專利名稱：混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物發(fā)酵處理酒糟等混合飼料原料的方法，具體而言， 本發(fā)明涉及一種采用乳酸菌和酵母菌混合發(fā)酵處理酒糟與豆粕、菜餅、棉粕或 其他雜粕等蛋白性原料混合物的方法。
背景技術(shù)：
白酒糟中不但含有豐富的粗蛋白質(zhì)(20%左右)，還含有豐富的粗纖維(25% 左右)、粗脂肪(10%左右)、B族維生素以及磷、鉀等無機(jī)元素，由此可見， 白酒糟的營養(yǎng)價值及開發(fā)利用價值都極高。此外，白酒糟中還可能存在由微生物 菌體產(chǎn)生的氨基酸、核糖核酸及嘌呤等微量有益成分，所有這些都是谷物所不能 比擬的。因此，國內(nèi)外對酒糟的研究一直不斷，各種有關(guān)酒糟的研究報告層出不 窮。目前我國在此方面的研究已經(jīng)取得了一定的成績，例如，利用白酒糟培養(yǎng)食 用菌、提取復(fù)合氨基酸及微量元素，提取植酸和植酸鈣，提取蛋白質(zhì)、生產(chǎn)淀粉 酶和纖維素酶，利用酒糟厭氧發(fā)酵回收沼氣，生產(chǎn)飼料蛋白，青貯制取詞料，生 產(chǎn)Y—氨基丁酸等，但這其中除了用作飼料、農(nóng)肥之外，其他方法都不能從根本 上解決白酒糟的最終去向問題。作為白酒的副產(chǎn)品，白酒糟含有極為豐富營養(yǎng)成分，有利于畜禽生長，可以 直接作為飼料或者飼料添加劑。例如，將固態(tài)白酒糟分離稻殼干燥或曬干后，再 與其他原料配合即可生產(chǎn)不同品種的飼料。雖然酒糟與小麥、玉米、高粱等糧食 的營養(yǎng)成分具有一定相似性，但是其中的粗纖維和植酸等抗?fàn)I養(yǎng)因子含量都較 高，除非經(jīng)過去殼等方法處理，否則很難應(yīng)用于飼料中，因此尋找更合理的處理 方法，才能使酒糟更充分發(fā)揮其中內(nèi)在的營養(yǎng)價值。雖然以往使用理化方法處理白酒糟制造提取化工品比較普遍，但這種處理方 法不能明顯改善白酒糟營養(yǎng)成分并用于飼料工業(yè)，且用理化方法處理的酒糟廢液 仍含有大量的有機(jī)物，COD值還在1500mg/L左右，若直接排放，仍將對環(huán)境產(chǎn) 生嚴(yán)重影響。相比較而言，采用微生物發(fā)酵的方法就有很大的優(yōu)勢，既可防止污 染，又能最大程度地利用資源，生產(chǎn)條件也比較簡單。據(jù)報道，目前國內(nèi)主要用 于生產(chǎn)菌體蛋白的微生物有曲霉菌、根霉菌、假絲酵母菌、乳酸桿菌、乳酸鏈球 菌、枯草桿菌、賴氨酸產(chǎn)生菌、擬內(nèi)孢霉、白地霉等。目前選育出的菌種有(1) 酵母菌酵母耐酸能力強(qiáng)，個體大，易回收，適宜于酒糟發(fā)酵，常用 的酵母菌有熱帶假絲酵母菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌、皮狀絲孢酵母菌、樹狀酵母。(2) 放線菌放線菌具有很強(qiáng)的分解纖維素的能力，可直接利用纖維原料生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白，常用的放線菌有諾卡氏菌、高溫放線菌。(3) 霉菌霉菌可產(chǎn)生高活性的纖維素酶，降解酒糟中的纖維素，常用的霉菌有白地霉、黑曲霉、康寧木霉、綠色木霉。(4)擔(dān)子真菌等。主要用于生產(chǎn)食用真菌等。 .研究表明，混合菌發(fā)酵的效果更明顯，采用多菌種混合回轉(zhuǎn)發(fā)酵，占地面積 小，發(fā)酵36 48h，可將酒糟的粗蛋白含量提高至30%以上，氨基酸的含量在22% 以上，粗纖維降低了2%左右。在發(fā)酵階段，菌株代謝酶破壞了纖維素和木質(zhì)素之 間的緊密結(jié)構(gòu)，更易于動物消化吸收，從而大大提高了酒糟蛋白飼料的生物效價。 目前已有研究用酒糟同雞糞和一些添加物，如玉米秸稈等粗纖維混合制造飼 料的報道，通過飼喂豬、牛、羊、鴨等均取得了較好的增重增產(chǎn)效果。以酒糟為 基本原料添加瘤胃內(nèi)容物或混合菌種發(fā)酵，可得到菌體蛋白詞料，這樣，不僅可 以變廢為寶，減少污染，而且還可以將原本作為粗飼料添加的酒糟變?yōu)榫?，?高營養(yǎng)含量添加劑，飼喂效果也比較成功。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種采用乳酸菌和酵母菌混合發(fā)酵處理酒糟與豆 粕、菜餅、棉粕或其他雜粕等蛋白性原料混合物的方法。經(jīng)該方法獲得的飼料， 其蛋白質(zhì)含量高，不含醇類及其它有毒物質(zhì)，因而動物適口性好，使用安全， 飼養(yǎng)效果好，不但使酒糟內(nèi)在的營養(yǎng)價值得到了充分發(fā)揮，而且還解決了酒糟 對環(huán)境造成的污染問題。