一種耐輻射曲霉及其在吸附銫137生物處理中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種耐輻射曲霉及其在吸附銫137生物處理中的應(yīng)用。通過(guò)某地區(qū)取樣，篩選、分離、篩選、生理生化鑒定獲得曲霉（Aspergillussp.）F77CGMCCNo.8382，利用該菌在吸附銫生物處理中的應(yīng)用，對(duì)Pb2+、Zn2+，Ni+的耐受濃度最大，分別可達(dá)1000mg/L和500mg/L，500mg/L；對(duì)Co2+，Cr2+，Hg2+的耐受性次之，都可達(dá)200mg/L通過(guò)本法可以利用菌體的生長(zhǎng)吸附銫離子，和放射性銫，也可以直接使用干菌體吸附，最大吸附能力可達(dá)44.5mg/g干菌體，應(yīng)用該菌種吸附Cs137生物處理中的應(yīng)用具有現(xiàn)實(shí)的價(jià)值和作用。
【專利說(shuō)明】一種耐輻射曲霉及其在吸附銫137生物處理中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種微生物菌種應(yīng)用于生物吸附放射性核素【技術(shù)領(lǐng)域】，具體的，本發(fā) 明涉及一種耐輻射曲霉及其在放射性核素吸附中應(yīng)用的【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 城市化、工業(yè)化及人口增長(zhǎng)造成全球性能源危機(jī)，可持續(xù)發(fā)展需求使得人類越來(lái) 越依賴于新能源。核能以其極低的二氧化碳排放和巨大的發(fā)展?jié)摿Χ絹?lái)越受到眾多國(guó)家 的重視。核能高速發(fā)展的同時(shí)，也給全球環(huán)境造成巨大的壓力，使放射性污染成為當(dāng)前重大 的環(huán)境問(wèn)題之一，特別是以切爾諾貝利和日本福島核電站為代表的核事故向環(huán)境釋放了大 量的放射性污染物，造成當(dāng)?shù)丶爸苓叚h(huán)境嚴(yán)重的放射性污染，對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康造成 長(zhǎng)期巨大的潛在威脅。
[0003] 作為生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分，微生物種群數(shù)量大、分布廣、比表面積大、繁殖快， 對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)能力強(qiáng)，對(duì)放射性輻射表現(xiàn)出高度的耐受性。利用生物作用清除、修復(fù)和 治理放射性污染具有選擇性強(qiáng)、處理時(shí)間短、成本低，不造成二次污染和不破壞生態(tài)環(huán)境等 優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)已成為放射性污染治理的熱點(diǎn)研究技術(shù)之一。
[0004] 銫137(Cs137)是重要的裂變產(chǎn)物之一，也是核彈、核武器試驗(yàn)和核反應(yīng)堆內(nèi)核裂 變的副產(chǎn)品之一，其半衰期較長(zhǎng)，具有較高的遷移性，易通過(guò)生物鏈轉(zhuǎn)移造成輻射危害，它 會(huì)釋放伽瑪射線，在環(huán)境放射性污染修復(fù)中備受關(guān)注。銫137的半衰期較長(zhǎng)達(dá)30年，會(huì)在 環(huán)境或生態(tài)系統(tǒng)中存留、積累和遷移，造成嚴(yán)重的環(huán)境污染和生態(tài)危害。如果透過(guò)進(jìn)食或呼 吸，攝入了銫137,或受到沉降在地面上的銫137所照射，都會(huì)對(duì)身體有較持久的影響。
