專(zhuān)利名稱(chēng)：嘧啶衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及嘧啶衍生物、它們的制備方法、含有它們的藥物組合物和它們?cè)卺t(yī)藥中的用途。
最近已經(jīng)公開(kāi)環(huán)加氧酶存在兩種同種型COX-1和COX-2。COX-1相當(dāng)于最初鑒別的組成型酶，而COX-2可被大量藥物迅速和容易地誘導(dǎo)，包括促細(xì)胞分裂劑、內(nèi)毒素、激素、細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子。因COX的作用而產(chǎn)生的前列腺素既具有生理作用，又具有病理作用。普遍認(rèn)為，COX-1是產(chǎn)生一些重要生理功能的主要原因，例如胃腸完整性和腎血流的維持。相反，人們認(rèn)為可誘導(dǎo)型COX-2是主要決定著前列腺素的病理作用，其中酶的迅速誘導(dǎo)使藥物發(fā)生反應(yīng)，例如炎性藥、激素、生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子。選擇性COX-2抑制劑因此將具有消炎、退熱和鎮(zhèn)痛性質(zhì)，而沒(méi)有潛在的與抑制COX-1有關(guān)的副作用。我們現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)一組新穎的化合物，它們是強(qiáng)效的選擇性COX-2抑制劑。
本發(fā)明因而提供式(I)化合物 及其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R1和R2獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6炔基、C3-10環(huán)烷基C0-6烷基或C4-12橋連的環(huán)烷烴；和R3是C1-6烷基或NH2。
藥學(xué)上可接受的衍生物是指式(I)化合物或在對(duì)服藥者用藥后能夠(直接或間接)產(chǎn)生式(I)化合物或其活性代謝產(chǎn)物或殘余物的任何其它化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、酯或酰胺，或者這類(lèi)酯或酰胺的鹽或溶劑化物。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會(huì)到，可以對(duì)式(I)化合物的每一官能團(tuán)進(jìn)行修飾，以提供其藥學(xué)上可接受的鹽。這類(lèi)衍生物中特別令人關(guān)注的是在苯磺酰胺官能上被修飾的化合物，以提供在代謝上不穩(wěn)定的苯磺酰胺。?；谋交酋０费苌锸怯绕淞钊岁P(guān)注的。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會(huì)到，式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物可以在不止一個(gè)位置上被衍生。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將進(jìn)一步領(lǐng)會(huì)到，式(I)的苯磺酰胺衍生物可以用作式(I)化合物制備中的中間體或式(I)的藥學(xué)上可接受的衍生物，或者二者皆是。
人們知道，對(duì)于用作藥物的上述鹽將是生理學(xué)上可接受的鹽，但是其他鹽例如也可以用于式(I)化合物及其生理學(xué)上可接受的鹽的制備。
適合的藥學(xué)上可接受的鹽包括與無(wú)機(jī)或有機(jī)酸所生成的酸加成鹽，優(yōu)選為無(wú)機(jī)酸，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽和硫酸鹽；和從堿金屬堿的加成作用所生成的堿金屬鹽，例如堿金屬氫氧化物，例如鈉鹽。
術(shù)語(yǔ)鹵素用于代表氟、氯、溴或碘。
術(shù)語(yǔ)“烷基”作為一個(gè)基團(tuán)或基團(tuán)的一部分表示直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基。
不言而喻，本發(fā)明涵蓋式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物的所有異構(gòu)體，包括所有幾何、互變與旋光型及其混合物(例如外消旋混合物)。
在本發(fā)明的一個(gè)方面中，R1是H。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，R2是C3-10環(huán)烷基C0-6烷基，例如C3-10環(huán)烷基(例如環(huán)戊基或環(huán)己基)。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，R2是C3-10環(huán)烷基甲基，例如C4-6環(huán)烷基甲基(例如環(huán)丁基甲基)。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，R2是C1-6烷基，例如直鏈C1-6烷基(例如正丙基、正丁基或正戊基)。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，R2是支鏈C3-6烷基，例如仲丁基或叔丁基(例如仲丁基)。
在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，R3是C1-6烷基，例如C1-3烷基(例如甲基)。
不言而喻，本發(fā)明涵蓋上述的具體方面的所有組合。
本發(fā)明提出一組式(I)化合物(A組)，其中R1是H；R2是C3-10環(huán)烷基C0-6烷基，例如C3-10環(huán)烷基(例如環(huán)戊基或環(huán)己基)； R3是C1-6烷基，例如C1-3烷基(例如甲基)。
本發(fā)明提出的另一組式(I)化合物(B組)，其中R1是H；R2是C1-6烷基，例如直鏈C1-6烷基(例如正丙基、正丁基或正戊基)；R3是C1-6烷基，例如C1-3烷基(例如甲基)。
