專利名稱:牛焦蟲苗的生產(chǎn)工藝的制作方法
本發(fā)明是一種預(yù)防牛環(huán)形泰勒焦蟲病的特效疫苗新的生產(chǎn)工藝,屬于獸醫(yī)生物藥品制造技術(shù)領(lǐng)域:
,該工藝以病牛的血源白細(xì)胞為原料,采用攪拌懸浮培養(yǎng)的生產(chǎn)方法生產(chǎn)牛焦蟲病疫苗。
曾請北京大學(xué)圖書館用計算機查從1973年至1985年的有關(guān)懸浮培養(yǎng)法的資料,共查到1600篇,其中攪拌懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的資料有20篇,用于培養(yǎng)焦蟲細(xì)胞苗的沒有,有一篇牛焦蟲的靜置懸浮培養(yǎng)(附電算機檢索文件一份)。
查專利文獻查到一篇中國專利局專利文獻,申請?zhí)?5100848。
現(xiàn)已有的培養(yǎng)泰勒焦蟲細(xì)胞苗的方法是靜置單層和靜置懸浮培養(yǎng)法;慢速和快速轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)法。這些方法的共同點是在傳代擴大再生產(chǎn)時,細(xì)胞有一部分貼于瓶壁生長,不易脫落,靜置培養(yǎng)和慢速轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)法還需用威爾遜液脫落,細(xì)胞產(chǎn)率低,即使細(xì)胞貼壁較少的快速轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)法,其生產(chǎn)分瓶率也只有1∶2,需擴大再生產(chǎn)時,細(xì)胞懸液需要離心,去棄舊液,加入新營養(yǎng)液進行培養(yǎng)、費工、費時,疫苗產(chǎn)量低,生產(chǎn)成本高。
該發(fā)明的任務(wù)是提供一種新的生產(chǎn)工藝,解決以往各種工藝方法的不足,以達到操作簡便、細(xì)胞生長繁殖快、耗用培養(yǎng)液、化學(xué)藥品少,成本低,疫苗產(chǎn)量高的目的。
其解決方案是改變原培養(yǎng)液(伊格氏液40%+40%水解乳蛋白+牛血清20%)的成份,在原培養(yǎng)液的基礎(chǔ)上加入必需的氨基酸、維生素,用時再臨時加入少量谷氨胺液和“三素”液(含青霉素、鏈霉素和卡那霉素的混合液),配好后用碳酸氫鈉液將培養(yǎng)液的PH值調(diào)節(jié)到7.2~7.4。改轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)為發(fā)酵罐攪拌懸浮生產(chǎn)。首先用靜置單層培養(yǎng)的含焦蟲傳代細(xì)胞經(jīng)懸浮馴化培養(yǎng),再接種到發(fā)酵罐進行懸浮培養(yǎng),48小時后,取出2/3的細(xì)胞液制苗,將新的培養(yǎng)液倒入余下的1/3的細(xì)胞液中繼續(xù)培養(yǎng),進行再生產(chǎn)。
1982年10月制定了“牛環(huán)形泰勒焦蟲病血源高代細(xì)胞苗的制作規(guī)程”,規(guī)定該苗制造為七個步驟1.種子細(xì)胞的保存;2.種子細(xì)胞的復(fù)蘇;3.細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代;4.膠胨細(xì)胞苗的配制;5.無菌檢驗;6.安全和效力檢驗;7.膠胨細(xì)胞苗的使用。根據(jù)該規(guī)程,可生產(chǎn)出成本低、產(chǎn)量高的合格的疫苗。
實施例1986年2月,該研究小組用新的生產(chǎn)工藝進行了大批量疫苗生產(chǎn),每毫升培養(yǎng)液生產(chǎn)細(xì)胞250萬個,比原產(chǎn)量(100萬個/毫升)細(xì)胞產(chǎn)率提高了150%,使疫苗產(chǎn)量提高了大約4倍,而使用的培養(yǎng)液僅為原用量的20%,成本降低了60%,操作簡便,適于大規(guī)模的生產(chǎn)。
權(quán)利要求
1.牛環(huán)形泰勒焦蟲病血源高代細(xì)胞苗的制造工藝流程為a、種子細(xì)胞的保存,b、種子細(xì)胞的復(fù)蘇,c、細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代,d、膠胨細(xì)胞苗的配制,e、無菌檢驗,f、安全和效力檢驗,g、膠胨細(xì)胞苗的使用。其特征在于在上述工藝流程的細(xì)胞培養(yǎng)和傳代中改變培養(yǎng)液成份,即在原培養(yǎng)液中增加必需的氨基酸和維生素。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的牛環(huán)形泰勒焦蟲病血源高代細(xì)胞苗的生產(chǎn)工藝其特征在于在工藝流程中的細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代中采用了發(fā)酵罐攪拌懸浮培養(yǎng)的生產(chǎn)方法,制苗時,余下的1/3的細(xì)胞液可不去棄舊液直接加新培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),進行再生產(chǎn)。
專利摘要
本發(fā)明是一種生產(chǎn)預(yù)防牛環(huán)形泰勒焦蟲病特效疫苗的新的生產(chǎn)工藝。其技術(shù)特征在于改變原培養(yǎng)液成分來提高細(xì)胞的生長繁殖率;改轉(zhuǎn)瓶生產(chǎn)為發(fā)酵罐攪拌懸浮生產(chǎn),簡化操作手續(xù),節(jié)約了培養(yǎng)液。提高了細(xì)胞的產(chǎn)率。
文檔編號A61K39/002GK86103544SQ86103544
公開日1987年12月2日 申請日期1986年5月22日
發(fā)明者趙巨奎 申請人:新疆維吾爾自治區(qū)畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan