本發(fā)明涉及植物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種利用氣生根誘導(dǎo)綠蘿愈傷組織的方法。
背景技術(shù)：
綠蘿(學(xué)名：epipremnumaureum)，屬于麒麟葉屬植物，大型常綠藤本，生長于熱帶地區(qū)，常攀援生長在雨林的巖石和樹干上，其纏繞性強(qiáng)，氣根發(fā)達(dá)，可以水培種植。成熟枝上葉柄粗壯，長30-40厘米，基部稍擴(kuò)大，上部關(guān)節(jié)長2.5-3厘米、稍肥厚，腹面具寬槽，葉鞘長，葉片薄革質(zhì)，翠綠色，通常(特別是葉面)有多數(shù)不規(guī)則的純黃色斑塊，全緣，不等側(cè)的卵形或卵狀長圓形，先端短漸尖，基部深心形，稍粗，兩面略隆起。
綠蘿原產(chǎn)地在印度尼西亞所羅門群島的熱帶雨林中，性喜溫暖、潮濕環(huán)境，要求土壤疏松肥沃、排水良好。在熱帶地區(qū)常攀援生長于巖石和樹干上，成為巨大的觀賞藤本植物，我國南方各地均有栽植。綠蘿耐陰性強(qiáng)，終年常綠，葉面有較厚的角質(zhì)層，能適應(yīng)室內(nèi)干燥的環(huán)境條件，是優(yōu)良的室內(nèi)觀葉植物。此外，還能吸附和去除室內(nèi)空氣中的甲醛、苯、三氯乙烯等污染物，是天然的“空氣凈化器”，具有較大的市場前景。
綠蘿的繁殖目前是通過扦插進(jìn)行繁殖，由于綠蘿生長環(huán)境高溫高濕，扦插繁殖的后代極易感病菌，生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象，給綠蘿的培育造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于克服綠蘿的繁殖目前是通過扦插進(jìn)行繁殖，由于綠蘿生長環(huán)境高溫高濕，扦插繁殖的后代極易感病菌，生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象，給綠蘿的培育造成一定的經(jīng)濟(jì)損失的缺陷。
為解決上述問題，本發(fā)明提供一種利用氣生根誘導(dǎo)綠蘿愈傷組織的方法，包括以下步驟：
選取母株，經(jīng)預(yù)處理后取氣生根；
將所述氣生根進(jìn)行機(jī)械損傷，并分別接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號和愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中，得愈傷組織；
將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得；
所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號包括如下成分：
改良ms培養(yǎng)基1號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、吲哚-3-乙酸、d丁酯、蔗糖、椰子水和瓊脂粉；
所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號包括如下成分：
改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、蔗糖、椰子水和瓊脂粉。
優(yōu)選地，所述選取母株，經(jīng)預(yù)處理后取氣生根，包括：
選取母株運(yùn)用多菌靈灌根；
取所述母株生長點(diǎn)處莖段；
將所述莖段消毒，得氣生根外植體。
優(yōu)選地，所述選取母株運(yùn)用多菌靈灌根，包括：
選取母株使用80％多菌靈1000倍溶液進(jìn)行灌根30天，每10天1次。
優(yōu)選地，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號和愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號；
所述將所述氣生根進(jìn)行機(jī)械損傷，并接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，得愈傷組織，包括：
將所述氣生根修剪后，得修剪莖段；
將所述修剪莖段進(jìn)行機(jī)械損傷；
將所述機(jī)械損傷的修剪莖段接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號中，在溫度25℃-28℃和濕度50％-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，得第一愈傷組織；
將所述第一愈傷組織轉(zhuǎn)入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中，在溫度25-28℃，濕度為50-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得第二愈傷組織。
優(yōu)選地，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1按如下方法配置：
在改良ms培養(yǎng)基1號中，按照濃度加入5.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的吲哚-3-乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得；
所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2按如下方法配置：
在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、蔗糖、30g/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
優(yōu)選地，所述改良ms培養(yǎng)基1號按如下方法配置：
以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，還包括以下成分，并調(diào)整含量為：
肌醇：1-5mg/l；
鹽酸硫胺素：3-6mg/l；
鹽酸吡哆醇：0.5-2mg/l；
煙酸：0.5-3mg/l；
精氨酸：50mg/l；
天冬氨酸：100mg/l；
谷氨酸：150mg/l。
優(yōu)選地，所述將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得，包括：
