一株脫氨除臭菌株qdn01及其在生物除臭中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一株脫氨除臭菌株QDN01及其在生物除臭中的應用。本發(fā)明從草根黑土中篩選出一株脫氨除臭菌株，并對其生物學特性及對雞糞的脫氮情況進行了研究。通過生理生化特性及16SrDNA序列分析，該脫氨除臭菌株被鑒定為霍氏腸桿菌屬(Enterobacter?hormaechei)，命名為Enterobacter?hormaechei?QDN01，保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址在武漢大學，保藏號為CCTCC?NO:M2013670。研究表明，本發(fā)明分離出的QDN01菌株的生物特性穩(wěn)定，菌株繁殖能力快，特別是在添加了淀粉的雞糞中能夠迅速生長，生長量達到2500億cfu/ml，同時能夠很好的脫氮除臭，與現有技術相比具有很明顯的優(yōu)勢。因此，本發(fā)明的提出為家禽糞便的無害化生物處理提供了非?？尚袑嵱玫募夹g方案，具有良好的發(fā)展前景。
【專利說明】一株脫氨除臭菌株QDN01及其在生物除臭中的應用

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種脫氨除臭菌，還涉及該菌株在家禽糞便以及工業(yè)廢水的無害化生 物處理，特別是對家禽糞便進行脫氨除臭中的應用。本發(fā)明屬于生物除臭【技術領域】。

【背景技術】
[0002] 隨著全球工農產品的迅猛發(fā)展，人類生活水平的不斷提高，臭氣也隨之從產生的 廢棄物中而來。惡臭污染是一種感知污染，它所存在的有害氣體直接影響了人們的生活與 身體健康，所以惡臭污染己公認為是僅次于噪聲污染的六大公害之一。去除臭氣的方法很 多，而微生物去除臭氣已經成為高效，環(huán)保，低耗的手段之一，并且在環(huán)境污染中發(fā)揮出巨 大的潛力。
[0003] 造成惡臭的主要原因是畜禽的糞便通過發(fā)酵和含硫蛋白分解而產生的氨氣、硫化 氫、甲硫醚、甲烷等有毒有害氣體，并且造成空氣中污染度升高，空氣質量下降。為解決這一 問題，大量的學者進行了一系列的研究。
[0004] 根據惡臭氣體凈化方法的特點，可把凈化惡臭污染物的方法分為：（1)物理法，如 掩蔽中和法、擴散稀釋法、冷凝法、水吸收法、吸附法；（2)化學法，如化學洗滌發(fā)、燃燒法、 氧化法等；（3)生物法，如生物過濾法、生物吸收法、土壤堆肥法等。
[0005] 生物除臭法是近年來開發(fā)處理惡臭氣體的一種方法，它是利用微生物的生物化學 作用，將惡臭物質轉化為無臭或少臭的物質，以達到去除臭味的目的。原理是惡臭物質首先 被溶于水中，而后被微生物吸附吸收進入微生物體內，作為其營養(yǎng)物質被分解，從而生成無 惡臭的物質。
[0006] 生物脫臭過程大致有如下三個階段：
[0007] -階段，惡臭氣體由氣態(tài)轉移至液態(tài)中的過程，該過程遵循亨利（Henrry)法則。
[0008] 二階段，惡臭氣體的水溶液被微生物菌群吸附并吸收進入生物體內，而使惡臭成 分從水中去除，其速度接近一般化學反應的速度。
[0009] 三階段，被微生物菌體攝取的惡臭物質，成為微生物的能源，通過微生物新陳代謝 被分解、利用和變成細胞物質而去除。胺類、氨氣等含氮惡臭成分，一部分用于構成微生物 菌體蛋白質，還有一部分轉化為亞硝酸或硝酸。酪酸、苯酚、甲醛等不含氮的被分解為〇) 2和 H20等。含硫類的惡臭物質由真菌、霉菌與硫氧化細菌等的作用而被氧化成S、S0廣、S04 2、 成為微生物能量的供給源。生物除臭法可分為生物過濾法（固著態(tài)）、生物吸收法（懸浮 態(tài)）、土壤堆肥法和生物脫臭劑等。
