本發(fā)明屬于中草藥種植技術領域,具體涉及一種白芨組培的生根培養(yǎng)基及其育苗方法。
背景技術:
白芨為蘭科白芨屬多年生草本植物,亦作白及、連及草、甘根,分布于中國至朝鮮、日本,我國產于華東、華南及河南、陜西、四川、云南等地。白芨的塊莖為我國傳統(tǒng)中藥,早在《神農本草經(jīng)》中就有記載,《中國藥典》中所收載具有補肺、消腫、生肌、止血、斂瘡等功效,用于治療肺傷咳血、金瘡出血、潰瘍疼痛、湯火灼傷、手足皸裂等癥。此外,白芨花色艷麗,也是一種很好的景觀植物,因此市場對白芨的需求十分旺盛。
由于市場需求的擴大,近年來我國大部分地區(qū)的野生白芨遭到過度采挖,導致其野生自然資源急劇減少,瀕臨滅絕,被國家列為重點保護的野生藥用植物之一。為保護白芨野生資源,人工繁育和栽培白芨勢在必行。白芨的種子非常細小且無胚乳,因此在自然狀況下很難萌發(fā)和生長,實生苗的栽培較為困難,傳統(tǒng)栽培主要靠分株繁殖。但分株繁殖周期長,繁殖效率低,而且耗種量大,很難滿足大量栽培的需要。
組織培養(yǎng)技術可以快速繁殖大量種苗,遠較分株繁殖快捷高效。近年來我國學者開始探索白芨組織培養(yǎng)技術,以便為白芨栽培提供種源,實現(xiàn)人工種植,擺脫對野生資源的依賴。如發(fā)明專利cn201510253683.6,公開了一種白芨組培快繁培養(yǎng)基,它包括白芨種子播種培養(yǎng)基、繼代培養(yǎng)基、生根定植培養(yǎng)基;所述生根定植培養(yǎng)基以ms培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,在每升基質中含有:花寶i號2g、花寶ii號1g、瓊脂8g、白糖20g、活性炭1g、香蕉肉40g、馬鈴薯泥20g,培養(yǎng)基的ph值為5.4。該配方中缺少促進白芨根葉生長的微量元素,白芨生根的長勢不好。
技術實現(xiàn)要素:
基于以上技術問題,本發(fā)明提供了一種白芨組培的生根培養(yǎng)基。得到白芨生根的質量更高,成活率更高。
本發(fā)明的技術方案如下:
一種白芨組培的生根培養(yǎng)基,按重量計,包括以下原料:硝酸鉀25-30份、硝酸銨22-26份、硫酸鎂5-8份、氯化鈣6-9份、磷酸二氫鉀1-3份、naa15-30份、ba0.5-0.8份,香蕉300-400份、洋芋200-300份、白糖700-800份、瓊脂150-180份、碳粉10-20份、微量元素水溶液60-80份、鐵鹽水溶液120-160份、有機水溶液25-35份和肌醇水溶液25-35份。
優(yōu)選地,一種白芨的生根培養(yǎng)基,按重量計,包括以下原料:硝酸鉀28.5份、硝酸銨25份、硫酸鎂5.5份、氯化鈣6.6份、磷酸二氫鉀2.5份、naa24份、ba0.6份,香蕉350份、洋芋250份、白糖750份、瓊脂160份、碳粉15份、微量元素水溶液75份、鐵鹽水溶液150份、有機水溶液30份和肌醇水溶液30份。
培養(yǎng)基中添加洋芋和香蕉等有機附加物,主要是由于他們含有豐富的糖、蛋白質、各種無機鹽、維生素以及各種活性物質。
為了促進根葉的生長,本發(fā)明的生根培養(yǎng)基中還添加了促進白芨根葉生長的微量元素??紤]到母液穩(wěn)定性的問題,根據(jù)化學反應原理,若陰離子的濃度高,對微量素中的金屬離子來說是過量的,若混合在一起,微量素中的金屬離子會很容易發(fā)生水解反應,生成沉淀,從而失效。長時間使用這樣的母液,就會發(fā)生生理病害,比如缺素癥產生黃葉,葉不展,萎縮變脆等,因此本發(fā)明對微量素的用量進行了嚴格控制。
所述的微量元素包括碘化鉀0.15-0.2份、硼酸1-1.1份、硫酸錳0.002-0.005份、硫酸鋅1.5-1.8份、鉬酸鈉0.03-0.05份、硫酸銅0.001-0.003份和氯化鈷0.002-0.006份。
所述的鐵鹽包括硫酸亞鐵2.2-2.8份和乙二氨四乙酸二鈉3.2-3.6份。鐵鹽是植物生長中必須的礦物元素,加入乙二氨四乙酸二鈉與鐵鹽形成螯合物防止氧化形成三價鐵鹽。
所述的有機成分包括煙酸0.3-0.5份、維生素b60.3-0.5份、維生素b10.1-0.3份和甘氨酸1.5-2份。小分子有機物是多種氨基酸的混合物,對胚狀體、不定芽及細胞的分化有良好的促進作用。