[0005] 在治理放射性環(huán)境污染方面，傳統(tǒng)方法是工程法、化學(xué)法。工程法是物理性地收集 和隔離放射性物質(zhì)的方法，化學(xué)法是采用特殊的化學(xué)品來(lái)固定和清除放射性污染。上述方 法雖然已得到成功的應(yīng)用，如日本的廣島和長(zhǎng)崎兩個(gè)城市、馬紹爾群島共和國(guó)的比基尼環(huán) 礁核試驗(yàn)場(chǎng)和澳大利亞的馬拉林加核試驗(yàn)場(chǎng)的修復(fù)與重建，但其成本很高，難以用于大面 積輻射區(qū)的修復(fù)，因此，工程與化學(xué)的方法局限性很大。生物修復(fù)是利用特殊的生物富集和 固定放射性污染物的方法，主要是微生物和植物，特別是微生物功能利用最受關(guān)注，因其 成本低，適合于大面積修復(fù)，因而生物修復(fù)放射性污染成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。
[0006] 研究表明：微生物不僅可通過(guò)溶解和沉淀、生物吸附和吸收、氧化還原等作用來(lái)治 理環(huán)境中的放射性核素污染，并且可以通過(guò)改變植物根際微環(huán)境，從而提高植物對(duì)重金 屬離子和放射性核素的吸收、揮發(fā)或固定的效率。相關(guān)的研究也取得了積極進(jìn)展，如 分ite[1]等研究證明放射性核素鈾（U)在土壤中的遷移率受環(huán)境中微生物及環(huán)境因子的影 響，研究表明Fe(III)還原菌的增生有利于包括U在內(nèi)的重金屬離 子由土壤向地下水遷移。C?和ft [3]等的研究表明，細(xì)菌菌群可促使可溶態(tài)U (VI)向穩(wěn)定的U (IV)轉(zhuǎn)化，等研究顯示硫酸鹽還原菌可固定U，β9/7^--5·?〇/7θ[5] 等分離獲得可大量積累137CS、238+239+24°Pu等放射性核素的微生物菌株，Hu [6]等的研究表明 許多微生物都能吸附 U，如 aerwgiflosa CSZ/MpergiBiAs /應(yīng)/辟 和 等研究發(fā)現(xiàn)施用AM菌根菌可促進(jìn)行植物對(duì)137Cs、9°Sr 的積累，希瓦氏菌MR-1，可以有效將可溶性U6+、Cr6+和Tc7+還原為不溶性U 5+、 Cr3+ 和 Tc4+。
[0007] 利用微生物修復(fù)放射性環(huán)境污染已經(jīng)有成功的例子，CroW￡/e/8]在2001年利用土 著微生物對(duì)保加利亞南部含有放射性元素鈾、鐳和釷同重金屬銅、鎘和鉛污染土壤，進(jìn)行 原位修復(fù)，經(jīng)過(guò)8個(gè)月的時(shí)間，污染物的水平下降到人體安全范圍。
[0008] 利用微生物修復(fù)放射性的污染環(huán)境必須考慮到以下兩個(gè)方面：第一，必須是強(qiáng)耐 輻射的微生物；第二，微生物修復(fù)環(huán)境時(shí)不能威脅到公共安全，也不能產(chǎn)生二次污染。由 于大多數(shù)的細(xì)菌對(duì)放射性比較敏感，因此它們修復(fù)放射性污染環(huán)境的能力會(huì)受到較大的限 制。因此，需要從自然環(huán)境中去分離具有輻射抗性的微生物，或者通過(guò)基因工程技術(shù)來(lái)改造 一些微生物使之獲得輻射抗性。目前尚無(wú)有關(guān)耐輻射曲霉及其在放射性核素吸附中應(yīng)用的 報(bào)導(dǎo)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 針對(duì)目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)關(guān)于耐輻射曲霉及其在放射性核素吸附中應(yīng)用的相關(guān)報(bào)道， 特別是沒(méi)有耐輻射曲霉在銫生物處理中的應(yīng)用相關(guān)報(bào)道。