專(zhuān)利名稱(chēng)：制備旋光性胺的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過(guò)N-酰胺外消旋體的酶致水解作用制備(R)-胺的新方法。
已知用芐青霉素酰基轉(zhuǎn)移酶作為生物催化劑通過(guò)相應(yīng)的外消旋體的酶致解離制備旋光性的N-P-氨基苯基-乙酰氨基衍生物(參見(jiàn)J.Org.Chem.44，2222～2225(1979))。然而，該方法的缺點(diǎn)是在某些情況下旋光產(chǎn)率很低。此外，在該方法中起始外消旋體的(S)-對(duì)映體優(yōu)選被水解。因此，例如N-P-氨基-1-苯基乙?；?1-苯乙基胺的(R)-對(duì)映體和游離(S)-胺由其相應(yīng)的外消旋體生成。另一缺點(diǎn)是生物催化劑以非常強(qiáng)的底物特異性(Substratspezifisch)起反應(yīng)，只能采用含有苯基乙?；哪切┗衔?。
還已知使用特定生物催化物使N-?；?1-甲基-1-苯基-烷基胺外消體轉(zhuǎn)變，可由N-?；?-甲基-1-苯基-烷基胺制備(S)-胺和(R)-對(duì)映體(參見(jiàn)EP-A-0 399 589)。該方法的缺點(diǎn)是如果N-?；?1-甲基-1-苯基-烷基胺的(R)-對(duì)映體在附加反應(yīng)步驟中被脫?；?，那么只能得到相應(yīng)的(R)-胺。
現(xiàn) 發(fā)現(xiàn)通式(I)的(R)-胺
其中R1表示任選取代的烷基，R2表示任選取代的烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的環(huán)烯基、任選取代的芳基或任選取代的雜環(huán)基，但其中R1和R2不相同，和n表示數(shù)字0，1，2或3，可以下列方式制得在水存在和任選在有機(jī)稀釋劑的存在下，在pH為3.0至10.0，溫度為0℃至80℃的情況下，使通式(II)的外消旋N-酰胺與適合解離通式(II)的N-酰胺的(R)-對(duì)映體的脂肪酶反應(yīng)。
其中R1，R2和n具有上述意義，和R3表示氫、氨基、二烷基氨基、烷硫基、任選取代的烷基或任選取代的烷氧基，其中含有多于1個(gè)碳原子的基團(tuán)中的碳鏈可被雜原子或雜原子基團(tuán)間隔，或R3表示任選取代的環(huán)烷基、任選取代的環(huán)烯基、任選取代的芳基或任選取代的雜環(huán)基。
(R)-胺應(yīng)理解為在不對(duì)稱(chēng)取代的碳原子上表現(xiàn)(R)構(gòu)型的通式(I)的那些旋光性化合物。在通式(I)中，不對(duì)稱(chēng)取代的碳原子用(*)表示。
相當(dāng)驚人的是(R)-胺可根據(jù)本發(fā)明方法制備，因?yàn)槠駷橹贡炯夹g(shù)領(lǐng)域僅公布(S)-胺可用生物催化劑由N-酰胺的外消旋體制得。
本發(fā)明的方法具有許多優(yōu)點(diǎn)。因此，使通式(I)的(R)-胺能以相當(dāng)高的旋光純度制備。另外的優(yōu)點(diǎn)是需用作起始化合物的N-酰胺是易得的，并且?；鶊F(tuán)變化范圍很寬。最后，進(jìn)行反應(yīng)和分離所需的物質(zhì)也沒(méi)有困難。
在現(xiàn)有情況下，如無(wú)另外定義，則烷基表示直鏈或帶支鏈的飽和脂族烴基。
在現(xiàn)有情況下，如無(wú)另外定義，則環(huán)烷基表示任選與其它稠合或橋連的環(huán)一起形成雙環(huán)或多環(huán)環(huán)系的飽和碳環(huán)基團(tuán)。
在現(xiàn)有情況下，如無(wú)另外說(shuō)明，則環(huán)烯基代表任選與其他稠合的或橋連的環(huán)一起形成雙環(huán)或多環(huán)環(huán)系的不飽和碳環(huán)基團(tuán)。
在現(xiàn)有情況下，如無(wú)另外定義，則芳基表示芳族的，單環(huán)，雙環(huán)或多環(huán)的烴基，諸如苯基，萘基，蒽基或菲基，優(yōu)選苯基或萘基，特別是苯基。