所述肌醇水溶液的質量百分數(shù)為3-4%。
本發(fā)明白芨的生根培養(yǎng)基的ph值為6.0-6.3。培養(yǎng)基滅菌后ph會降低0.2左右,其主要原因就是有機物的分解,特別是維生素、氨基酸和糖。6.0-6.3是白芨生根生長的最適酸堿度。
本發(fā)明還提供了一種白芨組培的育苗方法,包括以下步驟:
a、生根培養(yǎng)基的制備
分別配制微量元素水溶液、鐵鹽水溶液、有機水溶液和肌醇水溶液;
取硝酸鉀25-30份、硝酸銨22-26份、硫酸鎂5-8份、氯化鈣6-9份、磷酸二氫鉀1-3份、naa15-30份、ba0.5-0.8份,香蕉300-400份、洋芋200-300份、白糖700-800份、瓊脂150-180份、碳粉10-20份、微量元素水溶液60-80份、鐵鹽水溶液120-160份、有機水溶液25-35份和肌醇水溶液25-35份,混合得到生根培養(yǎng)基;
b、將種籽移植于組培瓶中播種
所述種籽先放入無菌水中清洗,再放入消毒液中泡洗20-40分鐘后用于播種;所述組培瓶中含有步驟a的生根培養(yǎng)基,高壓滅菌120-125分鐘,冷卻后拿到無菌工作臺上用于播種;
c、出瓶馴化
播種兩個月后,部分種子已開始長出根、葉,由原來的黃金色變成綠色,以一分十的量開始分瓶,無限分瓶培養(yǎng),直到長出根莖6-8公分就出瓶馴化。
由于培養(yǎng)基中的微量元素、鐵鹽、有機成分和肌醇直接混合在一起容易發(fā)生化學反應產生沉淀而不能使用,因此先用純凈水分別配制成四種母液后再混合。另外,由于肌醇容易發(fā)霉或變質,如果與其他的成分在一起,在夏天只能保存五天左右,因此單獨配制可以保存15天左右。
優(yōu)選地,所述組培瓶中含有50-80ml的生根培養(yǎng)基。
本發(fā)明的有益效果在于:
1、本發(fā)明的組培生長周期比一般培養(yǎng)基要多兩周左右,主要是提高植株生根的根系生長及讓根系進一步適應自然環(huán)境,提高煉苗的成活率,成活率可以達到95-99%。
2、同等條件下采用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的小苗,本培養(yǎng)基的植株鮮重更大,葉片明顯寬大,根系的條數(shù)增多,植株的生根率更高達到90%以上。
具體實施方式
下面結合具體實施方式對本發(fā)明的實質性內容作進一步詳細的描述。
實施例1
一種白芨組培的生根培養(yǎng)基,按重量計,包括以下原料:硝酸鉀30g、硝酸銨26g、硫酸鎂8g、氯化鈣9g、磷酸二氫鉀3g、naa30ml、ba0.8ml,香蕉400g、洋芋300g、白糖800g、瓊脂180g、碳粉20g、微量元素水溶液80ml、鐵鹽水溶液160ml、有機成分水溶液35ml和肌醇水溶液35ml。
實施例2
一種白芨組培的生根培養(yǎng)基,按重量計,包括以下原料:硝酸鉀28.5g、硝酸銨25g、硫酸鎂5.5g、氯化鈣6.6g、磷酸二氫鉀2.5g、naa24ml、ba0.6ml,香蕉350g、洋芋250g、白糖750g、瓊脂160g、碳粉15g、微量元素水溶液75ml、鐵鹽水溶液150ml、有機水溶液30ml和肌醇水溶液30ml。
實施例3
一種白芨組培的生根培養(yǎng)基,按重量計,包括以下原料:硝酸鉀250g、硝酸銨220g、硫酸鎂50g、氯化鈣60g、磷酸二氫鉀10g、naa150ml、ba5ml,香蕉3000g、洋芋2000g、白糖7000g、瓊脂1500g、碳粉100g、微量元素水溶液600ml、鐵鹽水溶液1200ml、有機成分水溶液250ml和肌醇水溶液250ml。
所述的微量元素包括碘化鉀1.5g、硼酸10g、硫酸錳0.02g、硫酸鋅15g、鉬酸鈉0.3g、硫酸銅0.01g和氯化鈷0.02g。
所述的鐵鹽包括硫酸亞鐵22g和乙二氨四乙酸二鈉32g。
所述的有機成分包括煙酸3g、維生素b63g、維生素b11g和甘氨酸15g。
所述肌醇水溶液的質量百分數(shù)為3%。
該生根培養(yǎng)基的ph值為6.0。
實施例4
