專利名稱：免疫調(diào)節(jié)肽和使用方法
免疫調(diào)節(jié)肽和使用方法本申請要求2009年6月5日提交的美國臨時專利申請61/184，438，2009年6月5日提交的美國臨時專利申請61/184，455，2009年6月26日提交的美國臨時專利申請61/220，738，2009年6月26日提交的美國臨時專利申請61/220，745，和2009年10月30日提交的美國臨時專利申請61/256，364的優(yōu)先權(quán)，每項申請的全文通過引用納入本文。有關(guān)聯(lián)邦資助的研究的聲明引起本發(fā)明的工作得到SBIR AI065000，"細(xì)菌引發(fā)的敗血癥新型治療策略"和SBIR DC005882,"對中耳感染中炎癥的新型治療"的資助。美國政府可享有本發(fā)明的某些權(quán)利。
背景技術(shù)：
Toll-樣受體(TLR)識別名為病原相關(guān)分子模式(PAMP)的保守基序并作出應(yīng)答。TLR以胞外富含亮氨酸的重復(fù)基序和胞內(nèi)Toll/IL-Ι受體(TIR)結(jié)構(gòu)域為特征。TLR受PAMP激發(fā)啟動一系列胞內(nèi)信號傳導(dǎo)事件導(dǎo)致旨在控制并消除所述病原體的炎性免疫應(yīng)答。病毒編碼能有效抑制胞內(nèi)TIR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)引起炎性免疫應(yīng)答消減的免疫調(diào)節(jié)蛋白如A52R(由牛痘病毒(vaccina virus)產(chǎn)生)。慢性中耳炎(COM)對兒童和成人都有影響。COM中所見慢性炎癥可影響內(nèi)耳并引起感音神經(jīng)性失聰。COM是重要的醫(yī)學(xué)問題，目前尚無甾體以外的COM治療劑。許多COM患者需要手術(shù)植入耳管。與急性中耳炎(AOM) —樣，COM患者經(jīng)歷聽力減退，起因是中耳內(nèi)強(qiáng)烈炎性應(yīng)答的發(fā)展，包括殘液的存在。發(fā)明概沭在一些實施方式中，本發(fā)明考慮含肽的藥物組合物，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-368 中任一項所示序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮含肽的藥物組合物，所述肽包含SEQ ID NO :1-186中任一項所示的序列。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮包含SEQ ID NO 1-368中任一項所示序列的肽。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮包含SEQ ID NO :1-369中任一項所示序列的肽的衍生物，其中所述衍生物包含至少一個D-氨基酸殘基。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮調(diào)節(jié)細(xì)胞活性的方法，所述方法包括給予有相關(guān)需要或要求的生物以有效量的含肽藥物組合物，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-368中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮治療動物中炎癥的方法，所述方法包括給予有相關(guān)需要或要求的動物以有效量的含肽藥物組合物，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-368中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，
其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮治療鼻竇炎的方法，所述方法包括將氣溶膠組合物給予對此有需要或要求的生物，所述氣溶膠組合物包含治療有效量的肽，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮改善動物聽力的方法，所述方法包括給予患有中耳或內(nèi)耳炎癥并聽力減退的動物以治療有效量的肽，所述肽包含
a) SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列，其中所述肽局部(topical)給藥，其中所述聽力改善至不優(yōu)于普通水平的水平，和/或所述聽力改善比不給予所述肽更快。