本發(fā)明目的旨在于提供一種 耐輻射曲霉及其在吸附Cs 137生物處理中的應(yīng)用，特別是本發(fā)明提供一種利用耐輻射曲霉 5/7. )F77 CGMCC No. 8382在吸附銫生物處理中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明采用的主要技術(shù)方案： 本發(fā)明從新疆巴音郭楞蒙古自治州地區(qū)污染環(huán)境中取樣，以不同的培養(yǎng)溫度、pH值、培 養(yǎng)基為富集條件，篩選出一批生長(zhǎng)良好的微生物菌株，從中優(yōu)選出一株編號(hào)為F77的菌株， 經(jīng)過(guò)微生物菌種的生理生化特性、菌落形態(tài)、菌種的分子水平等系列試驗(yàn)驗(yàn)證確定，該菌種 是一種耐福射曲霉(As/76?r^77A/5· 5/7. )F77,經(jīng)中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生 物中心（CGMCC)保藏，獲得保藏號(hào)為CGMCC No. 8382,利用該菌種在放射性銫生物處理中 應(yīng)用，通過(guò)試驗(yàn)證明該菌種耐福射曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382對(duì)于Ni+， Cr2+'、Zn2+、Co2+、Pb2+、Hg 2+六種離子均具有耐受特性，其中對(duì)Pb2+、Zn 2+,Ni+的耐受濃度最 大，分別可達(dá)1000 mg/L和500 mg/L，500 mg/L;對(duì)Co2+，Cr2+，Hg2+的耐受性次之，都可達(dá) 200 mg/L ;特別是在放射性核素銫吸附中應(yīng)用獲得顯著明顯的技術(shù)效果，從而證明了該菌 種在吸附銫生物處理中具有良好的的應(yīng)用前景。
[0011] 本發(fā)明具體提供一種利用曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382。本發(fā)明 所使用的曲霉5/7.)由新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所從新疆巴音郭楞 蒙古自治州地區(qū)某地放射性污染土壤中取樣分離，以不同的培養(yǎng)溫度、pH值、培養(yǎng)基為富 集條件，篩選出一批生長(zhǎng)良好的微生物菌株，從中優(yōu)選出一株編號(hào)為F77的菌株于申請(qǐng)日 前已保藏于布達(dá)佩斯條約微生物國(guó)際保藏單位：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微 生物中心（CGMCC)保藏，地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究 所，郵編：100101,保藏日期是2013年10月22日，保藏號(hào)是CGMCC No. 8382;該菌株培養(yǎng) 溫度28-30°C，最適培養(yǎng)溫度28°C左右；該菌種生長(zhǎng)于PDA培養(yǎng)基表面為馬鈴薯200g、葡萄 糖20g、瓊脂15g、蒸餾水IL，pH自然，經(jīng)28°C、48h培養(yǎng)，將菌種F77通過(guò)插片和水壓片的 鏡檢觀察，該菌株初生菌絲白色，呈疏松絨毛狀，分隔，菌落表面粽葉綠色。孢子梗和孢子 同色，孢子近圓形，成串著生在膨大的孢子梗頂端周圍，呈放射狀分布，無(wú)分生小梗。根據(jù) 以上形態(tài)特征，初步鑒定該菌株為半知菌綱叢梗孢目叢梗孢科單梗曲霉屬的一個(gè)種。參照 《真菌鑒定手冊(cè)》進(jìn)行鑒定，結(jié)合對(duì)F77菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)，生理生化鑒定，命名為耐輻射曲霉 {.Aspergillus sp. )〇
[0012] 該菌株曲霉577. ) F77在PDA培養(yǎng)基，Wort培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好，經(jīng) Biolog FF鑒定板試驗(yàn)證明F77可以利用吐溫80, N-乙?；?β-D-葡萄糖胺，核糖醇，L-阿 拉伯糖，D-阿拉伯醇，熊果苷，D-纖維二糖，D-木糖，蘋(píng)果酸，糊精，赤藻糖醇，D-葡萄糖酸， a-D-葡萄糖，D-甘露醇，β-甲基-D-葡萄糖苷，6-0-D-吡喃葡萄糖酰，D-呋喃果糖，D-葡 萄醛酸，丙三醇，肝糖，麥芽三糖，奎尼酸，L-谷氨酸，腺苷-5 -磷酸鹽，a-D-葡萄糖-1-磷 本鹽，D-核糖，水楊苷，D-山梨醇，L-山梨糖，水蘇糖，K-海藻糖，松二糖，木糖醇，y-氨基丁 酸，溴代琥珀酸，反丁烯二酸，β_羥基丁酸，y_羥基丁酸，P-羥苯乙酸，a-酮戊二酸，D-蘋(píng)果 酸，D-葡萄糖二酸，癸二酸，琥珀酸，琥珀酸甲基酯，L-丙胺酸酰胺，L-丙胺酸，L-丙胺酰氨 基乙酸，L-天冬酰胺，L-天冬氨酸，甘氨酰-L-谷氨酸，L-苯基柄氨酸，脯氨酸，焦谷氨酸， L-絲氨酸，L-蘇胺酸，2-氨基乙醇，腐苷，腺苷。
