一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及肽或蛋白質(zhì)的制備方法，公開了一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，包括原料處理、酶解處理和純化處理步驟；原料處理經(jīng)過清洗、粉碎、氯化鈉溶液浸泡、離心處理步驟后，45℃～50℃下復(fù)合酶酶解8h～15h，酶解液經(jīng)過滅活、過濾冷凍干燥獲得水產(chǎn)膠原蛋白。本方法制備的膠原蛋白產(chǎn)品，分子量低，溶解性好，克服了傳統(tǒng)水產(chǎn)膠原蛋白有異味、腥味、純度低、色澤差等技術(shù)問題，其純度高、色澤均勻、無(wú)異味，生產(chǎn)簡(jiǎn)便、周期較短，能廣泛應(yīng)用于食品、保健品、化妝品等行業(yè)。
【專利說明】一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及肽或蛋白質(zhì)的制備方法，尤其涉及了一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]膠原蛋白，是一種重要的功能性蛋白質(zhì)，具有很強(qiáng)的生物活性及生物功能，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、日用化工、生物合成等工業(yè)領(lǐng)域，如藥用膠囊、手術(shù)材料、食用添加劑、化妝品等。目前，所應(yīng)用的膠原蛋白多來(lái)自牛、豬及雞等哺乳動(dòng)物或家禽動(dòng)物的膠原蛋白組織提取物。近年來(lái)，牛的瘋牛病，豬的口蹄疫及家禽類的禽流感等家畜、家禽類疾病接連發(fā)生，家畜、家禽類的膠原蛋白的安全性受到質(zhì)疑，加上一些消費(fèi)者使用家畜類膠原蛋白有過敏的傾向。因此，使用陸產(chǎn)動(dòng)物所提取的膠原蛋白，存有安全隱憂。
[0003]魚鱗是魚真皮層的膠原蛋白生成的骨質(zhì)，占魚體重的2%?3%，鱗片外表面看是透明的，邊緣呈微小的卷曲，白色光澤，略帶有魚腥味，質(zhì)地堅(jiān)且柔軟，含水量為16.4%?17.8%，含有豐富的膠原蛋白。魚皮中膠原蛋白的含量占其他蛋白質(zhì)重量的80%以上，魚膠原蛋白中含有多種氨基酸，能提高人類細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)皮膚和骨骼組織的新陳代謝，能使細(xì)胞變得豐滿、完整，保持皮膚彈性和濕潤(rùn)，使皮膚更加潤(rùn)滑細(xì)膩，防止老化。水產(chǎn)膠原蛋白與其他膠原蛋白比，蛋白質(zhì)易分解，容易被消化、吸收。此外，水產(chǎn)膠原蛋白具有高溶解性和滲透性，在人體內(nèi)的消化利用率達(dá)100%，另外，水產(chǎn)膠原蛋白對(duì)預(yù)防骨質(zhì)疏松癥和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、提高人體免疫力、增強(qiáng)生命活力具有良好的作用。
[0004]傳統(tǒng)提取工藝較差，導(dǎo)致水產(chǎn)膠原蛋白有異味、腥味、純度低、色澤差，不適用于食品、藥品、化妝品行業(yè)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有水產(chǎn)膠原蛋白提取方法生產(chǎn)的產(chǎn)品有腥味、純度低、色澤差等缺點(diǎn)，提供了一種純度、色澤、氣味等各指標(biāo)均優(yōu)于以往產(chǎn)品的水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法。
[0006]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明通過下述技術(shù)方案得以解決:
[0007]一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟:
[0008]a.原料處理:原料清洗、粉碎，加入原料體積5?10倍的NaCl溶液浸泡5?12h，離心取沉淀，滅菌即得粗膠原纖維；
[0009]b.酶解處理:粗膠原纖維調(diào)pH為8?9，配制成質(zhì)量濃度為50g/L?150g/L的底物溶液，加入50?IOOPPm的復(fù)合酶，45°C?50°C下酶解反應(yīng)8h?15h，制得酶解液；
[0010]C.純化處理:酶解液經(jīng)滅活處理后，過濾冷凍干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白。
[0011]原料經(jīng)過清洗粉碎后采用氯化鈉溶液浸泡，能將除附著在原料表面的雜質(zhì)灰塵完全洗脫，保證終產(chǎn)品質(zhì)量安全；復(fù)合酶處理，充分酶解去除原料中的脂肪和糖類，保證終產(chǎn)品純度。
[0012]作為優(yōu)選，NaCl溶液濃度為1%?10%。NaCl溶液浸泡能溶解去除魚鱗、魚皮、魚骨等原料上的粘稠物質(zhì)或其它雜質(zhì)，保證原料清潔安全。[0013]作為優(yōu)選，原料處理步驟中，還包括洗滌沉淀步驟。沉淀經(jīng)過洗滌步驟，保障產(chǎn)品安全。