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮治療中耳和/或內(nèi)耳炎癥的方法，所述方法包括向有相關(guān)需要或要求的動物的鼓膜給予治療有效量的肽，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮肽在制備調(diào)節(jié)細(xì)胞活性用藥物中的用途，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-368中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮肽在制備治療動物炎癥用藥物中的用途，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-368中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮肽在制備治療鼻竇炎用藥物中的用途，所述藥物含氣溶膠組合物，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮肽在制備改善動物聽力用藥物中的用途，其中所述動物患有中耳和/或內(nèi)耳炎癥和聽力減退，所述肽包含a) SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列，其中所述藥物是局部藥物。在一些實施方式中，本發(fā)明考慮肽在制備治療中耳和/或內(nèi)耳炎癥用藥物中的用途，所述藥物適于給予對其有需要或要求的動物的鼓膜，所述肽包含
a) SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物，其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。


圖I :顯示由FITC標(biāo)記的P13跨越鼓膜的試驗。圖1A.亮場顯微鏡檢顯示中耳流體中的細(xì)胞。圖1B.熒光顯微鏡檢顯示與中耳流體中細(xì)胞結(jié)合的FITC標(biāo)記P13。圖2 P13減輕中耳炎癥。用熱滅活的肺炎鏈球菌(S. pneumonia)注射BALB/c小鼠(PBS組n = 6，Ρ13組η = 7)，24小時后由外用(滴 耳液)給予PU(Iyg)來處理，細(xì)菌導(dǎo)入72小時后檢查組織學(xué)。圖A :中耳內(nèi)細(xì)胞數(shù)；圖B :中耳內(nèi)流體面積。注在Ρ13治療組中高細(xì)胞數(shù)和高流體面積的動物是同一動物。圖3 :外用給予Ρ13顯著改善聽力閾值。給予BALB/c小鼠熱滅活的肺炎鏈球菌，24小時后由外用(滴耳液)給予P13 (Iyg)或PBS來處理小鼠。圖A :在給予細(xì)菌后5天和13天由ABR定量分析在4、8、16和32kHz的聽力閾值。通過從處理后ABR中減去背景ABR并將各頻率加合計算出聽力損耗。圖B :全頻率聽力損耗> 20DB的動物數(shù)。動物數(shù)量在括號內(nèi)。圖4 :肽T52、S5和P13對TNF- α分泌的百分抑制。RAW264. 7以3χ105細(xì)胞/孔接種入48孔板中。24小時后，所述細(xì)胞與不同濃度的肽一起一式三份室溫孵育15分鐘，然后用lug/ml CpG-ODN刺激。然后，細(xì)胞在37°C孵育4小時，收集上清，通過ELISA測定TNF-α。通過與肽孵育的細(xì)胞和無肽處理的對照細(xì)胞間的TNF-α分泌比較計算百分抑制。通過引用納入將本說明書中提到的所有發(fā)表物、專利和專利申請以其全文形式納入本文作為參考，就好像將各篇單獨的發(fā)表物、專利或?qū)＠暾埦唧w地和單獨地通過引用納入本文一樣。
具體實施例方式天然和病原體引發(fā)的炎癥的治療與控制是重要的臨床難題。靶向TLR/TIR信號級聯(lián)是一種控制炎癥的方法，因此鑒定衍生自A52R蛋白或A52R-樣蛋白的肽有治療用途。本文公開的本發(fā)明所述肽和藥物組合物，及使用所述肽和藥物組合物的用途和方法，提出了控制炎癥和調(diào)節(jié)炎癥相關(guān)細(xì)胞途徑中問題的解決方案。本公開全文中，本發(fā)明所述肽的氨基酸殘基以本領(lǐng)域已知的兩種標(biāo)準(zhǔn)縮寫方式其一或兩者表述a)單字母縮寫，例如R為精氨酸、D為天冬氨酸、V為纈氨酸等jPb)三字母縮寫，例如Arg為精氨酸、Asp為天冬氨酸、Val為纈氨酸等。本發(fā)明對L-和D-型氨基酸殘基都作考慮。當(dāng)某縮寫僅指D-構(gòu)型的氨基酸殘基時，該縮寫有前綴“D-”，例如D-Arg為D-精氨酸，D-Asp為D-天冬氨酸，D-Val為D-纈氨酸等。Toll-樣受體信號傳導(dǎo)Toll-樣受體(“TLR”)是識別細(xì)菌、真菌、原生動物和病毒結(jié)構(gòu)的保守分子受體。TLR的激活啟動一系列胞內(nèi)事件導(dǎo)致以促炎細(xì)胞因子生產(chǎn)為特征的先天免疫應(yīng)答(參考文獻(xiàn)2-9)。TLR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)發(fā)端于胞質(zhì)Toll/白介素-I受體(TIR)結(jié)構(gòu)域，這是所有TLR的保守域。不受任何理論限制，在某些實施方式中，含TIR結(jié)構(gòu)域和死亡結(jié)構(gòu)域的銜接分子MyD88可結(jié)合TLR和IRAK蛋白的TIR結(jié)構(gòu)域。然后，IRAK的磷酸化能引起與TRAF6的結(jié)合及后續(xù)的NF- K B激活和促炎細(xì)胞因子分泌(參考文獻(xiàn)14，22-25)。|i痘苗病毒是痘病毒科的一員，已證明該DNA病毒編碼免疫調(diào)節(jié)蛋白(參考文獻(xiàn)15-18)。