[0013] 本發(fā)明通過(guò)總DNA的提取、ITS1基因的PCR擴(kuò)增和測(cè)序，根據(jù)測(cè)序結(jié)果，用Blast 搜索軟件從GenBank、EMBL等數(shù)據(jù)庫(kù)中調(diào)出相似性較高的相關(guān)菌株的ITS1基因序列，用 CLUSTAL X進(jìn)行多序列比對(duì)，并采用Saitou和Nei的鄰接法用MEGA 5. 0軟件進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)的構(gòu)建和同源性比較。經(jīng)測(cè)定，耐福射曲霉577. )F77 CGMCC No. 8382 的 ITS1 基因序列為 600bp。
[0014] 通過(guò)上述結(jié)果及ITS1基因同源分析、系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果，將純化的菌株耐輻射曲 霉Usper價(jià)7ΛΛ5沙.）F77 CGMCC No. 8382進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)的構(gòu)建及多樣性分析，菌種編 號(hào)為F77與/Yaras PT18同源性最高，但兩者還存在明顯的差異，顯 示不同屬性的菌種，本發(fā)明將菌種編號(hào)為F77菌株鑒定為曲霉5/7.)。
[0015] 同時(shí)，本發(fā)明具體提供一種利用耐福射曲霉5/7. ) F77 CGMCC No. 8382進(jìn)行放射性銫生物處理中應(yīng)用技術(shù)方案：分別在含有10mg/L的穩(wěn)定銫離子的PDA培 養(yǎng)基中加入lml (6772. 95貝克）放射性銫母液，和2ml (13545. 9貝克）放射性銫母液，接 種F77,培養(yǎng)至最適的生長(zhǎng)時(shí)間，收集樣品。分別通過(guò)ICP-MS和液閃測(cè)定菌株在生長(zhǎng)過(guò)程中 對(duì)穩(wěn)定性銫和放射性銫的吸附。通過(guò)試驗(yàn)表明，菌種F77對(duì)于放射性銫存在下，對(duì)穩(wěn)定的銫 的吸附率明顯下降，只有19. 3%，而在一倍放射性銫和兩倍放射性銫存在下，對(duì)穩(wěn)定性銫吸 附率差異不大，對(duì)于放射性銫的吸附率差異也不大，都達(dá)40%以上。
[0016] 本發(fā)明所用的菌株曲霉沙.）F77 CGMCC No. 8382對(duì)其中對(duì)Pb2+、 Zn 2+，Ni+的耐受濃度最大，分別可達(dá) 1000 mg/L 和 500 mg/L，500 mg/L;對(duì) Co2+ Cr2+，Hg2+ 的耐受性次之，都可達(dá)200 mg/L ;在放射性核素銫吸附中應(yīng)用獲得顯著明顯的技術(shù)效果，從 而證明了該菌種在吸附銫生物處理中具有良好的的應(yīng)用前景。
[0017] 本發(fā)明進(jìn)而提供耐福射曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382的分離和培 養(yǎng)方法。
[0018] 1.分離培養(yǎng)基采用：PDA培養(yǎng)基。
[0019] 2.分離和篩選條件：采取梯度稀釋法，稱取10g 土壤樣品于90mL無(wú)菌生理鹽水 中，30 ° C活化30min后進(jìn)行梯度稀釋，選取10' 10' ΚΓ4稀釋液分別涂布于分離培養(yǎng)基淀 粉PDA培養(yǎng)基平板，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，置30° C培養(yǎng)。待長(zhǎng)出菌落后挑取形狀、大小、顏色 等不同的菌落分別劃線接種于相應(yīng)的平板，直至無(wú)雜菌落。
