專利名稱:組織培養(yǎng)快速繁殖白簕的方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種白簕快速繁殖的方法,尤其涉及一種白簕組織培養(yǎng)快速繁殖的方法。
背景技術(shù):
白簕是五加科(Araliaceae)五加屬(Acanthopanan)的一種攀援狀灌木。以根、葉或全株入藥,具有清熱解毒,祛風(fēng)除濕,散瘀止痛的藥用價(jià)值;通過(guò)對(duì)白簕嫩葉的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)進(jìn)行分析表明白簕也具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。除此之外,白簕嫩葉還具有健腦和增強(qiáng)腦細(xì)胞呼吸作用的功能。因此,白簕是一種營(yíng)養(yǎng)和保健價(jià)值都很高的野生蔬菜。由于白簕常規(guī)繁殖采用成熟莖扦插繁殖,繁殖系數(shù)低,近年來(lái),國(guó)內(nèi)外在其化學(xué)成分方面做了許多的研究, 而其組織培養(yǎng)方面只見(jiàn)以白簕葉片為外植體,探討了不同調(diào)節(jié)因子組合對(duì)其愈傷組織誘導(dǎo)的影響,在組織培養(yǎng)快速繁殖白簕方面仍為空白。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于采用組織培養(yǎng)法提供一種快速、高效、低成本快速擴(kuò)繁白簕的方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案是第一,白簕的選取及預(yù)處理取Icm左右白簕莖尖或帶腋芽莖段的部分,在無(wú)菌條件下用75%酒精浸泡30秒, 再放入0. 的汞溶液中浸泡5 lOmin,再用蒸餾水沖洗3。第二,初培養(yǎng)將所述的已進(jìn)行預(yù)處理過(guò)的白簕莖尖或帶腋芽莖段的部分接種到初培養(yǎng)培養(yǎng)基中,培養(yǎng)30天,所述的莖尖或腋芽莖段的腋芽可長(zhǎng)高1 2cm,并形成叢芽;所述的初培養(yǎng)基由MS+BA1. Omg/L+GAl. 0mg/L+3mg/L蔗糖+0. 8mg/L瓊脂,所述的初培養(yǎng)基PH = 5. 8,培養(yǎng)溫度25°C ^°C,每天光照l(shuí)lh,光照強(qiáng)度20001uX ;第三,生根培養(yǎng)將初培養(yǎng)獲得叢芽分切成單芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,10天后開(kāi)始生根,30天便可移栽,所述的生根培養(yǎng)基是MS+6g/L瓊脂+IAAanl/L,PH = 5. 8,培養(yǎng)溫度25°C ,每天光照l(shuí)lh,光照強(qiáng)度20001uX;第四,生根試管苗移栽所述的生根培養(yǎng)基中白簕幼苗長(zhǎng)到2 3cm以上時(shí),將生根試管苗移至通風(fēng)蔭涼處,開(kāi)瓶煉苗1 2天后,取出小苗,洗去根部培養(yǎng)基,移栽到溫室裝有蛭石和草炭基質(zhì)比例為1 1的穴盤(pán)中,蓋上塑料薄膜保濕,加蓋遮蔭網(wǎng);7 8天后逐漸通風(fēng),再煉苗5天后, 可完全放開(kāi);當(dāng)穴盤(pán)內(nèi)幼苗長(zhǎng)到5cm左右時(shí),移至裝有營(yíng)養(yǎng)土的營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi),營(yíng)養(yǎng)土的構(gòu)成為大田土、腐熟農(nóng)家肥、腐殖土各占1/3,并拌入防病菌的藥劑,加蓋遮蔭網(wǎng),澆透水,保持空氣濕度80%左右;當(dāng)營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi)幼苗長(zhǎng)至15 20cm左右時(shí),定植生產(chǎn)田。
