本發(fā)明屬于植物栽培
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體涉及一種鷓鴣茶的繁殖方法。
背景技術(shù):
:鷓鴣茶,海南特產(chǎn),葉圓味甘,是一種奇特的野生茶葉。主產(chǎn)于冠有“世界長壽之鄉(xiāng)”美譽的海南萬寧各山區(qū)、丘陵、沿海一帶的優(yōu)良品質(zhì)原生態(tài)野生鷓鴣茶樹大葉,其茶質(zhì)醇厚,眾口皆碑。品之其味,甘辛、香溫、散發(fā)出濃郁的零陵香氣。千年來,被歷代文人墨客譽為茶品中的“靈芝草”,是海南各地方人們?nèi)粘I?,四季常飲和接待賓客的綠色養(yǎng)生健康飲品。我國著名詩人、戲作家田漢當(dāng)年登東山嶺曾寫下:“羊肥愛芝草,茶好伴名泉”的詩句?!侗静萸笤硪弧吩疲骸苞p鴣茶,甘辛,香溫,主咳嗽,痰火內(nèi)傷,散熱毒瘤??;理蛇要藥。根治牙痛,疳積。”現(xiàn)代文獻(xiàn)則有記載“干后有零陵香氣”。目前,鷓鴣茶資源的開發(fā)利用尚停留在利用野生資源的水平上,產(chǎn)業(yè)發(fā)展所需的鷓鴣茶人工規(guī)模種植和配套栽培技術(shù)尚處于空白。亦今為止,海南島內(nèi)外或國內(nèi)外尚沒有建立鷓鴣茶產(chǎn)品商業(yè)化生產(chǎn)的大規(guī)模種植基地,幾乎所有市場上流通的鷓鴣茶產(chǎn)品均是直接從野生植物上獲取。除了個別農(nóng)戶有零星的庭院式種植外,制作鷓鴣茶產(chǎn)品所需的原材料幾乎全部依賴掠奪式地從野生植株上獲取葉片。受到經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)使,目前鷓鴣茶野生資源已經(jīng)逐年減少。由于鷓鴣茶的市場需求量較大,且隨著“海南國際旅游島”的發(fā)展,鷓鴣茶原葉的需求量也將會急劇增加。因此如何克服現(xiàn)有技術(shù)的不足是目前植物栽培
技術(shù)領(lǐng)域:
亟需解決的問題。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種鷓鴣茶的繁殖方法,該方法提高鷓鴣茶的繁殖系數(shù),可滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要,彌補(bǔ)了目前鷓鴣茶組培繁殖的空白。為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:一種鷓鴣茶的繁殖方法,包括如下步驟:步驟(1),選取生長健壯且?guī)б秆康您p鴣茶莖段作為外植體,清洗干凈并經(jīng)過消毒處理后,于h培養(yǎng)基+naa0.15-0.2mg/l+土豆汁20%(v/v)+瓊脂5g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里,培養(yǎng)3-5d,更換培養(yǎng)基,更換為ms培養(yǎng)基+6-ba4-5mg/l+naa0.01-0.05mg/l+瓊脂6-7g/l+蔗糖30g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)20-25d;步驟(2),將步驟(1)培養(yǎng)得到的芽切下,置于dkw培養(yǎng)基+蕓苔素內(nèi)酯0.15-0.2mg/l+2-2.5mg/l多效唑+椰子汁10-15g/l+蔗糖50-80g/l+瓊脂5-5.5g/l,ph為5.7-5.9的培養(yǎng)基里進(jìn)行增殖培養(yǎng)18-22d;步驟(3),將步驟(2)培養(yǎng)得到的芽苗置于1/2ms培養(yǎng)基+iba1-2mg/l+6-ba6-8mg/l+蔗糖20-25g/l+pvp(聚乙烯吡咯烷酮)2-3g/l+活性炭0.8g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里進(jìn)行生根培養(yǎng);步驟(4),當(dāng)步驟(3)的生根培養(yǎng)培養(yǎng)至根長為3-3.5cm時,即可移栽,移栽后,在遮陰度為40%-45%、基質(zhì)濕度為50-60%條件下進(jìn)行栽培,25-30d后,即可移栽至大田;移栽的基質(zhì)由如下組分組成:按照重量份數(shù)計,雞樅菌渣5-10份、腐殖土8-12份、鈉沸石粉1-2份、海藻粉2-3份、油橄欖果渣6-10份,將上述組分混合均勻,即為基質(zhì);鈉沸石粉、海藻粉的粒徑?jīng)]有具有要求,優(yōu)選為-100目;油橄欖果渣為油橄欖果榨油后的廢料。