[0020] 經(jīng)培養(yǎng)篩選確定的耐輻射曲霉取）F77 CGMCC No. 8382在PDA 培養(yǎng)基上菌株菌絲疏松絨毛狀，分隔，菌落表面粽葉綠色。可以利用吐溫80, N-乙酰 基-β-D-葡萄糖胺，核糖醇，L-阿拉伯糖，D-阿拉伯醇，熊果苷，D-纖維二糖，D-木糖，蘋(píng)果 酸，糊精，赤藻糖醇，D-葡萄糖酸，a-D-葡萄糖，D-甘露醇，β-甲基-D-葡萄糖苷，6-0-D-吡 喃葡萄糖酰，D-呋喃果糖，D-葡萄醛酸，丙三醇，肝糖，麥芽三糖，奎尼酸，L-谷氨酸，腺 昔 _5'一憐酸鹽，a_D_匍萄糖-1-憐本鹽，D-核糖，水楊昔D-山梨醇，L-山梨糖，水蘇糖， K-海藻糖，松二糖，木糖醇，y_氨基丁酸，溴代琥珀酸，反丁烯二酸，β_羥基丁酸，y_羥基丁 酸，P-羥苯乙酸a-酮戊二酸，D-蘋(píng)果酸，D-葡萄糖二酸，癸二酸，琥珀酸，琥珀酸甲基酯， L-丙胺酸酰胺，L-丙胺酸，L-丙胺酰氨基乙酸，L-天冬酰胺，L-天冬氨酸，甘氨酰-L-谷氨 酸，L-苯基柄氨酸脯氨酸，焦谷氨酸，L-絲氨酸，L-蘇胺酸，2-氨基乙醇，腐苷，腺苷。
[0021] 通過(guò)實(shí)施本發(fā)明具體的技術(shù)方案，實(shí)現(xiàn)本
【發(fā)明內(nèi)容】
達(dá)到以下有益效果： 本發(fā)明提供的耐輻射曲霉Usper價(jià)7ΛΛ5沙.）F77 CGMCC No. 8382及其在銫離子吸附 中的應(yīng)用，Ni+，Cr2+，、Zn2+、Co2+、Pb2+、Hg 2+六種離子均具有耐受特性，其中對(duì)Pb2+、Zn 2+，Ni+ 的耐受濃度最大，分別可達(dá)1000 mg/L和500 mg/L，500 mg/L;對(duì)Co2+，Cr2+，Hg2+的耐受性 次之，都可達(dá)200 mg/L通過(guò)本法可以利用菌體的生長(zhǎng)吸附銫離子，和放射性銫，也可以直接 使用干菌體吸附，最大吸附能力可達(dá)44. 5mg/g干菌體。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0022] 圖1所示為曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382的菌落形態(tài)水壓片圖。
[0023] 圖2所示為曲霉5/7. ) F77 CGMCC No. 8382系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)狀圖。
[0024] 圖 3 曲霉 5/7. ) F77 CGMCC No. 8382 對(duì)酸度的耐受性圖。
[0025] 圖4曲霉（Aspergillus sp. )F77 CGMCC No. 8382吸附時(shí)間對(duì)銫吸附行為的影響 圖。
[0026] 圖5曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382銫初始濃度對(duì)吸附效果的影響 圖。
[0027] 圖6曲霉（Aspergillus sp. ) F77 CGMCC No. 8382吸附等溫式擬合曲線圖。
[0028] 圖7鉀對(duì)曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382生長(zhǎng)和吸附銫的影響圖。
[0029] 圖 8 曲霉 5/7. ) F77 CGMCC No. 8382pH 對(duì)吸附效果的影響圖。
[0030] 圖9不同菌體量對(duì)曲霉5/7. ) F77 CGMCC No. 8382吸附銫離子的 影響圖。
[0031] 圖10吸附時(shí)間對(duì)于對(duì)曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382吸附銫離子 的影響圖。
[0032] 圖11溫度對(duì)曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382菌體對(duì)銫離子吸附的 影響圖。
[0033] 圖12曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382對(duì)穩(wěn)定銫和放射性銫的吸附 率圖。