本發(fā)明提出另一組式(I)化合物(C組)，其中R1是H；R2是C3-10環(huán)烷基甲基，例如C4-6環(huán)烷基甲基(例如環(huán)丁基甲基)；R3是C1-6烷基，例如C1-3烷基(例如甲基)。
本發(fā)明提出另一組式(I)化合物(D組)，其中R1是H；R2是支鏈C3-6烷基，例如仲丁基或叔丁基(例如叔丁基)；R3是C1-6烷基，例如C1-3烷基(例如甲基)。
本發(fā)明提出另一組式(I)化合物(E組)，其中R1和R2獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、C3-10環(huán)烷基C0-6烷基或C4-12橋連的環(huán)烷烴；R3是C1-6烷基或NH2。
本發(fā)明在另一方面提供下列化合物N-環(huán)戊基-4-[4-(甲磺酰基)苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺；N-環(huán)己基-4-[4-(甲磺酰基)苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺；N-異丁基-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺；N-(環(huán)丁基甲基)-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺；及它們藥學(xué)上可接受的衍生物。
本發(fā)明化合物是強(qiáng)效的選擇性COX-2抑制劑。它們選擇性地抑制COX-2而非COX-1的能力說(shuō)明了這種活性。
鑒于它們的選擇性COX-2抑制活性，本發(fā)明化合物尤其可用于人與獸醫(yī)，特別是治療由選擇性COX-2抑制作用介導(dǎo)的各種病變和疾病的疼痛(慢性與急性)、發(fā)熱和炎癥。這類(lèi)病變和疾病是本領(lǐng)域所熟知的，包括風(fēng)濕熱；與流感或其他病毒感染有關(guān)的癥狀，例如感冒；下背部和頸部疼痛；頭痛；牙痛；扭傷和拉傷；肌炎；交感性持續(xù)性疼痛；滑膜炎；關(guān)節(jié)炎，包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；變性關(guān)節(jié)疾病，包括骨關(guān)節(jié)炎；痛風(fēng)和強(qiáng)直性脊椎炎；腱炎；黏液囊炎；與皮膚有關(guān)的病變，例如牛皮癬、濕疹、灼傷和皮炎；損傷，例如運(yùn)動(dòng)損傷和由外科和牙科手術(shù)引起的損傷。
本發(fā)明化合物還可用于治療神經(jīng)性疼痛。在神經(jīng)元損傷之后能夠發(fā)展為神經(jīng)性疼痛綜合征，所致疼痛可以持續(xù)數(shù)月或數(shù)年，即使最初的損傷已經(jīng)愈合以后也是如此。神經(jīng)元損傷可以發(fā)生在外周神經(jīng)、后根神經(jīng)、脊髓或腦中某些區(qū)域。神經(jīng)性疼痛綜合征在傳統(tǒng)上根據(jù)促成它們的疾病或情況加以分類(lèi)。神經(jīng)性疼痛綜合征包括糖尿病性神經(jīng)病；坐骨神經(jīng)痛；非特異性下背部疼痛；多發(fā)性硬化疼痛；纖維肌痛；與HIV有關(guān)的神經(jīng)?。簧窠?jīng)痛，例如皰疹后神經(jīng)痛和三叉神經(jīng)痛；由物理創(chuàng)傷、切斷手術(shù)、癌、毒素或慢性炎性病變所導(dǎo)致的疼痛。這些病變難以治療，盡管已知有若干種藥物具有有限的功效，不過(guò)很少實(shí)現(xiàn)完全控制疼痛。神經(jīng)性疼痛的癥狀難以置信地是多種多樣的，經(jīng)常被描述為自發(fā)的發(fā)射性和槍刺般疼痛，或者正在經(jīng)歷中的灼痛。另外，還有與正常非疼痛性感覺(jué)有關(guān)的疼痛，例如“釘感和針感”(感覺(jué)異常和感覺(jué)遲鈍)、對(duì)觸摸的敏感性增加(感覺(jué)過(guò)敏)、無(wú)害刺激之后的疼痛性感覺(jué)(動(dòng)態(tài)、靜態(tài)或熱性異常性疼痛)、對(duì)有害刺激的敏感性增加(熱、冷、機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏)、除去刺激后的連續(xù)疼痛感覺(jué)(痛覺(jué)過(guò)敏)或者選擇性感覺(jué)途徑缺少或缺陷(痛覺(jué)減退)。
本發(fā)明化合物還可用于治療其他由選擇性COX-2抑制作用介導(dǎo)的病變。
例如，本發(fā)明化合物抑制細(xì)胞與腫瘤的轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)移瘤的生長(zhǎng)，因此可用于治療某些癌性疾病，例如結(jié)腸癌和前列腺癌。本發(fā)明化合物還可用于減少腺瘤性結(jié)腸直腸息肉的數(shù)量，因而減少發(fā)展為結(jié)腸癌的危險(xiǎn)。本發(fā)明化合物還可用于治療與HER-2/neu過(guò)度表達(dá)有關(guān)的癌癥，特別是乳腺癌。
本發(fā)明化合物還通過(guò)抑制神經(jīng)元自由基的產(chǎn)生(和氧化性應(yīng)激反應(yīng))而預(yù)防神經(jīng)元損傷，因此用于治療中風(fēng)；癲癇；癲癇發(fā)作(包括癲癇大發(fā)作、癲癇小發(fā)作、肌陣攣性癲癇和部分發(fā)作)。
本發(fā)明化合物還抑制前列腺素類(lèi)誘導(dǎo)的平滑肌收縮，因此用于治療痛經(jīng)和早產(chǎn)。
本發(fā)明化合物還可用于治療肝臟疾病，例如炎性肝疾病，例如慢性病毒性乙型肝炎、慢性病毒性丙型肝炎、酒精性肝損傷、原發(fā)性膽汁性肝硬變、自體免疫性肝炎、非酒精性脂肪肝和肝臟移植排斥。
