一種獲得紅色馬鈴薯突變體的方法及所用誘變培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種獲得紅色馬鈴薯突變體的方法及所用誘變培養(yǎng)基，屬于農(nóng)業(yè)生物【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明的誘變培養(yǎng)基是在再生培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加30-40mg/L的平陽霉素。本發(fā)明獲得紅色馬鈴薯突變體的方法，是將紫色馬鈴薯方片置于誘變培養(yǎng)基培養(yǎng)15天，然后移至再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：22±2℃、光照強(qiáng)度700lx、光照時(shí)間8h/d、相對(duì)濕度65-75%。采用本發(fā)明的誘導(dǎo)培養(yǎng)基及誘導(dǎo)方法，誘導(dǎo)15天后，則能誘導(dǎo)紫色馬鈴薯發(fā)生突變，通過進(jìn)一步培養(yǎng)則能獲得能夠結(jié)出紅色塊莖的馬鈴薯再生苗。
【專利說明】一種獲得紅色馬鈴薯突變體的方法及所用誘變培養(yǎng)基

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種獲得紅色馬鈴薯突變體的方法及所用誘變培養(yǎng)基，屬于農(nóng)業(yè)生物

【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 馬鈴薯是世界第四大糧食作物，也是我國食物安全體系的重要組成部分。馬鈴薯 營養(yǎng)豐富，有"地下蘋果"之稱。馬鈴薯含有豐富的抗氧化劑，主要的氧化劑是酚類，抗壞血 酸，類胡蘿卜素，生育酚，a-硫辛酸，和硒。多酚類的抗氧化劑主要是L-酪氨酸，咖啡酸， 綠原酸等。而彩色馬鈴薯除了含有上述抗氧劑外，還富含具有明顯抗氧化作用的保健型天 然花青素色素，它的含量是普通白肉馬鈴薯的兩至三倍，甚至更高。另外，彩色馬鈴薯不僅 具有普通馬鈴薯的優(yōu)良特性，并且肉質(zhì)鮮艷，外觀誘人，逐漸受到人們的喜愛。除原產(chǎn)地安 第斯外，其他地區(qū)的彩色馬鈴薯資源很少，中國也不例外，并且種植品種單一，主要為黃色 薯肉的馬鈴薯品種。由于中國國情的需要，前期的育種目標(biāo)主要以高產(chǎn)為主。近年來，隨著 生活水平的提高，人們開始選擇更為健康的飲食，逐漸關(guān)注具有營養(yǎng)保健作用的彩色馬鈴 薯品種。我國通過品種引進(jìn)等方式獲得了彩色馬鈴薯品種，但是這些品種數(shù)量很少，且多為 晚熟品種，在我國表現(xiàn)為產(chǎn)量和品質(zhì)較低。所以通過誘變途徑獲得新的彩色馬鈴薯品種可 以豐富馬鈴薯市場(chǎng)，滿足人們的需要。
[0003] 目前誘變馬鈴薯突變體的主要采用EMS誘變和輻照技術(shù)，由于EMS具有極強(qiáng)的毒 性，并且所獲的變異株容易恢復(fù)，所以應(yīng)用受到限制。而輻照技術(shù)多產(chǎn)生負(fù)面的變異，正面 的變異很少。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了獲得彩色馬鈴薯的突變體，本研究利用紫色馬鈴薯薯塊為材料，采用離體誘 變技術(shù)與平陽霉素再生技術(shù)相結(jié)合的方式，獲得了紅皮紅肉的馬鈴薯突變體。
[0005] 本發(fā)明技術(shù)方案如下： 一種誘變培養(yǎng)基，在每升再生培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加30-40mg平陽霉素； 所述再生培養(yǎng)基包括無機(jī)物、有機(jī)物、植物激素、蔗糖和倍力凝； 所述無機(jī)物包括濃度范圍在165-2108mg/L的大量元素氮、磷、鉀、硫、鈣、鎂的硝酸鹽、 磷酸鹽、硫酸鹽、氯化物，濃度范圍在0. 〇25-38mg/L的微量元素碘、硼、錳、鋅、鈉、銅、鐵、 鑰、鉆； 所述有機(jī)物包括谷氨酰胺、水解酪蛋白、酵母提取物、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素、 甘氨酸中的一種或兩種以上； 所述植物激素包括玉米素、萘乙酸、6-芐氨基腺嘌呤、激動(dòng)素、吲哚丁酸中的一種或兩 種以上。
