一種毛梾組培苗的繼代培養(yǎng)方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種毛梾組培苗的繼代培養(yǎng)方法，它包括以下步驟：將達(dá)到繼代要求的毛梾無(wú)菌組培苗，在無(wú)菌條件下將＜1cm的芽叢接種于增殖培養(yǎng)基中，將組培苗中≥1cm的壯芽接種于伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中，同時(shí)滿(mǎn)足增殖擴(kuò)繁和高枝壯苗的增殖要求。本發(fā)明利用不同培養(yǎng)基建立一套可操作性強(qiáng)、增殖伸長(zhǎng)生長(zhǎng)結(jié)合的毛梾組培苗的繼代培養(yǎng)技術(shù)，平均增殖系數(shù)在10以上，平均株高3.5cm以上，且組培苗長(zhǎng)勢(shì)良好，經(jīng)過(guò)多代培養(yǎng)增殖系數(shù)穩(wěn)定，可應(yīng)用于毛梾組培苗大規(guī)模生產(chǎn)中，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種毛楝組培苗的繼代培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，具體為一種毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]毛株(Cornus walteri Wanger.)屬山茱萸科株木屬，又名車(chē)梁木。落葉喬木，高達(dá)8-15m。東北起遼寧，南至湖南，西南到云南、貴州，東自江蘇、浙江，西至甘肅、青海均有分布，其中山東、河南、陜西、山西分布較為集中。毛株根系發(fā)達(dá)，適應(yīng)力強(qiáng)，對(duì)土壤要求不嚴(yán)，在我國(guó)大部分地區(qū)的荒山荒坡上都適宜生長(zhǎng)。毛株不僅是優(yōu)良的用材樹(shù)種，同時(shí)也是優(yōu)良的城市綠化和水土保持樹(shù)種，更是發(fā)展林業(yè)生物柴油的良好樹(shù)種。毛株果肉和種仁均含油月旨，果實(shí)含油率31.8%-41.3%，其油既可食用，又可作為工業(yè)原料，特別是可制成生物柴油原料油。
[0003]由于對(duì)毛株的果實(shí)油脂價(jià)值的開(kāi)發(fā)和利用，目前發(fā)展毛株樹(shù)種還需要大量?jī)?yōu)質(zhì)無(wú)性系種苗，而市場(chǎng)上能提供造林的種苗還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，并且品質(zhì)參差不一。過(guò)去毛株繁殖方法以種子育苗為主，但種子繁殖的后代容易失去原有的優(yōu)良性狀，且實(shí)生苗造林一般要6-8年開(kāi)始結(jié)果，產(chǎn)量高低不一;嫁接苗造林一般2-3年開(kāi)始結(jié)果，但成本較高且缺少優(yōu)株接穗;扦插繁殖目前比較困難，生根率低，因此均無(wú)法滿(mǎn)足生產(chǎn)的需求。
[0004]現(xiàn)代育苗技術(shù)中，植物組培快繁技術(shù)能夠在短時(shí)間內(nèi)快速大量繁殖，并獲得基因型一致的優(yōu)良種苗，適用于毛株樹(shù)種苗木的工廠(chǎng)化生產(chǎn)。但目前關(guān)于毛株組織培養(yǎng)方面的研究鮮有報(bào)道，僅限于初代培養(yǎng)，且仍存在許多問(wèn)題。因此特別需要一種適合毛株組培苗繼代培養(yǎng)的方法，以解決上述現(xiàn)有存在的技術(shù)問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于解決毛株組培苗繼代培養(yǎng)增殖系數(shù)低、伸長(zhǎng)生長(zhǎng)緩慢無(wú)高枝等問(wèn)題，優(yōu)化培養(yǎng)基配方，提供一種增殖系數(shù)高和伸長(zhǎng)生長(zhǎng)的毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法。
[0006]本發(fā)明的一種毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)，包括以下步驟:
[0007](I)增殖培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將<lcm的芽叢切分成小叢接種于增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為22-28°C，光照強(qiáng)度1800-25001x，每日光照12-16h，經(jīng)過(guò)1-2個(gè)繼代周期后形成叢生芽；
[0008](2)伸長(zhǎng)培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將組培苗中多Icm的壯芽枝條切分成多0.5cm且至少含一對(duì)芽的莖段，接種于伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為22-28°C，光照強(qiáng)度1800-25001x，每日光照12-16h，2-3個(gè)繼代周期后可得到高枝壯苗。
[0009]以上所述的增殖培養(yǎng)基配方為:DKW+6-BA 0.1-1.0mg/L+IBA0.1-0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉 6.5g/L，pH調(diào)至 5.8-6.5。