[0010] 過濾法原理是使收集到的廢氣在適宜的條件下通過長滿細菌真菌放線菌等微生 物的固體載體（填料），氣味物質先被填料吸收，然后被填料上的微物氧化分解為二氧化碳 和水等物質，從而完成廢氣的除臭過程。該方法具有設備簡單，運行費用低等優(yōu)點；但是反 應條件不易控制，占地面積較大。適用于處理大氣量、低濃度的臭氣。
[0011] 吸收法也稱生物洗滌法，是先利用洗滌的方法，將惡臭成份轉移到水中，然后再采 用活性污泥進行受污染水的微生物處理，有效地吸附分解臭氣成分。該法反應條件易控制， 運行費用低，但是需要提供大量氧氣才能維持高效率運行。
[0012] 土壤堆肥法的原材料主要是污泥、糞便、垃圾等物質，將其混合后通過好氧發(fā)酵熱 處理從而抑制臭氣的產生。該法的除臭效率較高，但周期較長。
[0013] 生物脫臭劑一般是指從污水處理廠的活性污泥中或者土壤中馴化篩選高效的脫 臭微生物用于臭氣的治理。根據微生物除臭原理而開發(fā)的生物制劑是將篩選的高效微生物 固定在某種載體上，當惡臭物質通過時即可達到脫除的目的
[0014] 養(yǎng)殖業(yè)中危害畜禽正常生長和影響人類健康的主要臭氣成分是NH3和H2S，因此 這兩種氣體常作為養(yǎng)殖場環(huán)境污染的主要檢測指標，也是衡量微生物除臭劑效果的重要指 標。常見的能利用氨的微生物主要有硝化細菌等。硝化細菌（nitrifying bacteria)是無 機化能自養(yǎng)型微生物，以〇)2作為碳源合成有機物質，在自然界氮素循環(huán)中起著非常重要的 作用。它們所進行的硝化作用能把氨氮轉化為亞硝酸鹽，再把亞硝酸鹽轉化為硝酸鹽。將 NH3氧化為Ν(Γ的過程是氨氧化菌和亞硝酸氧化菌兩類細菌連續(xù)作用的結果。氨氧化菌把 氨氮轉化為亞硝酸鹽，亞硝酸氧化菌再將亞硝酸鹽氧化為硝酸鹽。這兩類細菌都屬于硝化 桿菌科。硝化細菌在自然界氮素循環(huán)中起著非常重要的作用。硝化細菌能夠通過硝化作用 把氨氮轉化為亞硝酸鹽，再進一步把亞硝酸鹽轉化為硝酸鹽，是含氮物質徹底礦化的重要 步驟，在生態(tài)系統(tǒng)的氮循環(huán)中有著重要的作用。
[0015] 世紀70年代后，各國相繼在生物除臭領域開展了廣泛的研究，其中的德國和日本 取得的成果最為顯著。從上世紀的80年代中期開始，針對特定惡臭污染物的高效脫臭菌被 陸續(xù)發(fā)現，應用于實際的脫臭系統(tǒng)的背景菌群中，可以形成脫臭效率更高的優(yōu)勢菌群落。目 前對含硫惡臭治理研究比較多的是日本，日本工業(yè)技術院微生物技術研究所發(fā)現的"硫桿 菌屬硫化細菌ΤΚ-Μ"對硫類惡臭物質具有非常強的分解能力。大野勝史利用從土壤中分 離到的對油脂廢水有較強分解能力的枯草芽孢桿菌，該菌對油脂的臭味具有較好的抑制效 果，現已經制成除臭劑產品。栗田工業(yè)與東京工業(yè)大學開發(fā)利用泥炭作載體的亞硝化胞菌 屬等微生物除臭劑，將此填充與反應槽中，可去除硫化氫、氨氣能惡臭成分。日本微生物技 術研究所將污水廠活性污泥在30?40°C下干燥后粉碎，制成除臭劑，填充至柱管中，當硫 化氫、硫醇等惡臭通過時可具有很好的去除效果。
[0016] 微生物具有來源廣泛、繁殖迅速、容易培養(yǎng)、對環(huán)境的適應性強和易變異等特性， 在一定條件下加以馴化，可以在很多方面都有較好的應用前景Paneray等最早于1957年開 始"利用土壤微生物處理H2S廢氣"的研究 [94°]，隨后的20型細胞固定化技術（如包埋法 等）運用到生物處理裝置中，可望使惡臭的治理技術尤其是生物治理技術出現突破，這也 是環(huán)保工作者今后努力的一個方向。
[0017] 本發(fā)明主要通過選擇性培養(yǎng)馴化出降解氨氮與硝態(tài)氮的菌株，并研究其生物特性 與脫氮除臭的效果，從而提供了一種新的微生物除臭菌劑。


【發(fā)明內容】