[0006] 上述誘變培養(yǎng)基，優(yōu)選的，所用再生培養(yǎng)基由以下組分組成； (1)無機(jī)物 大量元素 硝酸鉀 1900- 2108mg/L 硝酸銨 1600-1700 mg/L 憐酸二氫!鐘 165-175 mg/L 硫酸鎂 360-380 mg/L 氯化鈣 430-450 mg/L ; 微量元素 碘化鉀 0? 8-0. 9 mg/L 砸酸 5. 5-6. 5 mg/L 硫酸錳 16-17. 5mg/L 硫酸鋅 9-10 mg/L 鑰酸鈉 0? 2-0. 3 mg/L 硫酸銅 0? 02-0. 03 mg/L 氯化鈷 0? 02-0. 03 mg/L 硫酸亞鐵 27-28 mg/L 乙二胺四乙酸二鈉 37-38 mg/L; (2) 有機(jī)物 水解酪蛋白 0-300 mg/L 酵母提取物 0-500 mg/L 水解乳蛋白 0_500mg/L 肌醇 80-120 mg/L 煙酸 0. 4-0. 6 mg/L 鹽酸批咳醇 0. 4-0. 6 mg/L 鹽酸硫胺素 0? 05-0. 15 mg/L 甘氨酸 1-2 mg/L ; (3) 植物激素 6_芐氨基腺嘌呤 1-4 mg/L 萘乙酸 0? 001-0. I mg/L 激動(dòng)素 0-2. 0 mg/L 玉米素 l-4mg/L 吲哚乙酸 0? 5-2 mg/L (4) 鹿糖 25-35 g/L ; (5) 倍力凝 3.5-4.5 g/L。 更優(yōu)選的，所用再生培養(yǎng)基由以下組分組成； (1)無機(jī)物 大量元素 硝酸鉀 2108 mg/L 硝酸銨 1650 mg/L 磷酸二氫鉀170 mg/L 硫酸鎂 370 mg/L 氯化1丐 440 mg/L ； 微量元素 碘化鉀 0? 83 mg/L 硼酸 6. 0 mg/L 硫酸猛 16. 9 mg/L 硫酸鋅 9. 6 mg/L 鑰酸鈉 0? 25mg/L 硫酸銅 0? 025mg/L 氯化鈷 0? 025mg/L 硫酸亞鐵 27. 8 mg/L 乙二胺四乙酸二鈉37. 3 mg/L ; (2) 有機(jī)物 水解酪蛋白 100 mg/L 酵母提取物 250 mg/L 水解乳蛋白 100mg/L 肌醇 100 mg/L 煙酸 0? 5 mg/L 鹽酸批咳醇 0. 5 mg/L 鹽酸硫胺素 0. I mg/L 甘氨酸 2 mg/L ; (3) 植物激素 6_芐氨基腺嘌呤 I. Omg/L 萘乙酸 0? 005 mg/L 激動(dòng)素 0. 5 mg/L 玉米素 4 mg/L 口引哚乙酸 I mg/L (4) 蔗糖 30 g/L; (5) 倍力凝 4 g/L。 上述誘變培養(yǎng)基，其中平陽霉素的濃度優(yōu)選為37. 5mg/L。
[0007] 上述誘變培養(yǎng)基配制方法：按照配方準(zhǔn)確稱量各組分，加去離子水充分溶解，定 容，調(diào)整pH至5. 8-6. 0,分裝，121 °C滅菌15分鐘；所用試劑為分析純。
[0008] 上述誘變培養(yǎng)基，是在再生培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加了特定量的平陽霉素。沒有添加 平陽霉素的再生培養(yǎng)基，僅能夠?qū)ⅠR鈴薯莖塊培育出沒有發(fā)生突變的再生苗；而添加了平 陽霉素的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，誘導(dǎo)15天后，則能誘導(dǎo)紫色馬鈴薯發(fā)生突變，通過進(jìn)一步培養(yǎng)則能 獲得能夠結(jié)出紅色塊莖的馬鈴薯再生苗。而且，本發(fā)明通過進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，激素種類和 水平、平陽霉素的濃度和誘導(dǎo)時(shí)間決定了誘導(dǎo)結(jié)果；如果激素種類和水平、平陽霉素的濃度 任何一因素超出本發(fā)明所限定的范圍則無法獲得目標(biāo)再生苗"能夠結(jié)出紅色馬鈴薯的再生 苗"。