本發(fā)明是通過實(shí)施如下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，其特征在于所使用的菌種 為發(fā)酵乳酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母，工藝步驟為將經(jīng)三級種子培養(yǎng)的發(fā)酵乳 酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母混合后接種于混合種子培養(yǎng)基中，得到發(fā)酵乳酸短桿 菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合種子液，再將該混合種子液按l: IO的接種量接種于 濕度為50 60%的混合發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種后的混合物在30 37t:的溫度下經(jīng) 分段發(fā)酵后，將所得的發(fā)酵物再置于40 6(TC的溫度下烘干、包裝后得到成品。所述發(fā)酵乳酸短桿菌(5rew'6a"ei"i"/ff 73cto/er/pe/7t咖)的保藏編號為 CICC 10227，產(chǎn)朊假絲酵母(Om力^nflz7j)的保藏編號為CICC 1314,菌種分 別保存于培養(yǎng)基斜面上。所述發(fā)酵乳酸短桿菌(5reWtecZ^77'咖7actafe7we/7t咖)的三級種子培養(yǎng) 步驟為A、 挑取2 3個接種環(huán)菌體接種于5ml乳酸菌液體培養(yǎng)基中，220rpm， 37°C 培養(yǎng)16小時，得一級種子培養(yǎng)液；B、 將5mL過夜培養(yǎng)的一級種子培養(yǎng)液接種于100mL乳酸菌液體培養(yǎng)基中， 220rpm， 37'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度"(^CFU/mL，得二級種子培養(yǎng)液；C、 將100mL二級種子培養(yǎng)液接種于10L乳酸菌液體培養(yǎng)基中，220rpm， 37'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度W(^CFU/mL，得發(fā)酵乳酸短桿菌的三級種 子培養(yǎng)液。所述乳酸菌液體培養(yǎng)基配制如下酵母膏7.5g 、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g、 KH2P042g、西紅柿汁100mL、吐溫-80 0.5mL、蒸餾水900mL， pH7.0， 15 磅滅菌30分鐘。所述產(chǎn)朊假絲酵母(Omc/Wflto^)的三級種子培養(yǎng)步驟為A、 挑取2 3個接種環(huán)菌體接種于5ml麥芽汁液體培養(yǎng)基中，220ipm， 28 。C培養(yǎng)16小時，得一級種子培養(yǎng)液；B、 將5mL過夜培養(yǎng)的一級種子培養(yǎng)液接種于100mL麥芽汁液體培養(yǎng)基中， 220rpm， 28'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度W(^CFU/mL,得二級種子培養(yǎng)液；C、 將100mL二級種子培養(yǎng)液接種于10L麥芽汁液體培養(yǎng)基中，220rpm， 28'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度MOYFU/mL，得產(chǎn)朊假絲酵母的三級種子 培養(yǎng)液。所述麥芽汁培養(yǎng)基配制如下將發(fā)酵啤酒的原料(未加酒花)，稀釋至12 柏林，15磅滅菌30分鐘。所述乳酸菌或麥芽汁液體培養(yǎng)基，通過添加總重量1.5%的瓊脂粉即可得到 固體培養(yǎng)基。所述發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合種子液的培養(yǎng)工藝為將發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母按照1: 0.01 1的比例混合后，再按1:10的接種量接種于種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度28 30°C ，攪拌轉(zhuǎn)速220 300r/min， 培養(yǎng)48小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL。所述發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的最佳混合比例為1: 0.1。 