[0018] 本發(fā)明的目的之一是通過選擇性培養(yǎng)馴化出能夠有效降解氨氮與硝態(tài)氮的脫氨 除臭菌株；
[0019] 本發(fā)明的目的之二是提供所述的菌株在生物脫臭劑中的應用；
[0020] 本發(fā)明的目的之三是提供一種除臭菌劑，其含有如上所述的脫氨除臭菌株；
[0021] 本發(fā)明的目的之四是提供一種對雞糞進行脫氨除臭的方法。
[0022] 本發(fā)明的目的是通過以下技術手段實現的：
[0023] 本發(fā)明從草根黑土中篩選出一株脫氨除臭菌株，并對其生物學特性及對雞糞的脫 氮情況進行了研究。通過生理生化特性及16SrDNA序列分析，該脫氨除臭菌株被鑒定為霍 氏腸桿菌屬（Enterobacter hormaechei)，命名為 Enterobacter hormaechei QDN01，保藏 在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址在武漢大學，保藏號為CCTCC N0:M2013670,保藏日期為 2013年12月17日。
[0024] 本發(fā)明發(fā)明人考察了 QDN01菌株的生長曲線以及在不同溫度（15°C?40°C )、PH 值（?!1 = 5?9)下菌株的生長情況，在4811內培養(yǎng)基中不同(：/^(15:1?73:1)下菌株的生 長情況，以及硝化與異養(yǎng)硝化72h菌株對氨氮與硝基氮的降解情況。研究顯示，QDN01菌株 最適合的生長溫度為30°C，脫氨菌株最適生長pH為8左右，培養(yǎng)基C/N不同時菌株以25:1 生長為最佳，QDN01菌株培養(yǎng)30-32h時菌數量基本穩(wěn)定，對氨氮的去除率達到64. 75%，對 硝基氮的去除率達到70. 62%。此外，將本發(fā)明的菌株用于雞糞的除臭，結果表明本發(fā)明分 離出的QDN01菌株在添加了淀粉的雞糞中能夠迅速生長，生長量能夠達到2500億cfu/ml， 同時能夠很好的對雞糞進行脫氮除臭，相較于現有技術具有明顯優(yōu)勢。
[0025] 因此，本發(fā)明還提出了所述的脫氨除臭菌株在生物除臭中的應用。
[0026] 在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的生物除臭包括去除家畜糞便中的異味以及工業(yè)廢水 中的惡臭，更優(yōu)選的，所述家畜糞便為雞糞。
[0027] 為了方便使用，本發(fā)明通過將含有以上所述的脫氨除臭菌株QDN01的菌液吸附在 膨潤土上，同時添加紅糖后得到了一種生物除臭菌劑。
[0028] 在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的生物除臭菌劑是通過將含有以上所述的脫氨除臭菌 株QDN01的菌液吸附在于膨潤土上制成1.0X10 12個（菌）/g的菌制劑，同時按質量比添加 1 %的市售紅糖后得到的。
[0029] 實踐證明，將所述的除臭菌劑均勻拋灑在養(yǎng)殖籠下方的雞糞排泄處（雞糞用淀粉 調節(jié)C/N比為20-30/1)，使用量為200g菌劑/kg雞糞淀粉，3天撒施1次，通過示范點養(yǎng)殖 人員和志愿者進行現場感官評價，4個示范點的養(yǎng)殖舍內空氣質量明顯好轉，嗆人的氨臭味 消失，腐臭味降低，志愿者表示能在養(yǎng)殖室內停留的時間延長了。綜合現場評價結果，該菌 劑能夠有效降低養(yǎng)殖舍內的氨氣含量，提升空氣質量。同時針對示范點雞蛋產量進行了 20 天的監(jiān)測，4個監(jiān)測點施用本發(fā)明的除臭菌劑后，雞蛋產量平均增產4-6%，增產幅度較大， 說明雞舍內的空氣質量提升有利于雞身體狀況的提升，從而提升了雞蛋產量。
[0030] 因此，本發(fā)明提出了所述的生物除臭菌劑在生物除臭中的應用。
[0031] 其中，所述的生物除臭包括去除家畜糞便中的異味以及工業(yè)廢水中的惡臭，優(yōu)選 的，所述家畜糞便為雞糞。
[0032] 進一步的，本發(fā)明還提出了一種對雞糞進行脫氨除臭的方法，其特征在于包括以 下步驟：
[0033] (1)將含有本發(fā)明所述的脫氨除臭菌株QDN01的菌液吸附在膨潤土上，同時添加 紅糖，得到生物除臭菌劑；
[0034] (2)采用淀粉調節(jié)雞糞C/N比為20-30:1 ;
[0035] (3)將步驟⑴的除臭菌劑均勻拋灑在經步驟⑵處理后的雞糞中，3天撒施1 次；
[0036] (4)評價除臭效果。
[0037] 在本發(fā)明中，優(yōu)選的，將含有所述的脫氨除臭菌株QDN01的菌液吸附在于膨潤土 上制成1. 0 X 1012個/g的菌制劑，同時按質量比添加1 %的市售紅糖，得到除臭菌劑。
[0038] 在本發(fā)明中，優(yōu)選的，采用淀粉調節(jié)雞糞C/N比為25:1，將步驟（1)的除臭菌劑按 照使用量為200g菌劑/m 3(雞糞淀粉）均勻拋灑在經步驟（2)處理后的雞糞中。
[0039] 以上研究表明，本發(fā)明分離出的QDN01菌株的生物特性穩(wěn)定，菌株繁殖能力快，脫 氨除臭能力佳，，特別是在添加了淀粉的雞糞中能夠迅速生長，生長量達到2500億cfu/ml， 同時能夠很好的脫氮除臭，與現有技術相比具有很明顯的優(yōu)勢。本發(fā)明的提出為家禽糞便 的無害化生物處理提供了非?？尚袑嵱玫募夹g方案，具有良好的發(fā)展前景。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0040] 圖1為QDN01菌株在N1選擇培養(yǎng)基上生長24h稀釋10-8的菌落形態(tài)；
[0041] 圖2為脫氨除臭菌的系統(tǒng)進化樹（矢量圖）；
[0042] 圖3為QDN01菌株的生長曲線；
[0043] 圖4為溫度對QDN01菌株生長的影響；
[0044] 圖5為PH對QDN01菌株生長的影響；
[0045] 圖6為C/N對QDN01菌株生長的影響；
[0046] 圖7為QDN01菌株在0D600下生長與脫氨氮的變化情況；
[0047] 圖8為QDN01菌株在0D600下生長與脫硝態(tài)氮的變化情況；
[0048] 圖9為QDN01菌株在血球計數板下觀察到的細菌個數；
[0049] 圖10為在三種不同碳氮比下的雞糞淀粉中PH變化；
[0050] 圖11為加入相同量QDN01菌株在三種不同碳氮比下的雞糞淀粉中PH變化；
[0051] 圖12為不加入QDN01菌株的雞糞淀粉中脫臭效果的比較；
[0052] 圖13為加入QDN01菌株的雞糞淀粉中脫臭效果的比較；
[0053] 圖14為不加入QDN01菌株的雞糞淀粉中銨態(tài)氮含量隨時間變化；
[0054] 圖15為加入QDN01菌株的雞糞淀粉中銨態(tài)氮含量隨時間變化；
[0055] 圖16為不加入QDN01菌株的雞糞淀粉中硝態(tài)氮含量隨時間變化；
[0056] 圖17為加入QDN01菌株的雞糞淀粉中硝態(tài)氮含量隨時間變化；
[0057] 圖18為QDN01菌株的雞糞淀粉中生長曲線；
[0058] 圖19為不同QDN01菌株接入量的雞糞淀粉中菌體個數變化；
[0059] 圖20為不同QDN01菌株接入量的雞糞淀粉中菌懸液在D600吸收度變化。

【具體實施方式】
[0060] 下面結合具體實施例來進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨著描述而 更為清楚。但這些實施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構成任何限制。本領域技術 人員應該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術方案的細節(jié)和形式 進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護范圍內。
[0061] 實施例1脫氨除臭菌株QDN01的分離馴化與鑒定
[0062] 1.材料與方法
[0063] 1· 1培養(yǎng)基
[0064] 含氨富集培養(yǎng)基（Ν1選擇培養(yǎng)基）：蔗糖36. 00g，KH2P042. 00g，MgS040 . 50g， NaC12. 00g，氨水 10. 00ml，FeS040. 10g，1% ZnS045. 0ml，瓊脂 20g，蒸餾水 1000ml，pH = 7. 0， 121°C下滅菌 20min，C/N 為 7:1。
[0065] 液體NH3選擇性培養(yǎng)基（N2培養(yǎng)液）：N1培養(yǎng)基不含瓊脂，C/N為7:1。
[0066] 反硝化培養(yǎng)基（DM 培養(yǎng)基）：C6H5Na307 · 2Η203· 00g，ΚΝ030 · 7210g，ΚΗ2Ρ041· 0g， MgS04 · 7H201.0g，蒸餾水定容至 1000ml，調節(jié)至 PH = 7.0，121°C 滅菌 20min。
[0067] 異養(yǎng)硝化培養(yǎng)基：C6H5Na307 · 2H205.0g，（NH4)2S040 . 45g，K2HP040.25g， FeS04 · 7Η200· 0025g，NaC10. 125g，MgS040. 06g，MnS04 ·Η200· 001g，蒸餾水定容至 1000ml，調 節(jié)至 PH = 7· 0,121°C 滅菌 20min。
[0068] 1. 2脫氨除臭菌株的分離馴化
[0069] 取濕地中含氧量較高的草根黑土（Jennifer G. Allen, Marc W. Beutel, Douglas R. Call, et al. Effects of oxygenation on ammonia oxidation potential and microbial diversity in sediment from surface-flow wetland mesocosms[J]. Bioresource Technology, 2010, 101 (4) : 1389-1392.) lOOg 與 500ml 蒸饋水放入 1000ml 維 形瓶中150r/mim，振蕩lh，靜止；將50ml上清液放入150ml N2培養(yǎng)液中，130r/min，30°C恒 溫振蕩3d ;再取10ml渾濁液直接加入190ml的N2培養(yǎng)液中，每3d重復一次，反復8次。得 富集的菌液用移液槍取lml稀釋到10'10'10'ΚΓ 9分別取0. lml涂布于N1選擇培養(yǎng)基 上，30°C恒溫培養(yǎng)48h，選擇形貌不同的單一菌落進行反復的馴化培養(yǎng)。
[0070] 1. 3菌株形態(tài)結構觀察
[0071] 在N1選擇培養(yǎng)基上觀察菌落的形態(tài)、邊緣、顏色、透明度等，并采用番紅染色法在 光學顯微鏡下拍照觀察菌體的形態(tài)和大小。
[0072] 1. 4生理生化試驗
[0073] 采用革蘭氏染色，甲基紅試驗，V-P實驗，吲哚試驗，H2S產生試驗，賴氨酸脫羧酸， 精氨酸雙水解酶，氧化酶試驗，葡萄糖產酸，乙酸鹽利用，檸檬酸鹽，苯丙氨酸脫氨酶，明膠 液化試驗，脲酶水解試驗，氧化-發(fā)酵試驗，鳥酸氨脫羧酶，芽孢染色，葡萄糖產氣，硝酸鹽 還原，運動性試驗，丙二酸試驗等對脫氨除臭菌進行生理生化鑒定。具體實驗方法參照《伯 杰細菌手冊》第八版。