將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在預(yù)設(shè)培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
每40天繼代一次，即得。
優(yōu)選地，所述預(yù)設(shè)培養(yǎng)條件，包括：
光照強(qiáng)度：1500-20001x；
光照時(shí)間：12小時(shí)/日；
溫度：25℃-28℃；
濕度：50％-65％。
優(yōu)選地，所述繼代培養(yǎng)基包括如下組分：
改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸、蔗糖、瓊脂粉。
優(yōu)選地，所述繼代培養(yǎng)基，按如下方法進(jìn)行配制：
制備改良ms培養(yǎng)基2號：以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2；還包括以下成分，并調(diào)整含量為：肌醇：1-5mg/l、鹽酸硫胺素：3-6mg/l、鹽酸吡哆醇：0.5-2mg/l、煙酸：0.5-3mg/l、精氨酸：100mg/l、天冬氨酸：50mg/l和谷氨酸：200mg/l；
在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
本發(fā)明提供一種利用氣生根誘導(dǎo)綠蘿愈傷組織的方法，包括選取母株，經(jīng)預(yù)處理后取氣生根；將所述氣生根進(jìn)行機(jī)械損傷，并接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，得愈傷組織；將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得。本發(fā)明通過綠蘿組織培養(yǎng)技術(shù)培育的綠蘿氣生根的無菌苗，可縮短生長周期，避免或減小外界不良因素引起的大規(guī)模莖腐、根腐所帶來的損失，避免了目前對綠蘿通過扦插進(jìn)行繁殖，扦插繁殖的后代極易感病菌，生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象，給綠蘿的培育造成一定的經(jīng)濟(jì)損失的問題。
具體實(shí)施方式
為了更清楚地說明本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，可以理解的是，以下僅示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例，因此不應(yīng)被看作是對范圍的限定，任何人在本發(fā)明權(quán)利要求范圍內(nèi)所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍之內(nèi)。
為解決上述問題，本發(fā)明提供一種利用氣生根誘導(dǎo)綠蘿愈傷組織的方法，包括以下步驟：
選取母株，經(jīng)預(yù)處理后取氣生根；
將所述氣生根進(jìn)行機(jī)械損傷，并接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，得愈傷組織；
將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得；
所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號包括如下成分：
改良ms培養(yǎng)基1號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、吲哚-3-乙酸、d丁酯、蔗糖、椰子水和瓊脂粉；
所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號包括如下成分：
改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、6-糖基氨基嘌呤、萘乙酸、吲哚-3-乙酸、蔗糖、椰子水和瓊脂粉。
綠蘿原產(chǎn)地在印度尼西亞所羅門群島的熱帶雨林中，性喜溫暖、潮濕環(huán)境，要求土壤疏松肥沃、排水良好。在熱帶地區(qū)常攀援生長于巖石和樹干上，成為巨大的觀賞藤本植物，我國南方各地均有栽植。綠蘿耐陰性強(qiáng)，終年常綠，葉面有較厚的角質(zhì)層，能適應(yīng)室內(nèi)干燥的環(huán)境條件，是優(yōu)良的室內(nèi)觀葉植物。此外，還能吸附和去除室內(nèi)空氣中的甲醛、苯、三氯乙烯等污染物，是天然的“空氣凈化器”，具有較大的市場前景。
本發(fā)明提供一種利用氣生根誘導(dǎo)綠蘿愈傷組織的方法，包括選取母株，經(jīng)預(yù)處理后取氣生根；將所述氣生根進(jìn)行機(jī)械損傷，并接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，得愈傷組織；將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得。本發(fā)明通過綠蘿組織培養(yǎng)技術(shù)培育的綠蘿氣生根的無菌苗，可縮短生長周期，避免或減小外界不良因素引起的大規(guī)模莖腐、根腐所帶來的損失，避免了目前對綠蘿通過扦插進(jìn)行繁殖，扦插繁殖的后代極易感病菌，生產(chǎn)中經(jīng)常出現(xiàn)大規(guī)模莖腐、根腐現(xiàn)象，給綠蘿的培育造成一定的經(jīng)濟(jì)損失的問題。
優(yōu)選地，所述選取母株，經(jīng)預(yù)處理后取氣生根，包括：
選取母株運(yùn)用多菌靈灌根；
取所述母株生長點(diǎn)處莖段；
將所述莖段消毒，得氣生根外植體。
上述，選取形態(tài)正常、生長旺盛的健壯母株預(yù)處理(使用80％多菌靈可濕性粉劑1000倍液灌根，每10天一次)30天后，切取距莖生長點(diǎn)處10～15cm莖段，使用80％多菌靈可濕性粉劑1000倍液浸泡1min后，水培10～15天(每天更換清水)獲得3～5cm新生氣生根，在氣生根生長位置點(diǎn)上下1cm莖處切取帶有氣生根的莖段，經(jīng)表面除雜、清洗后轉(zhuǎn)入超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒處理，得到無菌的綠蘿氣生根外植體。綠蘿母株的切面在外植體采集后，對切面進(jìn)行防護(hù)處理，待恢復(fù)生長后可以重新取樣。
