專利名稱：：來自葡萄酒發(fā)酵醪液的具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳桿菌屬菌、含有該菌的組合物及具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌的高效分離方法。
背景技術(shù)：
：已知乳酸菌具有整腸作用、免疫賦活作用等有益的生理活性，且是具有健康功能的原材料，所以一般消費(fèi)者對(duì)其的認(rèn)知度也很高。此種具有有益生理活性的乳酸菌的大多數(shù)是從發(fā)酵乳制品、腸道分離的來自動(dòng)物原材料的乳酸菌。另外，在以植物原材料為分離源的植物性乳酸菌中也發(fā)現(xiàn)了具有免疫賦活作用的菌株。例如，日本特開平10-167972號(hào)公報(bào)(公開日平成10年6月23日)中記載了具有免疫賦活作用的乳酸菌植物乳桿菌(Lactobacillusplantarnm)L-137株。且已知從京都傳統(tǒng)的腌菜類"酸蘿卜咸菜"(日語(yǔ)原名「t〈"務(wù)」)中分離的短乳桿菌(Lactobacillusbrevis)Labre株，從"紫蘇淹"(日語(yǔ)原名「^tf漬tt」)中分離的戊糖乳桿菌(Lactobacilluspentosus)DA74N株等也具有免疫賦活作用[參照(l)日本特公平7-55908號(hào)公報(bào)(公開日平成6年7月26日)，(2)PaskenJournal15.21-26，2002，岸惇子、小久保A0I(日語(yǔ)原名Afcl0、赤谷薰、扇谷ERI子(日語(yǔ)原名i。子)、藤田哲也、岸田綱太郎用于有用乳酸菌選定的篩選1)(日語(yǔ)原名有用乳酸菌選定O&&o^夕V—二>夕"l))人體末梢血液中植物性乳酸菌的體外(invitro)免疫賦活作用，(3)第6次腸內(nèi)細(xì)菌學(xué)會(huì)(2002.05.30-31)要旨，赤谷薰、岸惇子、扇谷ERI子(日語(yǔ)原名AQ子)、小久保A0I(日語(yǔ)原名A於^)、藤田哲也、岸田綱太郎)]。已知以植物原材料為分離源的植物性乳酸菌與腌菜類、酒類的釀造有密切的關(guān)系，可從釀造工序中分離大量的菌。除上述以外，還存在具有免疫賦活作用等有價(jià)值的生理活性的菌株，例如，從酒類釀造工序的葡萄酒釀造工序中分離的、分離頻率高的菌株中可列舉植物乳桿菌。但是，對(duì)于該種從酒類釀造工序中分離的菌，主要進(jìn)行的研究是有關(guān)其在釀造過程中的作用、其對(duì)香味等所起的作用，對(duì)于菌本身對(duì)生物體所產(chǎn)生的作用基本未加以研究。因此，希望從酒類釀造工序中分離的乳酸菌中找到具有有價(jià)值的生理活性的菌株。此外，使用植物性乳酸菌時(shí)有時(shí)會(huì)產(chǎn)生獨(dú)特的發(fā)酵味，所以根據(jù)制造的食品種類，有時(shí)需考慮感官方面的問題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明鑒于上述現(xiàn)狀，以提供具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌、含有該菌的組合物及分離具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌的方法為目的。本發(fā)明者為解決所涉及的課題，對(duì)于從酒類釀造工序的產(chǎn)物中分離的乳酸菌測(cè)定了其免疫調(diào)節(jié)作用，對(duì)于從其中選擇的屬于植物乳桿菌及短乳桿菌的乳酸菌，更加詳細(xì)地測(cè)定了其免疫調(diào)節(jié)作用。其結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該乳酸菌具有強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)作用，且使用該乳酸菌的發(fā)酵產(chǎn)物呈現(xiàn)出良好的香味，從而完成了本發(fā)明。