[0074] 1. 5菌株16SrDNA的序列分析
[0075] 取對數期的菌液，離心后收集菌體，提取基因組總DNA，根據細菌16SrDNA 的序列設計以及合成引物，正向引物：5' -AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'，反向引物： 5，-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3，。PCR 反應體系：10XEx Taq buffer2.0yl，2.5mM dNTP Mixl.6 μ 1,5p Primer1 0.8 μ 1,5p Primer2 0.8 μ 1, TemplateO. 5 μ 1,5u Ex TaqO. 2 μ 1, ddH2014. 1 μ 1，Total volume20y 1。PCR 反應條件：95°C變性 5min 后進入循環(huán)：95°C 30s -55°C30s -72°C 1.5min -72°C 10min，共24個循環(huán)；最后在10°C下退火基因擴增的 產物經純化后由上海美吉生物公司測序，將所得的序列與Genbank中核酸數據庫中已有的 16SrDNA序列建立系統(tǒng)進化樹進行相似性比對分析。
[0076] 1. 6環(huán)境條件對脫氨除臭菌株生長的影響
[0077] 1. 6. 1脫氨除臭菌株的生長曲線：取新鮮培養(yǎng)的菌體種子液2ml轉接于98ml的N2 液體培養(yǎng)基中，30°C恒溫振蕩（130r/min)，分別在 0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、 26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48h 波長 600nm 下測定菌株生長的 0D 值，以 0D 值的 變化研究菌株的生長情況。
[0078] 1. 6. 2溫度對菌株生長的影響：取新鮮培養(yǎng)的菌體種子液2ml轉接于98ml的N2液 體培養(yǎng)基中，分別置于15、20、25、30、35、401：溫度下振蕩（13017^11)培養(yǎng)2411后，于60011111 波長處測定菌體的光密度值（〇D_nm)，以研究溫度對菌株生長的影響。
[0079] 1. 6. 3pH對菌株生長的影響：取新鮮培養(yǎng)的菌體種子液2ml轉接于98ml的N2液 體培養(yǎng)基中，分別置于pH為7、7· 5、8、8· 5、9下振蕩（130r/min)培養(yǎng)24h后，于600nm波長 處測定菌體的光密度值（〇D_nm)，以研究PH對菌株生長的影響。
[0080] 1. 6. 4C/N對菌株生長的影響：通過改變蔗糖和氨水的加入量，調整N2培養(yǎng)基的 C/N分別為15、25、35、46、54、64、73,取新鮮培養(yǎng)的菌體種子液2ml轉接于98ml C/N分別 為15、25、35、46、54、64、73的吧液體培養(yǎng)基中，振蕩（13〇1'/11^11)培養(yǎng)4811，每411于波長為 600nm處測定菌體的光密度值（0D 6CI(lnm)，以研究C/N對菌株生長的影響。
[0081] 1.7菌株的脫氮性能測定
[0082] 1. 7. 1脫氨基氮的性能測定：取新鮮培養(yǎng)的菌體種子液2ml接于98ml的異養(yǎng)硝化 培養(yǎng)基中，130r/min，30°C恒溫培養(yǎng)96h，每6h取2ml于600nm波長處測定菌體的光密度值 (0D_nm)，再將樣品4000r/min離心lOmin，取上清液用納氏試劑分光光度法（HJ535-2009， 水質氨氮的測定納氏試劑分光光度法[S])，在波長420nm下檢測溶液中氨氮的含量。