所述種子培養(yǎng)基配制為玉米淀粉5%、尿素1%、 CaHP04 0.5%，自然 pH值，15磅滅菌30分鐘。所述混合發(fā)酵培養(yǎng)基的制作工藝為將新鮮酒糟于45 55'C下烘干或壓榨 至含水量為25 35%后，以重量百分比計(jì)，先按照白酒酒糟與蛋白性原料為80 90%: 10 20%進(jìn)行混合，再按照97.3~98.9%%的混合物和1~2.5%的尿素進(jìn)行 混合，加入0.1。/aCaCO3，再選擇性加入0.5%的CaHP04、 0.1%飼用礦物添加劑 或0.1%飼用維生素配制發(fā)酵培養(yǎng)基，自然pH值，105'C蒸汽間歇式滅菌1小時， 2 3次，每次間歇3 4小時。所述混合發(fā)酵培養(yǎng)基的濕度通過加入水或適量麩皮加以控制。所述蛋白性原料選自豆粕、棉粕、菜籽餅或椰子粕。配制1000Kg所述飼用礦物添加劑的原料組成及重量配比如下CuS04 5H20 24KgFeS04 7H20 250KgZnS04 H20 200KgMnS04 200Kg質(zhì)量百分比濃度為5n/。的KI 5Kg 質(zhì)量百分比濃度為1%的Na2Se03 18Kg.載體沸石粉 303Kg配制方法為先將70%的沸石粉212.1 Kg加入到混合器中，然后按上述重 量配比加入CuS04.5H20、 FeS04.7H20、 ZnS04.H20、 MnS04、 5%的KI及1% 的Na2Se03，最后再加入余下的87.9 Kg沸石粉，混合均勻即得到1000 Kg飼 用礦物添加劑。所述飼用維生素選自由北京君德同創(chuàng)公司生產(chǎn)的"豬通用多種維生素"。所述分段發(fā)酵是指將接種后的混合物分裝于密閉袋子中，然后分兩階段進(jìn)行發(fā)酵處理，先好氧發(fā)酵12小時，發(fā)酵溫度30 32'C;后厭氧發(fā)酵48 72 小時，發(fā)酵溫度35 37。C，當(dāng)混合物pH下降至3.5 4.0的穩(wěn)定狀態(tài)，且菌體數(shù) 目達(dá)到107 108 CFU/g時，停止發(fā)酵。 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1、 本發(fā)明采用發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母兩種微生物混合發(fā)酵處理酒 糟與豆粕、菜餅、棉粕或其他雜粕等蛋白性原料混合物，從而獲得了蛋白質(zhì)含 量高達(dá)30 40%，無醇類物質(zhì)，且適口性好，無有毒物質(zhì)，使用安全性好的詞 料原料；2、 本發(fā)明在對飼料原料的發(fā)酵過程中，采用先好氧、后厭氧的分段發(fā)酵方 式，從而有效地脫去了菜餅等蛋白性原料中的硫代葡萄糖甙，在最終獲得的詞 料成品中，硫代葡萄糖甙的含量低于0.01%，符合飼料安全要求即異硫氰酸 含量小于0.045%、噁唑烷硫酮含量小于0.025%;3、 本發(fā)明通過先好氧、后厭氧發(fā)酵的共同作用，從而有效地脫去了棉粕等 蛋白.性原料中的棉酚，在最終獲得的飼料成品中，棉酚的含量低于0.01%，符 合飼料安全要求即棉酚的含量小于0.02%;4、 本發(fā)明通過采用發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母兩種微生物先好氧、后 厭氧共同發(fā)酵酒糟，從而增加了酒糟中的總蛋白含量，降解了醇類物質(zhì)，分解 了纖維素等非淀粉多糖類物質(zhì)，使最終獲得的飼料成品的纖維素含量由原有的 25%下降至11%，蛋白質(zhì)含量由原有的15%提高至30 40%。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，所使用的菌種之一為發(fā)酵乳 酸短桿菌(5re^z'6a"ei-i咖7a"o/knz7e"t咖)，其保藏編號為CICC 10227，菌 種之二為產(chǎn)朊假絲酵母(OmdW"M/&)，其保藏編號為CICC 1314，菌種分別 保存于培養(yǎng)基斜面上。所述發(fā)酵乳酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母分別經(jīng)三級種子培養(yǎng)，混合后接種于 混合種子培養(yǎng)基中，得到發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合種子液，再將 該混合種子液按l: 10的接種量接種于濕度為50%的混合發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種 后的混合物在30 37'C的溫度下經(jīng)分段發(fā)酵后，將所得的發(fā)酵物再置于50'C的 溫度下烘干、包裝后得到成品。