具體地說，對(duì)于從酒類釀造工序的產(chǎn)物中分離的乳酸菌來說，Thl型細(xì)胞因子白細(xì)胞介素12(以下簡(jiǎn)寫為"IL-12")誘導(dǎo)能力的比較結(jié)果，發(fā)現(xiàn)可高效分離具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌，特別是還發(fā)現(xiàn)了用屬于植物乳桿菌及短乳桿菌的菌株對(duì)由小鼠制備的腹腔巨噬細(xì)胞進(jìn)行體外處理時(shí)，可使IL-12的產(chǎn)生增加。且還證實(shí)了向小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行加熱菌液的體內(nèi)給藥，也可誘導(dǎo)Thl型細(xì)胞因子IL-12的產(chǎn)生。即本發(fā)明涉及酒類制造工序中的含有微生物的成分中所含有的具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳桿菌屬菌，特別是含有微生物的成分是發(fā)酵醪液，酒類制造工序是葡萄酒的釀造工序。此外，本發(fā)明涉及具有免疫調(diào)節(jié)作用的植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)或短乳桿菌(Lactobacillusbrevis)。且本發(fā)明中，具有免疫調(diào)節(jié)作用的植物乳桿菌是植物乳桿菌SAM2446株(FERMABP-10438)或短乳桿菌是短乳桿菌SAM2447株(FERMABP_10439)。本發(fā)明還涉及具有免疫調(diào)節(jié)作用的組合物，其含有酒類制造工序中的含有微生物的成分中所含有的具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳桿菌屬菌。特別是所述組合物是飲食品或醫(yī)藥品。本發(fā)明還進(jìn)一步涉及分離具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌的方法，其包括從酒類制造工序中的含有微生物的成分中分離微生物的工序、測(cè)定所分離的各微生物的免疫調(diào)節(jié)作用的工序及篩選免疫調(diào)節(jié)作用強(qiáng)的乳酸菌的工序。特別是含有微生物的成分是發(fā)酵醪液，酒類制造工序是葡萄酒的釀造工序。圖1表示測(cè)定將12種乳酸菌向小鼠腹腔內(nèi)給藥后血清IL一12濃度的結(jié)果。圖2表示經(jīng)解讀的SAM2446株的16SrRNA基因序列。下線部表示與植物乳桿菌JCM1149T(ATCC14917)的序列不同的部分。圖3表示經(jīng)解讀的S旭2447株的16SrRNA基因序列。下線部表示與短乳桿菌JCM1059T(ATCC14869)的序列不同的部分。圖4表示M活性的測(cè)定結(jié)果。圖5表示IFN-Y濃度的測(cè)定結(jié)果。具體實(shí)施例方式<乳桿菌屬菌>乳桿菌屬菌是乳酸菌的一種，本發(fā)明涉及酒類制造工序中的含有微生物的成分中所含有的具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳桿菌屬菌。乳桿菌屬菌優(yōu)選屬于植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)或短孚L桿菌(Lactobacillusbrevis)的孚L桿菌屬菌。乳桿菌屬菌的菌學(xué)性質(zhì)如《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》(BERGEY'SMANUALofSystematicBacteriology)(第1巻1984年、第2巻1986年、第3巻1989年、第4巻1989年)中所記載。