[0083] 1.7. 2脫硝基氮的性能測定：取新鮮培養(yǎng)的菌體種子液2ml接于98ml DM培 養(yǎng)基中，130r/min，30°C恒溫培養(yǎng)96h，每6h取2ml于600nm波長處測定菌體的光密度 值（OD_nm)，再將樣品4000r/min離心lOmin，取上清液用紫外分光光度法（陜紅，張 慶忠，張曉娟，等，保存、分析方法等因素對土壤中硝態(tài)氮測定的影響[J].分析測試學 報，2013, 32 (12) : 1466-1471.)在波長210nm下檢測溶液中硝基氮的含量。
[0084] 2.結果
[0085] 2. 1QDN01菌株的分離及馴化分析
[0086] 本發(fā)明運用草根黑土進行篩選菌株，目的是避免與糞便篩選出有同樣功能的病原 菌。通過選擇性培養(yǎng)基的富集與培養(yǎng)，并通過硼酸吸收滴定法（吳鵬鳴.環(huán)境空氣質量保 證手冊[M].中國環(huán)境科學出版社，1989:184-211)篩選出脫氨效果最好的單一菌株并做進 一步試驗。
[0087] 2. 2脫氨除臭菌株形態(tài)結構觀察及生理生化試驗
[0088] 由圖1可知，該單一菌株直徑為2?3mm，乳白色，呈橢圓形，表面光滑，隆起，半透 明，無滲出物，革蘭氏染色為陰性，桿狀。生理生化鑒定結果如下：
[0089] 表1脫氨除臭菌的生理生化實驗鑒定結果
[0090]

【權利要求】
1. 一種脫氨除臭菌株，命名為Enterobacter hormaechei QDN01，保藏在中國典型培養(yǎng) 物保藏中心，其保藏號為CCTCC N0:M2013670。
2. 權利要求1所述的脫氨除臭菌株在生物除臭中的應用。
3. 如權利要求2所述的應用，其特征在于所述的生物除臭包括去除家畜糞便中的異味 以及工業(yè)廢水中的惡臭，優(yōu)選的，所述家畜糞便為雞糞。
4. 一種生物除臭菌劑，其特征在于是通過將含有權利要求1所述的脫氨除臭菌株的菌 液吸附在膨潤土上，同時添加紅糖后得到的。
5. 如權利要求4所述的生物除臭菌劑，其特征在于是將含有權利要求1所述的脫氨除 臭菌株的菌液吸附在于膨潤土上制成1. 0X 1〇12個/g的菌制劑，同時按質量比添加1 %的 市售紅糖，得到除臭菌劑。
6. 權利要求4或5所述的生物除臭菌劑在生物除臭中的應用。
7. 如權利要求6所述的應用，其特征在于所述的生物除臭包括去除家畜糞便中的異味 以及工業(yè)廢水中的惡臭，優(yōu)選的，所述家畜糞便為雞糞。
8. -種對雞糞進行脫氨除臭的方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 將含有權利要求1所述的脫氨除臭菌株的菌液吸附在膨潤土上，同時添加紅糖，得 到生物除臭菌劑； (2) 采用淀粉調節(jié)雞糞C/N比為20-30:1 ; (3) 將步驟（1)的除臭菌劑均勻拋灑在經步驟（2)處理后的雞糞中，3天撒施1次； (4) 評價除臭效果。
9. 如權利要求8所述的方法，其特征在于將含有權利要求1所述的脫氨除臭菌株的菌 液吸附在于膨潤土上制成1. 0 X 1〇12個/g的菌制劑，同時按質量比添加1 %的市售紅糖，得 到除臭菌劑。
10. 如權利要求8所述的方法，其特征在于采用淀粉調節(jié)雞糞C/N比為25:1，將步驟 (1)的除臭菌劑按照使用量為200g菌劑/m 3均勻拋灑在經步驟（2)處理后的雞糞中。
【文檔編號】C12N1/20GK104152375SQ201410344493
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年7月18日 優(yōu)先權日:2014年7月18日
【發(fā)明者】王志剛, 田險峰, 徐偉慧, 尚明慧, 鄭永杰 申請人:齊齊哈爾大學, 黑龍江田雨綠色農業(yè)工程有限公司