在現(xiàn)有情況下，如無(wú)另外定義，則雜環(huán)基表示飽和或不飽和的環(huán)式基團(tuán)，其中至少有一個(gè)環(huán)原子是雜原子，即不同于碳的原子。如果環(huán)含有幾個(gè)雜原子，那么它們可以相同或不同。優(yōu)選的雜原子是氧，氮或硫。環(huán)式基團(tuán)任選與其它碳環(huán)或雜環(huán)，稠合或橋連的環(huán)一起形成雙環(huán)或多環(huán)環(huán)系。優(yōu)選單環(huán)或雙環(huán)環(huán)系，特別是具有芳族特征的單環(huán)或雙環(huán)環(huán)系。
在現(xiàn)有情況下，如無(wú)另外定義，則鹵素表示氟，氯，溴或碘，優(yōu)選氟，氯或溴，特別是氟或氯。
若用外消旋的N-〔1-(4-氯苯基)-乙基〕-乙酰胺作為起始化合物，并用由Candida antarctica得來(lái)的脂肪酶作為生物催化劑，則本發(fā)明方法的過(guò)程可以如下分子式示意圖說(shuō)明。
實(shí)施新方法時(shí)，需要作為起始化合物的外消旋N-酰胺通常用通式(II)定義R1優(yōu)選表示具有1至8個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈烷基，其中烷基基團(tuán)可被相同或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、氰基、氨基、羥基、甲?；?、羧基、氨基甲酰基、各自為直鏈或帶支鏈的各自具有1至6個(gè)碳原子的烷氧基或烷硫基；各自為直鏈或帶支鏈的各具有1至6個(gè)碳原子和1至13個(gè)相同或不同的鹵原子的鹵代烷氧基或鹵代烷硫基；各自為直鏈或帶支鏈的在各自的烷基部分都具有1至6個(gè)碳原子的烷氨基、二烷氨基、烷基羰基、烷基羰氧基、烷氧羰基、烷基磺酰氧基、羥基亞氨基烷基或烷氧基亞氨基烷基；或者被鍵連兩次的具有1至6個(gè)碳原子的亞烷基或被鍵連兩次且具有1至4個(gè)碳原子的二氧亞烷基取代，其中后兩種基團(tuán)本身可一次或多次被相同或不同的基團(tuán)取代，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基。
R2優(yōu)選表示具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烷基，其中該基團(tuán)可被相同或不同的下列基團(tuán)取代一次至四次鹵素和/或具有1至4個(gè)碳原子的烷基，或表示具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烯基，其中該基團(tuán)可被相同或不同的下列基團(tuán)取代一次至四次鹵素和/或具有1至4個(gè)碳原子的烷基，或R2表示飽和或不飽和的，任選苯稠合的雜環(huán)基，在雜環(huán)中具有3至7個(gè)環(huán)原子，其中1至3個(gè)為相同或不同的雜原子，如氧、氮或硫，其中基團(tuán)可被相同或不同的基團(tuán)取代一次至三次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的烷基、具有1至4個(gè)碳原子的烷氧基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至5個(gè)相同或不同的鹵原子的鹵代烷基，或R2優(yōu)選表示具有6至10個(gè)碳原子的芳基，其中這些基團(tuán)中每個(gè)都可被相同或不同的下列基團(tuán)取代一次至五次鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、甲?；?、羧基、氰基甲?；?、硫代氨基甲?；?；各自為直鏈或帶支鏈的烷基、烷氧基、烷硫基、烷基亞磺?；蛲榛酋；?，它們各自具有1至6個(gè)碳原子；各自為直鏈或帶支鏈的烯基或烯氧基，它們各自都具有2至6個(gè)碳原于；各自為直鏈或帶支鏈的鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代烷硫基、鹵代烷基亞磺?；螓u代烷基磺?；?，它們各自都具有1至6個(gè)碳原子和1至13個(gè)相同或不同的鹵原子；各自為直鏈或帶支鏈的鹵代烯基或鹵代烯氧基，它們各自都具有2至6個(gè)碳原子和1至13相同或不同的鹵原子；各自為直鏈或帶支鏈的烷基氨基、二烷基氨基、烷基羰基、烷基羰氧基、烷氧羰基、烷基磺酰氧基、羥基亞氨基烷基或烷氧基亞氨基烷基，它們?cè)诟髯缘耐榛糠侄季哂?