[0009] -種獲得紅色馬鈴薯突變體的方法， 將紫色馬鈴薯方片置于誘變培養(yǎng)基培養(yǎng)15天，然后移至再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)；培養(yǎng)條 件：22±2°C、光照強(qiáng)度700 lx、光照時(shí)間8h/d、相對(duì)濕度65-75% ; 所述再生培養(yǎng)基為本發(fā)明上述的任意一種再生培養(yǎng)基； 所述誘變培養(yǎng)基為本發(fā)明上述的任意一種誘變培養(yǎng)基。
[0010] 所述培養(yǎng)條件是指誘變培養(yǎng)條件和再生培養(yǎng)條件。
[0011] 上述方法，在再生培養(yǎng)基上的培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)再生苗的生長態(tài)勢(shì)而定。本發(fā)明中，在 再生培養(yǎng)基上的培養(yǎng)時(shí)間為兩個(gè)月。
[0012] 本發(fā)明的方法，采用先誘變培養(yǎng)15天，然后再在再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)；二者的順序 不能顛倒，否則無法獲得目標(biāo)再生苗。誘變培養(yǎng)的時(shí)間也不能改變，否則也無法獲得目標(biāo)再 生苗。本發(fā)明的光照培養(yǎng)條件，顯著提高了再生苗數(shù)量。
[0013] 上述方法，其具體步驟為： 待處理樣品的準(zhǔn)備：取收獲30天、還未發(fā)芽的紫色馬鈴薯塊莖為材料；先用自來水將 其表面沖洗干凈，然后用自來水連續(xù)沖洗30分鐘以上，接著用0. 1%的升汞或次氯酸鈉溶液 表面滅菌10分鐘，最后在無菌條件下用無菌水徹底沖洗3-5次；在無菌條件下，用解剖刀將 紫色馬鈴薯塊莖的皮切掉，切掉薯皮的厚度在Imm以上；然后將中間的薯肉切成長0. 5cm、 寬0. 5cm、厚度0. Icm的方片，即得紫色馬鈴薯方片； 塊莖切片接種：將紫色馬鈴薯方片放置在本發(fā)明的塊莖誘導(dǎo)突變體的培養(yǎng)基上，在溫 度為22±2°C，光照強(qiáng)度700 lx，光照時(shí)間8h/d，相對(duì)濕度65-75%的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15天 后移至再生培養(yǎng)基上。
[0014] 將切掉薯皮的厚度限定在Imm以上，是為了防止塊莖的芽眼組織的存在。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0015] 圖1為紫色馬鈴薯及其紅色突變體(紅色馬鈴薯）的外貌圖； 圖2為紫色馬鈴薯及其紅色突變體(紅色馬鈴薯）的切面圖。

【具體實(shí)施方式】
[0016] 實(shí)施例1 稱?。?(1) 無機(jī)物：硝酸鉀2108mg，硝酸銨1650 mg，磷酸二氫鉀170 mg，硫酸鎂370 mg，氯化 ?丐440 mg,碘化鉀0. 83 mg,硼酸6. 0 mg,硫酸猛16. 9 mg,硫酸鋅9. 6mg，鑰酸鈉0. 25mg，硫 酸銅0. 025mg，氯化鈷0. 025mg，硫酸亞鐵27. 8 mg,乙二胺四乙酸二鈉37. 3 mg ; (2) 有機(jī)物：水解酪蛋白100 mg,酵母提取物250 mg,水解乳蛋白IOOmg,肌醇100 mg, 煙酸0. 5 mg,鹽酸批卩多醇0. 5 mg,鹽酸硫胺素0. I mg,甘氨酸2 mg ; (3) 植物激素：6-芐氨基腺嘌呤I. Omg，萘乙酸0. 005mg，激動(dòng)素0. 5mg，吲哚乙酸 I. Omg,玉米素 4mg ; (4) 蔗糖 30 g; (5) 倍力凝 4g; 配制方法：將稱取的各組分加去離子水充分溶解，定容至1L，調(diào)整pH至5. 8-6.0,分裝， 121°C滅菌15分鐘，得再生培養(yǎng)基； 還可以先將稱取的無機(jī)物、有機(jī)物和植物激素加去離子水充分溶解配成母液，再加入 其余組分充分溶解，定容1L，調(diào)整pH至5. 8-6. 0,分裝，滅菌得再生培養(yǎng)基。
