本發(fā)明屬于多酚的制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及的是一種石榴渣制備多酚的方法。

背景技術(shù)：

多酚類物質(zhì)是指分子中具有多個(gè)酚羥基的植物酚類。石榴渣果實(shí)內(nèi)有很高含量的天然多酚類化合物，植物多酚類物質(zhì)具有很強(qiáng)的抗氧化能力，是相同劑量下維生素 C 的抗氧化能力的 20 倍，因此可有效的清除人體內(nèi)的氧自由基，從而減少氧自由基對(duì)正常細(xì)胞的破壞，起到保護(hù)作用。同時(shí)多酚類化合物還可以預(yù)防潛在的致癌性物質(zhì)在人體內(nèi)的形成和聚集，改善新陳代謝，防癌作用顯著。此外石榴渣果實(shí)中一些特殊結(jié)構(gòu)的多酚類物質(zhì)具有某些特殊的功效。

多酚在食品工業(yè)上的應(yīng)用日益受到關(guān)注，因此對(duì)多酚這種天然物質(zhì)的研究和開發(fā)就顯得越來越急切。多酚類物質(zhì)雖然廣泛存在于植物源食品中，但是它在不同食品中的含量和結(jié)構(gòu)有很大差異。而且植物中多酚的含量會(huì)受到多種因素的影響，如果實(shí)和蔬菜的成熟程度、存儲(chǔ)條件和食品加工過程的溫度等。目前想補(bǔ)充多酚，只能通過飲食的方式獲取。

植物多酚可溶于水及甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮等有機(jī)溶劑，不溶于氯仿，在酸性介質(zhì)中穩(wěn)定，在堿性介質(zhì)中易氧化褐變。目前國多酚粗品的提取的方法主要有水和有機(jī)溶劑提取法、超臨界流體萃取法、超聲波浸提方法、微波浸提法離子沉淀法、樹脂吸附分離法、低溫純化酶法等方法。溶劑提取法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備。與用水提取相比，有機(jī)溶劑浸提法能耗較小、浸提率較高，而且能有效減少浸提過程中多酚的變性，但有機(jī)溶劑的殘留和對(duì)環(huán)境的壓力問題一直制約著該法的廣泛應(yīng)用。目前已有多種有機(jī)溶劑被用于植物多酚的浸提，其中使用最多的為乙醇。采用該種提取劑，可以延緩多酚氧化，在一定程度上提高了多酚的制取率，而且相較于其他有機(jī)溶劑更安全廉價(jià)。

目前，石榴多酚類成分的分離純化研究公開的資料不多，沒有適合工業(yè)化生產(chǎn)的資料。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種石榴渣制備多酚的方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下 ：

一種石榴渣制備多酚的方法，包括如下步驟 ：

（1）按比例將 150g 的石榴渣干粉與 700-800mL 的乙醇混合，攪拌，萃取 3-5h，靜置、過濾，萃取 1-3 次，合并萃取液，將所述萃取液在 35-45℃蒸發(fā)干燥 ；

（2）按比例為 1g ：4-6mL 的比例，將步驟（1）獲得的產(chǎn)物與石油醚混合，萃取 2-4次，合并上清液并回收石油醚 ；按比例為 1g ：4-6mL 的比例將萃取物加入乙酸乙酯，萃取 2-4次，合并上清液在 35-45℃蒸發(fā)，蒸發(fā)出乙酸乙酯，固體凍結(jié)后冷凍干燥得石榴渣多酚粗提物。

本發(fā)明的方法過程簡單、能耗低，分離條件溫和、樣品回收率高、實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性高、設(shè)備簡便經(jīng)濟(jì)。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的實(shí)施例是為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠更好地理解本發(fā)明，并不能對(duì)本發(fā)明作任何限制。

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。

實(shí)施例 1

一種石榴渣制備多酚的方法，包括如下步驟 ：

（1）按比例將 150g 的石榴渣干粉與 750mL 的乙醇混合，攪拌，萃取 4h，靜置、過濾，萃取2次，合并萃取液，將萃取液在 40℃蒸發(fā)干燥 ；所述乙醇為體積比為99.0 ：1.0 的甲醇和濃鹽酸混合液 ；

（2）按比例為1g：5mL 的比例，將步驟（1）獲得的產(chǎn)物與石油醚混合，萃取 3 次，合并上清液并回收石油醚 ；按比例為 1g ：5mL 的比例將萃取物加入乙酸乙酯，萃取 3 次，合并上清液在 40℃蒸發(fā)，蒸發(fā)出乙酸乙酯，固體凍結(jié)后冷凍干燥得石榴渣多酚粗提物。提取率91.2%。