這些蛋白之一為A52R，已表明其抑制TIR信號級聯(lián)啟動后的NF-K B激活(參考文獻(xiàn)15和18)。近期研究證明A52R抑制TR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)并有助于痘苗病毒的毒力。在某些實施方式中，響應(yīng)不同PAMP的細(xì)胞激活涉及所有TLR中共有的多種胞內(nèi)分子，包括但不限于MyD88、IL-I受體相關(guān)激酶(IRAK)蛋白成員、TNF受體相關(guān)因子(TRAF6)和NF-κ B (參考文獻(xiàn)I)。Harte及其同事(參考文獻(xiàn)18)證明A52R蛋白通 過結(jié)合IRAK2與TRAF6抑制TIR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。痘苗病毒缺失A52R蛋白導(dǎo)致病毒毒力降低。肽13( “Ρ13”)序列(DIVKLTVYDCI (SEQ ID NO :369))源自痘苗病毒的 A52R 序列。Blast檢索分析顯示肽P13與痘苗病毒中A52R以外的更大蛋白、兩種牛痘病毒的蛋白和一種兔痘病毒蛋白內(nèi)發(fā)現(xiàn)的序列具有100%同源性。肽13顯示與來自不同的類天花(variola)(天花(smallpox))病毒毒株的3種獨立蛋白的顯著同源性,這些蛋白為i)來自重型天花病毒印度株的A46L ；ii)來自重型天花病毒加西亞株的A49L ;和iii)來自重型天花病毒株的A44L。P13抑制Toll-樣受體依賴性信號轉(zhuǎn)導(dǎo)(US 7，192，930和US2008/0039395，通過引用全文納入本文)。在一些實施方式中，可進(jìn)行構(gòu)效測試來鑒定P13序列中可被取代以增強(qiáng)活性的氨基酸殘基。在一些實施方式中，本發(fā)明提供含肽的藥物組合物，所述肽源自A52R。在一些實施方式中，所述藥物組合物是耳用藥物組合物。在一些實施方式中，所述肽是P13。在一些實施方式中，所述肽源自P13。在一些實施方式中，所述肽是P13變體、衍生物、立體異構(gòu)體或類似物。在一些實施方式中，所述肽包括氨基酸序列LEEYFMY(SEQ ID NO :370)。在一些實施方式中，所述肽包括氨基酸序列FTILEEYFMY(SEQ ID NO :371)。在一些實施方式中，所述肽包括氨基酸序列DIVKLTVYDCI (SEQ ID NO :369)。在一些實施方式中，所述肽包括氨基酸序列VYDCI (SEQ IDNO 372)。在一些實施方式中，所述肽包括氨基酸序列VYACI (SEQ ID NO :373)。在一些實施方式中，所述肽包括氨基酸序列KLTVY (SEQ ID NO :374)。在一些實施方式中，所述肽包括氨基酸序列KLYVY (SEQ ID NO :375)。在一些實施方式中，所述肽包括氨基酸序列KVYVY (SEQID NO :376)。在一些實施方式中，所述肽包含7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50個殘基。在一些實施方式中，所述肽包含7_50個殘基。在一些實施方式中，肽包含轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列可參與細(xì)胞攝取。轉(zhuǎn)導(dǎo)序列的存在可引起細(xì)胞攝取增強(qiáng)或選擇性細(xì)胞攝取。在一些實施方式中，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列在所述肽的N-末端。在一些實施方式中，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列在所述肽的C-末端。轉(zhuǎn)導(dǎo)序列的非限制性示例有多精氨酸序列。在一些實施方式中，所述多精氨酸序列含精氨酸殘基。在一些實施方式中，所述多精氨酸序列由精氨酸殘基組成。在具體實施方式
中，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列包含3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或20個精氨酸殘基。在一些實施方式中，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列含9個精氨酸殘基。在一些實施方式中，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列由9個精氨酸殘基組成。所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列中的精氨酸殘基可以是L-精氨酸、D-精氨酸或L-和D-精氨酸的混合物。表I提供了本發(fā)明肽的非限制性示例。示例性肽1-130是源自A52R的肽。肽