[0017] 實(shí)施例2 稱?。?(1) 無機(jī)物：硝酸鉀1900 mg，硝酸銨1650 mg，磷酸二氫鉀170 mg，硫酸鎂370 mg，氯化 ?丐440 mg,碘化鉀0.83 mg,硼酸6.0 mg,硫酸猛16. 9 mg,硫酸鋅9. 6 mg,鑰酸鈉0.25mg， 硫酸銅〇. 〇25mg，氯化鈷0. 025mg，硫酸亞鐵27. 8 mg,乙二胺四乙酸二鈉37. 3 mg ; (2) 有機(jī)物：肌醇100 mg,煙酸0. 5 mg,鹽酸批卩多醇0. 5 mg,鹽酸硫胺素0. I mg,甘氨 酸 2 mg ; (3) 植物激素：6-節(jié)氨基腺噪呤I. Omg，萘乙酸0. Olmg,激動(dòng)素0. 5mg，卩引哚乙酸I. Omg， 玉米素4mg ; (4) 蔗糖 30 g; (5) 倍力凝 4 g ; 配置方法：同實(shí)施例1。
[0018] 實(shí)施例3 稱?。?(1) 無機(jī)物：硝酸鉀1900 mg，硝酸銨1600 mg，磷酸二氫鉀175 mg，硫酸鎂360 mg，氯化 ?丐430 mg,碘化鉀0.83 mg,硼酸6.0 mg,硫酸猛16. 9 mg,硫酸鋅9. 6 mg,鑰酸鈉0.25mg， 硫酸銅〇. 〇25mg，氯化鈷0. 025mg，硫酸亞鐵27. 8 mg,乙二胺四乙酸二鈉37. 3 mg ; (2) 有機(jī)物：肌醇100 mg,煙酸0. 5mg，鹽酸批B多醇0. 5 mg,鹽酸硫胺素0. lmg，甘氨酸1 mg ； (3) 植物激素：6-芐氨基腺嘌呤I. Omg，萘乙酸0. 005mg，激動(dòng)素0. 5mg，吲哚乙酸 I. Omg,玉米素 4mg ; (4) 蔗糖 30 g; (5) 倍力凝 3.5 g; 配置方法：同實(shí)施例1。
[0019] 實(shí)施例4 稱?。?(1) 無機(jī)物：硝酸鉀2108mg，硝酸銨1700 mg，磷酸二氫鉀165 mg，硫酸鎂380 mg，氯化 ?丐450 mg,碘化鉀0. 83 mg,硼酸6. 0 mg,硫酸猛16. 9 mg,硫酸鋅9. Omg,鑰酸鈉0. 25mg，硫 酸銅0. 025mg，氯化鈷0. 025mg，硫酸亞鐵27. 8 mg,乙二胺四乙酸二鈉37. 3 mg ; (2) 有機(jī)物：水解酪蛋白100 mg,酵母提取物250 mg,水解乳蛋白200mg，肌醇100 mg, 煙酸0. 5 mg,鹽酸批卩多醇0. 5 mg,鹽酸硫胺素0. I mg,甘氨酸2 mg ; (3) 植物激素：6-節(jié)氨基腺噪呤I. Omg，萘乙酸0. Olmg,激動(dòng)素0. 5mg，卩引哚乙酸I. Omg， 玉米素4mg ; (4) 蔗糖 30 g; (5) 倍力凝 4.5 g; 配置方法：同實(shí)施例1。
[0020] 實(shí)施例5 采用實(shí)施例1的配比和配置方法制備五份再生培養(yǎng)基(每份為1L)，然后分別加入 20mg、30mg、37. 5mg、40mg、55mg平陽霉素；即得相應(yīng)的誘變培養(yǎng)基D1、A1、A2、A3、D2; 分別采用實(shí)施例2-4的配比和配置方法制備再生培養(yǎng)基(每份為1L)，然后均加入 37. 5mg平陽霉素；即得相應(yīng)的誘變培養(yǎng)基A4、A5、A6。
[0021] 誘變實(shí)驗(yàn) 步驟一、待處理樣品的準(zhǔn)備： 取收獲30天、還未發(fā)芽的紫色馬鈴薯塊莖為材料，先用自來水將其表面沖洗干凈。然 后用自來水連續(xù)沖洗30分鐘以上，接著用0. 1%的生汞表面滅菌10分鐘(也可用次氯酸鈉 溶液)，最后在無菌條件下用無菌水徹底沖洗3-5次。在無菌條件下，用解剖刀將紫色馬鈴 薯塊莖的皮切掉。為了防止塊莖的芽眼組織的存在，切掉薯皮的厚度應(yīng)在Imm以上。然后 將中間的薯肉切成長〇. 5cm、寬0. 5cm、厚度0. Icm的方片，即得紫色馬鈴薯方片； 步驟二、誘變、再生培養(yǎng) 誘變、再生培養(yǎng)（1):將8塊紫色馬鈴薯方片分別放置在誘變培養(yǎng)基A1、A2、A3、A4、A5、 A6、Dl、D2上培養(yǎng)15天；然后移至相應(yīng)的再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)兩個(gè)月；分別獲得再生苗；培養(yǎng) 條件：22°C，光照強(qiáng)度700 lx，光照時(shí)間8h/d，相對(duì)濕度70% ; 誘變、再生培養(yǎng)（2):將一塊紫色馬鈴薯方片放置在誘變培養(yǎng)基A2上培養(yǎng)15天；然后 移至相應(yīng)的再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)兩個(gè)月獲得再生苗；培養(yǎng)條件：22°C，自然光照條件，相對(duì) 濕度70% ; 誘變、再生培養(yǎng)（3):將一塊紫色馬鈴薯方片放置在誘變培養(yǎng)基A2上培養(yǎng)5天后，然后 移至相應(yīng)的再生培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件：22°C，光照強(qiáng)度700 lx，光照時(shí)間8h/d，相對(duì)濕度 70%。
