狗的低重量摩爾滲透壓濃度水抗性(aquaresis)及降低外周阻力(H.Ogawa，J.Med.Chem.1996，39，3547)。在一些病理學(xué)狀態(tài)中，對(duì)于給定的重量摩爾滲透壓濃度，血漿血管升壓素濃度可能不適當(dāng)?shù)厣?，由此?dǎo)致腎水潴留和低鈉血癥。低鈉血癥，伴有水腫病癥(肝硬變、充血性心力衰竭、腎衰竭)，可能伴有抗利尿激素的不適當(dāng)分泌綜合征(SIADH)。用血管升壓素V-2拮抗劑治療患有SIADH的大鼠能夠糾正其已有的低鈉血癥(G.Fujisawa，Kidney Int.1993，44(1)，19)。部分由于在脈管系統(tǒng)中血管升壓素在其V-1受體的收縮作用，血管升壓素V-1拮抗劑作為高血壓病的有效治療藥物也可降低血壓。因此，血管升壓素受體拮抗劑作為治療高血壓、充血性心力衰竭/心機(jī)能不全、冠狀血管痙攣、心局部缺血、肝硬變、腎血管痙攣、腎衰竭、大腦水腫及局部缺血、中風(fēng)、血栓形成、和水潴留等病癥是有用的。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及下式I代表的化合物或其光學(xué)異構(gòu)體、對(duì)映體、非對(duì)映異構(gòu)體、外消旋體，或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1是一個(gè)至三個(gè)獨(dú)立選自氫、鹵素、氨基、取代氨基、羥基、烷氧基、苯基、取代苯基、烷硫基、芳硫基、烷基-亞砜、芳基-亞砜、烷基-砜，及芳基-砜的部分；-R2-R3-是 或 其中R’選自烷基、取代烷基、苯基、取代苯基、雜芳基、取代雜芳基，及-Bp-G-Eq-W，其中
(a)B選自(CH2)m，NH和O；(b)G選自芳基、取代芳基、雜芳基，及取代雜芳基；(c)E是O、S、NH、(CH2)iN(R”)CO或(CH2)iCONR”，其中R”選自氫、烷基，及取代烷基；(d)W是一個(gè)至三個(gè)獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、氨基、取代氨基、烷硫基苯基、烷基-亞砜苯基、芳基、取代芳基、雜芳基及取代雜芳基的部分；(e)P獨(dú)立為0或1；(f)q獨(dú)立為0或1；(g)m獨(dú)立為1、2或3；及(h)i獨(dú)立為0、1、2或3；R4是一個(gè)至二個(gè)獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、苯基，及取代苯基的基團(tuán)；R5選自氫、烷基、取代烷基、醛、羧基、烷氧基羰基、取代烷氧基羰基、-(CH2)kNZ1Z2和-CONZ1Z2，其中k是1-4的整數(shù)，及Z1和Z2獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、氨基羰基，和取代氨基羰基，或N、Z1和Z2一起生成雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、雜芳基，和取代雜芳基；a代表單鍵或雙鍵，條件是當(dāng)R1是碘、溴、烷硫基、芳硫基、烷基-砜、或芳基-砜時(shí)，a是雙鍵；A選自芳基、萘基和雜芳基；X選自CH、CH2、CHOH，和C＝O；及N是1、2，或3。
本發(fā)明化合物是有用的血管升壓素受體拮抗劑，一般可用于內(nèi)耳疾病、高血壓、充血性心力衰竭、心機(jī)能不全、冠狀血管痙攣、心局部缺血、肝硬變、腎血管痙攣、腎衰竭、大腦水腫及局部缺血、中風(fēng)、血栓形成、水潴留、攻擊行為、強(qiáng)迫觀念與行為疾病、痛經(jīng)、腎病綜合征，和中樞神經(jīng)損傷等疾病狀態(tài)。
本發(fā)明的示例是包含藥學(xué)上可接受的載體和任一上述化合物的藥用組合物。示證性的本發(fā)明是通過任一上述化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合制備藥用組合物。本發(fā)明的例子是包括任一上述化合物與藥學(xué)上可接受的載體混合來制備藥用組合物的方法。
本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)例是對(duì)需要此治療的與血管升壓素受體活性有關(guān)的疾病的患者進(jìn)行治療的方法，該方法包括對(duì)所述患者給予治療有效量的上述任一化合物或藥用組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)例是抑制與血管升壓素受體活性有關(guān)的疾病的患者疾病發(fā)作的方法，該方法包括對(duì)所述患者給予預(yù)防有效量的式I化合物的藥用組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)例是治療充血性心力衰竭的方法，其中所述化合物的治療有效量是約1至約30mg/kg/天。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)例是抑制充血性心力衰竭發(fā)作的方法，其中所述化合物的預(yù)防有效量是約1至約30mg/kg/天。
本發(fā)明另外的實(shí)例是對(duì)需要此治療的患有選自高血壓、充血性心力衰竭、心機(jī)能不全、冠狀血管痙攣、心局部缺血、肝部硬變、腎血管痙攣、腎衰竭、大腦水腫及局部缺血、中風(fēng)、血栓形成、或水潴留的疾病的患者進(jìn)行治療的方法，該方法包括對(duì)所述患者給予治療有效量的任一上述化合物或藥用組合物。最好所給予的治療任一上述疾病的化合物的治療有效量是約1至約30mg/kg/天。
本發(fā)明也包括任一上述化合物在制備對(duì)需要此治療的患有選自內(nèi)耳疾病、高血壓、充血性心力衰竭、心機(jī)能不全、冠狀血管痙攣、心局部缺血、肝硬變、腎血管痙攣、腎衰竭、大腦水腫及局部缺血、中風(fēng)、血栓形成、水潴留、攻擊行為、強(qiáng)迫觀念與行為疾病、痛經(jīng)、腎病綜合征，和中樞神經(jīng)損傷等疾病的患者治療的藥物中的用途。發(fā)明詳述本發(fā)明提供可用作血管升壓素拮抗劑的非肽取代的螺苯并氮雜化合物。特別是這些取代的螺苯并氮雜化合物抑制血管升壓素對(duì)于V-1a、V-1b，和/或V-2受體的結(jié)合。本發(fā)明化合物通過其抑制在表達(dá)人V-1a和V-2受體的轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞中由精氨酸血管升壓素(AVP)誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣離子轉(zhuǎn)移及cAMP聚集的能力也顯示了它們的功能活性。特別是，本發(fā)明涉及式I化合物或其光學(xué)異構(gòu)體、對(duì)映體、非對(duì)映異構(gòu)體、外消旋體，或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1是一個(gè)至三個(gè)獨(dú)立選自氫、鹵素、氨基、取代氨基、羥基、烷氧基、苯基、取代苯基、烷硫基、芳硫基、烷基-亞砜、芳基-亞砜、烷基-砜，及芳基-砜的部分；-R2-R3-是 或 其中R’選自烷基、取代烷基、苯基、取代苯基、雜芳基、取代雜芳基，及-Bp-G-Eq-W，其中(a)B選自(CH2)m，NH和O；(b)G選自芳基、取代芳基、雜芳基，及取代雜芳基；(c)E是O、S、NH、(CH2)iN(R”)CO或(CH2)iCONR”，其中R”選自氫、烷基，及取代烷基；(d)W是一個(gè)至三個(gè)獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、氨基、取代氨基、烷硫基苯基、烷基-亞砜苯基、芳基、取代芳基、雜芳基及取代雜芳基的部分；(e)P獨(dú)立為0或1；
(f)q獨(dú)立為0或1；(g)m獨(dú)立為1、2或3；及(h)i獨(dú)立為0、1、2或3；R4是一個(gè)或二個(gè)獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、苯基，及取代苯基的基團(tuán)；R5選自氫、烷基、取代烷基、醛、羧基、烷氧基羰基、取代烷氧基羰基、-(CH2)kNZ1Z2和-CONZ1Z2，其中k是1-4的整數(shù)，及Z1和Z2獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、氨基羰基，和取代氨基羰基，或N、Z1和Z2一起形成雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、雜芳基，或取代雜芳基；a代表單鍵或雙鍵，條件是當(dāng)R1是碘、溴、烷硫基、芳硫基、烷基-砜、或芳基-砜時(shí)，a是雙鍵；A選自芳基、萘基和雜芳基；X選自CH、CH2、CHOH，和C＝O；及n是1、2，或3。
本發(fā)明的非肽取代的螺苯并氮雜化合物是血管升壓素受體拮抗劑。在一個(gè)最佳實(shí)施方案中，所述化合物是口服有活性的。如根據(jù)后文描述的藥理學(xué)研究的結(jié)果所證明的，所述化合物顯示了阻斷血管升壓素與重組V-1a、V-1b，和/或V-2結(jié)合的能力，并因而在治療或預(yù)防如攻擊行為、強(qiáng)迫觀念與行為疾病、高血壓、痛經(jīng)、充血性心力衰竭/心機(jī)能不全、冠狀血管痙攣、心局部缺血、肝硬變、腎血管痙攣、腎衰竭、水腫、局部缺血、中風(fēng)、血栓形成、水潴留、腎病綜合征，和中樞神經(jīng)損傷等疾病是有用的。
特別是，其中A是苯基或取代苯基的式I化合物是本發(fā)明的實(shí)施方案。
更特別的是，其中-R2-R3-是 的式I化合物也是本發(fā)明特別的實(shí)施方案。
其中a是雙鍵的式I化合物也是本發(fā)明的特別的實(shí)施方案。
式I化合物，其中R’是-Bp-G-Eq-W(其中B、G、E、W、p，及q如上所述)，是本發(fā)明的特別的實(shí)施方案。特殊的實(shí)例是那些化合物，其中(a)p是0和q是1；(b)G是苯基或取代苯基；(c)E是NHCO；及(d)W是苯基或取代苯基。
式I化合物，其中R5是-CONZ1Z2(其中Z1和Z2如上所述)，是本發(fā)明的另一個(gè)特別的實(shí)施方案。
式I化合物，其中R’是獨(dú)立由一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代的苯基，所述基團(tuán)選自烷基、取代烷基、烷氧基、硝基、氨基、任選由選自烷基、取代烷基、醛、烷基羰基、羧基、烷基羧基、烷氧基羰基及-NZ1Z2的基團(tuán)取代的 任選由烷基或取代烷基取代 任選由烷基或取代烷基取代的 -O(CO)O-烷基、羥基、鹵代基、烷氧基羰基、用任選取代的烷基或烷基羰基任選取代的-O-雜環(huán)基，及-NZ1Z2，其中Z1和Z2如上所述，也是本發(fā)明的特別的實(shí)施方案。
式I化合物，其中X選自CH2、CHOH，及C＝O，是本發(fā)明的其他的實(shí)施方案。特別是-R2-R3-是
更特別地是，R1、R4，及R5是氫，和R’是取代的苯基或-Bp-G-Eq-W，其中(a)W是苯基或取代苯基；(b)E是NHCO；及(c)p是0。
式I化合物，其中n是1或2，也是本發(fā)明的其他的實(shí)施方案。特別是，a是雙鍵。
更特別的是，下述化合物是本發(fā)明的特別的實(shí)施方案化合物1904-[3-甲氧基-4-(3-羥甲基吡咯-1-基)苯甲?；鵠-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯；化合物22和23(S)-4-(2-氟苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3’-(2-(N，N-二甲基氨基乙基氨基羰基))-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯和(R)-4-(2-氟苯基苯甲酰基-4-氨基苯甲?；?-3’-(2-(N，N-二甲基氨基乙基氨基羰基))-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯；及化合物20和21(S)-4-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3’-(2-(N，N-二甲基氨基乙基氨基羰基))-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯和(R)-4-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3’-(2-(N，N-二甲基氨基乙基氨基羰基))-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯。