1-130中，進(jìn)一步指定子集S1-S22。其他示例包括源自P13的肽(“T肽”)。在一些實施方式中，本發(fā)明提供含肽的藥物組合物，所述肽包含表I所示的任何氨基酸序列。在一些實施方式中，本發(fā)明提供含有任何表I所示肽的藥物組合物。在一些實施方式中，本發(fā)明提供含肽的藥物組合物，所述肽包含S1-S22所示的任何氨基酸序列。在一些實施方式中，本發(fā)明提供含有任何S1-S22所示肽的藥物組合物。在一些實 施方式中，本發(fā)明提供含肽的藥物組合物，所述肽包含T1-T56所示的任何氨基酸序列。在一些實施方式中，本發(fā)明提供含有任何T1-T56所示肽的藥物組合物。在一些實施方式中，所述肽包含轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。在一些實施方式中，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列是多精氨酸。在一些實施方式中，所述肽包含SEQ ID NO :42-44,68-77、79-81、83、102-106、133、141、151、166、167、181、182、228-230、254-263、265-267、269、288-292、319、327、337、352、353、367和368中任一項所示序列。在一些實施方式中，所示肽包含T3、Til、T21、T36、T37、T51或T52所示序列。在一些實施方式中，所示肽包含T3-R9、Tl I-R9、T21-R9、T36-R9、T37-R9、T51-R9 或 T52-R9 所示序列。
權(quán)利要求
1.一種含肽藥物組合物，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-368 中任一項；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物。
2.如權(quán)利要求I所述的藥物組合物，其特征在于，所述肽還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列是多精氨酸序列。
4.如權(quán)利要求2或3所述的藥物組合物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列包含9個連續(xù)精氨酸殘基。
5.如權(quán)利要求2或3所述的藥物組合物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列由9個連續(xù)精氨酸殘基組成。
6.如權(quán)利要求2-5中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述肽包括含有至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物。
7.如權(quán)利要求1-6中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述肽的所有氨基酸殘基都是D-氨基酸殘基。
8.如權(quán)利要求2-6中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所有不是所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列一部分的氨基酸殘基都是D-氨基酸殘基。
9.如權(quán)利要求2-6中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列的至少一個氨基酸殘基是D-氨基酸殘基。
10.如權(quán)利要求2-6中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述轉(zhuǎn)導(dǎo)序列的所有氨基酸殘基都是D-氨基酸殘基。
11.如權(quán)利要求2-5中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述肽是SEQID NO:42-44、68-77、79-81、83、102-106、133、141、151、166、167、181 和 182 中任一項。
12.如權(quán)利要求I所述的藥物組合物，其特征在于，所述肽是SEQID NO =228-230,254-263、265-267、269、288-292、319、327、337、352、353、367 和 368 中任一項。
13.如權(quán)利要求1-12中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，還包含藥學(xué)上可接受的賦形劑。
14.如權(quán)利要求1-13中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物是滴劑形式。
15.如權(quán)利要求1-14中任一項所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物是氣溶膠劑、吸入劑、噴劑或霧劑形式。
16.一種含肽的藥物組合物，所述肽包含SEQ ID NO :1-186中任一項所示的序列。
17.一種肽，所述肽包含SEQ ID NO :1-368中任一項所示的序列。
