專(zhuān)利名稱(chēng)：超低IgG新生牛血清生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及超低IgG新生牛血清生產(chǎn)工藝。
背景技術(shù)：
牛血清是人用生物制品疫苗、動(dòng)物疫苗產(chǎn)品中重要的原材料之一，關(guān)系到人和動(dòng)物的健康和社會(huì)的和諧，所以牛血清產(chǎn)品一直受各國(guó)政策的扶持。牛血清主要用于科研院所的中心實(shí)驗(yàn)室、人用生物制品疫苗及動(dòng)物疫苗的生產(chǎn)和研究等領(lǐng)域。隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展，牛血清的需求量與日俱增。超低IgG胎牛血清和新生牛血清的生產(chǎn)單位國(guó)內(nèi)沒(méi)有，所以，該產(chǎn)品不僅市場(chǎng)前景十分廣闊，而且填補(bǔ)一項(xiàng)空白，并對(duì)國(guó)際學(xué)術(shù)界的影響具有推動(dòng)作用，其成功必然會(huì)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種超低IgG新生牛血清生產(chǎn)工藝，主要是利用金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術(shù)相結(jié)合的生產(chǎn)工藝進(jìn)行分離IgG或其亞型及片段(如Fe,Fab)等。SPA能與人及多種哺乳動(dòng)物血清IgG分子中的Fe片段結(jié)合。SPA除與IgG結(jié)合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結(jié)合。SPA菌對(duì)各類(lèi)免疫球蛋白的吸附率=IgGS90% 98%、IgM為2% 30%、IgA為I. 5% 20%。SPA-S印harose4B親和層析去除牛血清中r-IgG生產(chǎn)工藝是技術(shù)關(guān)鍵。而超低IgG胎牛和新生牛血清的生產(chǎn)工藝(r-IgG<5 10ug/ml)為本發(fā)明的創(chuàng)新點(diǎn)。本發(fā)明的超低IgG胎牛血清和新生牛血清，是利用親和層析工藝去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量減到IgG ( 5ug/ml水平，而保持生物學(xué)活性不變。隨著基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是生物醫(yī)藥領(lǐng)域疫苗的快速發(fā)展，都是通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。而且細(xì)胞是病毒、蛋白的表達(dá)載體，細(xì)胞質(zhì)量直接影響蛋白的表達(dá)量或病毒的滴度，故篩選、馴化優(yōu)質(zhì)細(xì)胞是關(guān)鍵。細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展，培養(yǎng)基的質(zhì)量又是關(guān)鍵，而培養(yǎng)基的主要成份中動(dòng)物血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖發(fā)揮著重要，甚至是難以替代的作用。在動(dòng)物血清的應(yīng)用中牛血清又是最為廣泛的，而牛血清中IgG含量的高低對(duì)于細(xì)胞的表達(dá)和提高抗體的滴度非常重要，所以超低IgG牛血清生產(chǎn)工藝的研究迫在眉睫。本發(fā)明主要技術(shù)是利用SPA_Sepharose4B的親和層析法去除牛血清中r球蛋白。主要技術(shù)指標(biāo)是牛血清中免疫球蛋白(r-IgG)含量達(dá)到彡5 10ug/ml，而生物活性不變。主要技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)本發(fā)明的超低IgG新生牛特別是的生產(chǎn)單位國(guó)內(nèi)沒(méi)有。所以，其成功必然會(huì)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。本發(fā)明是在比較現(xiàn)有成熟技術(shù)基礎(chǔ)上，進(jìn)行優(yōu)化組合并融合國(guó)際先進(jìn)技術(shù)而完善建立的。其適用于規(guī)?；a(chǎn)，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)空白。本發(fā)明的超低IgG新生牛血清生產(chǎn)工藝，是通過(guò)親和層析工藝去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量減到IgG ( 5ug/ml水平，而保持生物學(xué)活性不變；通過(guò)金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術(shù)相結(jié)合的生產(chǎn)工藝進(jìn)行分離IgG或其亞型及片段(如Fe、Fab) ；SPA能與人及多種哺乳動(dòng)物血清IgG分子中的Fe片段結(jié)合；SPA除與IgG結(jié)合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結(jié)合；SPA菌對(duì)各類(lèi)免疫球蛋白的吸附率IgG*90% 98%、IgM* 2% 30%、IgA 為 I. 5% 20% ;SPA_S印harose4B 親和層析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG彡5 10ug/ml。