[0010]以上所述的伸長(zhǎng)培養(yǎng)基配方為:DKW+6-BA0.2-1.0mg/L+NAA0.05-0.5mg/L+GA30.5-1.0mg/L+蔗糖 30g/L+瓊脂粉 6.5g/L，pH 調(diào)至 5.8-6.5。
[0011]以上所述的毛株繼代組培苗的繼代周期為20d。
[0012]以上所述的毛株繼代組培苗的平均增殖系數(shù)為10以上，進(jìn)行伸長(zhǎng)培養(yǎng)的毛株組培苗平均每株含I.36個(gè)高枝(株高>2.5cm的枝條)以上，平均株高為3.5cm以上。
[0013]本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明通過(guò)調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類(lèi)型和濃度，研究其對(duì)毛株組培苗繼代增殖的影響，篩選出對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基配方，為毛株組培苗不同目的繼代培養(yǎng)提供了均衡合理的營(yíng)養(yǎng)需求，增殖培養(yǎng)基可以實(shí)現(xiàn)芽的分化擴(kuò)繁，提高了增殖系數(shù);伸長(zhǎng)培養(yǎng)基可以有效的促進(jìn)節(jié)間伸長(zhǎng)，能夠快速形成高枝;對(duì)毛株組培苗< Icm的芽叢和多Icm的壯芽枝條分別使用對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基，滿(mǎn)足增殖擴(kuò)繁和高枝壯苗的增殖要求;建立了一套可操作性強(qiáng)、增殖伸長(zhǎng)生長(zhǎng)結(jié)合毛株組培苗的繼代培養(yǎng)技術(shù)，增殖系數(shù)達(dá)到10以上，平均株高3.5cm以上，且組培苗長(zhǎng)勢(shì)良好，經(jīng)過(guò)多代培養(yǎng)增殖系數(shù)穩(wěn)定，可應(yīng)用于毛株組培苗大規(guī)模生產(chǎn)中，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
【具體實(shí)施方式】
[0014]以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步的詳述，不是對(duì)本發(fā)明的限制。
[0015]實(shí)施例1:
[0016]本發(fā)明的一種毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，包括以下步驟:
[0017](I)增殖培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將<lcm的芽叢切分成小叢接種于DKW+6-BA 0.25mg/L+IBA0.lmg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉6.5g/L的增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為25°C，光照強(qiáng)度18001x，每日光照14h，經(jīng)過(guò)I個(gè)繼代增殖周期后形成叢生芽，平均增殖系數(shù)10.27;
[0018](2)伸長(zhǎng)培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將組培苗中多1(3111的壯芽枝條切分成彡0.5(3111且至少含一對(duì)芽的莖段，接種于01(￥+6-840.2511^/1^+NAA0.3mg/L+GA30.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉6.5g/L的伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為25°C，光照強(qiáng)度25001x，每日光照15h，2個(gè)繼代增殖周期后可得到高枝壯苗，平均每株含1.36個(gè)高枝(株高>2.5cm的枝條)，平均株高為3.51cm，增殖系數(shù)平均為10.18。
[0019]實(shí)施例2:
[0020]本發(fā)明的一種毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，包括以下步驟:
[0021](I)增殖培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將<lcm的芽叢切分成小叢接種于DKW+6-BAlmg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉6.5g/L的增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為25°C，光照強(qiáng)度20001x，每日光照14h，經(jīng)過(guò)2個(gè)繼代增殖周期后形成叢生芽，平均增殖系數(shù)12.33;
[0022](2)伸長(zhǎng)培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將組培苗中多1(3111的壯芽枝條切分成彡0.5(3111且至少含一對(duì)芽的莖段，接種于01(￥+6-840.511^/1^NAA0.4mg/L+GA30.8mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉6.5g/L的伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為25°C，光照強(qiáng)度25001x，每日光照15h，2個(gè)繼代增殖周期后可得到高枝壯苗，平均每株含1.77個(gè)高枝(株高>2.5cm的枝條)，平均株高為3.83cm，增殖系數(shù)平均為12.35。