式I化合物可以按照各種已知的合成路徑由容易獲得的起始原料制得。本發(fā)明也涉及下述結(jié)構(gòu)式的中間體， 其中R1、R4、R5、A和n如上所述。
本發(fā)明化合物也可以以藥學(xué)上可接受的鹽的形式存在。對(duì)于在藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明化合物的鹽指無毒的“藥學(xué)上可接受的鹽”。然而，其他鹽可以用于制備根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。代表性有機(jī)或無機(jī)酸包括但不限于，氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、高氯酸、硫酸、硝酸、磷酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、乳酸、琥珀酸、馬來酸、反丁烯二酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、羥基乙磺酸、苯磺酸、草酸、撲酸、2-萘磺酸、p-甲苯磺酸、環(huán)己基氨基磺酸、水楊酸、己糖酸、或三氟乙酸。代表性的堿/陽離子鹽包括但不限于，芐星青霉素、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺、普魯卡因、鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉或鋅。
當(dāng)根據(jù)本發(fā)明的化合物具有至少一個(gè)立體相關(guān)的(stereogenic)中心時(shí)，相應(yīng)地，它們可以作為對(duì)映體存在。當(dāng)該化合物具有兩個(gè)或多個(gè)立體相關(guān)的中心時(shí)，它們可以另外作為非對(duì)映異構(gòu)體存在。應(yīng)該理解，全部此類異構(gòu)體及其混合物均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。而且，一些化合物的晶型可以以多晶型形式存在并因此也打算包括在本發(fā)明中。另外，一些化合物可以與水或普通有機(jī)溶劑形成溶劑合物(例如，水合物)，并且這樣的溶劑合物也打算包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
用于此處的術(shù)語“受試者”，是指已經(jīng)是治療、觀察或?qū)嶒?yàn)對(duì)象的動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選人。
用于此處的術(shù)語“治療”一種病癥是指消除或改善所述病癥的原因和/或其影響。“阻礙”或“抑制”一種疾病的發(fā)作是指預(yù)防、延緩或減少此種發(fā)作的可能性。
確定本發(fā)明藥用組合物的治療及預(yù)防有效量的方法是本領(lǐng)域公知的。用于此處的術(shù)語“治療有效量”是指研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)生或其他臨床醫(yī)師一直尋找的活性化合物或藥劑引起的在組織系統(tǒng)、動(dòng)物或人中的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的量，該反應(yīng)包括所治療的疾病或病癥的癥狀的減輕。術(shù)語“預(yù)防有效量”是指研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)生或其他臨床醫(yī)師一直尋找的活性化合物或藥劑抑制受試者疾病發(fā)作的量，對(duì)于所述疾病的延遲是由減少血管阻力增高介導(dǎo)的。
除另有說明外，本公開全文采用標(biāo)準(zhǔn)命名法命名，首先描述指定側(cè)鏈的端基部分，接著為對(duì)于該連接部位的相鄰官能度。
除另有說明外，文中所用的“烷基”和“烷氧基”，不論是單獨(dú)用還是作為取代基的部分，包括具有1至8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈，以及含有3至8個(gè)環(huán)碳及優(yōu)選5至7個(gè)環(huán)碳的環(huán)烷基，或者在此范圍內(nèi)的任何數(shù)量的基團(tuán)。例如，烷基包括甲基、乙基、n-丙基、異丙基、正-丁基、異丁基、仲-丁基、叔-丁基、正-戊基、3-(2-甲基)丁基、2-戊基、2-甲基丁基、新戊基、正-己基、2-己基及2-甲基戊基。烷氧基是由前述直鏈、支鏈，或環(huán)鏈烷基基團(tuán)生成的氧醚。文中所用的烷基可以由例如，氨基、取代氨基、鹵素、羥基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、烷基、烷氧基、烷氧基羰基、雜芳基、取代的雜芳基，和/或如苯基或芐基的芳基所取代。
“雜環(huán)基”或“雜環(huán)”是3-至8-元飽和的或部分飽和的由碳原子與一個(gè)至三個(gè)選自N、O，和S的雜原子構(gòu)成的單環(huán)或稠環(huán)體系。如文中所用，“雜環(huán)基”或“雜環(huán)”也指3-、4-、7-或8-元不飽和的由碳原子與一個(gè)至三個(gè)選自N、O，和S的雜原子構(gòu)成的單環(huán)或稠環(huán)體系。所述雜環(huán)基可以連接在導(dǎo)致產(chǎn)生穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的任一雜原子或碳原子上。雜環(huán)基的實(shí)例包括，但不限于吡啶、嘧啶、噁唑啉、吡咯、咪唑、嗎啉、呋喃、吲哚、苯并呋喃、吡唑、吡咯烷、哌啶，及苯并咪唑。“雜環(huán)基”或“雜環(huán)”可以由一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立基團(tuán)取代，所述基團(tuán)包括但不限于，H、鹵素、氧代基、OH、烷基、取代烷基、氨基、雜芳基、醛、烷基羰基、烷氧基羰基、羧基、烷基羧基、烷氧基，及NZ1Z2，其中Z1和Z2如上所述。
文中所用術(shù)語“Ar”或“芳基”，不論是單獨(dú)使用或作為一個(gè)取代基團(tuán)的部分，是指芳香族基團(tuán)例如苯基和萘基。當(dāng)Ar或芳基被取代時(shí)，可以具有一個(gè)或三個(gè)取代基，所述取代基獨(dú)立選自C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、芳烷氧基、取代的C1-C8烷基(例如，三氟甲基)、氟代C1-C8烷氧基(例如，三氟甲氧基)、鹵素、氰基、羥基、硝基、任選取代的氨基、羧基、烷基羧基、烷氧羰基、C1-C4烷基氨基(即，-NH-C1-C4烷基)、C1-C4二烷基氨基(即，-N-[C1-C4烷基]2，其中烷基可以是相同的或不同的)、-O(CO)O-烷基、由任選取代的烷基或烷基羰基任選取代的-O-雜環(huán)基(即， )，任選取代的雜芳基(即，由選自烷基、取代烷基、醛、烷基羰基、羧基、烷基羧基、烷氧基羰基，及-NZ1Z2(其中Z1和Z2如上所述)的基團(tuán)任選取代的 )，以及未取代的、單-、雙-或三-取代的苯基，其中在苯基上的取代基獨(dú)立選自芳基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、取代的C1-C8烷基、氟代C1-C8烷氧基、鹵素、氰基、羥基、氨基、硝基、羧基、烷基羧基、烷基氨基、二烷基氨基和雜環(huán)基?！癙h”或“PH”表示苯基。
文中所用術(shù)語“雜芳基”代表由碳原子和一個(gè)或三個(gè)選自N、O和S的雜原子組成的穩(wěn)定的五或六元單環(huán)芳香環(huán)體系。雜芳基可以連接在導(dǎo)致形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的任一雜原子或碳原子上。雜芳基的實(shí)例包括但不限于吡啶基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、噻吩基、呋喃基、咪唑基、異噁唑基、噁唑基、吡唑基、吡咯基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并異噁唑基、苯并噁唑基、苯并吡唑基、吲哚基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基或喹啉基。優(yōu)選的雜芳基包括吡啶基、噻吩基、呋喃基和喹啉基。當(dāng)雜芳基被取代時(shí)，所述雜芳基可以帶有一個(gè)至三個(gè)獨(dú)立選自C1-C8烷基、取代的C1-C8烷基、鹵素、醛、烷基羰基、芳基、雜芳基、烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、硝基、羧基、烷基羧基，及羥基的取代基。
術(shù)語“芳烷氧基”是指用芳基取代的烷氧基(例如，芐氧基)。
文中所用術(shù)語“?；保徽撌菃为?dú)使用還是作為取代基的部分，是指通過除去羥基衍生自有機(jī)酸的具有2至6個(gè)碳原子(分支的或直鏈的)的有機(jī)基團(tuán)。
文中所用術(shù)語“Ac”，不論是單獨(dú)使用還是作為取代基的部分，是指乙?；?br> 術(shù)語“鹵素”應(yīng)包括碘、溴、氯及氟。
術(shù)語“取代的烷基羧基”、“取代的氨基”和“取代的氨基羰基”代表所述基團(tuán)的取代基帶有至少一個(gè)選自鹵素、烷基、取代烷基、芳基、烷氧基、氨基，及取代氨基的基團(tuán)。
無論當(dāng)術(shù)語“烷基”、“酰基”，或“芳基”或者其前綴詞根出現(xiàn)在取代基的名字中(例如，芳基烷基，二烷基氨基)時(shí)，它應(yīng)該解釋為包括上述對(duì)于“烷基”、“?；?，及“芳基”已給定的限制。指定的碳原子數(shù)(例如，C1-C6)應(yīng)該獨(dú)立指在烷基或環(huán)烷基部分的碳原子數(shù)或者指大的取代基中的烷基部分(其中烷基作為其前綴詞根出現(xiàn))。
分子中的任一取代基或在特定部分的變量的定義規(guī)定為獨(dú)立于其在分子中其他部位的定義。應(yīng)該理解在本發(fā)明化合物中的取代基或取代基類型可以由本領(lǐng)域中的技術(shù)人員選擇，以提供化學(xué)穩(wěn)定的及可以容易地通過本領(lǐng)域公知的技術(shù)以及文中提出的方法合成的化合物。
如文中所用，術(shù)語“組合物”是指包括包含規(guī)定量的特定成分的產(chǎn)物，以及由規(guī)定量的特定成分的組合直接或間接地產(chǎn)生的任何產(chǎn)物。
治療血管阻力增高的疾病的化合物的使用可以按照文中描述的方法確定。因而本發(fā)明提供對(duì)需要此治療的受試者治療血管阻力增高疾病的方法，該方法包括以有效治療血管阻力增高疾病的量的如本文所定義的任何化合物給藥。所述化合物可以通過任一常規(guī)的給藥方式給予患者，包括但不限于，靜脈、口服、皮下、肌肉、皮內(nèi)及非腸道給藥。
本發(fā)明也提供包含一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明的化合物及藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。