所述發(fā)酵乳酸短桿菌(5rew'力scteri咖7acto/"e/yz7e/ t咖)的三級種子培養(yǎng) 步驟為A、 挑取2 3個接種環(huán)菌體接種于5ml乳酸菌液體培養(yǎng)基中，220rpm， 37°C 培養(yǎng)16小時，得一級種子培養(yǎng)液B、 將5mL過夜培養(yǎng)的一級種子培養(yǎng)液接種于100mL乳酸菌液體培養(yǎng)基中， 220rpm， 37'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度H(^CFU/mL，得二級種子培養(yǎng)液；C、 將100mL二級種子培養(yǎng)液接種于10L乳酸菌液體培養(yǎng)基中，220rpm， 37。C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL,得發(fā)酵乳酸短桿菌的三級種子培養(yǎng)液。所述乳酸菌液體培養(yǎng)基配制如下酵母膏7.5g 、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g、 KH2P042g、西紅柿汁100mL、吐溫-80 0.5mL、蒸餾水900mL， pH7.0， 15 磅滅菌30分鐘。所述產(chǎn)朊假絲酵母(am必&to&)的三級種子培養(yǎng)步驟為A、 挑取2 3個接種環(huán)菌體接種于5ml麥芽汁液體培養(yǎng)基中，220rpm， 28 'C培養(yǎng)16小時，得一級種子培養(yǎng)液；B、 將5mL過夜培養(yǎng)的一級種子培養(yǎng)液接種于100mL麥芽汁液體培養(yǎng)基中， 220rpm， 28'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL，得二級種子培養(yǎng)液；C、 將100mL二級種子培養(yǎng)液接種于10L麥芽汁液體培養(yǎng)基中，220rpm， 28'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL,得產(chǎn)朊假絲酵母的三級種子 培養(yǎng)液。所述麥芽汁培養(yǎng)基配制如下將發(fā)酵啤酒的原料(未加酒花)，稀釋至12 柏林，15磅滅菌30分鐘。所述發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合種子液的培養(yǎng)工藝為將發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母按照1: 0.5的比例混合后，再按l: 10 的接種量接種于種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度3(TC，攪拌轉(zhuǎn)速220r/min，培養(yǎng)48 小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL。所述種子培養(yǎng)基配制為玉米淀粉5%、尿素1%、 CaHP04 0.5%,自然 pH值，15磅滅菌30分鐘。所述混合發(fā)酵培養(yǎng)基的制作工藝為將新鮮酒糟于45'C下烘干至含水量為 30%后，以重量百分比計(jì)，先將80%的白酒酒糟與20%的菜籽餅混合，再取97.4% 的酒糟菜籽餅混合物與2%的尿素混合后，加入0.1Q/。CaCO3、 0.5% CaHP04, 自然pH值，105'C蒸汽間歇式滅菌1小時，2次，間歇4小時。所述分段發(fā)酵是指將接種后的混合物分裝于密閉袋子中，然后分兩階段 進(jìn)行發(fā)酵處理，先好氧發(fā)酵12小時，自然狀態(tài)發(fā)酵，溫度3(TC;厭氧發(fā)酵60 小時，發(fā)酵溫度35'C，當(dāng)混合物pH下降至4.0的穩(wěn)定狀態(tài)，且菌體數(shù)目達(dá)到 K)7 108CFU/g時，停止發(fā)酵。該產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)如下微生物含量107 108CFU/g， pH<4.0，蛋白質(zhì)含量30%以上，硫甙含量小 于0.01%。實(shí)施例2將發(fā)酵乳酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母分別進(jìn)行三級種子培養(yǎng)，三級種子液經(jīng) 混合后接種于混合種子培養(yǎng)基中，得到發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合 種子液，再將該混合種子液按l: 10的接種量接種于濕度為60%的混合發(fā)酵培 養(yǎng)基中，接種后的混合物在30 37'C的溫度下經(jīng)分段發(fā)酵后，將所得的發(fā)酵物 再置于4(TC的溫度下烘干、包裝后得到成品。