專利名稱：一種以米酒糟為原料液態(tài)發(fā)酵制備靈芝多糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種以米酒糟為原料液態(tài)發(fā)酵制備靈芝多糖的方法，屬于發(fā)酵工程技 術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
我國米酒產(chǎn)量大，每生產(chǎn)It米酒就可生產(chǎn)大約0. It的濕酒糟。由于米酒糟所含 蛋白質(zhì)豐富，且價格低廉，目前主要用于生產(chǎn)飼料。但是生產(chǎn)飼料的能耗大，成本高，因此， 很多廠家都將米酒糟當作廢棄物處理，這既造成了浪費又污染了環(huán)境。米酒糟固形物含量 為5-6 %。米酒糟干基含蛋白質(zhì)47. 7 %，脂肪8. 7 %，纖維25 %，同時還含有豐富的礦物質(zhì) 元素，可作為靈芝液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基。靈芝是一種藥食兩用真菌，為擔子菌綱、多孔菌科、靈芝屬。我國古代的多部藥書， 如《神農(nóng)本草經(jīng)》，《本草綱目》中都有關(guān)于靈芝藥效的記敘。主要有治療肝病、慢性肝炎、腎 炎、高血壓、高血脂、神經(jīng)衰弱、失眠健忘、氣管炎及支氣管炎、腸炎、動脈硬化、白血病、糖尿 病和久病引起的體質(zhì)衰弱等。近代國內(nèi)外的臨床實踐證實靈芝多糖具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、 降低血糖等功能。近年來以靈芝多糖研制而成的抗癌抗腫瘤產(chǎn)品，是醫(yī)學界樂意采用的熱 門良藥之一。人工栽培靈芝一般需要三個月的時間才能收獲，而且受氣候的影響很大，成本 也高。液態(tài)發(fā)酵法生產(chǎn)靈芝多糖也有較多的報道，其發(fā)酵和提取工藝也比較成熟，但是利用 米酒糟這種低成本的原料生產(chǎn)靈芝多糖還未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足，以低成本原料米酒糟作為原料 液態(tài)發(fā)酵制備靈芝多糖的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案如下(1)以米酒糟為原料液態(tài)發(fā)酵制備靈芝多糖的方法，其特征在于采用以下步驟 制備液體菌種將活化好的靈芝菌種接入已滅菌的液體種子培養(yǎng)基，于28°C中培養(yǎng)5-6d后 備用；(2)液體發(fā)酵培養(yǎng)，以添加了碳源及輔助營養(yǎng)成份的米酒糟作為液體發(fā)酵培養(yǎng)基， 對液體發(fā)酵培養(yǎng)菌滅菌后接種，搖床培養(yǎng)，28°C中培養(yǎng)6d ；(3)將步驟(2)得到的發(fā)酵后產(chǎn)物進行離心分離得到菌絲體和發(fā)酵液，在發(fā)酵液 中加入95%乙醇，靜置，離心沉淀得到靈芝多糖。靈芝多糖具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、降低血糖等功能，廣泛用于保健食品和藥品，本發(fā)明充分利用米酒糟這種低成本的原料，通過滅菌、添加碳源和維生素等營養(yǎng)成份，接入菌 種，液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)靈芝多糖，是以米酒糟為原料可以變廢為寶，既防止米酒糟污染環(huán)境，又 可生產(chǎn)靈芝多糖，大大提高了米酒糟的價值，一舉兩得，符合可持續(xù)發(fā)展的效益。
具體實施例方式為更好理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步地詳細說明，但是本發(fā)明 要求保護的范圍并不局限于實施例表示的范圍。實施例1(1)種子培養(yǎng)將IOOml種子培養(yǎng)基裝入500ml的三角瓶中，121°C滅菌15min，冷 卻至室溫，然后將活化好后在斜面上長好的菌種接入種子培養(yǎng)基中。種子培養(yǎng)基為(單位 為g/L):葡萄糖20，酵母粉2,KH2PO4 2,MgSO4 1，起始pH為自然pH ；培養(yǎng)條件為搖床轉(zhuǎn)速 為150轉(zhuǎn)每分鐘，28°C中培養(yǎng)6d。用于生產(chǎn)靈芝多糖的微生物為靈芝屬的菌種，例如紅芝菌、赤芝菌等靈芝菌種。本 例中采用由中國微生物保藏管理中心保藏，編號為CGMCC No. 5. 26號的菌株。(2)液體發(fā)酵培養(yǎng)將IOOml液體發(fā)酵培養(yǎng)基裝入500ml的三角瓶中，121°C滅菌 15min,冷卻至室溫，然后將所得的種子培養(yǎng)液接入液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量為IOml，搖床 培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速為150轉(zhuǎn)/分鐘，28°C中培養(yǎng)6d。其中，液體發(fā)酵培養(yǎng)基為(單位為g/L) 葡萄糖 16，米酒糟 500，KH2PO4 1，MgSO4 0. 5 ；(3)將步驟(2)得到的發(fā)酵液體進行離心分離得到菌絲體和發(fā)酵液，將所得的靈 芝發(fā)酵液在10000轉(zhuǎn)每分鐘的條件下離心分離，在上清液中加入4倍體積的95%乙醇，靜置 15-20小時，在10000轉(zhuǎn)每分鐘的條件下離心分離，將沉淀烘干得到靈芝多糖0. 