至6個(gè)碳原子；苯基、苯氧基、苯硫基、芐氧基、芐硫基或苯乙基氧基，或被具有3或4個(gè)碳原子的鍵鏈兩次的亞烷基或被具有1或2個(gè)碳原子的鍵鏈兩次的二氧亞烷基取代，其中后兩種基團(tuán)本身可被相同或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基，n也優(yōu)選表示數(shù)字0，1，2，或3R3優(yōu)選表示氫、氨基、在每個(gè)烷基部分具有1至6個(gè)碳原子的二烷基氨基、具有1至6個(gè)碳原子的烷硫基、具有1至10個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基或具有1至6個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷氧基，其中烷基基團(tuán)或烷氧基基團(tuán)可被相同的或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、甲?；?、羧基、氨基甲?；桓髯詾橹辨溁驇еф湹耐檠趸?、烷硫基、烷基亞磺?；蛲榛酋；?，它們各自都具有1至6個(gè)碳原子；各自為直鏈或帶支鏈的烯基或烯氧基，它們各具有2至6個(gè)碳原子，各自為直鏈或帶支鏈的鹵代烷氧基、鹵代烷硫基、鹵代烷基亞磺?；螓u代烷基磺?；?，它們各自具有1至6個(gè)碳原子和1至13個(gè)相同或不同的鹵原子；各自為直鏈或帶支鏈的烷基氨基、二烷基氨基、烷基羰基、烷基羰氧基、烷氧羰基、烷基磺酰氧基、羥基亞氨基烷基或烷氧基亞氨基烷基，它們?cè)诟髯缘耐榛糠志哂?至6個(gè)碳原子；或被具有1至6個(gè)碳原子的鍵鏈二次的亞烷基或具有1至4個(gè)碳原子的鍵鏈二次的二氧亞烷基取代，其中后兩種基團(tuán)本身可被相同或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基，或被苯基取代，或R3優(yōu)選表示具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烷基，其中這些基團(tuán)可被相同或不同的鹵素和/或具有1至4個(gè)碳原子的烷基取代一次至四次，或表示具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烯基，其中這些基團(tuán)可被相同或不同的鹵素和/或具有1至4個(gè)碳原子的烷基取代一次至四次，或R3優(yōu)選表示具有3至7個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和的雜環(huán)基，其中各有1至3個(gè)相同或不同的雜原子，如氧、氮或硫，其中該基團(tuán)可被相同或不同的基團(tuán)取代一次至三次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的烷基、具有1至4個(gè)碳原子的烷氧基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至5個(gè)相同或不同的鹵原子的鹵代烷基，或R3優(yōu)選表示具有6至10個(gè)碳原子的芳基，其中這些基團(tuán)的每一個(gè)都可被相同或不同的基團(tuán)取代一次至五次，這些基團(tuán)是鹵素、氰基、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基，具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基，具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷氧基或烷硫基，具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷氧基或鹵代烷硫基，苯基、苯氧基、苯硫基、芐氧基、芐硫基或苯乙基氧基，或被具有3或4個(gè)碳原子的鍵鏈兩次的亞烷基或被具有1或2個(gè)碳原子的鍵鏈兩次的二氧亞烷基取代，其中后兩種基團(tuán)本身可被相同或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基。
R1特別優(yōu)選表示甲基、乙基或正丙基。