所述發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合種子液的培養(yǎng)工藝為將發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母按照l: l的比例混合后，再按l: 10的接種量接種于種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度28'C，攪拌轉(zhuǎn)速220r/min，培養(yǎng)50小 時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL。所述混合發(fā)酵培養(yǎng)基的制作工藝為將新鮮酒糟壓搾至含水量為35%后， 以重量百分比計(jì)，先將80%的白酒酒糟與20%的棉粕混合，再取97.3%的酒糟 棉粕混合物與2.5%的尿素混合后，加入0.1。/nCaCO3、 0.1%詞用礦物添加劑， 自然pH值，105。C蒸汽間歇式滅菌1小時，3次，每次間歇3 4小時。其余方法步驟同實(shí)施例l。該產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)如下-微生物含量107 108CFU/g， pH<4.0,蛋白質(zhì)含量30%以上。 實(shí)施例3將發(fā)酵乳酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母分別進(jìn)行三級種子培養(yǎng)，三級種子液經(jīng) 混合后接種于混合種子培養(yǎng)基中，得到發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合 種子液，再將該混合種子液按l: 10的接種量接種于濕度55%的混合發(fā)酵培養(yǎng) 基中，接種后的混合物在30 37'C的溫度下經(jīng)分段發(fā)酵后，將所得的發(fā)酵物再 置于60'C的溫度下烘干、包裝后得到成品。所述發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合種子液的培養(yǎng)工藝為將發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母按照l: O.Ol的比例混合后，再按l: 10 的接種量接種于種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度3(TC，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，培養(yǎng)72 小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL。所述混合發(fā)酵培養(yǎng)基的制作工藝為將新鮮酒糟于55'C下烘干至含水量為 25%后，以重量百分比計(jì)，先將90%的白酒酒糟與10%的豆粕混合，再取98.9% 的酒糟豆粕混合物與1%的尿素混合后，加入0.1。/。CaCO3，自然pH值，105°C 蒸汽間歇式滅菌l小時，3次，每次間歇3 4小時。其余方法步驟同實(shí)施例l。該產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)如下微生物含量107 108CFU/g， pH<4.0,蛋白質(zhì)含量30%以上。 實(shí)施例4將發(fā)酵乳酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母分別進(jìn)行三級種子培養(yǎng)，三級種子液經(jīng) 混合后接種于混合種子培養(yǎng)基中，得到發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合 種子液，再將該混合種子液按l: 10的接種量接種于濕度58%的混合發(fā)酵培養(yǎng) 基中，接種后的混合物在30 37'C的溫度下經(jīng)分段發(fā)酵后，將所得的發(fā)酵物再 置于40 50。C的溫度下烘干、包裝后得到成品。所述發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲#母的混合種子液的培養(yǎng)工藝為將發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母按照l: O.l的比例混合后，再按l: 10 的接種量接種于種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度3(TC，攪拌轉(zhuǎn)速220r/min，培養(yǎng)55 小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL。所述混合發(fā)酵培養(yǎng)基的制作工藝為將新鮮酒糟于45t:下烘干至含水量為 32%后，以重量百分比計(jì),先將80%的白酒酒糟與20%的椰子粕混合，再取97.8%的酒糟椰子粕混合物與2%的尿素混合后，加入0.in/。CaCO3、 0.1%飼用維生素， 自然pH值，105'C蒸汽間歇式滅菌1小時，2次，間歇3小時。其余方法步驟同實(shí)施例l。該產(chǎn)品的主要技術(shù)指標(biāo)如下微生物含量107 108CFU/g， pH<4.0，蛋白質(zhì)含量30%以上。