作為本發(fā)明優(yōu)選的方案,在進(jìn)行初培養(yǎng)后和生根培養(yǎng)前還進(jìn)行增值培養(yǎng)步驟,所述的增值培養(yǎng)是將初培養(yǎng)獲得叢芽分切成單芽,超過(guò)2cm的單芽分段切成Icm左右的莖尖和莖段,然后接種到增殖培養(yǎng)基中,培養(yǎng)25 30天后,可獲得1 2cm的叢芽;所述的增殖培養(yǎng)基是MS+BA0. 5mg/L+GAlmg/L+3mg/L 蔗糖 +0. 8mg/L 瓊脂,PH = 5. 8,培養(yǎng)溫度 25°C 28°C,每天光照l(shuí)lh,光照強(qiáng)度20001ux ;本發(fā)明具有如下突出的有益效果由于本發(fā)明單芽增殖率可達(dá)2 3培,生根率為100%,移植的成活率在95%以上,因此,本發(fā)明克服了白簕常規(guī)繁殖采用成熟莖扦插繁殖,繁殖系數(shù)低的缺點(diǎn),是一種快速、高效、低成本的快速繁殖白簕方法。
具體實(shí)施例方式第一,白簕的選取及預(yù)處理取Icm左右白簕莖尖或帶腋芽莖段的部分,在無(wú)菌條件下用75%酒精浸泡30秒, 再放入0. 的汞溶液中浸泡5 lOmin,再用蒸餾水沖洗3 5次。第二,初培養(yǎng)將所述的已進(jìn)行預(yù)處理過(guò)的白簕莖尖或帶腋芽莖段的部分接種到初培養(yǎng)培養(yǎng)基中,培養(yǎng)30天,所述的莖尖或腋芽莖段的腋芽可長(zhǎng)高1 2cm,并形成叢芽;所述的初培養(yǎng)液由 MS+BA1. Omg/L+GAl. 0mg/L+3mg/L 蔗糖 +0. 8mg/L 瓊脂,PH = 5. 8,培養(yǎng)溫度 25°C 28 0C ;第三,增值培養(yǎng)將初培養(yǎng)獲得叢芽分切成單芽,超過(guò)2cm的單芽分段切成Icm左右的莖尖和莖段, 然后接種到增殖培養(yǎng)基中,培養(yǎng)25 30天后,可獲得1 2cm的叢芽;所述的增殖培養(yǎng)基是:MS+BA0. 5mg/L+GAlmg/L+3mg/L 蔗糖 +0. 8mg/L 瓊脂,PH = 5. 8,培養(yǎng)溫度 25°C 28°C, 每天光照l(shuí)lh,光照強(qiáng)度20001UX ;第四,生根培養(yǎng)將初培養(yǎng)獲得叢芽分切成單芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,10天后開(kāi)始生根,30天便可移栽,生根培養(yǎng)基MS+6g/L瓊脂+IAAanl/L,PH= 5.8,培養(yǎng)溫度251 沘1,每天光照l(shuí)lh, 光照強(qiáng)度20001uX ;第五,生根試管苗移栽所述的生根培養(yǎng)基中白簕幼苗長(zhǎng)到2 3cm以上時(shí),將生根試管苗移至通風(fēng)蔭涼處,開(kāi)瓶煉苗1 2天后取出小苗,洗去根部培養(yǎng)基,移栽到溫室裝有蛭石和草炭基質(zhì)比例為1 1的穴盤(pán)中,蓋上塑料薄膜保濕,加蓋遮蔭網(wǎng);7 8天后逐漸通風(fēng),再煉苗5天后, 可完全放開(kāi);當(dāng)穴盤(pán)內(nèi)幼苗長(zhǎng)到5cm左右時(shí),移至裝有營(yíng)養(yǎng)土的營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi),營(yíng)養(yǎng)土的構(gòu)成為大田土、腐熟農(nóng)家肥、腐殖土各占1/3,并拌入防病菌的藥劑,加蓋遮蔭網(wǎng),澆透水,保持空氣濕度80%左右;當(dāng)營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi)幼苗長(zhǎng)至15 20cm左右時(shí),定植生產(chǎn)田。所述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式,但并不代表僅僅受所述實(shí)施例的限制,其它的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理的情況下所作出的任何改變、修飾、替代、組合、 簡(jiǎn)化,均應(yīng)視為與本發(fā)明等效的置換方式,均包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種組織培養(yǎng)快速繁殖白簕的方法,其特征在于包括以下步驟第一,白簕的選取及預(yù)處理取Icm左右白簕莖尖或帶腋芽莖段的部分,在無(wú)菌條件下用工業(yè)酒精浸泡一會(huì)兒,再放入濃度較稀的汞溶液中浸泡5 lOmin,再用蒸餾水沖洗干凈;第二,初培養(yǎng)將所述的已進(jìn)行預(yù)處理過(guò)的白簕莖尖或帶腋芽莖段的部分接種到初培養(yǎng)基中,直到所述的莖尖或腋芽莖段的腋芽形成叢芽;所述的初培養(yǎng)基由MS+BA1. Omg/L+GAl. 0mg/L+3mg/ L蔗糖+0. 