[0014]作為優(yōu)選，滅菌步驟采用濕熱滅菌法，滅菌溫度為115°C?125°C，滅菌時(shí)間為15min?30min。濕熱滅菌法能夠完全殺滅附著在魚鱗、魚皮或魚骨表面或內(nèi)部的寄生蟲、微生物、病毒或芽孢等，保證終產(chǎn)品水產(chǎn)膠原蛋白食用安全，保障終產(chǎn)品質(zhì)量符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)。
[0015]作為優(yōu)選，酶解處理步驟中，采用食品級(jí)NaOH調(diào)節(jié)粗膠原纖維pH。食品級(jí)NaOH符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)，保證終產(chǎn)品食用安全。
[0016]作為優(yōu)選，酶解處理步驟中，復(fù)合酶包括纖維素酶、α-半乳糖苷酶、甘露聚糖酶、蛋白酶和脂肪酶。纖維素酶、α -半乳糖苷酶、甘露聚糖酶、蛋白酶和脂肪酶組成的復(fù)合酶，能催化魚皮或魚骨或魚鱗中纖維素、聚糖、二糖和脂肪的分解，還能催化大分子蛋白水解為小分子肽段，能降低膠原蛋白分子量，去除異味，有利于吸收，口感更好，有利于服用。
[0017]作為優(yōu)選，純化處理步驟中，滅活處理溫度為70 °C?85 °C，滅活處理時(shí)間為IOmin?15min。高溫處理,滅活反應(yīng)體系中的酶。
[0018]作為優(yōu)選，純化處理步驟中，過濾前還經(jīng)過脫色步驟。
[0019]作為優(yōu)選，脫色步驟采用活性炭脫色，活性炭的添加量為原料質(zhì)量的3%?5%。活性炭脫色處理，吸附水產(chǎn)膠原蛋白中有異味的雜質(zhì)、吸附色素，極大的提升水產(chǎn)膠原蛋白的口感，易于食用。
[0020]本發(fā)明由于采用了以上技術(shù)方案，生產(chǎn)的水產(chǎn)膠原蛋白產(chǎn)品溶解度好，分子量約為1800Da，克服了傳統(tǒng)水產(chǎn)膠原蛋白有異味、腥味、純度低、色澤差等技術(shù)問題，其純度高、色澤均勻、無(wú)異味，生產(chǎn)簡(jiǎn)便、周期較短，能廣泛應(yīng)用于食品、保健品、化妝品等行業(yè)。
【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0022]實(shí)施例1
[0023]一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟:
[0024]a.原料處理:原料清洗、粉碎，加入原料體積5倍的10%的NaCl溶液浸泡5h，離心取沉淀，洗滌沉淀，115°C濕熱滅菌30min，即得粗膠原纖維。
[0025]b.酶解處理:用食品級(jí)NaOH調(diào)節(jié)粗膠原纖維至pH為8，配制成質(zhì)量濃度為50g/L的底物溶液，加入50PPm的復(fù)合酶，45°C下酶解反應(yīng)8h，制得酶解液。其中復(fù)合酶包括纖維素酶、α-半乳糖苷酶、甘露聚糖酶、蛋白酶和脂肪酶。
[0026]c.純化處理:酶解液70°C滅活處理時(shí)間為15min，活性炭脫色，活性炭添加量為原料質(zhì)量的3%，過濾冷凍干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白。
[0027]實(shí)施例2
[0028]一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟:
[0029]a.原料處理:原料清洗、粉碎，加入原料體積8倍的7%的NaCl溶液浸泡12h，離心取沉淀，121°C濕熱滅菌20min，即得粗膠原纖維。
[0030]b.酶解處理:用食品級(jí)NaOH調(diào)節(jié)粗膠原纖維至pH為8，配制成質(zhì)量濃度為IOOg/L的底物溶液，加入80PPm的復(fù)合酶，48°C下酶解反應(yīng)12h，制得酶解液。其中復(fù)合酶包括纖維素酶、α-半乳糖苷酶、甘露聚糖酶、蛋白酶和脂肪酶。
[0031]c.純化處理:酶解液80°C滅活處理時(shí)間為12min，活性炭脫色，活性炭添加量為原料質(zhì)量的5%，過濾冷凍干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白。
[0032]實(shí)施例3
[0033]一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟:
[0034]a.原料處理:原料清洗、粉碎，加入原料體積10倍的10%的NaCl溶液浸泡8h，離心取沉淀，洗滌沉淀，125°C濕熱滅菌15min，即得粗膠原纖維。
[0035]b.酶解處理:用食品級(jí)NaOH調(diào)節(jié)粗膠原纖維至pH為9，配制成質(zhì)量濃度為150g/L的底物溶液，加入IOOPPm的復(fù)合酶，50°C下酶解反應(yīng)10h，制得酶解液。其中復(fù)合酶包括纖維素酶、α-半乳糖苷酶、甘露聚糖酶、蛋白酶和脂肪酶。
[0036]c.純化處理:酶解液85°C滅活處理時(shí)間為lOmin，活性炭脫色，活性炭添加量為原料質(zhì)量的4%過濾冷凍干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白。