權(quán)利要求
1、一種混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，其特征在于所使用的菌種為發(fā)酵乳酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母，工藝步驟為將經(jīng)三級種子培養(yǎng)的發(fā)酵乳酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母混合后接種于混合種子培養(yǎng)基中，得到發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的混合種子液，再將該混合種子液按1∶10的接種量接種于濕度為50～60％的混合發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種后的混合物在30～37℃的溫度下經(jīng)分段發(fā)酵后，將所得的發(fā)酵物再置于40～60℃的溫度下烘干、包裝后得到成品；所述發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母混合種子液的培養(yǎng)工藝為將發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母按照1∶0.01～1的比例混合后，再按110的接種量接種于種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度28～30℃，攪拌轉(zhuǎn)速220～300r/min，培養(yǎng)48小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度＞109CFU/mL；所述種子培養(yǎng)基配制為玉米淀粉5％、尿素1％、CaHPO4 0.5％，自然pH值，15磅滅菌30分鐘；所述分段發(fā)酵是指將接種后的混合物分裝于密閉袋子中，然后分兩階段進(jìn)行發(fā)酵處理，先好氧發(fā)酵12小時，發(fā)酵溫度30～32℃；后厭氧發(fā)酵48～72小時，發(fā)酵溫度35～37℃，當(dāng)混合物pH下降至3.5～4.0的穩(wěn)定狀態(tài)，且菌體數(shù)目達(dá)到107～108CFU/g時，停止發(fā)酵。
2、 如權(quán)利要求1所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要詞料原料的方法，其特 征在于所述發(fā)酵乳酸短桿菌的三級種子培養(yǎng)步驟為A、 挑取2 3個接種環(huán)菌體接種于5ml乳酸菌液體培養(yǎng)基中，220rpm， 37°C 培養(yǎng)16小時，得一級種子培養(yǎng)液；B、 將5mL過夜培養(yǎng)的一級種子培養(yǎng)液接種于100mL乳酸菌液體培養(yǎng)基中， 220rpm， 37"C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL，得二級種子培養(yǎng)液；C、 將100mL二級種子培養(yǎng)液接種于10L乳酸菌液體培養(yǎng)基中，220ipm， 37'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度W(fCFU/mL，得發(fā)酵乳酸短桿菌的三級種 子培養(yǎng)液。
3、 如權(quán)利要求1或2所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要詞料原料的方法， 其特征在于所述乳酸菌液體培養(yǎng)基配制如下酵母膏7.5g 、蛋白胨7.5g、葡萄 糖10g、 KH2P042g、西紅柿汁100mL、吐溫-80 0.5mL、蒸餾水900mL， pH 7.0， 15磅滅菌30分鐘。