優(yōu)選地，所述選取母株運(yùn)用多菌靈灌根，包括：
選取母株使用80％多菌靈1000倍溶液進(jìn)行灌根30天，每10天1次。
優(yōu)選地，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號和愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號；
所述將所述氣生根進(jìn)行機(jī)械損傷，并接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，得愈傷組織，包括：
將所述氣生根修剪后，得修剪莖段；
將所述修剪莖段進(jìn)行機(jī)械損傷；
將所述機(jī)械損傷的修剪莖段接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號中，在溫度25℃-28℃和濕度50％-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，得第一愈傷組織；
將所述第一愈傷組織轉(zhuǎn)入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中，在溫度25-28℃，濕度為50-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得第二愈傷組織。
上述，修剪莖段的獲得是通過將綠蘿氣生根所在的莖段上下各修剪0.5cm得到。
上述，將所述修剪莖段進(jìn)行機(jī)械損傷是通過將氣生根頂端進(jìn)行縱切刻傷。
上述，將刻傷后的莖段接種到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號得到第一愈傷組織中，在溫度為25-28℃，濕度為50-65％的條件下進(jìn)行暗培養(yǎng)，直至氣生根刻傷出產(chǎn)生淡黃色的愈傷組織中間體或刻傷前部氣生根膨大，即得第一愈傷組織；將得到的淡黃色愈傷組織中間體或膨大氣生根(第一愈傷組織)縱切后轉(zhuǎn)接入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號，在溫度為25-28℃，濕度為50-65％的條件下暗培養(yǎng)，獲得第二愈傷組織。
優(yōu)選地，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1按如下方法配置：
在改良ms培養(yǎng)基1號中，按照濃度加入5.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的吲哚-3-乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得；
所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2按如下方法配置：
在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、蔗糖、30g/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
優(yōu)選地，所述改良ms培養(yǎng)基1號按如下方法配置：
以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，還包括以下成分，并調(diào)整含量為：
肌醇：1-5mg/l；
鹽酸硫胺素：3-6mg/l；
鹽酸吡哆醇：0.5-2mg/l；
煙酸：0.5-3mg/l；
精氨酸：50mg/l；
天冬氨酸：100mg/l；
谷氨酸：150mg/l。
上述，需要理解的是，ms培養(yǎng)基是murashige和skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的，其特點(diǎn)是無機(jī)鹽和離子濃度較高，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適，能滿足植物細(xì)胞的營養(yǎng)和生理需要，因而適用范圍比較廣，多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。基于此，這種培養(yǎng)基就用他們的名字來命名。其配方如表所示。
表1ms培養(yǎng)基配方表
優(yōu)選地，所述將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得，包括：
將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在預(yù)設(shè)培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
每40天繼代一次，即得。
優(yōu)選地，所述預(yù)設(shè)培養(yǎng)條件，包括：
光照強(qiáng)度：1500-20001x；
光照時(shí)間：12小時(shí)/日；
溫度：25℃-28℃；
濕度：50％-65％。
優(yōu)選地，所述繼代培養(yǎng)基包括如下組分：
改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸、蔗糖、瓊脂粉。
優(yōu)選地，所述繼代培養(yǎng)基包括如下組分：
改良ms培養(yǎng)基2號、6-芐氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸、蔗糖、瓊脂粉。
優(yōu)選地，所述繼代培養(yǎng)基，按如下方法進(jìn)行配制：
制備改良ms培養(yǎng)基2號：以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2；還包括以下成分，并調(diào)整含量為：肌醇：1-5mg/l、鹽酸硫胺素：3-6mg/l、鹽酸吡哆醇：0.5-2mg/l、煙酸：0.5-3mg/l、精氨酸：100mg/l、天冬氨酸：50mg/l和谷氨酸：200mg/l；
在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
實(shí)施例1：
步驟1，選取母株使用80％多菌靈1000倍溶液進(jìn)行灌根30天，每10天1次；
步驟2，取所述母株生長點(diǎn)處莖段；
步驟3，將所述莖段消毒，得氣生根外植體；