本發(fā)明涉及的乳酸菌的代表菌可為植物乳桿菌S細(xì)2446株及短乳桿菌SAM2447株。本菌保藏于獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所、專利生物保藏中心(日本國(guó)茨城縣筑波市東1丁目1番地1中央第6)，其保藏號(hào)為FERMABP-10438及FERMABP-10439。植物乳桿菌SAM2446株(FERMABP-10438)的菌學(xué)性質(zhì)如表1所示，短乳桿菌SAM2447株(FERMABP-10439)的菌學(xué)性質(zhì)如表2所示。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本發(fā)明的乳桿菌屬菌，可通過從酒類制造工序中的含有微生物的成分中分離微生物、測(cè)定所分離的各微生物的免疫調(diào)節(jié)作用、篩選免疫調(diào)節(jié)作用強(qiáng)的菌來獲得。本發(fā)明中，"酒類制造工序"是指與酒類制造有關(guān)的一系列工序。在此，"酒類"中也包括葡萄酒等的果實(shí)酒，啤酒、發(fā)泡酒等的麥芽發(fā)酵飲料，清酒、威士忌等的蒸餾酒等。含有微生物的成分是指在酒類制造工序中存在有微生物的成分，例如，下料的原料、發(fā)酵醪等。<組合物>本發(fā)明涉及的乳桿菌屬菌，可作為含有該乳桿菌屬菌的組合物利用。特別是優(yōu)選作為具有免疫調(diào)節(jié)作用的藥學(xué)組合物利用。上述組合物中所含有的乳桿菌屬菌，可為乳桿菌屬菌(活菌及死菌)、乳桿菌屬菌含有物、乳桿菌屬菌發(fā)酵物、乳桿菌屬菌處理物等。活菌可從該乳桿菌屬菌培養(yǎng)液等的乳桿菌屬菌含有物中獲得。死菌，例如可通過對(duì)活菌進(jìn)行加熱、紫外線照射、福爾馬林處理等獲得?？赏ㄟ^將所得到的活菌、死菌進(jìn)一步磨碎、破碎等制成處理物。即本發(fā)明中利用乳桿菌屬菌的含有乳桿菌屬菌的組合物，可含有本發(fā)明涉及的乳桿菌屬菌、該乳桿菌屬菌含有物、該乳桿菌屬菌發(fā)酵物、該乳桿菌屬菌處理物中的至少任意一種。所述乳桿菌屬菌含有物，例如可為乳桿菌屬菌懸浮液、乳桿菌屬菌培養(yǎng)物(包括菌體、培養(yǎng)上清、培養(yǎng)基成分)、乳桿菌屬菌培養(yǎng)液(從菌培養(yǎng)物中除去固體成分后的產(chǎn)物)、乳桿菌屬菌發(fā)酵乳(乳桿菌屬菌飲料、酸乳、酸奶等)。用于培養(yǎng)屬于乳桿菌屬的微生物的培養(yǎng)基，只要是屬于乳桿菌屬的微生物可生長(zhǎng)發(fā)育的培養(yǎng)基，無特別限制，均可使用。且乳桿菌屬菌處理物，例如可為磨碎物、破碎物、液狀物(提取液等)、濃縮物、糊狀物、干燥物(噴霧干燥物、冷凍干燥物、真空干燥物、滾筒干燥物等)、稀釋物等。此外，因本發(fā)明涉及的植物乳桿菌SAM2446株及短乳桿菌SAM2447株是從葡萄酒釀造工序中分離的，所以，例如含有通過本發(fā)明涉及的乳桿菌屬菌使果菜類、谷類發(fā)酵的發(fā)酵產(chǎn)物的物質(zhì)，也作為本發(fā)明中利用乳桿菌屬菌的含有乳酸菌的組合物的一種優(yōu)選方式。且如上所述，本發(fā)明涉及的乳桿菌屬菌原本就是從食品中分離的，所以安全性高。本發(fā)明中利用乳桿菌屬菌的含有乳桿菌屬菌的組合物，優(yōu)選作為具有免疫調(diào)節(jié)作用的藥學(xué)組合物使用。例如可為飲食品、醫(yī)藥品、詞料等。用于飲食品時(shí)，可優(yōu)選作為具有免疫調(diào)節(jié)作用的健康食品實(shí)施。且可混合公知的甜味劑、酸味劑、維生素等的各種成分制成適合用戶嗜好的產(chǎn)品。例如，可以片劑、膠囊劑、保健營(yíng)養(yǎng)液、含片、口香糖、酸奶等的乳制品、冰淇淋、飲料、酒精飲料、調(diào)味料、加工食品、甜點(diǎn)類、點(diǎn)心等的形態(tài)提供。用于醫(yī)藥品時(shí)，可在主藥中使用賦形劑、結(jié)合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、矯味矯臭劑、助溶劑、懸浮劑、包衣材料等醫(yī)藥制劑