為了制備本發(fā)明的藥用組合物，將一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明的式I化合物或其鹽作為活性成分，按照常規(guī)的藥物制劑技術(shù)與藥用載體密切混合，所述載體可以根據(jù)給藥所需制劑的形式采取多種不同的形式，例如，口服或如肌注的非腸道給藥。在制備口服劑型的組合物時(shí)，可以使用任一常用的藥用介質(zhì)。因而，對(duì)于液體口服制劑，例如懸浮劑、酏劑及溶液劑，合適的載體及添加劑包括水、乙二醇、油、乙醇、調(diào)味劑、防腐劑、著色劑等等；對(duì)于固體口服制劑，例如，散劑、膠囊劑、囊片劑(caplets)、凝膠囊劑(gelcaps)和片劑，合適的載體和添加劑包括淀粉、糖、稀釋劑、成粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等等。因?yàn)槿菀捉o藥，片劑和膠囊劑代表最優(yōu)選的口服劑量單位形式，在此情況下顯然應(yīng)使用固體藥用載體。如果需要，片劑可用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)包糖衣或包腸衣。對(duì)于非腸道給藥，載體通常包括無菌水，可以包括其他成分，如通過這些成分以增加溶解性或者防腐性。可注射的懸浮液也可以制備，在此情況下可以使用適當(dāng)?shù)囊后w載體，懸浮劑等等。此處的藥用組合物包括，每劑量單位，例如，片劑、膠囊、散劑、注射劑、藥匙劑(teaspoonful)等，提供如上所述的傳遞有效劑量所必需的活性成分的量。此處的藥用組合物包括，每劑量單位，例如，片劑、膠囊、散劑、注射劑、栓劑、藥匙劑等，含有從約1mg至30mg/kg并可以給予從約1至30mg/kg/天(優(yōu)選3至15mg/kg/天)的劑量。然而，此劑量可以根據(jù)患者的需要、治療的病情嚴(yán)重程度以及使用的化合物而不同。即可以每日給藥，也可以使用周期后(post-periodic)維持劑量給藥。
優(yōu)選這些組合物為單位劑量形式如片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、無菌非腸道溶液劑或懸浮液、計(jì)量氣霧劑或液體噴霧劑、滴劑、安瓶、自動(dòng)注射劑裝置或栓劑；用于經(jīng)口、非腸道、鼻內(nèi)、舌下或直腸給藥，或者經(jīng)吸入或吹入給藥?；蛘撸M合物可以以適合一周一次或一月一次給藥的形式存在；例如，可以采用如癸酸鹽的活性化合物的不溶性鹽，以提供用于肌肉注射的長效包埋(depot)制劑。對(duì)于制備如片劑的固體組合物，可將主要活性成分與藥用載體混合，例如，常規(guī)制片成分如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨醇、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂、磷酸二鈣或樹膠，及其他藥用稀釋劑。例如水，以形成含有本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的均勻混合物的固體預(yù)制劑組合物。當(dāng)提及這些預(yù)制劑組合物為均勻的，是指活性成分平均地分散在整個(gè)組合物中，以至于該組合物可以容易地再分散成等量有效劑量形式諸如片劑、丸劑和膠囊劑。然后該固體預(yù)制劑組合物再分散成上述類型的含有從0.1至約500mg本發(fā)明活性成分的單位劑量形式。新組合物的片劑或丸劑可以包衣或另外地混合以提供給予延長作用的益處的劑量形式。例如，片劑或丸劑可以包括內(nèi)劑量和外劑量成分，后者為前者的包層形式。該兩種成分可以通過腸衣層分隔，該腸衣可以抵抗在胃中的崩解并允許內(nèi)層成分完整進(jìn)入十二指腸或延遲釋放。許多物質(zhì)可以用作此種腸衣層或包衣，這些物質(zhì)包括許多聚合酸(polymeric acids)與此類物質(zhì)如蟲漆、十六烷基醇及乙酸纖維素。
其中本發(fā)明的新組合物可以口服或經(jīng)注射結(jié)合給藥的液體形式包括含水溶液劑、適當(dāng)調(diào)味的糖漿劑、水性或油性懸浮液，及用食用油諸如棉花籽油、芝麻油、椰子油或花生油調(diào)味的乳劑，以及酏劑和類似的藥用溶媒。對(duì)于水性懸浮液合適的分散劑或懸浮劑，包括合成的或天然的樹膠諸如黃蓍膠、阿拉伯樹膠、藻酸鹽、右旋糖苷、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮或明膠。
當(dāng)制備根據(jù)本發(fā)明的化合物的方法產(chǎn)生立體異構(gòu)體混合物時(shí)，這些異構(gòu)體可以通過諸如制備性層析的常規(guī)技術(shù)分離。所述化合物可以制備成外消旋體的形式，或者單獨(dú)的對(duì)映體可以通過對(duì)映體特異性(enantiospecific)合成或通過拆分來制備。所述化合物可以例如，通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)拆分成其成分的對(duì)映體，如通過生成鹽形成的非對(duì)映異構(gòu)體對(duì)。所述化合物也可以通過生成非對(duì)映異構(gòu)體酯或酰胺，接著經(jīng)層析分離并除去手性輔助基團(tuán)來拆分?；蛘?，使用立體相關(guān)的HPLC柱可以拆分所述化合物。
在任一制備本發(fā)明化合物的方法中，必須和/或需要保護(hù)在所涉及的任一分子上敏感的或反應(yīng)的基團(tuán)。這可以通過常規(guī)保護(hù)基的方法完成，如在有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基(Protective Groups in OrganicChemistry)，ed，J.F.W.McOmie，Plenum出版社，1973年；知T.W.Greene&P.G.M.Wuts，有機(jī)合成中的保護(hù)基(Protective Groups in OrganicSynthesis)，第三版，John Wiley & Sons，1999年所描述的。使用本領(lǐng)域公知的方法，可以經(jīng)方便的后續(xù)步驟除去所述保護(hù)基。
本發(fā)明通過參考下述流程和實(shí)例應(yīng)該較好理解，但本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易理解這些僅是后文權(quán)利要求書中更完整描述的本發(fā)明的說明性實(shí)例。
流程1 如流程1所提出，其中R1a是R1而不是R1b、R1b是烷基-亞砜、芳基-亞砜、烷基-砜，或芳基-砜，和R1、R4、A及n如上所述，醛1a(可以容易地使用 作為原料，并按照在Chen等的美國專利號(hào)5,753,715中的流程1來制備，所述原料可從商業(yè)獲得，或可容易地用已知方法制得)于優(yōu)選0℃至室溫(rt)的溫度下，用氧化劑諸如在丙酮中的CrO3-H2SO4或在二甲基甲酰胺(DMF)中的氯鉻酸吡啶鎓或在二甲基亞砜(DMSO)和水中的NaClO2氧化得到相應(yīng)的酸1b。該酸用如(CF3CO)2O-CF3CO2H的酸酐于優(yōu)選0℃至室溫的溫度下環(huán)化得到酮1c。該酮的貝克曼(Beckman)重排經(jīng)肟1d接著優(yōu)選于室溫下經(jīng)在二氧六環(huán)中的SOCl2得到內(nèi)酰胺1e和1f?；蛘撸摲磻?yīng)可以用NaN3在CF3CO2H中進(jìn)行主要得到內(nèi)酰胺1e。內(nèi)酰胺1e和1f可以容易地經(jīng)硅膠柱層析分離。內(nèi)酰胺1e也可以經(jīng)手性HPLC柱或其他本領(lǐng)域公知的方法分離成對(duì)映體。內(nèi)酰胺1e或1f用試劑如氫化鋰鋁(LAH)在乙醚中，于優(yōu)選0℃至室溫的溫度下還原，分別得到胺1g和1h。其中R1a是烷硫基或芳硫基的胺1g和1h，可以用氧化劑如高碘酸鈉在諸如甲醇或乙醇的溶劑中，優(yōu)選于室溫至60℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)一步分別轉(zhuǎn)化成其中R1b是烷基-亞砜或芳基-亞砜的胺1i和1j。其中R1a是烷硫基或芳硫基的胺1g和1h，也可以用氧化劑如H2O2分別轉(zhuǎn)化成其中R1b是烷基-亞砜或芳基-亞砜的胺1i和1j。
流程2 如流程2所提出，其中R1a、R1b、R4，及A如上所述，胺2e至2h可以由2a和2b按照類似流程1的方法制備，2a和2b可從商業(yè)獲得，或可容易地用已知方法制得。
流程3 如流程3所提出，其中R1、R2、R3、R’、A，及n如上所述，用酰鹵或酸酐如酰氯(3a)在有機(jī)溶劑如四氫呋喃(THF)、CH2Cl2，或CHCl3中用有機(jī)堿如Et3N或無機(jī)堿如K2CO3于優(yōu)選0℃至室溫的溫度下處理胺1g、1h、1i，或1j，生成酰胺3b。同樣處理胺2e、2f、2g，或2h得到酰胺Ia。
另外，其中-R2-R3-是 或 和R’是4-硝基苯基(另外，可以具有一個(gè)或多個(gè)適當(dāng)?shù)娜〈?的化合物Ia和3b可以由胺1g、1h、1i、1j、2e、2f、2g，或2h與4-硝基苯甲酰氯，接著經(jīng)用如10％Pd/C的氫化還原或者用還原劑如SnCl2還原來制備。所得胺可以用合適的酸氯或異氰酸酯處理得到相應(yīng)的式I化合物。
流程4 如流程4所提出，其中Z3是烷基或取代烷基、Z4是羥基C2-8烷基、k’是2-4，及R1、R2、R3、Z1、Z2、A，及n如上所述，化合物3b用過量臭氧于優(yōu)選-78至-20℃的溫度下在有機(jī)溶劑諸如甲醇(MeOH)、CH2Cl2、乙酸乙酯(EtOAc)或CHCl3中處理。在同一反應(yīng)容器內(nèi)生成的臭氧化物可以用如甲基硫或三苯基膦的還原劑處理得到雙醛。這些中間體(不經(jīng)進(jìn)一步純化)使用如對(duì)甲苯磺酸或甲磺酸的有機(jī)酸于優(yōu)選0℃至室溫的溫度下環(huán)化得到相應(yīng)的醛Ib。用如NaBH4(在CH3OH或EtOH中)或NaBH(OAc)3的還原劑于優(yōu)選0℃至室溫的溫度下還原醛Ib得到相應(yīng)的醇Ic。用如CrO3-H2SO4或NaClO2-DMSO的氧化劑于優(yōu)選-20℃至室溫的溫度下氧化Ib得到相應(yīng)的酸Id。用胺與試劑如NaCNBH3在CH3OH和乙酸中于優(yōu)選0℃至室溫的溫度下對(duì)Ib進(jìn)行還原胺化得到胺Ie。用合適的磺酰氯如甲苯磺酰氯和三乙胺在如CH2Cl2的有機(jī)溶劑中處理醇Ic得到甲苯磺酸酯衍生物。用合適的試劑諸如二烷基或二芳基銅鋰或氫化銅在THF中與該甲苯磺酸酯衍生物反應(yīng)得到相應(yīng)的If化合物?；蛘撸煤线m的氰化物如NaCN或KCN與該甲苯磺酸酯衍生物反應(yīng)，接著氫解可以得到相應(yīng)的酸，該酸可以被如BH3-THF復(fù)合物的試劑于優(yōu)選-78至0℃的低溫下進(jìn)一步還原，得到相應(yīng)的醇Ig(重復(fù)同樣的步驟將進(jìn)一步延長烷基鏈)。醇Ig可以進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成Ih化合物。用合適的磺酰氯如對(duì)甲苯磺酰氯和三乙胺在如CH2Cl2的有機(jī)溶劑中處理醇Ig得到甲苯磺酸酯衍生物。使甲苯磺酸酯衍生物與適當(dāng)?shù)脑噭┤鏗NZ1Z2(已知化合物)反應(yīng)得到相應(yīng)的Ih化合物。用不同的胺與酸Id偶合產(chǎn)生相應(yīng)的酰胺衍生物Ii。酸Id在如H2SO4的酸與Z3OH存在下也可以轉(zhuǎn)化成Ij化合物，Z3OH可從商業(yè)獲得，或可容易地用已知方法制得。
另一方面，其中-R2-R3-是 或 和R’是4-硝基苯基的化合物Ib至Ij可以由胺1g、1h、1i、1j、2e、2f、2g，或2h與4-硝基苯甲酰氯經(jīng)如上所述的臭氧化和環(huán)化，接著經(jīng)用如10％Pd/C的氫化還原或用如SnCl2的還原劑還原來制備。所得胺可以用合適的酸氯或異氰酸酯處理得到相應(yīng)的式I化合物。