進(jìn)一步,優(yōu)選的是所述的清洗采用含有洗滌劑的水溶液進(jìn)行清洗1-3次。進(jìn)一步,優(yōu)選的是所述的洗滌劑為十二烷基苯磺酸鈉,在水溶液中的濃度為0.1-0.15mol/l。進(jìn)一步,優(yōu)選的是所述的消毒方法為在質(zhì)量濃度為0.1%的升汞溶液中消毒6-8min,再在質(zhì)量濃度為0.3%的次氯酸鈉溶液中消毒2-4min,然后用無菌水沖洗1-2min。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,其有益效果為:本發(fā)明方法可解決鷓鴣茶人工大面積栽培所面臨的種苗來源緊缺、移栽成活率低等問題,起到了關(guān)鍵性的作用,移栽成活率在95%以上,產(chǎn)量提高40%以上;本發(fā)明方法不僅防止無性繁殖中的病毒感染,還能培養(yǎng)出性狀一致組培苗植株,有利于鷓鴣茶的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn),并能提高單位面積的產(chǎn)值,并能大大推動鷓鴣茶產(chǎn)業(yè)化、規(guī)?;l(fā)展,具有良好的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解,下列實施例僅用于說明本發(fā)明,而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術(shù)或條件者,按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者,均為可以通過購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。iba為吲哚丁酸;naa為萘乙酸;6-ba為6-芐基腺嘌呤;pvp為聚乙烯吡咯烷酮;土豆汁為新鮮的土豆榨汁;椰子汁為新鮮的椰子汁。實施例1一種鷓鴣茶的繁殖方法,包括如下步驟:步驟(1),選取生長健壯且?guī)б秆康您p鴣茶莖段作為外植體,清洗干凈并經(jīng)過消毒處理后,于h培養(yǎng)基+naa0.15mg/l+土豆汁20%(v/v)+瓊脂5g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里,培養(yǎng)3d,更換培養(yǎng)基,更換為ms培養(yǎng)基+6-ba4mg/l+naa0.01mg/l+瓊脂6g/l+蔗糖30g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)20d;步驟(2),將步驟(1)培養(yǎng)得到的芽切下,置于dkw培養(yǎng)基+蕓苔素內(nèi)酯0.15mg/l+2mg/l多效唑+椰子汁10g/l+蔗糖50g/l+瓊脂5g/l,ph為5.7-5.9的培養(yǎng)基里進(jìn)行增殖培養(yǎng)18d;步驟(3),將步驟(2)培養(yǎng)得到的芽苗置于1/2ms培養(yǎng)基+iba1mg/l+6-ba6mg/l+蔗糖20g/l+pvp2g/l+活性炭0.8g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里進(jìn)行生根培養(yǎng);步驟(4),當(dāng)步驟(3)的生根培養(yǎng)培養(yǎng)至根長為3-3.5cm時,即可移栽,移栽后,在遮陰度為40%-45%、基質(zhì)濕度為50-60%條件下進(jìn)行栽培,25-30d后,即可移栽至大田;移栽的基質(zhì)由如下組分組成:按照重量份數(shù)計,雞樅菌渣10份、腐殖土12份、鈉沸石粉2份、海藻粉3份、油橄欖果渣10份。其中,步驟(1)中的清洗采用含有0.15mol/l十二烷基苯磺酸鈉的水溶液進(jìn)行清洗3次。步驟(1)中的消毒方法為在質(zhì)量濃度為0.1%的升汞溶液中消毒8min,再在質(zhì)量濃度為0.3%的次氯酸鈉溶液中消毒4min,然后用無菌水沖洗2min。