本發(fā)明化合物抑制炎性過(guò)程，因此用于治療哮喘、變應(yīng)性鼻炎和呼吸窘迫綜合征；胃腸病變，例如炎性腸疾病、克羅恩氏病、胃炎、腸易激綜合征和潰瘍性結(jié)腸炎；和諸如下列疾病中的炎癥血管疾病、偏頭痛、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈外膜炎、甲狀腺炎、再生障礙性貧血、何杰金氏病、硬皮病(sclerodoma)、I型糖尿病、重癥肌無(wú)力、多發(fā)性硬化、sorcoidosis、腎病綜合征、Bechet氏綜合征、多肌炎、齒齦炎、結(jié)膜炎和心肌缺血。
本發(fā)明化合物還可用于治療眼科疾病，例如視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜病、眼色素層炎和急性眼組織損傷。
本發(fā)明化合物還可用于治療認(rèn)知障礙，例如癡呆，特別是變性癡呆(包括早老性癡呆、阿爾茨海默氏病、Pick氏病、杭廷頓氏舞蹈病、帕金森氏病和克-雅氏病)和血管性癡呆(包括多梗塞性癡呆)，以及與下列因素有關(guān)的癡呆顱內(nèi)空間占據(jù)性傷害、創(chuàng)傷、感染與有關(guān)病變(包括HIV感染)、代謝、毒素、缺氧和維生素缺乏；與衰老有關(guān)的輕微認(rèn)知減退，特別是與年齡有關(guān)的記憶減退。
按照本發(fā)明的進(jìn)一步方面，我們提供用于人或獸醫(yī)藥的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
按照本發(fā)明的另一方面，我們提供用于治療由COX-2介導(dǎo)的病變的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
按照本發(fā)明的進(jìn)一步方面，我們提供治療患有由COX-2介導(dǎo)的病變的人或動(dòng)物患者的方法，包括給所述患者服用有效量的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
按照本發(fā)明的進(jìn)一步方面，我們提供治療患有炎癥的人或動(dòng)物患者的方法，該方法包括給所述患者服用有效量的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
按照本發(fā)明的另一方面，我們提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物在治療劑制造中的用途，該治療劑用于治療由COX-2介導(dǎo)的病變。
按照本發(fā)明的另一方面，我們提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物在治療劑制造中的用途，該治療劑用于治療炎癥。
不言而喻，關(guān)于治療包括既定癥狀的治療和預(yù)防性治療，另有明確規(guī)定除外。
本發(fā)明化合物被認(rèn)為是可以有效地與一種或多種其他治療劑結(jié)合使用。適合于附加治療的藥物實(shí)例包括5HT1激動(dòng)劑，例如曲坦類(lèi)(例如舒馬普坦或那拉曲坦)；腺苷Al激動(dòng)劑；EP配體(例如EP4拮抗劑)；NMDA調(diào)制劑，例如甘氨酸拮抗劑；鈉通道阻滯劑(例如拉莫三嗪)；P物質(zhì)拮抗劑(例如NK1拮抗劑)；大麻的化學(xué)成分；對(duì)乙酰氨基酚或非那西?。?-脂加氧酶抑制劑；白三烯受體拮抗劑；DMARD(例如甲氨蝶呤)；加巴噴丁與有關(guān)化合物；三環(huán)抗抑郁劑(例如阿米替林)；神經(jīng)元穩(wěn)定性抗癲癇藥；單胺能攝取抑制劑(例如文拉法辛)；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；一氧化氮合成酶(NOS)抑制劑，例如iNOS或nNOS抑制劑；腫瘤壞死因子α釋放或作用抑制劑；抗體療法，例如單克隆抗體療法；抗病毒劑，例如核苷抑制劑(例如拉米夫定)或免疫系統(tǒng)調(diào)制劑(例如干擾素)；雅片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥；局部麻醉藥；刺激物，包括咖啡因；H2-拮抗劑(例如雷尼替丁)；質(zhì)子泵抑制劑(例如奧美拉唑)；抗酸藥(例如鋁或鎂的氫氧化物)；抗氣脹藥(例如二甲硅油)；解充血藥(例如苯腎上腺素、苯丙醇胺、偽麻黃堿、羥甲唑啉、腎上腺素、萘甲唑林、賽洛唑啉、丙己君或左脫氧麻黃堿)；止咳藥(例如可待因、氫可酮、carmiphen、噴托維林或右美沙芬)；利尿藥；或者鎮(zhèn)靜或非鎮(zhèn)靜性抗組胺藥。不言而喻的是，本發(fā)明涵蓋式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物與一種或多種其他治療劑的組合的用途。
式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物適宜以藥物組合物的形式給藥。因而在本發(fā)明的另一方面，我們提供適合用在人或獸醫(yī)中的藥物組合物，包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。這類(lèi)組合物可以適宜按常規(guī)方式與一種或多種生理學(xué)上可接受的載體或賦形劑混合使用。
式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物可以配制成以任意適合的方式給藥。例如它們可以配制成局部給藥或者通過(guò)吸入給藥，或者更優(yōu)選地用于口服、透皮或腸胃外給藥。該藥物組合物可以配制成能使式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物受控釋放的劑型。
關(guān)于口服給藥，藥物組合物例如可以采取片劑(包括舌下片)、膠囊劑、粉劑、溶液、糖漿劑或懸液的劑型，借助常規(guī)手段與可接受的賦形劑加以制備。
關(guān)于透皮給藥，藥物組合物可以以透皮貼劑的形式給藥，例如透皮離子電滲貼劑。
關(guān)于腸胃外給藥，藥物組合物可以作為注射劑或連續(xù)輸注劑給藥(例如靜脈內(nèi)、血管內(nèi)或皮下方式)。組合物可以采取諸如在油性或水性載體中的懸液、溶液或乳液的劑型，并且可以含有制劑用試劑，例如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。關(guān)于注射給藥，它們可以采取單位劑量方式或多劑量方式，優(yōu)選地加入防腐劑。