流程5 如流程5所提出，其中R1、R2、R3、R4、R5、A，及n如上所述，在有機(jī)溶劑如甲醇、乙醇或乙酸乙酯中，于室溫下，在如Pd/C的催化劑存在下，優(yōu)選于30-50psi用H2對(duì)酰胺Ik延長氫化得到Il。
流程6 如流程6所提出，其中R1、R2、R3、R4、R5、A，及n如上所述，用如BH3-THF的試劑在如THF的有機(jī)溶劑中，于優(yōu)選-78℃至室溫的溫度下對(duì)酰胺Ik硼氫化，接著經(jīng)H2O2-NaOH可以生成相應(yīng)的醇Im。用CrO3-H2SO4或CrO3-吡啶于優(yōu)選-20℃至室溫的溫度下氧化這些醇可以得到酮In。
本發(fā)明描述的治療血管阻力疾病的方法也可以使用包括任一本文中定義的化合物及藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物進(jìn)行。所述藥用組合物可以包含在約100mg至1000mg之間，優(yōu)選約100至500mg的所述化合物，并可以構(gòu)成任一用于所選給藥方式的合適的形式。載體包括必須的和惰性的藥用賦形劑，包括但不限于，粘合劑、懸浮劑、潤滑劑、調(diào)味劑、增甜劑、防腐劑、染色劑及糖衣。適合于口服給藥的組合物包括固體形式，如丸劑、片劑、囊片、膠囊(分別包括立即釋放、定時(shí)釋放及緩釋劑型)、顆粒劑，及粉劑，以及液體形式，諸如溶液劑、糖漿劑、酏劑、乳劑，及懸浮劑。用于非腸道給藥的形式包括無菌溶液劑、乳劑及懸浮液。
本發(fā)明化合物可以方便地以每日單劑量給藥，或者全部日劑量可以分成每日兩次、三次或四次的分劑量給藥。而且，本發(fā)明化合物可以經(jīng)局部使用合適的鼻內(nèi)裝置以鼻內(nèi)的形式給藥，或者本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)人員熟知的經(jīng)皮膚的皮膚貼劑形式給藥。由于經(jīng)皮膚釋放體系的形式給藥，給藥的劑量當(dāng)然應(yīng)該是在整個(gè)劑量方案范圍內(nèi)連續(xù)的而不是間歇的。
例如，對(duì)于口服給藥的片劑或膠囊劑形式，活性的藥物成分可以與口服的、非毒的藥學(xué)上可接受的惰性載體如乙醇、甘油，水等等相混合。此外，當(dāng)需要或必需時(shí)，合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑也可以摻入所述混合物中。合適的粘合劑包括但不限于，淀粉、明膠、天然糖如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜素、天然的和合成的樹膠諸如阿拉伯樹膠、黃蓍膠或油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括但不限于，淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠等等。
液體形式可以加入合適調(diào)味的懸浮劑或分散劑諸如合成的或天然的樹膠，例如黃芪膠、阿拉伯樹膠、甲基纖維素等等。對(duì)于非腸道給藥，需要無菌懸浮劑和溶液劑。當(dāng)需要靜脈給藥時(shí)使用通常含有合適的防腐劑的等滲制劑。
本發(fā)明化合物也可以以脂質(zhì)體釋放體系的形式給藥，諸如小的單室(unilamellar vesicles)型、大的單室型，及多室型。脂質(zhì)體可以由許多磷脂諸如膽固醇、硬脂酰胺或磷脂酰膽堿形成。
本發(fā)明化合物也可以通過使用單克隆抗體作為化合物分子偶合于其上的單一載體來釋放。本發(fā)明化合物也可以與作為靶向藥物載體的可溶性聚合物偶合。此種聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酰胺酚、聚羥乙基天冬氨酰胺酚，或者用棕櫚酰殘基取代的聚環(huán)氧乙烷(polyethyl eneoxide)聚賴氨酸。而且，本發(fā)明化合物可以與用于實(shí)現(xiàn)藥物的控制釋放的可生物降解的聚合物類，例如聚乙酸、聚ε-己內(nèi)酯、聚羥基丁酸(butyeric acid)、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯、以及交聯(lián)的或兩親的水凝膠的嵌段共聚物相偶合。
當(dāng)需要治療血管阻力疾病時(shí)，可以以任一前述組合物并根據(jù)所本領(lǐng)域已確立的劑量方案給予本發(fā)明化合物。
所述產(chǎn)物的日劑量可以在從每個(gè)成年人每日100至3000mg的寬范圍內(nèi)變化。對(duì)于口服給藥，所用組合物優(yōu)選以含有足以調(diào)節(jié)待治療患者癥狀的劑量的量的活性成分的片劑形式提供。藥物的有效量通常是以每日從約1mg至約30mg/kg體重的劑量水平提供。優(yōu)選范圍是每日從約3至約15mg/kg體重，更優(yōu)選每日從約5至約10mg/kg體重。所述化合物可以以每日1至2次的劑量方案給藥。
最佳劑量可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地確定，并將隨所用的具體化合物、給藥的方式、制劑的含量，以及病情的進(jìn)展而變化。此外，以待治療的具體患者有關(guān)的因素，包括患者的年齡、體重、飲食及給藥時(shí)間，將產(chǎn)生對(duì)調(diào)節(jié)劑量的需要。
下述實(shí)例是用來說明本發(fā)明但不對(duì)其加以限制。實(shí)施例13-芐基-3-羧甲基環(huán)己烯 在3小時(shí)內(nèi)，向NaH2PO4(55.3g)、NaClO2(36.3g)、DMSO(200mL)和水(375mL)的混合物中加入在DMSO(150mL)中3-芐基-3-甲酰甲基環(huán)己烯(57g)的溶液。加入之后，攪拌該混合物過夜并用乙醚(200mL)稀釋。將所得物用飽和的NaHCO3(3×100mL)提取。將合并的水層冷至0℃并用濃鹽酸酸化到PH＝1。將所得物用CH2Cl2(3×300mL)提取。干燥合并的有機(jī)層(Na2SO4)并真空除去溶劑。所得殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化得稠油狀標(biāo)題化合物(50g)。MS(MH+＝231)。實(shí)施例23-氧代-[5，5]-螺-[4，5]-苯并十一碳-2’-烯 于0℃、N2氣下，向在CH2Cl2(100mL)中的CF3CO2H(47.5g)和(CF3CO)2O(42.3g)的溶液中加入在CH2Cl2(5mL)中的3-芐基-3-羧甲基環(huán)己烯(46.35g)的溶液，并攪拌10分鐘?？蓪⑺没旌衔锛訜嶂潦覝夭⒃贁嚢?小時(shí)。將該混合物用飽和的K2CO3(40mL)小心處理，并分離有機(jī)層，將水層用乙醚(3×300mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，真空除去溶劑。將殘留物通過短的硅膠柱過濾并用(乙酸乙酯∶己烷1∶9)洗滌得稠的黃色油狀標(biāo)題化合物(42.7g)。MS(MH+＝213)。實(shí)施例33-肟基-[5，5]-螺-[4，5]-苯并十一碳-2’-烯 將在乙醇(25mL)中的3-氧代-[5，5]-螺-[4，5]-苯并十一碳-2’-烯(2.3g)、NH2OH∶HCl(1.24g)和吡啶(1.42g)的混合物加熱到45℃(浴溫)并攪拌4小時(shí)。真空除去大部分溶劑，并將所得殘留物用CH2Cl2(300mL)稀釋。將所得物用冷的1NHCl(2×50mL)和水(50mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)，真空除去溶劑得到固體，從CH2Cl2/己烷中結(jié)晶得到白色粉末狀的肟。MS(MH+＝228)。實(shí)施例4制備4-氮雜-3-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯和3-氮雜-4-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯的方法 于室溫、N2氣下，向在二氧六環(huán)中的3-肟基-[5，5]-螺-[4，5]-苯并十一碳-2’-烯(2.1g)的溶液中緩慢加入SOCl2(2.8g)并攪拌16小時(shí)。
將所得混合物倒入冰水(100mL)中并攪拌30分鐘，分離有機(jī)層，水層用乙醚(3×75mL)提取。干燥合并的有機(jī)層(Na2SO4)，并真空除去溶劑。殘留物經(jīng)硅膠(350g)柱層析純化。用乙酸乙酯∶己烷1∶1洗脫，得到灰白色粉末的4-氮雜-3-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(220mg)。MS(MH+＝228)。用乙酸乙酯洗脫，得到白色粉末的3-氮雜-4-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(1.2g)。MS(MH+＝228)。制備4-氮雜-3-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯的替代方法于55℃向3-氧代-[5，5]-螺-[4，5]-苯并十一碳-2’-烯(31g)和CF3CO2H(130mL)的混合物中分幾次加入NaN3(19g)并攪拌16小時(shí)?？梢詫⑺没旌衔锢渲潦覝夭⒄婵粘ゴ蟛糠秩軇Ｋ脷埩粑镉靡宜嵋阴?300mL)稀釋并小心倒入飽和的碳酸氫鈉(300mL)中。分離有機(jī)層，水層用乙酸乙酯(300mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。殘留物經(jīng)硅膠柱層析(850g，乙酸乙酯∶己烷3∶7)純化得到灰白色粉末的4-氮雜-3-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(23.5g)。MS(MH+＝228)。實(shí)施例54-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯 于室溫、N2氣下，向在乙醚(400mL)中的LAH(2.03g)的懸浮液中分3次加入4-氮雜-3-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(9.9g)并攪拌過夜。將混合物冷至0℃并小心加入飽和的K2CO3直到形成白色沉淀。所得混合物經(jīng)硅藻土墊過濾并用CH2Cl2(2×200mL)洗滌。真空濃縮合并的濾液得到稠的黃色油狀物(9.41g)。MS(MH+＝214)。實(shí)施例64-(4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物49) 于室溫、N2氣下，向在CH2Cl2(350mL)中的4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(8.5g)和Et3N的溶液中逐滴加入在CH2Cl2(50mL)中的4-硝基苯甲酰氯(7.2g)的溶液，將所得混合物攪拌16小時(shí)。將該混合物倒入冷的1N.NaOH(100mL)中，并將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl2(2×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層。真空除去溶劑，得到淡黃色固體的標(biāo)題化合物(12.5g)。NMR(CDCl3)1.98(m，2H)，2.72(Abq，J＝12Hz，2H)，3.23(m，2H，)，5.65(m，2H，烯屬質(zhì)子)，6.70-7.15(m，4H，芳族質(zhì)子)，7.30(d，J＝6Hz，2H)，8.15(d，J＝6Hz，2H)。實(shí)施例74-(4-硝基苯甲?；?-3′-(甲?；?-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯 在-78℃，用臭氧處理在二氯甲烷中的4-(4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯的溶液。