步驟4，將所述氣生根修剪后，得修剪莖段；
步驟5，將所述修剪莖段進(jìn)行機(jī)械損傷；
步驟6，將所述機(jī)械損傷的修剪莖段接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號中，在溫度25℃-28℃和濕度50％-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，得第一愈傷組織；
步驟7，將所述第一愈傷組織轉(zhuǎn)入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中，在溫度25-28℃，濕度為50-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得第二愈傷組織；
步驟8，將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在光照強(qiáng)度：1500-20001x、光照時(shí)間：12小時(shí)/日、溫度：25℃-28℃、濕度：50％-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；每40天繼代一次，即得。
按照如下方法配制愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號：
1、配制改良ms培養(yǎng)基1號：以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4，微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2；
還包括以下成分，并調(diào)整含量為：
肌醇：1mg/l；
鹽酸硫胺素：3mg/l；
鹽酸吡哆醇：0.5mg/l；
煙酸：0.5mg/l；
精氨酸：50mg/l；
天冬氨酸：100mg/l；
谷氨酸：150mg/l。
2、在改良ms培養(yǎng)基1號中，按照濃度加入5.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、1.0mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的吲哚-3-乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
按照如下方法配制愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號：
1、制備改良ms培養(yǎng)基2號：以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2；還包括以下成分，并調(diào)整含量為：
肌醇：1mg/l；
鹽酸硫胺素：3mg/l；
鹽酸吡哆醇：0.5mg/l；
煙酸：0.5mg/l；
精氨酸：100mg/l；
天冬氨酸：50mg/l；
谷氨酸：200mg/l。
2、在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
按照如下方法配制繼代培養(yǎng)基：
1、制備改良ms培養(yǎng)基2號：參考上述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中配制改良ms培養(yǎng)基2號的方法。
2、在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
實(shí)施例2：
步驟1，選取母株使用80％多菌靈1000倍溶液進(jìn)行灌根30天，每10天1次；
步驟2，取所述母株生長點(diǎn)處莖段；
步驟3，將所述莖段消毒，得氣生根外植體；
步驟4，將所述氣生根修剪后，得修剪莖段；
步驟5，將所述修剪莖段進(jìn)行機(jī)械損傷；
步驟6，將所述機(jī)械損傷的修剪莖段接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號中，在溫度25℃-28℃和濕度50％-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，得第一愈傷組織；
步驟7，將所述第一愈傷組織轉(zhuǎn)入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中，在溫度25-28℃，濕度為50-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得第二愈傷組織；
步驟8，將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在光照強(qiáng)度：1500-20001x、光照時(shí)間：12小時(shí)/日、溫度：25℃-28℃、濕度：50％-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；每40天繼代一次，即得。
按照如下方法配制愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號：
1、配制改良ms培養(yǎng)基1號：以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4，微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2；
還包括以下成分，并調(diào)整含量為：
肌醇：2mg/l；
鹽酸硫胺素：4mg/l；
鹽酸吡哆醇：1mg/l；
煙酸：1mg/l；
精氨酸：50mg/l；
天冬氨酸：100mg/l；
谷氨酸：150mg/l。
2、在改良ms培養(yǎng)基1號中，按照濃度加入5.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、1.0mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的吲哚-3-乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
按照如下方法配制愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號：
1、制備改良ms培養(yǎng)基2號：以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2；還包括以下成分，并調(diào)整含量為：
