專(zhuān)利名稱(chēng)：酶法測(cè)定β－羥丁酸試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酶法測(cè)定β-羥丁酸試劑盒。
測(cè)定血尿β-羥丁酸對(duì)糖尿病酮癥酸中毒早期診斷、指導(dǎo)療效、判定預(yù)防有重要意義，對(duì)酒精、饑餓、子癇引起的酮癥酸中毒也有重要意義。測(cè)定β-羥丁酸有滴定法、比重法、比色法，這些測(cè)定方法是半定量的，用氣相色譜法無(wú)特異性，毛細(xì)管等速電泳法不適于臨床大批量化驗(yàn)。有關(guān)文獻(xiàn)介紹了酶法測(cè)定β-羥丁酸的方法，但這種試劑只能現(xiàn)配現(xiàn)用，不能長(zhǎng)期保存。
本發(fā)明的目的在于提供一種測(cè)定速度快，并能長(zhǎng)期保存的酶法測(cè)定β-羥丁酸試劑盒。
本發(fā)明的技術(shù)方案一種酶法測(cè)定β-羥丁酸試劑盒，其特征在于含有三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑、乙二胺四乙酸二鈉、β-羥丁酸脫氫酶、氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、氯化鎂、疊氮鈉、蔗糖。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明配方中乙二胺四乙酸二鈉可有效洛合重金屬離子避免對(duì)酶的破壞，氯化鎂可做為酶的激活劑，疊氮鈉可防腐，蔗糖對(duì)酶有保護(hù)作用。試劑盒使用了酶做催化劑，所以本發(fā)明抗干擾能力強(qiáng)，中等程度溶血，乳糜血，血糖20毫摩爾/升以下，膽紅素100微毫摩爾/升以下對(duì)測(cè)定不產(chǎn)生干擾。凍干試劑冷藏一年，試劑盒中酶活力下降小于5％，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸破壞小于10％。測(cè)β-羥丁酸線性范圍，達(dá)5.0毫摩爾/升，回收率97.1-104.2％，X＝0.24毫摩爾/升，n＝20，CV＝6.3％，SD＝0.015，復(fù)溶后穩(wěn)定72小時(shí)(室溫)，冷藏穩(wěn)定二周。
下面詳述本發(fā)明的實(shí)施例。
取超純蒸餾水，用前將水加熱至沸，密封備用。將三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑、乙二胺四乙酸二鈉、氯化鎂、疊氮鈉、蔗糖加入前述的蒸餾水溶解，調(diào)PH值于8.0，然后加入β-羥丁酸脫氫酶、氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，此時(shí)，乙二胺四乙酸二鈉含量21毫摩爾/升，氯化鎂2毫摩爾/升、疊氮鈉0.01毫摩爾/升，β-羥丁酸脫氧酶30國(guó)際單位/升、氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸2.0毫摩爾/升，三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑65毫摩爾/升，蔗糖濃度40毫摩爾/升，將該試劑溶液分裝為5-10毫升/瓶，經(jīng)低溫冷凍干燥后冷藏，冷凍干燥后水份小于3％，可保存一年以上。使用時(shí)，加5-10毫升蒸餾水溶解10分鐘即可使用。
權(quán)利要求
1.一種酶法測(cè)定β-羥丁酸試劑盒，其特征在于含有三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑、乙二胺四乙酸二鈉、β-羥丁酸脫氫酶、氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、氯化鎂、疊氮鈉、蔗糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法測(cè)定β-羥丁酸試劑盒，其特征在于各組分的含量的摩爾比為三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑60-100、乙二胺四乙酸二鈉20-30、氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1.8-4.0、氯化鎂1.0-5.0、疊氮鈉0.009-0.015、蔗糖14.6-43.8。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酶法測(cè)定β－羥丁酸試劑盒,解決了現(xiàn)有測(cè)定試劑不易保存的問(wèn)題。本發(fā)明技術(shù)方案:一種酶法測(cè)定β－羥丁酸試劑盒,其特征在于:含有三羥甲基氨基甲烷—鹽酸緩劑、乙二胺四乙酸二鈉、β－羥丁酸脫氫酶、氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、氧化鎂、疊氮鈉、蔗糖,本發(fā)明保存時(shí)間長(zhǎng),測(cè)定速度快,使用方便。
文檔編號(hào)C12Q1/32GK1277264SQ9911296
公開(kāi)日2000年12月20日 申請(qǐng)日期1999年5月28日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月28日
發(fā)明者于永光, 辛?xí)悦? 馮磊光 申請(qǐng)人:哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院