實施例2步驟(1),選取生長健壯且?guī)б秆康您p鴣茶莖段作為外植體,清洗干凈并經(jīng)過消毒處理后,于h培養(yǎng)基+naa0.18mg/l+土豆汁20%(v/v)+瓊脂5g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里,培養(yǎng)5d,更換培養(yǎng)基,更換為ms培養(yǎng)基+6-ba4.5mg/l+naa0.03mg/l+瓊脂6.5g/l+蔗糖30g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)23d;步驟(2),將步驟(1)培養(yǎng)得到的芽切下,置于dkw培養(yǎng)基+蕓苔素內(nèi)酯0.17mg/l+2.4mg/l多效唑+椰子汁11g/l+蔗糖570g/l+瓊脂5.2g/l,ph為5.7-5.9的培養(yǎng)基里進(jìn)行增殖培養(yǎng)20d;步驟(3),將步驟(2)培養(yǎng)得到的芽苗置于1/2ms培養(yǎng)基+iba1.4mg/l+6-ba7mg/l+蔗糖22g/l+pvp2.5g/l+活性炭0.8g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里進(jìn)行生根培養(yǎng);步驟(4),當(dāng)步驟(3)的生根培養(yǎng)培養(yǎng)至根長為3-3.5cm時,即可移栽,移栽后,在遮陰度為40%-45%、基質(zhì)濕度為50-60%條件下進(jìn)行栽培,25-30d后,即可移栽至大田;移栽的基質(zhì)由如下組分組成:按照重量份數(shù)計,雞樅菌渣5份、腐殖土8份、鈉沸石粉1份、海藻粉2份、油橄欖果渣6份。其中,步驟(1)中的清洗采用含有0.1mol/l十二烷基苯磺酸鈉的水溶液進(jìn)行清洗1次。步驟(1)中的消毒方法為在質(zhì)量濃度為0.1%的升汞溶液中消毒6min,再在質(zhì)量濃度為0.3%的次氯酸鈉溶液中消毒2min,然后用無菌水沖洗1min。實施例3步驟(1),選取生長健壯且?guī)б秆康您p鴣茶莖段作為外植體,清洗干凈并經(jīng)過消毒處理后,于h培養(yǎng)基+naa0.2mg/l+土豆汁20%(v/v)+瓊脂5g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里,培養(yǎng)5d,更換培養(yǎng)基,更換為ms培養(yǎng)基+6-ba5mg/l+naa0.05mg/l+瓊脂7g/l+蔗糖30g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)25d;步驟(2),將步驟(1)培養(yǎng)得到的芽切下,置于dkw培養(yǎng)基+蕓苔素內(nèi)酯0.2mg/l+2.5mg/l多效唑+椰子汁15g/l+蔗糖80g/l+瓊脂5.5g/l,ph為5.7-5.9的培養(yǎng)基里進(jìn)行增殖培養(yǎng)22d;步驟(3),將步驟(2)培養(yǎng)得到的芽苗置于1/2ms培養(yǎng)基+iba2mg/l+6-ba8mg/l+蔗糖25g/l+pvp3g/l+活性炭0.8g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里進(jìn)行生根培養(yǎng);步驟(4),當(dāng)步驟(3)的生根培養(yǎng)培養(yǎng)至根長為3-3.5cm時,即可移栽,移栽后,在遮陰度為40%-45%、基質(zhì)濕度為50-60%條件下進(jìn)行栽培,25-30d后,即可移栽至大田;移栽的基質(zhì)由如下組分組成:按照重量份數(shù)計,雞樅菌渣8份、腐殖土10份、鈉沸石粉1.2份、海藻粉2.5份、油橄欖果渣7份。其中,步驟(1)中的清洗采用含有0.13mol/l十二烷基苯磺酸鈉的水溶液進(jìn)行清洗2次。步驟(1)中的消毒方法為在質(zhì)量濃度為0.1%的升汞溶液中消毒7min,再在質(zhì)量濃度為0.3%的次氯酸鈉溶液中消毒3min,然后用無菌水沖洗1.5min。對比例1步驟(1),選取生長健壯且?guī)б秆康您p鴣茶莖段作為外植體,清洗干凈并經(jīng)過消毒處理后,于h培養(yǎng)基+naa0.1mg/l+土豆汁20%(v/v)+瓊脂5g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里,培養(yǎng)5d,更換培養(yǎng)基,更換為ms培養(yǎng)基+6-ba5mg/l+naa0.05mg/l+瓊脂7g/l+蔗糖20g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)25d;步驟(2),將步驟(1)培養(yǎng)得到的芽切下,置于dkw培養(yǎng)基+蕓苔素內(nèi)酯0.2mg/l+椰子汁15g/l+蔗糖