[0022] 誘變、再生培（4):將一塊紫色馬鈴薯方片放置在誘變培養(yǎng)基A2上培養(yǎng)20天后，然 后移至相應(yīng)的再生培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件：22°C，光照強(qiáng)度700 lx，光照時(shí)間8h/d，相對(duì)濕度 70%。
[0023] 步驟二中，所述"移至相應(yīng)的再生培養(yǎng)基"是指：將在誘變培養(yǎng)基A1、A2、A3、D1、D2 培養(yǎng)過的馬鈴薯方片均轉(zhuǎn)移至實(shí)施例1制備的再生培養(yǎng)基；將在誘變培養(yǎng)基A4培養(yǎng)過的馬 鈴薯方片均轉(zhuǎn)移至實(shí)施例2制備的再生培養(yǎng)基；將在誘變培養(yǎng)基A5培養(yǎng)過的馬鈴薯方片均 轉(zhuǎn)移至實(shí)施例3制備的再生培養(yǎng)基；將在誘變培養(yǎng)基A6培養(yǎng)過的馬鈴薯方片均轉(zhuǎn)移至實(shí)施 例4制備的再生培養(yǎng)基； 按照上述實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行多次實(shí)驗(yàn)；統(tǒng)計(jì)在不同培養(yǎng)條件下獲得的再生苗的平均數(shù)量占 所接種塊莖數(shù)的百分比；然后將再生苗在相同的條件下栽培，觀察所收獲的馬鈴薯塊莖的 顏色；結(jié)果如表1所示。
[0024] 表1，不同誘變、再生培養(yǎng)條件下馬鈴薯再生情況

【權(quán)利要求】
1. 一種誘變培養(yǎng)基，其特征在于，在每升再生培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加30-40mg平陽霉素； 所述再生培養(yǎng)基包括無機(jī)物、有機(jī)物、植物激素、蔗糖和倍力凝； 所述無機(jī)物包括濃度范圍在165-2108mg/L的大量元素氮、磷、鉀、硫、鈣、鎂的硝酸鹽、 磷酸鹽、硫酸鹽、氯化物，濃度范圍在0. 〇25-38mg/L的微量元素碘、硼、錳、鋅、鈉、銅、鐵、 鑰、鉆； 所述有機(jī)物包括谷氨酰胺、水解酪蛋白、酵母提取物、煙酸、鹽酸吡哆醇、鹽酸硫胺素、 甘氨酸中的一種或兩種以上； 所述植物激素包括玉米素、萘乙酸、6-芐氨基腺嘌呤、激動(dòng)素、吲哚丁酸中的一種或兩 種以上。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述誘變培養(yǎng)基，其特征在于，所用再生培養(yǎng)基由以下組分組成； (1) 無機(jī)物 大量元素 硝酸鉀 1900- 2108mg/L 硝酸銨 1600-1700 mg/L 憐酸二氧鐘 165-175 mg/L 硫酸鎂 360-380 mg/L 氯化鈣 430-450 mg/L ; 微量元素 碘化鉀 0? 8-0. 9 mg/L 砸酸 5. 5-6. 5 mg/L 硫酸錳 16-17. 5mg/L 硫酸鋅 9-10 mg/L 鑰酸鈉 0? 2-0. 3 mg/L 硫酸銅 0? 02-0. 03 mg/L 氯化鈷 0? 02-0. 03 mg/L 硫酸亞鐵 27-28 mg/L 乙二胺四乙酸二鈉 37-38 mg/L; (2) 有機(jī)物 水解酪蛋白 0-300 mg/L 酵母提取物 0-500 mg/L 水解乳蛋白 0_500mg/L 肌醇 80-120 mg/L 煙酸 0. 4-0. 6 mg/L 鹽酸批咳醇 0. 4-0. 6 mg/L 鹽酸硫胺素 0? 05-0. 15 mg/L 甘氨酸 1-2 mg/L ; (3) 植物激素 6_芐氨基腺嘌呤 1-4 mg/L 萘乙酸 0? 001-0. 