8mg/L瓊脂,初培養(yǎng)基為弱酸性,培養(yǎng)溫度25°C ^°C,出培養(yǎng)中每天輔以一定的光照;第三,生根培養(yǎng)將初培養(yǎng)獲得叢芽分切成單芽,將高度為Icm左右的單芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,10 30 天便可移栽;所述的生根培養(yǎng)基是MS+6g/L瓊脂+IAAanl/L,生根培養(yǎng)基為弱酸性,培養(yǎng)溫度25°C ^°C,生根培養(yǎng)中每天輔以一定的光照;第四,生根試管苗移栽待所述的生根培養(yǎng)基中白簕幼苗長(zhǎng)到2 3cm以上時(shí),將生根試管苗移至通風(fēng)蔭涼處, 開(kāi)瓶煉苗1 2天后,取出小苗,洗去根部培養(yǎng)基,移栽到溫室裝有蛭石和草炭基質(zhì)比例為 1 1的穴盤(pán)中,并進(jìn)行保濕和遮蔭;7 8天后逐漸通風(fēng),再煉苗5天后,可完全放開(kāi);當(dāng)穴盤(pán)內(nèi)幼苗長(zhǎng)到5cm左右時(shí),移至裝有營(yíng)養(yǎng)土的營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi),營(yíng)養(yǎng)土的構(gòu)成為大田土、腐熟農(nóng)家肥、腐殖土各占1/3,并拌入防病菌的藥劑,加蓋遮蔭網(wǎng),澆透水,保持空氣濕度80%左右; 當(dāng)營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi)幼苗長(zhǎng)至15 20cm左右時(shí),定植生產(chǎn)田。
2.如權(quán)利要求1所述的一種組織培養(yǎng)快速繁殖白簕的方法,其特征在于第一,在所述的白簕的選取及預(yù)處理時(shí),所述的工業(yè)酒精濃度為75%酒精浸泡30秒, 再放入0. 1 %的汞溶液中浸泡5 lOmin,再用蒸餾水沖洗3 4次;第二,所述初培養(yǎng)是將已進(jìn)行預(yù)處理過(guò)的白簕莖尖或帶腋芽莖段的部分接種到初培養(yǎng)培養(yǎng)基中,培養(yǎng)30天,莖尖或腋芽長(zhǎng)高1 2cm,并形成叢芽;所述的初培養(yǎng)培養(yǎng)基PH = 5. 8,初培養(yǎng)每天光照l(shuí)lh,光照強(qiáng)度20001UX ;第三,所述的生根培養(yǎng)基PH= 5. 8,生根培養(yǎng)每天光照l(shuí)lh,光照強(qiáng)度20001UX。
3.如權(quán)利要求1或2所述的一種組織培養(yǎng)快速繁殖白簕的方法,其特征在于在進(jìn)行初培養(yǎng)后和生根培養(yǎng)前還進(jìn)行增值培養(yǎng)步驟,所述的增值培養(yǎng)是將初培養(yǎng)獲得叢芽分切成單芽,超過(guò)2cm的單芽分段切成Icm左右的莖尖和莖段,然后接種到增殖培養(yǎng)基中,培養(yǎng) 25 30天后,可獲得1 2cm的叢芽;所述的增殖培養(yǎng)基是MS+BA0. 5mg/L+GAlmg/L+3mg/ L蔗糖+0. 8mg/L瓊脂,PH = 5. 8,增值培養(yǎng)培養(yǎng)溫度25°C ^°C,每天光照l(shuí)lh,光照強(qiáng)度 20001ux。
全文摘要
本發(fā)明涉及組組織培養(yǎng)快速繁殖白簕的方法,它是通過(guò)白簕的選取及預(yù)處理、初培養(yǎng)、增值培養(yǎng)和生根試管苗移栽等步驟實(shí)現(xiàn)組組織培養(yǎng)快速繁殖白簕的方法,填補(bǔ)了目前利用組織培養(yǎng)快速繁殖白簕方法的空白;是一種快速、高效、低成本速繁殖白簕方法。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102326512SQ20101022444
公開(kāi)日2012年1月25日 申請(qǐng)日期2010年7月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月12日
發(fā)明者孫彩云, 林偉君, 林春華, 謝映忠 申請(qǐng)人:孫彩云, 林偉君, 林春華, 謝映忠