技術(shù)領(lǐng)域：
中通常使用的公知輔助劑進(jìn)行制劑化。劑型可為片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、糖漿劑、栓劑、注射劑等，無特別限定。本醫(yī)藥品的給藥途徑，例如可為經(jīng)口給藥、直腸給藥、經(jīng)腸給藥等，但無特別限定。用于飼料時(shí)，例如可于寵物食品或家畜用飼料等原料中混合菌體，或也可添加于市售的動(dòng)物用飼料中。其中，可優(yōu)選用于狗、貓或雞等禽類等的食佴中。<具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌的分離方法〉免疫調(diào)節(jié)作用的測(cè)定可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員周知的方法中的任一種方法。例如，Thl型細(xì)胞因子白細(xì)胞介素12(以下簡(jiǎn)寫為"IL-12")誘導(dǎo)能力試驗(yàn)中，對(duì)由小鼠制備的腹腔巨噬細(xì)胞通過體外處理測(cè)定IL-12的產(chǎn)生量。免疫調(diào)節(jié)作用強(qiáng)的乳酸菌的篩選，可通過上述免疫調(diào)節(jié)作用的測(cè)定，通過篩選免疫調(diào)節(jié)作用強(qiáng)的菌株來進(jìn)行。篩選的標(biāo)準(zhǔn)，可進(jìn)行與具有公知免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌比較、與對(duì)照比較或與平均值比較等適當(dāng)設(shè)定。此外，除免疫調(diào)節(jié)作用外，還可將在一般的乳酸菌用培養(yǎng)基中是否顯示良好增殖添加到篩選標(biāo)準(zhǔn)中。本發(fā)明中，"酒類制造工序"是指與酒類制造有關(guān)的一系列工序。在此，"酒類"中也包括葡萄酒等的果實(shí)酒，啤酒、發(fā)泡酒等的麥芽發(fā)酵飲料，清酒威士忌等的蒸餾酒等。含有微生物的成分是指在酒類制造工序中存在有微生物的成分，例如為下料原料、發(fā)酵醪等。作為分離源，通過使用上述葡萄酒釀造工序中的發(fā)酵醪液等，可極高效地分離具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌。通過實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明，但本發(fā)明不限于上述各實(shí)施方式，在權(quán)利要求所示范圍內(nèi)可進(jìn)行種種變更，對(duì)于根據(jù)不同的實(shí)施方式適當(dāng)組合分別公開的技術(shù)手段后所得到的實(shí)施方式，也包含于本發(fā)明的技術(shù)范圍。實(shí)施例實(shí)施例1〔使用乳酸菌株〕為選擇Thl型免疫賦活能力強(qiáng)的菌株，將從葡萄酒釀造醪中分離的104株乳酸菌用于白細(xì)胞介素12(IL-12)誘導(dǎo)能力的比較實(shí)驗(yàn)中?！搀w外剌激的IL-12誘導(dǎo)〕對(duì)BALB/c小鼠(7周齡.雄性)，將4.05%硫乙醇酸鈉進(jìn)行腹腔內(nèi)給藥，4天后使用PBS回收腹腔內(nèi)巨噬細(xì)胞，使用含有10%FBS的RPMI培養(yǎng)基調(diào)整到2X106cells/mL后，在24孔(well)板中按每孔0.5mL加入。在各孔中添加各菌株的加熱死菌(lug/mL)，測(cè)定培養(yǎng)24小時(shí)后的培養(yǎng)上清中的IL-12濃度。對(duì)照中不添加死菌。