【具體實(shí)施方式】
[0034] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明，當(dāng)然，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而 不用于限制本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
[0035] 本發(fā)明中涉及到的主要原輔材料、試劑和儀器設(shè)備： 培養(yǎng)基選用：PDA培養(yǎng)基表面為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15g、蒸餾水IL，pH自然。
[0036] 主要儀器與試劑：MSSPX-250型生化培養(yǎng)箱，MLS-3020高壓蒸汽滅菌鍋，SW-CJ-1F B型單人雙面凈化工作臺(tái)，E360K離心機(jī)，恒溫?fù)u床HWY-KKLPCR儀Eppendorf No:5345,電 泳儀 Bio-Rad Mode 200/2.0,凝膠成像儀 United-Bio, GK-330C plus，PCR 預(yù)混液（TaKaRa Biotechnology),其余試劑均為分析純。超聲波破碎儀為美國(guó)Sonics，VC 130。Xseries II 型電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS)，美國(guó)THERMO公司；Seven Easy Plus S20P型精密pH 計(jì)，上海梅特勒-托利多儀器有限公司；DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué) 儀器有限公司；THZ-82氣浴恒溫振蕩箱，江蘇金壇誠(chéng)輝儀器廠；GMSX-280壓力蒸汽滅菌器， 北京永光明醫(yī)療儀器有限公司。試劑均為分析純，水為超純水，18.2 ΜΩ ?cm。
[0037] 本發(fā)明中選用的所有試劑和儀器都為本領(lǐng)域熟知選用的，但不限制本發(fā)明的實(shí) 施，其他本領(lǐng)域熟知的一些試劑和設(shè)備都可適用于本發(fā)明以下實(shí)施方式的實(shí)施。
[0038] 實(shí)施例一：曲霉 ?。〧77CGMCC No. 8382 的分離、培養(yǎng) 1.分離：本發(fā)明所使用的耐福射曲霉5/7. )F77由新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生 物應(yīng)用研究所從新疆巴音郭楞蒙古自治州地區(qū)某地放射性污染土壤中取樣分離，利用傳統(tǒng) 的平板培養(yǎng)法分離出土層中的微生物，平板劃線法純化菌株，以不同的培養(yǎng)溫度、pH值、培 養(yǎng)基為富集條件，篩選出一批生長(zhǎng)良好的微生物菌株，從中優(yōu)選出一株編號(hào)為F77的菌株。
[0039] 分離步驟：依據(jù)梯度稀釋法，稱取10g 土壤樣品于90mL無(wú)菌生理鹽水中，30° C于 恒溫振蕩箱活化30min后進(jìn)行梯度稀釋，選取1(Γ2、10' ΚΓ4稀釋液分別涂布于PDA培養(yǎng)基 的平板，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，置30° C培養(yǎng)。待長(zhǎng)出菌落后挑取形狀、大小、顏色等不同的菌 落分別劃線接種于新的分離培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基，直至無(wú)雜菌落。將純化后的菌株一部分采 用凍干安瓿管、甘油管和液氮等方式保藏，一部分保存于4° C直接用于后續(xù)研究。
[0040] 2.培養(yǎng)條件：將純化的菌株接種到馬鈴薯固體培養(yǎng)基斜面上，于30°C培養(yǎng)6天，放 入4 °C冰箱中保存?zhèn)溆谩?br> [0041] 具體的：該菌株培養(yǎng)溫度28-30°C，最適培養(yǎng)溫度30°C左右；該菌種生長(zhǎng)于PDA培 養(yǎng)基表面為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15g、蒸餾水IL，pH自然，經(jīng)30°C、48h培養(yǎng)。