[0037]實(shí)施例4
[0038]一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟:
[0039]a.原料處理:原料清洗、粉碎，加入原料體積5倍的1%的NaCl溶液浸泡12h，離心取沉淀，洗滌沉淀，121°C濕熱滅菌20min，即得粗膠原纖維。
[0040]b.酶解處理:用食品級(jí)NaOH調(diào)節(jié)粗膠原纖維至pH為9，配制成質(zhì)量濃度為IOOg/L的底物溶液，加入75PPm的復(fù)合酶，47°C下酶解反應(yīng)15h，制得酶解液。其中復(fù)合酶包括纖維素酶、α-半乳糖苷酶、甘露聚糖酶、蛋白酶和脂肪酶。
[0041]c.純化處理:酶解液75°C滅活處理時(shí)間為12min，過濾冷凍干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白。
[0042]對(duì)比實(shí)施例
[0043]膠原蛋白理化性質(zhì)測(cè)試結(jié)果
[0044]試驗(yàn)組A:實(shí)施例1所生產(chǎn)的膠原蛋白
[0045]試驗(yàn)組B:實(shí)施例2所生產(chǎn)的膠原蛋白
[0046]試驗(yàn)組C:實(shí)施例3所生產(chǎn)的膠原蛋白
[0047]試驗(yàn)組D:實(shí)施例4所生產(chǎn)的膠原蛋白
[0048]對(duì)照組E:市售某品牌膠原蛋白產(chǎn)品
[0049]外觀檢測(cè)方法:取25g樣品，盛放在透明玻璃皿中，自然光下，觀測(cè)色澤，辨識(shí)氣味。
[0050]蛋白質(zhì)含量檢測(cè):按照GB5009.5規(guī)定的方法測(cè)定。
[0051]分子量檢測(cè):按照QB2732-2005規(guī)定的方法測(cè)定。
[0052]脂肪含量檢測(cè):按照GB/T5009.6規(guī)定的方法測(cè)定。
[0053]菌落總數(shù):按照GB4789.2規(guī)定的方法檢測(cè)。
[0054]致病菌:按照GB4789.4、GB/T4789.5、GB4789.10 規(guī)定的方法檢測(cè)。
[0055]表I膠原蛋白理化性質(zhì)測(cè)試結(jié)果
[0056]
【權(quán)利要求】
1.一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:包括如下步驟: a.原料處理:原料清洗、粉碎，加入原料體積5?10倍的NaCl溶液浸泡5?12h，離心取沉淀，滅菌得粗膠原纖維； b.酶解處理:粗膠原纖維調(diào)pH為8?9，配制成質(zhì)量濃度為50g/L?150g/L的底物溶液，加入50?IOOPPm的復(fù)合酶，45°C?50°C下酶解反應(yīng)8h?15h，制得酶解液； c.純化處理:酶解液經(jīng)滅活處理后，過濾冷凍干燥，制得水產(chǎn)膠原蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:原料處理步驟中，NaCl溶液濃度為1%?10%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:原料處理步驟中，離心取沉淀后還包括洗滌沉淀步驟。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:滅菌步驟采用濕熱滅菌法，滅菌溫度為115°C?125°C，滅菌時(shí)間為15min?30min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:酶解處理步驟中，采用食品級(jí)NaOH調(diào)節(jié)粗膠原纖維pH。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:酶解處理步驟中，復(fù)合酶包括纖維素酶、α -半乳糖苷酶、甘露聚糖酶、蛋白酶和脂肪酶。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:純化處理步驟中，滅活處理溫度為70°C?85°C，滅活處理時(shí)間為IOmin?15min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:純化處理步驟中，過濾前還經(jīng)過脫色步驟。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種水產(chǎn)膠原蛋白的提取方法，其特征在于:脫色步驟采用活性炭脫色，活性炭的添加量為原料質(zhì)量的3%?5%。
【文檔編號(hào)】A23J1/04GK103598400SQ201310559993
【公開日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年11月12日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月12日
【發(fā)明者】諸輝, 賈艷, 吳呂平, 石亞妮 申請(qǐng)人:諸輝