因IL-12的活性型是p35和p40的亞單位結(jié)合后的p70，所以測(cè)定IL-12(p70)。且IL-12的測(cè)定中使用OptEIAmouseIL-12測(cè)定試劑盒(BDPharmingen公司制)評(píng)價(jià)分離的104株乳酸菌的體外IL-12產(chǎn)生能力的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)大量含有具有IL-12產(chǎn)生能力的菌株。其中一些菌株的IL-12產(chǎn)生能力即使與已知具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌相比也具有非常高的活性。其中，具有超出對(duì)照10倍的IL-12產(chǎn)生能力菌株有12株，所以可作為具有高IL-12產(chǎn)生能力的菌株進(jìn)行選擇?？紤]到超出對(duì)照10倍的這種極高的標(biāo)準(zhǔn)，認(rèn)為這種概率為相當(dāng)高的值，所以，認(rèn)為葡萄酒釀造醪作為免疫調(diào)節(jié)乳酸菌的分離源非常有利用價(jià)值。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>*1:相對(duì)于對(duì)照的各樣品的IL-12產(chǎn)生量*2:后述的SAM2446株(FERMABP-10438)承3:后述的SAM2447株(FERMABP-10439)實(shí)施例2(使用乳酸菌株〕將實(shí)施例1中選擇的乳酸菌12株用于體內(nèi)刺激IL-12誘導(dǎo)能力的比較實(shí)驗(yàn)?！搀w內(nèi)刺激的IL-12誘導(dǎo)〕對(duì)BALB/c小鼠(7周齡，雄性)，將上述各菌株的加熱死菌(500ug/0.2mL/mouse)懸浮液(溶劑生理食鹽水)進(jìn)行腹腔內(nèi)給藥，6小時(shí)后頸椎脫臼后，從心臟采血。對(duì)于對(duì)照的小鼠等量投給生理食鹽水。采血后，通過離心分離采取血清，使用OptEIAmouseIL-12測(cè)定試劑盒(BDPharmingen公司制)測(cè)定血清中的IL-12濃度。結(jié)果如圖l所示。血清IL-12濃度在A株和L株中特別高。因此，將其分別命名為SAM2446株、SAM2447株。實(shí)施例3SAM2446株、SAM2447株的鑒定SAM2446株的菌學(xué)性質(zhì)的研究結(jié)果如表1所示，SAM2447株的菌學(xué)性質(zhì)的研究結(jié)果如表2所示。通過這些研究結(jié)果，推測(cè)出SAM2446株是植物乳桿菌，SAM2447株是短乳桿菌。已知植物乳桿菌有具有山梨醇同化性和不具有山梨醇同化性的兩種，如表1所示，SAM2446株是具有山梨醇同化性的乳酸菌種。且已知短乳桿菌有具有D-木糖同化性和不具有D-木糖同化性的兩種，如表2所示，SAM2447株是不具有D-木糖同化性的乳酸菌種。從SAM2446株及SAM2447株中提取DNA后，對(duì)16SrRNA基因區(qū)域進(jìn)行解讀。因經(jīng)解讀的S雄2446株的16Sr頭A基因序列(序列號(hào)1)具有與植物乳桿菌JCM1149T(ATCC14917)的16SrRNA基因序列99%的同源性，所以鑒定為植物乳桿菌(圖2)。且SAM2447株的16SrRNA基因序列(序列號(hào)2)具有與短乳桿菌JCM1059T(ATCC14869)的16SrRNA基因序列97%的同源性，所以鑒定為短乳桿菌(圖3)。實(shí)施例4經(jīng)口攝取的免疫賦活及免疫調(diào)節(jié)作用對(duì)C57BL/6小鼠[日本CharlesRiver株式會(huì)社(日語(yǔ)原名日本f"^一》又''J"'一株式會(huì)社)、7周齡"雄性、1組4只]，使其以飲水(相當(dāng)于0.2mg/day)的方式自由攝取1周SAM2446株、S細(xì)2447株(死菌體)。