R2特別優(yōu)選表示環(huán)己基、降冰片基(Norbornyl)或環(huán)己烯基，其中這些基團(tuán)可被相同或不同的氟、氯、甲基和/或乙基取代一次至四次，或表示呋喃基、吡啶基、噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基或苯并噻吩基，它們可被相同或不同的基團(tuán)取代一次至三次，這些基團(tuán)是氟、氯、溴、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、三氟甲基和/或三氟乙基，或R2特別優(yōu)選表示苯基或萘基，其中這些基團(tuán)的每個(gè)都可被相同或不同的基團(tuán)取代一至五次，這些基團(tuán)是氟、氯、溴、氰基、硝基、氨基、羥基、甲?；Ⅳ然?、氨基甲酰基、硫代氨基甲?；⒓谆?、乙基、正-或異-丙基、正-、異-、仲-或叔-丁基、甲氧基、乙氧基、正-或異-丙氧基、甲硫基、乙硫基、正-或異-丙硫基、甲基亞磺?；⒁一鶃喕酋；?、甲基磺?；蛞一酋；?、三氟甲基、三氟乙基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、二氟一氯甲氧基、三氟乙氧基、二氟甲硫基、二氟一氯甲硫基、三氟甲硫基、三氟甲基亞磺?；蛉谆酋；?、甲氨基、乙氨基、正-或異-丙氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、甲氧羰基、乙氧羰基，苯基、苯氧基、苯硫基、芐氧基、芐硫基或苯乙基氧基，或被各自任選被相同或不相同取代基取代一次或多次且各鍵連兩次的三亞甲基(丙-1，3-二基)、亞甲二氧基或亞乙二氧基取代，這些取代基是氟、氯、甲基、三氟甲基、乙基或正-或異-丙基。
n特別優(yōu)選表示數(shù)字0，1，2或3。
R3特別優(yōu)選表示氫、氨基、二甲氨基、甲硫基、甲基、乙基、正-或異-丙基、正-、異-或仲-丁基、戊基、己基、庚基、辛基、甲氧基、乙氧基、甲氧基甲基、羥甲基、1-羥基-1-乙基、2-羥基羰基-1-羥基-1-乙基、2-羥基羰基-1-乙基、3-羥基羰基-1-丙基和芐基。
通式(II)的外消旋N-酰胺要么是已知的，要么可根據(jù)已知的方法通過(guò)胺的?；饔弥苽?。因此，例如通式(II)的N-酰胺通過(guò)外消旋的胺與酰氯或酸酐反應(yīng)制得。
實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，作為生物催化劑，可考慮所有脂肪酶，只要它們適于選擇性地解離通式(II)N-酰胺的(R)-對(duì)映體?？商峒暗膶?shí)例有來(lái)自Candida antartica，Newlase F的脂肪酶，來(lái)自PseudomonasSP的脂肪酶和脂肪酶M。這些可用作生物催化劑的脂肪酶是已知的。
實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，脂肪酶或者以天然的形式或者以改性的(modifizierte)形式使用，例如為微膠囊形式或結(jié)合至無(wú)機(jī)或有機(jī)載體材料上的形式。適合的載體材料的例子有硅藻土、沸石、聚糖、聚酰胺和聚苯乙烯樹(shù)脂。
作為可用于實(shí)施本發(fā)明方法的有機(jī)稀釋劑，可為慣用于此類(lèi)反應(yīng)的所有溶劑?？蓛?yōu)選使用的溶劑為醇類(lèi)，如甲醇、乙醇、正-丁醇、苯甲醇和苯乙醇、還有醚類(lèi)、如四氫呋喃和二呫烷，此外還有烴類(lèi)，如戊烷和己烷，還有酰胺類(lèi)，如二甲基甲酰胺或其他強(qiáng)極性溶劑，如二甲基亞砜。最后，可起相轉(zhuǎn)移催化劑作用的乳化劑和表面活性物質(zhì)也可用作有機(jī)稀釋劑。優(yōu)選考慮的有烷芳基聚乙二醇醚、聚環(huán)氧乙烷脂肪酸酯、聚環(huán)氧乙烷脂肪醇醚和4-(1，1，3，3-四甲基丁基)-苯酚的乙氧基化物。
在實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，為調(diào)節(jié)所需的pH值，可采用所有的慣用緩沖體系。優(yōu)選使用的緩沖體系有磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉的混合物、檸檬酸鹽緩沖劑、氨基乙酸緩沖劑和其它適宜的酸和堿的混合物。