一種白芨組培的生根培養(yǎng)基,按重量計,包括以下原料:硝酸鉀260g、硝酸銨230g、硫酸鎂60g、氯化鈣80g、磷酸二氫鉀20g、naa180ml、ba7ml,香蕉3500g、洋芋2500g、白糖7600g、瓊脂1600g、碳粉120g、微量元素水溶液950ml、鐵鹽水溶液1500ml、有機成分水溶液280ml和肌醇水溶液280ml。
所述的微量元素包括碘化鉀1.8g、硼酸10.5g、硫酸錳0.03g、硫酸鋅16g、鉬酸鈉0.4g、硫酸銅0.02g和氯化鈷0.05g。
所述的鐵鹽包括硫酸亞鐵25g和乙二氨四乙酸二鈉33g。
所述的有機成分包括煙酸4g、維生素b64g、維生素b12g和甘氨酸18g。
所述肌醇水溶液的質量百分數(shù)為4%。
該生根培養(yǎng)基的ph值為6.1。
實施例5
一種白芨組培的生根培養(yǎng)基,按重量計,包括以下原料:硝酸鉀29g、硝酸銨25g、硫酸鎂6.5g、氯化鈣8g、磷酸二氫鉀2.5g、naa20ml、ba0.7ml,香蕉360g、洋芋220g、白糖760g、瓊脂165g、碳粉12g、微量元素水溶液90ml、鐵鹽水溶液130ml、有機成分水溶液32ml和肌醇水溶液32ml。
所述的微量元素包括碘化鉀0.17g、硼酸1.06g、硫酸錳0.004g、硫酸鋅1.6g、鉬酸鈉0.035g、硫酸銅0.0015g和氯化鈷0.004g。
所述的鐵鹽包括硫酸亞鐵2.3g和乙二氨四乙酸二鈉3.4g。
所述的有機成分包括煙酸0.35g、維生素b60.4g、維生素b10.15g和甘氨酸1.8g。
所述肌醇水溶液的質量百分數(shù)為3.5%。
該生根培養(yǎng)基的ph值為6.3。
實施例6
實施例2的白芨生根培養(yǎng)基的育苗方法,包括以下步驟:
a、生根培養(yǎng)基的制備
分別配制微量元素水溶液、鐵鹽水溶液、有機水溶液和肌醇水溶液;按配方比例混合后,得到生根培養(yǎng)基;
b、將種籽移植于組培瓶中播種
所述種籽先放入無菌水中清洗,再放入消毒液中泡洗20分鐘后用于播種;所述組培瓶中含有步驟a的生根培養(yǎng)基,高壓滅菌120分鐘,冷卻后拿到無菌工作臺上用于播種;
c、出瓶馴化
播種兩個月后,部分種子已開始長出根、葉,由原來的黃金色變成綠色,以一分十的量開始分瓶,無限分瓶培養(yǎng),直到長出根莖6公分就出瓶馴化。
實施例7
實施例3白芨生根培養(yǎng)基的育苗方法,包括以下步驟:
a、生根培養(yǎng)基的制備
分別配制微量元素水溶液、鐵鹽水溶液、有機水溶液和肌醇水溶液;按配方比例混合后,得到生根培養(yǎng)基;
b、將種籽移植于組培瓶中播種
所述種籽先放入無菌水中清洗,再放入消毒液中泡洗40分鐘后用于播種;所述組培瓶中含有步驟a的生根培養(yǎng)基,高壓滅菌125分鐘,冷卻后拿到無菌工作臺上用于播種;
c、出瓶馴化
播種兩個月后,部分種子已開始長出根、葉,由原來的黃金色變成綠色,以一分十的量開始分瓶,無限分瓶培養(yǎng),直到長出根莖8公分就出瓶馴化。
實施例8
實施例4白芨生根培養(yǎng)基的育苗方法,包括以下步驟:
a、生根培養(yǎng)基的制備
分別配制微量元素水溶液、鐵鹽水溶液、有機水溶液和肌醇水溶液;按配方比例混合后,得到生根培養(yǎng)基;
b、將種籽移植于組培瓶中播種
所述種籽先放入無菌水中清洗,再放入消毒液中泡洗30分鐘后用于播種;所述組培瓶中含有步驟a的生根培養(yǎng)基,高壓滅菌122分鐘,冷卻后拿到無菌工作臺上用于播種;
c、出瓶馴化
播種兩個月后,部分種子已開始長出根、葉,由原來的黃金色變成綠色,以一分十的量開始分瓶,無限分瓶培養(yǎng),直到長出根莖7公分就出瓶馴化。
同等條件下采用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)的小苗,本培養(yǎng)基的植株鮮重更大,葉片明顯寬大,根系的條數(shù)增多,植株的生根率更高達到90%以上。
以上所述實施例僅表達了本發(fā)明的具體實施方式,其描述較為具體和詳細,但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應當指出的是,對于本領域的普通技術人員來說,在不脫離本發(fā)明構思的前提下,還可以做出若干變形和改進,這些都屬于本發(fā)明的保護范圍。