并設(shè)置不攝取SAM2446株、SAM2447株的對(duì)照組。l周后摘出脾臟。根據(jù)通常方法，用摘出的脾臟制備脾細(xì)胞，測(cè)定M活性和細(xì)胞因子產(chǎn)生能力。NK活性的測(cè)定，是將脾細(xì)胞和靶細(xì)胞Yac-l以200:1或100:1的比例共培養(yǎng)4小時(shí)，再使用流式細(xì)胞儀用PINK法測(cè)定脾細(xì)胞的細(xì)胞毒活性。且使刀豆素A(NacalaiTesque)2.5mg/mL與脾細(xì)胞(5X106個(gè)/mL)作用24小時(shí)，用ELISA法[OptEIA(BDBioScience)]測(cè)定培養(yǎng)上清中產(chǎn)生的IFN-y濃度。NK活性的測(cè)定結(jié)果如圖4所示。圖4中，NK活性(%)表示對(duì)小鼠脾細(xì)胞Yac-l的細(xì)胞毒性，E:T比表示反應(yīng)的脾細(xì)胞數(shù):Yac-l數(shù)。從圖4可說明，與對(duì)照組(control)相比，由經(jīng)口攝取了SAM2446株、SAM2447株的小鼠制備的脾細(xì)胞的NK活性顯著提高。IFN-y濃度的測(cè)定結(jié)果如圖5所示。從圖5可說明，與對(duì)照組(control)相比，由經(jīng)口攝取了SAM2446株、SAM2447株的小鼠制備的脾細(xì)胞的IFN-y濃度顯著增加。如上所述，在經(jīng)口攝取了SAM2446株、SAM2447株的小鼠中NK活性增加，促進(jìn)了Thl型細(xì)胞因子IFN-Y的產(chǎn)生。因此，證明SAM2446株、SAM2447株具有免疫賦活作用及具有免疫調(diào)節(jié)作用。實(shí)施例5豆乳發(fā)酵物的制造將SAM2446株發(fā)酵菌液以不受其他微生物污染為條件添加于市售的豆乳中，3(TC靜置24小時(shí)獲得豆乳發(fā)酵物。發(fā)酵迅速進(jìn)行，可發(fā)現(xiàn)酸度提高及pH值降低。所得到的發(fā)酵物與以往的植物發(fā)酵品相比未呈現(xiàn)不愉快的發(fā)酵味等，而呈現(xiàn)出感官上優(yōu)異的香味。實(shí)施例6添加乳酸菌末的豆乳的制造將SAM2447株發(fā)酵菌液加熱殺菌后，通過離心分離(3000rpm、IO分鐘)回收菌體，所得到的菌體進(jìn)行冷凍干燥。將該乳酸菌菌體末在市售的豆乳中添力口-攪拌，使其懸浮溶解于豆乳中，所得到添加乳酸菌末的豆乳與以往的含有乳酸菌的發(fā)酵食品相比，未呈現(xiàn)不愉快發(fā)酵味等，而呈現(xiàn)出感官上優(yōu)異的香味。實(shí)施例7含有乳酸菌的組合物的制造制造例l:含有乳酸菌的醫(yī)藥品片劑通過以下所示方法，制造含有乳酸菌的醫(yī)藥品(片劑)。將50gSAM2446株菌體末與250g乳糖及2g硬脂酸鎂一同混合，通過用單沖式壓片機(jī)壓片，制造直徑10mm、重量300mg的片劑。顆粒劑在100gSAM2447株菌體末中加入0.5g硬脂酸鎂，經(jīng)壓縮、粉碎、整粒、過篩后，得到2050目的顆粒劑。制造例2:含有乳酸菌的各種飲食品用以下所示的組成，制造加入了乳酸菌的各種飲食品。被糖(組成)(重量:份)山梨醇粉末99.7香料0.2SAM2446株菌體末0.05山梨醇晶種(sorbitolseed)0,05，/100.00果凍(咖啡果凍)(組成)(重量份)精制白砂糖15.0明膠1.0咖啡提取物5.0水78.93SAM2447株菌體末_0.07總量100.00果汁:(組成)(重量:份)冷凍濃縮溫州蜜桔果汁5.0果糖葡萄糖液糖11.0檸檬酸0,2L-抗壞血酸0.02SAM2446株菌體末0,05香料0.2色素0.1水83.43總量100.00碳酸飲料(組成)(重蓍t份)精制白砂糖8,0濃縮檸檬果汁1.0L-抗壞血酸0.10檸檬酸0.09檸檬酸鈉0.05著色料0.05香料0-15碳酸水90.55SAM2447株菌體末0.01，/旦'W、塌100.00表8<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表10<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表12發(fā)泡酒(組成)發(fā)泡酒SAM2447株菌體末總"S(重量份)99.980.02100.0制造例3:含有乳酸菌的詞料用如下所示的組成，制造加入了乳酸菌的伺料。