過量的臭氧由氮?dú)饬鲙ё?，將所得混合物用二甲硫處理，接著加入TsOH-H2O?？梢詫⑺没旌衔锛訜嶂潦覝夭嚢?8小時(shí)。將混合物倒入冷的1N.NaOH(100mL)中并分離有機(jī)層及水層用二氯甲烷(2×100mL)提取。干燥合并的有機(jī)層(Na2SO4)并真空除去溶劑。油狀殘留物經(jīng)硅膠柱層析(300g，乙酸乙酯/己烷1∶1)純化，得到標(biāo)題化合物，為無色結(jié)晶(mp 90-93℃.NMR(CDCl3)3.45(s，2H，芐基的質(zhì)子)，5.83(bs，1H，烯屬質(zhì)子)，7.22(m，5H，芳族質(zhì)子)實(shí)施例84-(4-硝基苯甲?；?-3′-(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯 于0℃在1小時(shí)內(nèi)，向在水和丙酮中的CrO3和濃硫酸的溶液中加入在丙酮中的乙醛的溶液。加入之后，將混合物用水處理并將有機(jī)層分離。將水層用CH2Cl2(2×200mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。將殘留物重新溶解在甲醇中并用過量的三甲基甲硅烷基重氮甲烷處理。真空除去溶劑，殘留物經(jīng)硅膠柱層析(100g，乙酸乙酯/己烷(4∶6)純化，得到無色結(jié)晶3。mp.172-174℃；NMR(CDCl3)3.72和3.77(均為s，共3H，CH3O-)，6.42和6.71(均為s，共1H，烯屬質(zhì)子)。實(shí)施例94-(4-氨基苯甲酰基)-3′-(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯 將4-(4-硝基苯甲?；?-3′-(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯、濃鹽酸和10％Pd/C的混合物在50psi氫化3小時(shí)。將所得混合物經(jīng)硅藻土墊過濾并用CH2Cl2(250mL)洗滌。將合并的濾液真空濃縮，得到白色粉末的標(biāo)題化合物(270mg，24％)，mp 96-98℃為亮棕色粉末。MS(m+1)＝379。替代方法將在乙醇中的4-(4-硝基苯甲酰基)-3′-(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯和SnCl2的混合物在氮?dú)庀录訜嶂粱亓?2小時(shí)?？蓪⒒旌衔锢渲潦覝夭⒓尤腼柡偷奶妓釟溻c。將所得混合物經(jīng)硅藻土墊過濾并用CH2Cl2分次洗滌。將合并的濾液真空濃縮，得到標(biāo)題化合物。MS(m+1)＝359。實(shí)施例104-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3′(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯 在0℃和氮?dú)庀?，?5分鐘內(nèi)，向在CH2Cl2中的苯胺(實(shí)施例9)和Et3N的溶液中加入在CH2Cl2中的2-苯基苯甲酰氯的溶液。加入之后，可將混合物加熱至室溫并再攪拌1小時(shí)。將混合物倒入冷的1N.NaOH(100mL)中。將有機(jī)層分離及水層用CH2Cl2(2×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。油狀殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化。NMR(CDCl3)3.20(Abq，J＝8Hz，2H)s，5.63(s，1H，烯屬質(zhì)子)，6.61(bs，1H，NH)。mp 90-92℃。MS(MH+＝540)實(shí)施例114-(2-苯基苯甲酰基-4-氨基苯甲?；?-3′-(羧基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物4) 于室溫、氮?dú)庀?，將所述?實(shí)施例10)、甲醇(150mL)和1N NaOH(50mL)的混合物攪拌16小時(shí)。真空除去大部分甲醇，將殘留物用水和乙醚稀釋。將水層分離并將有機(jī)層用0.5NaOH(50mL)提取。將合并的水層冷至0℃并用濃鹽酸酸化至PH＝1。將所得物用CH2Cl2(3×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑，得到灰白色粉末的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝543)。實(shí)施例124-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3′-[2-(N，N-二甲基氨基乙基羰基)]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物9) 于室溫下，將在CH2Cl2中的所述酸(實(shí)施例11)和SOCl2的混合物攪拌16小時(shí)。將過量的SOCl2和溶劑真空除去并將殘留物溶解在甲苯中并將溶劑真空除去。將所得殘留物再重新溶解于CH2Cl2中并在氮?dú)夂褪覝叵录尤氲皆贑H2Cl2中的N，N-二甲基氨基乙基胺和三乙胺的溶液中，并攪拌4小時(shí)。將所得混合物用CH2Cl2和1N NaOH(100mL)處理。將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl2(2×50mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。油狀殘留物經(jīng)硅膠柱層析(400g，乙酸乙酯∶甲醇∶三乙胺100∶10∶1)純化，得到灰白色粉末的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝613)。實(shí)施例134-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物66) 按照實(shí)施例6的方法進(jìn)行，但是用4-(2-苯基苯甲酰胺基)苯甲酰氯替代4-硝基苯甲酰氯，得到為無色固體的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝513)。實(shí)施例144-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲酰基)-3′-(甲?；?-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯 按照實(shí)施例7的方法進(jìn)行，但是用4-(4-苯基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯替代4-(4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯。，得到為無色固體的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝527)。實(shí)施例154-(2-苯基苯甲酰基-4-氨基苯甲?；?-3′-(羥甲基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物1) 于室溫、氮?dú)庀拢蛟贑H3OH中的4-(2-苯基苯甲酰基-4-氨基苯甲?；?-3-(甲酰基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(實(shí)施例14)的溶液中一次性加入全部NaBH4并攪拌1小時(shí)。將所得混合物用1N NaOH(50mL)處理并攪拌30分鐘。將大部分CH3OH真空除去，殘留物用水和CH2Cl2稀釋。將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl2(2×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑，得到白色粉末的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝529)。實(shí)施例164-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3′-(甲基氨基甲基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物3) 于室溫、氮?dú)庀?，向在CH3OH(5mL)中的4-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3′-(甲酰基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(31mg，實(shí)施例14)、CH3NH2(40％水溶液，0.3mL)和醋酸(0.5mL)的溶液中一次性加入全部NaCNBH3(21mg)并攪拌2小時(shí)。將揮發(fā)性物質(zhì)真空除去并將殘留物用1N NaOH(30mL)和CH2Cl2(50mL)處理。將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl(2×10mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空濃縮，得到淡黃色油狀的標(biāo)題化合物(30mg)。MS(MH+＝542)。將所得油轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽，為白色粉末。實(shí)施例174-(2-苯基苯甲酰基-4-氨基苯甲?；?-3′-(N-甲基-N-乙酰基氨基甲基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物5) 于室溫、氮?dú)庀?，向在CH2Cl2(5mL)中的所述胺(實(shí)施例16)(10mg)和三乙基胺(50mg)的溶液中加入乙酸酐(35mg)并攪拌5小時(shí)。將大部分溶劑真空除去，殘留物經(jīng)硅膠柱層析(8g，乙酸乙酯/己烷90∶10)純化，得到白色粉末的標(biāo)題化合物(9mg)。MS(MH+＝584)。實(shí)施例184-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲酰基)-3′-(羧基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物4) 以類似實(shí)施例10和實(shí)施例11的方法，用4-(4-氨基苯甲?；?-3′-(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(實(shí)施例9的標(biāo)題化合物)作為起始化合物，得到白色粉末的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝543)。實(shí)施例194-(2-氟苯甲?；?4-氨基苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物101) 除用4-(2-氟苯甲酰胺基)苯甲酰氯替代4-硝基苯甲酰氯外，按照實(shí)施例6的方法，得到白色粉末的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝455)。實(shí)施例204-(2-氟苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3′-(羧基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物20)于0℃、氮?dú)庀?，?5分鐘時(shí)間內(nèi)，向4-(4-氨基苯甲?；?-3′-(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(實(shí)施例9)的溶液中加入在CH2Cl2中的Et3N和2-氟苯甲酰氯的溶液。加入之后，可以將該混合物加熱至室溫并再攪拌1小時(shí)。將混合物倒入冷的1N NaOH(100mL)中。將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl2(2×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。所得油狀殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，得到4-(2-氟苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3′-(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯。