實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，pH可在一定范圍內(nèi)變化。一般，該方法在pH值為3.0至10.0，優(yōu)選4.0至9.0進(jìn)行。
實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，反應(yīng)溫度可在一定范圍內(nèi)變化。一般，該方法在溫度為0℃至80℃，優(yōu)選在20℃至70℃進(jìn)行。
實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，通式(II)的外消旋N-酰胺的濃度可在一定范圍內(nèi)變化。一般，反應(yīng)混合物中通式(II)的外消旋N-酰胺的濃度為1至200克/升，優(yōu)選2至100克/升。
實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，一般每1克通式(II)的外消旋N-酰胺使用0.01至200g，優(yōu)選0.05至100g的生物催化劑。按照慣常的方法實(shí)施該過(guò)程。一般是分離生物催化劑并通過(guò)利用蒸餾、分級(jí)結(jié)晶、酸-堿溶液萃取或利用其它方法將需要的化合物與余下的反應(yīng)混合物分開(kāi)。這樣，通式(I)的(R)-胺以游離狀態(tài)或者以鹽的形式得到，再由它們通過(guò)用堿處理而釋放出(R)-胺。此外，通式(II)的N-酰胺的(S)-對(duì)映體也可從反應(yīng)混和物中分離出來(lái)。后一種對(duì)映體可通過(guò)另外的化學(xué)反應(yīng)步驟，例如酸或堿水解或酶致方法轉(zhuǎn)化成游離的(S)-胺或它的酸加成鹽。
可按本發(fā)明的方法制備的通式(I)的(R)-胺是制備具有殺蟲(chóng)、殺真菌或除草特性的藥物或活性化合物的有價(jià)值的中間體(參見(jiàn)EP-A 0 519 211，EP-A 0 453 137，EP-A 0 283 879， EP-A 0 264 217和EP-A 0 341 475)。因此，例如通式(III)的殺真菌活性化合物可按以下方法得到
在酸結(jié)合劑存在下并在惰性有機(jī)稀釋劑存在下，使通式(I-1)的(R)-1-(4-氯苯基)-乙胺
與通式(IV)的2，2-二氯-1-乙基-3-甲基-1-環(huán)丙烷碳酰氯反應(yīng)。
用以下實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明方法實(shí)施。
制備實(shí)施例實(shí)施例1
將50mg外消旋N-〔1-(4-氯苯基)-乙基〕-乙酰胺和100mg的Candida antarctica的脂肪酶(Novozym435；E.C.no.3.1.1.3)的混合物用50mM的磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩沖劑的混合物水溶液配制成體積為10ml。將pH為8的反應(yīng)混合物在50℃振蕩168小時(shí)。然后離心5分鐘，之后分析液相。為此，從混合物中取出一定量并將其在-60℃凍結(jié)1小時(shí)，然后凍干。將干樣用甲醇提取1小時(shí)，同時(shí)加入分子篩并用渦流振搖器反復(fù)劇烈地處理。離心后得到的無(wú)水甲醇相用氣相色譜分析。將習(xí)用的反相RP18柱用于HPLC分析以確定外消旋胺和外消旋的N-乙酰胺的濃度，得到轉(zhuǎn)化率。
乙腈/20mM磷酸緩沖劑，pH為2.0，80∶20(v/v)的混合物用作流動(dòng)相。用波長(zhǎng)220nm來(lái)做UV檢測(cè)。對(duì)外消旋胺和N-乙酰胺用外標(biāo)法進(jìn)行校準(zhǔn)。采用毛細(xì)管氣相色譜法進(jìn)行手性分析。長(zhǎng)度為20m的毛細(xì)管玻璃柱用作柱。手性混合相用作分離材料，而用載氣壓力為0.4巴的H2作為載氣。采用溫度梯度為80℃//1分鐘iso//2.5℃/分鐘//150℃//10℃/分鐘//200℃。
運(yùn)用對(duì)映體過(guò)剩量(ee值)確定反應(yīng)的對(duì)映體選擇性，對(duì)映體過(guò)剩量(ee值)按下式計(jì)算ee=(R-S)(R+S)×100%]]>在該等式中，R和S表示生成的胺的各種對(duì)映體的濃度。