1 mg/L 激動(dòng)素 0-2. 0 mg/L 玉米素 l-4mg/L 吲哚乙酸 0? 5-2 mg/L (4) 鹿糖 25-35 g/L ; (5) 倍力凝 3.5-4.5 g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述誘變培養(yǎng)基，其特征在于，所用再生培養(yǎng)基由以下組分組成； (1) 無機(jī)物 大量元素 硝酸鉀 2108 mg/L 硝酸銨 1650 mg/L 磷酸二氫鉀170 mg/L 硫酸鎂 370 mg/L 氯化440 mg/L ； 微量元素 碘化鉀 0? 83 mg/L 硼酸 6. 0 mg/L 硫酸猛 16. 9 mg/L 硫酸鋅 9. 6 mg/L 鑰酸鈉 0? 25mg/L 硫酸銅 0? 025mg/L 氯化鈷 0? 025mg/L 硫酸亞鐵 27. 8 mg/L 乙二胺四乙酸二鈉37. 3 mg/L ; (2) 有機(jī)物 水解酪蛋白 100 mg/L 酵母提取物 250 mg/L 水解乳蛋白 100mg/L 肌醇 100 mg/L 煙酸 0? 5 mg/L 鹽酸批咳醇 0. 5 mg/L 鹽酸硫胺素 0. 1 mg/L 甘氨酸 2 mg/L ; (3) 植物激素 6_芐氨基腺嘌呤 1. Omg/L 萘乙酸 0? 005 mg/L 激動(dòng)素 0. 5 mg/L 玉米素 4 mg/L 口引哚乙酸 1 mg/L (4) 蔗糖 30 g/L; (5)倍力凝 4 g/L。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述誘變培養(yǎng)基，其特征在于，其中平陽霉素的濃度為 37. 5mg/L〇
5. -種獲得紅色馬鈴薯突變體的方法，其特征在于： 將紫色馬鈴薯方片置于誘變培養(yǎng)基培養(yǎng)15天，然后移至再生培養(yǎng)基上培養(yǎng)；培養(yǎng)條 件：22±2°C、光照強(qiáng)度700 lx、光照時(shí)間8h/d、相對(duì)濕度65-75% ; 所述再生培養(yǎng)基為權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的再生培養(yǎng)基； 所述誘變培養(yǎng)基為權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的誘變培養(yǎng)基。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述方法，其特征在于，在再生培養(yǎng)基上的培養(yǎng)時(shí)間為兩個(gè)月。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述方法，其特征在于，其具體步驟為： 待處理樣品的準(zhǔn)備：取收獲30天、還未發(fā)芽的紫色馬鈴薯塊莖為材料；先用自來水將 其表面沖洗干凈，然后用自來水連續(xù)沖洗30分鐘以上，接著用0. 1%的升汞或次氯酸鈉溶液 表面滅菌10分鐘，最后在無菌條件下用無菌水徹底沖洗3-5次；在無菌條件下，用解剖刀將 紫色馬鈴薯塊莖的皮切掉，切掉薯皮的厚度在1_以上；然后將中間的薯肉切成長0. 5cm、 寬0. 5cm、厚度0. lcm的方片，即得紫色馬鈴薯方片； 塊莖切片接種：將紫色馬鈴薯方片放置在本發(fā)明的塊莖誘導(dǎo)突變體的培養(yǎng)基上，在溫 度為22±2°C，光照強(qiáng)度700 lx，光照時(shí)間8h/d，相對(duì)濕度65-75%的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)15天 后移至再生培養(yǎng)基上。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104381127SQ201410526873
【公開日】2015年3月4日 申請(qǐng)日期:2014年10月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月9日
【發(fā)明者】劉芳, 楊元軍, 王培倫, 董道峰, 陳廣俠, 馬蕾 申請(qǐng)人:山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所