肌醇：2mg/l；
鹽酸硫胺素：4mg/l；
鹽酸吡哆醇：1mg/l；
煙酸：1mg/l；
精氨酸：100mg/l；
天冬氨酸：50mg/l；
谷氨酸：200mg/l。
2、在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
按照如下方法配制繼代培養(yǎng)基：
1、制備改良ms培養(yǎng)基2號：參考上述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中配制改良ms培養(yǎng)基2號的方法。
2、在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
實(shí)施例3：
步驟1，選取母株使用80％多菌靈1000倍溶液進(jìn)行灌根30天，每10天1次；
步驟2，取所述母株生長點(diǎn)處莖段；
步驟3，將所述莖段消毒，得氣生根外植體；
步驟4，將所述氣生根修剪后，得修剪莖段；
步驟5，將所述修剪莖段進(jìn)行機(jī)械損傷；
步驟6，將所述機(jī)械損傷的修剪莖段接種至愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號中，在溫度25℃-28℃和濕度50％-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，得第一愈傷組織；
步驟7，將所述第一愈傷組織轉(zhuǎn)入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中，在溫度25-28℃，濕度為50-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得第二愈傷組織；
步驟8，將所述愈傷組織轉(zhuǎn)接至亟待培養(yǎng)基中在光照強(qiáng)度：1500-20001x、光照時(shí)間：12小時(shí)/日、溫度：25℃-28℃、濕度：50％-65％的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；每40天繼代一次，即得。
按照如下方法配制愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基1號：
1、配制改良ms培養(yǎng)基1號：以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/4，微量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2；
還包括以下成分，并調(diào)整含量為：
肌醇：5mg/l；
鹽酸硫胺素：6mg/l；
鹽酸吡哆醇：2mg/l；
煙酸：3mg/l；
精氨酸：50mg/l；
天冬氨酸：100mg/l；
谷氨酸：150mg/l。
2、在改良ms培養(yǎng)基1號中，按照濃度加入5.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、1.0mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的吲哚-3-乙酸、0.05mg/l的d丁酯、30g/l的蔗糖、100ml/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
按照如下方法配制愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號：
1、制備改良ms培養(yǎng)基2號：以ms培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，調(diào)整其中大量元素為所述ms培養(yǎng)基原有含量的1/2；還包括以下成分，并調(diào)整含量為：
肌醇：5mg/l；
鹽酸硫胺素：6mg/l；
鹽酸吡哆醇：2mg/l；
煙酸：3mg/l；
精氨酸：100mg/l；
天冬氨酸：50mg/l；
谷氨酸：200mg/l。
2、在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入1.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.1mg/l的6-糖基氨基嘌呤、0.2mg/l的萘乙酸、0.1mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的椰子水和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
按照如下方法配制繼代培養(yǎng)基：
1、制備改良ms培養(yǎng)基2號：參考上述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基2號中配制改良ms培養(yǎng)基2號的方法。
2、在改良ms培養(yǎng)基2號中，按照濃度加入2.0mg/l的6-芐氨基腺嘌呤、0.3mg/l的吲哚-3-乙酸、30g/l的蔗糖和7g/l的瓊脂粉，調(diào)節(jié)ph值至5.6-5.8，即得。
應(yīng)當(dāng)理解，雖然本說明書按照實(shí)施方式加以描述，但并非每個(gè)實(shí)施方式僅包含一個(gè)獨(dú)立的技術(shù)方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)將說明書作為一個(gè)整體，各實(shí)施方式中的技術(shù)方案也可以經(jīng)適當(dāng)組合，形成本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的其他實(shí)施方式。
發(fā)明人聲明，本發(fā)明通過上文所列出的一系列的詳細(xì)說明僅僅是針對本發(fā)明的可行性實(shí)施方式的具體說明，但本發(fā)明并不局限于上述詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程。并且即不意味著本發(fā)明應(yīng)依賴上述詳細(xì)工藝設(shè)備和工藝流程才能實(shí)施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對本發(fā)明的任何改進(jìn)，對本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍和公開范圍之內(nèi)。