按照此方法，發(fā)現(xiàn)生成的(R)-1-(4-氯苯基)-乙胺的產(chǎn)率為43％，ee值為＞99％。實(shí)施例2
將3mg外消旋N-〔1-(4-氯苯基)乙基〕-乙酰胺和0.75mgCandida antarctica純化的游離脂肪酶B的混合物用50mM的磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩沖劑混合物的水溶液配制成體積為1.5ml。將pH為8的反應(yīng)混合物在30℃振蕩360小時(shí)。然后，以實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行并分析。按照此方法，發(fā)現(xiàn)生成的(R)-1-4-氯苯基-乙胺的產(chǎn)率為25％，ee值為＞99％。實(shí)施例3
將1.3mg外消旋N-〔1-(4-甲基苯基)-乙基〕-乙酰胺和15mg的Candida antarctica脂肪酶(Novozym 435；E.C.No.3.1.1.3)的混合物用50mM的磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩沖劑的混合物水溶液配制成體積為1.5ml。將pH為8的反應(yīng)混合物在50℃振蕩400小時(shí)。而后以實(shí)施例1所述的方法進(jìn)行并分析。按照此方法，發(fā)現(xiàn)生成的(R)-1-4-(甲基苯基)-乙胺的產(chǎn)率為32％，ee值為＞90％。實(shí)施例4
將1.2mg外消旋N-(1-苯基乙基)乙酰胺和15mg Candidaantarctica脂肪酶(Novozym435；E.C.No 3.1.1.3)的混合物用50mM的磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩沖劑的混合物的水溶液配制成體積為1.5ml。將pH為8的反應(yīng)混合物在50℃下振蕩400小時(shí)。而后按實(shí)施例1的方法進(jìn)行并分析。因此發(fā)現(xiàn)(R)-1-苯基-乙胺的產(chǎn)率為7.6％，ee值＞99％。實(shí)施例5
將200mg(0.88mmol)外消旋N-〔1-(4-氯苯基)-乙基〕甲氧基乙酰胺和50U Candida antarctica(Novozym 435)的混合物用50mM磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩沖劑混合物水溶液配至體積7ml。將pH8的反應(yīng)混合物在40℃振動(dòng)48小時(shí)。反應(yīng)混合物然后用二異丙基醚萃取3次。合并有機(jī)相，減壓濃縮。利用手性柱對(duì)剩余的殘余物進(jìn)行氣相色譜分析。由此發(fā)現(xiàn)反應(yīng)以轉(zhuǎn)化率48％進(jìn)行。生成的(R)-1-(4-氯苯基)-乙胺的ee值為99％。測(cè)定(S)-N-〔1-(4-氯苯基)-乙基〕-甲氧基乙酰胺的ee值為92％。
權(quán)利要求
1.制備通式(I)的(R)-胺的方法，
其中，R1表示任選取代的烷基，R2表示任取代的烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代環(huán)烯基、任選取代的芳基或任選取代的雜環(huán)基，而其中R1和R2不相同，和n表示數(shù)字0，1，2或3，其特征在于，使通式(II)的外消旋N-酰胺
其中R1、R2和n具有上述意義，和R3表示氫、氨基、二烷基氨基、烷硫基、任選取代的烷基或任選取代的烷氧基，其中含有多于1個(gè)碳原子的基團(tuán)中的碳鏈可被雜原子或雜原子基團(tuán)間隔，或R3表示任選取代的環(huán)烷基，任選取代的環(huán)烯基，任選取代的芳基或任選取代的雜環(huán)基，在水存在及任選在有機(jī)稀釋劑存在下，在pH為3.0至10.0，溫度為0℃至80℃的條件下，與適于解離通式(II)的N-酰胺的(R)-對(duì)映體的脂肪酶反應(yīng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于采用通式(II)的外消旋N-酰胺，其中R1表示具有1至8個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈烷基，其中烷基基團(tuán)可被相同或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、氰基、氨基、羥基、甲?；Ⅳ然?、氨基甲?；?、各自為直鏈或帶支鏈的各自具有1至6個(gè)碳原子的烷氧基或烷硫基；各自為直鏈或帶支鏈的各具有1至6個(gè)碳原子和1至13個(gè)相同或不同的鹵原子的鹵代烷氧基或鹵代烷硫基；。各自為直鏈或帶支鏈的在各自的烷基部分都具有1至6個(gè)碳原子的烷氨基、二烷氨基、烷基羰基、烷基羰氧基、烷氧羰基、烷基磺酰氧基、羥基亞氨基烷基或烷氧基亞氨基烷基；或者被鍵連兩次的具有1至6個(gè)碳原子的亞烷基或被鍵連兩次且具有1至4個(gè)碳原子的二氧亞烷基取代，其中后兩種基團(tuán)本身可一次或多次被相同或不同的基團(tuán)取代，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基，R2表示具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烷基，其中該基團(tuán)可被相同或不同的下列基團(tuán)取代一次至四次鹵素和/或具有1至4個(gè)碳原子的烷基，或R2表示具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烯基，其中該基團(tuán)可被相同或不同的下列基團(tuán)取代一次至四次鹵素和/或具有1至4個(gè)碳原子的烷基，或R2表示飽和或不飽和的，任選苯稠合的雜環(huán)基，在雜環(huán)中具有3至7個(gè)環(huán)原子，其中1至3個(gè)為相同或不同的雜原子，如氧、氮或硫，其中該基團(tuán)可被相同或不同的基團(tuán)取代一次至三次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的烷基、具有1至4個(gè)碳原子的烷氧基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至5個(gè)相同或不同的鹵原子的鹵代烷基，或R2表示具有6至10個(gè)碳原子的芳基，其中這些基團(tuán)中每個(gè)都可被相同或不同的下列基團(tuán)取代一次至五次鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、甲?；?、羧基、氨基甲酰基、硫代氨基甲?；桓髯詾橹辨溁驇еф湹耐榛?、烷氧基、烷硫基、烷基亞磺?；蛲榛酋；?，它們各自具有1至6個(gè)碳原子；各自為直鏈或帶支鏈的烯基或烯氧基，它們各自都具有2至6個(gè)碳原子；各自為直鏈或帶支鏈的鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代烷硫基、鹵代烷基亞磺酰基或鹵代烷基磺?；?，它們各自都具有1至6個(gè)碳原子和1至13個(gè)相同或不同的鹵原子；各自為直鏈或帶支鏈的鹵代烯基或鹵代烯氧基，它們各自都具有2至6個(gè)碳原子和1至13相同或不同的鹵原子；各自為直鏈或帶支鏈的烷基氨基、二烷基氨基、烷基羰基、烷基羰氧基、烷氧羰基、烷基磺酰氧基、羥基亞氨基烷基或烷氧基亞氨基烷基，它們?cè)诟髯缘耐榛糠侄季哂?至6個(gè)碳原子；苯基、苯氧基、苯硫基、芐氧基、芐硫基或苯乙基氧基，或被具有3或4個(gè)碳原子的鍵鏈兩次的亞烷基或被具有1或2個(gè)碳原子的鍵鏈兩次的二氧亞烷基取代，其中后兩種基團(tuán)本身可被相同或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基，n表示數(shù)字0，1，2，或3，和R3表示氫、氨基、在每個(gè)烷基部分具有1至6個(gè)碳原子的二烷基氨基、具有1至6個(gè)碳原子的烷硫基、具有1至10個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基或具有1至6個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷氧基，其中烷基基團(tuán)或烷氧基基團(tuán)可被相同的或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、甲酰基、羧基、氨基甲酰基；各自為直鏈或帶支鏈的烷氧基、烷硫基、烷基亞磺?