[0042] 本發(fā)明所使用的耐福射曲霉(Aspergi/AAs· 57?. ) F77菌株已保藏于布達(dá)佩斯條約 微生物國(guó)際保藏單位：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（CGMCC)保藏，地 址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編：100101，保藏日期 為2013年10月22日，菌種保藏號(hào)為CGMCC No. 8382,該菌株培養(yǎng)溫度28-30°C，最適培養(yǎng) 溫度30°C左右；該菌種生長(zhǎng)于PDA培養(yǎng)基表面為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂15g、蒸餾水 IL，pH自然，經(jīng)30°C、48h培養(yǎng)。菌種F77通過(guò)插片和水壓片的鏡檢觀察，該菌株初生菌絲 白色，疏松絨毛狀。孢子堆粽葉綠色，孢子近圓形，成串著生在膨大的孢子梗頂端四周，成放 射狀分布，無(wú)分生小梗。參見(jiàn)附圖1。根據(jù)以上形態(tài)特征，初步鑒定該菌株為半知菌綱叢梗 孢目叢梗孢科單梗曲霉屬的一個(gè)種。參照《真菌鑒定手冊(cè)》進(jìn)行鑒定，結(jié)合對(duì)F77菌株進(jìn)行 形態(tài)學(xué)，生理生化鑒定，命名為曲霉5/7.)。
[0043] 該菌株曲霉5/7. ) F77在PDA培養(yǎng)基，Wort培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好，經(jīng) Biolog FF鑒定板試驗(yàn)證明F77可以利用吐溫80, N-乙?；?β-D-葡萄糖胺，核糖醇，L-阿 拉伯糖，D-阿拉伯醇，熊果苷，D-纖維二糖，D-木糖，蘋(píng)果酸，糊精，赤藻糖醇，D-葡萄糖酸， a-D-葡萄糖，D-甘露醇，β-甲基-D-葡萄糖苷，6-0-D-吡喃葡萄糖酰，D-呋喃果糖，D-葡萄 醛酸，丙三醇，肝糖，麥芽三糖，奎尼酸，L-谷氨酸，腺苷-5 ζ -磷酸鹽，a-D-葡萄糖-1-磷 本鹽，D-核糖，水楊苷，D-山梨醇，L-山梨糖，水蘇糖，K-海藻糖，松二糖，木糖醇，y-氨基丁 酸，溴代琥珀酸，反丁烯二酸，β_羥基丁酸，y_羥基丁酸，P-羥苯乙酸，a-酮戊二酸，D-蘋(píng) 果酸，D-葡萄糖二酸，癸二酸，琥珀酸，琥珀酸甲基酯，L-丙胺酸酰胺，L-丙胺酸，L-丙胺 酰氨基乙酸，L-天冬酰胺，L-天冬氨酸，甘氨酰-L-谷氨酸，L-苯基柄氨酸，脯氨酸，焦谷 氨酸，L-絲氨酸，L-蘇胺酸，2-氨基乙醇，腐苷，腺苷。結(jié)果見(jiàn)表1。
[0044] 表1 :溫度、pH等因素對(duì)菌株F77生長(zhǎng)的影響_

【權(quán)利要求】
1. 一種曲霉5/7. )F77,其特征在于，所述的曲霉dpergiBiAs 5/7. )F77 保藏編號(hào)為CGMCCNo. 8382。
2. 如權(quán)利要求1所述的曲霉(As/76?r^77A/5· 5/7. )F77在在放射性核素吸附中應(yīng)用。
3. -種利用耐輻射曲霉5/7. )F77 CGMCC No. 8382在吸附銫生物處理 中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C12R1/66GK104087519SQ201410334312
【公開(kāi)日】2014年10月8日 申請(qǐng)日期:2014年7月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月15日
【發(fā)明者】王瑋, 王衛(wèi)憲, 張志東, 謝玉清, 張麗娟, 徐輝, 顧美英, 朱靜, 唐琦勇, 宋素琴, 王耀琴, 楚敏 申請(qǐng)人:新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所