專利名稱：一種查爾霉素化合物的制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術領域，具體地說是一種查爾霉素化合物的制備方法。
背景技術：
查耳霉素首次從鏈霉菌Sti^ptomyces bikiniensis分離得到，為16元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯，其糖苷配基帶有2，3反向雙鍵。查耳霉素具有非常強的抑菌活性，可以抑制多種細菌如 Staphylococcus aureus 的生長(Frohardt RP, Pitillo RF, andEhrlich J. Chalcomycin and its fermentative production. 1962. U. S. patent3, 065，137.)。同時，chalcomycin 能夠抑制 HeLa 細胞的蛋白合成(Gupta RS, Murray W, and Gupta R.Cross resistance pattern towards anticancer drugs of ahuman carcinoma multidrug-resistant cell line. Br J Cancer. 1988(58) =441-447) 目前已報道多例查耳霉素同系物，它們在 C-5 和 C-19 各連有一個中性糖(Kim SD, Ryoo IJ, Kim CJ, Kim WG, Kim JP, Kong JY, Koshino H, Uramoto M, and Yoo ID. GERI—155, a new macroIide antibiotic related tochalcomycin. J Antibiot. 1996(49) 955 957 ；Goo YM, Lee YY, and Kim BT. A new 16-membered chalcomycin type macrolide antibiotic,250-144C. JAntibiot.1997(50) 85 88 ；Asolkar RN,Maskey RP,Helmke Ε,and LaatschH. Chalcomycin B,a new macrolide antibiotic from the marine isoIateStreptomyces sp. B7064. J Antibiot.2002(55) 893 898 ；Chatterjee S, ReddyGCS, Franco CMM, Rupp RH, Ganguli BN, Fehlhaber HW, and Kogler H.Swalpamycin, a new macrolide antibiotic ii.Structure elucidation. Journal ofAntibiotics. 1987(40) : 1368-1374)。鑒于查耳霉素類化合物的活性，進一步發(fā)現(xiàn)新結(jié)構的查耳霉素類化合物具有重要意義。同時，該族化合物的抗腫瘤活性卻未見有專利保護。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種查爾霉素化合物的制備方法。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的的技術方案為查爾霉素化合物具有式一、式二或式三的結(jié)構式，分別為
權利要求
1.一種查爾霉素化合物的制備方法，其特征在于按如下步驟操作1)固體培養(yǎng)將海洋鏈霉菌M491接種于M2+固體培養(yǎng)基，在28-30°C下培養(yǎng)直至長出青灰色的孢子；其中鏈霉菌M491保存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心 CGMCC，保藏編號為CGMCC No. 2446 ；2)搖床培養(yǎng)將上述培養(yǎng)的0.5-1. Ocm2帶有孢子絲的瓊脂塊接種到200-250ml豆粉液體培養(yǎng)基，在28-35°C溫度以110-130rpm的轉(zhuǎn)速下進行搖床培養(yǎng)4_5天后，待用；3)萃取將上述發(fā)酵液用有機溶劑浸提3-4次，合并有機相濃縮得粗提物；4)純化將粗提物經(jīng)硅膠柱層析，以1-3L二氯甲烷，2-4L 二氯甲烷/2%甲醇，1-3L 二氯甲烷/5%甲醇，1-3L 二氯甲烷/10%甲醇梯度進行洗脫，流速為8-1 lmL/min，將所得組分 3經(jīng)濃硫酸/茴香醛顯色待含棕黃色的條帶，經(jīng)葡聚糖層析后，在展開劑為二氯甲烷/10% 甲醇時Rf = 0. 50-0. 52分離得到式一化合物；組分4經(jīng)濃硫酸/茴香醛顯色待含棕黃色的條帶，再將組分4經(jīng)硅膠柱層析以二氯甲烷/7%甲醇進行梯度洗脫，待以展開劑為二氯甲烷/10%甲醇時Rf = 0. 22-0. 24處，分離得到式二化合物，在Rf = 0. 25-0. 27分離得到式三化合物。
2.按權利要求1所述的查爾霉素化合物的制備方法，其特征在于所述所述M2瓊脂平板培養(yǎng)基成份為大麥提取物9-1 lg，酵母粉3-5g，葡萄糖3-5g，瓊脂粉12-18g，IL天然海水，pH 7. 5-8. 0 ；所述豆粉液體培養(yǎng)基為大豆粉19-21g，甘露醇19_21g，IL天然海水，pH 7. 5-8. O0
3.按權利要求1所述的查爾霉素化合物的制備方法，其特征在于所述豆粉液體培養(yǎng)基為大豆粉19-21g，甘露醇19-21g，人工海水450-550ml，自來水450_550ml，調(diào)整pH為 7. 6-8. O。
全文摘要
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術領域，具體地說涉及一種查爾霉素的制備方法。具體化合物為式一化合物、式二化合物和式三化合物，制備方法為將海洋鏈霉菌M491，經(jīng)發(fā)酵積累粗提物，利用硅膠層析等多種層析方法分離得到式一化合物、式二化合物和式三化合物，同時所述式一化合物、式二化合物或式三化合物可在制備抗腫瘤、抗菌、或抗病毒藥物中。本發(fā)明利用海洋微生物資源，尋找到一種化學結(jié)構新穎的化合物，它具有抗腫瘤活性，對多種人體腫瘤細胞有抑制作用；為臨床提供了新型藥物或先導化合物。
文檔編號C12R1/50GK102220399SQ20111008056
公開日2011年10月19日 申請日期2008年7月11日 優(yōu)先權日2008年7月11日
發(fā)明者丁玲, 哈特穆特·拉赤, 張偉杰, 李富超, 秦松 申請人:中國科學院海洋研究所