；蛲榛酋；?，它們各自都具有1至6個(gè)碳原子；各自為直鏈或帶支鏈的烯基或烯氧基，它們各具有2至6個(gè)碳原子，各自為直鏈或帶支鏈的鹵代烷氧基、鹵代烷硫基、鹵代烷基亞磺?；螓u代烷基磺酰基，它們各自具有1至6個(gè)碳原子和1至13個(gè)相同或不同的鹵原子；各自為直鏈或帶支鏈的烷基氨基、二烷基氨基、烷基羰基、烷基羰氧基、烷氧羰基、烷基磺酰氧基、羥基亞氨基烷基或烷氧基亞氨基烷基，它們?cè)诟髯缘耐榛糠志哂?至6個(gè)碳原子；或被具有1至6個(gè)碳原子的鍵鏈二次的亞烷基或具有1至4個(gè)碳原子的鍵鏈二次的二氧亞烷基取代，其中后兩種基團(tuán)本身可被相同或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基，或被苯基取代，或R3表示具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烷基，其中這些基團(tuán)可被相同或不同的鹵素和/或具有1至4個(gè)碳原子的烷基取代一次至四次，或R3表示具有3至7個(gè)碳原子的環(huán)烯基，其中這些基團(tuán)可被相同或不同的鹵素和/或具有1至4個(gè)碳原子的烷基取代一次至四次，或R3表示具有3至7個(gè)環(huán)原子的飽和或不飽和的雜環(huán)基，其中各有1至3個(gè)相同或不同的雜原子，如氧、氮或硫，其中該基團(tuán)可被相同或不同的基團(tuán)取代一次至三次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的烷基、具有1至4個(gè)碳原子的烷氧基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至5個(gè)相同或不同的鹵原子的鹵代烷基，或R3表示具有6至10個(gè)碳原子的芳基，其中這些基團(tuán)的每一個(gè)都可被相同或不同的基團(tuán)取代一次至五次，這些基團(tuán)是鹵素、氰基、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基，具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基，具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷氧基或烷硫基，具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷氧基或鹵代烷硫基，苯基、苯氧基、苯硫基、芐氧基、芐硫基或苯乙基氧基，或被具有3或4個(gè)碳原子的鍵鏈兩次的亞烷基或被具有1或2個(gè)碳原子的鍵鏈兩次的二氧亞烷基取代，其中后兩種基團(tuán)本身可被相同或不同的基團(tuán)取代一次或多次，這些基團(tuán)是鹵素、具有1至4個(gè)碳原子的直鏈或帶支鏈的烷基和/或具有1至4個(gè)碳原子和1至9個(gè)相同或不同的鹵原子的直鏈或帶支鏈的鹵代烷基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于將下列通式的化合物用作外消旋N-酰胺。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于用來(lái)自Candida antartica，Newlase F的脂肪酶，來(lái)自Pseudomonas SP.的脂肪酶或脂肪酶M作為生物催化劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于pH為4.0至9.0時(shí)進(jìn)行操作。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于在溫度為20℃至70℃時(shí)進(jìn)行操作。
全文摘要
公開(kāi)了制備通式(Ⅰ)的(R)－胺的新方法,其中R
文檔編號(hào)C12P41/00GK1177382SQ96192310
公開(kāi)日1998年3月25日 申請(qǐng)日期1996年3月1日 優(yōu)先權(quán)日1995年3月2日
發(fā)明者H·斯密特, A·菲斯徹爾, P·菲斯徹爾, R·D·施密德, U·斯特澤爾 申請(qǐng)人:拜爾公司