本發(fā)明的社會(huì)效益(I)填補(bǔ)國(guó)內(nèi)的空白，打破國(guó)外市場(chǎng)的壟斷地位該項(xiàng)目國(guó)內(nèi)剛剛起步，創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目的完成必將填補(bǔ)國(guó)內(nèi)的空白，打破國(guó)外同類(lèi)產(chǎn)品對(duì)國(guó)內(nèi)牛血清市場(chǎng)的壟斷地位。(2)促進(jìn)生物制藥業(yè)的健康發(fā)展全面完成后公司生產(chǎn)的牛血清可以廣泛應(yīng)用于國(guó)內(nèi)各生物尖端領(lǐng)域，保證生物制藥業(yè)和試驗(yàn)的科學(xué)性，促進(jìn)生物制品事業(yè)的健康發(fā)展和社會(huì)的和諧穩(wěn)定。

(3)促進(jìn)就業(yè)項(xiàng)目完成后，可吸納生產(chǎn)、研發(fā)和銷(xiāo)售人員。本發(fā)明用的主要原材料是犢牛血和成牛血的下游副產(chǎn)品，廢牛血的綜合利用將極大促進(jìn)畜牧業(yè)的健康發(fā)展，既提高農(nóng)民的收入，同時(shí)又治理環(huán)境。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的超低IgG新生牛血清生產(chǎn)エ藝，是通過(guò)親和層析エ藝去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量減到IgG ^ 5ug/ml水平，而保持生物學(xué)活性不變；通過(guò)金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術(shù)相結(jié)合的生產(chǎn)エ藝進(jìn)行分離IgG或其亞型及片段(如Fe、Fab) ；SPA能與人及多種哺乳動(dòng)物血清IgG分子中的Fe片段結(jié)合；SPA除與IgG結(jié)合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結(jié)合；SPA菌對(duì)各類(lèi)免疫球蛋白的吸附率IgG 為 90% 98%、IgM 為 2% 30%、IgA 為 I. 5% 20% ；SPA-Sepharose4B 親和層析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG彡5 10ug/ml。
權(quán)利要求
1.一種超低IgG新生牛血清生產(chǎn)エ藝，其特征在于通過(guò)親和層析エ藝去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量減到IgG <5ug/ml水平，而保持生物學(xué)活性不變；通過(guò)金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術(shù)相結(jié)合的生產(chǎn)エ藝進(jìn)行分離IgG或其亞型及片段(如Fc、Fab) ；SPA能與人及多種哺乳動(dòng)物血清IgG分子中的Fe片段結(jié)合；SPA除與IgG結(jié)合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結(jié)合；SPA菌對(duì)各類(lèi)免疫球蛋白的吸附率IgG 為 90% 98%、IgM 為 2% 30%、IgA 為 I. 5% 20% ；SPA-Sepharose4B 親和層析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG≤5 10ug/ml。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種超低IgG新生牛血清生產(chǎn)工藝。通過(guò)親和層析工藝去除胎牛和新生牛血清中的γ球蛋白，使FBS γ球蛋白含量減到IgG≤5ug/ml水平，而保持生物學(xué)活性不變；通過(guò)金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術(shù)相結(jié)合的生產(chǎn)工藝進(jìn)行分離IgG或其亞型及片段(如Fc、Fab)；SPA能與人及多種哺乳動(dòng)物血清IgG分子中的Fc片段結(jié)合；SPA除與IgG結(jié)合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結(jié)合；SPA菌對(duì)各類(lèi)免疫球蛋白的吸附率IgG為90％～98％、IgM為2％～30％、IgA為1.5％～20％；SPA-Sepharose4B親和層析去除牛血清中r-IgG，超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG≤5～10ug/ml。
文檔編號(hào)C12N5/00GK102757930SQ201110105789
公開(kāi)日2012年10月31日 申請(qǐng)日期2011年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月27日
發(fā)明者李卓 申請(qǐng)人:長(zhǎng)春安貝生物科技有限公司