一種哺乳類動物膠原蛋白的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種膠原蛋白的提取方法，特別涉及一種哺乳類動物膠原蛋白的提取 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 膠原蛋白，是一種功能性蛋白，其具有很強的生物活性和生物功能，因此被廣泛應(yīng) 用于醫(yī)藥、食品、日用化工、生物合成等工業(yè)領(lǐng)域。
[0003] Jj父原蛋白是動物體內(nèi)含量最多的蛋白質(zhì)，約占人體蛋白質(zhì)的25%_35%，相當(dāng)于人 體重量的6%，分布遍及全身各個組織器官，如骨骼、軟骨、韌帶、皮膚、角膜、各種內(nèi)膜和筋 膜等，尤其在人體的皮膚和結(jié)締組織中，含有大量的膠原蛋白。
[0004] 通常，膠原蛋白的制造工藝較為復(fù)雜，主要應(yīng)用于醫(yī)療和生物醫(yī)學(xué)材料方面，如人 工皮膚、止血劑、人工血管以及護(hù)膚化妝品等，因此價位較高。
[0005] 目前市售的某些水解性膠原蛋白幾乎與蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物一樣，不僅純度較低，且 其原有的生理活性也已經(jīng)被破壞，這都是由于現(xiàn)有的提取方式導(dǎo)致的。這也極大限制了膠 原蛋白的使用范圍和使用效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是:提出一種哺乳類動物膠原蛋白的提取方法，其不僅大大提高了 膠原蛋白的純度，還能夠100%的保留膠原蛋白的活性。
[0007] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：
[0008] -種哺乳類動物膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟：
[0009] a、原料處理:將原料清洗干凈，去除脂肪和筋膜后，放入碳酸鈉溶液中浸泡3-6個 小時，然后再用蒸餾水漂洗3-4次后，晾干；
[0010] b、酶解處理:在步驟a處理后原料中加入質(zhì)量配比為0.2WT % -0.3WT %的蛋白水解 酶，再加入濃度為〇.2mol/L乙酸溶液，并緩慢攪拌3-5天，然后離心取出沉淀，制得粗提膠原 蛋白溶液；
[0011] c、膠原蛋白的提純:在制得的粗提膠原蛋白溶液中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%-1.5% 的H202溶液，混合均勻后靜置3-6小時，之后，再用檸檬酸三鈉溶液調(diào)節(jié)PH值到5-6，離心后， 再進(jìn)行鹽析處理，再將沉淀物裝入透析袋中，用〇.2mol/L的乙酸溶液透析1-1.5天，再用蒸 餾水透析3-4天，且每天換透析液2-3次，最終得到膠原蛋白水液；
[0012] d、活性保存處理:在膠原蛋白水液中加入90-1 lOppm的復(fù)合酶，然后在-50 °C真空 超低溫狀態(tài)下冷凍干燥處理，制得哺乳類動物膠原蛋白。
[0013] 進(jìn)一步，所述原理處理中除脂肪和筋膜后，先在2_3°C的溫度下冷凍后，再放入碳 酸鈉溶液中。
[0014] 進(jìn)一步，所述碳酸鈉溶液為0.05 % -0.1 %。
[0015] 進(jìn)一步，所述乙酸溶液的濃度為0.3mol/L，PH值為2-3。
[0016]進(jìn)一步，所述酶解處理中緩慢攪拌在8-10°C的條件下進(jìn)行。
[0017]進(jìn)一步，所述鹽析處理為在PH值在4-6的酸性條件下，用濃度為0.3mol/L的氯化鈉 的濃度對離心后的膠原蛋白溶液進(jìn)行處理。
[0018] 進(jìn)一步，所述活性保存處理中復(fù)合酶包括纖維素酶、海藻糖酶、出芽短梗酶和甘露 聚糖酶，該復(fù)合酶能有效減少膠原流失，100%保留膠原蛋白活性以及天然活性的功能。
[0019] 本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明的提取方案不僅解決現(xiàn)有膠原蛋白純度低的問題， 而且還能夠保持著膠原分子的完整三螺旋結(jié)構(gòu)，做到了 100%的保留膠原蛋白的生理活性， 從而使提取出來的膠原蛋白的使用效果更好，通過本方法提取的膠原蛋白具備超強修復(fù)能 力，強化角質(zhì)修復(fù)角質(zhì)層的功效，減少皮脂膜流失，促進(jìn)肌膚自身保濕生理成分的合成，對 于敏感肌有強大的修復(fù)力，皮膚紅腫、脫皮、痘痘、皮炎甚至于疤痕都可以使用生膠原來修 復(fù)，并且其超強的活性成分可以促使皮膚再生，增強肌膚抵抗力;改善粉刺、痘痘，生膠原在 被皮膚吸收后可在痘痘周圍形成一個微酸的環(huán)境，這個環(huán)境具有抗菌抗炎癥的作用，幫助 舒緩痘痘肌和皮炎的炎癥惡化，同時幫助疏通毛孔達(dá)到促進(jìn)皮脂正常分泌效果，提升皮膚 抗氧化力和抗菌力，并可改善痤瘡愈合后的早期色素沉淀，早期淺性疤痕;抗衰老淡化細(xì)紋 提亮膚色，長期使用可以幫助肌膚恢復(fù)自身代謝功能，抑制黑色素生成和沉淀，提亮膚色， 源源不斷為肌膚補充流失的膠原，令角質(zhì)更加健康。
【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
[0021] 實施例1:
[0022] -種哺乳類動物膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟：
[0023] a、原料處理:將原料清洗干凈，去除脂肪和筋膜后，在2°C的溫度下冷凍處理，再放 入0.07%碳酸鈉溶液中浸泡4個小時，然后再用蒸餾水漂洗3次后，晾干。
[0024] b、酶解處理:在晾干后的原料中加入質(zhì)量配比為0.3WT %的蛋白水解酶，再加入濃 度為0.2mol/L的乙酸溶液(PH為2)，并在8°C的條件下，緩慢攪拌4天，然后離心取出沉淀，制 得粗提膠原蛋白溶液。
[0025] c、膠原蛋白的提純:在制得的粗提膠原蛋白溶液中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.2%的H2〇2溶 液，混合均勻后靜置5小時，之后，再用檸檬酸三鈉溶液調(diào)節(jié)PH值到5,離心后，在PH值在5的 酸性條件下，放入濃度為〇. 3mol/L的氯化鈉溶液進(jìn)行沉淀處理，再將沉淀物裝入透析袋中， 用0.2mol/L的乙酸溶液透析1天，再用蒸餾水透析3天，且每天換透析液2次，最終得到膠原 蛋白水液。
[0026] d、活性保存處理:在膠原蛋白水液中加入lOOppm的復(fù)合酶，所述復(fù)合酶包括纖維 素酶、海藻糖酶、出芽短梗酶和甘露聚糖酶，然后在-50 °C真空超低溫狀態(tài)下冷凍干燥處理， 制得哺乳類動物膠原蛋白。
[0027] 實施例2:
[0028] -種哺乳類動物膠原蛋白的提取方法，包括如下步驟：
[0029] a、原料處理:將原料清洗干凈，去除脂肪和筋膜后，在:TC的溫度下冷凍處理，再放 入0.1 %碳酸鈉溶液中浸泡6個小時，然后再用蒸餾水漂洗4次后，晾干。
[0030] b、酶解處理:在晾干后