80g/l+瓊脂5.5g/l,ph為5.7-5.9的培養(yǎng)基里進(jìn)行增殖培養(yǎng)22d;步驟(3),將步驟(2)培養(yǎng)得到的芽苗置于1/2ms培養(yǎng)基+iba2mg/l+6-ba8mg/l+蔗糖25g/l+活性炭0.8g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里進(jìn)行生根培養(yǎng);步驟(4),當(dāng)步驟(3)的生根培養(yǎng)培養(yǎng)至根長為3-3.5cm時,即可移栽,移栽后,在遮陰度為40%-45%、基質(zhì)濕度為50-60%條件下進(jìn)行栽培,25-30d后,即可移栽至大田;移栽的基質(zhì)由如下組分組成:按照重量份數(shù)計,雞樅菌渣8份、腐殖土10份、鈉沸石粉1.2份、海藻粉2.5份、油橄欖果渣7份。其中,步驟(1)中的清洗采用含有0.13mol/l十二烷基苯磺酸鈉的水溶液進(jìn)行清洗2次。步驟(1)中的消毒方法為在質(zhì)量濃度為0.1%的升汞溶液中消毒7min,再在質(zhì)量濃度為0.3%的次氯酸鈉溶液中消毒3min,然后用無菌水沖洗1.5min。對比例2步驟(1),選取生長健壯且?guī)б秆康您p鴣茶莖段作為外植體,清洗干凈并經(jīng)過消毒處理后,于h培養(yǎng)基+naa0.2mg/l+土豆汁20%(v/v)+瓊脂5g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里,培養(yǎng)5d,更換培養(yǎng)基,更換為ms培養(yǎng)基+6-ba5mg/l+naa0.05mg/l+瓊脂15g/l+蔗糖30g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)25d;步驟(2),將步驟(1)培養(yǎng)得到的芽切下,置于dkw培養(yǎng)基+蕓苔素內(nèi)酯0.2mg/l+2.5mg/l多效唑+蔗糖40g/l+瓊脂5.5g/l,ph為5.7-5.9的培養(yǎng)基里進(jìn)行增殖培養(yǎng)22d;步驟(3),將步驟(2)培養(yǎng)得到的芽苗置于1/2ms培養(yǎng)基+iba4mg/l+6-ba8mg/l+蔗糖25g/l+pvp3g/l,ph為5.8-6.0的培養(yǎng)基里進(jìn)行生根培養(yǎng);步驟(4),當(dāng)步驟(3)的生根培養(yǎng)培養(yǎng)至根長為3-3.5cm時,即可移栽,移栽后,在遮陰度為40%-45%、基質(zhì)濕度為50-60%條件下進(jìn)行栽培,25-30d后,即可移栽至大田;移栽的基質(zhì)由如下組分組成:按照重量份數(shù)計,雞樅菌渣8份、腐殖土10份、鈉沸石粉1.2份、海藻粉2.5份、油橄欖果渣7份。其中,步驟(1)中的清洗采用含有0.13mol/l十二烷基苯磺酸鈉的水溶液進(jìn)行清洗2次。步驟(1)中的消毒方法為在質(zhì)量濃度為0.1%的升汞溶液中消毒7min,再在質(zhì)量濃度為0.3%的次氯酸鈉溶液中消毒3min,然后用無菌水沖洗1.5min。對比例3對比例3與實施例3的差別在于:移栽的基質(zhì)為泥炭土+蛭石(質(zhì)量比1:1),其余都相同。將實施例1-3方法與對比例1-3方法進(jìn)行對比,比較移栽成活率如下表,同時與野生資源的產(chǎn)量進(jìn)行比較,結(jié)果如下:移栽成活率,%產(chǎn)量提高,%實施例195.248實施例296.362實施例39871對比例17515對比例26210對比例37428由上表可知,本發(fā)明實施例的效果均優(yōu)于對比例的效果,通過本發(fā)明各組分的配伍與各步驟的協(xié)同作用,使得移栽成活率在95%以上,且產(chǎn)量大大提高,彌補(bǔ)了目前鷓鴣茶組培繁殖的空白,具有良好的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解,本發(fā)明不受上述實施例的限制,上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理,在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下,本發(fā)明還會有各種變化和改進(jìn),這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。當(dāng)前第1頁12