以類似于實(shí)施例11的方法，于室溫、氮?dú)庀拢瑢?-(2-氟苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3′-(甲酯基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯的混合物在甲醇(150mL)和1N NaOH(50mL)中攪拌16小時(shí)。將大部分甲醇真空除去并將殘留物用水和醚稀釋。將水層分離及有機(jī)層用0.5N NaOH(50mL)提取。將合并的水層冷至0℃并用濃鹽酸酸化至PH＝1。將所得物用CH2Cl2(3×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑，得到灰白色粉末的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝485)。實(shí)施例214-(2-氟苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3′-[2-(N，N-二甲基氨基乙基羰基)]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物16) 除實(shí)施例11的酸由實(shí)施例20的4-(2-氟苯甲酰基-4-氨基苯甲?；?-3′-(羧基)-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯取代外，按照實(shí)施例12的方法進(jìn)行，得到白色粉末的標(biāo)題化合物。MS(MH+＝555)。實(shí)施例224-氮雜-2’-羥基-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳烯 于-78℃、氮?dú)庀?，向在THF(100mL)中的3-氧代-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(1.0g)的溶液中加入在THF(1M，4.3mL)中BH3-THF的溶液。加入之后，將該混合物升溫至室溫并攪拌16小時(shí)。將所得混合物冷卻至0℃并加入6N NaOH(10mL)，接著加入30％H2O2(5mL)并攪拌3小時(shí)。將大部分THF真空除去并將所得殘留物用緩沖液(PH＝4，150mL)處理。將所得物用CH2Cl2(1×250mL，2×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。所得油狀殘留物經(jīng)硅膠柱層析(300g，乙酸乙酯/己烷3∶7)純化，得到稠的黃色油狀的標(biāo)題化合物(510mg)(兩個(gè)異構(gòu)體)。MS(MH+＝232)。實(shí)施例234-氮雜-2’-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳烯 于0℃，向在水(3mL)和丙酮(25mL)中的CrO3(350mg)、濃硫酸(0.5mL)的溶液中加入4-氮雜-2’-羥基-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(500mg)的溶液并攪拌1小時(shí)。將所得混合物用水(25mL)稀釋并將大部分丙酮真空除去。用飽和的NaHCO3將所得混合物堿化。將所得物用CH2Cl2(3×100mL)提取并干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層。真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為稠的淡黃色油狀物(315mg)。MS(MH+＝230)。實(shí)施例244-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲酰基)-4-氮雜-2’-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳烯(化合物30)于室溫、氮?dú)庀?，?-氮雜-2’-氧代-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳烯(實(shí)施例23)的溶液中逐滴加入在CH2Cl2中的Et3N和在CH2Cl2(50mL)中的4-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲酰基)氯并將所得混合物攪拌16小時(shí)。將混合物倒入冷的1N NaOH(100mL)中并將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl2(2×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層。真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體。得到標(biāo)題化合物，為無色固體。MS(MH+＝529)。實(shí)施例254-(4-甲酯基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物54) 除用4-甲酯基苯甲酰氯取代4-硝基苯甲酰氯外，按照實(shí)施例6的方法進(jìn)行，得到標(biāo)題化合物，為無色固體。MS(MH+＝376)。實(shí)施例264-(4-羧基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物65) 將4-(4-甲酯基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(52mg)、lN NaOH(1mL)和THF(9mL)的混合物加熱至回流16小時(shí)。將所得混合物冷至室溫及將大部分THF真空除去。用濃鹽酸將所得混合物酸化至PH＝1，然后用CH2Cl2(3×10mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末(45mg)。MS(MH+＝362)。實(shí)施例274-(4-苯胺基羰基苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物27) 由4-(4-羧基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(45mg)和SOCl2(91mg)制備4-(4-氯代羰基(苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯。用CH2Cl2(30mL)和Et3N(100mg)處理新鮮制備的酸氯，接著加入苯胺(35mg)。將所得混合物攪拌2小時(shí)及真空除去溶劑。所得殘留物經(jīng)硅膠柱層析(30g，乙酸乙酯/己烷1∶4～1∶3)純化，得到標(biāo)題化合物，為淺棕色固體(53mg)。MS(MH+＝437)。實(shí)施例283-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯 除4-氮雜-3-氧代[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯由3-氮雜-4-氧代[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯取代外，按照實(shí)施例5的方法進(jìn)行，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色油狀物。MS(MH+＝214)。實(shí)施例294-(2-氟苯甲?；?4-氨基苯甲酰基)-3-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物128) 除4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯由3-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯取代外，按照實(shí)施例19的方法，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末。MS(MH+＝455)。實(shí)施例304-(2-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯 按照實(shí)施例6的方法進(jìn)行，但4-硝基苯甲酰氯由2-甲氧基-4-硝基苯甲酰氯取代，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體。MS(MH+)＝393。實(shí)施例314-(4-乙氧羰基(carboyl)氧基-3，5-二甲氧基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物206) 按照實(shí)施例6的方法進(jìn)行，但4-硝基苯甲酰氯由4-乙氧羰基氧基-3，5-二甲氧基苯甲酰氯取代。得到標(biāo)題化合物，為黃色固體。MS(MH+)＝466。實(shí)施例324-(3-甲氧基-4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯 按照實(shí)施例6的方法進(jìn)行，但是4-硝基苯甲酰氯由3-甲氧基-4-硝基苯甲酰氯取代。得到標(biāo)題化合物，為黃色固體。MS(MH+)＝393。實(shí)施例334-(4-氨基-3-甲氧基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯
在氮?dú)庀?，將在乙醇中?-(3-甲氧基-4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯和SnCl2的混合物加熱至回流12小時(shí)。將所得混合物冷至室溫，加入飽和的NaHCO3。將所得物經(jīng)硅藻土墊過濾并分次用CH2Cl2洗滌。真空濃縮合并的濾液，得到標(biāo)題化合物。MS(MH+)＝363。實(shí)施例344-(3-甲氧基-4-(吡咯-1-基-3-甲醛)苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物167) 將在醋酸(5mL)中的4-(4-氨基-3-甲氧基苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(120mg，0.33mmol)和2，5-二甲氧基-3-四氫呋喃甲醛(300mg)的溶液回流2小時(shí)。將所得溶液冷卻并在高真空下用甲苯作為共沸劑將溶劑除去。所得殘留物經(jīng)硅膠層析，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體。MS(M+)＝441。實(shí)施例354-(3-甲氧基-4-(3-羥基甲基吡咯-1-基)苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物178)