作為腸胃外給藥的替代選擇，活性成分可以是用于與適合載體再組合的粉末形式。
本發(fā)明化合物還可以配制成藥庫(kù)制劑。這類(lèi)長(zhǎng)效制劑可以通過(guò)植入(例如皮下或肌內(nèi))或肌內(nèi)注射給藥。因而，例如，本發(fā)明化合物可以與適合的聚合性或疏水性材料進(jìn)行配制(例如配制成在可接受的油中的乳液)或者與離子交換樹(shù)脂進(jìn)行配制，或者配制成微溶性衍生物，例如微溶性鹽。
如上所述，本發(fā)明化合物還可以與其他治療劑結(jié)合使用。本發(fā)明因而在進(jìn)一步的方面提供一種組合，包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物與另一種治療劑一起使用。
上述組合可以適宜地以藥物制劑的形式使用，因而包含上述組合與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物制劑構(gòu)成本發(fā)明的進(jìn)一步方面。這類(lèi)組合的單獨(dú)組分可以在獨(dú)立或聯(lián)合的藥物制劑中被先后或同時(shí)給藥。
當(dāng)式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物與第二種對(duì)抗相同疾病狀態(tài)的治療劑結(jié)合使用時(shí)，每種化合物的劑量可以不同于當(dāng)單獨(dú)使用化合物時(shí)的劑量。適當(dāng)?shù)膭┝咳菀诪楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)識(shí)。
關(guān)于人的治療，式(I)化合物的推薦每日劑量為0.01mg/kg至500mg/kg，例如0.05mg/kg至100mg/kg，例如0.1mg/kg至50mg/kg，可以適當(dāng)分1至4次給藥。所采用的精確劑量將取決于患者的年齡與癥狀和給藥途徑。因而，例如，0.25mg/kg至10mg/kg的每日劑量可以適合于系統(tǒng)給藥。
式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物可以通過(guò)相似結(jié)構(gòu)化合物制備領(lǐng)域已知的任意方法加以制備。
適合于制備式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物的方法如下。
流程1中，R1至R3是如上式(I)所定義的，另有規(guī)定除外；Hal是鹵素，例如Cl或Br；MTBE是甲基叔丁基醚；烷基是直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基。
參照流程1，式(III)化合物用式(II)胺處理適宜在溶劑中、例如腈(例如乙腈)和在高溫下(例如從約50℃至回流)進(jìn)行?？梢允褂眠^(guò)量的胺代替溶劑。
或者，式(III)化合物用式(II)胺處理適宜在溶劑中、例如叔胺(例如NMP)和在環(huán)境溫度與高溫之間(例如環(huán)境溫度)進(jìn)行。使用NMP作為溶劑的優(yōu)點(diǎn)是在反應(yīng)完成后加入水可以使所需式(I)化合物從反應(yīng)混合物中沉淀出來(lái)，使之容易分離和純化。
流程1所示代硼酸偶聯(lián)適宜這樣進(jìn)行在溶劑中，例如醚(例如1，2-二甲氧基乙烷)；在堿的存在下，例如無(wú)機(jī)堿(例如碳酸鈉)；采用鈀催化劑，例如四(三苯膦)鈀(O)。
流程1所示氧化作用適宜使用單過(guò)硫酸化合物進(jìn)行，例如過(guò)硫酸氫鉀(已知的OxoneTM)，反應(yīng)在溶劑中、例如含水醇(例如含水乙醇)和在-78℃ 與環(huán)境溫度之間進(jìn)行。
參照流程1，式(VI)二酮的環(huán)化作用得到對(duì)應(yīng)的式(IV)嘧啶，這反應(yīng)適宜采用硫代脲鎓鹽，例如2-甲基-2-硫代假脲硫酸鹽，和在回流下進(jìn)行。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)知道，流程1所述的用于制備式(I)化合物或其中間體的某些過(guò)程可能不適用于一些可能取代的基。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將進(jìn)一步領(lǐng)會(huì)到，可能有必要或者需要按不同于所述的順序進(jìn)行流程1所述轉(zhuǎn)化，或者修飾一種或多種轉(zhuǎn)化，以提供所需的式(I)化合物。
在流程1的一種變化中，其中R3是C1-6烷基的式(III)化合物可以這樣制備，即在上述氧化條件下氧化式(IV)A二硫化物 式(IV)A二硫化物可以按照流程1的一般過(guò)程加以制備，采用硫化物衍生物代替對(duì)應(yīng)的式(VII)與(VIII)烷基磺酰化合物。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會(huì)到，式(I)化合物可以通過(guò)互變作用加以制備，利用其他式(I)化合物作為前體。適合的互變作用、例如烷基化作用是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，描述在很多標(biāo)準(zhǔn)的有機(jī)化學(xué)文本中，例如“Advanced Organic Chemistry”(高級(jí)有機(jī)化學(xué))Jerry March，第四版(Wiley，1992)，引用在此作為參考文獻(xiàn)。例如，其中R1或R2是C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6炔基、C3-10環(huán)烷基C0-6烷基或C4-12橋連的環(huán)烷烴的式(I)化合物可以通過(guò)烷基化其中R1是H的相應(yīng)的式(I)化合物加以制備。