23g。實施例2其它條件同實施例1，改變步驟(2)中的液體發(fā)酵培養(yǎng)基為(單位為g/L)葡萄糖 20，米酒糟500，豆粕粉2，KH2PO4 1，MgSO4 0.5，維生素Bl 0. 1起始pH為自然pH。最后得 到靈芝多糖0. 32g。實施例3其它條件同實施例1，改變步驟(2)中的液體發(fā)酵培養(yǎng)基為(單位為g/L)蔗糖 18，米酒糟500，KH2PO4 1，MgSO4 0. 5，起始pH為自然pH。最后得到靈芝多糖0. 20g。實施例4其它條件同實施例1，改變步驟(2)中的液體發(fā)酵培養(yǎng)基為(單位為g/L)蔗糖 18，米酒糟500，豆粕粉1，KH2PO4 1，MgSO4 0. 5，起始pH為自然pH。最后得到靈芝多糖0. 28g。實施例5其它條件同實施例1，改變液體發(fā)酵培養(yǎng)基為(單位為g/L)葡萄糖18，米酒糟 500，麩皮2，KH2PO4 1，MgSO4 0. 5，起始pH為自然pH。最后得到靈芝多糖0. 25g。
權(quán)利要求
一種以米酒糟為原料液態(tài)發(fā)酵制備靈芝多糖的方法，其特征在于采用以下步驟(1)制備液體菌種將活化好的靈芝菌種接入已滅菌的液體種子培養(yǎng)基，于28℃中培養(yǎng)5～6d后備用；(2)液體發(fā)酵培養(yǎng)以添加了碳源及輔助營養(yǎng)成份的米酒糟作為液體發(fā)酵培養(yǎng)基，對液體發(fā)酵培養(yǎng)菌滅菌后接種，搖床培養(yǎng)，28℃中培養(yǎng)5～6d；(3)將步驟(2)得到的發(fā)酵后產(chǎn)物進行離心分離得到菌絲體和發(fā)酵液，在發(fā)酵液中加入95％乙醇，靜置，離心沉淀得到靈芝多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備靈芝多糖的方法，其特征在于所述步驟(2)中的液體 發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源為同時添加或單獨添加的葡萄糖、蔗糖、豆粕粉或麩皮。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備靈芝多糖的方法，其特征在于所述步驟(2)中的液體 發(fā)酵培養(yǎng)基的輔助營養(yǎng)成份為無機鹽或維生素。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備靈芝多糖的方法，其特征在于所述步驟(3)中添加的 乙醇的量為4倍發(fā)酵液體積。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備靈芝多糖的方法，其特征在于所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基 為葡萄糖 16g/L，米酒糟 500g/L, KH2PO4 lg/L，MgSO4 0. 5g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備靈芝多糖的方法，其特征在于所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基 為葡萄糖 20g/L，米酒糟 500g/L，豆粕粉 2g/L，KH2PO4 lg/L, MgSO4 0. 5g/L，維生素 B1 0. lg/ L0
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備靈芝多糖的方法，其特征在于所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基 為蔗糖 18g/L，米酒糟 500g/L, KH2PO4 lg/L, MgSO4 0. 5g/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備靈芝多糖的方法，其特征在于所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基 為蔗糖 18g/L，米酒糟 500g/L，豆粕粉 lg/L, KH2PO4 lg/L, MgSO4 0. 5g/L。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備靈芝多糖的方法，其特征在于所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基 為葡萄糖 18g/L，米酒糟 500g/L，麩皮 2g/L，KH2PO4 lg/L, MgSO4 0. 5g/L。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種以米酒糟為原料液態(tài)發(fā)酵制備靈芝多糖的方法。本發(fā)明充分利用米酒糟這種低成本的原料，通過滅菌、添加碳源和維生素等營養(yǎng)成份，接入菌種，液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)靈芝多糖，采用酒精沉淀法提取多糖。本發(fā)明的方法可以變廢為寶，既防止米酒糟污染環(huán)境，又可生產(chǎn)靈芝多糖，大大提高了米酒糟的價值，一舉兩得。
文檔編號C12P19/04GK101838673SQ20101018375
公開日2010年9月22日 申請日期2010年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月18日
發(fā)明者余以剛, 葉志中, 葉盛權(quán) 申請人:湛江三角威力神釀酒集團有限公司