在室溫下，向在甲醇(25mL)中的4-(3-甲氧基-4-(吡咯-1-基-3-甲醛)苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(100mg，0.23mmol)的溶液中加入NaBH4。將該混合物攪拌3小時(shí)。將所得粗品用1N NaOH(20mL)處理并攪拌15分鐘，然后用水和CH2Cl2稀釋。將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl2(2×50mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末。MS(MH+)＝443。實(shí)施例364-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)-4-氮雜-3’-甲?；?[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯 于-78℃，用臭氧處理在CH2Cl2中的4-(3-甲氧基-4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯的溶液。將過量的臭氧用氮?dú)饬鞒ゲ⑺没旌衔镉枚琢蛱幚恚又尤爰妆交撬嵋凰衔?TsOH-H2O)。將所得混合物加熱至室溫并攪拌48小時(shí)。將混合物倒入冷的1N NaOH(100mL)中，將有機(jī)層分離。水層用二氯甲烷(2×100mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。所得油狀殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色結(jié)晶。MS(MH+)＝407。實(shí)施例374-(3-甲氧基-4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-3’-羧基-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯 于0℃，在1小時(shí)期間，向在水和丙酮中的CrO3，濃硫酸的溶液中加入在丙酮中4-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)-4-氮雜-3’-甲?；?[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯的溶液。加畢，將所得混合物用水處理并將有機(jī)層分離。水層用CH2Cl2(2×200mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物。MS(M+1)＝423。實(shí)施例384-(3-甲氧基-4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物186) 于室溫下攪拌在CH2Cl2中的4-(3-甲氧基-4-硝基苯甲酰基)-4-氮雜-3’-羧基-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(500mg，1.2mmol)。加入N，N-二甲基乙二胺(417mg)和三乙胺(396mg)，然后加入1-羥基苯并三唑(350mg)。將該混合物冷至0℃并一次性加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(270mg)。在室溫?cái)嚢杷没旌衔?小時(shí)。將混合物冷至0℃，加入0.5N HCl水溶液(15mL)并將混合物攪拌30分鐘。將有機(jī)層分離及用NaCl水溶液洗滌，水層用CH2Cl2(3×200mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。所得油狀殘留物經(jīng)硅膠層析，得到標(biāo)題化合物，為灰白色粉末。MS(MH+)＝493。實(shí)施例394-(4-氨基-3-甲氧基苯甲?；?-4-氮雜-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物187) 在氮?dú)庀?，將在乙醇中?-(3-甲氧基-4-硝基苯甲?；?-4-氮雜-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯和SnCl2的混合物加熱至回流12小時(shí)。將所得混合物冷至室溫并加入飽和的碳酸氫鈉水溶液。將所得物經(jīng)硅藻土墊過濾及用CH2Cl2分次洗滌。將合并的濾液真空濃縮，得到標(biāo)題化合物。MS(MH+)＝463。實(shí)施例404-[3-甲氧基-4-(吡咯-1-基-3-甲醛)苯甲?；鵠-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物189) 將在醋酸(5mL)中的4-(4-氨基-3-甲氧基苯甲?；?-4-氮雜-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(120mg，0.331mmol)和2，5-二甲氧基-3-四氫呋喃甲醛(300mg)的溶液回流2小時(shí)。將所得溶液冷卻并在高真空下以甲苯為共沸劑除去溶劑。所得殘留物經(jīng)硅膠層析，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體。MS(M+)＝541。實(shí)施例414-[3-甲氧基-4-(3-羥基甲基吡咯-1-基)苯甲?；鵠-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(化合物190) 在室溫下，將4-[3-甲氧基-4-(吡咯-1-基-3-甲醛)苯甲?；鵠-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯(75mg，0.139mmol)懸浮于25mL甲醇中并加入10mg的NaBH4。在氮?dú)庀拢瑢⑺没旌衔飻嚢?小時(shí)。將混合物用20mL的1N NaOH處理并攪拌15分鐘，然后用水和CH2Cl2稀釋。將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl2(2×50mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末。MS(MH+)＝543。實(shí)施例424-[3-甲氧基-4-(3-羥基甲基吡咯-1-基)苯甲?；鵠-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯的對(duì)映體的分離 式(C 197)式(C 198)通過手性的HPLC分離外消旋的4-[3-甲氧基-4-(3-羥基甲基吡咯-1-基)苯甲?；鵠-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯。每個(gè)對(duì)映體，得到相同的MS(MH+)＝543。實(shí)施例434-(4-羥基苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯 按照實(shí)施例6的方法進(jìn)行，但是4-硝基苯甲酰氯由4-乙酰氧基苯甲酰氯取代。得到標(biāo)題化合物。為白色固體。MS(MH+)＝334。實(shí)施例444-(4-(哌啶-4-基氧基)苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯 向在THF(100mL)中的4-羥基-1-哌啶羧酸叔丁基酯(310mg，1.5mmol)和4-(4-羥基苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(410mg，0.12mmol)的溶液中加入偶氮二羧酸二乙基酯(322mg，1.9mmol)并繼續(xù)攪拌30分鐘。加入三苯基膦(483mg)并繼續(xù)攪拌6小時(shí)。所得粗產(chǎn)品用水(100mL)處理，用乙酸乙酯稀釋。將有機(jī)層分離，水層用CH2Cl2(2×50mL)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層并真空除去溶劑。所得濃縮的樣品用CF3COOH/CH2Cl2(1∶10)處理并攪拌4小時(shí)。真空除去溶劑。所得混合物用CH2Cl2稀釋并用NaHCO3洗滌，干燥(Na2SO4)有機(jī)層并真空濃縮。所得樣品經(jīng)硅膠層析純化，得到標(biāo)題化合物。MS(M+1)＝417。實(shí)施例454-(4-(N-乙?；哙?4-基氧基)苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物224) 于室溫、氮?dú)庀?，向在CH2Cl2(10mL)中的4-(4-(哌啶-4-基氧基)苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(40mg)和三乙胺(20mg)的溶液中加入乙酸酐(35mg)。將所得混合物攪拌5小時(shí)。將大部分溶劑真空除去且所得殘留物經(jīng)硅膠層析，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末。MS(MH+)＝459。實(shí)施例464-(3-氟-4-(吡唑-1-基)苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物156) 將4-(3，4-二氟苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(200mg，0.57mmol)溶于THF(85mL)中，加入氫化鈉(58mg，60％在油中，0.85mmol)和吡唑(91.8mg，1.1mmol)并將該混合物加熱至50℃16小時(shí)。將該溶液冷卻并用10mL飽和的氯化銨水溶液處理。用乙酸乙酯稀釋所得混合物并用水(3x)洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)并真空濃縮，得到黑棕色固體。經(jīng)硅膠層析，得到標(biāo)題化合物。MS(MH+)＝402。實(shí)施例474-(3-氟-4-(哌啶-4-基氧基)苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯 將4-(3，4-二氟苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(200mg，0.57mmol)溶于THF(85mL)中，加入氫化鈉(58mg，60％在油中，0.85mmol)，接著加入4-羥基-1-哌啶羧酸叔丁基酯，在80℃，將該混合物攪拌16小時(shí)。將該溶液冷卻并用10mL飽和的氯化銨水溶液處理。用乙酸乙酯稀釋混合物并用水(2x)洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)并真空濃縮，得到黃色固體。所得樣品用CF3COOH/CH2Cl2(1∶10)處理并攪拌4小時(shí)。真空除去溶劑。所得混合物用CH2Cl2稀釋并用NaHCO3洗滌，干燥(Na2SO4)有機(jī)層并真空濃縮。所得樣品經(jīng)硅膠層析純化，得到標(biāo)題化合物。MS(MH+)＝435。實(shí)施例484-(3-氟-4-(N-乙?；哙?4-基氧基)苯甲酰基)-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯(化合物168) 除用4-(3-氟-4-(哌啶-4-基氧基)苯甲?；?-4-氮雜-[6，5]-螺-[5，6]-苯并十二碳-2’-烯作為起始原料外，按照實(shí)施例45的方法進(jìn)行。，得到標(biāo)題化合物，為白色粉末。MS(MH+)＝477。實(shí)施例49(A)體外結(jié)合分析分析緩沖液是50mM Tris-Cl、5mM MgCl2、含有5μg/ml的抑肽酶、亮抑酶肽、胃蛋白酶抑制劑、50μg/ml的桿菌肽，及1mM Pefabloc的0.1％BSA(pH 7.5)。H3血管升壓素是3H-精氨酸-8-血管升壓素(68.5Ci/mmol，分析中最終濃度是0.65-0.75nM)。向96孔圓底聚丙烯板的孔內(nèi)加入緩沖液、試驗(yàn)化合物、膜(含有人的V2受體)，及H3血管升壓素。將該反應(yīng)板置于室溫一小時(shí)。將樣品通過Unifilter GF/C板(用0.3聚乙烯亞胺預(yù)浸泡)過濾。該板用含有0.05％Tween 20的冷的生理鹽水沖洗5次。干燥后，將該過濾板底部封住并向每個(gè)過濾器加入0.025ml的Microscint-20。