其中R3是NH2的式(I)化合物的?；饔玫玫綄?duì)應(yīng)的酰化苯磺酰胺衍生物，這可以通過(guò)常規(guī)手段進(jìn)行，例如采用常規(guī)的?；瘎纭癆dvanced Organic Chemistry”(高級(jí)有機(jī)化學(xué))pp 417-424所述那些。
正如將為本領(lǐng)域技術(shù)人員所領(lǐng)會(huì)到的是，可能有必要或者需要在式(I)化合物合成的任意階段保護(hù)該分子中的一個(gè)或多個(gè)敏感基團(tuán)，以防止不希望有的副反應(yīng)。用在式(I)化合物制備中的保護(hù)基團(tuán)可以按常規(guī)方式使用。例如參見(jiàn)“Protective Groups in Organic Synthesis”(有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán))Theodora W Green和Peter G M Wuts第二版(John Wiley and Sons，1991)，引用在此作為參考文獻(xiàn)，其中還描述了除去這類(lèi)基團(tuán)的方法。
式(II)的胺是已知的化合物或者可以通過(guò)文獻(xiàn)方法制備，例如“Comprehensive Organic Transformationsa guide to functional grouppreparations”(綜合有機(jī)轉(zhuǎn)化官能團(tuán)制備指南)(VCH，1989)所述那些方法，引用在此作為參考文獻(xiàn)。
式(V)的硫脲鎓鹽是已知的化合物或者可以通過(guò)文獻(xiàn)方法制備，例如A H Owens等Eur J Med Chem(歐洲醫(yī)藥化學(xué)雜志)，1988，23(3)，295-300所述那些，引用在此作為參考文獻(xiàn)。
式(VII)的苯乙酮是已知的化合物或者可以通過(guò)常規(guī)化學(xué)方法制備。
式(VIII)的代硼酸或其衍生物是已知的化合物或者可以通過(guò)文獻(xiàn)方法制備，例如EPA公報(bào)No.533268；或R Miyaura等J Org Chem(有機(jī)化學(xué)雜志)，1995，60，7508-7510所述那些，各自引用在此作為參考文獻(xiàn)。
式(IX)的4-鹵代-6-三氟甲基嘧啶是已知的化合物或者可以通過(guò)文獻(xiàn)方法制備，例如日本專(zhuān)利no.42014952(化學(xué)文摘ref CAN 68105224)所述那些，引用在此作為參考文獻(xiàn)。
上述某些中間體是新穎的化合物，本文所有新穎的中間體可以理解為是構(gòu)成本發(fā)明的另一方面。式(III)和(IV)化合物是關(guān)鍵的中間體，代表本發(fā)明一個(gè)特定的方面。
本發(fā)明化合物適宜在處理之后分離為游離堿的形式。本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可以利用常規(guī)手段制備。
本發(fā)明化合物的溶劑化物(例如水合物)可以在上述方法步驟之一的處理程序期間生成。
下列中間體和實(shí)施例闡述本發(fā)明但決不限制本發(fā)明。所有溫度均以℃表示。快速柱色譜是利用Merck 9385二氧化硅進(jìn)行的。固相萃取(SPE)色譜是利用Varian Mega Bond Elut(Si)藥筒(Anachem)進(jìn)行的，在15mmHg真空下進(jìn)行逐步的梯度洗脫。薄層色譜(TLC)是在二氧化硅平板上進(jìn)行的。除了已有的定義以外，使用下列縮寫(xiě)Me，甲基；Ac，酰基；DMSO，二甲基亞砜；TFA，三氟乙酸；DME，二甲氧基乙烷；THF，四氫呋喃；DCM，二氯甲烷；NMP，N-甲基吡咯烷酮；MTBE，甲基叔丁基醚。
中間體14，4，4-三氟-1-[4-(甲硫基)苯基]丁烷-1，3-二酮向三氟乙酸乙酯(7.95ml，1.1eq)的MTBE(125ml)溶液中滴加25％甲醇鈉的甲醇溶液(16ml，1.2eq)。分批加入4-甲硫基苯乙酮(Aldrich，10g，0.06mol)，將混合物在環(huán)境溫度下攪拌過(guò)夜。小心地加入2N鹽酸(40ml)，分離有機(jī)相，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，得到橙色固體。使該橙色固體從熱的異丙醇中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為黃色結(jié)晶性固體(11.25g，71％)。
MH-261中間體22-(甲硫基)-4-[4-(甲硫基)苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶向4，4，4-三氟-1-[4-(甲硫基)苯基]丁烷-1，3-二酮(5g)與2-甲基-2-硫代假脲硫酸鹽(5.1g，0.98eq)在乙酸(100ml)中的混合物中加入乙酸鈉(3g，2eq)，在回流下加熱8小時(shí)。將混合物在真空中濃縮，加入水(100ml)，得到固體，過(guò)濾分離之，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(5.8g，定量)。
MH+317中間體32-(甲硫基)-4-[4-(甲硫基)苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶在N2下，在攪拌下，將4-氯-2-甲硫基-6-(三氟甲基)嘧啶(ButtPark Ltd，2.86g，14.55mmol)、4-(甲硫基)苯基代硼酸(Aldrich，2.83g，1.1eq)、四(三苯膦)鈀(0)(0.2g)與碳酸鈉(4.04g，2.6eq)在DME(200ml)與水(100ml)中的混合物在回流下加熱24小時(shí)。將反應(yīng)混合物在真空中濃縮，使所得混合物在乙酸乙酯與水之間分配。分離有機(jī)相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，得到紫色固體。經(jīng)過(guò)快速柱色譜純化，用環(huán)己烷∶乙酸乙酯(6∶1)作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物，為黃色結(jié)晶性固體(3.86g，84％)。