表13飼料(組成)(重量份)市售寵物食品99.98SAM2446株菌體末_0，P2總量100.0如攝取本發(fā)明的乳桿菌屬菌等，則可通過賦活免疫功能來抑制免疫功能下降。且通過調(diào)節(jié)免疫功能的平衡，可抑制對(duì)生物體產(chǎn)生不良影響的免疫功能的過度亢進(jìn)和由此派生的給生物體帶來的各種不良癥狀等。根據(jù)本發(fā)明，可高效獲得具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌。權(quán)利要求1.具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳桿菌屬菌，其含有于葡萄酒釀造工序的發(fā)酵醪液中。2.權(quán)利要求l中所述的菌，其中，乳桿菌屬菌是植物乳桿菌。3.權(quán)利要求l中所述的菌，其中，乳桿菌屬菌是短乳桿菌。4.權(quán)利要求2中所述的菌，其中，植物乳桿菌具有山梨醇同化性。5.權(quán)利要求3中所述的菌，其中，短乳桿菌不具有D-木糖同化性。6.權(quán)利要求2中所述的菌，其中，植物乳桿菌是植物乳桿菌SAM2446株(FERMABP-10438)。7.權(quán)利要求3中所述的菌，其中，短乳桿菌是短乳桿菌SAM2447株(FERMABP-10439)。8.組合物，其含有權(quán)利要求17中任一項(xiàng)所述的乳桿菌屬菌，具有免疫調(diào)節(jié)作用。9.權(quán)利要求8中所述的組合物，其中，所述組合物是飲食品。10.權(quán)利要求8中所述的組合物，其中，所述組合物是醫(yī)藥品。11.權(quán)利要求8中所述的組合物，其中，所述組合物是飼料。12.方法，其是分離具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌的方法，所述方法包括(a)從酒類制造工序中的含有微生物的成分中分離微生物的工序，(b)測(cè)定被分離的各微生物的免疫調(diào)節(jié)作用的工序，及(c)篩選免疫調(diào)節(jié)作用強(qiáng)的乳酸菌的工序。13.權(quán)利要求12中所述的方法，其中，乳酸菌是乳桿菌屬菌。14.權(quán)利要求12或13中所述的方法，其中，所述含有微生物的成分是發(fā)酵醪液。15.權(quán)利要求1214中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述酒類制造工序是葡萄酒釀造工序。全文摘要本發(fā)明涉及具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳桿菌屬菌、含有該菌的組合物及具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌的高效分離方法。本發(fā)明的乳桿菌屬菌具有免疫調(diào)節(jié)作用，如攝取本發(fā)明的組合物等，則可通過賦活免疫功能來抑制免疫功能下降。且根據(jù)本發(fā)明，可高效獲得具有免疫調(diào)節(jié)作用的乳酸菌。文檔編號(hào)C12R1/25GK101300341SQ20068004062公開日2008年11月5日申請(qǐng)日期2006年10月31日優(yōu)先權(quán)日2005年10月31日發(fā)明者山村孝子,蘆刈匡子,阿部圭一,飯野妙子申請(qǐng)人:三得利株式會(huì)社