將該過濾板頂部封住，并對(duì)該板計(jì)數(shù)。通過向這些孔中加入1.25μM精氨酸-8-血管升壓素測(cè)定非特異性結(jié)合。％抑制率如下計(jì)算 (B)V1a血管升壓素受體功能活性V1a受體是G-蛋白偶合受體，它通過激活作用引發(fā)增加細(xì)胞內(nèi)鈣的轉(zhuǎn)移。為評(píng)價(jià)化合物的V1a受體功能活性的，用人的V1a受體轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞(V1a-HEK細(xì)胞)。使HEK-293細(xì)胞在補(bǔ)充有10％FBS和谷氨酰胺的DMEM(Dulbecco’s改良的Eagle培養(yǎng)基)中生長。HEK-細(xì)胞經(jīng)兩周的胰蛋白酶化作用并以每孔33000個(gè)細(xì)胞接種至96孔板上。使用來自Life Technologies的DMRIE-C試劑，用人的V1a受體DNA轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞。通過選擇在含有遺傳霉素的培養(yǎng)基中生長的細(xì)胞來產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系。在Packard Clear-View black 96孔板中生長4-6天后，使V1a-HEK細(xì)胞負(fù)載鈣-敏感性熒光染料，F(xiàn)LUO-3AM。使用FLIPR(熒光計(jì)成像板讀數(shù)儀，Molecular Devices，Sunnyvale，CA)對(duì)細(xì)胞熒光的變化進(jìn)行定量。首先將試驗(yàn)化合物加至上述細(xì)胞中，接著熒光測(cè)定產(chǎn)生的變化以確定受體的激動(dòng)活性。五分鐘后用血管升壓素刺激該細(xì)胞以檢驗(yàn)化合物的拮抗活性。受體拮抗劑抑制血管升壓素促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的熒光增加的活性。計(jì)算IC50值。
下述表I至VI提出本發(fā)明的一些化合物的血管升壓素受體結(jié)合的數(shù)據(jù)和V1a血管升壓素受體的功能活性。
表I 1對(duì)映體(未知(pending)絕對(duì)立體化學(xué)的確定)
表II
表III
1對(duì)映體(未知絕對(duì)立體化學(xué)的確定)表IV
表V

表VI 實(shí)施例50V2血管升壓素受體的功能活性V2受體也是一種G-蛋白偶合的受體，當(dāng)其激活時(shí)誘導(dǎo)增加cAMP代謝。通過測(cè)定在表達(dá)人的V2受體(V2-HEK細(xì)胞)的轉(zhuǎn)染的HEK-293細(xì)胞中c-AMP的聚集來確定對(duì)V2受體的拮抗。檢驗(yàn)化合物阻斷血管升壓素對(duì)cAMP聚集的刺激作用的活性。通過使用NEN閃式板(flashplate)的放射免疫分析測(cè)定細(xì)胞中的cAMP含量。實(shí)施例51在大鼠中血管升壓素-誘導(dǎo)的高血壓的逆轉(zhuǎn)化合物的抗高血壓活性可以使用血管升壓素-誘導(dǎo)的高血壓的麻醉模型評(píng)價(jià)。體重在350至450g之間的正常血壓的雄性Long Evans大鼠可以用戊巴比妥(35mg/kg，ip)麻醉，并在整個(gè)過程中以10mg/kg/hr的ip輸注來維持。可以以30ng/kg/min，iv輸注精氨酸血管升壓素(AVP)，以誘導(dǎo)穩(wěn)定的高血壓狀態(tài)(平均動(dòng)脈血壓增加約50mmHg)。本發(fā)明化合物可以按照升高的劑量的方式給藥并可記錄平均動(dòng)脈血壓的最大降低?？梢詮拿總€(gè)動(dòng)物的劑量-反應(yīng)關(guān)系的線性部分確定ED50值。
雖然前述說明書通過提供為了說明目的的實(shí)施例來講授本發(fā)明的原則，但是應(yīng)該理解本發(fā)明的實(shí)施包括在下述權(quán)利要求及其相同內(nèi)容范圍內(nèi)的全部的通常的變化、應(yīng)用和/或修改。
權(quán)利要求
1.一種式(I)化合物或其光學(xué)異構(gòu)體、對(duì)映體、非對(duì)映異構(gòu)體、外消旋體，或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1是一個(gè)至三個(gè)獨(dú)立選自氫、鹵素、氨基、取代氨基、羥基、烷氧基、苯基、取代苯基、烷硫基、芳硫基、烷基-亞砜、芳基-亞砜、烷基-砜，及芳基-砜的部分；-R2-R3-是， 或 其中R’選自烷基、取代烷基、苯基、取代苯基、雜芳基、取代雜芳基，及-Bp-G-Eq-W，其中(a) B選自(CH2)m，NH和O；(b) G選自芳基、取代芳基、雜芳基，及取代雜芳基；(c) E是O、S、NH、(CH2)iN(R”)CO或(CH2)iCONR”，其中R”選自氫、烷基，及取代烷基；(d) W是一個(gè)至三個(gè)獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、氨基、取代氨基、烷硫基苯基、烷基-亞砜苯基、芳基、取代芳基、雜芳基及取代雜芳基的部分；(e) P獨(dú)立為0或1；(f) q獨(dú)立為0或1；(g) m獨(dú)立為1、2或3；及(h) i獨(dú)立為0、1、2或3；R4是一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、苯基，及取代苯基的基團(tuán)；R5選自氫、烷基、取代烷基、醛、羧基、烷氧基羰基、取代烷氧基羰基、-(CH2)kNZ1Z2和-CONZ1Z2，其中k是1-4的整數(shù)，及Z1和Z2獨(dú)立選自氫、烷基、取代烷基、雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、氨基羰基，及取代氨基羰基，或者N、Z1和Z2一起形成雜環(huán)基、取代雜環(huán)基、雜芳基，或取代雜芳基；a代表單鍵或雙鍵，條件是當(dāng)R1是碘、溴、烷硫基、芳硫基、烷基-砜、或芳基-砜時(shí)，a是雙鍵；A選自芳基、萘基和雜芳基；X選自CH、CH2、CHOH，和C＝O；及n是1、2，或3。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中A是苯基或取代苯基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中-R2-R3-是。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中a是雙鍵。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R’是-Bp-G-Eq-W或是獨(dú)立由一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代的苯基，所述取代基團(tuán)選自烷基、取代烷基、烷氧基、硝基、氨基、任選由選自烷基、取代烷基、醛、烷基羰基、羧基、烷基羧基、烷氧基羰基，及-NZ1Z2的基團(tuán)取代的 任選由烷基或取代烷基取代的 任選由烷基或取代烷基取代的 -O(CO)O-烷基、羥基、鹵代基、烷氧基羰基、用任選取代的烷基或烷基羰基任選取代的-O-雜環(huán)基，及-NZ1Z2，其中Z1和Z2如權(quán)利要求1所定義。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中(a)p是0和q是1；(b)G是苯基或取代苯基；(c)E是NHCO；及(d)W是苯基或取代苯基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R5是-CONZ1Z2，其中Z1和Z2如權(quán)利要求1所定義。
8.權(quán)利要求2的化合物，其中R5是-CONZ1Z2，其中Z1和Z2如權(quán)利要求1所定義。
9.權(quán)利要求2的化合物，其中X選自CH2、CHOH，和C＝O。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中-R2-R3-是，。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R1是氫；R4是氫；R5是氫；R’是取代的苯基或-Bp-G-Eq-W，其中(a)W是苯基或取代苯基；(b)E是NHCO；及(c)p是0。
12.權(quán)利要求2的化合物，其中n是1或2。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中n是1及a是雙鍵。
14.權(quán)利要求1的化合物，它為(S)-4-(2-氟苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3’-(2-(N，N-二甲基氨基乙基氨基羰基))-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯。
15.權(quán)利要求1的化合物，它為(R)-4-(2-氟苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3’-(2-(N，N-二甲基氨基乙基氨基羰基))-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯。
16.權(quán)利要求1的化合物，它為(S)-4-(2-苯基苯甲酰基-4-氨基苯甲?；?-3’-(2-(N，N-二甲基氨基乙基氨基羰基))-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯。
17.權(quán)利要求1的化合物，它為(R)-4-(2-苯基苯甲?；?4-氨基苯甲?；?-3’-(2-(N，N-二甲基氨基乙基氨基羰基))-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯。
18.權(quán)利要求1的化合物，它為4-[3-甲氧基-4-(3-羥甲基吡咯-1-基)苯甲?；鵠-3’-[2-(N，N-二甲基氨基)乙基甲酰胺基]-4-氮雜-[6，4]-螺-[5，6]-苯并十一碳-2’-烯。
19.一種包括根據(jù)權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。
20.一種治療患有與血管升壓素受體活性有關(guān)的疾病患者的方法，它包括給予患者治療有效量的權(quán)利要求1定義的式I化合物。
21.一種抑制患者的與血管升壓素受體活性有關(guān)的疾病發(fā)作的方法，它包括給予患者預(yù)防有效量的權(quán)利要求1定義的式I化合物。
22.權(quán)利要求19或20的方法，其中所述疾病選自內(nèi)耳疾病、高血壓、充血性心力衰竭、心機(jī)能不全、冠狀血管痙攣、心局部缺血、肝硬變、腎血管痙攣、腎衰竭、大腦水腫及局部缺血、中風(fēng)、血栓形成、水潴留、攻擊行為、強(qiáng)迫觀念與行為疾病、痛經(jīng)、腎病綜合征，和中樞神經(jīng)損傷。
23.權(quán)利要求21的方法，其中所述疾病是充血性心力衰竭或心機(jī)能不全。
24.一種制備藥用組合物的方法，它包括將任何根據(jù)權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體混合。
25.一種選自以下結(jié)構(gòu)式的中間體 其中R1、R4、R5、A和n如權(quán)利要求1所定義。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I的非肽取代的苯并氮雜，其中A、X、n、R
文檔編號(hào)A61P27/16GK1449386SQ01814927
公開日2003年10月15日 申請(qǐng)日期2001年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月5日
發(fā)明者R·H·陳, M·A·向 申請(qǐng)人:奧索-麥克尼爾藥品公司