MH+317TLC SiO2環(huán)己烷∶乙酸乙酯(3∶1)Rf0.75 UV254中間體42-(甲磺?；?-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶向2-(甲硫基)-4-[4-(甲硫基)苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶(5.78g)的MeOH(500ml)溶液中加入OXONETM(Aldrich，56.23g，5eq)的水(200ml)溶液。將混合物在環(huán)境溫度下攪拌過(guò)夜，在真空中濃縮，使殘余物在水與乙酸乙酯之間分配(2×100ml)。合并有機(jī)相，干燥，在真空中濃縮，得到不完全白色固體，用熱的異丙醇研制，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(5.6g，80％)。
MH+381TLC SiO2乙酸乙酯∶環(huán)己烷(1∶1)Rf0.45實(shí)施例1N-環(huán)戊基-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺向攪拌著的2-(甲磺?；?-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶(0.50g，1.31mmol)的MeCN(10ml)溶液中加入環(huán)戊胺(0.34g)，將所得溶液在回流下加熱18小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，在真空中濃縮，使殘余物在2N HCl與乙酸乙酯之間分配。分離有機(jī)相，用2N HCl洗滌，然后用水洗滌，在真空中濃縮，得到黃色的油。該油經(jīng)過(guò)SPE色譜純化，用環(huán)己烷∶乙酸乙酯(3∶1)作為洗脫劑。合并含有純產(chǎn)物的部分，在真空中濃縮，得到晶體，過(guò)濾分離之，得到標(biāo)題化合物，為白色結(jié)晶性固體(0.21g，53％)。
MH+386實(shí)施例2N-環(huán)己基-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺向攪拌著的2-(甲磺酰基)-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶(0.50g，1.31mmol)的MeCN(10ml)溶液中加入環(huán)己胺(0.50ml)，將所得溶液在回流下加熱26小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，在真空中濃縮，使殘余物在2N HCl與乙酸乙酯之間分配。分離有機(jī)相，用2N HCl洗滌，然后用水洗滌，在真空中濃縮，得到不完全白色固體。使該固體從5％AcOH/MeOH中結(jié)晶，在真空中干燥，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.27g，52％)。
MH+400實(shí)施例3至30按照實(shí)施例1和2所述方式制備實(shí)施例3至30化合物，如下表1所示。為清楚起見(jiàn)，表1使用下列符號(hào)·開(kāi)放的括號(hào)(用于標(biāo)記取代基與它所連接的氮原子之間的鍵；·星號(hào)*表示手性中心。
表1 表1 Ref1 TLC SiO2環(huán)己烷∶乙酸乙酯(2∶1)Rf0.25實(shí)施例8N-異丁基-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺如上表1所述，按照實(shí)施例1和2所述方式制備實(shí)施例8，也就是使用MeCN作為溶劑，在回流下加熱該反應(yīng)。還使用NMP作為溶劑制備該標(biāo)題化合物如下
將2-(甲磺酰基)-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶(1g，2.629mmol)與異丁胺(0.52ml)在NMP(10ml)中的混合物在環(huán)境溫度下攪拌18小時(shí)。然后加入水(100ml)，過(guò)濾收集所得沉淀，干燥(0.85g)。將該物質(zhì)用乙醚/環(huán)己烷研制，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體(0.62g)。
MH+374實(shí)施例31N-(環(huán)丁基甲基)-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺將2-(甲磺酰基)-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶(0.5g，1.314mmol)與(環(huán)丁基甲基)胺(0.24g)在NMP(5ml)中的混合物在環(huán)境溫度下攪拌18小時(shí)。然后加入水(50ml)，過(guò)濾收集所得沉淀，干燥，得到標(biāo)題化合物，為奶油狀固體(0.434g)。
MH+384實(shí)施例32-片劑a) 本發(fā)明化合物 5.0mg乳糖 95.0mg微晶纖維素90.0mg交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 8.0mg硬脂酸鎂2.0mg壓片重量 200.0mg使本發(fā)明化合物、微晶纖維素、乳糖和交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮通過(guò)500微米篩，摻合在適合的混合機(jī)內(nèi)。使硬脂酸鎂通過(guò)250微米篩，與該活性摻合物摻合。利用適合的沖壓機(jī)將該摻合物壓制成片。