4、 如權(quán)利要求1所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，其特 征在于所述產(chǎn)朊假絲酵母(Ca"&^/to沿).的三級種子培養(yǎng)步驟為A、 挑取2 3個接種環(huán)菌體接種于5ml麥芽汁液體培養(yǎng)基中，220rpm， 28 'C培養(yǎng)16小時，得一級種子培養(yǎng)液；B、 將5mL過夜培養(yǎng)的一級種子培養(yǎng)液接種于100mL麥芽汁液體培養(yǎng)基中， 220rpm， 28'C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL，得二級種子培養(yǎng)液；C、 將100mL二級種子培養(yǎng)液接種于10L麥芽汁液體培養(yǎng)基中，220rpm，28。C培養(yǎng)16小時，培養(yǎng)至細(xì)胞濃度〉l(^CFU/mL，得產(chǎn)朊假絲酵母的三級種子 培養(yǎng)液。
5、 如權(quán)利要求1或4所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法， 其特征在于所述麥芽汁培養(yǎng)基配制如下將未加酒花的發(fā)酵啤酒原料稀釋至12 柏林，15磅滅菌30分鐘。
6、 如權(quán)利要求1所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，其特 征在于所述發(fā)酵乳酸短桿菌與產(chǎn)朊假絲酵母的最佳混合比例為1: 0.1。
7、 如權(quán)利要求1所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，其特 征在于所述混合發(fā)酵培養(yǎng)基的制作工藝為將新鮮酒糟于45 55'C下烘干或壓榨至含水量為25 35%后，以重量百分 比計(jì)，先按照白酒酒糟與蛋白性原料為80 90%: 10 20%進(jìn)行混合，再按照 97.3~98.9°/。％的混合物和1~2.5%的尿素進(jìn)行混合，加入0.1。/oCaC03，再選擇性 加入0.5%的€01^04、0.1%飼用礦物添加劑或0.1%詞用維生素配制發(fā)酵培養(yǎng)基， 自然pH值，105'C蒸汽間歇式滅菌1小時，2 3次，每次間歇3~4小時。
8、 如權(quán)利要求7所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，其特 征在于所述蛋白性原料選自豆粕、棉粕、菜籽餅或椰子粕。
9、 如權(quán)利要求7所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，其特 征在于配制1000Kg所述飼用礦物添加劑的原料組成及重量配比如下-CuS04 5H20 24KgFeS04 7H20 250KgZnS04 H20 200KgMnS04 200Kg質(zhì)量百分比濃度為5%的KI 5Kg 質(zhì)量百分比濃度為1%的Na2Se03 18Kg載體沸石粉 303Kg配制方法為先將70%的沸石粉212.1 Kg加入到混合器中，然后按上述重 量配比加入CuS04.5H20、 FeS04.7H20、 ZnS04. H20、 MnS04、 5%的KI及1% WNa2Se03，最后再加入余下的87.9 Kg沸石粉，混合均勻即得到1000Kg飼 用礦物添加劑。
10、如權(quán)利要求7所述的混合發(fā)酵處理以酒糟為主要飼料原料的方法，其 特征在于所述飼用維生素選自由北京君德同創(chuàng)公司生產(chǎn)的"豬通用多種維生 素"。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種混合發(fā)酵處理酒糟等飼料原料的方法，菌種為發(fā)酵乳酸短桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母，其工藝為將經(jīng)三級種子培養(yǎng)的菌種液混合后接種于混合種子培養(yǎng)基中，再按1∶10的接種量將混合種子液接種于濕度為50～60％的混合發(fā)酵培養(yǎng)基中，混合物在30～37℃的溫度下經(jīng)分段發(fā)酵后的發(fā)酵物再置于40～60℃的溫度下烘干、包裝后得到成品。本發(fā)明采用先好氧后厭氧的分段發(fā)酵方式，從而有效地脫去了菜籽餅或棉粕中的硫代葡萄糖甙及棉酚，增加了酒糟中的總蛋白含量，降解了醇類物質(zhì)，分解了纖維素等非淀粉多糖類物質(zhì)，所得飼料成品中的纖維素含量由原有的25％下降至11％，蛋白質(zhì)含量由原有的15％提高至30～40％，動物飼喂效果好。
文檔編號A23K1/06GK101273749SQ20081004421
公開日2008年10月1日 申請日期2008年4月15日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月15日
發(fā)明者吳玉材, 鋼 李, 王信輝, 王小行, 陳聿久, 黎漢兵 申請人:四川宜賓全福飼料有限公司;四川川大光耀生物工程有限公司