18.如權(quán)利要求17 所述的肽，其包含 SEQ ID NO :42-44、68-77、79_81、83、102-106、133、141、151、166、167、181、182、228-230、254-263、265-267、269、288-292、319、327、337、352、353、367和368中任一項所示序列。
19.一種包含SEQ ID NO :1-369中任一項所示序列的肽的衍生物，其中所述衍生物包含至少一個D-氨基酸殘基。
20.一種調(diào)節(jié)細(xì)胞活性的方法，所述方法包括給予有相關(guān)需要或要求的生物有效量的含肽藥物組合物，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-368中任一項所示的序列；或b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于，所述細(xì)胞活性由Toll-樣受體介導(dǎo)。
22.如權(quán)利要求21所述的方法，其特征在于，所述由Toll-樣受體介導(dǎo)的細(xì)胞活性是TNF-α分泌。
23.如權(quán)利要求20-22中任一項所述的方法，其對LPS和/或CpG-ODN刺激后的TNF-α分泌提供 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或 90%的抑制。
24.如權(quán)利要求20-23中任一項所述的方法，其特征在于，所述給予導(dǎo)致細(xì)胞因子分泌的抑制。
25.一種治療動物中炎癥的方法，所述方法包括將含肽藥物組合物給予有相關(guān)需要或要求的動物，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-368中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
26.如權(quán)利要求25所述的方法，其特征在于，所述炎癥由病毒、細(xì)菌、真菌、抗原、自體抗原或其組合引起。
27.如權(quán)利要求25或26所述的方法，其特征在于，所述炎癥是耳部炎癥。
28.如權(quán)利要求25-27中任一項所述的方法，其特征在于，所述炎癥是中耳炎。
29.如權(quán)利要求25-28中任一項所述的方法，其特征在于，所述給予減輕或消除中耳炎的癥狀。
30.如權(quán)利要求29所述的方法，其特征在于，所述癥狀是疼痛、耳液溢、發(fā)熱、煩躁、厭食、嘔吐或腹瀉。
31.如權(quán)利要求29或30所述的方法，其特征在于，所述癥狀是疼痛。
32.如權(quán)利要求25或26所述的方法，其特征在于，所述炎癥是皮膚、關(guān)節(jié)、肌肉組織、腦或結(jié)締組織的炎癥。
33.如權(quán)利要求25、26和32中任一項所述的方法，其特征在于，所述炎癥是關(guān)節(jié)炎、皮炎、紅斑狼瘡、腦膜炎或銀屑病。
34.如權(quán)利要求33所述的方法，其特征在于，所述關(guān)節(jié)炎是骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、假性痛風(fēng)、青少年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎、斯蒂爾病或強(qiáng)直性脊柱炎。
35.如權(quán)利要求33所述的方法，其特征在于，所述皮炎是海綿水腫性皮炎、兒童濕疹、過敏接觸性皮炎、脂溢性皮炎、出汗障礙性皮炎、蕁麻疹、水泡型或大皰型皮炎或丘疹性蕁麻疹。
36.如權(quán)利要求33所述的方法，其特征在于，所述銀屑病是斑塊狀銀屑病、屈側(cè)銀屑病、點滴性銀屑病、膿皰性銀屑病、銀屑病甲、銀屑病性關(guān)節(jié)炎或紅皮病型銀屑病。
37.如權(quán)利要求25-36中任一項所述的方法，其特征在于，所述藥物組合物經(jīng)局部施用給予。
38.如權(quán)利要求37所述的方法，其特征在于，所述局部施用包括施用于皮膚、毛發(fā)、夕卜耳、鼓膜、口頰、鼻腔或舌下。
39.如權(quán)利要求37或38所述的方法，其特征在于，所述局部施用包括施用于鼓膜。
40.如權(quán)利要求38或39所述的方法，其特征在于，所述施用于鼓膜包括將滴劑施用于鼓膜。
41.如權(quán)利要求25-40中任一項所述的方法，其特征在于，所述動物是人。
42.一種治療鼻竇炎的方法，其包括將氣溶膠組合物給予對此有需要或要求的生物，所述氣溶膠組合物包含治療有效量的肽，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
43.一種改善動物聽力的方法，所述方法包括給予患有中耳或內(nèi)耳炎癥并聽力減退的動物以治療有效量的肽，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列，其中所述肽局部給藥，其中所述聽力改善至不優(yōu)于普通水平的水平，和/或所述聽力改善比不給予所述肽更快。
44.一種治療中耳和/或內(nèi)耳炎癥的方法，所述方法包括向有相關(guān)需要或要求的動物的鼓膜給予治療有效量的肽，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