b) 本發(fā)明化合物 5.0mg乳糖 165.0mg預(yù)膠凝淀粉20.0mg交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 8.0mg硬脂酸鎂2.0mg壓片重量 200.0mg將本發(fā)明化合物、乳糖和預(yù)膠凝淀粉摻合在一起，用水造粒。將濕材干燥，研磨。使硬脂酸鎂和交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮通過(guò)250微米篩，與顆粒摻合。利用適合的壓片機(jī)壓制所得摻合物。
實(shí)施例33-膠囊劑a) 本發(fā)明化合物 5.0mg乳糖 193.0mg硬脂酸鎂2.0mg填充重量 200.0mg使本發(fā)明化合物和預(yù)膠凝淀粉通過(guò)500微米目篩，摻合在一起，用硬脂酸鎂潤(rùn)滑(通過(guò)250微米篩)。將摻合物填充在適合大小的硬膠囊內(nèi)。
b) 本發(fā)明化合物 5.0mg乳糖 177.0mg聚乙烯吡咯烷酮 8.0mg交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 8.0mg硬脂酸鎂2.0mg填充重量 200.0mg將本發(fā)明化合物與乳糖摻合在一起，用聚乙烯吡咯烷酮溶液造粒。將濕材干燥，研磨。使硬脂酸鎂和交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮通過(guò)250微米篩，與顆粒摻合。將所得摻合物填充在適合大小的硬膠囊內(nèi)。
實(shí)施例34-糖漿劑a) 本發(fā)明化合物 5.0mg羥丙基甲基纖維素45.0mg羥基苯甲酸丙酯 1.5mg羥基苯甲酸丁酯 0.75mg糖精鈉 5.0mg山梨糖醇溶液 1.0ml適合的緩沖液 適量適合的矯味劑 適量純凈水，至 10.0ml將羥丙基甲基纖維素與羥基苯甲酸酯一起分散在一部分熱的純凈水中，使溶液冷卻至環(huán)境溫度。向本體溶液中加入糖精鈉、矯味劑和山梨糖醇溶液。將本發(fā)明化合物溶于其余的水，加入到本體溶液中?？梢约尤脒m合的緩沖液，以控制pH在最大穩(wěn)定性的區(qū)域內(nèi)。補(bǔ)充溶液至所需體積，過(guò)濾，灌裝在適合的容器內(nèi)。
實(shí)施例35-注射劑％w/v本發(fā)明化合物 1.00B.P.注射用水，至100.00可以加入氯化鈉，以調(diào)節(jié)溶液的張性，還可以利用稀酸或堿或者加入適合的緩沖鹽，調(diào)節(jié)pH至最大穩(wěn)定性和/或促進(jìn)本發(fā)明化合物溶解。還可以加入增溶劑，例如助溶劑，以促進(jìn)本發(fā)明化合物溶解。還可以包括抗氧化劑和金屬螯合鹽。使溶液澄清，用水加至最終體積，重新測(cè)量pH，如果必要的話調(diào)節(jié)之，以提供10mg/ml的式(I)化合物。
可以包裝溶液以備注射，例如灌裝和密封在安瓿、小瓶或注射器內(nèi)。安瓿、小瓶或注射器可以被無(wú)菌灌裝(例如可以將溶液通過(guò)過(guò)濾滅菌，在無(wú)菌條件下灌裝在無(wú)菌安瓿內(nèi))和/或最后滅菌(例如利用一個(gè)可接受的周期在高壓滅菌器內(nèi)加熱)?？梢栽诙栊缘?dú)夥障鹿嘌b溶液。
優(yōu)選地將溶液灌裝在安瓿內(nèi)，通過(guò)玻璃的熔融密封，最后滅菌。
按照相似方式制備其他無(wú)菌制劑，其中含有0.5、2.0和5％w/v的本發(fā)明化合物，以分別提供5、20和50mg/ml的本發(fā)明化合物。
生物學(xué)數(shù)據(jù)細(xì)胞的測(cè)定在COS細(xì)胞中評(píng)估對(duì)人COX-1和COX-2的抑制活性，該細(xì)胞已被穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有人COX-1和人COX-2的cDNA。實(shí)驗(yàn)前24小時(shí)，利用下列方法將COS細(xì)胞從它們所生長(zhǎng)的175cm2燒瓶轉(zhuǎn)移到24孔細(xì)胞培養(yǎng)皿。從融合細(xì)胞燒瓶(1瓶融合細(xì)胞含有大約1×107個(gè)細(xì)胞)除去培養(yǎng)基(Dulbecco改進(jìn)的沉香(eagles)培養(yǎng)基(DMEM)，補(bǔ)充有熱滅活的胎牛血清(10％v/v)、青霉素(100IU/ml)、鏈霉素(100μg/ml)和遺傳霉素(600μg/ml))。向燒瓶?jī)?nèi)加入5ml磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)，洗滌細(xì)胞。棄去PBS后，在恒溫箱(37℃)內(nèi)將細(xì)胞與5ml胰蛋白酶培養(yǎng)5分鐘。然后從恒溫箱中取出燒瓶，加入5ml新鮮培養(yǎng)基。將燒瓶?jī)?nèi)容物轉(zhuǎn)移到250ml無(wú)菌容器，隨后補(bǔ)充培養(yǎng)基的體積至100ml。將1ml細(xì)胞懸液移取到4×24孔細(xì)胞培養(yǎng)皿的每個(gè)小孔內(nèi)。然后將平皿放置在恒溫箱(37℃，95％空氣/5％CO2)過(guò)夜。如果需要不只1燒瓶的細(xì)胞，那么先合并各燒瓶的細(xì)胞再分散到24孔平皿中。
培養(yǎng)過(guò)夜后，從24孔細(xì)胞培養(yǎng)皿中完全除去培養(yǎng)基，用250μl新鮮DMEM代替(37℃ )。在DMSO中調(diào)節(jié)供試化合物的濃度達(dá)所需試驗(yàn)濃度的250x，向小孔內(nèi)加入1μl。然后通過(guò)旋轉(zhuǎn)平皿輕微地混合，然后放置在恒溫箱內(nèi)達(dá)1小時(shí)(37℃ ，95％空氣/5％CO2)。培養(yǎng)后，向每孔加入10μl花生四烯酸(750μM)，得到最終的花生四烯酸濃度為30μM。然后將平皿培養(yǎng)另外10分鐘，然后從平皿各孔中除去培養(yǎng)基，貯存在-20℃下，然后利用酶免疫測(cè)定法測(cè)定前列腺素E2(PGE2)的含量。供試化合物的抑制效力以IC50值表示，它的定義是抑制50％PGE2從這些細(xì)胞中釋放所需化合物濃度。通過(guò)比較各自的IC50值計(jì)算COX-1對(duì)COX-2的抑制作用選擇性比。
從關(guān)于本發(fā)明化合物的基于細(xì)胞的測(cè)定法得到下列關(guān)于COX-1和COX-2抑制作用的IC50值