[0023]實(shí)施例3:
[0024]本發(fā)明的一種毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，包括以下步驟:
[0025](I)增殖培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將<lcm的芽叢切分成小叢或單芽接種于DKW+6-BA 0.5mg/L+IBA0.8mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉6.5g/L的增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為25°C，光照強(qiáng)度18001x，每日光照14h，經(jīng)過(guò)2個(gè)繼代增殖周期后形成叢生芽，平均增殖系數(shù)14.18；
[0026](2)伸長(zhǎng)培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將組培苗中多Icm的壯芽枝條切分成彡0.5cm且至少含一對(duì)芽的莖段，接種于DKW+6-BAlmg/L+NAA0.5mg/L+6知111^/1+蔗糖3(^/1+瓊脂粉6.5g/L的伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為25°C，光照強(qiáng)度25001x，每日光照15h，3個(gè)繼代增殖周期后可得到高枝壯苗，平均每株含2.04個(gè)高枝(株高>2.5cm的枝條)，平均株高為4.07cm，增殖系數(shù)平均為13.38。
[0027]以上實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行描述，并非對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行限定，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行各種變形和改進(jìn)，均應(yīng)落入本發(fā)明的權(quán)利要求書(shū)確定的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟: (1)增殖培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將<lcm的芽叢切分成小叢接種于增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為22?28°C，光照強(qiáng)度1800?25001x，每日光照12?16h，經(jīng)過(guò)1-2個(gè)繼代周期后形成叢生芽； (2)伸長(zhǎng)培養(yǎng):將達(dá)到繼代要求的毛株無(wú)菌組培苗，在超凈工作臺(tái)上將組培苗中多Icm的壯芽枝條切分成多0.5cm且至少含一對(duì)芽的莖段，接種于伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為22?28 °C，光照強(qiáng)度1800?25001X，每日光照12?16h，2-3個(gè)繼代周期后可得到高枝壯苗。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟(I)(2)中所述的繼代周期為20d。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟(I)中所述的增殖培養(yǎng)基配方為:DKW+6-BA 0.I?I.0mg/L+IBA0.I?0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉6.5g/L，pH 調(diào)至 5.8 ?6.5。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟(I)中所述增殖培養(yǎng)基得到的毛株組培苗平均增殖系數(shù)為10以上。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟(2)中所述的伸長(zhǎng)培養(yǎng)基配方為:DKW+6-BA 0.2?I.0mg/L+NAA0.05?0.5mg/L+GA30.5?I.0mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂粉 6.5g/L，pH 調(diào)至 5.8 ?6.5。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛株組培苗的繼代培養(yǎng)方法，其特征在于:步驟(2)中所述伸長(zhǎng)培養(yǎng)基得到的毛株組培苗平均增殖系數(shù)為10以上，平均每株含1.36個(gè)高枝(株高>2.5cm的枝條)以上，平均株高為3.5cm以上。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK105981651SQ201510847105
【公開(kāi)日】2016年10月5日
【申請(qǐng)日】2015年11月30日
【發(fā)明人】蘇淑釵, 暴甜
【申請(qǐng)人】北京林業(yè)大學(xué)