石榴渣多酚粗提物可以采用多種公知的方法進(jìn)行提純，下面的方法不對(duì)本發(fā)明作為限定 ：

（1）按比例，將 100mg 石榴渣多酚粗提物溶于 50mL 乙醇中，用 45μm 有機(jī)濾膜過濾；

（2）濾液用恒流泵泵入預(yù)先處理好并填充好的 AB-8 大孔吸附樹脂中，待提取物溶液充滿樹脂床時(shí)停泵 15min，用酸化蒸餾水進(jìn)行沖洗 35min，用乙醇解吸附，當(dāng)采集器在280nm 處開始出現(xiàn)吸收峰時(shí)開始收集洗脫液直至吸收峰結(jié)束 ；

（3）重復(fù)步驟（2）2 次，合并洗脫液 ；洗脫液在 40℃蒸發(fā)，蒸發(fā)到不能再蒸發(fā)出甲醇為止，-30℃溫度下凍結(jié)，冷凍干燥 24h，得到純化石榴渣多酚。

酸化蒸餾水為體積比為 99.5 ：0.5 的蒸餾水和濃鹽酸混合液。

實(shí)施例 2

（1）按比例將 150g 的石榴渣干粉與 700mL 的乙醇混合，攪拌，萃取 5h，靜置、過濾，萃取 1 次，將萃取液在 35℃蒸發(fā)干燥 ；

（2）按比例為 1g ：4mL 的比例，將步驟（1）獲得的產(chǎn)物與石油醚混合，萃取 4 次，合并上清液并回收石油醚 ；按比例為 1g ：4mL 的比例將萃取物加入乙酸乙酯，萃取 4 次，合并上清液在 35℃蒸發(fā)，蒸發(fā)出乙酸乙酯，固體凍結(jié)后冷凍干燥得石榴渣多酚粗提物。提取率89.9%。

石榴渣多酚粗提物可以采用多種公知的方法進(jìn)行提純，下面的方法不對(duì)本發(fā)明作為限定：

（1）按比例，將 100mg 石榴渣多酚粗提物溶于 45mL 乙醇中，用 45μm 有機(jī)濾膜過濾；

（2）濾液用恒流泵泵入預(yù)先處理好并填充好的 AB-8 大孔吸附樹脂中，待提取物溶液充滿樹脂床時(shí)停泵 10min，用酸化蒸餾水進(jìn)行沖洗 35min，用乙醇解吸附，當(dāng)采集器在280nm 處開始出現(xiàn)吸收峰時(shí)開始收集洗脫液直至吸收峰結(jié)束 ；

（3）重復(fù)步驟（2）2 次，合并洗脫液 ；洗脫液在 40℃蒸發(fā)，蒸發(fā)到不能再蒸發(fā)出甲醇

為止，-25℃溫度下凍結(jié)，冷凍干燥 28h，得到純化石榴渣多酚。

酸化蒸餾水為體積比為 99.5 ：0.5 的蒸餾水和濃鹽酸混合液。

實(shí)施例 3

一種石榴渣制備多酚的方法，包括如下步驟 ：

（1）按比例將 150g 的石榴渣干粉與 800mL 的乙醇混合，攪拌，萃取 3h，靜置、過濾，萃取 3 次，合并萃取液，將萃取液在 45℃蒸發(fā)干燥 ；

（2）按比例為 1g ：6mL 的比例，將步驟（1）獲得的產(chǎn)物與石油醚混合，萃取 2 次，合并上清液并回收石油醚 ；按比例為 1g ：6mL 的比例將萃取物加入乙酸乙酯，萃取 2 次，合并上清液在 45℃蒸發(fā)，蒸發(fā)出乙酸乙酯，固體凍結(jié)后冷凍干燥得石榴渣多酚粗提物。提取率90.6%。

石榴渣多酚粗提物可以采用多種公知的方法進(jìn)行提純，下面的方法不對(duì)本發(fā)明作為限定：

（1）按比例，將 100mg 石榴渣多酚粗提物溶于 55mL 乙醇中，用 45μm 有機(jī)濾膜過濾；

（2）濾液用恒流泵泵入預(yù)先處理好并填充好的 AB-8 大孔吸附樹脂中，待提取物溶液充滿樹脂床時(shí)停泵 15min，用酸化蒸餾水進(jìn)行沖洗 30min，用乙醇解吸附，當(dāng)采集器在280nm 處開始出現(xiàn)吸收峰時(shí)開始收集洗脫液直至吸收峰結(jié)束 ；

（3）重復(fù)步驟（2）1 次，合并洗脫液 ；洗脫液在 40℃蒸發(fā)，蒸發(fā)到不能再蒸發(fā)出甲醇

為止，-35℃溫度下凍結(jié)，冷凍干燥 20h，得到純化石榴渣多酚。

酸化蒸餾水為體積比為 98.5 ：1.5 的蒸餾水和濃鹽酸混合液。