微粒體測(cè)定針對(duì)來(lái)自被桿狀病毒感染的SF9細(xì)胞的微粒體制劑，測(cè)定對(duì)微粒體h-COX2的抑制活性。使微粒體制劑試樣在冰上緩慢融化，按1/40,000稀釋在測(cè)定緩沖液(無(wú)菌水，用氬脫氣，含有100mM HEPES(pH7.4)，10mM EDTA(pH7.4)，1mM苯酚，1mM還原谷胱甘肽，20mg/ml明膠和0.001mM高鐵血紅素)中。一旦稀釋?zhuān)磳⒚溉芤河寐暡ㄌ幚?秒鐘(Branson sonicator，4檔，1cm尖端)，以確保懸浮均勻。然后向96孔微量滴定皿的每孔內(nèi)加入155μl酶溶液，平皿含有5μl供試化合物(40x所需試驗(yàn)濃度)或5μl DMSO作為對(duì)照。然后將平皿混合，在室溫下培養(yǎng)1小時(shí)。培養(yǎng)后，向每孔加入40μl 0.5μM花生四烯酸，得到最終濃度為0.1μM。然后將平皿混合，精確地培養(yǎng)10分鐘(室溫)，然后向每孔加入25μl 1M HCl(鹽酸)，以終止反應(yīng)。然后向每孔加入25μl 1M NaOH(氫氧化鈉)，以中和溶液，然后利用酶免疫測(cè)定法(EIA)測(cè)定PGE2水平。
從關(guān)于本發(fā)明化合物的微粒體測(cè)定法得到下列關(guān)于COX-1和COX-2抑制作用的IC50值
權(quán)利要求
1.式(I)化合物 及其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R1和R2獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6炔基、C3-10環(huán)烷基C0-6烷基或C4-12橋連的環(huán)烷烴；和R3是C1-6烷基或NH2。
2.如權(quán)利要求1所要求保護(hù)的化合物，其中R1是H。
3.如權(quán)利要求1或2所要求保護(hù)的化合物，其中R2是C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基C0-6烷基。
4.如權(quán)利要求1至3的任一項(xiàng)所要求保護(hù)的化合物，其中R3是C1-6烷基。
5.如權(quán)利要求1至4的任一項(xiàng)所要求保護(hù)的化合物，其中R1是H；R2是C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基C0-6烷基；R3是C1-6烷基。
6.如權(quán)利要求1至5的任一項(xiàng)所要求保護(hù)的化合物，其中R1是H；R2是C3-10環(huán)烷基甲基或支鏈C3-6烷基；R3是C1-6烷基。
7.N-環(huán)戊基-4-[4-(甲磺酰基)苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺；N-環(huán)己基-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺；N-異丁基-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺；N-(環(huán)丁基甲基)-4-[4-(甲磺?；?苯基]-6-(三氟甲基)嘧啶-2-胺；及它們藥學(xué)上可接受的衍生物。
8.如權(quán)利要求1至7的任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物的制備方法，包含(A)使式(II)的胺HNR1R2或其被保護(hù)的衍生物與式(III)化合物 或其被保護(hù)的衍生物反應(yīng)；或者(B)使式(I)化合物轉(zhuǎn)化為式(I)另一種化合物；或者(C)使被保護(hù)的式(I)化合物衍生物去保護(hù)；和可選地使通過(guò)(A)至(C)任一方法所制備的式(I)化合物轉(zhuǎn)化為其藥學(xué)上可接受的衍生物。
9.藥物組合物，包含如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物以及一種或多種生理上可接受的載體或賦形劑。
10.用在人或獸醫(yī)藥中的如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
11.用于治療由COX-2介導(dǎo)的疾病的如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
12.治療患有由COX-2介導(dǎo)的疾病的人或動(dòng)物患者的方法，包括給所述患者服用有效量的如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
13.治療患有炎癥的人或動(dòng)物患者的方法，包括給所述患者服用有效量的如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
14.如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物的用途，用于制造治療由COX-2介導(dǎo)的疾病的治療劑。
15.如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所定義的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物的用途，用于制造治療炎癥的治療劑。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R
文檔編號(hào)A61P11/16GK1399633SQ00816293
公開(kāi)日2003年2月26日 申請(qǐng)日期2000年11月23日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月26日
發(fā)明者理查德·H·格林, 查爾斯·D·哈特利, 艾倫·內(nèi)勒, 杰里米·J·佩恩, 尼爾·A·佩格 申請(qǐng)人:葛蘭素集團(tuán)有限公司