45.肽在制備調(diào)節(jié)細(xì)胞活性用藥物中的用途，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-368中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
46.如權(quán)利要求45所述的用途，其特征在于，所述細(xì)胞活性由Toll-樣受體介導(dǎo)。
47.如權(quán)利要求46所述的用途，其特征在于，所述由Toll-樣受體介導(dǎo)的細(xì)胞活性是TNF-α分泌。
48.如權(quán)利要求45-47中任一項所述的用途，其特征在于，所述藥物對LPS和/或CpG-ODN刺激后的TNF-α 分泌提供 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%的抑制。
49.如權(quán)利要求45-48中任一項所述的用途，其特征在于，所述藥物適于抑制細(xì)胞因子分泌。
50.肽在制備治療動物炎癥用藥物中的用途，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-368中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
51.如權(quán)利要求50所述的用途，其特征在于，所述炎癥由病毒、細(xì)菌、真菌、抗原、自體抗原或其組合引起。
52.如權(quán)利要求50或51所述的用途，其特征在于，所述炎癥是耳部炎癥。
53.如權(quán)利要求50-52中任一項所述的用途，其特征在于，所述炎癥是中耳炎。
54.如權(quán)利要求50-53中任一項所述的用途，其特征在于，所述藥物減輕或消除中耳炎的癥狀。
55.如權(quán)利要求54所述的用途，其特征在于，所述癥狀是疼痛、耳液溢、發(fā)熱、煩躁、厭食、嘔吐或腹瀉。
56.如權(quán)利要求54或55所述的用途，其特征在于，所述癥狀是疼痛。
57.如權(quán)利要求50或51所述的方法，其特征在于，所述炎癥是皮膚、關(guān)節(jié)、肌肉組織、腦或結(jié)締組織的炎癥。
58.如權(quán)利要求50、51和57中任一項所述的用途，其特征在于，所述炎癥是關(guān)節(jié)炎、皮炎、紅斑狼瘡、腦膜炎或銀屑病。
59.如權(quán)利要求58所述的用途，其特征在于，所述關(guān)節(jié)炎是骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、假性痛風(fēng)、青少年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎、斯蒂爾病或強(qiáng)直性脊柱炎。
60.如權(quán)利要求58所述的用途，其特征在于，所述皮炎是海綿水腫性皮炎、兒童濕疹、過敏接觸性皮炎、脂溢性皮炎、出汗障礙性皮炎、蕁麻疹、水泡型或大皰型皮炎或丘疹性蕁麻疹。
61.如權(quán)利要求58所述的用途，其特征在于，所述銀屑病是斑塊狀銀屑病、屈側(cè)銀屑病、點滴性銀屑病、膿皰性銀屑病、銀屑病甲、銀屑病性關(guān)節(jié)炎或紅皮病型銀屑病。
62.如權(quán)利要求50-61中任一項所述的用途，其特征在于，所述藥物適于局部施用。
63.如權(quán)利要求62所述的用途，其特征在于，所述局部施用包括施用于皮膚、毛發(fā)、夕卜耳、鼓膜、口頰、鼻腔或舌下。
64.如權(quán)利要求62或63所述的用途，其特征在于，所述局部施用包括施用于鼓膜。
65.如權(quán)利要求63或64所述的用途，其特征在于，所述施用于鼓膜包括將滴劑施用于鼓膜。
66.如權(quán)利要求50-65中任一項所述的方法,其特征在于,所述動物是人。
67.肽在制備治療鼻竇炎用藥物中的用途，所述藥物含氣溶膠組合物，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
68.肽在制備改善動物聽力用藥物中的用途，其中所述動物患有中耳和/或內(nèi)耳炎癥和聽力減退，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列，其中所述藥物是局部用藥物。
69.肽在制備治療中耳和/或內(nèi)耳炎癥用藥物中的用途，所述藥物適于給予對其有需要或要求的動物的鼓膜，所述肽包含 a)SEQ ID NO :187-369中任一項所示的序列；或 b)含至少一個D-氨基酸殘基的P13衍生物， 其中所述肽可選還包含C-末端的轉(zhuǎn)導(dǎo)序列。
全文摘要
公開了用于治療炎癥的肽及其治療用途和使用方法。肽包括轉(zhuǎn)導(dǎo)序列，能通過與toll樣受體的相互作用有效抑制細(xì)胞因子活性和TNF-α分泌。描述了說明所述化合物在治療中耳炎中功效的實驗。
文檔編號C12P21/06GK102803500SQ201080030313
公開日2012年11月28日 申請日期2010年6月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月5日
發(fā)明者S·L·麥考伊, S·H·赫芬艾德 申請人:13治療有限公司